Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013 / Introdução: Nos ultimos 20 anos tem crescido o numero de estudos tentando explicar a relacao existente entre sistema imunologico e exercicio fisico. Hoje se sabe que o exercicio pode ser imunomodulador, estimulando ou inibindo a resposta imune. Ja a hipoxia tem sido descrita como um potente agente imunossupressor, impondo ao organismo um estresse excessivo. Por isso, esse trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da suplementacao com carboidrato e glutamina sobre parametros imunologicos e o desempenho ao final de exercicio realizado apos duas horas de exposicao a hipoxia. Metodos: Nove voluntarios foram submetidos a tres procedimentos em diferentes dias: (1) em hipoxia sem suplementacao (placebo), (2) em hipoxia com suplementacao de 8% de maltodextrina (200 ml/20 minutos) e (3) em hipoxia depois de seis dias de suplementacao com glutamina (20g/dia) e suplementacao com 8% de maltodextrina (200 ml/20 minutos). Os voluntarios realizaram exercicio a 70% VO2pico. Em repouso, antes e apos o exercicio e apos duas horas de recuperacao foi coletado sangue para avaliacao da funcao de linfocitos e parametros sericos que podem modular a funcao celular, alem de parametros fisiologicos e psicologicos. A analise estatistica foi realizada por uma ANOVA de medidas repetidas, seguida de pos-teste de Tukey com p≤ 0,05. Resultados: A SaO2 apresentou reducao significativa apos duas horas de permanencia em uma camara hipoxia normobarica. A EPO aumentou 300% e 200% no momento pos-exercicio e apos duas horas de recuperacao respectivamente no grupo hipoxia, comparado ao repouso. Enquanto a concentracao plasmatica de IL-6 se elevou no posexercicio, comparado ao repouso e antes do exercicio perdurando apos as duas horas de recuperacao, comparado ao periodo antes do exercicio, no grupo hipoxia. O cortisol nao apresentou diferenca, ja a glicemia foi maior apos o exercicio nos 3 grupos, comparado ao repouso e antes do exercicio. No grupo hipoxia+carboidrato+glutamina a concentracao de glutamina plasmatica foi elevada no pos-exercicio, comparado ao repouso, enquanto a HSP-70 aumentou no pos-exercicio, comparado ao repouso e antes do exercicio, e apos duas horas, comparado ao periodo antes do exercicio, no grupo hipoxia+carboidrato. Nao houve diferenca na producao de IL-2 e IL-6 por linfocitos, porem IL-4 sofreu reducao nos grupos suplementados. Houve aumento da PSE e reducao na FC/PSE e SaO2/PSE nos tres grupos apos os 45 minutos do inicio do exercicio, e essas modificacoes foram atenuadas pelas suplementacoes. Ja o lactato diminuiu ao longo do exercicio no grupo hipoxia. A relacao lactato/PSE e glicose/PSE nao apresentou diferenca, assim como na glicemia. Conclusao: Nesse sentido, o presente estudo observou que as suplementacoes modificaram o balanco Th1/Th2, direcionando para uma resposta imune celular (Th1). Ademais, podemos concluir que o ambiente hipoxico foi capaz de alterar os parametros fisiologicos e psicologicos avaliados, porem com o uso de estrategias nutricionais, a suplementacao com glutamina conseguiu atenuar as alteracoes PSE, mas nao melhorar o desempenho, uma vez que nao houve diferenca no tempo ate a exaustao entre os grupos / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-09-24 / Vários estudos têm demonstrado a relação entre sistema imunológico e hormonal com o exercício físico e poucos estudos têm analisado esta relação em diferentes intensidades de esforço na natação. O objetivo desta pesquisa foi verificar as alterações metabólicas, hormonais e imunológicas antes e depois de um exercício de natação intermitente agudo com sessões diferentes durante o programa de treinamento. Dezessete nadadores do sexo masculino foram analisados em 3 sessões diferentes de treinamento, utilizando intensidades de 90% (potência anaeróbica – Pan), 70% (potência aeróbica – Pae) e 98% (capacidade anaeróbica – CAn) da velocidade máxima do melhor tempo de prova, resultado proveniente da melhor performance de competição. Amostras sanguíneas foram coletadas no pré e imediatamente após o exercício. Foi encontrado aumento significativo no lactato pós-exercício das três sessões de treinamento, na glicose pósexercício nas sessões de Pan e PAe, respectivamente. A glutamina aumentou significativamente no PAe e CAn. Foi observado um aumento nas concentrações de cortisol em PAe e em Pan. Os leucócitos aumentaram significativamente depois das três diferentes sessões. Não foram observadas diferenças significativas na concentração das imunoglobulinas e na contagem diferencial dos linfócitos, neutrófilos e basófilos. Os eosinófilos apresentaram diminuição significativa no pós-exercício de PAe e CAn em relação ao PAn e os monócitos não apresentaram alterações significativas no pósexercício nas três sessões, entretanto entre os tipos de treinamentos ocorreu uma diminuição significativa no PAe. Vários trabalhos revelam evidências das alterações nas concentrações e funções do sistema imune em decorrência do exercício físico. Esta apresentou protocolo de treinamento aplicado nos nadadores são adequados para alterar alguns componentes metabólicos, hormonais e leucocitários. / The effect of physical exercise in immune function has been extensively studied. The intensity and duration of physical exercise have considerable influence in immunologic parameters. However, few studies have compared different exercise intensities in different stages of a physical training program. To this point, we aimed to verify the metabolic, hormonal and immunologic changes before and after acute intermittent swimming exercise following different stages of training program. Seventeen male swimmers were analyzed in three stages of training, using the intensity of the three sessions was 90% (anaerobic potency – ANP), 70% (aerobic potency - AEP) and 98% (anaerobic ability – ANA) of the maximal speed from the best time of the distance, resulted from peak performance in competition. Blood samples were collected pre and immediately after exercise. Lactato increased significantly after the three different stages of training program, glucose post exercise in the ANP and AEP sessions, respectively. Glutamine increased significantly in AEP and ANA. Increased cortisol levels were also observed in AEP and in ANP. Leukocytes increased significantly after the three different sessions. There were no significant differences in lymphocytes, neutrophils e basophils. The eosinophils decreased in AEP and ANA. Monocytes no significant differences after the three different stages of training program, however decreased significantly on AEP. The immunoglobulins did not change of the three exercise patterns of pre and post-exercise. In summary, the protocoll intermittent swimming exercise following different stages of training the alterations capacity metabolic, hormones parameters and leukocytes any populations, favoring however health condition, so illnesses to not present. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-09-29 / A epilepsia acomete cerca de 1 a 2% da população mundial e carece de propostas terapêuticas mais eficazes. Aproximadamente 30% das epilepsias são sintomáticas e a epilepsia do lobo temporal (ELT) se destaca pela alta incidência e gravidade. Cerca de 30% de pacientes com ELT possuem crises refratárias ao tratamento medicamentoso, sendo necessário, muitas vezes, intervenção cirúrgica para o controle das mesmas. A investigação dos mecanismos fisiopatológicos empregando tecido humano extraído cirurgicamente, embora muito importante, tem a limitação de refletir apenas o processo crônico em que as alterações moleculares, bioquímicas e de neuroplasticidade resultantes do quadro epiléptico já se encontram estabelecidos. Nesse sentido, os modelos experimentais são fundamentais por permitir uma melhor abordagem dos mecanismos envolvidos com a epileptogênese, ou seja, aqueles ativados durante a indução até o estabelecimento do quadro epiléptico. O modelo lesional de epilepsia induzida por pilocarpina em pequenos roedores tem sido amplamente utilizado por reproduzir as principais características da ELT. Nesse modelo as crises epilépticas são acompanhadas por uma ação combinada entre o sistema imune, nervoso e endócrino, envolvendo a ativação de mediadores como citocinas, quimiocinas, neurotransmissores e seus receptores celulares. Estes processos têm sido associados com a etiologia da condição epiléptica. No presente projeto, camundongos imunodeficientes BALB/c nude foram submetidos ao modelo de epilepsia induzida por pilocarpina, para caracterização das alterações comportamentais, eletrográficas, neuroquímicas e histológicas comparadas ao seu controle BALB/c. Os resultados indicaram que a integridade do sistema imunológico é necessário para proteger o sistema nervoso central do insulto causado pelo status epilepticus (SE) induzido pela pilocarpina. Após a aplicação da pilocarpina, os animais BALB/c nude apresentaram um maior número de crises tônicoclônicas até atingirem o SE, apresentando um alto índice de mortalidade quando comparados ao BALB/c. Os camundongos BALB/c nude também apresentaram uma maior ativação de c-Fos em áreas relacionadas com a circuitaria das crises e uma menor expressão de parvalbumina, uma proteína ligadora de cálcio intracelular em relação ao BALB/c estudado na mesma condição experimental. Diferenças nas concentrações de neurotransmissores excitatórios e inibitórios também foram observados no córtex e hipocampo do BALB/c nude em relação ao BALB/c. Os camundongos BALB/c nude tiveram aumento na concentração de aminoácidos excitatórios sem a alteração compensatória dos aminoácidos inibitórios durante as crises, conforme ocorreu nos camundongos BALB/c. A morte neuronal avaliada pelas técnicas histológicas de Fluoro Jade-B e Nissl, também se mostrou aumentada em algumas áreas do sistema nervoso central dos camundongos BALB/c nude que apresentaram SE em relação ao BALB/c Os dados sugerem uma correlação positiva entre ativação de c-Fos, concentração de aminoácidos excitatórios e morte neuronal nos camundongos BALB/c nude, sugerindo que a deficiência imunológica possa ter contribuído para a hiperexcitabilidade e vulnerabilidade do sistema nervoso central aos danos causados pelas crises. / Epilepsy affects about 1-2% of world population and lack of effective therapeutic interventions more effective. Approximately 30% are symptomatic of epilepsy and temporal lobe epilepsy (TLE) is distinguished by the high incidence and severity. About 30% of patients with TLE seizures are refractory to treatment, if necessary, often, surgical intervention for control of them. The investigation of pathophysiology mechanism using human tissue extracted surgically, although very important, is limited by reflects only the chronic process in which the molecular, biochemical, and neuronal plasticity alterations resulting from epileptic effects already established. Thus, experimental models are essential for better approach of the mechanisms involved in epileptogenesis. The epilepsy induced by pilocarpine in small rodents has been widely used for reproducing the main features of TLE. In this model, the seizures are accompanied by a combined action between immune system, nervous and endocrine systems, involving the mediators activation such as cytokines, chemokines, neurotransmitters and their cell receptors. These processes have been associated with the etiology of the epileptic condition. In this project, immunodeficient BALB/c nude mice submitted to epilepsy model induced by pilocarpine to characterize behavior, electrographic, histological and neurochemical changes compared to their control BALB/c. The results indicated that integrity of the immune system is necessary to protect the central nervous system insult caused by status epilepticus. After administration of pilocarpine, the BALB/c nude mice showed a larger number of tonic-clonic seizures, with a high mortality rate when compared to BALB/c. The BALB/c nude also showed a greater activation of c-Fos in areas related to the circuitry of the crisis and a lower expression of parvalbumin, an intracellular calcium-binding protein compared to BALB/c studied in the same experimental condition. Differences concentrations of excitatory and inhibitory neurotransmitters were also observed in cortex and hippocampus of the BALB/c nude compared to BALB/c. The BALB/c nude showed increased of the excitatory amino acids concentrations without compensatory alteration in the inhibitory amino acids during seizure, as occurred in BALB/c. Neuronal death measured by Fluoro Jade- B and Nissl histological techniques, was also increased in some areas of the central nervous system of BALB/c nude SE presented relative to BALB/c. The data suggest a positive correlation between c-Fos activation, excitatory amino acids concentration and neuronal death in BALB/c nude mice, suggesting that immune deficiency may have contributed to the hyperexcitability and vulnerability of the central nervous system injury caused by seizure. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Glioblastoma multiforme é o tumor maligno mais comum do sistema nervoso central em adultos e a sobrevida média é de apenas 12 a 15 meses após o diagnóstico. Por isso, é extremamente importante desenvolver tratamentos mais eficazes e específicos contra essa neoplasia. A presença do sistema imune, incluindo macrófagos associados ao tumor, promove a proliferação tumoral e está associada com um pior prognóstico em pacientes com essa doença maligna. A sinalização purinérgica e o receptor purinérgico P2X7, um canal iônico, têm sido implicados na progressão de diferentes tipos de tumores tanto in vitro como in vivo. A ciclooxigenase 2 (COX-2) desempenha um papel importante na regulação da proliferação celular, diferenciação e na tumorigênese. O ácido ursólico é um triterpeno pentacíclico encontrado em uma variedade de plantas e exibe diversas atividades biológicas e farmacológicas. O objetivo dessa tese é verificar a participação do sistema purinérgico, sistema imune e COX-2 no desenvolvimento e progressão do glioblastoma multiforme, e também investigar os efeitos citotóxicos do ácido ursólico. Primeiramente, verificamos que macrófagos expostos ao meio condicionado de glioma (GL-CM) foram modulados para um fenótipo do tipo M2 e houve um aumento da liberação de IL-10, IL-6 e MCP-1. Esses efeitos foram diminuídos na presença de antagonistas dos receptores P2X7 e A2A. Portanto, os resultados apresentados contribuem para o melhor entendimento da interação entre inflamação e câncer e demonstram que os receptores purinérgicos são importantes para a progressão do glioma. Após, analisamos o papel do receptor P2X7 na proliferação de células de glioma. Surpreendentemente, in vitro, não se observou nenhuma diferença no crescimento das células quando houve a transfecção com o P2X7. Entretanto, in vivo, essas células geraram tumores maiores quando comparado com o controle. Os nossos resultados demonstram que, como em outros tipos de cânceres, o P2X7 tem um papel importante no desenvolvimento e progressão tumoral. Uma vez verificado o importante papel do receptor P2X7 nos macrófagos associados ao tumor e nas células de glioma, investigamos se esse receptor poderia interagir com a enzima COX-2 em células de glioma. Porém, não houve diferença na expressão do P2X7 ou da COX-2 tanto in vitro como in vivo. E também não houve nenhum efeito adicional entre o antagonista de P2X7 e o inibidor seletivo de COX-2. Esse trabalho fornece evidências de que não há relação entre o P2X7 e COX-2 em células de glioma. Em conclusão, todos esses resultados reforçam a hipótese do envolvimento da sinalização purinérgica na progressão do glioblastoma multiforme e tornam o P2X7 como um interessante alvo terapêutico. Finalmente, também investigamos a possível atividade anticâncer do ácido ursólico contra as células de glioma. Essa molécula foi capaz de diminuir o número de células e induziu parada no ciclo celular. In vivo, o ácido ursólico reduziu ligeiramente o tamanho do tumor, mas não alterou as características malignas. Em conclusão, o ácido ursólico pode ser um potencial candidato como adjuvante para o tratamento do glioblastoma multiforme. Em conjunto, todos os resultados apresentados nessa tese indicam possíveis novas abordagens terapêuticas no tratamento e novos conhecimentos em relação a esse maligno câncer cerebral. / Glioblastoma multiforme is the most common malignant tumor of central nervous system in adults and the median survival is only 12 to 15 months after diagnosis. Therefore, it is extremely important to develop more effective and specific treatments. The presence of an inflammatory environment, including tumor-associated macrophages, promotes tumor proliferation and is associated with a poor prognosis in patients with this malignancy. Disruption of purinergic signaling has also been implicated in cancer progression. P2X7R is an ion channel receptor, whose participation in tumor progression has been demonstrated in in vitro and in vivo studies. Cyclooxygenase 2 (COX-2) plays an important role in regulating cell proliferation, differentiation, and tumorigenesis. Ursolic acid is a pentacyclic triterpenoid found in a variety of plants that exhibits several biological and pharmacological activities. The aim of this study is to verify the participation of the purinergic system, immune system and COX-2 in the glioblastoma multiforme development and progression, and also to investigate the anti-proliferative effects of ursolic acid. We first verified that macrophages exposed to glioma conditioned medium (GL-CM) were modulated to an M2-like phenotype and there was an increased IL-10, IL-6 and MCP-1 secretion and these effects were diminished by P2X7 and A2A receptors antagonists. Therefore, the results presented contribute to advancing in the field of cancer-related inflammation and point specific purinergic receptors as targets for glioma progression. After that, we analyzed the role of P2X7 receptor in glioma cell proliferation. Surprisingly, in vitro, no difference in cell growth was observed when the cells were transfected with P2X7R but in vivo these cells generated larger tumors when compared to the control. Our data demonstrate that, as in other type of cancers, P2X7R has an important role in sustaining the development of glioma. Once verified the important role of P2X7 receptor in tumorassociated macrophages and glioma cells, we verified whether this receptor could interact with the COX-2 enzyme in glioma cells. No differences in mRNA expression of P2X7R or COX-2 were verified both in vitro and in vivo experiments. And any additional effect with selective P2X7R antagonist and COX-2 inhibitor were observed in in vitro and in vivo experiments. This work provides evidence that there is no relationship between the P2X7R and COX-2 in glioma. In conclusion, all these results reinforce the hypothesis of purinergic signaling involvement in glioma progression and point to P2X7R as an interesting target for glioma treatment. Finally, we also investigated the potential anticancer activity of ursolic acid against to glioma cells. Ursolic acid decreased the cell number and induced an arrest in the cell cycle in glioma cells. In vivo, ursolic acid slightly reduced the glioma tumor size but did not alter the malignant features. In conclusion, the ursolic acid may be a potential candidate as adjuvant for glioblastoma therapy. Taken together, the results presented herein indicate new adjuvant treatment approaches and new knowledge regarding to this deadliest brain tumor.

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-31. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:06Z : No. of bitstreams: 1 000868417_20170731.pdf: 124958 bytes, checksum: bf72a7f09986678cc29855b1fbd1c2c9 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-08-07T14:09:04Z: 000868417_20170731.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-08-07T14:10:13Z : No. of bitstreams: 1 000868417.pdf: 1153725 bytes, checksum: d7676d38e8c4fa2daf08e559555e8ebf (MD5) / Os peixes são encontrados em ambientes passíveis de contaminação, dentre as quais se destaca a radiação decorrente de descartes inadequados de material radiativo ou mesmo de acidentes como de Chernobyl na Ucrânia e, mais recentemente, Fukushima no Japão. Poucos trabalhos são encontrados na literatura com o emprego de radiações ionizantes como agente estressor em peixes. Neste trabalho pretende-se quantificar o impacto de diferentes doses de radiação gama em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) no comportamento alimentar, em parâmetros bioquímicos, tais como, hematócrito, glicemia e proteinograma plasmático, assim como no comprometimento na sobrevida. Neste trabalho foram utilizados 105 exemplares machos de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus), com o comprimento padrão médio de 11,11 ± 0,44 cm e peso médio de 40,56 ±3,64 gramas; divididos em seis grupos experimentais de 15 peixes cada e expostos à radiação gama de corpo inteiro de dose única através de um aparelho de telecobaltoterapia nas doses de 1 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 8 Gy, 16 Gy e 32 Gy, e um grupo Controle sem irradiação. Foram coletados, em média, 0,3 mL de sangue com o auxílio de agulhas e seringas heparinizadas através de punção cardíaca. Posteriormente, foram determinadosos parâmetros de hematócrito, glicemia e proteinograma plasmático, por técnicas usuais, para se avaliarem os efeitos da radiação. Observou-se a diminuição da ingestão de alimento, devido à ocorrência de irritação na mucosa oral em doses mais elevadas de radiação. A porcentagem de hematócrito foi a variável mais sensível aos efeitos da radiação gama. Os níveis glicêmicos variaram dependendo das doses de radiação gama em função do tempo. Elevadas doses de radiação gama provocaram alterações metabólicas que modificaram os padrões das diferentes classes protéicas. A tilápia do Nilo demonstrou-se resistente às doses de 1 a 8 Gy, possivelmente devido... / Fish are found in susceptible to contamination environments, among which stands out the radiation arising from inadequate disposal of radioactive material or even accidents like Chernobyl in Ukraine and, more recently, Fukushima in Japan. Few studies are found in the literature with the use of ionizing radiation as a stressor in fish. This work aims to quantify the impact of different doses of gamma radiation in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) in eating behavior, biochemical parameters, such as, hematocrit, glucose and plasma protein electrophoretic pattern, as well as the commitment on survival. In this work we used 105 males of Nile tilapia (Oreochromis niloticus), with the average standard length of 11.11 ± 0.44 cm and average weight of 40.56 ± 3.64 grams; divided into six experimental groups of 15 fish each and exposed to gamma radiation full-length single dose, by the use of a telecobaltoterapia apparatus in doses of 1 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 8 Gy, 16 Gy and 32 Gy, and a group Control without irradiation. They were collected, on average, 0.3 ml of blood with the aid of needles and heparinized syringes by cardiac puncture. Subsequently, they determined the parameters hematocrit, blood glucose and plasma protein electropherogram by standard techniques, to assess the effects of radiation. There was a decrease in food intake due to the occurrence of irritation on oral mucosa in higher doses of radiation. The percentage of hematocrit was the most sensitive variable to the effects of gamma radiation. Glucose levels varied depending on the doses of gamma radiation as a function of time. High doses of gamma radiation caused metabolic alterations that changed the standards of different protein classes. The Nile tilapia shown to be resistant to doses of 1 to 8 Gy, possibly due to repair system efficiency. It is believed that in the group of 16 and 32 Gy, mortality was occurring due to infection by opportunistic agents and susceptibilityof the...

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-11-27. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:20Z : No. of bitstreams: 1 000866553_20171126.pdf: 380333 bytes, checksum: 84405dc42df088ce6a479f7158e7fd49 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-11-29T13:07:45Z: 000866553_20171126.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-11-29T13:08:38Z : No. of bitstreams: 1 000866553.pdf: 2314592 bytes, checksum: 7fc46c19fdec3f21779317a59ff8e385 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O desenvolvimento dos órgãos linfoides de pacu (Piaractus mesopotamicus) desde a eclosão até 34 dias de vida, e os efeitos de diferentes manejos alimentares sobre a ontogenia do sistema imunológico e a resistência das larvas à exposição ao ar foram avaliados neste estudo. Os manejos alimentares estudados foram: (TP) transição prematura de náuplios de artêmia para a dieta comercial iniciada aos oito dias após a primeira alimentação (12 dias pós- eclosão); (TT) transição tardia de náuplios de artêmia para dieta comercial iniciada aos 15 dias após a primeira alimentação (19 dpe) e (A) alimentação exclusivamente com náuplios de artêmia. As amostras para análises histológicas para descrição da ontogenia do rim, timo e baço foram tomadas duas vezes por dia, diariamente até os 13 dias pós-eclosão (dpe) (nove dias pós a primeira alimentação), uma vez ao dia até o 16 dpe (12 dias após a primeira alimentação) e, posteriormente, a cada três dias até o final do experimento. Biometrias foram realizadas na primeira alimentação, aos sete, 11, 16, 22 e 30 dias após o início da alimentação exógena. Um teste de resistência ao estresse (exposição ao ar por 1, 3, 5, 7 e 20 min) foi aplicado às larvas após 12 dias do término da transição alimentar prematura e tardia, respectivamente aos 22 e 29 dias de alimentação. A histogênese dos órgãos do sistema imune do pacu mostrou que o primeiro órgão a se tornar linfoide foi o timo aos 2 dpe, embora nos rins tenham sido observadas células indiferenciadas desde a eclosão. No início da alimentação exógena, aos 5 dpe, o rim da larva de pacu apresenta pequenos linfócitos e células eritropoiéticas dispersas entre os túbulos renais. O baço foi último órgão a se tornar linfoide, sendo observado a partir do 6º dpe como um órgão eritrocítico e, a partir do 16º dpe, o órgão torna-se linfoide. Ao final do experimento, com 34 dpe, o rim... / The development of the lymphoid organs in pacu larvae (Piaractus mesopotamicus) since hatching until 34 days of age and the effects of different feeding protocols on the morphogenesis of the immune system and the resistance of ar exposure were investigated. The feeding treatments studied were: (TP) early weaning, replacement of artêmia nauplii by commercial microdiet initiated at eight days after the first feeding; (TT) late weaning, replacement initiated at 15 after the first feeding; (ART) larvae fed exclusively artemia nauplii. The histological samples to describe the ontogeny of the kidney, thymus and spleen were taken twice a day until 13 days pos-hatch (dph), once a day until 16 dph and then each three days until the end of the experiment. On the first feeding day, 7, 11, 16, 22 and 30 days after the beginning of the active feeding, biometrics were made. A stress resistance test (air exposure for 1, 3, 5, 7 e 20 min) was applied to the larvae 12 days after the end of the early and late weaning, respectively, after 22 and 29 days of feeding. The histogenesis of the lymphoid organs demonstrated that the fisrt organ to became lymphoid was the thymus with 2 dph, although the kidney had been observed since the moment the larvae hatched. At 6 dph, the kidney show signs of differentiation. The spleen was the last organs to appear at 6 dph. At 35 dph the kidney had already differentiated into head kidney (with monocytes, lymphocytes and hematopoietic tissue) and posterior kidney (renal tubules). The thymic parenchyma didn't present differences, however the cells differentiated in the inner and outer zones and the spleen did not present differentiation between red and white pulp until this period. Comparing to the treatment that received only artemia nauplii, early and late weaning reduced de survival of the larvae. However, only the early weaning decreased the specific growth rate and weight gain and caused difference on larvae size ... / CNPq: 830847/1999-5

Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Coorientador: Fábio Sabbadin Zanuzzo / Banca: Marco Antonio de Andrade belo / Banca: Janessa Sampaio de Abreu / Resumo: Manejos inerentes da piscicultura intensiva, como o transporte, desencadeiam resposta de estresse nos animais, podendo causar perdas na produtividade. Como alternativa, o β-glucano, um polissacarídeo derivado da parede celular de cereais, bactérias e fungos, vem sendo muito utilizado na aquicultura pelo seu efeito imunoestimulante. Há evidências de que o β-glucano minimiza os efeitos negativos do estresse por atuar no sistema imune, porém é pouco investigado o seu efeito direto sobre a resposta clássica de estresse. Neste contexto, o presente estudo avaliou, em juvenis de pacu, o uso oral de 0.1% de duas gerações de β-glucano, de diferentes graus de pureza e processamentos, na resposta de estresse e no sistema imune inato, após transporte e inoculação com Aeromonas hydrophila. Avaliamos a concentração de cortisol e glicose plasmáticos como indicadores da resposta de estresse, a atividade respiratória de leucócitos, a atividade hemolítica do sistema complemento, a atividade de lisozima e contagem total e diferencial de leucócitos, como indicadores do sistema imune inato, e o hematócrito, número de eritrócitos, concentração de hemoglobina e volume corpuscular médio de eritrócitos como indicadores hematológicos. As duas gerações de β-glucano utilizadas modularam os níveis de cortisol circulantes, mantendo os níveis elevados até 24 horas após o transporte, sem alteração após o desafio bacteriano. O β-glucano aumentou a atividade hemolítica do sistema complemento e de lisozima apó... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Inherent handling in intensive fish farming, such as transport, trigger stress response in animals, and may cause losses in productivity. As an alternative, the β-glucan, a polysaccharide derived from the cell walls of cereals, bacteria and fungi, has been widely used in aquaculture due their immunostimulatory effect. The β-glucan minimizes the negative effects of stress by acting on the immune system, but it is little investigated its direct effect on the classical stress response. In this context, the present study evaluated in pacu, the oral administration of 0.1% of two generations of β-glucan, with different degrees of purity and processing methods, on the stress and innate immune system responses, after transport and inoculation with Aeromonas hydrophila. We evaluated the plasma concentration of cortisol and glucose, as stress response indicators, the respiratory activity of leukocytes, the hemolytic activity of the complement system, lysozyme activity and total and differential counts of leukocytes as innate immune system indicators, and hematocrit, number of erythrocytes, hemoglobin concentration, and mean corpuscular volume of erythrocytes as hematological indicators. The two generations of β-glucan modulated the circulating levels of cortisol, keeping the high levels 24 hours after transportation, without changes after the bacterial challenge. The β-glucan increased the hemolytic activity of the complement system and lysozyme after handling and after bacterial inoculation, and kept the population of circulating leukocytes after recovery of leukopenia, demonstrating the immunostimulatory effect. The general results of this study suggest the strengthening of the immune response of pacu juveniles fed for 15 with feed containing 0,1% β-glucan derived from yeast cell wall (Sacaromyces cerevisiae) days before stressful ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Carlos Roberto Teixeira / Coorientador: Jane Megid / Banca: Flávia Karina Delella / Banca: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Resumo: A raiva é uma zoonose, que se caracteriza como uma encefalite aguda e letal. Atualmente, sabe-se que o vírus da raiva possui vários ciclos epidemiológicos e diversos animais podem servir como seus reservatórios, perpetuando-o no ciclo silvestre e urbano. Esse estudo teve como objetivo avaliar a prevalência de anticorpos neutralizantes (AN) contra a raiva no soro de gambás das espécies Didelphis albiventris e Didelphis aurita por meio da técnica de soroneutralização (Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test - RFFIT). A pesquisa foi conduzida nas cidades de Anhembi, Torre de Pedra e Bofete, localizadas no centro oeste de São Paulo. Soro de 67 animais, a maioria do sexo masculino e na idade adulta, foram avaliados. A positividade para anticorpos neutralizantes antirábicos foi de 17,9%. Esse resultado evidencia a circulação do vírus da raiva em gambás e serve de alerta tanto à comunidade científica quanto às autoridades governamentais envolvidas nas pesquisas e controle da raiva / Abstract: Rabies is a zoonotic disease, which is characterized as an acute and lethal encephalitis. Currently, it is known that rabies virus has several cycles and several epidemiological animals may serve as reservoirs of the virus perpetuating it in wild and urban cycle. This study aimed to evaluate the presence of antirabies neutralizing antibodies (NA) in the serum of the opossum Didelphis albiventris e Didelphis aurita by means of a virus neutralizing (Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test - RFFIT). The survey was conducted in the cities of Anhembi, Torre de Pedra and Bofete, located in the center west of São Paulo. Sera from 67 animals were examined, most males in adulthood. The percentage of animals that presented neutralizing antibodies was 17.9%. This result shows the circulation of the rabies virus in skunks and serves to alert both the scientific community and government authorities involved in the research and rabies control / Mestre

Orientador: Paulo Câmara Marques Pereira / Coorientador: Fátima Regina Vilani Moreno / Banca: Ângela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Maria Esther Salles Nogueira / Banca: Sônia Maria Usó Ruiz Silva / Banca: Silvio Luís de Oliveira / Resumo: A doença de Jorge Lobo é micose cutânea-subcutânea de evolução crônica causada pelo fungo Lacazia loboi. Esta micose é predominante na região Amazônica e afeta principalmente trabalhadores rurais que vivem em contato constante com a vegetação e o solo, como é o caso dos seringueiros dessa região. Até o momento não existem estudos sobre a participação do estado nutricional na resposta imunológica abordando a doença de Jorge Lobo; assim, este estudo tem por finalidade avaliar os efeitos da desnutrição protéico-calórica na resposta imune de camundongos isogênicos da linhagem BALB/c inoculados com L. loboi, empregando parâmetros imunológicos e histopatológicos. O presente estudo foi desenvolvido com 120 camundongos do sexo masculino, da linhagem BALB/c, com idade aproximada de 12 semanas e cerca de 25g de peso corporal. Foram constituídos quatro grupos: G1: 30 camundongos inoculados com o fungo L. loboi, recebendo restrição dietética de 20% da dieta normal; G2: 30 camundongos não inoculados, recebendo restrição dietética de 20% da dieta normal; G3: 30 camundongos inoculados, recebendo dieta normal; G4: 30 camundongos sadios. Os animais dos grupos G1 e G2 foram submetidos previamente, por 20 dias, antes do início do estudo, a restrição dietética com oferta diária de 80% da quantidade ingerida pelos grupos G3 e G4. Após instalada a desnutrição, os animais foram inoculados no coxim plantar, via intradérmica, com fungo L. loboi e depois de 4 meses (período de aparecimento das lesões macroscópicas no coxim plantar), os animais foram sacrificados e submetidos ao lavado peritoneal e à necrópsia para a retirada dos órgãos: fígado e baço. Os coxins plantares foram removidos para determinação da viabilidade e do número total de fungos, além do histopatológico. As células do lavado peritoneal... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Jorge Lobo's disease is a cutaneous and subcutaneous mycosis with chronicle evolution caused by the fungus Lacazia loboi. This mycosis is predominant in the Amazon region and affects mainly rural workers who live in constant contact with the vegetation and the soil, such as the rubber tappers in this region. Up to this date there haven't been studies about the participation of the nutritional state in the immunological response approaching the Jorge Lobo; thus, this study aims to evaluate the effects of the protein-calorie malnutrition in the immune response of the isogenic mice lineage BALB/c inoculated with L. loboi, using hystopatological and immunological parameters. The present study was developed with 120 male mice lineage BALB/c, with approximately 12 weeks old and circa 25g of body weight. Four groups were made: G1: 30 mice inoculated with L. loboi fungus, receiving diet restriction of 20% of the normal diet; G2: 30 non inoculated mice, receiving diet restriction of 20% of normal diet; G3: 30 mice inoculated receiving normal diet; G4: 30 healthy mice. The animals in the groups G1 and G2 were previously submitted for 20 days before the beginning of the study to a diet restriction with a daily offer of 80% of the quantities ingested by groups G3 e G4. After malnutrition was installed the animals were inoculated in the plantar cushion, via intradermic, with L. loboi fungus and after 4 months (period of the appearance of the macroscopic lesions in the plantar cushion), the animals were sacrificed and submitted to a peritoneal washing and to a necropsy to remove the organs: liver and spleen. The plantar cushions were removed for determining the viability and the total number of fungi, besides the hystopatological. The cells in the peritoneal washing were used for: total cell culture for the dosage of cytokine IFN-γ, macrophage... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Célia Portella / Coorientador: Natalia de Jesus Leitão / Banca: Elisabeth Criscuolo Urbinati / Banca: Rosângela Kiyoko Jomori Bonichelli / Resumo: O desenvolvimento dos órgãos linfoides de pacu (Piaractus mesopotamicus) desde a eclosão até 34 dias de vida, e os efeitos de diferentes manejos alimentares sobre a ontogenia do sistema imunológico e a resistência das larvas à exposição ao ar foram avaliados neste estudo. Os manejos alimentares estudados foram: (TP) transição prematura de náuplios de artêmia para a dieta comercial iniciada aos oito dias após a primeira alimentação (12 dias pós- eclosão); (TT) transição tardia de náuplios de artêmia para dieta comercial iniciada aos 15 dias após a primeira alimentação (19 dpe) e (A) alimentação exclusivamente com náuplios de artêmia. As amostras para análises histológicas para descrição da ontogenia do rim, timo e baço foram tomadas duas vezes por dia, diariamente até os 13 dias pós-eclosão (dpe) (nove dias pós a primeira alimentação), uma vez ao dia até o 16 dpe (12 dias após a primeira alimentação) e, posteriormente, a cada três dias até o final do experimento. Biometrias foram realizadas na primeira alimentação, aos sete, 11, 16, 22 e 30 dias após o início da alimentação exógena. Um teste de resistência ao estresse (exposição ao ar por 1, 3, 5, 7 e 20 min) foi aplicado às larvas após 12 dias do término da transição alimentar prematura e tardia, respectivamente aos 22 e 29 dias de alimentação. A histogênese dos órgãos do sistema imune do pacu mostrou que o primeiro órgão a se tornar linfoide foi o timo aos 2 dpe, embora nos rins tenham sido observadas células indiferenciadas desde a eclosão. No início da alimentação exógena, aos 5 dpe, o rim da larva de pacu apresenta pequenos linfócitos e células eritropoiéticas dispersas entre os túbulos renais. O baço foi último órgão a se tornar linfoide, sendo observado a partir do 6º dpe como um órgão eritrocítico e, a partir do 16º dpe, o órgão torna-se linfoide. Ao final do experimento, com 34 dpe, o rim... / Abstract: The development of the lymphoid organs in pacu larvae (Piaractus mesopotamicus) since hatching until 34 days of age and the effects of different feeding protocols on the morphogenesis of the immune system and the resistance of ar exposure were investigated. The feeding treatments studied were: (TP) early weaning, replacement of artêmia nauplii by commercial microdiet initiated at eight days after the first feeding; (TT) late weaning, replacement initiated at 15 after the first feeding; (ART) larvae fed exclusively artemia nauplii. The histological samples to describe the ontogeny of the kidney, thymus and spleen were taken twice a day until 13 days pos-hatch (dph), once a day until 16 dph and then each three days until the end of the experiment. On the first feeding day, 7, 11, 16, 22 and 30 days after the beginning of the active feeding, biometrics were made. A stress resistance test (air exposure for 1, 3, 5, 7 e 20 min) was applied to the larvae 12 days after the end of the early and late weaning, respectively, after 22 and 29 days of feeding. The histogenesis of the lymphoid organs demonstrated that the fisrt organ to became lymphoid was the thymus with 2 dph, although the kidney had been observed since the moment the larvae hatched. At 6 dph, the kidney show signs of differentiation. The spleen was the last organs to appear at 6 dph. At 35 dph the kidney had already differentiated into head kidney (with monocytes, lymphocytes and hematopoietic tissue) and posterior kidney (renal tubules). The thymic parenchyma didn't present differences, however the cells differentiated in the inner and outer zones and the spleen did not present differentiation between red and white pulp until this period. Comparing to the treatment that received only artemia nauplii, early and late weaning reduced de survival of the larvae. However, only the early weaning decreased the specific growth rate and weight gain and caused difference on larvae size ... / Mestre