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"Sensor Sólido de óxido nítrico utilizando látex como matriz". / Solid Sensor of Nitric Oxide using a latex matrix

Herculano, Rondinelli Donizetti 18 March 2005 (has links)
O óxido nítrico (NO) é um dos mais importantes radicais livres da fisiologia humana. Desde a sua descoberta, inúmeras pesquisas são realizadas com o objetivo de encontrar métodos alternativos para detecção e quantificação deste radical in vitro, in vivo e ex vivo.Este trabalho consistiu no desenvolvimento e aperfeiçoamento de um sensor de NO construído a partir de uma matriz sólida de látex. O sensor proposto baseia-se no aprisionamento do complexo ferro(II)-dietilditiocarbamato Fe+2(DETC)2, dentro da matriz sólida. Neste caso, o NO é armadilhado no FeDETC, o que permite a sua detecção. O látex foi usado como matriz sólida por ser promissor em aplicações biomédicas, pois apresenta excelentes propriedades de bio-compatibilidade e de estímulo natural a angiogênese. Para a detecção do NO, bem como para a caracterização do sensor, foi utilizada a técnica de ressonância paramagnética eletrônica (RPE), devida a sua seletividade e sensibilidade. As análises dos processos de otimização do sensor sólido envolveram as concentrações de FeCl3.6H2O e DETC, temperatura do látex, proporção de FeDETC na matriz de látex, homogeneidade da membrana, sensibilidade e reprodutibilidade do sinal de RPE. O sensor apresentou uma alta estabilidade quando observado por RPE. A detecção do NO pôde ser obtido mesmo depois de 40 dias de exposição ambiente. Ele pode ser reutilizado e é capaz de medir o NO em concentrações de até 0,1mM. Estes resultados faz do látex-FeDETC um sensor promissor de NO onde a detecção com resolução espacial pode ser atingida. / Nitric oxide (NO) is one of the most important free radicals of the human physiology. Since its discovery, many efforts have been preformed in order to find alternative methods of detection and quantification for this radical in vitro, in vivo and ex vivo. In this work a NO sensor is made with a solid latex matrix was developed and improved. The proposed sensor is based on encapsulating the complex iron(II)-diethyldithiocarbamic Fe+2(DETC)2 in a solid matrix. In this case, the NO radical is trapped in FeDETC, which allows its detection. The latex was used as solid matrix due to excellent biocompatible, natural angiogenesis properties and it is a promising material to be applied in biological systems. The electron paramagnetic resonance (EPR), a selective and sensible technique, was used for the NO detection and sensor characterization. The fabrication and optimization processes was analyzed by FeCl36H2O and DETC concentrations, latex temperature, FeDETC/latex ratio, membrane homogeneity, sensitivity and reproducibility of the RPE signal. The sensor presents high stability when observed by EPR. The NO detection can be observed even after the sensor is exposed to ambient atmosphere for 40 days. It can be reused and is able to measure NO concentration of 0,1mM. These results make the latex-FeDETC a promising NO sensor.
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Osteoblastic response to biomaterials surfaces: mineralization evaluation and extracellular matrix proteomic analysis / Resposta de osteoblastos a superfícies de biomateriais: avaliação da mineralização e análise proteômica da matriz extracelular

Graeff, Marcia Sirlene Zardin 17 August 2018 (has links)
Dental implants are designed to replace tooth loss, due to periodontal diseases, trauma or decay. Among the biomaterials used for this purpose, titanium and zirconia have been investigated for some years, with excellent mechanical properties and biocompatibility. Surface treatments such as anodizing, with the incorporation of Mg, Ca and P in the structure of the titanium oxide films, were used in order to increase tribocorrosion resistance and improve the osseointegration process. The cellular response to surfaces is mediated, among other factors, by the extracellular matrix (ECM) . However, very little is still known about the ECM proteomics during mineralization. Our objective was a longitudinal comparison of osteoblastic behavior on different materials, in terms of mineralization volume and actin cytoskeleton status, associated with the proteomic analysis of the extracellular matrix. The three types of biomaterial surfaces (pure titanium, anodized titanium and zirconia) were imaged by confocal 3D microscopy and analyzed in terms of roughness. MC3T3 cells were cultivated on the biomaterials for 7, 14 and 21 days, with osteogenic medium containing calcein. The cells were then fixed, stained with Rhodamine phalloidin and DAPI, and imaged by confocal laser scanning microscopy. The quantification of mineralization and actin cytoskeleton was performed by a novel technique, based on the acquired 3D images. For the proteomic analysis, the specimens were washed, decellularized and the ECM was collected in buffer solution. The anodized titanium surface is more porous when compared to that of cp-Ti and zirconia, and superior mineralization was obtained over it after 21 days of culture. The actin microtubular volume was increased on the three materials on the first 14 days, but on the 21th day there was a reduction over anodized titanium and zirconia, related to mineralization phase.. Conclusion: The greater mineralization obtained over anodized titanium after 21 days demonstrated an improved response provided by the surface modification. The innovative volume quantification technique adopted was useful in providing information about the cellular status and biomaterial performance. Alpha-1_4 glucan phosphorylase and Glycogen phosphorylase brain form were down-regulated on zirconia after 7 and 14 days of culture, and up-regulated on Anod Ti on the 7th day, suggesting the influence of material surface roughness and chemical composition on energy metabolism. Proteins related to bone development, like TGF-3, were found exclusively on cp-Ti on the 21st day. The small number of identified proteins demonstrates that the chosen decellularization process was effective at reducing the proteome dataset. Altogether, our results reveal new insights regarding osseointegration and how material surfaces affect this process. / Implantes dentários são projetados para substituir a perda de dentes, que pode ser causada por doenças periodontais, traumas ou cáries. Entre os biomateriais utilizados para este fim, titânio e zircônia têm sido investigados durante alguns anos, com excelentes propriedades mecânicas e biocompatibilidade. Tratamentos de superfície como a anodização, com a incorporação de Mg, Ca e P na estrutura dos filmes de óxido de titânio, foram utilizados a fim de aumentar a resistência à tribocorrosão e melhorar o processo de osseointegração. A resposta celular às superfícies é mediada, entre outros fatores, pela matriz extracelular (ECM). No entanto, muito pouco ainda é conhecido sobre a proteômica da matriz óssea durante a mineralização. Nosso objetivo foi a comparação longitudinal do desempenho de osteoblastos em diferentes materiais em termos do volume da mineralização e do status do citoesqueleto de actina, associada à análise proteômica da matriz extracelular. Imagens dos três tipos de superfícies de biomateriais (titânio puro, titânio anodizado e zircônia) foram adquiridas por microscopia confocal 3D e analisadas em termos de rugosidade. Células MC3T3 foram cultivadas na superfície dos biomateriais durante 7, 14 e 21 dias, com meio osteogênico contendo calceína. As células foram então fixadas, coradas com faloidina-rodamina e DAPI, e levadas ao microscópio confocal de varredura a laser. A quantificação da mineralização e do citoesqueleto de actina foi feita por uma nova técnica, baseada em imagens 3D. Para a análise proteômica, os espécimes foram lavados, descelularizados e a matriz extracelular foi coletada em solução tampão. A superfície de titânio anodizado é mais porosa quando comparada com a de cp-Ti e zirconia e apresentou mineralização superior após 21 dias de cultura. O volume dos microtúbulos de actina foi aumentado sobre os três materiais nos primeiros 14 dias, mas no 21º dia houve uma redução relacionada ao aumento da mineralização sobre o titânio anodizado e zirconia. Conclusão: a mineralização superior obtida sobre o titânio anodizado após 21 dias de cultura demonstrou a melhoria provocada pela modificação de superfície. A nova técnica adotada para a quantificação do volume foi útil para fornecer informações sobre o status celular e o desempenho dos biomateriais. Alpha-1_4 glucano fosforilase e glicogênio fosforilase forma cerebral foram sub-expressas sobre a zircônia após 7 e 14 dias de cultura e sobre-expressas sobre o titânio anodizado no 7º dia, sugerindo a influência da rugosidade e composição química da superfície dos materiais no metabolismo de energia. Algumas proteínas relacionadas com o desenvolvimento ósseo, como a TGF- 3, foram encontradas exclusivamente sobre o cp-Ti no 21º dia. A pequena quantidade de proteínas identificadas demonstra que o processo de descelularização adotado foi eficiente em reduzir o conjunto de dados da análise proteômica. Em suma, nossos resultados revelam novos detalhes sobre a osseointegração e como a superfície dos materiais podem afetar esse processo.
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Efeito da crotoxina na ação moduladora dos macrófagos sobre eventos de neovascularização Ensaios in vitro. / Crotoxin effect in modulating action of macrophages on angiogenesis. In vitro assays.

Pimenta, Luciana de Araujo 27 November 2015 (has links)
A CTX estimula, in vivo e in vitro, a capacidade secretória de macrófagos na presença de tumor, acompanhado por significativa diminuição da massa tumoral ou proliferação de células tumorais, respectivamente. Considerando a ação imunomodulatória da CTX, a importância central do macrófago na gênese e progressão tumoral e a participação desta célula no microambiente estromal, a atividade secretória de macrófagos tratados com CTX sobre a angiogênese in vitro foi investigada. Células endoteliais tímicas (t.End.1), quando incubadas na presença de macrófagos tratados com CTX (0,3µg/mL) ou sobrenadantes desses macrófagos apresentaram significativa inibição da proliferação, da adesão aos seus ligantes naturais (colágeno I-10µg/mL; fibronectina-3µg/mL e laminina-10 µg/mL) e do número de células migradas, em modelo de Wound healing, bem como a velocidade de migração, avaliada em Time Lapse. Consequentemente, houve inibição da formação de tubos no matrigel-3D, acompanhada pela diminuição da concentração de VEGF e TNF-. Ainda, o bloqueio dos receptores peptídeo formil (FPRs) aboliu as atividades inibitórias dos macrófagos tratados com a toxina, evidenciando a importância destes receptores para a ação da CTX sobre a atividade antiangiogênica de macrófagos. / CTX stimulates, in vivo and in vitro, the macrophages secretory capacity in the presence of tumor, accompanied by a significant tumor mass reduction and tumor cells or inhibition of the proliferation, respectively. Considering the immunomodulatory action of CTX, the pivotal importance of macrophages in the genesis, tumor progression and in the stromal microenvironment, the macrophages secretory activity treated with CTX on angiogenesis was investigated in vitro. Thymic endothelial cells (t.End.1), when incubated in the presence of macrophages treated with CTX (0.3g/ml) or supernatants of these macrophages showed significant inhibition of proliferation, adhesion to its natural ligands (Type I collagen-10mg/ml ; fibronectin-3g/ml and laminin-10/mL), and of the cell number migrated in Wound healing model as well as the cell migration velocity, evaluated in Time Lapse. Consequently, there was inhibition of the cappilary-like tube formation on matrigel-3D matrix, accompanied by VEGF and TNF- secretion decrease. Further, the formyl peptide receptor (FPRs) blockade abolished the inhibitory activity of the macrophages treated with the toxin, suggesting the importance of these receptors to the action of CTX on the macrophages antiangiogenic activity.
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Quantificação do colágeno na camada muscular da bexiga de pacientes com obstrução infravesical por hiperplasia prostática benigna: correlação com parâmetros urodinâmicos / -

Ribeiro, Wesley de Oliveira 05 November 2004 (has links)
Avaliou-se prospectivamente 19 pacientes com obstrução infravesical por hiperplasia prostática benigna selecionados pra prostatectomia transvesical. Obteve-se um fragmento da parede da bexiga e quantificou-se o colágeno no epimísio, perimísio e endomísio do detrusor. Amostra vesicais de oito doadores cadavéricos de órgãos serviram como controles. Observou-se padrão focal de aumento do colágeno na camada muscular da bexiga dos pacientes com obstrução. Demonstrou-se que a idade correlaciona-se positivamente com o aumento da quantidade de colágeno com a diminuição da complacência vesical, o aumento da prevalência de hiperatividade detrusora e a maior chance de retenção urinária / We prospectively evaluated 19 patients with bladder outlet obstruction by benign prostatic hyperplasia selected for transvesical prostatectomy. A sample of the bladder wall was obtained and the collagen was measured at the level of epimysium, premysium and endomysium. Bladder samples from eight cadaveric organ donors were used as controls. A focal pattern of collagen increase was observed at the bladder smooth muscle layer of obstructed patients. Age was shown to correlate with increased collagen quantity. Increased collagen quantity also correlated with decreased bladder compliance, higher prevalence of detrusor overactivity and of urinary retention
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Influência do pH na atividade funcional de enzimas endógenas (metaloproteinases -2 e -9) que degradam a matriz de colágeno da dentina coronária e radicular humana / pH-influence on the functional activity of endogenous enzymes (metaloproteinases -2 and -9) that degrade collagen matrix of coronal and radicular human dentin

Ferreira, Stella da Silva 29 January 2015 (has links)
As metaloproteinases da matriz (MMPs) são uma família de endopeptidades cálcio e zinco dependentes que participam da degradação de praticamente todos os componentes da matriz extracelular. Com o pressuposto de que estas enzimas podem estar relacionadas à progressão da erosão dental e que os agentes ácidos causadores da erosão podem influenciar na ativação das MMPs, o objetivo desse estudo in vitro foi avaliar a influência do pH sobre a atividade funcional das MMP-2 e -9 presentes na dentina coronária e radicular humana. O pó das dentinas coronária e radicular, provenientes de terceiros molares inclusos recém extraídos foi obtido separadamente e submetido ao protocolo de extração das proteínas, com ácido fosfórico a 1%. Após, o extrato contendo as proteínas e o pó de dentina parcialmente desmineralizado foram incubados em uma das respectivas soluções: solução 2 mM de APMA (acetato de 4-aminofenilmercúrio / grupo controle) ou em uma das soluções tampão (fosfato de potássio 0.1 M) com diferentes pHs (2.5, 4.5, 5.0, 6.0 e 7.0). Após a incubação, as proteínas foram separadas por eletroforese, em um gel de poliacrilamida copolimerizado com gelatina, para a avaliação da atividade gelatinolítica das MMPs, por zimografia. Esta análise foi realizada em triplicada e os zimogramas obtidos ao final foram avaliados por densitometria. A quantificação das bandas observadas nos zimogramas foi realizada pelo programa de imagens ImageJ e os dados avaliados de maneira descritiva e qualitativa. Para a avaliação do conteúdo de colágeno solubilizado, o pó de dentina parcialmente desmineralizado e incubado nos respectivos pHs (n = 8) foi mantido em um tampão de incubação durante 24h, e o conteúdo de hidroxiprolina (HYP) liberado neste meio foi mensurado em espectrofotômetro. Os dados obtidos foram avaliados estatisticamente por ANOVA 1 fator, seguido do teste de Tukey, com 5% de significância. A análise por zimografia mostrou bandas evidentes correspondente a MMP-2 na sua forma ativa (66kDa) e bandas menos expressivas relacionadas a sua forma latente (72kDa), tanto para a dentina coronária quanto para a radicular, em todos os grupos experimentais. Não foram identificadas bandas correspondentes a MMP-9, para nenhum dos substratos avaliados. As soluções com os menores pHs (2.5, 4.5 e 5.0) resultaram na maior atividade funcional da MMP-2, em comparação as soluções com os maiores pHs (6.0 e 7.0), em ambos os substratos. Para a análise de HYP, os grupos pH 2.5 e pH 4.5 mostraram valores de absorbância abaixo do limite de detecção do aparelho. Para os demais grupos experimentais, tanto para a dentina coronária quanto para a radicular, foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre eles (p < 0,05). O conteúdo de HYP liberada foi maior para o pH 7.0, comparado aos demais grupos (p < 0,05), exceto para o pH 6.0. Não foi encontrada diferença estatisticamente significante entre os grupos pH 6.0, pH 5.0 e controle (p > 0,05). Conclui-se que a atividade funcional da MMP-2 é dependente do pH. Os menores pHs promoveram um aumento na ativação da MMP-2 da dentina coronária e radicular humana. Nota-se em pHs próximos ao neutro, uma maior degradação da matriz orgânica dentinária desmineralizada por essas enzimas endógenas. / Matrix metalloproteinases (MMPs) are a family of endopeptidades calcium and zinc dependent that participate in the degradation of pratically all components of the extracellular matrix. With the assumption that these enzymes may be related to the progression of dental erosion and acidic agents that cause erosion can influence the activation of MMPs, the aim of this in vitro study was to evaluate the pH-influence on the functional activity of MMP-2 and -9 present in human coronal and root dentin. The powder of root and coronal dentine, from freshly extracted third molars was separately obtained and subjected to protein extraction protocol, with 1% phosphoric acid. After, the extract containing proteins and the partially demineralized powder were incubated in one of the following solutions: 2 mM APMA (4-aminophenylmercuric acetate / control) or one of the buffer solutions (0.1 M potassium phosphate) with different pHs (2.5, 4.5, 5.0, 6.0 and 7.0). After incubation, the proteins were separated by electrophoresis in a polyacrylamide gel copolymerized with gelatin, to evaluate the gelatinolytic activity of MMPs by means of zymography. This analysis was performed in triplicate and the zymograms obtained were evaluated by densitometry. Quantification of the bands observed in zymograms was performed by ImageJ software and the data were evaluated descriptively and qualitatively. To assess the solubilized dentin collagen, the partially demineralized dentin powder treated with different pHs (n=8) was incubated in an artificial saliva for 24 h, and the amount of hydroxyproline (HYP) released in media was measured by spectrophotometer. Data were statistically analyzed by ANOVA one factor, followed by the Tukey\'s test, with 5% significance. Zymography showed evident bands corresponding to active MMP-2 (66kDa) and less expressed bands related to its latent form (72kDa), for both coronal and root dentin, in all experimental groups. No bands corresponding to MMP-9 were identified, for both substrates. The lowest pH solutions (2.5, 4.5 and 5.0) yielded the higher functional activity than did the highest pH solutions (6.0 and 7.0), for both substrates. For HYP analysis, the groups pH 2.5 and pH 4.5 showed absorbance values below the detection limit of the equipment. For the other groups, for both coronal and root dentin, statistically significant diferences were found between them (p<0.05). The amount of HYP was higher for pH 7.0 than all other groups (p<0.05), except for pH 6.0. No statistical difference was found between pH 6.0, pH 5.0 and control (p>0.05). It can be concluded that the functional activity of MMP-2 is pH-dependent. Low pH solutions are able to increase the activation of human coronal and root MMP-2. It is noted in pHs close to neutral, a higher degradation of demineralized dentin organic matrix by these endogenous enzymes.
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Análise estrutural do colágeno do tipo I - correlação estrutura : atividade biológica / Structural analysis of type I collagen : structure activities relationships

Goissis, Ana Paula Abdalla 02 March 2007 (has links)
Além das funções mecânicas, sabe-se que o colágeno do tipo I é um dos componentes mais ativos na modulação das atividades biológicas que ocorrem na matriz extracelular (MEC) tais como a adesão celular, a coagulação e a mineralização do osso. Estes eventos ocorrem nos limites do período D, que é provavelmente o domínio funcional que mais prevalece em relação à transferência da informação extracelular para o interior da célula. O objetivo deste trabalho foi estudar as correlações existentes entre as atividades biológicas da MEC e as características estruturais do colágeno do tipo I, principalmente em relação à distribuição topográfica dos aminoácidos (aa) ácidos, básicos e hidrofóbicos. A metodologia empregada foi baseada em informações já existentes sobre a estrutura colágeno do tipo I e suas atividades relacionadas com a MEC. Os resultados mostraram que aa ácidos, básicos e hidrofóbicos formam duas regiões distintas. Em uma delas, aa ácidos e básicos se alojam em áreas delimitadas por aa hidrofóbicos; na outra, aa básicos, ácidos e hidrofóbicos formam aglomerados localizados principalmente nas proximidades dos limites Overlap:Gap. Exceto para os eventos de natureza estrutural são as regiões do colágeno do tipo I mais envolvidas na modulação das atividades da MEC, com a interface Overlap:Gap funcionando como um divisor do controle destas atividades. Enquanto 83,2% das atividades de adesão estão localizadas na zona do Overlap, 93,3% das atividades de natureza estruturais ocorrem a partir da zona limite Overlap:Gap e em direção à zona Gap. Embora nenhuma correlação possa ter sido estabelecida para a resultante de carga, sugere-se que a participação do colágeno do tipo I nas atividades da MEC, possa estar associada a diferenças de interações dos ligantes (carga, massa molecular e hidrofobicidade) com gradientes eletrostático e hidrofóbico existentes ao longo do período D. / Besides mechanical function, it is known today that type I collagen plays a major role in the modulation of many of the activities occurring in the extra-cellular matrix (ECM) such as cell adhesion, coagulation cascade and mineral deposition during bone formation. All these events occur by interaction of cells and ligands within the D-period of collagen microfibrill assembly, which is perhaps the most prevalent module of ECM information in the body. The purpose of this work was the study of correlations between the biological activities of ECM and the structural features of collagen associated with the distribution of acidic, basic and hydrophobic amino acids (aa) within the D period. The methodology used was based on existing information with respect to the structure of type I collagen and its function with respect to ECM activities. The results showed that acidic, basic and hydrophobic aa are found in two major distinct regions: one in which acidic and basic aa are located in areas defined by hydrophobic aa barriers; the other in which acidic, basic and hydrophobic aa forming clusters located preferentially in the boundaries of the Overlap:Gap zones. Except for the structural event, these clusters are the major sites for the interaction involving cell adhesion. The results also suggest that the Overlap:Gap interface function as a borderline for collagen interactions with ECM since 83,2% of the activities related to cell adhesion are located in the Overlap region while 93,3% of the activities of structural nature are enclosed within the limiting zone of Overlap:Gap to the direction of the Gap zone. Although no correlation could be established for net charge along the D period it is suggested that type I collagen participation in the activities of the ECM may also be associated to differences in ligand interactions (charge, molecular mass and hydrophobicity) with the electrostatic and the hydrophobic gradients that exists within the D period.
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Peptídeo AG73, derivado da laminina, inibindo a proteína podoplanina em linhagem de câncer oral. / The laminin-derived peptide inhibits podoplanin in oral cancer lines.

Sarmento, Michelle Petronilo 29 November 2018 (has links)
A disseminação metastática de células tumorais malignas envolve múltiplas etapas e é uma das principais causas de mortalidade. O microambiente tumoral apresenta um importante papel no processo de tumorigênese. A laminina é um componente do microambiente que pode ser clivado em peptídeos bioativos, como o peptídeo AG73 (domínio globular da cadeia 1) que aumenta a formação/atividade de invadopódios. Invadopódios são protrusões de membrana ricas em actina com atividade proteolítica da matriz pericelular. Além da actina, os invadopódios exibem outras proteínas importantes, como a cortactina e o MT1-MMP. Recentemente, descobriu-se que a podoplanina pode desempenhar um papel importante na atividade dos invadopódios. A podoplanina é uma glicoproteína transmembrana do tipo I, intimamente associada à progressão maligna do câncer. A podoplanina e o peptídeo AG73 influenciam a biologia do câncer. Tal particularidade levou-nos a investigar o papel do peptídeo AG73 na regulação da da podoplanina e invadopódios em linhagem celular derivada de carcinoma de células escamosas oral (Cal 27). As células foram cultivadas em DMEM com SFB e tratadas com o peptídeo AG73. As células tratadas por peptídeo de sequência embaralhada serviram como controles. Imunofluorescência foi realizada para analisar os níveis de proteína de podoplanina, cortactina e MT1-MMP. Os resultados mostraram que o peptídeo AG73 diminuiu os níveis de podoplanina nas células Cal27 em comparação aos controles. Nenhuma alteração foi observada em relação à cortactina e MT1-MMP. Estes resultados foram confirmados por imunofluorescência. As células tratadas com AG73 diminuíram a distribuição da podoplanina em todo o citoplasma em comparação com os controles. Nossos resultados sugerem que o peptídeo derivado da laminina AG73 inibe a podoplanina, uma molécula reguladora do câncer, em células malignas humanas. / The metastatic spread of malignant tumor cells involves multiple steps, and is one of the major causes of mortality. The tumor microenvironment has an important role in tumorigenesis process. Laminin is a component of the microenvironment that can be cleaved into bioactive peptides, such as peptide AG73 (globular domain of 1 chain) that increase invadopodia formation/activity. Invadopodia are actin-rich membrane protrusions with proteolytic activity of peri-cellular matrix. In addition to actin invadopodia exhibit other key proteins such as cortactin and MT1-MMP. Recently it has been discovered that podoplanin may play an important role in the invadopodia activity. Podoplanin is a type I transmembrane glycoprotein, closely associated with the malignant progression of cancer. Podoplanin and the peptide AG73 influence cancer biology. This prompted us to investigate the role of peptide AG73 in the regulation of podoplanin and invadopodia formation in a cell line derived from oral squamous cell carcinoma (Cal 27). Cells were cultured in DMEM with FBS and treated with peptide AG73. Cells treated by scrambled peptide served as controls. Immunoblot was carried out to analyze protein levels of podoplanin, cortactin and MT1-MMP. Results showed that the peptide AG73 decreased podoplanin levels in Cal27 cells compared to controls. No alterations were observed with regard to cortactin and MT1-MMP. These results were confirmed by immunofluorescence. Cells treated by AG73 decreased podoplanin distribution throughout the cytoplasm compared to controls. Our results suggest that the laminin-derived peptide AG73 inhibits podoplanin, a cancer regulator molecule, in human malignant cells.
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Avaliação longitudinal de enxerto gengival livre e matriz dérmica acelular (alloderm®): análise comparativa intra e inter-grupos após 13 anos / Longitudinal evaluation of free gingival graft and acellular dermal matrix (alloderm®): intra and inter groups comparative analysis after 13 years

Reyes Cevallos, Cecilia Amparo 28 September 2018 (has links)
A presença de uma faixa adequada de mucosa ceratinizada (MC) é essencial para manutenção da homeostasia periodontal. Existem várias técnicas cirúrgicas com a finalidade de corrigir alterações mucogengivais, criando uma faixa de MC adequada nos casos em que está ausente ou insuficiente. O enxerto gengival livre (EGL) é uma das técnicas indicadas para criação de gengiva em áreas não estéticas. Outra opção é o uso de substitutos teciduais dentre eles, a matriz dérmica acelular (MDA), considerada uma alternativa para a criação de gengiva. O objetivo desse estudo foi analisar longitudinalmente (após 13 anos) os resultados obtidos após procedimentos cirúrgicos de EGL e MDA para a criação da faixa de MC. Foram comparados os dados intra e inter-grupos. Os dados iniciais e de 6 meses foram obtidos de um estudo prévio realizado na Disciplina de Periodontia da FOB-USP, em 2004. Vinte e dois pacientes foram incluídos e avaliados originalmente, sendo que 12 aceitaram participar desta avaliação longitudinal. Os parâmetros clínicos avaliados foram: recessão gengival (RG), profundidade de sondagem (PS); nível clínico de inserção (NCI); largura da mucosa ceratinizada (LMC) e espessura da mucosa ceratinizada (EMC). Além desses parâmetros, também foi feita uma análise atual da percepção estética pelos pacientes e por um profissional calibrado das áreas tratadas. Após 13 anos, ambos os tratamentos resultaram em aumento significante LMC e EMC, porém com resultados superiores para o grupo que recebeu EGL (p<0,05). Não houve diferenças entre os grupos para os parâmetros PS e NCI, contudo no grupo MDA, a profundidade da RG foi significantemente maior comparado ao EGL em longo prazo. No entanto, o grupo MDA apresentou resultados superiores em relação à percepção estética do profissional. / The presence of an adequate width of keratinized tissue (KT) is essential for the maintenance of periodontal homeostasis. There are several surgical techniques with the purpose of correcting mucogingival changes, creating a suitable KT width in cases where it is absent or insufficient. Free gingival graft (FGG) is one of the techniques used to create gingiva in non-esthetic areas. Another option is the use of tissue substitutes, the acellular dermal matrix (ADM) that is considered an alternative for the gingiva augmentation. The aim of this study was to longitudinally analyze (after 13 years) the outcomes obtained after surgical procedures of FGG and ADM for the KT augmentation. Intra and intergroup data were compared. Initial and 6- month data were obtained from a previous study conducted at the Discipline of Periodontics of Bauru School of Dentistry-University of São Paulo in 2004. Twentytwo patients were originally included and evaluated, and 12 accepted to participate in this longitudinal evaluation. Clinical parameters evaluated were: gingival recession (GR), probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), keratinized tissue width (KTW), soft tissue thickness (TT). In addition, esthetic perception was evaluated by patients and by a calibrated periodontist. After 13 years, both treatments resulted in a significant increase in KWT and TT, but with superior results for the FGG group (p <0.05). There were no differences between groups for PD and CAL, however in the ADM group, the depth of GR was significantly higher compared to FGG in long-term. However, esthetics perception by professional evaluation demonstrated superior outcomes for ADM group.
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Matriz de impactos intersetoriais em economia da defesa do Brasil

Ternus, C?ssia Heloisa 24 January 2017 (has links)
Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-05-29T17:09:11Z No. of bitstreams: 1 DIS_CASSIA_HELOISA_TERNUS_COMPLETO.pdf: 1215962 bytes, checksum: fe0f09818520bd556dd7bca3733db26f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-29T17:09:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_CASSIA_HELOISA_TERNUS_COMPLETO.pdf: 1215962 bytes, checksum: fe0f09818520bd556dd7bca3733db26f (MD5) Previous issue date: 2017-01-24 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Firstly, the present study aims the creation by a tool capable measuring and evaluating the intersectorial impacts on defense economics in Brazil. Defense studies economics have gained notoriety in the post-Cold Wartime; however, there is still no tradition in such research. Thus, there is an area for new studies, since in addition to being few; there are no consensus on the results. In Brazil, defense investments are low, concentrated in personnel payments and, regionally, in the Federal District and in the Southeast region. Moreover, the operation at research was on the construction of an Input-Output Matrix (IOM) with the inclusion of the National Defense sector, using the IOM in 2010 with updated values for 2015. The results indicate that the sector is not very significant defense in the national economy; nevertheless, they are very close to other public sectors. With regard to the Type II employment multiplier, defense occupies the 1st place, possibly due to the high salaries of the sector. Finally, as for the simulations, for Type II multipliers, a R$ 10 million shock would generate 191 jobs, R$ 12 million in added value and R$ 24.32 million in gross production. / O presente estudo objetiva a cria??o de uma ferramenta capaz de mensurar e avaliar os impactos intersetoriais em economia da defesa do Brasil. Estudos sobre economia da defesa ganharam notoriedade no per?odo p?s-Guerra Fria, no entanto, ainda n?o existe tradi??o em tais pesquisas. Assim, h? espa?o para novos estudos, uma vez que al?m de serem poucos os existentes os mesmos n?o apresentam consenso quanto aos resultados. No Brasil, os investimentos em defesa s?o baixos, concentrados em pagamento de pessoal e, regionalmente, no Distrito Federal e na regi?o Sudeste. A operacionaliza??o da pesquisa se deu a partir da constru??o de uma Matriz Insumo Produto (MIP) com a inclus?o do setor Defesa Nacional, para tanto, valeu-se da MIP de 2010 com valores atualizados para 2015. Os resultados apontam participa??o pouco expressiva do setor defesa na economia nacional, contudo, eles s?o muito pr?ximos a outros setores p?blicos. Com rela??o ao multiplicador de emprego do Tipo II, a Defesa ocupa o 1? lugar, possivelmente em decorr?ncia dos altos sal?rios do setor. Quanto as simula??es realizadas, para os multiplicadores do Tipo II, um choque de R$10 milh?es geraria 191 empregos, R$12 milh?es de valor adicionado e R$24,32 milh?es de valor bruto de produ??o.
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Economia do mar : conceito, valor e import?ncia para o Brasil

Carvalho, Andr?a Bento 30 January 2018 (has links)
Submitted by PPG Economia do desenvolvimento (economia-pg@pucrs.br) on 2018-03-20T22:35:51Z No. of bitstreams: 1 ANDREA_BENTO _CARVALHO_TES.pdf: 2537906 bytes, checksum: f8e7900fb9f2d100aac7e42d6b6307a8 (MD5) / Approved for entry into archive by Tatiana Lopes (tatiana.lopes@pucrs.br) on 2018-04-03T18:53:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ANDREA_BENTO _CARVALHO_TES.pdf: 2537906 bytes, checksum: f8e7900fb9f2d100aac7e42d6b6307a8 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-03T18:59:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANDREA_BENTO _CARVALHO_TES.pdf: 2537906 bytes, checksum: f8e7900fb9f2d100aac7e42d6b6307a8 (MD5) Previous issue date: 2018-01-30 / The concept of a marine economy, its quantification and impacts are important to change or to create appropriate public policies. It is noted that studies dedicated to the economics of the sea in Brazil are still incipient. Therefore, this thesis is dedicated to this interesting and innovative topic of research in Brazil. This thesis presents three essays of Brazilian Marine Economy. The aim of the first essay is to construct a concept of marine economy for Brazil, thus making possible the analysis of the participation of these sectors in the national economy. The Brazilian marine economy was divided into twelve sectors of the economy (sections) making a total of forty activities (classes). The methodology presented for the conceptualization of the Brazilian marine economy incorporates some aspects developed in previous international studies, by classifying the activities directly or indirectly related to the sea. However, it differs from some international studies when considering only activities exclusively developed in states and counties facing the sea. Thus, the Brazilian marine economy is defined as: Economic activities that have direct influence of the sea, including economic activities that do not have the sea as raw material, but which are developed in nearness to the sea. It was verified that the Brazilian marine economy is composed of two hundred and eighty municipalities located in seventeen states and in the three regions - North, Central and South, with the southern coast concentrating the highest indicators of population, GDP and employment in marine activities. The second essay aims to quantify the Brazilian marine economy for 2015 through the estimation of a National Input-Output Matrix which creates the marine sectors by separating activities directly related to the sea, (Marine Dimension activities), as well as indirectly linked to the sea (Adjacent to the Sea). Additionally, it is possible to know the size of the Brazilian marine economy. The result of this work is the Marine Economy Input-Output Matrix, denominated MIP Br Mar. The Brazilian marine economy, for the year 2015, generated for the national economy R$ 1.11 trillion of Gross Domestic Product and R$ 1.18 trillion of Gross Value Added. The Brazilian marine sectors employed more than 19 million people, generating almost R$ 500 billion in wages. The final demand of the marine sectors was estimated at R$ 1.3 trillion. Therefore, it should be noted that the Brazilian marine economy is dominated by the sector of services, where we can highlight tourism. Finally, the third essay presents the backward and forward linkages, in addition to the multipliers of the Brazilian marine economy. For the Marine Dimension, the Sea Manufactures, Marine Living Resources and Maritime Transport sectors have the largest multipliers. Considering the impacts of Backward and Forward policies, the Brazilian marine economy presents, by analyzing the Marine Dimension, two sectors with values greater than 1 for backward linkages (Manufactures of the Sea, both for the open and closed models, and Marine Living Resources for the open model). In relation to forward linkages, a single marine sector, by the marine dimension, presents a value greater than 1 for the open and closed model (Sea Energy). Thus, there are no key sectors in Brazilian marine economy and it is a major consumer of other industries rather than suppliers. / O conceito de economia do mar, sua quantifica??o e seus impactos na economia nacional s?o importantes para alterar, ou ent?o, criar pol?ticas p?blicas mais eficientes. Estudos apontando a economia do mar no Brasil ainda s?o incipientes. Portanto, esta tese dedica-se a este inovador e interessante t?pico de pesquisa para o Brasil, apresentando tr?s ensaios que versam sobre a Economia do Mar no Brasil. O objetivo do primeiro ensaio ? construir um conceito de economia do mar para o Brasil, dessa forma possibilitando a an?lise da participa??o destes setores na economia nacional. A economia do mar brasileira foi dividida em doze setores da economia (se??es) perfazendo um total de quarenta atividades (classes). A metodologia apresentada para a conceitua??o da economia do mar brasileira incorpora alguns aspectos desenvolvidos em estudos internacionais anteriores, ao classificar as atividades em direta ou indiretamente relacionadas ao mar. Entretanto, diferencia-se de alguns estudos internacionais ao considerar somente atividades realizadas exclusivamente em estados e munic?pios defrontantes com o mar. Assim sendo, economia do mar no Brasil ? definida, como: Atividades econ?micas que apresentam influ?ncia direta do mar, incluindo as atividades econ?micas que n?o tem o mar como mat?ria-prima, mas, que s?o realizadas nas suas proximidades. Verificou-se que a economia do mar brasileira ? composta por duzentos e oitenta munic?pios espalhados por dezessete estados repartidos, de acordo com classifica??o pr?pria, em tr?s regi?es ? Norte, Central e Sul, sendo que o litoral sul concentra os maiores indicadores de popula??o, PIB e emprego em atividades marinhas. O segundo ensaio visa quantificar a economia do mar no Brasil para o ano de 2015 atrav?s da estima??o de uma Matriz Insumo Produto nacional que crie os setores marinhos apartando as atividades em diretamente relacionadas ao mar (Dimens?o Marinha), bem como as indiretamente ligadas ao mar (Adjacentes ao Mar). Al?m disso, responda qual o tamanho da economia do mar no Brasil. Dessa forma, o resultado deste trabalho ser? a Matriz Insumo Produto do Mar, denominada MIP Br Mar. A economia do mar brasileira, no ano de 2015, gerou para a economia nacional R$ 1,11 trilh?o de PIB e R$1,18 trilh?o de Valor Adicionado Bruto. Os setores marinhos empregaram no total mais de 19 milh?es de pessoas, gerando quase R$ 500 bilh?es em sal?rios. A demanda final dos setores marinhos foi estimada em R$ 1,3 trilh?o. Nesse sentido, destaca-se que a economia do mar brasileira ? dominada pela categoria de servi?os, onde podemos salientar o turismo. Por fim, o terceiro ensaio apresenta os encadeamentos de impactos de pol?ticas backward e forward, al?m dos multiplicadores da economia do mar brasileira. Pelo escopo Dimens?o Marinha, os setores Manufaturas do Mar, Recursos Vivos do Mar e Transporte do Mar apresentam os maiores multiplicadores. Considerando os impactos de pol?ticas backward e forward, a economia do mar brasileira apresenta, analisando a Dimens?o Marinha, dois setores com valores maiores de 1 para backward linkages (Manufaturas do Mar, tanto para os modelos aberto e fechado, e, Recursos Vivos do Mar para o modelo aberto). No tocante a forward linkages, um ?nico setor marinho, pela dimens?o marinha, apresenta valor maior de 1 para o modelo aberto e fechado (Energia do Mar). Nesse sentido, constata-se que a economia do mar brasileira n?o apresenta setores-chaves e tem por caracter?stica ser maior consumidora de outras ind?strias ao inv?s de supridora.

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