Memoria para optar el título de Bioquímico / La plasticidad homeostática mantiene la actividad sináptica y neuronal en rangos fisiológicos. En cultivos neuronales primarios, estos cambios compensatorios se inducen por perturbaciones prolongadas (48 horas) de la actividad neuronal utilizando fármacos. Así, al incubar cultivos con Bicuculina, un inhibidor de la neurotransmisión inhibidora (GABAérgica), aumenta la actividad neuronal. Los cambios compensatorios incluyen inhibición de la neurotransmisión excitadora, que está mediada por el neurotransmisor L-glutamato. En las sinapsis glutamatérgicas, los receptores post-sinápticos son principalmente canales iónicos que conducen cationes y existen subtipos de ellos basados en su perfil farmacológico diferencial. Así, el receptor tipo NMDA conduce sodio, potasio y calcio. Se ha propuesto que este receptor puede ser inhibido de manera homeostática por óxido nítrico (NO) frente a períodos de actividad aumentada, induciendo neuroprotección. NO modifica la actividad del receptor NMDA a través de S-nitrosilación de residuos de cisteína relevantes. Sin embargo, también se ha reportado que NO es tóxico. En el hipocampo, la sobre-estimulación del receptor NMDA activa a la óxido nítrico sintasa, que es calcio-dependiente, síntesis de NO y muerte neuronal por excitotoxicidad. También se sabe que diversas zonas cerebrales son diferencialmente sensibles a la excitotoxicidad, siendo el hipocampo una de las zonas más vulnerables. Para dilucidar los efectos controversiales del NO en nuestro laboratorio se realizaron ensayos de viabilidad celular en cultivos primarios de neuronas incubados con NMDA. Se usaron tanto cultivos primarios hipocampales como corticales, en los cuales se indujeron aumentos de actividad prolongadas por incubaciones por 48 horas con bicuculina. Después de un insulto excitotóxico con NMDA, se encontró que las neuronas corticales son más resistentes al daño excitotóxico comparado con neuronas hipocampales, en que la sobrevida celular alcanzó al 72,93 ± 4,75 y 71,17 ± 2,81% en cultivos control e incubados con bicuculina. La mayor sobrevida de cultivos corticales depende de NO y la neurotrofina BDNF y su receptor TrkB. En cambio, en neuronas hipocampales, se confirmó la toxicidad de NO y la presencia de BDNF no tuvo efecto sobre la viabilidad. Basados en estos hallazgos, la hipótesis de esta memoria es la siguiente: BDNF, a través de su receptor TrkB, induce síntesis de NO lo que lleva a modulación homeostática del receptor de NMDA en neuronas corticales pero no hipocampales. Esta vía no depende de fosforilación del receptor TrkB en el residuo Y515. Se encontró que BDNF es capaz de inducir síntesis de NO en neuronas corticales, pero no en hipocampales. Además, NO inhibe los influjos de calcio mediadas por el receptor de NMDA en neuronas corticales, pero no hipocampales. Esta vía neuroprotectora no pudo ser detectada en células hipocampales, en la cual el NO fue sintetizado principalmente en respuesta a estimulación NMDA, lo que no inhibió los influjos de calcio. Este estudio muestra que BDNF tiene un papel neuroprotector frente a un insulto excitotóxico en neuronas corticales pero no hipocampales, efecto que está mediado por NO. Por lo tanto, efectos biológicos opuestos del NO dependen de la vía de señalización implicada en su síntesis. Es posible que este mecanismo neuroprotector pueda ser potenciado en regiones cerebrales vulnerables a insultos excitotóxicos asociados a patologías como la epilepsia, isquemia y accidentes vasculares

Submitted by Lucas Moreira Silva null (lucas_silvamg@hotmail.com) on 2018-09-11T11:36:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Mestrado LUCAS MOREIRA SILVA.pdf: 1668807 bytes, checksum: 0e91732240a421d8109ffd07d2bda313 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Carolina Gonçalves Bet null (abet@iq.unesp.br) on 2018-09-13T13:49:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_lm_me_araiq_int.pdf: 1649414 bytes, checksum: ad9e66c28797edd0c19dcbe90b8e00a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-13T13:49:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_lm_me_araiq_int.pdf: 1649414 bytes, checksum: ad9e66c28797edd0c19dcbe90b8e00a3 (MD5) Previous issue date: 2018-08-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O desenvolvimento de métodos analíticos com maior seletividade e sensibilidade tem ampla importância para a determinação de diferentes compostos químicos. O emprego de polímeros molecularmente impressos, do inglês “Molecularly Imprinted Polymers” (MIP), que são obtidos por polimerização na presença de uma molécula molde (template) a ser impressa, de tal forma que um esqueleto polimérico é formado ao redor do. No caso deste trabalho, o template utilizado foi a ciprofloxacina, antibiótico amplamente empregado no tratamento de doenças de seres humanos e animais. Desta maneira foi realizado a síntese das nanopartículas magnéticas de óxido de ferro, pelo método de co-precipitação, estas foram recobertas com MIP em sua superfície, formando assim um material híbrido do tipo Core-Shell. Foram realizadas duas sínteses distintas, sendo um primeiro MIP utilizando apenas o ácido acrílico como monômero funcional (Mag-MIP1), e um segundo MIP tendo em sua estrutura o ácido acrílico e o 1-vinilimidazol como monômeros funcionais (Mag-MIP2). Os materiais foram caracterizados fisicamente por diferentes técnicas. Foram realizados experimentos de otimização do Mag-MIP1 e Mag-MIP2, foi observado que o Mag-MIP1 exibiu um tempo ótimo de interação de 120 min em meio aquoso, enquanto que o Mag-MIP2 apresentou um tempo ótimo de interação de 30 min em meio de água/metanol (70:30) v/v. No que se refere ao parâmetro de seletividade, o Mag-MIP2 exibiu um valor de seletividade (S) ≥ 2, enquanto que o Mag-MIP1 apresentou valores de S ≥ 1. Os materiais desenvolvidos foram aplicados como fase dispersiva extratora em amostras de leite bovino do tipo integral e do tipo desnatado. Sob as mesmas condições experimentais, foi avaliada a capacidade de extração da ciprofloxacina adsorvida nos materiais sintetizados. O Mag-MIP1 apresentou um percentual de recuperação médio de 85% para amostras de leite bovino do tipo integral e 90% para amostras de leite bovino do tipo desnatado. O Mag-MIP2 exibiu o valor de 80% para amostras de leite bovino do tipo integral e 55% para amostras de leite bovino do tipo desnatado, sugerindo que neste caso precisa-se ainda otimizar a dessorção do analito para obtenção de resultados satisfatórios para o Mag-MIP2. Contudo, os Mag-MIP desenvolvidos mostraram-se promissores para serem utilizados como fase adsorvente em sistemas de extração em fase sólida e, evidencia que o uso de dois monômeros funcionais poderá melhorar a eficiência dos polímeros molecularmente impressos, uma vez que mostrou maior seletividade e menor tempo de interação para a adsorção de ciprofloxacina, contribuindo para o avanço no grupo e na área de pesquisa. / The development of analytical methods with greater selectivity and sensitivity is of great importance for the determination of different chemical compounds. The use of molecularly imprinted polymers (Molecularly Imprinted Polymers) (MIP), which are obtained by polymerization in the presence of a template molecule to be printed, such that a polymeric backbone is formed around the polymer. In the case of this w ork, the template used was ciprofloxacin, an antibiotic widely used in the treatment of diseases of humans and animals. In this way the synthesis of iron oxide magnetic nanoparticles was performed by the co - precipitation method, these were covered with MIP on their surface, forming a hybrid material of the Core - Shell type. Two distinct syntheses were performed, a first MIP using only acrylic acid as a functional monomer (Mag - MIP1), and a second MIP having acrylic acid and 1 - vinylimidazole as functional mono mers (Mag - MIP2). The materials were physically characterized by different techniques. Mag - MIP1 and Mag - MIP2 optimization experiments were performed, Mag - MIP1 showed an optimal interaction time of 120 min in aqueous medium, while Mag - MIP2 showed an optimal interaction time of 30 min in water / methanol (70:30) v / v medium. As for the selectivity parameter, the Mag - MIP2 exhibited a selectivity value (S) ≥ 2, while the Mag - MIP1 presented values of S ≥ 1 . The materials developed were applied as extractive phase dispersion in samples of bovine milk of the whole type and skimmed - mi lk type. Under the same experimental conditions, the extraction capacity of ciprofloxacin adsorbed on the synthesized materials was evaluated. Mag - MIP1 presented an average recovery percentage of 85% for bovine whole milk samples and 90% for skim milk type samples. Mag - MIP2 showed the value of 80% for bovine milk samples of the integral type and 55% for samples of bovine milk of the skimmed type, suggesting that in this case it is still necessary to optimize the desorption of the analyte to obtain satisfact ory results for the Mag - MIP2. However, the developed Mag - MIPs have shown to be promising to be used as an adsorbent phase in solid phase extraction systems, and it shows that the use of two functional monomers may improve the efficiency of the molecularly printed polymers since it showed greater selectivity and lower interaction time for adsorption of ciprofloxacin, contributing to the advancement in the group and in the research area.

Este estudo foi realizado em ratos machos Wistar, nos quais foram investigados os efeitos do flavonóide quercetina sobre a hipertensão portal, o dano oxidativo, a atividade das enzimas antioxidantes, a produção de óxido nítrico avaliada por seus metabólitos: nitratos(NO3) e nitritos (NO2) em fígado e estômago. Analisou-se ainda a histologia do fígado e do estômago através das técnicas de hematoxilina/eosina e picrosirius. Foram estabelecidos 4 grupos experimentais: SO (sham-operated)-controle, no qual foi simulada a ligadura parcial de veia porta (LPVP); SO administrado com quercetina (Q); grupo com ligadura parcial de veia porta (LPVP) e o grupo LPVP Q que foi ligado e recebe quercetina. A Q foi administrada por via intraperitoneal (i.p.) na dose de 50 mg/Kg de peso corporal, 7 dias após a ligadura até ao 14º dia pós-operatório. No 15º dia, foi aferida a pressão portal (mmHg) constatando-se aumento significativo nos LPVP e diminuição significativa nos LPVP Q. Através da análise histológica dos tecidos hepáticos e do estômago, foi observado que, no estômago, os animais LPVP apresentaram sinais de edema e vasodilatação; enquanto que os LPVP Q mantiveram aspecto normal. Os resultados da lipoperoxidação (LPO), avaliada pelas substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e quimiluminescência (QL), demonstraram redução próximo de 40% do grupo LPVP Q comparado com o grupo LPVP, sendo seus valores semelhantes aos valores dos SO, tanto no fígado como no estômago. Quanto às enzimas antioxidantes, foi observado, no estômago, aumento na atividade da Catalase (CAT) no grupo LPVP, enquanto que, no fígado, a atividade da SOD e CAT estão aumentadas no grupo LPVP Q. Na avaliação dos metabólitos do NO, observou-se que a relação nitratos e nitritos no estômago foi mais elevada nos LPVP, e que a quercetina diminuiu essa relação, apresentando valores semelhantes aos do grupo SO. No fígado, essa relação aumentou no grupo SO, sendo indiferenciada nos LPVP e LPVP Q. Esses resultados apontam que a Quercetina pode diminuir a pressão portal e, indiretamente, a circulação hiperdinâmica característica desse modelo experimental, reduzindo o dano oxidativo encontrado nos animais do grupo LPVP tanto no estômago como no fígado, incrementando a atividade das enzimas antioxidantes, protegendo-os. Assim, a partir dessas constatações, pode-se sugerir um efeito benéfico da quercetina neste protocolo experimental.

Em 20 amostras de horizontes B latossólicos, uma de B Plíntico, uma de B incipiente e uma de saprolito, foram avaliados dois procedimentos de extração de óxidos de ferro pedogênicos por ditionito-citrato-bicarbonato de sódio. O procedimento DCB80, com quatro extrações sucessivas a 80oC, extraiu aproximadamente 90% do Fed na primeira extração, sendo mais efetivo que o DCB20, em uma única extração a temperatura ambiente, que teve sua eficiência reduzida com o aumento da substituição por Al3+ na goethita. A substituição por Al3+ na goethita determinada por DCB80 superestimou os valores em relação aos estimados por DRX conforme aumentaram as extrações. Em amostras hematíticas, esta estimativa foi prejudicada pela presença de maghemita que dissolveu juntamente com a hematita. As amostras também foram submetidas a dissoluções seletivas por DCB20 em intervalos de tempo entre 5 e 3840 minutos. A segmentação das curvas de solubilização do ferro pelo tempo de dissolução das amostras demonstrou que populações de goethita de solos poligenéticos são heterogêneas quanto a características como substituição por Al3+ e cristalinidade, que combinadas condicionam a estabilidade da goethita à dissolução por redução. Populações de hematitas de solos poligenéticos caracterizaram-se pela homogeneidade dos cristais, semelhantemente a populações de goethitas oriundas de ambientes pedogênicos jovens. A hematita apresentou uma menor resistência à dissolução por redução em relação à goethita, exceto quando a última combinou baixa substituição por Al3+ e baixa cristalinidade. O fracionamento de populações heterogêneas de goethita pode ampliar a utilização deste óxido como mineral indicador ambiental e de processos pedogenéticos em solos poligenéticos, bem como possibilitar um melhor entendimento do comportamento químico e físico desses solos.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T06:45:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 295117.pdf: 6143193 bytes, checksum: 2cd1ac2bad94741ceaa31db1df9817b5 (MD5) / Este estudo teve como objetivo esclarecer o fenômeno de lascamento em próteses a base de zircônia através de testes mecânicos, evidências fractográficas e da mensuração dos estresses residuais na camada de porcelana. Sessenta e quatro copings de zicônia foram fabricados (Cerec3 Inlab, Sirona), sinterizados e jateados com partículas de alumina de 250 µm ou não jateados (n=32). Os copings foram estratificados com duas porcelanas com coeficientes de expansão térmica diferentes (VM9, VITA, CET: avm9=9.1 ppm/°C; LAVA Ceram, 3M ESPE, CET: alava=10.2 ppm/°C) de modo a criar uma incompatibilidade térmica alta ou baixa com a zirconia (YZ Cubes, VITA, CET: azirconia=10.5 ppm/°C) respectivamente. Metade das coroas de cada grupo foram submetidas ao teste de compressão ou ao teste de fadiga cíclica em um simulador de mastigação até a fratura (n=8). Os dados foram tratados seguindo uma distribuição Weibull, onde os parâmetros m, s0 e s5% foram calculados. As superfícies fraturadas das coroas foram avaliadas fractograficamente para determinar padrões discriminativos de estresses residuais dentro das porcelanas e o efeito do jateamento na união entre zircônia e porcelana. Doze coroas adicionais foram fabricadas com as duas porcelanas e resfriadas seguindo um protocolo de resfriamento rápido ou lento (n=3). Fatias de ~1.0 mm de espessura foram cortadas longitudinalmente a partir da região central das coroas (de palatal para vestibular), polidas e transiluminadas por luz polarizada para a mensuração do retardo entre as ondas e obtenção da magnitude e distribuição espacial dos estresses residuais dentro da camada de porcelana. O teste de compressão não indicou diferenças entre os grupos. O teste de fadiga conseguiu discriminar coroas com estresses residuais diferentes, revelando uma resistência característica significativamente maior para coroas estratificadas com Lava Ceram. Uma forte tendência de aumento dos parametros Weibull também foram observados para as coroas que tiveram seus copings jateados. Fraturas do tipo lascamento, similares às encontradas clinicamente, foram observadas apenas no teste de fadiga. As superfícies fraturadas revelaram comportamentos de trinca distintos entre as porcelanas, como consequência de diferentes estados de estresse. A mensuração dos estresses por fotoelastividade obteve sucesso em detectar diferenças de anisotropia ótica entre os grupos. As coroas estratificadas com VM9 apresentaram maior estresse residual que as coroas estratificadas com Lava Ceram, concentrados próximo à interface. A taxa de resfriamento mostrou ter pouca influência na magnitude e distribuição dos estresses. Resultados de fadiga, da análise fractográfica e da birrefringência apresentaram forte correlação. / In the swine production, the high nutrient load, coupled with the large volume of wastewater, are the biggest challenges of management activity. Generally, the lack of arable land for disposal of effluent on the ground requires the use of treatment techniques capable of removing high loads of nutrients. There are numerous alternatives for nitrogen removal from wastewater, including anammox process preceded by a system of partial nitritation. The aim of this study was to optimize the operation of anammox reactors with different configurations and perform cargo progression through different operating conditions. Three reactors, called A, B and C, were inoculated and started, in upward flow, temperature controlled at 35 ° C, DO concentration below 0.2 mg L-1, with suspended biomass and used as inoculum biomass with stable anammox activity from a pilot reactor at different concentrations. The starting time of the reactor, inoculated with 1% biomass (v / v) was approximately 100 days, and the reactors B and C, inoculated with 30% biomass (v / v) was approximately 60 days, showing it is possible to start the reactors with low inoculum concentration and higher concentrations significantly reduce the start up time of the system. To prove the veracity of the anammox process in the reactors was monitored the behavior of nitrogen forms, we calculated the stoichiometric coefficients (which were close to those found in literature) and was carried of the FISH analysis with specific probe (AMX 368) (with results positive). Through the kinetic study was determined the specific consumption rates of ammonium and nitrite and nitrate production, which were µN-NH3=47,94mgN-NH3.gSSV-1.d-1; µN-NO2 = 59,39 mgN-NO2 -.gSSV-1.d-1 e µN-NO3 = 14,75 mgN-NO3 -.gSSV-1.d-1. the process was more sensitive to the increased nitrogen concentration that reductions in HRT, the maximum load removed by the reactor A, which operated with increasing concentration was 1.53 KgN.m-3.d-1, to 331 days of operation, being fed 560 mgN.L-1.d-1 and HRT of 6h, and in the reactor C, which operated with reduced HRT was 16.24 KgN.m-3.d-1, to 193 days of operation being fed 200 mgN.L-1.d-1 and HRT of 0.2 h.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento. Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T18:08:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327458.pdf: 1187846 bytes, checksum: bb77d7020fe2410f5c0f4f5d63d46b99 (MD5) Previous issue date: 2014 / O glioblastoma multiforme é o tumor primário do sistema nervoso central mais frequente em adultos. No Brasil, segundo dados do INCA, a incidência de tumores deste tipo foi de 6,96/100 000 habitantes em 2005. A mediana de sobrevida é, geralmente, menor que um ano desde o diagnóstico, e a maioria dos pacientes (90% a 95%) evolui para óbito em dois anos. Com o intuito de procurar novas alternativas para o tratamento dessas neoplasias, diversos compostos têm sido estudados, entre eles, as chalconas. Chalconas são compostos fenólicos que fazem parte da via de biossintese de flavonóides em plantas e apresentam uma estrutura química simples e versátil. O objeto de estudo deste trabalho são três chalconas sintetizadas a partir da estrutura química comum da familia das chalconas, são elas A23, C31 e J11. Usando células de glioblastoma multiforme da linhagem comercial A172 e proveniente de ressecção cirúrgica, GBM1, essas substâncias foram testadas em diferentes ensaios para elucidação do seu mecanismo de funcionamento. Inicialmente foram realizados testes de viabilidade celular por MTT para determinar-se a concentração inibitória de 50% da ação (IC50) de cada uma das chalconas. Em sequência, esta concentração foi utilizada para observar e quantificar o tipo de morte, se apoptótica ou necrótica, causado. Tentando elucidar a maneira com que esses compostos causaram a morte ou a redução de viabilidade observadas, diferentes ensaios foram realizados. Primeiramente para se medir os níveis de espécies reativas de oxigênio e de oxido nitrico, foram utilizadas as sondas fluorescentes DCFDA e DAF-2, respectivamente. Além destes resultados, foi mensurada também a distribuição das células no ciclo celular. Com os dados obtidos foi possivel traçar um perfil aproximado dos mecanismos de ação de cada chalcona. Brevemente, A23 revelou-se um eficiente antioxidante e teve a maior taxa de indução de apoptose e necrose dentre as chalconas estudadas por uma via desconhecida. Contrariamente, C31 apresentou um efeito oxidativo e de aumento dos níveis de ON muito relevante, sendo por estas vias, sua provável ação de indução de apotose e consequente redução de viabilidade. Por último tem-se que J11, promoveu aumento nos níveis de apoptose apenas em GBM1 e teve uma ação antioxidativa em ambas as células testadas. Seu efeito redutor de viabilidade provavelmente se deve a indução da produção de altos níveis de ON e pelo seu efeito citostático, observado na análise do ciclo celular. Com o exposto neste estudo, foi possivel desvendar a ação de duas das três chalconas testadas e direcionar a pesquisa futura para as vias analisadas.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:35:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 330195.pdf: 1831812 bytes, checksum: f6a68fbb57eacf59ff3ac3dff0a9e6d9 (MD5) Previous issue date: 2014 / Abstract : Introdução: Nas últimas décadas, descobriu-se que o adipócito era capaz de secretar adipocinas e citocinas com funções autócrinas, parácrinas e sistêmicas, que influenciavam de maneira importante, todo o metabolismo dos organismos vivos. Dentre os fatores associados aos distúrbios da biologia do adipócito, podemos destacar o estresse oxidativo, intimamente relacionado à formação dos produtos finais de glicação avançada (AGEs). Esparsos trabalhos na literatura têm procurado elucidar o papel da via do óxido nítrico (NO.) na fisiologia do tecido adiposo. Essa via, por meio do aumento das concentrações de guanosina 3'5' monofosfato cíclico (GMPc), promove efeitos positivos na biologia do adipócito, e consequentemente maior equilíbrio no balanço energético e metabolismo sistêmicos. Outra maneira de incrementar as concentrações de GMPc é por meio da administração de inibidores da fosfodiesterase 5, medicamentos que no futuro talvez sejam úteis nos distúrbios do tecido adiposo, como a obesidade, e suas consequências. Objetivos: Identificar o impacto de uma dieta hipercalórica e hiperlipídica (dieta de cafeteria) sobre a variação do peso corporal, a ingestão alimentar, a resistência à ação da insulina, as concentrações séricas de adiponectina, bem como nas concentrações de fator de necrose tumoral a (TNFa), interleucina 6 (IL-6), NO. e AGEs no tecido adiposo visceral. Analisar o efeito do tadalafil na intensidade da resistência à insulina, nas concentrações séricas de adiponectina, assim como nas concentrações de TNFa, IL-6 e AGEs no tecido adiposo visceral. Métodos: Estudo analítico experimental controlado e com intervenção, envolvendo um total de 72 ratos machos Wistar, distribuídos em 06 subgrupos de 12 animais: subgrupo ração salina ? SGRS, recebeu ração e solução salina; subgrupo ração tadalafil - SGRT, recebeu ração e tadalafil; subgrupo ração magro - SGRM, recebeu ração e solução salina; subgrupo cafeteria salina - SGCS, recebeu dieta de cafeteria e solução salina; subgrupo cafeteria tadalafil - SGCT, recebeu dieta de cafeteria e tadalafil e subgrupo cafeteria magro - SGCM, recebeu dieta de cafeteria e solução salina. O estudo teve a duração de 10 semanas, e o peso dos animais e a ingestão alimentar foram registrados semanalmente. Foram mensuradas as concentrações séricas de insulina e adiponectina, bem como as concentrações de TNFa, IL-6, nitrito (metabólito do NO.) e compostos de Maillard (equivalente aos AGEs) no tecido adiposo, sendo que todo o material foi coletado no momento do sacrifício dos animais. Na análise estatística foram empregados os testes ANOVA one way com correção de Tukey,ANOVA two way e teste t pareado. Resultados: Foi observado um aumento significativo do peso corporal ao longo do estudo em todos os subgrupos. A média de peso final aos 60 dias foi superior nos animais alimentados com dieta de cafeteria. A ingestão alimentar em gramas foi maior nos animais alimentados com ração. Os animais alimentados com dieta de cafeteria apresentavam uma maior expansão do tecido adiposo. As médias do modelo de avaliação da homeostase para resistência à insulina (HOMA-IR) entre os subgrupos no final do acompanhamento não foram diferentes. A proporção da adiponectina sérica em relação ao tecido adiposo total foi maior nos animais que receberam dieta balanceada, e as concentrações de IL-6 foram maiores nos animais que receberam dieta de cafeteria. A concentração de nitrito foi maior nos animais submetidos à dieta balanceada. As concentrações médias de compostos de Maillard foram maiores nos animais submetidos à dieta de cafeteria e nos animais de maior peso. Nos animais submetidos à dieta de cafeteria e tadalafil a concentração de compostos de Maillard foi menor. Conclusão: A dieta de cafeteria por 60 dias, apesar de mais sacietógena, levou a uma média de peso ponderal e tecido adiposo visceral superiores nos animais a ela submetidos sem, no entanto, induzir a um aumento expressivo da resistência à ação da insulina. Apesar da expansão do tecido adiposo total, a dieta de cafeteria não foi capaz de aumentar proporcionalmente as concentrações de adiponectina, sugerindo a interferência de outros fatores na fisiologia desta adipocina. O aumento das concentrações de IL-6, no tecido adiposo visceral dos animais alimentados com dieta de cafeteria, indica um provável incremento no processo inflamatório local. A diminuição dos níveis de nitrito no tecido adiposo dos animais submetidos à dieta de cafeteria sugere um prejuízo à via do óxido nítrico, enquanto o aumento das concentrações de compostos de Maillard, e, por consequência de AGEs, uma intensificação do processo oxidativo. Outro fator relacionado aos compostos de Maillard foi o peso, já que os animais de menor peso apresentavam também uma concentração menor destes compostos. O uso do tadalafil não foi eficaz na redução da resistência à insulina, no aumento das concentrações séricas de adiponectina e na diminuição das concentrações de citocinas inflamatórias no tecido adiposo. No entanto, o tadalafil mostrou-se capaz de reduzir a concentração de AGEs no tecido adiposo de animais submetidos à dieta de cafeteria, sugerindo um possível efeito favorável sobre o estresse oxidativo.<br> / Abstract : Introduction: In recent decades, new discoveries demonstrated that the adipocytes were capable of secreting adipokines and cytokines with autocrine, paracrine and systemic functions, which influenced in important ways throughout the metabolism of living organisms. Among the factors associated with adipocyte biology disorders we can highlight oxidative stress, closely related to the advanced glycation end products (AGEs) formation. Few studies have sought to elucidate the role of nitric oxide (NO.) in the adipose tissue physiology. This pathway increases the titles of guanosine 3'5' cyclic monophosphate (cGMP), ultimately bringing positive effects on adipocyte biology, and consequently greater balance in energy control and systemic metabolism. Another way to increase cGMP levels is through the administration of phosphodiesterase-5 (PDE5) inhibitors, drugs that may be useful in the future in adipose tissue disorders, such as obesity and its consequences. Objectives: To identify the impact of a hypercaloric and hyperlipidic diet (cafeteria diet) on body weight variation, food intake, insulin resistance, serum adiponectin levels and visceral adipose tissue levels of tumor necrosis factor a (TNFa), interleukin 6 (IL-6), NO., and AGEs. To analyze the consequences of the administration of tadalafil in the intensity of insulin resistance, serum adiponectin levels, as well as visceral adipose tissue levels of TNFa, IL-6, and AGEs. Methods: Analytical controlled experimental intervention study involving a total of 72 male Wistar rats, divided into 06 subgroups of 12 animals: chow-saline subgroup (CSG) received chow and saline; chow-tadalafil subgroup (CTG) received chow and tadalafil; chow lean subgroup (CLG) received chow and saline; cafeteria diet-saline subgroup (CafSG) received cafeteria diet and saline; cafeteria diet-tadalafil subgroup (CafTG) received cafeteria diet and tadalafil; and cafeteria diet-saline lean subgroup (CafLG) received cafeteria diet and saline. The study lasted 10 weeks and weight gain and food intake were recorded weekly. Insulin and adiponectin levels were detected in serum. The concentrations of TNFa, IL-6, nitrite (NO. metabolite) and Maillard compounds (AGEs equivalent) were detected in adipose tissue. All the samples for testing were collected at the time of animals' sacrifice. In statistical analysis, one-way ANOVA test with Tukey correction, two-way ANOVA, and paired t test were applied. Results: A significant increase of body weight throughout the study was observed in all subgroups. The mean final weight at 60 days was higher in animals fedcafeteria diet. Food intake in grams was higher in animals fed with chow at many times of the study. Animals fed the cafeteria diet had greater expansion of epididymal and retroperitoneal adipose tissue. The mean homeostasis model assessment for insulin resistance (HOMA -IR) between subgroups at the end of follow-up was not different. The serum adiponectin levels in relation to total adipose tissue were higher in animals fed a balanced diet, and the IL-6 levels were higher in animals fed cafeteria diet. The nitrite concentration was higher in animals subjected to balanced diet. Mean levels of Maillard compounds were higher in animals subjected to the cafeteria diet, and in the animals with the highest weight. In animals submitted to the cafeteria diet and tadalafil, concentration of Maillard compounds was lower. Conclusion: Cafeteria diet for 60 days, although more satiating, led to a higher mean total weight and visceral adipose tissue in animals that were submitted to it, without, however, resulting in a significant increase in insulin resistance. Despite the total adipose tissue expansion, cafeteria diet was not able to proportionally increase adiponectin levels, suggesting the influence of other factors in this adipokine production. Increased levels of visceral adipose tissue IL-6 of animals fed cafeteria diet indicate a probable increase in the local inflammatory process. The decreased adipose tissue nitrite levels of animals subjected to the cafeteria diet suggest injury to the nitric oxide pathway, while increased Maillard compounds levels, and consequently of AGEs, an intensification of the oxidative process. Another factor related to Maillard compounds was the weight of the animals, as leaner animals showed lower concentration of these compounds. The use of tadalafil was not effective in reducing insulin resistance, increasing adiponectin levels, and decreasing inflammatory cytokines in adipose tissue. However tadalafil was capable of reducing AGEs levels in the adipose tissue of animals fed cafeteria diet, suggesting a possible favorable effect on oxidative stress.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:52:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327305.pdf: 1442510 bytes, checksum: 5fde4eea9cfd5385aece2ec737690160 (MD5) Previous issue date: 2014 / O choque séptico é um potente estímulo para a ativação de vários sistemas orgânicos e dentre eles, o sistema nervoso simpático (SNS) que, além dos efeitos nos vasos, também tem impacto no coração. Altas concentrações de adrenalina e noradrenalina são encontradas na circulação de pacientes com endotoxemia e sepse, sendo estes níveis diretamente relacionados com aumento da mortalidade dos indivíduos sépticos. Embora seja conhecido que a ativação simpática exacerbada é deletéria para a homeostase do organismo, ainda não é bem compreendido qual o papel da hiperativação simpática durante um quadro de choque séptico/sepse. Portanto, no presente trabalho nós estudamos o papel da transmissão ganglionar autonômica no que diz respeito à hiporeatividade a-adrenérgica do choque séptico, e, adicionalmente, examinamos as consequências do bloqueio ganglionar precoce na expressão de receptores a1D-adrenérgicos na aorta torácica de ratos, bem como em parâmetros inflamatórios e bioquímicos. Para isso, o choque séptico foi induzido por uma ligadura e perfuração do ceco (modelo de CLP) em ratos Wistar fêmeas. Uma hora após o procedimento de CLP, os animais receberam hexametônio (um bloqueador ganglionar), pentolínio (um bloqueador ganglionar mais seletivo para o gânglio simpático) ou salina (PBS). Seis e 24 h após a cirurgia de indução do choque séptico a resposta cardiovascular a agonistas vasoconstritores foi avaliada. Adicionalmente, 24 h após o procedimento de CLP, parâmetros inflamatórios e bioquímicos, hemograma, expressão de receptores a1D-adrenérgicos em aorta e curva de mortalidade foram avaliados. O choque séptico aumentou os níveis plasmáticos de nitrato e nitrito (NOx), ureia, creatinina, transaminases hepáticas (TGO e TGP), citocinas pró-inflamatórias (TNF-a e IL-1ß), bem como promoveu leucopenia e trombocitopenia. Além disso, os animais em choque séptico estavam hipotensos e hiporreativos à noradrenalina e fenilefrina. A hiporeatividade aos agentes vasoconstritores foi devida, pelo menos em parte, à redução na densidade dos receptores a1D-adrenérgicos na aorta da ordem de 60%. Finalmente, o choque séptico resultou em elevada mortalidade. O tratamento precoce com pentolínio reduziu os níveis plasmáticos de NOx e ureia, preveniu a hiporeatividade aos agonistas vasoconstritores, preservou a densidade dos receptores a1D-adrenérgicos na aorta e aumentou a sobrevida dos animais. Apesar do tratamento precoce com o12hexametônio ter sido capaz de prevenir a hiporeatividade à noradrenalina e fenilefrina, sua administração não resultou em nenhum efeito benéfico adicional. Assim, nossos resultados mostram claramente que a interferência com a transmissão ganglionar e consequente redução da hiperativação simpática, tem importante impacto no resgate da reatividade vascular à agonistas vasoconstritores e na redução da letalidade do choque séptico induzido por ligação e perfuração do ceco em ratos. Esses efeitos benéficos estão relacionados, em parte, com a manutenção da densidade dos receptores a1D-adrenérgicos nos vasos. Esses resultados podem levar à uma nova estratégia terapêutica no auxílio do tratamento do choque séptico/sepse.<br> / Abstract : Septic shock is a potent stimulus for the activation of several organic systems, including the sympathetic nervous system (SNS), which besides its effects on vessels, directly impacts on the heart. High circulating epinephrine and norepinephrine concentrations were reported during endotoxaemia and septic shock, being directly associated to high mortality in septic patients. Although it is known that sympathetic overstimulation is deleterious to homeostasis of the organism, the function of sympathetic hyperactivation during septic shock is poorly understood. Therefore, in this work we studied the role of autonomic ganglionic transmission with respect to a-adrenergic hyporeactivity in septic shock, and, additionally, examined the consequences of early ganglionic blockade on the density of a1D-adrenergic receptors in rat thoracic aorta, as well as inflammatory and biochemical parameters. For this, septic shock was induced by cecal ligation and puncture (CLP model) in female Wistar rats. One hour after surgery, animals received hexamethonium (a ganglionic blocker), pentolinium (a ganglionic blocker with a higher selectivity for sympathetic ganglia) or saline (PBS). Six and 24 h after surgery, the cardiovascular responses to adrenergic agonists were evaluated. In addition, 24 h after surgery, inflammatory and biochemical parameters, hemogram, the density of a1D-adrenergic receptors in aorta and survival were also evaluated. Septic shock increased plasma levels of nitrate and nitrite (NOx), urea, creatinine, hepatic transaminases (TGO and TGP), pro-inflammatory cytokines (TNF-a and IL-1ß) and promoted leukopenia and thrombocytopenia in CLP animals. Furthermore, the septic animals were hypotensive and showed hyporeactivity to norepinephrine and phenylephrine. The hyporeactivity to vasoconstrictors agents was due, at least in part, to the reduction of ~60% in a1D-adrenergic receptors density in the aorta. Septic shock also resulted in high mortality. Early treatment with pentolinium reduced plasma levels of NOx and urea, prevented the hyporeactivity to vasoconstrictors agents, preserved the density of a1D-adrenergic receptors in the aorta and increased survival. Notwithstanding the beneficial effect of the early treatment with hexamethonium on the hyporeactivity to noradrenaline and phenylephrine, no additional beneficial effects were observed. Thus, our results clearly show that interference, with the ganglionic transmission with the consequent reduction in sympathetic hyperactivation, has a15profound impact on the recovery of vascular reactivity to vasoconstrictor agonists and in reducing mortality of sepsis-induced by CLP in rats. These beneficial effects are related, in part, with the maintenance of the density of a1D-adrenergic receptors in vessels. These results may lead to a new therapeutic strategy for the treatment of sepsis/septic shock.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-05-30T04:11:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 345801.pdf: 1486291 bytes, checksum: 5347e4d73bdb9a7ad81e16994ea94457 (MD5) Previous issue date: 2016 / Zircônia tradicional apresenta coloração branca e não possui fluorescência, limitando a mimetização da cor natural em próteses dentárias. Procedimentos laboratoriais tais como imersão em líquidos de pigmentação e/ou fluorescente podem ser utilizados para contornar tais limitações. Porém, pouca informação sobre o efeito do uso desses líquidos, assim como do envelhecimento, nas propriedades ópticas da zircônia estão descritos na literatura. Objetivo - Avaliar as diferenças de cor e o grau de fluorescência de zircônia tratada com líquidos de pigmentação e fluorescente previamente e após protocolo de envelhecimento acelerado. Material e métodos - Quarenta espécimes de zircônia tetragonal policristalina (3Y-TZP, Prettau Zirconia, Zirkonzahn, Itália) foram fabricados (12mm diâmetro e 2.0mm espessura). Dez discos não receberam nenhum tratamento (controle); 10 foram tratados com líquido de pigmentação (A2); 10 com líquido fluorescente (fluorescente); e 10 com ambos, líquido de pigmentação e fluorescente (A2 fluorescente). As coordenadas L*a*b* foram obtidas por um espectrofotômetro antes do envelhecimento (T0) e o grau de fluorescência foi medido com um equipamento de medição de fluorescência. Os discos foram submetidos a um protocolo de envelhecimento acelerado durante 1 hora (T1) e 5 horas (T2). Novas mensurações foram feitas após cada tempo de envelhecimento. Os graus de fluorescência foram obtidos em percentagem e analisados com o teste ANOVA a um critério. Diferenças de cor (?E00) foram calculadas por meio da formula de diferenças de cor CIEDE2000, e estatisticamente analisados com ANOVA a um critério, assim como as diferenças em luminosidade (?L?), croma (?C?) e matiz (?H?), que foram analisados estatisticamente com ANOVA multivariável. Comparações múltiplas foram realizadas teste de Tukey (a=0.05). Resultados - Diferenças de cor foram observadas quando discos de 3Y-TZP foram tratados com líquido de pigmentação (?E00=7.91) e fluorescente (?E00=5.81), assim como com ambos os líquidos (?E00=5.52). O envelhecimento acelerado resultou em diferenças de cor no grupo A2 T2 (?E00=6.74), e em ambos os tempos analisados no grupo fluorescente (T1 - ?E00=8.59 e T2 - ?E00=8.47) e no grupo A2 fluorescente (T1 - ?E00=7.78 e T2 - ?E00=8.74), entretanto não influenciou significativamente os graus de fluorescência (Grupo controle: T0=0%, T1=1.94%, T2=1.0%; A2: T0=0%, T1=0.59%, T2=0%;fluorescente: T0=20%, T1=14.51%, T2=13.25%; e A2 fluorescente: T0=3.0%, T1=2.0%, T2=1.0%). Conclusões - Diferenças estatísticas para cor, luminosidade, croma e matiz foram observadas em todos os grupos testados, antes e depois do envelhecimento. Diferenças estatísticas no grau de fluorescência foram observadas somente no grupo fluorescente (p<0.001) e a fluorescência não foi influenciada pelo envelhecimento acelerado (p=0.05).Implicações clínicas ? Conhecimento sobre o uso dos líquidos de pigmentação e fluorescente é necessário para o uso da 3Y-TZP como um material restaurador. Adicionalmente, é necessário compreender o efeito do envelhecimento nas propriedades ópticas da zircônia pigmentada e fluorescente para o seu uso clínico.<br> / Abstract : State of Problem - Traditional zirconia presents an opaque white color and no fluorescence, limiting the color match of dental prostheses. Laboratorial procedures as immersion in colour and fluorescence liquids can be used to contour these limitations. However, little information about the effect of these liquids, as well as of the aging, on the optical properties of zirconia is described in the literature. Purpose - Evaluate the color differences and fluorescence degree of zirconia treated with colour and fluorescence liquids before and after accelerated aging protocol. Material and methods - Forty disk-shaped specimens of zirconia tetragonal polycrystalline (Prettau Zirconia, Zirkonzahn, Italy) were fabricated (12mm diameter and 2.0mm thickness). Ten disks did not receive any treatment (control); 10 were treated with colour liquid (A2); ten with fluorescence liquid (fluorescent); and 10 with both, fluorescent and colour liquid (A2 fluorescent). The L*a*b* coordinates before aging (T0) were obtained with a spectrophotometer and the fluorescence degree with a fluorescence equipment. The disks were subjected to accelerate aging protocol during 1 hour (T1) and 5 hours (T2). Measurements were made before and after each aging time. Color differences (?E00) were calculated by CIEDE2000 color difference formula, and statistically analyzed by one-way ANOVA, as well as lightness (?L?), chroma (?C?) and hue differences (?H?), however, statistically analyzed by multivariate ANOVA. Fluorescence degrees were obtained as percentage and analyzed by one-way ANOVA. Multiple comparisons were performed by Tukey's test (a=0.05). Results - Color differences were observed when 3Y-TZP disks were treated with colour (?E00=7.91) and fluorescent (?E00=5.81) liquid, as well as both liquids combined (?E00=5.52). Accelerated aging resulted in color differences in T2 A2 group (?E00=6.74), and in both times evaluated in fluorescent (T1 - ?E00=8.59 and T2 - ?E00=8.47) and A2 fluorescent group (T1 - ?E00=7.78 and T2 - ?E00=8.74) however does not influenced significantly in fluorescence degrees (Control group: T0=0%, T1=1.94%, T2=1.0%; A2: T0=0%, T1=0.59%, T2=0%; fluorescent: T0=20%, T1=14.51%, T2=13.25%; and A2 fluorescent: T0=3.0%, T1=2.0%, T2=1.0%. Use of fluorescence liquid influenced in fluorescence degree of fluorescent group (T0=20%). Conclusions - Statistical color, lightness, chroma and hue difference were achieved in all tested groups, before and after aging (p<0.001). Fluorescence degrees were statistically different only in fluorescent group (p<0.001) and were not influenced by accelerated aging (p=0.05). Clinical Implications - Knowledge about the use of colour and fluorescence liquids are necessary to use 3Y-TZP as restorative material. Moreover, it is necessary to understand the effect of low degradation on the optical properties of colored and fluorescent zirconia.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-05-31T14:18:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 345802.pdf: 2808706 bytes, checksum: b1c922798dff25394a856877feda3b8c (MD5) Previous issue date: 2017 / Apesar do uso da zircônia em diversas aplicações técnicas e biomédicas, após 20 anos de pesquisa, a possibilidade de este material envelhecer em função, fenômeno conhecido como degradação em baixas temperaturas (DBT), continua sendo um assunto em controvérsia. O objetivo deste estudo "in vitro" foi analisar a influência do envelhecimento no grau de adaptação de coroas bilaminares feitas em Y-TZP (Z-CAD HD, Metoxit AG, Suíça) e recobertas com cerâmica (E-max, Ivoclar Vivadent, Liechtenstein) e coroas monolíticas (Z-CAD HTL, Metoxit AG, Suíça), assim como a influência do agente de cimentação (Rely X U200, 3M Espe, EUA) no grau de adaptação marginal dessas peças cerâmicas. Quarenta e oito corpos de prova foram usinados em aço inoxidável simulando um primeiro pré-molar inferior que receberia uma coroa protética. Os corpos de prova foram divididos aleatoriamente em quatro grupos com 12 espécimes cada e, após, foram confeccionadas as seguintes coroas: (1) coroas bilaminares (infraestrutura em zircônia e cerâmica de cobertura) cimentadas; (2) coroas bilaminares (infraestrutura em zircônia e cerâmica de cobertura) não cimentadas; (3) coroas monolíticas em zircônia não cimentadas; (4) coroas monolíticas em zircônia cimentadas. Em relação ao envelhecimento, todos os grupos foram submetidos a dois tempos diferentes: T1: nenhum tratamento de envelhecimento e armazenamento em ambiente seco e temperatura ambiente. T2: tratamento de envelhecimento artificial em autoclave, sob uma atmosfera úmida a 131°C e pressão de 1,7 bares durante 5 horas. A adaptação marginal foi avaliada pela medida da discrepância marginal absoluta das coroas realizadas, utilizando um microscópio eletrônico de varredura. A difração de raios X foi utilizada para calcular a fração de fase monoclínica e monitorizar a DBT. Tanto as coroas bilaminares como as monolíticas apresentaram discrepâncias marginais verticais semelhantes, entretanto, não foram observadas diferenças significativas na adaptação marginal entre os grupos testados (p= 0,41). Também não foram observadas diferenças na discrepância marginal quanto à presença ou não de agente de cimentação e quando o envelhecimento artificial foi empregado (p= 0,17). A intensidade do pico da fase monoclínica a tetragonal aumentou de 1,2 a 3% para as coroas bilaminares e de 0,8 a 1,6% para as coroas monolíticas. As coroas monolíticas e bilaminares de zircônia confeccionadas mediante tecnologia CAD/CAM apresentaram gaps marginais que estavam dentro de uma faixa aceitável de discrepância marginal. A cimentação não demonstrou ter uma influência significativa no ajuste marginal. A adaptação marginal não foi influenciada pelo envelhecimento, e este não levou a uma transformação significativa da fase tetragonal para a fase monoclínica. Estudos "in vitro" demonstraram que a tecnologia CAD / CAM pode produzir estruturas de zircônia com um ajuste marginal clinicamente aceitável. Com base na ausência de estudos científicos longitudinais, não parece claro a relação entre o ajuste marginal e a consequente degradação do envelhecimento.<br> / Abstract : Despite the use of Yttria Tetragonal Zirconia Polycrystal (3Y-TZP) in several technical and biomedical applications, after over 20 years of research, the possibility that this material can aged in function, a phenomenon known as low temperature degradation (LTD), remains a subject under discussion. The aim of this "in vitro" research was to analyze the influence of aging on the degree of adaptation of Y-TZP based crowns, either monolithic (Z-CAD HTL, Metoxit AG, Tayngen, Switzerland) or ceramic coating (Z-CAD HD, Metoxit AG, Tayngen, Switzerland; E-max, Ivoclar Vivadent) as well as the influence of cementation (Rely X U200, 3M Espe) on the fit of the restorations. Forty-eight standardized dies will be prepared from stainless steel, to receive a ceramic crown. The specimens were randomly divided into 4 groups of 12 specimens each: (1) bilayer crown (zirconium structure with ceramic coating) cemented; (2) bilayer crown (zirconium structure with ceramic coating) without cement; (3) monolithic zirconia crown without cement; (4) cemented monolithic zirconia crown. All groups will be treated as a function of aging, in 2 different times: T1: No aging treatment and stored in a dry place at room temperature; T2: Treatment of artificial aging (hydrothermally), in autoclave, under a humid atmosphere at 131 °C and pressure of 1,7 bar for 5 hours. Marginal adaptation will be evaluated by measuring the absolute marginal discrepancy of the ceramic crowns on the specimens, using a scanning electron microscope. The monoclinic-to-tetragonal (m/t) peak intensity ratio measured by x-ray diffraction was used to calculate the monoclinic phase fraction and monitor LTD. Both zirconia groups showed similar vertical marginal discrepancies, however, no significant differences (p= 0.41) in marginal adaptation were observed among the experimental groups. Moreover, no differences were observed in either group in marginal discrepancies between cementation process neither artificial aging (p= 0.17). The relative XRD peak intensity of the monoclinic to tetragonal phase increased for 1,2 to 3% for bilayer crowns and from 0,8 to 1,6% for monolithic crowns. Monolithic and bilayer CAD /CAM zirconia crowns showed marginal gaps that were within an acceptable range of marginal discrepancy. Cementation was not found to have a statistically significant influence on the marginal fit. Marginal adaptation was not influenced by aging, and this did not lead a significant transformation from tetragonal to monoclinic phase. ?In vitro? studieshave demonstrated that CAD/CAM technology can produce zirconia structures with a clinically acceptable marginal fit. Based on the lack of rigorous scientific longitudinal studies, it seems not clear the relationship between the marginal fit and the resulting degradation of aging.