Orientador: Andrigo Barboza De Nardi / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Geórgia Modé Magalhães / Resumo: Feridas de grandes extensões, com perda da viabilidade tecidual e retardo na cicatrização por segunda intenção são casos que se faz necessário o emprego de técnicas cirúrgicas reconstrutivas. O plasma rico em plaquetas (PRP) é um produto com maior concentração plaquetária, adjuvante no processo cicatricial de cirurgias reconstrutivas, auxiliando nos processos de hemostasia e estimulação da angiogênese. Dessa forma, delineou-se um estudo a fim de avaliar a eficácia do uso do gel produzido a partir do plasma rico em plaquetas (PRP) em flapes de avanço de padrão axial toracodorsal em coelhos, para avaliar a possibilidade de favorecer a integração do retalho no leito receptor. Utilizaram-se 30 coelhos da raça Nova Zelândia branco, separados em dois grupos de 15 animais, compreendendo os grupos plasma rico em plaquetas (GPRP), na qual empregou-se o gel antes da síntese da ferida cirúrgica, e controle (GC), na qual utilizou-se apenas solução fisiológica. Para obtenção do PRP, coletou-se sangue dos animais, e determinou-se a contagem plaquetária antes da preparação do gel. No início e término do experimento os animais foram pesados para posterior análise de ganho peso médio. Após o procedimento cirúrgico iniciou-se as avaliações macroscópicas no 3º, 7º e 14º dia, e avaliou-se presença ou ausência de exsudato, integridade da pele, edema, rubor e necrose. Após esta etapa, coletou-se o material da ferida cirúrgica para confecção das lâminas histológicas e posterior avaliação microscópica. Avaliou-se a proliferação vascular, presença de células mononucleares e polimorfonucleares, proliferação fibroblástica, colagenização, reepitelização e hemorragia. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (Teste t Student, t emparalhado, e Kruskall Walis, sendo p<0,05). O ganho de peso médio não foi significativo entre os grupos ... / Abstract: Wounds of large tracts with loss of tissue viability and delayed healing by secondary intention are cases where it is necessary the use of reconstructive surgical techniques. The platelet rich plasma (PRP) is a product with a higher platelet concentration, adjuvant in the healing process of reconstructive surgeries, assisting in the processes of hemostasis and stimulation of angiogenesis. Thus, a study was devised to assess the efficacy of the gel produced from the platelet rich plasma (PRP) in the forward axial flaps thoracodorsal pattern in rabbits to evaluate the ability to promote the integration of the flap the recipient bed. We used 30 white rabbits New Zealand, separated into two groups of 15 animals, comprising the platelet rich plasma groups (GPRP), in which we used the gel before the synthesis of the surgical wound , and control (CG), in which only saline was used. To obtain the PRP, the blood was collected from the animals, was determined and the platelet count before preparation of the gel. At the beginning and end of the experiment the animals were weighed for analysis of average weight gain. After surgery began macroscopic in the 3rd, 7th and 14th day reviews, and we assessed the presence or absence of exudate, skin integrity, edema, redness and necrosis. After this step, yielded the material for the manufacture of surgical wound, followed by microscopic histological slides. We evaluated vascular proliferation, presence of polymorphonuclear and mononuclear cells, fibroblast proliferation, collagen deposition, reepithelialization and hemorrhage. The data were subjected to statistical analysis (Student t test, t paired, and Kruskal Wallis test, and p<0.05). The average weight gain was not significant between the groups; platelet concentration in the final sample of PRP was significantly higher when compared with the original; exudate and necrosis were significantly higher in the ... / Mestre

Orientador: Mirela Tinucci Costa / Coorientador: Débora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Banca: Carolina Franchi João / Banca: Sabryna Gouveia Calazans / Resumo: A pele exposta à luz UV sofre alteração nas funções e características morfológicas, isto influencia a produção local de citocinas e prejudica o reconhecimento e processamento de antígenos. A cronicidade a exposição solar na pele de cães com idades de oito a dez anos, de pelame curto e claro, com pouca pigmentação e glabra, usualmente evolui para ceratose actínica (CA) e culmina em carcinoma de células escamosas (CCE) cutâneo. Parte essencial do fenótipo maligno é a angiogênese, que tem como promotor o Fator de Crescimento do Endotélio Vascular (VEGF) que atua nas células endoteliais. Adicionalmente a angiogênese, o crescimento das células neoplásicas requer o aumento de proteínas da membrana celular envolvidas na nutrição, como o Transportador de Glicose 1 (GLUT 1), que é essencial para a sobrevivência e proliferação das células tumorais. Assim, se propôs investigar o valor do VEGF e do GLUT 1 na progressão tumoral empregando-se para isso pele de cães que apresentavam concomitantemente a CA (Grupo CA), CCE (Grupo CCE) e pele ausente de dermatopatias (Grupo Distante de lesões), comparando-as com a pele de cães sadios sem alterações histopatológicas (Grupo Controle); também avaliar se o tratamento com anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs) poderia interferir nas marcações dos anticorpos, bem como avaliar se a intensidade dessas marcações diferia na pele de cães que apresentaram recidiva tumoral dos que não apresentaram. Para isso, foram selecionados 15 cães com lesões de CA e CCE e pele distante de lesões e outros 15 cães com peles normais. A intensidade da expressão do VEGF e do GLUT 1 foi investigada pelo uso da imuno-histoquímica e os resultados avaliados estatisticamente. Os Grupos CA e Distante das lesões apresentaram comportamento semelhante quanto à intensidade de marcação do VEGF; enquanto a intensidade do GLUT 1 foi semelhante nos Grupos CA e CCE. Nas amostras do grupo CA ... / Abstract: The skin exposed to UV light undergoes changes in morphology and function, this influences the local production of cytokines and impairs the antigen recognition and processing. The chronic sun exposure on the skin of dogs with ages of eight to ten years, short hair coat and clear, with little pigmentation and glabra, usually progresses to actinic keratosis (AK) and culminates in cutaneous squamous cell carcinoma (SCC). Essential part of the malignant phenotype is angiogenesis, which is the promoter Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) that plays on endothelial cells. Additionally angiogenesis, the growth of neoplastic cells requires increasing cell membrane proteins involved in nutrition, as the Glucose Transporter 1 (GLUT 1), which is essential for survival and proliferation of tumor cells. Thus, we proposed to investigate the value of VEGF and GLUT 1 in tumor progression employing for this skin of dogs concomitantly presented the AK (AK group), SCC (SCC Group) absent from skin diseases and skin (Lesions distant Group), comparing them with the skin of healthy dogs without histopathological changes (Control Group); also evaluate whether treatment with nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) may interfere with markings of antibodies, as well as evaluating the intensity of these markings differed in the skin of dogs with tumor recurrence of which did not. For this, 15 dogs were selected with AK and SCC lesions and with lesions distant skin and 15 dogs with normal skin. The intensity of expression of GLUT 1 and VEGF was investigated by use of immunohistochemistry and the results were evaluated statistically. The AK and Lesions distant Groups showed similar behavior as the intensity staining of VEGF; while the intensity of GLUT 1 was similar in AK and SCC Groups. Samples from the AK Group who did not receive NSAIDs, VEGF showed higher intensity staining than the AK group receiving NSAID; already in dogs with tumor recurrence ... / Mestre

Resumo: A angiogênese tem importante participação na patogênese das neoplasias malignas em seres humanos e animais de companhia. Estudos envolvendo a influência dos fatores pró-angiogênicos no crescimento e disseminação dos tumores sólidos têm sido amplamente realizados, porém os relacionados às neoplasias hematopoiéticas são extremamente limitados. O presente estudo objetivou investigar o fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) nos linfomas caninos e sua relação com indicadores prognósticos da neoplasia. Foram avaliados 25 cães, sendo 10 sadios e 15 com linfoma. Os pacientes foram submetidos à coleta de sangue para mensuração da concentração sérica do VEGF, mediante ensaio imunoenzimático (ELISA), e biopsia de linfonodo ou de tecido neoplásico para avaliação da expressão do VEGF, pela técnica de imunoistoquímica. Embora a média das concentrações séricas do VEGF nos cães com linfoma (88,51±121,71) tenha sido superior à média dos cães sadios (17,93±23,34), estes valores não foram considerados significativos (p=0,10). A imunomarcação para VEGF foi maior (p<0,0001) em cães com linfoma (9,07±2,34) em comparação com os cães sadios (2,70±2,35). Não houve correlação significativa entre a concentração sérica e a marcação imunoistoquímica do VEGF com a localização anatômica, estádio e sub-estádio clínico, grau histológico, imunofenótipo e a sobrevida dos cães com linfoma. O sub-estádio clínico influenciou negativamente na sobrevida dos cães com linfoma. Os resultados obtidos permitem concluir que o VEGF possui grande importância no comportamento biológico dos linfomas caninos, seja mediante estímulo da angiogênese ou da linfangiogênese tumoral. São necessários estudos com maior número de animais para determinar o valor prognóstico do estímulo à angiogênese ou linfangiogênese nos linfomas caninos. / Abstract: Angiogenesis has a major role in the pathogenesis of malignancies in human beings and companion animals. Studies involving the role of pro-angiogenic factors in growing and dissemination of solid tumors are commonly performed, but studies involving hematological malignancies are relatively limited. The present report aims to investigate the role of the vascular endothelial growth factor (VEGF) in canine lymphomas and its relation with prognostic factors. Twenty five dogs were evaluated: ten healthy dogs and fifteen dogs with lymphoma. Patients were submitted to blood sample collection to VEGF serum concentration measure, by means of sandwich enzyme immunoassay. Lymph node or neoplastic tissue biopsy was accomplished in order to evaluate VEGF expression, through immunohistochemical technique. Although VEGF serum concentrations mean in dogs with lymphoma (88,51±121,71) was found to be greater than VEGF serum concentrations in healthy dogs (17,93±23,34), this values were not statistically significant (p=0,10). VEGF expression was significantly higher (p=0,0001) in dogs with lymphoma (9,07±2,34) than VEGF expression in healthy dogs (2,70±2,35). No significant relationship was found between VEGF serum concentration or expression and anatomical localization, clinical stage, histological grade, immunophenotype or overall survival of lymphoma affected dogs. The clinical sub-stage was the only negative prognostic factor in overall survival of dogs with lymphoma. We conclude that VEGF has an important role in biological behavior of canine lymphomas, once is involved in tumoral angiogenesis or lymphangiogenesis stimuli. Larger series of animals are needed to determine the prognostic value of angiogenesis and lymphangiogenesis in canine lymphomas. / Orientador: Carlos Roberto Daleck / Coorientadora: Renée Laufer Amorin / Banca: Duvaldo Eurides / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Mestre

Orientador: Aparecido Antonio Camacho / Banca: José Jurandir Fagliari / Banca: Wagner Luis Ferreira / Banca: Rosângela de Oliveira Alves / Banca: James Newton Bizetto Meira de Andrade / Resumo: No trabalho em tela, avaliou-se o potencial terapêutico do transplante de células-tronco autológas em dois modelos experimentais de cardiomiopatia. Na primeira parte avaliou-se a função cardíaca de cães chagásicos crônicos submetidos ao transplante de células-tronco hematopoiéticas autólogas. Na segunda etapa, a terapia foi realizada em cães com cardiomiopatia dilatada induzida pela doxorrubicina. Nas duas situações, as células-tronco foram obtidas da medula óssea, que foi coletada e, subsequentemente, fracionada em gradiente de ficol. A seguir, as células mononucleares foram recuperadas, lavadas e diluídas para transplantação intracoronariana. A cateterização das coronárias foi realizada pela técnica de Seldinger e foram infundidas cerca de 60 milhões de células em cada animal. Ao longo de seis meses os cães foram avaliados mensalmente quanto aos parâmetros eletrocárdiográficos, ecocardiográficos e de pressão arterial. Nos cães chagásicos pouco parâmetros se modificaram ao longo do período de avaliação, embora tenham observadas variações nos parâmetros ecocardiográficos PVAO, PPE, TRIV e ITEI. Com relação aos cães com cardiomiopatia induzida pela doxorrubicina, o período pós-transplante foi caracterizado por variação importante nos parâmetros ecocardiográficos PE, IEPs, PPE, TRIV, ITEI, SIV, PLVE, FEJ, FEC, VMEF e IE, embora não ocorrido alterações nas variáveis eletrocardiográficas e de pressão arterial. Os resultados mostraram evolução favorável da função sistólica e diastólica do ventrículo esquerdo em ambos os modelos utilizados. / Abstract: This study was conceived to evaluate the therapeutic potential of stem cells transplantation in two experimental models os cardiomyopathy. In the first of the study, the cardiac function of dogs with chronic Chagas disease sbumeitted hematopoietic stem cell therapy was assessed. In the second part, cell teraphy was carried out in dogs with doxorubicin-induced cardiomyopathy. In either situation, the animals included in the study underwent autologous bone marrow-derived stem cell transplantation into the coronary arteries. Bone marrow was aspirated and centrifuged in ficoll gradient. Mononuclear cells were collected, washed and diluted to permit intracoronary delivery. Coronary catheterization was accomplished with the Seldinger's technique, and approximately 60 million cells were transfunded in each animal. Dogs were assessed for electrocardiographic, echocardiographic and blood pressure parameters for six months at monthly intervals. Dogs with Chagas disease showed improvement in only a few parameters during the period of study, although a significant variation was seen in the echo parameters PVAO, PPE, TRIV and ITEI. Regarding the dogs with doxorubcin-induced cardiomyopathy, the post-transplantation riod was characterized by an important change in the echocardiographic parameters IVEs, SSPE, IEPs, PPE, TRIV, ITEI, SIV, PLVE, FEJ, FEC, VMEF and IE, although no change was documented in the electrocardiographic and blood pressure measurements. Results showed enhancement of left ventricular systolic and diastolic functions in both experimental models. / Doutor

Introdução: O carcinoma hepatocelular (CHC) é o câncer primário de fígado mais comum e está associado com a segunda menor taxa de sobrevida em 5 anos de todos os tipos de tumores. A melatonina (Mel) é uma potente molécula antioxidante que se tem mostrado benéfica em diversas situações patológicas, incluindo o CHC. Objetivo: Avaliar o efeito da Mel sobre marcadores de estresse oxidativo e angiogênicos no tecido hepático de ratos Wistar no modelo experimental de carcinogênese hepática induzida por dietilnitrosamina (DEN) associado ao acetilaminofluoreno (2-AAF). Métodos: 32 ratos machos Wistar (150g) foram divididos em 4 grupos: Controle (CO); Controle+Mel (CO+Mel); DEN e DEN+Mel. O DEN (50mg/kg) foi administrado por via intraperitoneal duas/uma vez por semana, associado a uma única dose de 2-AAF (100mg/kg). A Mel foi administrada na água de beber dos animais na concentração final de 20 mg/L e o tratamento teve início na 12ª semana perdurando até o fim das 19 semanas de experimento. O sangue dos animais foi coletado para as análises de AST, ALT, FA, γ-GT e amostras de fígado utilizadas para avaliar a lipoperoxidação (LPO), a atividade das enzimas antioxidantes (CAT, GPx e GST), os níveis de GSH e de metabólitos do óxido nítrico, a análise histógica e as proteínas envolvidas na angiogênese tumoral (VEGF, PI3K, p-Akt e eNOS). Resultados: O dano tecidual e o processo fibrogênico presentes no parênquima hepático estavam diminuídos no grupo DEN+Mel, assim como o nível de TBARS e a atividade da enzima GST quando comparados ao grupo DEN. A atividade da CAT mostrou-se aumentada no grupo DEN+Mel quando comparada ao grupo DEN. No processo angiogênio, a expressão de VEGF, PI3K, p-Akt mostrou-se diminuída no grupo DEN+Mel enquanto a expressão da eNOS apresentou-se aumentada quando comparado ao grupo DEN. Conclusão: Constatamos que a Mel foi capaz de minimizar os danos no parênquima hepático, de diminuir a LPO, modular a atividade da CAT, além de mostrar-se eficaz na redução de VEGF e da via PI3K/Akt no modelo experimental de carcinogênese hepática. / Background: Hepatocellular carcinoma (CHC) is the most common primary liver cancer and is associated with the second lowest 5-year survival rate of all tumor types. Melatonin (Mel) is a powerful antioxidant molecule that has been demonstrated to be beneficial in various pathological conditions, including HCC. Objective: The aim of this study was to evaluate the effect of Mel on oxidative stress and angiogenic markers in liver tissue of Wistar rats in the experimental model of hepatic carcinogenesis induced by diethylnitrosamine (DEN) and acetylaminofluorene (2-AAF). Methods: 32 male Wistar rats (150g) were divided into 4 groups: Control (CO); Control+Mel (CO+Mel); DEN and DEN+Mel. DEN (50mg/kg) was administered intraperitoneally once or twice a week, associated with a single dose of 2-AAF (100mg/kg). Mel was given in drinking water at the final concentration of 20 mg/L and the treatment was started at 12th week and continued until the end of the 19 weeks of experiment. Blood samples were collected for AST, ALT, AP, γ-GT and liver samples were used to evaluate lipid peroxidation (LPO), activity of antioxidant enzymes (CAT, GPx and GST), levels of GSH and nitric oxide levels, histological analysis and expression of proteins involved in tumor angiogenesis (VEGF, PI3K, p-Akt and eNOS). Results: The tissue damage and the fibrogenic process present in the hepatic parenchyma were decreased as well as the levels of TBARS and the activity of GST in the group DEN+Mel when compared to DEN group. CAT activity was increased in DEN+Mel group when we compared with DEN group. The expression of VEGF, PI3K, p-Akt was decreased in DEN+Mel group while eNOS expression was increased when compared to DEN group. Conclusion: Mel was able to minimize damage in the hepatic parenchyma, reduce LPO, modulate the activity of CAT and reduce VEGF and the PI3K/Akt pathway in a experimental model of hepatic carcinogenesis.

A quantificação da angiogênese e das metaloproteinases pode ser útil na avaliação do comportamento dos colesteatomas, como marcadores de sua agressividade. Objetivo: Comparar os marcadores CD31, MMP2 e MMP9 entre pacientes pediátricos e adultos. Método: transversal. Grupos pediátricos(até 18 anos) e adultos(a partir de 19 anos). Coletados 120 colesteatomas, fixados em formol a 10%, preparadas cinco lâminas, de cada amostra, por técnicas histológicas habituais, observados: número de vasos sangüíneos(CD 31), marcação com MMP2 e MMP9, número de células na matriz e espessura na perimatriz. Dados analisados no SPSS através coeficiente Spearman, exato de Fisher e Mann-Whitney. Resultados: Colesteatomas distribuídos igualmente: 60 pediátricos(11,77±3,57anos); 60 adultos(38,29±14,51anos). CD31pediátrico 7(4 a 11), CD31adulto 4(0 a 10) (P=0,044). MMP2citoplasmática pediátrico 1(0 a 3), MMP2citoplasmática adulto 0(0 a 1) (P=0,006). MMP2nuclear pediátrico 0(0 a 1), MMP2nuclear adulto 0(0 a 1) (P=0,056). MMP9 pediátrico 2(0 a 4), MMP9 adulto 0(0 a 4) (P=0,049). O número de vasos sangüíneos e a quantificação das metaloproteinases estavam fortemente correlacionados com a espessura da perimatriz. Conclusões: Os colesteatomas pediátricos apresentam um grau inflamatório mais exacerbado, produzem mais metaloproteinases, fatores estes, que conjugados, poderiam caracterizar os colesteatomas pediátricos como mais agressivos que os colesteatomas adultos. / Cholesteatoma is an epidermal cyst with three distinct components: matrix, perimatrix and cystic content. The clinical significance of cholesteatoma lies in its association with potential intracranial complications due to bone destruction. Objective: To compare histological and immunohistochemistry analysis between pediatric and adult acquired. Methods: Cross-sectional study. The patients were divided in two groups, according to their age: 60 adults(>18 years old) and 60 children(until 18 years old). The cholesteatomas were fixed in formalin 10%. Five slides from each sample were prepared using standard histology techniques. Slides were analyzed according to average number of blood vessels (CD31), MMP2 and MMP9 positivity and thickness of the perimatrix. Data were analyzed using Mann-Whitney and Fisher's exact tests and Spearmann coeficient, with P values<0.05 considered significant. Results: Perimatrix thickness was 78(34-217); CD31 was 6(0-11), cytoplasmic MMP2 positivity was 0(0-2), nuclear MMP2 positivity was 0(0-1); MMP9 positivity was 2(0-4). Statistical difference, between children and adults, was found in perimatrix thickness(P=0.014); blood vessels(P=0.044); cytoplasmic MMP2(P=0.006), nuclear MMP2(P=0.056); MMP9(P=0.049). Conclusions: Pediatric cholesteatomas have a thicker perimatrix, a greater degree of inflammation, and produce more metalloproteinases than those of adult patients, we can suggest, with the combination of these factors, that cholesteatoma is more aggressive in children than in adults.

Orientador: Carmen Silvia Passos Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T13:26:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lourenco_GustavoJacob_M.pdf: 17814526 bytes, checksum: 4b05f16607bfec15eee0533ac8440e33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A angiogênese é um importante processo para o desenvolvimento e progressão do câncer de mama esporádico (CME). Há evidências de que as células tumorais podem produzirproteínas antiangiogènicas como a endostatina (ES). A ES é codificada pelo gene COL18A1. Recentemente, um polimorfismo do gene COL18A1, o D104N, foi associado ao aumento do risco de ocorrência do adenocarcinoma de próstata. Considerando que não há descrições sobre a influência do polimorfismo D104N na susceptibilidade ao CME, este foi definido como o objetivo do estudo. Assim, o DNA genômico de 181 mulheres com CME e 448 controles foi analisado por meio da reação em cadeia da polimerase e digestão enzimática com a enzima Msél. O método ELISA foi utilizado para a quantificação da ES sérica de 118 pacientes com CME e 158 controles. As amostras dos controles estiveram no Equilíbrio de Hardy-Weinberg (X = 2,15; P= 0,14). Em contraste, as amostras das pacientes não confirmaram a expectativa de Hardy-Weinberg no lócus D104N do gene COL18A1 (X2= 22,87; P< 0,0001). Observamos que a freqüência do polimorfismo 104NN foi maior em pacientes do que em controles (2,8% vs 0,0%; respectivamente). Os indivíduos com o genótipo NN apresentaram um risco infinitamente maior de ocorrência da doença do que aqueles com os outros genótipos (P= 0,003). As freqüências do polimorfismo 104NN foram similares em pacientes estratificados por variáveis clínicas (idade, raça, idades da menarca, menopausa, da primeira gestação a termo, lactação, terapia de reposição hormonal e hábito de fumar) e laboratoriais (histologia, graus histológico e nuclear, padrão dos receptores de estrogênio e progesterona e estágio TNM do tumor). A mediana das concentrações da ES foi maior em pacientes do que em controles (P< 0,001). Valores similares foram encontrados em pacientes (P> 0,759) e controles (P= 0,535) estratificados por genótipos. Os nossos resultados sugerem que o polimorfismo 104NN do gene COL18A1 está associado à susceptibilidade do CME, possivelmente devido à anormalidade funcional da proteína. / Abstract: Angiogenesis is an important step in sporadic breast cancer (SBC) development and progression There is evidence that neoplastic cells play a role in the generation of endogenous antiangiogenic proteins, such as endostatin (ES). ES is codified by the COL18A1 gene. Recently, a COL18A1 polymorphism (D104N) was associated with increased risk for the prostatic adenocarcinoma. Considering that it is unknown whether the D104N polymorphism of the COL18A1 gene alters the risk for SBC, this was the aim of this study. Thus, genomic DNA from peripheral blood of 181 SBC women and 448 controls were analysed using the polymerase chain reaction followed by restriction endonuclease digestion with Msel. ELISA for quantification of ES was performed in serum from 118 SBC woman and 158 controls. Controls' samples were in Hardy-Weinberg equilibrium (X2= 2.15, P= 0.14). In contrast, patients' samples did not confirm the Hardy-Weinberg expectations at the D104N locus (X2= 22.87, P< 0.0001). We observed a higher frequency of 104NN polymorphism in SBC patients than in controls (2.8% vs 0.0%, respectively). Individuals with the 104NN polymorphism had an infinite risk for disease (P= 0.003) when compared with those with other genotypes. The frequencies of the 104NN polymorphism were similar in patients stratified by clinical (age, ethnical origin, ages of menarche, menopause, first full-term pregnancy, lactation, hormone replacement therapy, and smoke habit) and laboratory variables (tumour histology, histological and nuclear grades, status of estrogen and progesterone receptors, and stage TNM of the tumour). The median values of ES was higher in patients than in controls (P< 0.001). Similar median values of ES were seen among patients (P> 0 759) and controls (P= 0.535) stratified by genotypes However, differences in clinical and laboratory manifestation and levels of ES may not have reached statistical significance due to the small number of individuals with the 104N allele, enrolled in study. Our results suggest that the 104NN genotype of the COLI8AI gene is associated with SBC susceptibility, possibly due to an abnormal ES function. / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Maria Leticia Cintra / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T13:46:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Watanabe_IsabelaConde_M.pdf: 15950287 bytes, checksum: cf82f8afd1a89bbb152ae3bb8ae77dd0 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O Ceratoacantoma (CA) é um tumor cutâneo de grande interesse devido às suas características peculiares e relação controversa com o carcinoma espinocelular (CEC). Em razão das similaridades histológicas e da ausência de critérios definitivos, o diagnóstico diferencial entre estas entidades de comportamento biológico distinto é frequentemente problemático. Na tentativa de compreender melhor a patogênese destas neoplasias e com o objetivo de investigar se a avaliação da angiogênese poderia ser útil na distinção entre CA e CEC, nós estudamos, com o auxílio de programa de morfometria digital, a densidade microvascular (DMV) e a expressão da proteína p53 e do antígeno de proliferação celular Ki67 em biópsias incisionais de 40 lesões ceratoacantoma-símiles das quais o curso clínico foi monitorado. Não foram encontradas diferenças estatísticas entre CAs e CECs quanto à expressão de p53 e DMV. O índice proliferativo foi significativamente maior nos CECs, porém com sobreposição entre os grupos dificultando a aplicação deste critério na rotina diagnóstica. Em ambos os tumores, foi demonstrada correlação indireta entre a densidade de vasos neoformados (DMV-CD105) e a densidade de vasos pré-existentes. Para os CAs, foi observada correlação positiva entre DMV-CD105 e índice de Ki67 enquanto os CECs revelaram correlações positivas entre tamanho da lesão e idade e tamanho e p53. A DMV não se mostrou ferramenta útil no diagnóstico diferencial entre CAs e CECs. No entanto, apesar destas neoplasias apresentarem muitas similaridades, as diferentes formas de interação entre as variáveis estudadas indicam que, provavelmente, mecanismos distintos estão envolvidos em sua patogênese / Abstract: Keratoacanthoma (KA) is a cutaneous tumor of great interest because of its unique characteristics and controversial relationship to squamous cell carcinoma (SCC). We hypothesized that differences in microvessel density (MVD), p53 expression and proliferation index could be related to the distinct behavior between KAs and SCCs and that their assessment could help distinguish between these entities. Immunohistochemical staining was performed with markers for vessels (CD34 and CD105), p53 oncoprotein and cell proliferation (Ki67). Microvessel densities and p53 and Ki67 quantifications were calculated using computer-assisted image analysis. There were no significant differences between KAs and SCCs regarding neither p53 expression nor microvessel density. The Ki67 proliferation index was significantly higher in SCCs, but there was considerable overlap between the groups. We found an indirect correlation between CD105-MVD and the density of pre-existing vessels in both tumors. For KAs we also observed a positive correlation between CD105-MVD and Ki67 index whereas SCCs demonstrated significant positive correlations between tumor size and age and tumor size and p53. MVD was not a useful tool in the distinction between KAs and SCCs. However, despite the fact that these neoplasms have more similarities than differences, there are probably distinct mechanisms involved in their pathogenesis / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Lourenço Sbragia Neto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T01:31:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Schmidt_AugustoFredericoSantos_D.pdf: 2455947 bytes, checksum: 2419510f01584a15bbc44f3555be5714 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A hérnia diafragmática congênita (HDC) é uma doença grave com alta mortalidade devido à hipoplasia e hipertensão pulmonar. A via do ácido retinóico tem sido implicada na patogênese da HDC e pode ser uma alternativa de intervenção na promoção da alveolarização e vascularização pulmonar. O fator de crescimento vascular do endotélio (VEGF - Vascular Endothelial Growth Factor) e seus receptores VEGFR1 e VEGFR2 têm importante função no crescimento e na vascularização pulmonar, e, possivelmente, na patogênese da HDC. No entanto, não se conhece como o tratamento pré-natal com ácido retinóico pode afetar a vascularização pulmonar e seus fatores de crescimento. O objetivo deste estudo foi analisar o efeito do tratamento pré-natal com ácido retinóico na vascularização pulmonar e na expressão pulmonar de VEGF e seus receptores VEGFR1 e VEGFR2 em fetos de rato com HDC induzida pelo nitrofen (2,4-dicloro-4'nitrodifenil éter). Fetos de ratas Sprague-Dawley prenhes foram divididos em oito grupos: 1) controle externo, 2) placebo óleo nitrofen; 3) placebo óleo ácido retinóico, 4) tratados com ácido retinóico, 5) expostos ao nitrofen sem HDC, 6) expostos ao nitrofen com HDC, 7) expostos ao nitrofen sem HDC e tratados com ácido retinóico, 8) expostos ao nitrofen com HDC e tratados com ácido retinóico. Nitrofen foi administrado por via oral (gavagem) com 9,5 dias de gestação. Ácido retinóico foi administrado por via intraperitoneal com 18,5, 19,5 e 20,5 dias de gestação na dose de 5 mg/kg/dia, a coleta fetal foi realizada com 21,5 dias (termo=22 dias). Cada grupo fetal foi composto por 25 fetos. As variáveis morfológicas estudadas foram: peso corporal (PC), peso pulmonar total (PPT), peso do pulmão esquerdo (PPE) e a relação peso pulmonar total / peso corporal (PPT/PC). A morfologia pulmonar foi estudada pela mensuração da média linear de interceptação (MLI) e seus componentes diâmetro interno dos espaços aéreos (DEA) e a relação de comprimento de transecção do parênquima / espaço aéreo (MCTP). A morfologia vascular foi estudada pela mensuração do diâmetro externo (DE), diâmetro interno (DI) e espessura proporcional da camada muscular média (ECM) de arteríolas pulmonares de resistência. A expressão de VEGF e dos receptores VEGFR1 e VEGFR2 foi analisada por meio de imunoistoquímica e western blotting. Os dados morfológicos e morfométricos foram analisados pelo teste ANOVA com pós-teste de Tukey-Kramer, a avaliação semiquantitativa da imunoistoquímica foi analisada pelo teste de Kruskal-Wallis com pós-teste de Dunn, sendo considerados significativos valores de p<0,05 para ambos os testes. A freqüência de HDC observada entre os fetos expostos ao nitrofen foi de 40%. As variáveis morfológicas apresentaram diminuição significativa nos grupos expostos ao nitrofen, especialmente nos fetos com HDC (p<0,05). O tratamento com ácido retinóico não alterou as variáveis morfométricas pulmonares. Fetos com HDC apresentaram aumento da ECM, enquanto o tratamento com ácido retinóico reduziu a ECM nos fetos com HDC (p<0.001). A presença de HDC levou à diminuição da expressão de VEGF, VEGFR1 e VEGFR2, enquanto o tratamento com ácido retinóico recuperou a expressão de VEGF e VEGFR1. A alteração sinalização da via do VEGF na HDC pode estar associada à patogênese da hipoplasia e da hipertensão pulmonar. O tratamento pré-natal com ácido retinóico pode fornecer vias para tratamento da hipertensão pulmonar na HDC por meio da redução da ECM das arteríolas pulmonares e recuperação do VEGF e seus receptores / Abstract: Congenital diaphragmatic hernia (CDH) is a life-threatening disease with high mortality due to the pulmonary hypertension and hypoplasia. Vascular endothelial growth factor (VEGF) and its receptors VEGFR1 and VEGFR2 play a major role in lung vascularization, growth, and possibly in the pathogenesis of CDH. However it is not know how prenatal treatment with retinoic acid can affect lung vascularization by acting on the VEGF signaling. The purpose of this study was to analyze the effect of antenatal retinoic acid treatment on the expression of pulmonary VEGF and its receptors VEGFR-1 and VEGFR-2 in rat fetuses with CDH induced by nitrofen. Fetuses from pregnant Sprague-Dawley rats (term=22 days) were divided in eight groups: 1) external control, 2) placebo oil nitrofen, 3) placebo oil retinoic acid, 4) treated with retinoic acid, 5) exposed to nitrofen without CDH, 6) exposed to nitrofen with CDH, 7) exposed to nitrofen without CDH and treated with retinoic acid, 8) exposed to nitrofen with CDH and treated with retinoic acid. Nitrofen (2,4- dichloro-4'-nitrodiphenyl ether) was administered by gavage (100 mg) at 9,5 days of gestation. Retinoic acid was administered intraperitoneally on days 18.5, 19.5 and 20.5 of gestation (5 mg/kg), harvest was performed at 21.5 days (term =22 days). Each fetal subgroup was composed of 25 fetuses. The morphologic variables studied were: body weight, total lung weight, left lung weight, and total lung weight to body weight ratio. Pulmonary morphometry was studied by measuring the mean linear intercept and its components: internal diameter of airspaces and mean transection length / airspace. Vascular morphometry was studied by measuring the external diameter, internal diameter and proportionate thickness of the medial muscular layer of pulmonary resistance arterioles. Immunohistochemistry and Western blotting analysis were used to assess VEGF, VEGFR-1 and VEGFR-2 expression. Data was analyzed using ANOVA with Tukey's post-test and immunohistochemistry was studied semiquantitatively using Kruskal-Wallis test with Dunn's post-test. The frequency of CDH was 40%. The morphological variables showed reduction in the nitrofen group with and without CDH, which were more pronounced in the latter (p<0.05). Retinoic acid did not affect fetal morphology. There was no difference in pulmonary morphometry among groups. Fetuses with CDH had increased proportionate thickness of the medial muscular layer of pulmonary arterioles, while treatment with retinoic acid reduced this variable in fetuses with CDH (p<0.001). Fetuses with CDH had reduced VEGF, VEGFR1 and VEGFR2 expression, while retinoic acid treatment restored expression VEGF and VEGFR1. VEGF signaling disruption may be associated with pulmonary hypertension in CDH. Retinoic acid may provide a pathway for acting on pulmonary hypertension by reducing medial thickness of pulmonary arterioles and restoring expression of VEGF and its receptors / Doutorado / Cirurgia / Doutor em Ciências da Cirurgia

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