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Uncovering the Listeria monocytogenes virulence traits / Revelando as características de virulência de Listeria monocytogenes

Camargo, Anderson Carlos 25 August 2017 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-02-21T13:02:13Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2137513 bytes, checksum: 7725910b3e0d21458b72ca20693db1f2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-21T13:02:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2137513 bytes, checksum: 7725910b3e0d21458b72ca20693db1f2 (MD5) Previous issue date: 2017-08-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Listeria monocytogenes é uma bactéria Gram-positiva comumente encontrada no ambiente de processamento de alimentos, produtos in natura e processados. Esse patógeno é reconhecido como o agente causador da listeriose, uma doença grave que afeta principalmente indivíduos de grupos de risco. O presente estudo teve como objetivo caracterizar isolados de L. monocytogenes recuperados no Brasil a partir de fontes clínicas, ambiente de processamento de produtos cárneos, e de carne bovina. Os perfis de susceptibilidade aos antibióticos, genes de virulência, diversidade de sorotipos, capacidade de invadir, replicar e se disseminar em células hospedeiras, bem como a morte celular e a produção de IFN induzidas por isolados de L. monocytogenes foram caracterizados. Todos os isolados apresentaram sensibilidade aos antimicrobianos utilizados para o tratamento da listeriose, no entanto a maioria apresentou resistência ou resistência intermediária à clindamicina e à oxacilina. A sorotipagem molecular produziu resultados contraditórios para sete isolados do sorotipo 1/2a, que foram positivos para o gene lmo1118 e exibiram o perfil IIc (sorotipos 1/2c ou 3c). Além disso, quinze isolados do sorotipo 4b amplificaram o gene lmo0737, e foram classificados como atipico IVb-v1. O potencial de invadir células Caco-2 foi significativamente afetado pela presença de codons de parada prematuros (PMSCs) no gene inlA do sorotipo 1/2c (p < 0,005). As cepas variaram amplamente em seus tempos de duplicação intracelular em celulas Caco- 2, e não houve relação clara entre sorotipo ou fonte. Foram observadas diferenças significativas entre os sorotipos com relação a disseminação em células Caco-2; isolados do sorotipo 1/2a apresentaram defeito na disseminação celular, enquanto isolados do sorotipo 1/2b apresentaram maior habilidade de disseminação celular (p <0,0001). Além disso, identificamos três isolados de sorotipo 4b que se disseminaram em uma área aproximadamente duas vezes maior que a cepa de referência 10403S. Não foram observadas tendências quanto aos tempos duplicação intracelular em iBMDM, comparando fontes de isolamento e sorotipos. Os resultados indicam que a replicação intracelular é determinada pelas características genotípicas de cada isolado. A morte celular induzida por alguns isolados após a infecção de iBMDM foi dependente da enzima Caspase 1, indicando que eles induzem morte celular por piroptose. Alguns isolados também induziram alta produção de INF pela linhagem celular iBMDM. Usando macrófagos primários, foi revelado que a produção de INF foi sempre STING dependente, em alguns casos totalmente cGAS independente, parcialmente cGAS dependente, ou mesmo cGAS dependente. Este trabalho caracterizou o perfil patogênico de isolados de L. monocytogenes, permitindo uma melhor compreensão dos mecanismos de infectividade desse patógeno, e levando a uma análise mais profunda dos genomas e outras abordagens experimentais para revelar os mecanismos associados aos fenótipos de virulência mais extremos. / Listeria monocytogenes is a Gram-positive bacterium commonly isolated from food processing environment, raw and processed foods. It is recognized as the causative agent of listeriosis, a serious disease that affects mainly individuals from risk groups. The present study aimed to characterize L. monocytogenes isolates recovered in Brazil from clinical sources, meat processing environmental and beef. Antibiotic resistance profiles, virulence genes, serotype diversity, ability to invade, replicate and spread in host cells, as well as cell death and IFN production induced by L. monocytogenes isolates were characterized. All isolates presented sensitivity to antimicrobials used for listeriosis treatment while most of them presented resistance or intermediate resistance to clindamycin and oxacillin. Molecular serogrouping produced contradictory results for seven isolated from serotype 1/2a, which were positive for the gene lmo1118 and exhibited the profile IIc (serotypes 1/2c or 3c). In addition, fifteen isolates from serotype 4b amplified the gene lmo0737, being classified as atypical IVb-v1. The potential to invade Caco-2 cells was significantly affected by the presence of premature stop codons (PMSCs) in inlA gene of isolates from serotype 1/2c (p < 0.005). The isolates varied widely in their intracellular doubling times, and there was no clear relationship between serotype or source. There were significant differences between serotypes for cell-to-cell spread in Caco-2 cells, isolates from serotype 1/2a were generally impaired in their spreading ability while most os isolates from serotype 1/2b exhibited increased spreading ability (p < 0.0001). In addition, we identified three isolates from serotype 4b that spread nearly twice as much as the reference strain 10403S. No trends were observed regarding intracellular doubling times in iBMDM by comparing sources and serotypes; based on these results, intracellular growth seems to be determined by genetic characteristics of each strain. The cell death induced by some isolates after infection of iBMDM was Caspase 1 dependent, indicating that they induce pyroptosis. Some of these isolates also induced high INF production by iBMDM. Using primary macrophages, it was revealed that INF production was always STING dependent, and in some cases it is fully cGAS independent, partially cGAS dependent, or even mostly cGAS dependent. We have characterized L. monocytogenes isolates that could provide novel insight into infectivity of this pathogen that may not be revealed by studying common laboratory strains, demanding further analysis of their genomes and other experimental approaches to reveal the mechanisms associated with the most extreme phenotypes exhibited.
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Imunização experimental de bovinos com o peptídeo recombinante rBbo23290 para o controle de Babesia bovis (Babes 1888, Starcovich 1893) : avaliação de parâmetros clínicos e imunológicos / Experimental immunization of cattle with recombinant peptide rBbo23290 for control of rBbo23290 bovis (Babes 1888 Starcovich, 1983): review of clinical and immunological parameters

Hernández Ortiz, Byron Abdel 19 March 2014 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-12-16T08:30:10Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 958308 bytes, checksum: 9c5736945cebbeb560b27c1893c60060 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-16T08:30:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 958308 bytes, checksum: 9c5736945cebbeb560b27c1893c60060 (MD5) Previous issue date: 2014-03-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Tomando como base clones de Pichia pastoris transfretados com o gene desenhado a partir do peptídeo sintético SBbo23290, iniciou-se a produção do antígeno recombinante em leveduras Pichia pastoris. O material recuperado foi filtrado e concentrado em membranas de Amicon, com tamanho de filtro de 30 kDa e 3 kDa. Para garantir o máximo de proteína antigênica purificada, para ser usada em teste como candidato vacinal em Bovinos Bos taurus taurus com idade entre 8-12 meses, os quais receberam três imunizações subcutâneas com intervalo de 30 dias do peptídeo recombinante rBbo23290 mais saponina, 30 dias após da ultima imunização, os bovinos foram desafiados com amostra virulenta de B. bovis avaliando-se parâmetros clínicos como; hematócrito, parasitemia e temperatura, além do acompanhamento do desenvolvimento da resposta imune humoral, mediante quantificação de IgG total. Os parâmetros hematológicos e a temperatura foram analisados semanalmente durante o período de imunização, e diariamente a partir do 7o dia pós-desafio com o parasita. Os exames sorológicos foram realizados semanalmente durante todo o experimento, os resultados deste experimento demostraram que o peptídeo recombinante tem atividade imunogênica que foi comprovado com o incremento nos níveis de IgG total, mas na hora do desafio biológico evidenciou-se alguma possível falha na diluição do imunógeno ou uma alta dose na inoculação do parasita patogênico, o qual desenvolveu uma resposta diferente da esperada em alguns dos animais vacinados, mesmo assim conseguiu- se demostrar que o peptídeo recombinante possui atividade imunogênica, e pode ser considerado como um potente candidato vacinal para o controle da doença causada pela B. bovis. Precisam-se estudos adicionais para medir e quantificar o tipo de resposta produzida pela imunização, a dosificação ideal para obter a melhor resposta imune nos bovinos. Também, análise das variáveis físicas químicas e biológicas do peptídeo rBbo23290 para entender a influência do tipo e a intensidade da resposta imunológica dos animais no momento da inoculação e no desafio biológico. / Pichia pastoris clones expressing the synthetic peptide SBbo23290 were used to produce this recombinant antigen. The recombinant peptide rBbo 23290 with saponin was used to vaccinate bovines Bos taurus taurus. The animals were then challenged with virulent strain Babesia bovis. As clinical parameters were monitored: hematocrit, hemoglobine, parasitemy, and temperature. Furthermore, the IgG was quantified. Our results showed that some of the vaccinated animals presented an unexpected reaction. This could be due either to a mistake on the dilution of the peptide, or to an unproved higher inoculation of the pathogen strain. Nevertheless, it was demonstrated that our synthetic antigen was immunogenic, based on the increase total levels of IgG. Therefore, it could be considered as a candidate to control bovine babesiosis by B. bovis. Nonetheless, future research is needed to measure and quantify the response activated by the immunization. Furthermore, a suitable dose should be established, aiming to obtain an optimal immunological response. Moreover, it will be worthy to analyze physical, chemical, and biological parameters of this protein, which probably influence the immunological response of the animals.
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Determinações de imunoglobulinas G, inibidores de tripsina e lactoferrina em colostros de vacas mestiças holandês-zebu / Immunoglobulin G, trypsin inhibitor and lactoferrin concentrations in colostrum from crossbred holstein-zebu dairy cows

Soares Filho, Paulo Martins 21 August 2000 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-16T10:22:50Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 287467 bytes, checksum: 347509faadce208197eebdbfc17e054d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-16T10:22:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 287467 bytes, checksum: 347509faadce208197eebdbfc17e054d (MD5) Previous issue date: 2000-08-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Essa pesquisa foi conduzida em seis fazendas de criação de bovinos leiteiros mestiços holandês-zebu de diferentes graus de sangue, localizadas nas microrregiões de Ponte Nova e Viçosa, Minas Gerais. Os objetivos consistiram em conhecer os níveis de IgG, inibidores de tripsina e lactoferrina encontrados em colostros dos referidos animais. Para isso, as determinações de IgG e de lactoferrina foram feitas através de imunodifusão radial simples e, no caso dos inibidores de tripsina, foi empregada técnica colorimétrica, utilizando-se o substrato sintético D-L, BApNA. Os níveis médios de IgG (154,94 mg/ml) e de inibidores de tripsina (0,9577 mg de tripsina inibida/ml) não foram influenciados pelos diferentes grupos de graus de sangue e se apresentaram muito superiores aos relatados para raças taurinas puras. A grande amplitude verificada para o intervalo de confiança envolvendo níveis médios de IgG não tem implicações práticas, já que seu limite inferior de 134 mg/ml é bastante elevado. Por outro lado, em se tratando de lactoferrina, vacas com mais de 75% de grau de sangue holandês apresentaram concentrações médias mais altas que as pertencentes aos demais grupos de grau de sangue. Para essa última característica, os valores médios verificados em cada grupo (1 a 4) foram, respectivamente, 0,65 mg/ml, 0,82 mg/ml, 1,58 mg/ml e 0,96 mg/ml, mas a alta variabilidade encontrada não permitiu obter uma estimativa média representativa, segundo os diferentes grupos estabelecidos. Concluiu-se, então, que, na maioria das vezes, não se justifica o emprego de métodos artificiais de fornecimento do colostro em se tratando de animais mestiços holandês-zebu. Em tese, bastaria que se recorresse à mamada natural assistida, nas primeiras horas de vida, para assegurar que bezerros mestiços holandês-zebu venham a receber adequadas concentrações de anticorpos colostrais necessários à transferência de imunidade passiva. / Colostrum samples from 88 crossbred holstein-zebu (HZ) dairy cows were analyzed for immunoglobulin G (IgG), trypsin inhibitor (TI) and lactoferrin (LF) concentrations. The first and the last were determined by single radial immunodifusion and TI by colorimetric procedure with D,L-BApNA chromogenic subtract of trypsin. Mean colostral levels of IgG and TI were 145,97 mg/ml and 0,9577 mg of trypsin inhibited/ml, respectively. Both were not influenced by group of crossbred HZ. Additionally, it was observed that the large confidence interval of IgG mean was not important because its low limit (134 mg/ml) is so high. Lactoferrin concentrations were affect by crossbred groups and the means were 0,65 mg/ml, 0,82 mg/ml, 1,58 mg/ml and 0,96 mg/ml for each group of cows. Crossbred cows with >75% HZ showed higher LF concentrations, although a representative general mean could not be obtained due its high variability. Considering these results, mainly IgG concentrations, it was concluded that it is not necessary an artificial method of feeding colostrum to crossbred holstein-zebu calves. Probably, the assisted natural sucking as soon after birth as possible is sufficient to get passive immune transfer.
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Produção de clones secretores de anticorpos (IgG) contra o vírus da doença infecciosa bursal / Production of clone secreting of antibodies (IgG) against infectious bursal disease virus

Marín, Sandra Yuliet Gómez 10 April 2007 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-16T14:28:34Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 605491 bytes, checksum: 3d6eb9f3a272ae7d5ab2a5509a143dac (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-16T14:28:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 605491 bytes, checksum: 3d6eb9f3a272ae7d5ab2a5509a143dac (MD5) Previous issue date: 2007-04-10 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O vírus da doença infecciosa bursal (IBDV) é o agente etiológico de uma das mais importantes doenças para a indústria avícola mundial, e se caracteriza por ser altamente contagioso e produzir um estado de imunodepressão nas aves, trazendo falhas na vacinação e susceptibilidade a outras doenças, o que resulta em perdas econômicas ao setor avícola. O Brasil é o maior exportador de frango de corte do mundo o que motiva ao setor de sanidade avícola a oferecer alternativas de diagnóstico confiáveis, e rápidas, com tecnologia nacional. Por este motivo, a proposta do presente trabalho foi a produção de anticorpos monoclonais (AcM) de alta afinidade contra o vírus da doença infecciosa bursal (IBD), para uma possível utilização futura em testes de imunodiagnóstico do tipo imunofluorescência, imunohistoquímica ou ELISA de captura. Para a produção dos AcM se usou vírus inteiro proveniente de uma vacina comercial, estirpe intermediaria (Bur-706) o qual se multiplico em células VERO e foi purificado por ultracentrifugação em gradiente de sacarose, foi utilizado para a imunização dos camundongos BALB/c, usando como adjuvante saponina, o que permitiu a obtenção de anticorpos policlonais capazes de revelar a enzima por ELISA. A fusão das células esplênicas dos camundongos imunizados e o mieloma SP2/0 resultou na obtenção de 2 famílias de hibridomas (2H11 e 5C7) secretores de anticorpos. Após clonagem por diluição limitante, foram obtidos 3 clones secretores de AcM da classe IgG. Os três AcM obtidos foram capazes de revelar as proteínas virais VPX e VP2 por ”western blotting”, reconhecendo a proteína de 47 kDa e 41 kDa. A definição dos isótipos reconhecidos pelos AcM obtidos devem ser objeto de investigações futuras, de modo a permitir a utilização dos anticorpos em ensaios imunoenzimáticos para estudos epidemiológicos da doença o para diferenciar vírus vacinal e de campo. / The infectious bursal disease virus (IBDV) causes highly contagious and immunosuppressive disease for the world poultry, resulting in an impaired response to vaccination and susceptibility to other diseases, and severe economical losses to the poultry activity. Brazil is the world ́s largest exporter of chicken meat, condition which demands reliable and rapid procedures for diagnosis. The proposal of the present work is the production of monoclonal antibodies (MAbs) of high affinity against IBDV. The IBDV was strain S 706 (the intermediate vaccine) was replicated in VERO cell and purified by sucrose gradient, for ELISA and mice inoculation. For the immunization of the mice BALB/c using as a saponin adjuvant, that allowed an inflammation reaction which enhanced the antibody response, detectable by ELISA. The fusion of splenic cells of the immunized mice and the mieloma SP2/0 resulted in 2 hybridoma families (2H11 and 5C7). After cloning by limiting dilution, 3 clones secretors of MAbs from IgG class were obtained. The 3 obtained MAbs were capable to reveal the proteins turn VPX and VP2 by "western blotting", respectively of 47 kDa and 41 kDa. The definition of the isotypes recognized by obtained MAbs must be object of future characterization to allow the use of the antibodies in immunodiagnostic tests such as immunofluorescence, immunocitochemistry or capture ELISA, for epidemiologic of the disease researches or to differentiate vaccine’s virus of the field virus.
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Fungos helmintófagos Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Arthrobotrys robusta no controle de Oesophagostomum spp. parasito intestinal de suínos / Helmintofagos fungi, Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium and Arthrobotrys robust in control of Oesophagostomum spp. of intestinal parasite of pigs

Rodrigues, João Victor Facchini 19 February 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-07-14T10:29:37Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 958567 bytes, checksum: 144a5e3060830fe3bfec91e350e11928 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T10:29:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 958567 bytes, checksum: 144a5e3060830fe3bfec91e350e11928 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / A produção de suínos em sistemas semi-intensivo e extensivo constitui uma alternativa aos sistemas tradicionais de criação, entretanto, a infecção por helmintos parasitas pode ser favorecida. Dentre as parasitoses que acometem os suínos, se destacam os helmintos pertencentes aos gêneros Ascaris, Strongyloides, Hyostrongylus e Oesophagostomum, que apresentam suas formas infectantes presentes no ambiente, causando perdas econômicas no rebanho. Diante disso, esse trabalho teve como objetivos: Avaliar a eficácia in vitro da formulação fúngica contendo o fungo helmintófago Duddingtonia flagrans sobre larvas infectantes de Oesophagostomum spp.; Observar a dinâmica de eliminação de esporos do fungo helmintófago Duddingtonia flagrans e avaliar a viabilidade após a passagem pelo trato gastrintestinal de suínos; Avaliar a eficácia in vitro dos isolados dos fungos helmintófagos Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Arthrobotrys robusta, sobre larvas infectantes de Oesophagostomum spp. O trabalho foi dividido em dois capítulos, onde o primeiro verificou a eficácia in vitro dos isolados de Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium e Arthrobotrys robusta, sobre larvas infectantes de Oesophagostomum spp., onde todos os isolados demonstraram capacidade predatória eficaz sobre larvas infectantes. O segundo capitulo foi subdivido em três ensaios, que foi verificado a predação in vitro da formulação fúngica sobre larvas infectantes de Oesophagostomum spp. em placas de Petri, em coproculturas, e após a passagem pelo trato gastrintestinal de suínos. Ambos os ensaios obtiveram resultados satisfatórios, quanto a predação das larvas infectantes, e os isolados fúngicos suportaram a passagem pelo trato gastrintestinal, sem perder a capacidade de predação sobre as larvas infectantes. Os resultados apresentados nesse trabalho demonstram alta eficiência da formulação fúngica feita a partir do isolado de Duddingtonia flagrans em farelo de arroz, e dos isolados Monacrosporium thaumasium e Arthrobotrys robusta na predação de larvas infectantes de Oesophagostomum spp., podendo ser uma alternativa no controle de formas infectantes de nematoides parasitas de suínos. / The pigs production in semi-intensive and extensive systems constitute an alternative to traditional farming systems, however, infection with parasitic helminths can be favored. Among the parasites that affect pigs, stand out helminths belonging to the genera Ascaris, Strongyloides, Hyostrongylus and Oesophagostomum, which present their infective forms present in the environment causing economic losses in the herd. Thus, this study aimed: To evaluate the in vitro efficacy of fungi isolated from helmintófagos Duddingtonia flagrans on infective larvae of the Oesophagostomum spp.; Observing the dynamics of elimination of spores and assessing the viability after passage through the gastrointestinal tract of pigs; and to assess the in vitro efficacy of fungi isolated thaumasium helmintófagos and Arthrobotrys Duddingtonia robust on flagrans, Monacrosporium infective larvae of the Oesophagostomum spp. The study was divided in two chapters, where the first verified in vitro efficacy of isolated Duddingtonia flagrans, Monacrosporium thaumasium and Arthrobotrys robust on infective larvae of Oesophagostomum spp., where all isolates showed predatory capacity. The second chapter subdivided into three tests, to verified in vitro predation of fungal formulation rises infective larvae of Oesophagostomum spp. in Petri dishes in fecal cultures and after passage through the gastrointestinal tract of pigs. Both assays obtained satisfactory results, and predation of infective larvae, and supporting the passage through the gastrointestinal tract without losing predation capacity. The results presented in this study demonstrate high efficiency of the fungal formulation made from the isolated Duddingtonia flagrans in rice bran, and isolated Monacrosporium thaumasium and Arthrobotrys robust in predation infective larvae of the Oesophagostomum spp., could be an alternative to control infective forms of nematode parasites pigs.
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Parâmetros reprodutivos e comportamentais de coelhas Nova Zelândia influenciados pela cauterização dos ductos incisivos e pelo efeito do macho / Reproductive and behavioral parameters of female New Zealand rabbits influenced by cauterization of incisive ducts and by "male effect"

Coelho, Polyana Galvão Bernardes 29 January 2016 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-07-14T11:26:34Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2240112 bytes, checksum: 4939a4fe99132503c43837da656e03d6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T11:26:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2240112 bytes, checksum: 4939a4fe99132503c43837da656e03d6 (MD5) Previous issue date: 2016-01-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A atividade reprodutiva nas coelhas domésticas (Oryctolagus cunniculus) é controlada pelo sistema nervoso, e o mesmo recebe influência tanto do meio interno quanto do meio externo. O órgão vomeronasal liga o ambiente externo a áreas do encéfalo responsáveis por comportamentos reprodutivos e maternais. Baseado nestes aspectos, o estudo visou esclarecer como os comportamentos reprodutivo e maternal e a anatomia dos órgãos genitais seriam influenciados pela obstrução dos ductos incisivos associados à presença ou não do efeito do macho. Para este estudo foram utilizadas 30 coelhas da raça Nova Zelândia dividias em dois experimentos. No primeiro experimento, 10 das 20 coelhas com idade de 50 dias tiveram seus ductos incisivos cauterizados. No segundo experimento, 5 das 10 coelhas tiveram seus ductos incisivos cauterizados com a idade de 50 dias, enquanto as outras 5 foram submetidas à cauterização 10 dias após o parto. As coelhas do primeiro experimento foram divididas em 4 grupos baseados na associação da cauterização ou não dos ductos incisivos com a presença ou não do efeito do macho. As coelhas do segundo experimento foram destinadas exclusivamente para reprodução. As coelhas do primeiro experimento foram pesadas semanalmente, tiveram amostras de sangue coletadas para análise dos hormônios luteinizante (LH), folículo estimulante (FSH) e 17β-estradiol (E2) a cada dez dias, e o comportamento avaliado segundo um etograma adaptado a este estudo. Ao atingirem a idade de 125 dias, estas 20 coelhas foram eutanasiadas para coleta do órgão vomeronasal, do fígado e da vesícula biliar, fragmento dos músculos reto femoral e vasto medial, fragmento da epífise proximal de fêmur e órgãos genitais. A pesagem dos animais mostrou não haver diferença entre a taxa de crescimento e o ganho de peso entre os quatro grupos, mas a presença do macho influenciou no peso independente da cauterização dos ductos incisivos. A avaliação da coloração da vulva não mostrou diferença entre os grupos durante o experimento. O comportamento destas fêmeas mostrou diferença no tempo de auto-catação entre os grupos na ausência do efeito do macho. Os órgãos genitais não apresentaram diferenças anatômicas e histológicas que incapacitassem as fêmeas de gestar. O cálculo do índice hepatossomático não mostrou diferença entre os grupos. O índice gonadossomático mostrou diferença quando associado ao efeito do macho, independente da cauterização dos ductos incisivos estar ou não presente. A qualidade da carcaça se manteve a mesma para os grupos testados. O comprimento do órgão vomeronasal para os animais cujos ductos incisivos foram cauterizados foi menor que nos animais controles independente do efeito do macho. Dos três hormônios avaliados, o E2 mostrou diferença aos 120 dias de idade entre as coletas da manhã e da noite no grupo cujos ductos incisivos foram cauterizados e submetidos ao efeito do macho e no grupo controle sem efeito do macho. Este mesmo hormônio também mostrou diferenças entre as idades na coleta do período noturno para o grupo controle sem efeito do macho. Os níveis séricos do hormônio LH noturno foram diminuindo com a idade para o grupo controle com efeito do macho, enquanto o nível sérico do FSH diminuiu com a idade para o grupo cujos ductos incisivos foram cauterizados sem efeito do macho. As coelhas do segundo experimento não mostraram alteração de comportamento frente ao macho; a capacidade de gestar, o comportamento frente aos láparos e a habilidade materna permaneceram depois da cauterização dos ductos. Estes resultados mostraram que as coelhas mantiveram a sua capacidade reprodutiva intacta ao contrário de outras fêmeas, como ratas, camundongas e porquinhas da Índia. / The reproductive activity on female domestic rabbits (Oryctolagus cunniculus) is controlled by nervous system which, in its turn, is influenced both by internal and external means. The vomeronasal organ binds external environment and cerebrum areas responsible for reproductive and maternal behaviors. Based on these aspects, this study aimed to enlighten how reproductive and maternal behaviors and anatomy of reproductive organs would be influenced by the obstruction of incisive ducts; and how this obstruction is associated to the "male effect". For this study it was used 30 New Zealand female rabbits divided between two experiments. In the first experiment, 10 of the 20 female rabbits 50 days old had its incisive ducts cauterized. In the second experiment, 5 of the 10 female rabbits had their incisive ducts cauterized at 50 days old while the other 5 were submitted to cauterization 10 days after parturition. The female rabbits of the first experiment were divided into 4 group based on association between cauterization or not of incisive ducts and on presence or not of "male effect". The female rabbits of the second experiment were destined exclusively to reproduction. The females of the first experiment were weighted weekly, had blood samples collected every 10 days for analysis of luteinizing hormone (LH), follicle-stimulating hormone (FSH), 17β-estradiol (E2) and had their behavior evaluated by an ethogram adapted for this study. When 125 days old, these 20 females were euthanized for collection of vomeronasal organ, liver, fragments of rectus femoris and vastus medialis muscles, fragment of proximal femoral epiphysis, and reproductive organs. The weighing on the animals showed no difference between growth rate and weight gain among the 4 groups but the presence of male influenced on weight regardless of cauterization. Evaluation of coloring on the vulva showed no difference among groups during the experiment. The behavior of these female rabbits showed difference among groups in time spent on self- grooming in the absence of "male effect". The reproductive organs showed no anatomic or histological differences that could unable the females of gestating. The calculation of hepatosomatic index showed no difference between groups. The gonadosomatic index showed difference when associated to "male effect" regardless of presence or absence of cauterization. The carcass quality was the same among tested groups. The length of the vomeronasal organ from animals with cauterized incisive ducts was lesser than from control animals regardless of "male effect". Among the three tested hormones, E 2 showed difference at 120 days old between collects in the morning and at night on the group with cauterized incisive ducts and submitted to "male effect" and on the control group without "male effect". This same hormone also showed differences between ages in the night collect for control without "male effect" group. The serum levels of nightly LH decreased with age on control with "male effect" group while serum level of FSH decreased with age on the group with cauterized incisive ducts without "male effect". The female rabbits of the second experiment showed no behavioral change in face of male; the capacity of gestating, the behavior with young rabbits and maternal skills remained after cauterization of the ducts. These results showed that female rabbits kept their reproductive ability intact in opposite to other females like rats, mices and guinea pigs.These results showed that female rabbits kept their reproductive ability intact in opposite to other females.
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Manejo de bovinos em unidades familiares em transição agroecológica / Cattle handling in family properties in transition to agroecology

Furtado, Silvia Dantas Costa 29 February 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-09-14T13:07:52Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1528008 bytes, checksum: 73d33b843848653c120a760f0cc235b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-14T13:07:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1528008 bytes, checksum: 73d33b843848653c120a760f0cc235b6 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este estudo faz parte de um conjunto de estudos realizados com agricultores e agricultoras que trabalham com sistemas agroflorestais na região da Zona da Mata de Minas Gerais e teve como objetivo analisar a produção de bovinos em propriedades da agricultura familiar em transição agroecológica localizadas em municípios da Zona da Mata de Minas Gerais. A caracterização da atividade pecuária foi realizada nos municípios de Araponga e Divino. A opção metodológica foi a pesquisa etnográfica. Foi observado que o padrão racial predominante nas propriedades familiares avaliadas foi de animais cruzados Holandês–Zebu. Em Araponga e Divino, o rebanho existente nas propriedades é em média 5 e 14 animais por família, respectivamente. A atividade pecuária na maioria das propriedades é exercida pelos homens. As vacinas utilizadas para imunização dos animais são contra febre aftosa, raiva, brucelose e carbúnculo sintomático. Em relação às enfermidades dos animais, a diarreia em bezerros foi apontada como um dos principais problemas sanitários existentes. A presença de ectoparasitas, como carrapatos e bernes foi outro problema apontado pelos agricultores. Em Divino, observou-se que o tratamento dos animais ocorreu principalmente através do uso de medicamentos alopáticos, enquanto que em Araponga, prevaleceu os tratamentos fitoterápicos e homeopáticos. A principal dificuldade relatada em relação ao manejo reprodutivo dos animais foi a ausência de touro nas propriedades. Em relação à compra, venda ou troca de animais, os agricultores relataram que geralmente recorrem a pessoas conhecidas, com as quais possuem relação de confiança. No estudo sobre alimentos alternativos para bovinos, as espécies selecionadas foram: Sollanun mauritianum (capoeira branca), Senna macranthera (fedegoso), Aegiphila sellowiana (papagaio), Inga subnuda (ingá), Machaerium hirtum (Vell.) Stellfeld (bico-de-andorinha), Persea americana Mill. (abacate), Musa sp. cv. Prata (banana) e Musa sp. cv. Maçã (banana). Amostras desses alimentos foram coletadas para definição da composição nutricional em duas propriedades localizadas na comunidade de Pedra Redonda, município de Araponga. Foram determinados os teores de matéria seca (MS), proteína bruta (PB), extrato etéreo (EE), carboidratos não-fibrosos (CNF), fibra insolúvel em detergente neutro corrigida para cinzas e compostos nitrogenados (FDNcp), cinzas (CZ), fibra insolúvel em detergente neutro indigestível (FDNi), fibra insolúvel em detergente ácido (FDA), lignina (lig) e digestibilidade in vitro da matéria seca (DIVMS) e obtidas informações sobre as formas de uso dos alimentos na dieta dos animais. Os agricultores fornecem os alimentos alternativos nos currais e, em relação às espécies presentes nas pastagens, essas geralmente são consumidas no próprio local pelos animais. Dentre as espécies arbóreas, a capoeira branca foi a mais procurada para consumo pelos animais e em relação às bananeiras, os animais demonstraram maior preferência pelo cultivar maçã, pelo pseudocaule em relação às folhas, e pelas plantas mais jovens. Em relação à composição nutricional, as espécies arbóreas apresentaram teores consideráveis de proteína bruta (12,82% a 24,5%), mas, com exceção da capoeira branca, também apresentaram conteúdos consideráveis de lignina (13,42% a 30,61%) e baixos teores de EE. A capoeira branca foi a espécie que apresentou maior conteúdo médio de PB (24,5%), cinzas (8,26%), e menores de FDNcp (36,3%), FDA (24,79%), Lig (8,38%) e maior DIVMS (74,02%). O ingá foi a espécie que apresentou os teores mais elevados de FDNi, FDA, e Lig, com respectivamente 73,41%, 46,09% e 30,61% na matéria seca, e a menor DIVMS (33,04%). Em relação às bananeiras, as folhas apresentaram maiores conteúdos de proteína bruta (14,08% e 13,99% respectivamente para os cultivares prata e maçã) em relação aos pseudocaules. Os pseudocaules apresentaram maior conteúdo de CNF (44,01% e 57,46%) e menores teores de FDNi (16,7% e 9,37%) e Lig (5,06% e 2,69%) que as folhas. Os resultados obtidos evidenciam que as estratégias desenvolvidas pelos agricultores para contornarem as dificuldades relacionadas ao manejo dos animais potencializam a atividade pecuária leiteira nas propriedades. A importância da atividade pecuária nas propriedades familiares não se restringe somente à questão econômica, possuindo um significado mais amplo para as famílias agricultoras, como contribuição para a segurança alimentar das famílias e para potencializar os sistemas produtivos vegetais na propriedade, possibilitando assim diversificação produtiva nas propriedades e maior autonomia das famílias. / This study is part of a group of studies with small farmers that work with agroforestry systems in the Zona da Mata region of Minas Gerais. The objective of this work was to analyse the production of cattle in family agriculture properties which are in transition to agroecology. The characterization of livestock activity was performed in the municipalities of Araponga and Divino. The methodology of choice was ethnographic research. The most abundant breed in the family properties evaluated was of animals of Holstein-Zebu cross. In Araponga and Divino, the farmers had on average 5 and 14 animals respectively. The cattle-farming activity is typically conducted by men. The cattle are vaccinated against: foot & mouth disease, rabies, brucelosis and carbunculosis. One of the principal sickness issues observed in the study was diaherrea in calves. The presence of ectoparasites, such as ticks and warble disease was another problem that was often seen. In Divino, the animals were mainly treated using conventional veterinary medicines, whereas in Araponga, mainly phytotherapic and homeopathic treatments were applied. The principal problem experienced by the farmers in terms of growing their herds was the lack of bulls on these properties. In general, buying, selling and trading of animal mainly occurred between farmers who know each other and have a basis for mutual trust. In the study on alternative food sources for cattle, the following species were considered: Sollanun mauritianum, Senna macranthera, Aegiphila sellowiana, Inga subnuda, Machaerium hirtum, Stellfeld, Persea americana Mill., Musa sp. cv. Prata and Musa sp. cv. Maca. Samples of these feedstuffs were collected for analysis to define the nutritional composition from two properties in the community of Pedra Redonda, in the Araponga municipality. The contents of the following analyses were performed: dry mass (MS), net protein (PB), ether extract (EE), non-fibrous carbohydrates (CNF), insoluble fiber (including correction for ash and nitrogen- containing compounds) (FDNcp), ash (CZ), insoluble fiber in neutral indigestible detergent (FDNi), insoluble fiber in acid detergent (FDA), lignin (lig) and digestibility in vitro of dry mass (DIVMS), and information was obtained on how these foodstuffs were used in the animals’ diets. The farmers provided the alternative feed to the cattle in their pastures and these were consumed there. Amongst the tree-species, the Sollanun mauritianum was the most sought-after by the cattle. Amongst the banana species, the animals demonstrated a preference for the Musa sp. cv. Maca type, for the stem, and also preferred younger plants. In terms of nutritional value, the species provided considerable quantities of net protein (12,82% to 24,5%), but, with the exception of Sollanun mauritianum, also contained large quantities of lignin (13,42% to 30,61%) and small quantities of EE. The Sollanun mauritianum was the species which contained the largest amount of PB (24,5%), ash (8,26%) and lowest amount of FDNcp (36,3%), FDA (24,79%), lignin (8,38%) and largest amount of DIVMS (74,02%). The Inga subnuda was the species that showed the largest quantity of FDNi, FDA and Lig in the dry mass (73,41%, 46,09% and 30,61% respectively), and the smallest amount of DIVMS 33,04%. In the banana plant species, the leaves contained a higher content of net protein (14,08% and 13,99% for Musa sp. cv. Prata and Musa sp. cv. Maca respectively) compared to the stems. The stems contained more CNF (44,01% and 57,46%) and lower FDNi (16,7% and 57,46%) and Lig (5,06% and 2,69%) than the leaves. The results show that the strategies developed by the farmers for cattle feeding under challenging conditions is advantageous to their cattle production. The importance of cattle raising in these properties is not simply an economic issue, but also provides a security for difficult times and also allows additional optimization of the plant production strategies employed by the farmers on their properties. This allows the farmers and their families to be more successful and more autonomous from outside influences.
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Produção in vitro de embriões caprinos pré-púberes: efeito da melatonina nos meios de maturação in vitro e cultivo in vitro embrionário / In vitro production of prepubertal goats embryos: effect of melatonin in in vitro maturation and culture media

Chaya, Alberto Yukio 08 July 2016 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-11-29T17:51:01Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 573452 bytes, checksum: b30ab12e24dedee6f3cd4b820e641897 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-29T17:51:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 573452 bytes, checksum: b30ab12e24dedee6f3cd4b820e641897 (MD5) Previous issue date: 2016-07-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A produção in vitro de embriões caprinos ainda não é considerada uma biotecnologia rotineiramente efetiva. Um dos fatores mais importante e que dificulta a evolução no processo de todo o processo da PIV é o estresse oxidativo. A proposta adotada neste estudo foi avaliar os efeitos da adição de melatonina em meios de maturação e cultivo in vitro no desenvolvimento de embriões caprinos e na qualidade dos blastocistos oriundos de oocitos de cabras pré-púberes. O objetivo do primeiro estudo foi avaliar o efeito da melatonina no meio de cultura in vitro de embriões partenogenéticos através da taxa de desenvolvimento de blastocistos e vitrificação. Foi utilizado um meio de maturação e de cultivo in vitro e convencional com e sem melatonina (10-9 mol L-1). Os oocitos com células do Cumulus oophorus foram maturados in vitro naqueles meios de maturação por 27 h e então ativados. Estas células ativadas foram cultivadas nos respectivos meios de cultivo por oito dias e então aferidos as taxas de blastocistos. O método de vitrificação foi utilizado de acordo com Mermillod et al., 1998. A adição da melatonina a 10-9 mol L- aos meios de maturação e de cultivo in vitro não apresentou melhora na taxa de blastocistos produzidos. Na segunda parte deste estudo objetivou-se avaliar o efeito da melatonina no meio de cultura in vitro, porém em embriões fertilizados artificialmente, por meio da taxa de desenvolvimento de blastocistos. Utilizou-se um meio convencional para MIV com ou sem adição de melatonina a 10-9 mol L-1. Após a MIV, os oocitos maturados foram inseminados com semen a fresco, e os espermatozoides foram capacitados em meio de capacitação contendo heparina. Os possíveis zigotos foram separados e uma parte foi cultivado em meio de cultura padrão com adição da melatonina a 10-9 mol L-1. Ambos foram cultivados durante oito dias e a taxa de blastocisto foi aferida. Os resultados desta segunda etapa mostraram que ao utilizar melatonina a 10-9 mol L-1 adicionada ao meio de maturação in vitro convencional melhoraram quanto ao número de células fertilizadas (34,57% vs. 17,39%, p<0,05), embora, não houve melhora na taxa de clivagem e no número de blastocistos produzidos. A conclusão mostra que a melatonina a 10-9 mol L-1 adicionada tanto em MIV, quanto em CIV, não melhora o desenvolvimento e a produção dos embriões in vitro, embora possa aumentar a taxa fertilização in vitro. / The in vitro production of goat embryos is not considered a routinely effective biotechnology. There are a number of factors that hinder the progress in the process of maturation, fertilization, cultivation and freezing. One of the most important factors that cause deleterious effects throughout the IVP process is the oxidative stress. The proposal of this study in order to prevent and to control that stress condition was to supplement the in vitro maturation (IVM) and in vitro culture media (IVC) with melatonin evaluating it effects on the development of goat embryos and quality of embryos derived from prepubertal goats oocytes. The aim of the first experiment was to evaluate the effect of melatonin supplementation in the in vitro culture on development of parthenogenetic embryos. It was used two in vitro maturation media [conventional maturation media (CM) and CM + 10-9 M melatonin] and two in vitro culture media [conventional cultivation media (CC) and CC + 10-9 M melatonin. The oocytes with cumulus cells were randomly distributed in the IVM and then activated by ionomycin method followed by 6-DMAP. Afterwards, presumptive zygotes were randomly distributed in the IVC media and cultured for eight days. Supplementation of 10-9 M melatonin to the IVM and IVC media showed no improvement in the parthenogenetic blastocyst rate. The blastocyst rate diminished when melatonin was added in vitro culture medium. The second study was also evaluate the effect of melatonin in vitro culture medium, but using in vitro fertilization over the blastocyst development rate. We used a conventional medium (CM) to in vitro maturation media and other CM was supplemented with melatonin at 10-9 M. After IVM, the matured oocytes were inseminated with fresh semen, and then, that spermatozoa were capacitated and cultured for eight days. There was an in vitro culture media used and other one added with melatonin (10-9 M). The results of this second study demonstrated that the use of melatonin at 10-9 M added to the in vitro conventional maturation medium presented a beneficial effect on the number of fertilized cells (34.57 % vs. 17.39%, p<0.05). However, this addition there was no improvement in the cleavage rate nor the blastocyst rate. We concluded that melatonin at 10-9 M added in both IVM medium and IVC medium do not improve the development of embryos. However, it can be a gain in the in vitro fertilization rate when melatonin is added in the IVM medium.
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Atividade de 7-epiclusianona e do complexo metálico 7-epiclusianona- cobre sobre Streptococcus spp. isoladas de mastite bovina / Activity of 7-epiclusianone and metal complex 7-epiclusianone-copper on Streptococcus spp. isolated from bovine mastitis

Barros, Mariana de 20 July 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-12-13T12:08:26Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 524623 bytes, checksum: ccb2aae7476cf5b85359d873ffc9e9b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-13T12:08:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 524623 bytes, checksum: ccb2aae7476cf5b85359d873ffc9e9b7 (MD5) Previous issue date: 2016-07-20 / Mastite é uma inflamação da glândula mamária e é apontada como a maior causa de perdas econômicas na cadeia láctea mundial. As espécies de Streptococcus estão entre os principais patógenos da mastite. É notável a emergência de patógenos resistentes aos compostos tradicionalmente usados para o controle de doenças. Dessa forma, novas alternativas têm sido buscadas nos produtos naturais, destacando-se as plantas. Rheedia brasiliensis é muito utilizada na medicina popular brasileira com diversos fins terapêuticos. Foi isolado de seu fruto a benzofenona 7-epiclusianona. Uma boa estratégia para aumentar a atividade antimicrobiana é complexar moléculas ativas com metais. Assim, foi sintetizado um complexo metálico composto por duas moléculas de 7-epiclusianona com cobre. O objetivo do presente trabalho foi verificar a atividade de 7-epiclusianona (7-epi) e do complexo metálico 7- epiclusianona-cobre (7-epi-Cu) sobre bactérias do gênero Streptococcus isoladas de mastite bovina, e avaliar a citotoxidade dessas moléculas sobre células MAC-T. Foram utilizados para esse estudo quatro isolados de mastite bovina, dois de Streptococcus agalactiae (SA3930 e SA4038) e dois de Streptococcus uberis (SU959 e SU3580). Eles foram submetidos ao teste de concentração inibitória mínima (CIM) através da microdiluição em caldo, e também foi determinada a concentração bactericida mínima (CBM) em caldo. A curva de tempo de morte foi traçada a partir da contagem de Unidades Formadoras de Colônias em tempos pré-determinados durante 24 horas com os isolados submetidos à CIM e à CBM. O conteúdo de proteína no sobrenadante foi determinado pela centrifugação da suspensão bacteriana tratada com a CIM dos dois compostos, através do método de Bradford. Para avaliar a indução da aderência, foi utilizada uma concentração subinibitória dos compostos. O efeito citotóxico dos compostos foi medido através dos ensaios do MTT e da captação de vermelho neutro sobre células MAC-T. As médias obtidas nos ensaios de MTT, vermelho neutro, teste de liberação de proteínas e avaliação da aderência foram comparas pelo ANOVA seguido pelo Tukey. O nível de significância adotado foi 95% (p<0,05). As CIMs encontradas para os compostos 7-epi e 7-epiCu foram de 7,8 μg mL -1 para as cepas SA4038, SU959 e SU3580. A cepa SA3930 foi resistente a maior concentração testada (125 μg mL -1 ). A CBM para SA4038 com 7-epi foi 15,6 μg mL -1 , para as demais combinações composto/isolado foi 31,3 μg mL -1 . A dinâmica da curva de tempo de morte para os compostos mostrou ação bacteriostática de uma maneira tempo/dose-independente. Não foi evidenciada a presença de proteína no sobrenadante das culturas tratadas com os compostos. 7-epi e 7-epi-Cu que, em subdose, não induziram a aderência das bactérias S. agalactiae e S. uberis. Ambos compostos não apresentaram atividade citotóxica quando na CIM para as células MAC-T, porém foram tóxicos na concentração 7×CIM. Os compostos testados apresentaram excelentes resultados quanto à sua atividade contra essas bactérias Gram-positivas. Uma vez que os resultados dos dois compostos avaliados foram semelhantes, seria mais recomendada a utilização de 7-epi, por ser mais simples e barata sua produção. / Mastitis is an inflammation of the mammary gland and is identified as the major cause of economic losses in global dairy chain. Streptococcus species are among the main mastitis pathogens. It is remarkable the emergence of resistant pathogens to compounds traditionally used for disease control. Thus, new alternatives have been researched in natural products, especially plants. Rheedia brasiliensis is widely used in Brazilian folk medicine with various therapeutic purposes. It was isolated from its fruit the benzophenone 7- epiclusianone. A good strategy to enhance the antimicrobial activity is complex active molecules with metals. Then it was synthesized a metal complex with two molecules of 7-epiclusianone with copper. The aim of this study was to determine the activity of 7-epiclusianone (7-epi) and the metal complex 7- epiclusianone-copper (7-epi-Cu) on bovine mastitis isolated Streptococcus spp, and assess the cytotoxicity of these molecules on MAC-T cells. Were used for this study four bovine mastitis isolates, two Streptococcus agalactiae (SA3930 and SA4038) and two Streptococcus uberis (SU959 and SU3580). They were subjected to a minimum inhibitory concentration test (MIC) by broth microdilution and minimum bactericidal concentration (MBC) test in broth. Time- kill curve was plotted from Forming Units Colony count at predetermined times during 24 hours with the isolates submitted to the CIM and CBM. The protein content in the supernatant was determined by centrifugation of bacterial suspension treated with MIC of both compound by Bradford’s method. To evaluate the induction of adhesion one sub-inhibitory concentration of the compounds was used. Cytotoxic effect of the compounds was measured through MTT assay and neutral red uptake on MAC-T cells. The average obtained in the MTT assay, neutral red uptake, protein leakage and adherence evaluation were compared by ANOVA followed by Tukey. The significance level was 5% (p <0.05). The MICs found for compounds 7-epi and 7 –epi-Cu was 7.8 μg mL -1 to SA4038, SU959 and SU3580 strains. SA3930 strain was resistant to the highest concentration tested (125 μg mL -1 ). CBM for SA4038 with 7-epi was 15.6 μg mL -1 , for the other combinations compound/strain was 31.3 μg mL -1 . Time-kill curve dynamic of compounds showed bacteriostatic action in a manner time/dose independent. There was no evidence of protein in supernatant of cultures treated with the compounds. 7-epi-7-epi-Cu, in sub-doses, no induced S. agalactiae and S. uberis adhesion. Compounds tested showed no cytotoxic activity when at the MIC for the MAC-T cells, but were toxic in 7×CIM. Two compounds tested had excellent results for their activity against these Gram- positive bacteria. Since results of both compounds evaluated were similar, would most recommended use of 7-epi, because its simpler and cheaper production.
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Parâmetros espermáticos e proteínas do plasma seminal de cachaços e parâmetros reprodutivos de marrãs e porcas suplementados com minerais e vitaminas / Seminal plasma proteins of adult boars and correlations with sperm parameters

Cadavid, Verônica Gonzalez January 2014 (has links)
CADAVID, Verônica Gonzalez. Parâmetros espermáticos e proteínas do plasma seminal de cachaços e parâmetros reprodutivos de marrãs e porcas suplementados com minerais e vitaminas. 2014. 241 f. Tese (doutorado em zootecnia)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2014. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-04-26T17:20:42Z No. of bitstreams: 1 2014_tese_vgcadavid.pdf: 3289695 bytes, checksum: 3d4ccd01b841180e33fa7aa94e66bbd2 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-27T19:14:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_tese_vgcadavid.pdf: 3289695 bytes, checksum: 3d4ccd01b841180e33fa7aa94e66bbd2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-27T19:14:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_tese_vgcadavid.pdf: 3289695 bytes, checksum: 3d4ccd01b841180e33fa7aa94e66bbd2 (MD5) Previous issue date: 2014 / The present study was conducted to identify the major seminal plasma protein profile of boars and its associations with semen criteria. Semen samples were collected from 12 adult boars and subjected to evaluation of sperm parameters (motility, morphology, vitality and percent of cells with intact acrosome). Seminal plasma was obtained by centrifugation, analyzed by 2-D SDS-PAGE and proteins identified by mass spectrometry (electrospray ionization quadrupole-time-of-flight). We tested regression models using spot intensities related to the same proteins as independent variables and semen parameters as dependent variables (p < 0,05). One hundred and twelve spots were indentified in the boar seminal plasma gels, equivalent to 39 different proteins. Spermadhesins PSP-I, PSP-II, AQN1, AQN3 and AWN1 represented 45,2 ± 8 % of the total intensity of all spots. Other proteins expressed in the boar seminal plasma include albumin, complement proteins (complement factor H precursor, complement C3 precursor and adipsin/complement factor D), immunoglobulins (IgG heavy chain precursor, immunoglobulin delta heavy chain membrane bound form, immunoglobulin gamma-chain, Ig lambda chain V-C region PLC3 and CH4 and secreted domain of swine IgM), IgG-binding proteins, epididymal specific lipocalin-5, epididymal secretory protein E1 precursor, epididymal secretory glutathione peroxidase precursor, transferrin, lactotransferrin and fibronectin type 1 (FN1). Based on regression analysis, the percentage of sperm with midpiece defects was related to the amount of CH4 and secreted domains of swine IgM and FN1 (R² = 0,58), IgG-binding protein (R² = 0,61), complement factor H precursor (R² = 0,61) and lactadherin (R² = 0.45). The percentage of sperm with tail defects was also related to CH4 and secreted domains of swine IgM and FN1 (R² = 0,40), IgG-binding protein (R² = 0,34) and lactadherin (R² = 0,74). Sperm motility, in turn, had association with the intensities of spots identified as lactadherin (R² = 0,48). In conclusion, we presently describe the major proteome of boar seminal plasma and significant associations between specific seminal plasma proteins and semen parameters. Such relationships will serve as the basis for determination of molecular markers of sperm function in the swine species. / O presente estudo foi realizado com o objetivo de identificar o perfil das principais proteínas do plasma seminal suíno e suas associações com parâmetros seminais. Amostras de sêmen foram coletadas de 12 cachaços adultos e submetidas à avaliação dos parâmetros seminais (motilidade total, morfologia, vitalidade e porcentagem de células com acrossoma intacto). O plasma seminal foi obtido por centrifugação e as proteínas seminais foram analisadas por eletroforese 2-D e espectrometria de massa. Foram testados modelos de regressão usando a soma das intensidades dos spots referentes às mesmas proteínas como variáveis independentes e parâmetros seminais como variáveis dependentes (p < 0,05). Cento e doze spots foram identificados nos géis do plasma seminal, equivalentes a 39 proteínas diferentes. As espermadesinas PSP-I, PSP-II, AQN1, AQN3 e AWN1 representaram 45,2 ± 8 % do total da intensidade de todos os spots detectados nos geis. Outras proteínas expressas no plasma seminal suíno incluem a albumina, proteínas do complemento (complement factor H precursor, complement C3 precursor e adipsin/complement factor D), imunoglobulinas (IgG heavy chain precursor, imunoglobulina delta heavy chain membrane bound form, imunoglobulina gamma-chain, Ig lambda chain V-C region PLC3 e CH4 and secreted domain of swine IgM), IgG-binding proteins, epididymal specific lipocalin-5, epididymal secretory protein E1 precursor, epididymal glutathione peroxidase precursor, transferrin, lactotransferrin e fibronectin tipo 1 (FN1). Em função das análises de regressão, o percentual de espermatozoides com defeito na peça intermediária foi relacionado com a quantidade de “CH4 and secreted domain of swine IgM” e FN1 (R2 = 0,58), a proteína IgG-binding (R2 = 0,61), o fator H do complemento (R2 = 0,61) e lactaderina (R2 = 0,45). Porcentagem percentual de defeitos de cauda também foi relacionado com “CH4 and secreted domain of swine IgM” e FN1 (R2 =0,40), a proteína IgG-binding (R2 = 0,34), e lactaderina (R2 = 0,74). A motilidade espermática, por sua vez, teve associação com a intensidade dos spots identificados como lactaderina (R2 = 0,48). Em conclusão, descreve-se, neste trabalho, o proteoma do plasma seminal suíno e associações significativas entre proteínas específicas do plasma seminal e parâmetros seminais. Tais relações servirão como base para a determinação de marcadores moleculares da função espermática na espécie suína.

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