Sorbitol e ácido glucônico são obtidos equimolarmente em reação catalisada por glicose-frutose oxidorredutase (GFOR) e glucono-δ-lactonase (GL), enzimas periplasmáticas de Zymomonas mobilis. Visto que a demanda comercial do sorbitol é muito superior à do ácido glucônico, este trabalho objetivou aprofundar o conhecimento sobre a capacidade do complexo GFOR/GL de oxidar outras aldoses a seus respectivos ácidos orgânicos. O cultivo de Z. mobilis foi analisado visando a obtenção de biomassa, GFOR/GL e etanol. Em cultivo descontínuo em meio com 7,5 a 10,0 g/L de extrato de levedura bruto, obtiveramse cerca de 24 unidades de GFOR/GL por grama de células secas (U/g). Em regime descontínuo alimentado, atividade de 27 U/g e rendimento em etanol de 95% foram atingidos. A ação de GFOR/GL sobre diferentes pares frutose/aldoses foi avaliada com células permeabilizadas livres ou imobilizadas em alginato de cálcio. Com 0,7 mol/L de frutose/glicose, em sistema imobilizado, as mais altas atividades foram medidas entre 47 e 50°C com pH de 7,8 a 8,2, constatando-se que um valor de pH mais alto no meio permite a ocorrência de um pH próximo ao ideal (6,4) no interior das esferas de alginato. Conforme os substratos são consumidos, com conseqüente redução da velocidade reacional, pHs mais baixos no meio externo são exigidos. Entre as aldoses testadas, a maior afinidade enzima / substrato foi observada com maltose e a menor com lactose. Devido às aplicações comerciais do seu produto de oxidação - ácido lactobiônico - lactose foi estudada em detalhes. Com 0,7 mol/L de lactose/frutose, a máxima velocidade específica de formação de ácido lactobiônico foi, em média, de 4,0 mmol/g/h, com células livres, a 39°C e pH 6,4, e de 2,0 mmol/g/h, com o sistema imobilizado, a 47ºC e pH 6,4. Os resultados indicam a viabilidade da produção de ácido lactobiônico por este processo, já que conversões superiores a 85 % são obtidas. / Sorbitol and gluconic acid can be obtained, in equimolar basis, by reaction catalysed by the periplasmic enzymes glucose-fructose oxidoreductase (GFOR) and glucono-δ-lactonase (GL) of Zymomonas mobilis. Since the commercial demand for sorbitol is much larger than that for gluconic acid, the aim of this work was to achieve a deeper knowledge on the capacity of GFOR/GL complex in oxidising other aldoses to their respective organic acids. Z. mobilis cultivation was analysed with respect to growth and GFOR/GL and ethanol production. In batch cultivation in medium with 7.5 and 10.0 g/L of non-purified yeast extract, ca. of 24 GFOR/GL units per gram of dry cells (U/g) were obtained. In fed-batch mode, an activity of 27 U/g and an ethanol yield over 95% were achieved. The action of GFOR/GL on different fructose/aldose pairs was assessed with permeabilised cells, either free or immobilised in calcium alginate. With 0.7 mol/L of fructose/aldose, in immobilised system, the highest activities were measured between 47 and 50°C at pH 7.8-8.2, observing that higher pH values in the reaction medium led to the occurrence of pH values close to the optimum (6.4) in the inner space of alginate beads. As substrates were consumed, and as a consequence the reaction rate decreased, lower pH values in the external medium were needed. Among the aldoses tested, the highest enzyme - substrate affinity was observed for maltose and the lowest for lactose. Due to the commercial uses of its oxidation product - lactobionic acid - lactose was studied in details. With 0.7 mol/L of lactose/fructose, the maximum lactobionic acid specific production rate was in average 4.0 mmol/g/h with free cells, at 39ºC and pH 6.4, and 2.0 mmol/g/h with immobilised system, at 47ºC and pH 6.4. The results indicate the feasibility of producing lactobionic acid by this process, since conversion over 85% are obtained.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-10-24Bitstream added on 2014-06-13T19:39:05Z : No. of bitstreams: 1 souza_ja_me_ilha.pdf: 3840702 bytes, checksum: d1b78493b8f0c387c60f40d0693771e5 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Recentemente foi demonstrado que o boro exibe rápida e significante mobilidade no floema de algumas espécies produtoras de polióis. Os polióis como os açúcares alcoóis sorbitol, dulcitol e manitol possuem a capacidade de complexar o B conferindo a esse elemento alguma mobilidade dentro da planta. As espécies selecionadas foram o cajueiro (não produtora de sorbitol) e o pessegueiro (produtora de sorbitol). O trabalho teve por objetivo verificar a mobilidade de B aplicado via foliar em mudas de cajueiro e pessegueiro. As espécies foram conduzidas separadamente em dois experimentos em casa de vegetação pertencente a UNESP/FEIS no município de Ilha Solteira-SP. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com três repetições, em parcelas subdivididas, em duas épocas (30 e 60 dias). Foram avaliados nas parcelas cinco tratamentos e nas subparcelas dois tipos de folha (folhas velhas e folhas novas). Os tratamentos estudados constituiram-se da adubação via solo e/ou via foliar com boro marcado ou não com 10B, da seguinte forma: sem adubação via solo e foliar com B (Sol -B Fol -B); sem adubação via solo com B e adubação foliar com 10B (Sol -B Fol 10 B); adubação via solo com B e sem adubação foliar (Sol B Fol -B); adubação via solo com B e foliar com 10B (Sol B Fol10B) e adubação via solo com 10B e foliar com B (Sol10B Fol B). Na adubação via solo o mesmo foi acrescido de B na dose de 0,5 mg kg-1 de solo e na adubação via foliar aplicação de solução com B na doses de 255 mg L-1, utilizando-se como fonte de B o ácido bórico e ácido bórico enriquecido com átomos de 10 B (99%). Foram avaliados quinzenalmente a altura e o número de folhas e o teor total de B e a porcentagem de B na folha velha e folha nova proveniente do fertilizante aos 30 e 60 dias após a aplicação dos tratamentos / Recently it was demonstrated the boron mobility in the phloem of some species producing polyols. The polyols or such alcohols sugar as sorbitol, mannitol and dulcitol are capable of complexing B giving to this element some mobility within the plant. This work had the objective to study the effect of fertilization with boron in the soil and leaves of cashew and peach seedling. They were conducted two experiments for 120 days in the greenhouse at UNESP, Ilha Solteira/SP. The experimental design was randomized blocks with three replications in a split plot, in two times for collection of leaves (30 and 60 days after application of treatments). We studied five treatments in plots and two ages of leaves in the subplots (old leaves and new leaves). The treatments studied were: no fertilizer with B in the soil and leaves (Sol -B Fol -B); without fertilizer with B in the soil and leaves with 10B (Sol - B Fol10B); fertilizing in the soil with B and leaves without B (Sol B Fol -B); fertilizing in the soil with B and leaves with 10B (Sol B fol10B) and fertilizing in the soil with 10 B and leaves with B (Sol10B Fol B). Were evaluated the height and the number of leaves biweekly and B total content and B percentage at the leaf from the fertilizer (% Bfopf) at 30 and 60 days. There was no fertilization effect with boron in the cashew seedling growing . The foliar fertilization with boron showed higher increase in the leaves number on peach seedlings at 60 days after fertilization. Boron foliar application is restricted or intermediate mobility in mobile cashew and peach evaluated at 30 and 60 days after fertilization

Sorbitol e ácido glucônico são obtidos equimolarmente em reação catalisada por glicose-frutose oxidorredutase (GFOR) e glucono-δ-lactonase (GL), enzimas periplasmáticas de Zymomonas mobilis. Visto que a demanda comercial do sorbitol é muito superior à do ácido glucônico, este trabalho objetivou aprofundar o conhecimento sobre a capacidade do complexo GFOR/GL de oxidar outras aldoses a seus respectivos ácidos orgânicos. O cultivo de Z. mobilis foi analisado visando a obtenção de biomassa, GFOR/GL e etanol. Em cultivo descontínuo em meio com 7,5 a 10,0 g/L de extrato de levedura bruto, obtiveramse cerca de 24 unidades de GFOR/GL por grama de células secas (U/g). Em regime descontínuo alimentado, atividade de 27 U/g e rendimento em etanol de 95% foram atingidos. A ação de GFOR/GL sobre diferentes pares frutose/aldoses foi avaliada com células permeabilizadas livres ou imobilizadas em alginato de cálcio. Com 0,7 mol/L de frutose/glicose, em sistema imobilizado, as mais altas atividades foram medidas entre 47 e 50°C com pH de 7,8 a 8,2, constatando-se que um valor de pH mais alto no meio permite a ocorrência de um pH próximo ao ideal (6,4) no interior das esferas de alginato. Conforme os substratos são consumidos, com conseqüente redução da velocidade reacional, pHs mais baixos no meio externo são exigidos. Entre as aldoses testadas, a maior afinidade enzima / substrato foi observada com maltose e a menor com lactose. Devido às aplicações comerciais do seu produto de oxidação - ácido lactobiônico - lactose foi estudada em detalhes. Com 0,7 mol/L de lactose/frutose, a máxima velocidade específica de formação de ácido lactobiônico foi, em média, de 4,0 mmol/g/h, com células livres, a 39°C e pH 6,4, e de 2,0 mmol/g/h, com o sistema imobilizado, a 47ºC e pH 6,4. Os resultados indicam a viabilidade da produção de ácido lactobiônico por este processo, já que conversões superiores a 85 % são obtidas. / Sorbitol and gluconic acid can be obtained, in equimolar basis, by reaction catalysed by the periplasmic enzymes glucose-fructose oxidoreductase (GFOR) and glucono-δ-lactonase (GL) of Zymomonas mobilis. Since the commercial demand for sorbitol is much larger than that for gluconic acid, the aim of this work was to achieve a deeper knowledge on the capacity of GFOR/GL complex in oxidising other aldoses to their respective organic acids. Z. mobilis cultivation was analysed with respect to growth and GFOR/GL and ethanol production. In batch cultivation in medium with 7.5 and 10.0 g/L of non-purified yeast extract, ca. of 24 GFOR/GL units per gram of dry cells (U/g) were obtained. In fed-batch mode, an activity of 27 U/g and an ethanol yield over 95% were achieved. The action of GFOR/GL on different fructose/aldose pairs was assessed with permeabilised cells, either free or immobilised in calcium alginate. With 0.7 mol/L of fructose/aldose, in immobilised system, the highest activities were measured between 47 and 50°C at pH 7.8-8.2, observing that higher pH values in the reaction medium led to the occurrence of pH values close to the optimum (6.4) in the inner space of alginate beads. As substrates were consumed, and as a consequence the reaction rate decreased, lower pH values in the external medium were needed. Among the aldoses tested, the highest enzyme - substrate affinity was observed for maltose and the lowest for lactose. Due to the commercial uses of its oxidation product - lactobionic acid - lactose was studied in details. With 0.7 mol/L of lactose/fructose, the maximum lactobionic acid specific production rate was in average 4.0 mmol/g/h with free cells, at 39ºC and pH 6.4, and 2.0 mmol/g/h with immobilised system, at 47ºC and pH 6.4. The results indicate the feasibility of producing lactobionic acid by this process, since conversion over 85% are obtained.

Orientador: Jaime Aparecido Cury / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:51:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_NilzaCristinaLopesAfonsodeValor_D.pdf: 1391190 bytes, checksum: 3a3df4b3a44ef95411c1e66744ad3e25 (MD5) Previous issue date: 2004 / Doutorado

La presente tesis abarca estudios fundamentales basados en la catálisis heterogénea. El objetivo que se ha planteado en esta tesis doctoral es desarrollar catalizadores heterogéneos bifuncionales activos y selectivos en la reacción de hidrogenación hidrolítica de celulosa. De esta manera se podría contribuir al ambicioso objetivo de reducir las emisiones netas de dióxido de carbono a la atmosfera a través de la utilización de biomasa como fuente de combustibles líquidos. En particular, se han preparado catalizadores de rutenio soportados en materiales carbonosos con centros ácidos para combinar de este modo la actividad hidrogenante del rutenio con la actividad hidrolítica de los centros ácidos. Para ello, se han realizado diversos tratamientos de oxidación a los materiales carbonosos empleados con el fin de mejorar las propiedades ácidas de los soportes. Por otra parte, se ha estudiado el efecto de la adición de ácidos al medio de reacción. Para ello, se han empleado ácido clorhídrico y ácidos silicowolfrámicos (H4SiW12O40 = HPA) en distintas concentraciones. Seguidamente, se preparan catalizadores con heteropoliácidos y nanopartículas de rutenio soportadas en nanotubos de carbono. Tanto de forma conjunta, como independiente. Finalmente, se han estudiado los diversos catalizadores preparados en experimentos en los que se ha empleado el CO2 en estado supercrítico como disolvente.

Orientador: Crispin Humberto Garcia-Cruz / Banca: Eleni Gomes / Banca: Ranulfo Monte Alegre / Banca: Vanildo Luiz Del Bianchi / Banca: Hamilton Cabral / Resumo: O principal produto da fermentação de açúcares por Zymomonas mobilis é o etanol quando glicose e frutose são utilizadas como fontes de carbono. Entretanto, quando sacarose é empregada na fermentação, o rendimento do etanol diminui devido à formação de subprodutos como levana, sorbitol, acetaldeído, ácido acético, pequenas quantidades de alguns álcoois superiores e fenol. A utilização de produtos agroindustriais, como o caldo e melaço de cana-deaçúcar, é uma alternativa para reduzir o custo final dos produtos de fermentação devido à disponibilidade de aquisição e composição química desses substratos. Este trabalho teve como objetivo utilizar substratos alternativos e otimizar as condições de fermentação para a produção de etanol, levana e sorbitol por Zymomonas mobilis CCT 4494. Também foi considerado o efeito da variação do substrato e de sais minerais adicionados nos meios de produção (sintético, caldo e melaços de cana-de-açúcar). Para a obtenção dos produtos de fermentação, foi aplicada a metodologia de superfície de resposta, seguindo um planejamento fatorial do tipo 27-2, de acordo com o modelo proposto por Box e Hunter, onde as variáveis independentes estudadas foram: pH inicial do meio de cultivo, temperatura de incubação, concentração do substrato e efeito da adição de KCl, K2SO4, MgSO4, CaCl2. Durante a realização das fermentações foi observado que a bactéria Zymomonas mobilis CCT 4494 se adaptou nos meios de fermentação contendo altas concentrações de sacarose e suportou a variação do pH e da temperatura de fermentação. O aumento da concentração da fonte de carbono favoreceu a formação dos produtos levana e etanol, entretanto, não houve produção de sorbitol. O meio sintético proporcionou maior rendimento de levana e etanol, enquanto que, os meios alternativos caldo e melaços de cana-de-açúcar... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The main product from fermentation of sugars by Zymomonas mobilis is ethanol when glucose and fructose are used as carbon sources. However, when sucrose is used in the fermentation medium, ethanol yield decreases due to the formation of by-products such as levan, sorbitol, acetaldehyde, acetic acid, small amounts of some superior alcohols and phenol. The use of agro industrial by products, such as sugarcane juice and molasses, is an alternative to reduce the final cost of fermentation products due to the constant availability and to the chemical composition of these by substrates. This study had the aim of using alternative substrates and of optimizing fermentation conditions for the production of ethanol, levan and sorbitol by Zymomonas mobilis CCT 4494. The effect of variation of substrate and mineral salts added to the production media (synthetic, sugarcane juice and molasses) was also considered. To obtain the fermentation products, response surface methodology was employed, following a 27-2 factorial planning, according to the model proposed by Box and Hunter, where the independent variables studied were: initial medium pH, incubation temperature, substrate concentration and effect of the addition of KCl, K2SO4, MgSO4, CaCl2. During the fermentations, it was noted that the bacteria Zymomonas mobilis CCT 4494 well adapted in the media containing high concentrations of sucrose and tolerated pH and temperature variations. The increase of carbon source concentration favored the formation of levan and ethanol, however, there was no sorbitol production. The synthetic medium offered higher levan and ethanol yield, whereas alternative media sugarcane juice and molasses, favored cellular growth. Among the independent variables analyzed with the best medium (synthetic) for biosynthesis of the biopolymer and ethanol, the ones that significantly (p<0.05) affected were KCl, K2SO4, CaCl2... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Die Arbeit befasst sich mit Methoden der Erfassung metabolischer Funktion einer dynamischen Zellkultur in Bioreaktoren zur klinischen Verwendung als Leberunterstützungssystem. Der Fokus liegt auf der Etablierung von Tests zur Qualitätssicherung als effiziente In- Prozess Kontrollen während der Bereitstellungsphase der Zellkulturen. Weitere Ziele sind ein Beitrag zu Wirksamkeitsnachweis und zur Charakterisierung des Systems im Rahmen von Zulassungen als "Biologic". Bei der experimentellen Untersuchung unter Verwendung von Leberzellkulturen aus porcinen Organen wurden der Lidocain- MEGX Test, die Elimination von Galaktose und Sorbitol sowie die Elimination von Ammoniak und die Synthese von Harnstoff, Lactat und Albumin berücksichtigt. Dies erfolgte mittels Bolus- und Fliessgleichgewichtsuntersuchungen sowie Konzentrationsbestimmungen. Die Ergebnisse zeigten für alle Parameter einen hochsignifikanten Unterschied zu Zellfreien Bioreaktoren, sowie einen typischen Verlauf, der in eine initiale Adhäsionsphase, eine stabile Kulturphase und eine darauf folgende erweiterte Phase mit langsamer Abschwächung der Zellleistungen gegliedert werden kann. Die Parameter erwiesen sich prinzipiell alle geeignet für den Einsatz in der Qualitätssicherung der dynamischen Zellkultur. Ein kombiniertes Untersuchungsschema bestehend aus Parametern die die Integrität der Zellmembranen reflektieren, wie die Freisetzung von Enzymen, sowie metabolischen Parametern wie Lidocain, Galaktose, Sorbitol als auch Syntheseparameter, für Proteine Albumin, als Hepatozyten typische Leistungen die Synthese von Harnstoff und der Abbau von Lactat ist in der Lage einen ausreichend umfassenden Einblick in den Status der dynamischen Zellkultur zu liefern. / Objectives of this work were to find easy to handle every day quality assessment procedure for bioreactors that are intended for clinical trials, further more usefulness of these parameters in characterization and standardization of the Liver Support System. Parameters for evaluation had been: Lidocaine, Megx, Sorbitol, Galactose, Urea, Albumin and Lactate. Bolus and Continuous metabolic liver functions tests had been done, for synthesis and detoxification parameters liberation was measured by concentration. Highly significant difference between bioreactor with primary porcine liver cells and cell-free devices was shown by t-tests. Differences to other groups like infected bioreactors had been demonstrated with ANOVA. Results show typical course over the culture period that can be categorized into a initial phase of cell reorganization, a stable culture phase and an extended phase with slow decay. All parameter proved to be suitable for daily routine quality assessment in dynamic cell culture systems. The combination of parameters reflecting different specific cellular function is able to give more comprehensive insights in the status of the cell culture.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Sorbitol é um poliol encontrado em produtos para fins especiais, como diet e light, Dentro deste contexto, incluem-se as lactantes como grandes consumidoras, almejando o retorno mais rápido ao peso pré-gestacional. Devido à grande carência em dados referentes às consequências metabólicas do consumo excessivo destes tipos de produtos, o objetivo deste trabalho foi avaliar os possíveis efeitos da ingestão materna de sorbitol na lactação sobre os perfis nutricional, bioquímico e toxicológico nas proles amamentadas. O teste da Salmonella/microssoma foi utilizado, inicialmente, na avaliação mutagênica e citotóxica com linhagens de S. enterica sorovar Typhimurium (TA97, TA98, TA100, TA102, TA104 e TA1535). Verificamos a capacidade de reversão da mutação (I.M.) e sobrevivência (%), em diferentes concentrações (0,4; 4; 40; 400; 4000 e 5000 &#956;g/placa). Os resultados foram considerados positivos para valores de I.M. &#8805; 2,0. Ratas wistar lactantes (6 por grupo experimental), cada uma com 6 filhotes, receberam sorbitol (0,00015 mg/g/dia; 0,0015 mg/g/dia e 0,15 mg/g/dia), nos primeiros 14 dias da lactação. Neste período, avaliamos a biometria das mães e proles, consumo de ração e ingestão hídrica das mães. Após a lactação, as ratas mães foram ordenhadas, e, junto com as proles, sacrificadas por punção cardíaca, para coleta de sangue total. Os fígados das proles foram submetidos ao método de perfusão, para obtenção de hepatócitos em cultura primária, ao final dos 14 dias de lactação. Os fêmures das proles foram retirados, para obtenção da medula óssea. A bioquímica de sangue das proles (glicose, triglicerídeo, colesterol total, LDL, proteínas totais, albumina, ALT, AST, cálcio total e ionizado) foi analisada, assim como a bioquímica do leite ordenhado (triglicerídeos). Os testes do micronúcleo em medual óssea e hepatócitos, assim como o teste Cometa em sangue total, foram utilizados para avaliação genotóxica e citotóxica, de acordo com as diretrizes da OECD. Os resultados mostraram que, em concentrações mais baixas (0,00015 e 0,0015 mg/g), o sorbitol induziu o ganho de peso, principalmente na menor concentração (0,00015 mg/g), e alterações no perfil lipídico do sangue em todas as concentrações. As quantidades de triglicerídeo no leite variaram em função da dose ingerida, reduzida na maior concentração (0,15 mg/g) e aumentada na menor (0,00015 mg/g). A maior concentração (0,15 mg/g) resultou em perda de peso das mães e proles, diminuição de proteínas viscerais totais, albumina e aumento de enzimas hepáticas (ALT e AST) nas proles. Os resultados do teste da Salmonella/microssoma não indicaram mutagenicidade, entretanto, uma relação de dependência entre dose e Índice de Mutagenicidade (I.M.). Ambos os testes, micronúcleos de medula óssea e hepatócitos, apresentaram uma citotoxicidade dose dependente, estatisticamente significativa em relação ao grupo controle, corroborando com a genotoxicidade do teste Cometa e dependência de dose encontrada no teste da Salmonella/microssoma. Em concentrações mais baixas, parece existir modulação das vias lipogênicas, em contrapartida, nas mais altas a toxicidade parece dificultar tais alterações, induzindo o efeito contrário. Concluimos que o consumo excessivo de sorbitol resulta em alterações metabólicas e toxicológicas em lactentes, mesmo sendo considerado seguro pelo FDA e ANVISA. / Sorbitol is a polyol found in products for special purposes such as diet and light, Within this context, include lactating women as major consumers, aiming for a faster return to pre-pregnancy weight. Due to the great need for data on metabolic consequences of excessive consumption of these types of products, the objective of this study was to evaluate the possible effects of maternal intake of sorbitol in lactation on profiles nutritional, biochemical and toxicological in breastfed offspring. The test Salmonella/microsome was used initially in evaluating cytotoxic and mutagenic to Salmonella enterica sorovar Typhimurium strains deficient in the synthesis of the amino acid histidine. Lactating female Wistar rats (6 per experimental group), each with six puppies received sorbitol (0.00015 mg/g/day, 0.0015 mg/g/day and 0.15 mg/g/day) the first 14 days of lactation. In this period, we evaluate the biometrics of mothers and offspring, feed intake and water intake of the mothers. After lactation, the mother rats were milked, and, along with the proles, sacrificed by cardiac puncture for blood collection total. The livers of offspring were subjected to perfusion method for obtaining hepatocytes in primary culture, the end of the 14 days of lactation. The fêmurs of offspring were removed to obtain bone marrow. The biochemistry of blood offspring (glucose, triglycerides, total cholesterol, LDL, total protein, albumin, ALT, AST, total and ionized calcium) was analyzed as well as the biochemistry of milk milked (triglycerides). Micronucleus tests in bone medual and hepatocytes, as well as the Comet assay in whole blood, were used to evaluate cytotoxic and genotoxic, according to the OECD guidelines. The results showed that at lower concentrations (0.00015 and 0.0015 mg/g), sorbitol induced weight gain, especially at the lower concentration (0.00015 mg/g), and changes in blood lipid profiles in all concentrations. The amounts of triglycerides in milk varied according to the dose ingested reduced at the higher concentration (0.15 mg/g) and increased in the lower (0.00015 mg/g). The highest concentration (0.15 mg/g) resulted in weight loss of mothers and offspring, decreased visceral proteins, albumin and increased liver enzymes (ALT and AST) in the offspring. The test results of the Salmonella/microsome mutagenicity had not, however, a dependency relationship between dose and Mutagenicity Index (MI). Both tests, and bone marrow micronucleus hepatocyte cytotoxicity showed a dose dependent, statistically significant compared to the control group, supporting the Comet genotoxicity testing and dose dependency of the test found Salmonella / microsome. At lower concentrations, there appears to be modulation of lipogenic pathways in return, the higher the toxicity seems to hinder such changes, inducing the opposite effect. We conclude that excessive consumption of sorbitol could result in metabolic and toxicological disorders in infants and lactating rats, even though considered safe by the FDA and ANVISA.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Sorbitol é um poliol encontrado em produtos para fins especiais, como diet e light, Dentro deste contexto, incluem-se as lactantes como grandes consumidoras, almejando o retorno mais rápido ao peso pré-gestacional. Devido à grande carência em dados referentes às consequências metabólicas do consumo excessivo destes tipos de produtos, o objetivo deste trabalho foi avaliar os possíveis efeitos da ingestão materna de sorbitol na lactação sobre os perfis nutricional, bioquímico e toxicológico nas proles amamentadas. O teste da Salmonella/microssoma foi utilizado, inicialmente, na avaliação mutagênica e citotóxica com linhagens de S. enterica sorovar Typhimurium (TA97, TA98, TA100, TA102, TA104 e TA1535). Verificamos a capacidade de reversão da mutação (I.M.) e sobrevivência (%), em diferentes concentrações (0,4; 4; 40; 400; 4000 e 5000 &#956;g/placa). Os resultados foram considerados positivos para valores de I.M. &#8805; 2,0. Ratas wistar lactantes (6 por grupo experimental), cada uma com 6 filhotes, receberam sorbitol (0,00015 mg/g/dia; 0,0015 mg/g/dia e 0,15 mg/g/dia), nos primeiros 14 dias da lactação. Neste período, avaliamos a biometria das mães e proles, consumo de ração e ingestão hídrica das mães. Após a lactação, as ratas mães foram ordenhadas, e, junto com as proles, sacrificadas por punção cardíaca, para coleta de sangue total. Os fígados das proles foram submetidos ao método de perfusão, para obtenção de hepatócitos em cultura primária, ao final dos 14 dias de lactação. Os fêmures das proles foram retirados, para obtenção da medula óssea. A bioquímica de sangue das proles (glicose, triglicerídeo, colesterol total, LDL, proteínas totais, albumina, ALT, AST, cálcio total e ionizado) foi analisada, assim como a bioquímica do leite ordenhado (triglicerídeos). Os testes do micronúcleo em medual óssea e hepatócitos, assim como o teste Cometa em sangue total, foram utilizados para avaliação genotóxica e citotóxica, de acordo com as diretrizes da OECD. Os resultados mostraram que, em concentrações mais baixas (0,00015 e 0,0015 mg/g), o sorbitol induziu o ganho de peso, principalmente na menor concentração (0,00015 mg/g), e alterações no perfil lipídico do sangue em todas as concentrações. As quantidades de triglicerídeo no leite variaram em função da dose ingerida, reduzida na maior concentração (0,15 mg/g) e aumentada na menor (0,00015 mg/g). A maior concentração (0,15 mg/g) resultou em perda de peso das mães e proles, diminuição de proteínas viscerais totais, albumina e aumento de enzimas hepáticas (ALT e AST) nas proles. Os resultados do teste da Salmonella/microssoma não indicaram mutagenicidade, entretanto, uma relação de dependência entre dose e Índice de Mutagenicidade (I.M.). Ambos os testes, micronúcleos de medula óssea e hepatócitos, apresentaram uma citotoxicidade dose dependente, estatisticamente significativa em relação ao grupo controle, corroborando com a genotoxicidade do teste Cometa e dependência de dose encontrada no teste da Salmonella/microssoma. Em concentrações mais baixas, parece existir modulação das vias lipogênicas, em contrapartida, nas mais altas a toxicidade parece dificultar tais alterações, induzindo o efeito contrário. Concluimos que o consumo excessivo de sorbitol resulta em alterações metabólicas e toxicológicas em lactentes, mesmo sendo considerado seguro pelo FDA e ANVISA. / Sorbitol is a polyol found in products for special purposes such as diet and light, Within this context, include lactating women as major consumers, aiming for a faster return to pre-pregnancy weight. Due to the great need for data on metabolic consequences of excessive consumption of these types of products, the objective of this study was to evaluate the possible effects of maternal intake of sorbitol in lactation on profiles nutritional, biochemical and toxicological in breastfed offspring. The test Salmonella/microsome was used initially in evaluating cytotoxic and mutagenic to Salmonella enterica sorovar Typhimurium strains deficient in the synthesis of the amino acid histidine. Lactating female Wistar rats (6 per experimental group), each with six puppies received sorbitol (0.00015 mg/g/day, 0.0015 mg/g/day and 0.15 mg/g/day) the first 14 days of lactation. In this period, we evaluate the biometrics of mothers and offspring, feed intake and water intake of the mothers. After lactation, the mother rats were milked, and, along with the proles, sacrificed by cardiac puncture for blood collection total. The livers of offspring were subjected to perfusion method for obtaining hepatocytes in primary culture, the end of the 14 days of lactation. The fêmurs of offspring were removed to obtain bone marrow. The biochemistry of blood offspring (glucose, triglycerides, total cholesterol, LDL, total protein, albumin, ALT, AST, total and ionized calcium) was analyzed as well as the biochemistry of milk milked (triglycerides). Micronucleus tests in bone medual and hepatocytes, as well as the Comet assay in whole blood, were used to evaluate cytotoxic and genotoxic, according to the OECD guidelines. The results showed that at lower concentrations (0.00015 and 0.0015 mg/g), sorbitol induced weight gain, especially at the lower concentration (0.00015 mg/g), and changes in blood lipid profiles in all concentrations. The amounts of triglycerides in milk varied according to the dose ingested reduced at the higher concentration (0.15 mg/g) and increased in the lower (0.00015 mg/g). The highest concentration (0.15 mg/g) resulted in weight loss of mothers and offspring, decreased visceral proteins, albumin and increased liver enzymes (ALT and AST) in the offspring. The test results of the Salmonella/microsome mutagenicity had not, however, a dependency relationship between dose and Mutagenicity Index (MI). Both tests, and bone marrow micronucleus hepatocyte cytotoxicity showed a dose dependent, statistically significant compared to the control group, supporting the Comet genotoxicity testing and dose dependency of the test found Salmonella / microsome. At lower concentrations, there appears to be modulation of lipogenic pathways in return, the higher the toxicity seems to hinder such changes, inducing the opposite effect. We conclude that excessive consumption of sorbitol could result in metabolic and toxicological disorders in infants and lactating rats, even though considered safe by the FDA and ANVISA.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Orchids are considered the oldest among the ornamental species, and are herbaceous and perennial plants of high commercial value. The objective of this work was to develop protocols for in vitro conservation using the slow growth technique, and acclimatization of species of the subfamily Epidendroideae (Orchidaceae) of Sergipe State. The experiments were conducted in the Laboratory of Tissue Culture and Plant Breeding, Department of Agronomic Engineering, Federal University of Sergipe. We conducted two conservation experiments, both in a completely randomized design, the first in a 4x3x2 factorial scheme, testing four concentrations of salts of MS medium (100%, 75%, 50%, 25% salts), three species (Catasetum macrocarpum, Oeceoclades maculata and Polystachya estrellensis) and two temperatures (18 and 25ºC), and the second in a 3x3x2 factorial scheme, testing three combinations of carbon sources and osmotic regulators (20 g.L-1 sucrose, 10 g.L-1 sucrose + 5 g.L-1 mannitol, 10 g.L-1 sucrose + 5 g.L-1 sorbitol), three species (C. macrocarpum, O. maculata and P. estrellensis) and two temperatures (18 and 25ºC). For acclimatization, the experiment also was conducted in a completely randomized design, testing eight substrates [sand and earthworm castings (4:1); sand, coconut coir and earthworm castings (2:2:1); sand, crushed pine bark and earthworm castings (2:2:1); sand, crushed pine bark, coconut coir and earthworm castings (2:1:1:1); sand; sand and coconut coir (1:1); sand and crushed pine bark (1:1); sand, crushed pine bark and coconut coir (2:1:1)] and two species (O. macrocarpum and C. maculata). For in vitro conservation of C. macrocarpum, O. maculata and P. estrellensis for a period of 450 days, we should use culture medium containing 25% of MS salts at a temperature of 25°C or 20 g.L-1 of sucrose at 25°C. Acclimatization of micropropagated seedlings of C. macrocarpum can be performed using sand, crushed pine bark and earthworm castings (2:2:1) as the substrate, and for O. maculata we recommend to use only sand. / As orquídeas são consideradas as mais antigas entre as espécies ornamentais, sendo plantas herbáceas e perenes e de alto valor comercial. Diante disso objetivou-se com o presente trabalho desenvolver protocolos de conservação in vitro sob crescimento lento e aclimatização de espécies da subfamília Epidendroideae (Orchidaceae) do Estado de Sergipe. Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Cultura de Tecidos e Melhoramento Vegetal do Departamento de Engenharia Agronômica (DEA) da Universidade Federal de Sergipe (UFS). Foram realizados dois experimentos de conservação, ambos em delineamento inteiramente casualizado, sendo o primeiro em esquema fatorial 4x3x2, testando quatro concentrações de sais do meio MS (100%, 75%, 50%, 25% dos sais), três espécies (Catasetum macrocarpum, Oeceoclades maculata e Polystachya estrellensis) e duas temperaturas (18 e 25ºC), e o segundo em fatorial 3x3x2, testando três combinações de fontes de carbono e reguladores osmóticos (20 g.L- 1 de sacarose; 10 g.L-1 de sacarose + 5 g.L-1 de manitol; 10 g.L-1 de sacarose + 5 g.L-1 de sorbitol), três espécies (C. macrocarpum, O. maculata e P. estrellensis) e duas temperaturas (18 e 25ºC). Para a aclimatização o experimento também foi implantado em delineamento inteiramente casualizado, testando oito misturas de substratos [areia e húmus de minhoca (4:1); areia, pó de coco e húmus de minhoca (2:2:1); areia, casca de pinus triturada e húmus de minhoca (2:2:1); areia, casca de pinus triturada, pó de coco e húmus de minhoca (2:1:1:1); areia; areia e pó de coco (1:1); areia e casca de pinus triturada (1:1); areia, casca de pinus triturada e pó de coco (2:1:1)] e duas espécies (C. macrocarpum e O. maculata). Para conservação in vitro de C. macrocarpum, O. maculata e P. estrellensis por um período de 450 dias, deve-se utilizar meio de cultura contendo 25% dos sais MS à temperatura de 25ºC ou 20 g.L-1 de sacarose à 25ºC. A aclimatização de plântulas de C. macrocarpum pode ser realizada utilizando areia : casca de pinus triturada : húmus de minhoca (2:2:1) como substrato e para O. maculata recomenda-se somente a utilização de areia.