Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-24T12:55:10Z No. of bitstreams: 1 Eliana Maria dos Passos.pdf: 388635 bytes, checksum: e5d6eb95c9d3a471c040f1951f046959 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-24T12:55:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eliana Maria dos Passos.pdf: 388635 bytes, checksum: e5d6eb95c9d3a471c040f1951f046959 (MD5) Previous issue date: 2009-02-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The termite Coptotermes gestroi (Wasmann) is an urban and agricultural pest that has been established in many areas of the world. The use of entomopathogenic fungi is an option to minimize the economic loss caused by this termite. It is known, however, that physiological disorders caused by a pathogen trigger defence reactions of the insects, such as humoral and cellular responses (hemocytes). Thus, this research had as objectives: 1. to verify the pathogenicity of Isaria farinosa and I. fumosorosea to the termite C. gestroi and 2. to qualify and quantify the hemocytes in workers of this insect challenged by the pathogenic and virulent isolates. All fungi isolates tested, in the concentration of 107 conidia mL-1, were pathogenic and virulent causing more than 60% mortality, with an average survival of 2.0 to 3.9 days. However, the isolate URM-4995 of I. farinosa was one of the most virulent, being selected for the LC50 determination, estimated at 6.7 x 105 conidia mL-1, and to study the cellular immune response.The total average of hemocytes found in the hemolymph of workers termites treated with that isolate, in the concentration of 107 conidia mL-1, was not different from the hemocytes average recorded for the control, within 12, 24, 36 and 48 hours intervals. Regarding the cell types, the analysis in light microscopy revealed that the most frequent cells were plasmatocytes. The differential counts in infected and uninfected insects, did not differ significantly within the timeintervals assessed, there was only a change in function of time for plasmatocytes and prohemocytes. Thus, the results of total and differential counts show that I. farinosa in the concentration 107 conidia mL-1, did not affect quantitatively and qualitatively in the number of hemocytes of C. gestroi and that this pathogen appears as a promising candidate for controllingthis insect. / O cupim Coptotermes gestroi (Wasmann) é uma praga urbana e agrícola que vem se estabelecendo em muitas áreas do mundo. A utilização de fungos entomopatogênicos é uma opção para minimizar os prejuízos econômicos causados por este cupim. Sabe-se, contudo, que distúrbios fisiológicos ocasionados por um patógeno desencadeiam reações de defesa pelos insetos, como respostas humorais e celulares (hemócitos). Desta forma, a presente pesquisa teve como objetivos: 1. verificar a patogenicidade de isolados de Isaria farinosa e Isaria fumosorosea ao cupim C. gestroi e 2. avaliar qualitativamente e quantitativamente os hemócitos em operários deste inseto desafiado por isolado patogênico e virulento. Todos isolados se mostraram patogênicos, na concentração 107 conídios mL-1, ocasionando mortalidades acima de 60% e virulentos, apresentando uma sobrevivência média de 2,0 a 3,9 dias. Porém, o isolado URM-4995 de I. farinosa destacou-se como um dos mais virulentos, sendo selecionado para a determinaçãoda CL50, estimada em 6,7 x 105 conídios mL-1, e estudo da resposta imunológica celular. A média total de hemócitos encontrada na hemolinfa de operários tratados com este isolado, na concentração de 107 conídios mL-1, não foi diferente da média de hemócitos registradas para a testemunha, nos intervalos de 12h, 24h, 36h e 48h. Com relação aos tipos celulares, a análise em microscopia de luz revelou que as células mais frequentes foram plasmatócitos A contagem diferencial nos insetos infectados e não infectados, não diferiu significativamente nos intervalos de tempo avaliado, constatou-se somente uma variação em função do tempo para os plasmatócitos e prohemócitos. Assim, os resultados das contagens total e diferencial apresentados demonstram que I. farinosa, na concentração 107 conídios mL-1, não interferiu quantitativamente e qualitativamente no número de hemócitos de C. gestroi e que tal patógeno apresenta-se como promissor para o controle deste inseto.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-01T15:40:21Z No. of bitstreams: 1 Hugo Jose Goncalves dos Santos Junior.pdf: 559829 bytes, checksum: ef023fd54c27d2757f1cfcc6eb367bf7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-01T15:40:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hugo Jose Goncalves dos Santos Junior.pdf: 559829 bytes, checksum: ef023fd54c27d2757f1cfcc6eb367bf7 (MD5) Previous issue date: 2009-01-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The combined use of the entomopathogenic Bacillus thuringiensis Berliner with other arthropod natural enemies is an approach to improve the management of insect pests. Among the natural enemies, the egg parasitoid Trichogramma (Westwood) is recognized by its efficacy against various pest species in different agroecosystems, and can be used combined with B. thuringiensis. However, although B. thuringiensis exhibit several advantages, studies are required to ascertain about its selectivity for beneficial insects. The selection of isolates of B. thuringiensis is a way to assess the virulence to target insect pests, and the discovery of new toxins with higher entomopathogenic activity. Populations of Trichogramma should also be selected to avoid failure of its use, since this parasitoid has large variation regarding host preference and environmental conditions. Thus, this study selected isolates of B. thuringiensis (Bt) and populations of Trichogramma spp. to control of Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae). The selection methodology identified the Bt isolates Bt 23 and Bt 26 as promissory to control of H.zea. Among populations of Trichogramma evaluated there was variability in relation to the parameters analyzed and the thermal conditions, and the population of T. atopovirilia (Tatp1) exhibited the best performance at 25°C, and the populations Tp13 and Tp16 of T. pretiosum in thethermal conditions of 18 and 30ºC respectively. Based on these results, the populations Tatp1 of T. atopovirilia and Tp13 and Tp16 of T. pretiosum have potential as biological control agent against H. zea as well as the isolates Bt 23 and Bt 26 of B. thuringiensis. / A utilização conjunta de Bacillus thuringiensis Berliner com outros inimigos naturais é uma forma de incrementar o manejo de insetos-praga. Entre estes agentes, Trichogramma (Westwood) é reconhecido pela sua viabilidade e eficiência e, pode ser utilizado conjuntamente com B. thuringiensis. Porém, apesar de B. thuringiensis apresentar inúmeras vantagens, são necessários estudos que possibilitem comprovar sua seletividade a insetos benéficos. A seleção de isolados de B. thuringiensis é uma forma de avaliar a virulência a insetos-praga, além de possibilitar a descoberta de novas toxinas com maior atividade entomopatogênica. Populações de Trichogramma também devem ser selecionadas para evitar o insucesso da sua utilização, pois estes parasitóides apresentam grande variação, seja no comportamento de procura, preferência hospedeira e até mesmo às condições ambientais. Este trabalho teve como objetivo selecionar isolados de B. thuringiensis (B.t) e populações de Trichogramma spp. visando o controle de Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae). Os resultados apresentaram variabilidade emrelação à virulência dos isolados de B.t a H. zea, sendo que alguns não apresentaram índices satisfatórios de virulência, porém afetaram o desenvolvimento de H. zea. Foram identificados isolados promissores no controle de H. zea, a exemplo do B.t 23 e B.t 26. Entre as populações deTrichogramma avaliadas verificou-se variabilidade em relação aos parâmetros analisados e as condições térmicas, sendo que a população de T. atopovirilia (Tatp1) foi a que apresentou melhor desempenho a 25ºC e, as populações Tp13 e Tp16 de T. pretiosum nas condições térmicas de 18 e 30ºC respectivamente. Em virtude dos resultados encontrados, as populações de T. atopovirilia (Tatp1) e de T. pretiosum (Tp13 e Tp16) apresentam potencial para serem utilizadas em programas de controle biológico de H. zea.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-01T16:28:25Z No. of bitstreams: 1 Laurici Maria Pires dos Santos.pdf: 3466863 bytes, checksum: 5d731758c5c5bc0c0ab7e9025027b287 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-01T16:28:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Laurici Maria Pires dos Santos.pdf: 3466863 bytes, checksum: 5d731758c5c5bc0c0ab7e9025027b287 (MD5) Previous issue date: 2008-02-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The control of Tuta absoluta (Meyrick) is usually done with intensive insecticide sprays, which has led to the research of alternative control methods as part of the tomato leafminer integrated management in tomato crops. The objective of this work was to evaluate the pathogenicity of Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok. and Beauveria bassiana (Bals.)Vuill isolates on eggs and larvae of T. absoluta, and their compatibility with insecticides used to control this pest. Also, it was investigated the infection process of M. anisopliae on eggs and the effect over fecundity and mortality of females. Although both fungi showed pathogenicity to eggs and larvae of T. absoluta, M. anisopliae showed higher pathogenicity than B. bassiana. Among the isolates of M. anisopliae tested, URPE-6 and URPE-19 caused 95% and 42% infection in eggs and 1st instar larvae, respectively. The LC50-value for T. absoluta eggs was 3.5 x 104 conidia.mL-1 of the URPE-6 isolate. The compatibility of isolates URPE-6 and URPE-19 with neem, chlorfenapyr, indoxacarb, spinosad and abamectin was evaluated. Field dosages of chlorfenapyrand neem were toxic to the isolate URPE-19, while abamectin and neem showed toxicity to the isolate URPE-6. Ultra-structure analysis of URPE-6 infecting eggs showed that the process of conidia penetration occurred within 6 h after application of the fungus. Bodies of hyphae presenceand intense micelle extrusion were observed in eggs at 12 and 72 h after application, respectively. The URPE-6 isolate did not show any effect on egg-laying preference and fecundity of T. absoluta females, but it affected their survivals. The use of entomopathogenic fungi is a potential alternative control for T. absoluta mainly at the egg stage, and it may be associated with insecticides used in the control of this tomato pest / Um dos fatores limitantes da produtividade da cultura do tomateiro é a ocorrência de pragas, destacando-se Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera:Gelechiidae). A aplicação intensiva de inseticidas no controle convencional desse inseto torna relevante a busca por métodos alternativos que possam compor o Manejo Integrado desta praga. Esta pesquisa teve como objetivos avaliar a patogenicidade de isolados de Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorok. e Beauveria bassiana (Bals.) Vuill para ovos e lagartas de T. absoluta, estudar a compatibilidade destes patógenos com inseticidas, investigar o processo de infecção de M. anisopliae sobre ovos e avaliar seu efeito na fecundidade e mortalidade de fêmeas. Todos os isolados testados apresentaram patogenicidade a ovos e lagartas de T. absoluta, sendo M. anisopliae mais patogênico. Destacaram-se os isolados URPE-6 causando infecção de 95% sobre ovos e URPE-19 com mortalidade de 42% sobre lagartas de primeiro ínstar. Foi determinada a CL50 do isolado URPE-6 de M. anisopliae sobre ovos de T. absoluta, obtendo-se um valor de 3,5 x 104 conídios mL-1. Testou-se a compatibilidadedos isolados URPE-6 e URPE-19 com Nim, Clorfenapir, Indoxacarbe, Espinosade e Abamectina. Os produtos Clorfenapir e Nim foram tóxicos ao isolado URPE-19 e Abamectina e Nim apresentaram toxicidade para o isolado URPE-6, nas dosagens recomendadas pelo fabricante. Aavaliação ultra-estrutural dos ovos infectados pelo isolado URPE-6 de M. anisopliae nos períodos de 6, 12, 24, 48 e 72h após a aplicação do patógeno, demonstrou que o processo de penetração dos conídios ocorreu dentro do período de 6 horas, confirmando sua virulência. Foi observada a presença de corpos hifais no interior do ovo, nos períodos de 12 e 24h. No período de 72h após a infecção ocorreu intensa extrusão do micélio cobrindo a superfície externa dos ovos. O isolado URPE-6 não apresentou efeito sobre a oviposição e fecundidade de T. absoluta, porém afetou a sobrevivência. A utilização de M. anisopliae representa mais uma alternativa no controle de T. absoluta, principalmente no estágio de ovo, sendo possível associação deste patógeno com inseticidas utilizados no controle desta praga.

Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Flavio Neves Celestino.pdf: 399418 bytes, checksum: 337ada99c466400f48f7f81083580bc6 (MD5) Previous issue date: 2011-02-11 / The coffee cultivation is a very important social and agricultural activity. However, some phytosanitary problems can cause losses, diminishing productivity and ultimately their profitability economic. Among the insects the coffee berry borer, Hypothenemus hampei (Ferrari, 1867) (Coleoptera: Scolytidae), is a major pest of the crop. This study evaluates the potential use of castor oil and its association with the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin, 1912, in order to controlling of H. hampei. The potential of castor oil through the mortality of the coffee berry borer using three different routes of application was evaluated: (1) ingestion, (2) contact and (3) combined (ingestion + contact), beyond the estimate of LC50. In association between castor oil and B. bassiana the germination, vegetative growth and sporulation were evaluated, and the biological index (BI) determined. The route application combined (ingestion + contact) has increased mortality at concentrations of 0.5, 1.0 and 3.0% (v/v), differing from the other routes of application. However, on the concentrations 1.5, 2.0 and 2.5% (v/v) there was no significant differences between the routes of application contact and contact + ingestion, and these differ from the route of application by ingestion. The route of application by ingestion + contact presented 92% mortality on the concentration 3.0% (v/v), higher than the other routes of application. This route of application also presented an LC50 of 1.31% (v/v). The CCA-UFES/Bb-4 and CCA-UFES/Bb-15 isolated showed the highest values of germination. Only CCA-UFES/Bb-4 isolate presented the vegetative growth reduced in function of increasing concentrations of castor oil. This isolate was one that showed greater sporulation at all concentrations. The oil acts both by ingestion and contact, and that the association of both provides a more efficient control. All isolates present great potential for use associated with castor oil / A cafeicultura é uma atividade de extrema importância social e agrícola. Contudo, alguns problemas fitossanitários podem ocasionar prejuízos, diminuindo a produtividade e, consequentemente, a sua rentabilidade econômica. Dentre os insetos, a broca-do-café Hypothenemus hampei (Ferrari, 1867) (Coleoptera: Scolytidae), é considerada a principal praga da cultura. No presente estudo foi avaliado o potencial de uso do óleo de mamona e a associação com o fungo entomopatogênico Beauveria bassiana (Bals.) Vuillemin, 1912, visando o controle de H. hampei. Avaliou-se a potencialidade do óleo de mamona sobre a mortalidade da broca-do-café utilizando três diferentes vias de aplicação: (1) ingestão, (2) contato e (3) ingestão + contato, além da estimativa da CL50. Na associação entre o óleo de mamona e B. bassiana foram avaliados os parâmetros de germinação, crescimento vegetativo e esporulação, e determinado o índice biológico (IB). A via aplicação por ingestão + contato apresentou maior mortalidade nas concentrações de 0,5; 1,0 e 3,0% (v/v) diferindo das demais vias de aplicação. Por sua vez, nas concentrações 1,5; 2,0 e 2,5% (v/v) não houve diferença entre as vias de aplicação por contato e ingestão + contato, sendo que estas diferiram da via de aplicação por ingestão. A aplicação via ingestão + contato apresentou 92% de mortalidade na concentração 3,0% (v/v), superior as demais vias de aplicação. Esta via de aplicação também apresentou CL50 de 1,31% (v/v). Os isolados CCA-UFES/Bb-4 e CCA-UFES/Bb-15 foram os que apresentaram os maiores valores de germinação. Somente o isolado CCA-UFES/Bb-4 apresentou crescimento vegetativo reduzido em função do aumento das concentrações do óleo de mamona. Esse isolado foi o que apresentou a maior esporulação em todas as concentrações. O óleo atua tanto por ingestão quanto por contato, sendo que a associação de ambos proporciona uma melhor eficiência de controle. Todos os isolados apresentam grande potencial de utilização associados com óleo de mamona

O Brasil é o país líder no uso do fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae para o controle pragas agrícolas. Pouco se conhece sobre a diversidade e o impacto dos micovírus em M. anisopliae sensu stricto. Este trabalho mostra a riqueza dos micovírus associados a isolados de M. anisopliae da coleção de entomopatógenos da Universidade de São Paulo, usinas sucroalcooleiras e produtos microbianos à base do entomopatógeno. RNAfd foram encontrados em 55% dos 36 isolados de Metarhizium e apresentaram 16 diferentes padrões eletroforéticos consistindo de 3 a 18 bandas de RNAfd em gel de poliacrilamida. RNAfd não foram detectados em nenhum dos produtos comerciais utilizados no presente estudo. Os diferentes padrões de vírus encontrados nos isolados aqui estudados, aparentemente, não têm relação com os locais onde foram coletados. O inibidor de síntese protéica ciclohexamida não foi eficiente na eliminação dos vírus de RNAfd em nenhum dos isolados de fungos testados. Colônias dos isolados de M. anisopliae ESALQ 866, M. anisopliae ESALQ 1256 e M. anisopliae CTC F8 foram curadas por meio do cultivo monoconidial ou isolamento de ponta de hifas. Alguns segmentos do isolado M. anisopliae PL26 foram perdidos após o subcultivo de ponta das hifas. Colônias de M. anisopliae ESALQ PL26 obtidas por meio do cultivo monoconidial ou subcultivo de ponta de hifas apresentaram grande variabilidade morfológica, no entanto, essa variação não foi correlacionada com a presença de micovírus. Colônias isogênicas de M. anisopliae ESALQ 1256 mostraram diferenças no crescimento, na produção de conídios e na virulência, no entanto, essas diferenças não foram associadas à presença de RNAfd. Não foram observadas diferenças na tolerância aos raios ultravioleta e ao calor entre as colônias de M. anisopliae ESALQ 1256, com e sem vírus de RNAfd. Colônias oriundas de setores formados no isolado M. anisopliae PL26 produziram menor quantidade de conídios e apresentaram menor quantidade de vírus RNAfd em comparação com as colônias oriundas de outras regiões da colônias originais com características normais. A repicagem sucessiva dos isolados de M. anisopliae ESALQ PL26, ESALQ 1256, CTC F8 e CTC F15, infectados por diferentes vírus de RNAfd, nos meios de cultura BDA, SDAY e meio de arroz, bem como a passagem dos fungos em larvas de Tenebrio molitor, em geral, não afetaram a replicação dos micovírus. / Brazil is the leading country in the use of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae against agricultural pests. Little is known about the diversity and the impact of mycovirus in M. anisopliae sensu stricto. This study shows the richness of mycovirus associated with M. anisopliae isolates from the collections of entomopathogens of the University of São Paulo, from sugar-alcohol factories and microbial based products. dsRNA were found in 55% of the 36 Metarhizium isolates and showed 16 different electrophoretic patterns consisting of 3 to 18 dsRNA bands in polyacrylamide gels. dsRNA was not detected in any of the commercial products used in this study. The different viral patterns found in the isolates studied here apparently have no relation to the locations where they were collected. The inhibitor of protein synthesis cycloheximide culture was efficient in eradicating dsRNA virus from fungi. Colonies of isolates of M. anisopliae ESALQ 866, M. anisopliae ESALQ 1256 and M. anisopliae F8 were cured by monoconidial or by hyphal tip isolation of. Some segments of the M. anisopliae PL26 isolate were lost following hyphal tip subculture. Colonies both from monoconidial culture and hyphal tip subculture of M. anisopliae ESALQ PL26 showed great morphological variability; however, this variation was not correlated with the presence of mycoviruses. Isogenic colonies of M. anisopliae ESALQ 1256 showed differences in growth, conidia production and virulence; however, these differences were not associated to the presence of the dsRNA. No difference was observed regarding tolerance to ultraviolet rays and heat among the colonies of M. anisopliae ESALQ 1256, with and without the dsRNA virus. Sectors formed in the isolate M. anisopliae PL26 produced a smaller number of conidia and fewer dsRNA virus in comparison to the original colonies with normal characteristics. The repeated subculture of isolates of M. anisopliae ESALQ PL26, ESALQ 1256, CTC F8 and CTC F15, infected by different virus of dsRNA, in the PDA, SDAY culture media and in rice, as well as the fungi passage in larvae of Tenebrio molitor, in general, did not affect the replication of the mycovirus.

O principal problema fitossanitário da citricultura atualmente é a doença conhecida como greening ou Huanglongbing (HLB), transmitida pelo inseto vetor Diaphorina citri. O presente trabalho objetivou desenvolver estratégias para incorporação dos fungos Beauveria bassiana ESALQ-PL63, registrado para o controle de outras pragas e/ou I. fumosorosea ESALQ-1296 em desenvolvimento como biopesticida especialmente para o manejo de D. citri, determinando a melhor concentração de adjuvantes e de conídios dos fungos a serem utilizados, sua eficácia em laboratório, semi-campo e campo; assim como sua compatibilidade com os agroquímicos utilizados na cultura. Na comparação dos dois fungos aplicados com seis adjuvantes no controle de D. citri revelaram que exceto Tween 80 a 0,001%, todos os outros adjuvantes contribuíram para aumentar a eficácia dos fungos. Os níveis de controle obtidos nos bioensaios em laboratório com B. bassiana e I. fumosorosea foram confirmados nos bioensaios em semi-campo e em campo. Realizaram-se 12 pulverizações com os dois fungos durante o período de dezembro de 2011 a janeiro de 2013 em campo nas concentrações de 2,5x106 conídios/mL em 2000 L/ha e 5x106 conídios/mL em 1000 L/ha ambos com 0,075% do adjuvante KBRAdj. Na comparação mês a mês, somente em janeiro de 2012 o controle químico foi superior a todos os outros tratamentos. No restante dos meses, as mortalidades causadas pelos tratamentos com fungos foram semelhantes entre si e semelhantes ao controle químico. As mortalidades de adultos de D. citri pelos fungos variaram de 96,4±3,8% (dezembro/2011) a 57,8±3,5% (outubro/2012). Os efeitos de 27 agroquímicos sobre o crescimento vegetativo e esporulação das colônias e a viabilidade dos conídios in vitro e a virulência dos fungos in vivo após mistura com cada um dos produtos foram determinados e revelaram que exceto os fungicidas a maioria dos produtos são compatíveis com os fungos e podem ser misturados na calda de aplicação. Estes resultados indicam que Beauveria bassiana ESALQ-PL63 e Isaria fumosorosea ESALQ-1296 são promissores para utilização no controle de D. citri em programas de manejo integrado de pragas de citros. / The main cause of the crop loss in citrus is currently the disease known as greening or Huanglongbing (HLB), transmitted by the insect vector Diaphorina citri. This study aimed to develop strategies for incorporating the fungi Beauveria bassiana ESALQ-PL63, registered for the control of other pests and Isaria fumosorosea ESALQ-1296 in development as biopesticide especially for the management of D. citri by determining the optimal concentration of adjuvants and of conidia to be used, their effectiveness in laboratory, semifield and field; as well as its compatibility with agrochemicals used in the crop. The comparison of the two fungi applied with six adjuvants for the control of D. citri revealed that except Tween 80 (0.001%), all other adjuvants contributed to increase the effectiveness of the fungi. Control levels obtained in the laboratory bioassays with B. bassiana and I. fumosorosea were confirmed in bioassays in semi-field and field. Both fungi were sprayed 12 times from December 2011 to January 2013 in the field at concentrations of 2.5x106 conidia/mL in 2000 L/ha and 5x106 conidia/mL in 1000 L/ha both with 0.075% of KBRAdj adjuvant. Only in January 2012 the chemical control was superior to all other treatments. In the remaining months, the mortalities caused by all the fungi treatments were similar to each other and similar to chemical control. The mortalities of adult D. citri by fungi ranged from 96.4 ± 3.8% (December/2011) to 57.8 ± 3.5% (October/2012). The effects of 27 agrochemicals on the vegetative growth and sporulation of colonies and conidia viability in vitro and in vivo virulence of the fungus after mixing it with each of the products were determined and showed that except the fungicides, the majority of products are compatible with the fungi and may be tank mixed. These results indicate that B. bassiana ESALQ-PL63 and I. fumosorosea ESALQ-1296 are promising for use in the control of D. citri in integrated pest management programs of citrus.

Hypothenemus hampei apresenta aspectos bioecológicos e comportamentais que dificulta o seu controle, como a sua natureza críptica, ficando dentro da semente de café a maior parte de seu ciclo de vida, por apresentar várias gerações por ano. Uma grande quantidade de frutos com H. hampei cai ao solo, constituindo uma excelente forma para sobrevivência do inseto na entressafra e como fonte para novas infestações. O controle de H. hampei deve então ser efetuado no período em que as fêmeas deixam o fruto onde nasceram até o momento em que colonizam novos frutos para reproduzirem. Biopesticida a base de Beauveria bassiana é uma opção disponível para o controle de H. hampei, no entanto, existem poucas evidências de sua eficiência em campo. Objetivou-se com está pesquisa avaliar estratégias para utilização de B. bassiana para manejo de populações de H. hampei por: i) pulverização aquosa com adjuvantes, ii) armadilha atrativa para auto-autocontaminação e iii) incorporação do patógeno no solo com fertilizantes quimícos. Pulverização direta de suspensões de conídios com o adjuvante Tween 80 resultou em menor mortalidade de H. hampei do que suspensões com os demais adjuvantes testados em laboratório. A eficácia dos adjuvantes com o fungo variou com o método de inoculação. As pulverizações diretas dos insetos resultaram em mortalidades reduzidas (23 - 53%), enquanto que a imersão e os métodos que permitiram que os insetos ficassem em contato com os conídios no substrato (fruto ou papel de filtro) após a pulverização resultaram em maiores mortalidades (63 - 98%). As imagens ultramorfológicas de H. hampei inoculados por diferentes métodos sugerem que a região ventral do abdome é o principal sítio de infecção do fungo, visto que, diferente dos outros métodos, na pulverização direta que resultou em mortalidades reduzidas, grande quantidade de conídios aderidos e germinados foram observados no élitro em comparação com a região ventral. Três modelos de armadilha de auto-inoculação foram comparadas em cafezal sombreado e a pleno sol e a captura de H. hampei foi superior em ESALQHh2. O manejo de H. hampei com a armadilha ESALQ-Hh2 foi avaliado em cafezal a pleno sol desde a fase de formação dos frutos até a colheita. Foi constatado em média 6,6% de H. hampei infectados por Beauveria sp. nas plantas distante 4 e 8 m das armadilhas e nenhum inseto infectado nas parcelas com as mesmas armadilhas, mas sem o fungo. Observou-se redução na concentração e viabilidade do patógeno nas armadilhas ao longo do tempo, porém as mortalidades de H. hampei expostos ao fungo foram elevadas (73 - 100%) durante os 148 dias de avaliação. Estudos conduzidos em laboratório revelaram que a capacidade de voo de H. hampei não é afetada pela carga de conídios aderidos ao seu corpo quando comparados aos insetos sem exposição ao fungo. Além disso, apenas 5% dos insetos expostos ao fungo conseguiram penetrar na semente de café, indicando baixo potencial de danos. A mistura de conídios de B. bassiana com fertilizantes químicos granulados em solo de cafezal resultou em reduções (34 e 50%) da infestação de H. hampei quando comparadas às parcelas somente com aplicação dos fertilizantes. Sugere-se que o manejo desta praga com B. bassiana apresenta maior potencial a curto prazo por pulverizações apenas no período de trânsito das fêmeas colonizadoras, e, à médio e longo prazo, pela aplicação do patógeno no solo conjuntamente com fertilizantes e com o uso de armadilha de auto-inoculação. / Hypothenemus hampei, presents bioecological and behavioral aspects that hinders its control, such as its cryptic nature, remaining inside the coffee bean most of its life cycle and for presenting several generations per year. A large number of coffee beans carrying H. hampei drop to the ground, providing an excellent way for insect survival in the off season and as a source for new infestations of berries. The control of H. hampei must thus be made in the period when the females leave the beans where they were born until the moment they colonize new fruits to reproduce. Biopesticide based with Beauveria bassiana is an option available for the control of H. hampei; however, there is little evidence of its effectiveness in the field. The objective of this study was to evaluate strategies to use B. bassiana in the management of H. hampei in three ways: i) aqueous spray with adjuvants, ii) attractive trap of autoinoculation and iv) inoculation of the pathogen into the soil with chemical fertilazers. Direct spraying of suspensions of fungal conidia with adjuvant Tween 80 resulted in lower mortality of H. hampei than suspensions with the other adjuvants tested in the laboratory. The effectiveness of the adjuvant with the fungus varied with the inoculation method. Direct sprays on the insects reduced mortalities (23 - 53%), while immersion and the methods that allowed the insects to have contact with the conidia in the substrate (fruit or filter paper) after spraying, resulted in greater mortality (63 - 98%). Ultramorphological images of H. hampei, inoculated by different methods, suggest that the ventral region of the abdomen is the primary site of infection of the fungus since, unlike the other methods, the direct spray that resulted in reduced mortality, large quantity of conidia adhered and germinated were observed in the elytron compared to the ventral region. Three models of autoinoculation traps were compared in a shaded coffee plantation and in the full sun. Capture of H. hampei was superior in ESALQHh2. The management of H. hampei with trap ESALQ-Hh2 was assessed at a coffee plantation under full sun from fruit formation until harvest. On average, 6.6% of H. hampei was infected by Beauveria sp. in plants 4 and 8 m distant from the traps and no insect was infected in the plots with the same traps, but without the fungus. There was a reduction in concentration and viability of the pathogen in the traps over time; however, mortality of H. hampei exposed to the fungus were high (73 - 100%) during the 148 days of evaluation. Studies conducted in laboratory revealed that the flight capacity of H. hampei was not affected by the load of conidia adhered to its body when compared to insects without exposure to the fungus. Furthermore, only 5% of insects exposed to the fungus managed to penetrate the coffee bean, indicating low potential damage. Inoculation of conidia of B. bassiana, along with granulated chemical fertilizers in the soil of the coffee plantation, reduced (34 and 50%) the infestation of H. hampei compared the plots with only the application of fertilizers. It is suggested that the management of this pest with B. bassiana presents greater potential in the short term by spraying only during the period of transit of colonizing females and in the medium and long term through the application of the pathogen to the soil together with fertilizers and autoinoculation traps.

Orientadores: Kil Jin Park, Jose Maria Monteiro Sigrist / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agricola / Made available in DSpace on 2018-08-04T08:24:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Spagnol_WigbertoAntonio_D.pdf: 1868736 bytes, checksum: 6f96b6c038ec83ef28aec9e47331b2bc (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Apesar dos consumidores associarem frutas e hortaliças como uma dieta saudável, por outro lado, estão mais exigentes, requerendo o aprimoramento da qualidade e a praticidade para seu consumo. Para atender esta expectativa dos consumidores, as hortaliças processadas minimamente necessitam de aplicação de tecnologias, a fim de evitar a perda de qualidade causada pelas várias operações unitárias inerentes ao processamento. O presente trabalho teve como finalidade caracterizar os efeitos da temperatura, da modificação da atmosfera através da aplicação de filme plástico e de atmosferas ativas com altos teores de O2 e CO2, visando atingir a segurança, a alta qualidade e a conveniência no consumo de produtos processados minimamente (PM). O conceito de aplicação de fatores de preservação combinados envolve um enfoque mais amplo da preservação da qualidade, tanto na prevenção do crescimento de microrganismos de deterioração e/ou tóxicos, mas também para a conservação de outros atributos (cor, sabor, odor, textura). Em cenoura e vagem processadas minimamente, considerando um sistema com fluxo de ar contínuo, um acréscimo de 10ºC na temperatura causou um aumenta na taxa respiratória de 3,0 vezes em cenouras e, para vagens aumentou de 3,78 a 4,71 vezes. As condições climáticas de produção, verão e inverno, afetaram a taxa de respiração de vagens, sendo em torno de 50% maior para as vagens colhidas na época de inverno em relação às vagens colhidas no verão. O sintoma de dano pelo frio foi constatado à temperatura de 1ºC, sendo possível mantê-las a esta temperatura no máximo durante 4 dias. Foi observada uma diferença de 3 ciclos logUFC.g-1 no atraso de crescimento de microrganismos de deterioração a 1ºC quando comparado a 11ºC, para as cenouras embaladas em filmes plásticos. A aplicação de altos teores de O2 e CO2 em cenoura e vagem PM, considerando um sistema experimental aberto, com fluxo da mistura de gases contínuo, causou uma diminuição do crescimento de bactérias aeróbias psicrotróficas e mesófilas em torno de 2 ciclos log ao longo do período de 10 dias de armazenamento tanto para as cenouras mantidas a 11ºC como para as vagens a 5ºC. O alto teor de CO2 (30 kPa) em sinergia com alto teor de O2 (50 a 60 kPa) apresentou uma maior eficiência na inibição do crescimento das bactérias. A presença de altos teores de CO2 também evitaram a ocorrência de escurecimento enzimático nas vagens, evitando a perda de sua coloração verde durante o período de armazenamento / Abstract: Although the consumers associate fruits and vegetables to a healthy diet, they are more demanding about their quality and facility, on the other hand. The minimally processed vegetables need some technology to satisfy the consumer's expectations and in order to avoid the loss of the quality caused by many different operations concerned to minimally processing food. This work has the purpose to characterize the temperature effects, to modify the atmosphere by using plastic films and active atmospheres with high concentration of CO2 and O2. It aims to get safety, high quality and the convenience in consuming minimally processed products.The combination of preservation factors applied to minimal processing of foods concept involves a wider focus of quality preservation as prevention of the microorganisms deterioration growth and toxics microorganisms: and also for the conservation of other qualities (color, flavour, odor, texture). The minimally processing carrots and snap beans submitted to an open experimental system with the continuous air flux, an increase of 10ºC in the temperature has caused an increase of the respiration rate from 2 to 3 times in carrots and from 4 to 5 times on snap beans, being around 50% higher to snap beans harvested in the summer. The chilling injury symptoms on the snap beans were verified at the temperature of 1ºC. It is possible to maintain then at this temperature during only four days. It was observed a difference of 3 cycles log UFC.g-1 in the growth lag of deterioration microorganisms at 1ºC when compared to 11ºC, for the plastic films packaged carrots. The application of high concentration on the MP carrots and snap beans considering an experimental open system, with mixture flux of continuous gases, caused a decrease of psicotrofic and mesofile aerobic bacteria around 2 cycles log during 10 days of storage either carrots at 11ºC or snap beans at 5ºC. The high concentration of CO2 (30kPa) in synergy with high level of O2 (50 to 60 kPa) presented bigger efficiency in inhibition of the bacteria growth. The presence of high concentration of O2 also CO2 also avoided the occurrence of enzymatic browning on the snap beans, besides the loss of the green coloration during the storage period. The high concentration of O2 and CO2 didn¿t caused statistics alteration on C vitamin when compared to the air / Doutorado / Tecnologia Pós-Colheita / Doutor em Engenharia Agrícola

Entomopathogenic fungi (EPF) of the genera Metarhizium and Beauveria are able to endophytically colonize a wide variety of plant species, providing protection against arthropod pests; besides increasing the plant development; and act as phytopathogen antagonists. The main objective of the present project was to evaluate the potential of entomopathogenic fungi as plant inoculants against the two-spotted spider mite Tetranychus urticae and the effects on plant growth promotion. Tritrophic effects were also studied, by evaluating prey consumption and feeding behavior of the predatory mite Phytoseiulus persimilis. The evaluated strategy has several potential benefits compared to the sole use of EPF as contact biocontrol agents, as it may control both pests and phytopathogens; be compatible with other natural enemies; provide limited exposure of fungal propagules to adverse environmental conditions, and accelerate seed emergence and plant growth. Considering this, the effects of seed inoculation using two isolates of Metarhizium robertsii and Beauveria bassiana were evaluated at University of Copenhagen, Denmark, on plant development (i.e. biomass and yield) and T. urticae population growth in a model system with bean plants under greenhouse conditions. Effects on feeding performance of P. persimilis were also studied in laboratory conditions. In Brazil, inoculation studies with EPF were conducted at ESALQ/USP with strawberry plants in greenhouse conditions and in the field in four commercial production areas of strawberries in Atibaia-SP and Senador Amaral-MG. In greenhouse studies, the effects of 15 isolates of Metarhizium spp., 5 isolates of B. bassiana and 5 of Cordyceps (= Isaria) fumosorosea were studied, whereas in the commercial area one isolate of Metarhizium and Beauveria was used. Strawberry roots were inoculated by submersion in fungal suspensions, and the population growth of spider mites, while plants development was assessed by measuring root lengths, biomass of roots and leaves, and the strawberry fruit weight. The results showed a significant reduction in T. urticae population and in general better plant development in both crops. The production of string beans and strawberry fruits were higher in inoculated plants than in non-inoculated plants. There was no difference in predation rate and feeding behavior of the predator mite P. persimilis towards T. urticae from fungal inoculated and uninoculated plants. In the commercial strawberry production areas there were significantly lower populations of T. urticae and fewer symptoms of plant diseases on plants in the fungal treated beds compared to plants in untreated beds. The results of this project bring a new perspective on the use of Metarhizium and Beauveria as plant protecting agents revealing that the use of entomopathogenic fungi as plant inoculants may be a promising strategy. / Fungos entomopatogênicos dos gêneros Metarhizium e Beauveria são capazes de colonizar endofiticamente uma ampla variedade de espécies de plantas e conferir à estas, proteção contra artrópodes pragas; além de acelerar o seu desenvolvimento; e atuar como antagonistas de fitopatógenos. O objetivo geral deste projeto foi avaliar o potencial de fungos entomopatogênicos como inoculantes contra o ácaro rajado Tetranychus urticae e seus efeitos na promoção de crescimento de plantas. O efeito tri-trófico no consumo e comportamento alimentar do ácaro predador Phytoseiulus persimilis também foi estudado. A estratégia avaliada traz vários potenciais benefícios comparado ao uso exclusivo de fungos entomopatogênicos como agentes de controle biológico de contato, como o controle duplo de pragas e fitopatógenos; compatibilidade com outros inimigos naturais; menor exposição de propágulos às condições ambientais adversas, além de acelerar a emergência de sementes e o crescimento de plantas. Diante disso, os efeitos da inoculação de sementes usando dois isolados de Metarhizium robertsii e Beauveria bassiana foram avaliados na Universidade de Copenhagen, Dinamarca, na promoção de crescimento das plantas (biomassa e produção) e no crescimento populacional de T. urticae em um sistema modelo com plantas de feijão em casa-de-vegetação. Efeitos no comportamento alimentar de P. persimilis foram também estudados em condições de laboratório. No Brasil, estudos foram conduzidos na ESALQ/USP com plantas de morangueiro em casa-de-vegetação e em quatro áreas de produção comercial de morangueiro em Atibaia-SP e Senador Amaral-MG. Nos estudos em casa-de-vegetação, os efeitos de 15 isolados de Metarhizium spp., 5 de B. bassiana e 5 de Cordyceps (= Isaria) fumosorosea foram estudados, enquanto em área comercial um isolado de Metarhizium e Beauveria foram utilizados. Raízes de morangueiro foram inoculadas por imersão em suspensões fúngicas, e foram avaliados o crescimento populacional do ácaro rajado e o desenvolvimento das plantas, quantificando o comprimento de raiz, biomassa de raiz e de parte aérea, e massa de frutos de morango. Os resultados mostraram redução significativa na população de T. urticae e em geral melhor desenvolvimento das plantas nas duas culturas. A produção de vagens em plantas de feijão e de frutos de morango foram superiores nas plantas inoculadas em relação às não inoculadas. Não se observou diferenças na taxa de predação e comportamento alimentar do ácaro predador P. persimilis quando oferecidos T. urticae provenientes de plantas inoculadas e não inoculadas. Em campo foram observadas populações significativamente menores de T. urticae e menos sintomas de doenças nas plantas inoculadas com os fungos, comparado às plantas não inoculadas. Os resultados obtidos por este projeto trazem uma nova perspectiva do uso de Metarhizium e Beauveria como agentes protetores de plantas revelando que a utilização de fungos entomopatogênicos como inoculantes pode ser uma estratégia promissora.

Novos sistemas biocompatíveis para aplicações biotecnológicas são relevantes não só do ponto de vista tecnológico, mas também para avanços científicos. A presente dissertação visou à criação e caracterização de filmes finos (espessura de até 100 nm) ou micrométricos (espessura de 50 µm a 100 µm) formados por goma xantana (GXT), poli(cloreto de dimetil dialil amônio), (PDDA), albumina bovina sérica (BSA), e nanopartículas de magnetita (NPM). A incorporação de amoxicilina (Amox), um antibiótico amplamente utilizado contra muitas infecções, nos filmes foi realizada durante a formação dos sistemas. Os filmes finos foram caracterizados através de elipsometria e microscopia de força atômica. Em solução, as interações favoráveis entre o Amox e a BSA foram evidenciadas por mudanças substanciais na estrutura secundária da BSA, como revelado pelo dicroísmo circular. Os filmes micrométricos (patches) de GXT e GXT/NPM/BSA foram imersos em Amox 2 g/L, levando a incorporação de 10 ± 3 e 17 ± 4 µg/cm³ de Amox, respectivamente. Sua caracterização compreendeu espectroscopia vibracional no infravermelho por transformada de Fourier no modo de refletância total atenuada (FTIR-ATR), microscopia eletrônica de varredura (MEV), medidas de sorção e espectrometria de emissão óptica com plasma indutivamente acoplado (ICP-OES). A incorporação de 0,2% em massa de Fe3O4 nos \"patches\" e sua exposição a um campo magnético externo, viabilizou a liberação total in vitro de Amox, em pH 5,5 e em 0,02 mol/L de NaCl, seguindo o comportamento quasi-Fickiano. A difusão da Amox dos \"patches\" de GXT/NPM/BSA em ágar contendo Staphylococcus aureus e Escherichia coli, levou halos de inibição consideráveis. A inibição do crescimento de E. coli foi particularmente eficiente sob efeito de campo magnético externo. / New biocompatible systems for biotech applications are relevant not only from a technological point of view, but also for scientific advances. The present project aimed at the creation and characterization of thin films (thickness up to 100 nm) or micrometric patches (thickness of 50 µm to 100 µm) formed by the deposition of xanthan gum (GXT), poly (dimethyl diallyl ammonium chloride) (PDDA), bovine serum albumin (BSA), and magnetite nanoparticles (NPM). The incorporation of amoxicillin (Amox), a widely used antibiotic against many infections, in the films was performed during the formation of the systems. Thin films were characterized by means of ellipsometry and atomic force microscopy. In solution, favorable interactions between Amox and BSA were evidenced by substantial changes in the secondary structure of BSA, as revealed by circular dichroism spectra. Patches of GXT and GXT/NPM/BSA were immersed into Amox solution at 2 g/L, leading to the Amox incorporation of 10 ± 3 and 17 ± 4 µg/cm3, respectively. The patches characterization included Fourier Transform Infrared vibration spectroscopy in the attenuated total reflectance mode (FTIR-ATR), scanning electron microscopy (MEV), sorption measurements and inductively coupled plasma optical emission spectrometry (ICP-OES). The incorporation of 0.2 wt% of Fe3O4 in the patches and their exposure to an external magnetic field, allowed the total in vitro release of Amox, at pH 5.5 and 0.02 mol/L NaCl, following the behavior quasi-Fickian. Amox diffusion from GXT/NPM/BSA patches in agar containing Staphylococcus aureus and Escherichia coli led to a considerable zone of inhibition. Inhibition of E. coli growth was particularly efficient under the effect of external magnetic field.