Contexto: Doenças crônicas como as cardiovasculares e demências são mais frequentes na população idosa, especialmente na faixa etária acima dos 80 anos. A despeito desta evidência, são poucos os estudos delineados com indivíduos longevos. E frequentes são os resultados indefinidos ou inversos quando avaliados. Esta lacuna no conhecimento é dificultada pela complexidade de fatores ambientais e genéticos que influenciam a progressão das doenças crônicas. Especificamente, os níveis de pressão arterial e colesterol e o alelo 4 da apolipoproteína E (apoE) tem efeitos divergentes nos idosos longevos comparados aos idosos jovens. O objetivo deste estudo é investigar a relação entre o polimorfismo do gene da apoE e a mortalidade por doença cardiovascular e demência em idosos longevos que vivem em comunidade e avaliar a sobrevida de acordo com este polimorfismo e fatores de risco cardiovascular. Métodos: Uma amostra de 74 idosos com 80 anos ou mais da coorte do Projeto Veranópolis foi selecionada para genotipagem da apoE. Na linha de base, foram coletadas variáveis antropométicas, dosagens sanguíneas de glicose e lipídeos, pressão arterial e variáveis de estilo de vida como tabagismo, consumo de álcool e atividade física. O seguimento médio da coorte foi 16,4 anos e total de 18 anos. As causas de morte foram classificadas de acordo com a CID-10 em cardiovasculares e demenciais. A Escala Bayer de Atividades da Vida Diária foi aplicada aos cuidadores dos idosos para avaliar demência. A sobrevida dos portadores dos genótipos da apoE foi comparada através do método de estimação da curva por Kaplan-Meier e o modelo de azares proporcional da Regressão de Cox foi utilizado na descrição dos fatores associados à mortalidade geral. Resultados: A frequência gênica da apoE presente na amostra foi: 4,1% 2; 85,1% 3 e 10,8% 4. E a frequência genotípica: 1,4% E2E2; 5,4% E2E3; 71,6% E3E3 e 21,6% E3E4. Para a comparação dos desfechos foram formados 2 grupos: portadores do genótipo apoE3E3 (53 idosos) e portadores do genótipo apoE3E4 (16 idosos). A expectativa de vida média foi de 92,3 anos (IC95% 91,2-93,5). Diferenças significativas entre os genótipos foram encontradas com relação à idade média de entrada na coorte, índice de massa corporal e pressão arterial diastólica. Encontramos uma tendência para que os níveis de colesterol total e LDL-colesterol fossem maiores no grupo E3E4. Não encontramos associação entre desfechos de morbidade (AVC, IAM e ICC) ou mortalidade entre os genótipos. Para a amostra no geral, os fatores significativamente associados à mortalidade foram: tabagismo, atividade física, pressão arterial sistólica (PAS), pressão de pulso (PP) e diabetes mellitus. O risco de morte em indivíduos fumantes e ex-fumantes foi 2,83 vezes (IC95% 1,00-7,98) do risco em não fumantes. Indivíduos que praticavam atividade física vigorosa (≥4.000 kcal/semana) tiveram uma redução no risco de óbito em 54% (IC95% 10%-77%). Para o aumento de 1mmHg na PAS ou na PP houve uma redução de 2% (IC95% 1%-3%) no risco de morte. Os idosos diabéticos tiveram 3,43 (IC95% 1,03-11,50) vezes o risco de óbito dos não diabéticos. Conclusão: Não foi encontrada associação entre os dois genótipos da apoE mais frequentes na população e mortalidade cardiovascular ou sobrevida em idosos longevos. Em toda a amostra, os fatores de risco significativamente associados à mortalidade foram tabagismo e diabetes mellitus. Atividade física vigorosa, PAS e PP maiores foram considerados fatores de proteção para mortalidade geral.

A doença de Parkinson é a segunda enfermidade neurodegenerativa mais frequente e acomete entre 1 a 2% das pessoas acima de 65 anos. Com a expectativa de envelhecimento da população, espera-se um aumento proporcional da prevalência desta doença, o que justifica uma preocupação crescente com o manejo dessa condição. A levodopa é fundamental para o manejo farmacológico desses pacientes, uma vez que é possível um controle quase ótimo dos sintomas, pelo menos nos primeiros anos de tratamento. Entretanto, em cinco anos, cerca de metade dos pacientes apresentarão complicações pelo uso crônico desta medicação, o que determinará piora da qualidade de vida e um desafio ao médico, no sentido de controlar esses fenômenos. As principais complicações crônicas são as flutuações da resposta motora, as discinesias e as alucinações. Este trabalho tem a proposta de investigar a gênese dessas alterações em sua relação com variações genéticas específicas. Foram selecionados polimorfismos em genes com plausibilidade biológica, por estarem envolvidos na farmacocinética e farmacodinâmica da levodopa. São eles: Val158Met da COMT (catecol-orto-metiltransferase), íntron 13 da MAO-B (monoamina oxidase B), VNTR (“variable number tandem repeat”) de 40pb da região 3'UTR (“untranslated region”) do DAT (transportador de dopamina) e -839C>T da região promotora 5' do DAT. A COMT e a MAO-B são as duas rotas enzimáticas de degradação da dopamina e o DAT é um transportador présináptico de dopamina. Foram selecionados pacientes com doença de Parkinson idiopática em acompanhamento no Serviço de Neurologia do HCPA com idade de início dos sintomas após os 45 anos e que estavam em uso de levodopa há pelo menos dois anos. Esses pacientes foram submetidos a um protocolo de avaliação clínica, com obtenção de informações relevantes para a determinação da presença das complicações, aplicação de escalas padronizadas e coleta de sangue (ver anexos para o protocolo e as escalas). Após, o material biológico foi submetido à extração de DNA e os polimorfismos determinados por análise de fragmentos de enzima de restrição, no Departamento de Genética da UFRGS. Entre os polimorfismos da COMT e da MAO-B não se observou diferença para a presença ou ausência de flutuação da resposta motora, discinesia e alucinação. Entretanto, pacientes com genótipo lento da COMT (MetMet) apresentaram menos complicações da terapia (desfecho aferido pela parte IV da UPDRS, “Unified Parkinson Disease Rating Scale”, que fornece um escore cuja pontuação baixa representa menos complicações da terapia). Fazendo análise dos subítens da escala, observou-se que esse efeito se deveu à menor presença de flutuação motora. Observamos ainda que os pacientes portadores do genótipo MetMet apresentaram idade de início da doença de Parkinson menor quando comparados aos portadores dos genótipos de atividade rápida (ValMet e ValVal). A diferença aproximada foi de 4 anos, com um p=0,03. Seguindo o estudo da influência genética sobre a idade de início, observou-se que homens hemizigotos para o alelo G da MAO-B apresentavam idade de início precoce em relação aos portadores do alelo A, com diferença aproximada de 5 anos e p=0,03. Tomados em conjunto os polimorfismos da COMT e da MAO-B, o efeito do genótipo lento MetMet da COMT sobre a idade de início foi potencializado naqueles com alelo A da MAO-B (homens hemizigotos A e mulheres homozigotas AA), com diferença aproximada de oito anos e p=0,001. Em relação ao gene do DAT, observou-se que a presença do alelo T do polimorfismo da região promotora está associada à maior frequencia de alucinação visual, com OR (“odds ratio”, ou razão de chances) de 5,17 e IC (intervalo de confiança) de 95% de 1,45-18,41 com p=0,01. Ademais, encontrou-se um achado a ser melhor explorado: pacientes portadores do alelo de 9 repetições do VNTR de 40pb necessitavam de maior dose para o controle dos sintomas parkinsonianos, com uma diferença aproximada de 100mg com p=0,042. Há na literatura estudos de associação desses polimorfismos com a presença da doença de Parkinson, entretanto, poucos avaliaram o efeito dessas variantes polimórficas sobre a resposta ao uso de levodopa e sobre outros fatores clínicos. Os resultados desta dissertação trazem informações importantes para o melhor entendimento da variabilidade da resposta farmacológica e sobre a fisiopatologia da doença de Parkinson.

Resumo não disponível

O carcinoma medular de tireóide (CMT) é uma neoplasia maligna rara, ocorrendo na forma esporádica ou hereditária. Mutações germinativas no protooncogene RET são responsáveis pelo CMT hereditário. No entanto, a maioria dos casos de CMT ocorre em indivíduos sem história familiar, na qual a patogênese da doença ainda é pouco compreendida. Os polimorfismos do gene RET são descritos na população geral assim como em pacientes com CMT. Embora, estas variações alélicas aparentemente não confiram qualquer atividade transformadora no receptor RET, estudos sugerem que essas alterações genéticas podem modificar a suscetibilidade à doença e o fenótipo clínico em pacientes com CMT esporádico ou hereditário. Uma maior freqüência dos polimorfismos localizados nos exons 11 (G691S), 13 (L769L), 14 (S836S) e 15 (S904) é descrita em pacientes com CMT provenientes de países Americanos e Europeus. Na presente revisão, analisamos criticamente os resultados obtidos nos diferentes estudos e descrevemos a freqüência dos polimorfismos do RET em pacientes Brasileiros com CMT esporádico. / Medullary thyroid carcinoma (MTC) is a rare malignant neoplasia, which may occur on sporadic form or on a hereditary basis. Germ line mutations in the RET proto-oncogene is responsible for hereditary MTC. However, most MTC occur in individuals without family history where the pathogenesis is still unclear. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) of the RET gene have been described in the general population as well as in patients with MTC. Even though these allelic variants do not seem to confer any transforming activity to the tyrosine kinase domain of the RET protein, cumulative studies suggest that they could modify disease susceptibility and clinical phenotype in patients with sporadic or hereditary MTC. Polymorphisms located in exon 11 (G691S) 13 (L769L), 14 (S836S) and 15 (S904S) seem to be over-represented in sporadic MTC patients from American and European countries. Here, we discuss the results obtained in different studies as well as describe the frequency of RET polymorphisms in Brazilian patients with sporadic MTC.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2014. / Texto parcialmente liberado pelo autor. Conteúdo restrito: páginas 90 a 108. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-10-16T20:18:02Z No. of bitstreams: 1 2014_RenatoMaranoRocha.pdf: 1898857 bytes, checksum: eac9acaab04808504f2e0a70288fdda6 (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2014-10-16T20:25:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_RenatoMaranoRocha.pdf: 1898857 bytes, checksum: eac9acaab04808504f2e0a70288fdda6 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-16T20:25:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_RenatoMaranoRocha.pdf: 1898857 bytes, checksum: eac9acaab04808504f2e0a70288fdda6 (MD5) / Introdução: A síndrome metabólica (SMet) é doença multifatorial, resultante da complexa interação entre fatores fisiológicos, comportamentais, culturais e genéticos que aumentam o risco de desenvolvimento de doenças crônicas, como diabetes mellitus tipo 2, hipertensão arterial sistêmica, dislipidemia, e consequentemente, aumento do risco cardiovascular e de morte prematura. Apesar do amplo conhecimento de que a adiposidade e resistência insulínica exercem papel relevante no desenvolvimento desta síndrome, os fatores genéticos envolvidos ainda não estão esclarecidos na sua totalidade. Os receptores ativados por proliferador de peroxissomo gama (PPAR) desempenham papel importante na adipogênese e no metabolismo de lipídeos e hidratos de carbono. Sua variabilidade genética, em particular, o polimorfismo rs1801282 (Pro12Ala), é investigado como possível marcador genético preditivo para a esteatose hepática, diabetes mellitus e outras condições. No entanto, os estudos que abordam essa questão no contexto da SMet são escassos na literatura. Objetivo: Este estudo destinou-se a determinar as frequências genotípicas e alélicas de rs1801282 em 179 controles e em 154 pacientes com SMet que vivem em Brasília, Brasil e também examinar a associação com variáveis antropométricas, bioquímicas e hemodinâmicas neste último grupo. Metodologia: DNA foi extraído pelo método de Chelex-100 e as determinações dos genótipos foram realizadas por meio da reação em cadeia da polimerase alelo específico. Resultados: A distribuição de frequência do genótipo no grupo SMet não foi estatisticamente diferente da frequência nos controles. Na SMet, a frequência do genótipo foi 0,869 para o CC, e 0,103 para CG, enquanto as frequências alélicas foram 0,948 para C e 0,052 para o alelo G. No grupo controle, as frequências genotípicas e alélicas foram 0,882 para CC, 0,117 para CG; e 0,941 para C e 0,059para G, respectivamente. O genótipo GG não foi encontrado em quaisquer dos dois grupos. As distribuições genotípicas e as frequências alélicas estavam em equilíbrio de Hardy-Weinberg. Nenhum marcador pôde ser detectado a partir da análise das variáveis antropométricas, bioquímicas e hemodinâmicas no grupo SMet. Conclusão: Nossos dados sugerem que esse polimorfismo não está correlacionado com predisposição à SMet. Este resultado, obtido em uma pequena amostra da população de Brasília, está em consonância com os achados anteriores relatados na literatura sobre a prevalência deste polimorfismo no PPAR em populações de diferentes origens étnicas. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: The metabolic syndrome (MetS) is a multifactorial disorder which results from the complex interaction between physiological, behavioral, cultural and genetic factors that increase the risk of developing chronic diseases such as hypertension, type 2 diabetes mellitus, dyslipidemia, and consequently, increased cardiovascular risk and early deaths. Despite current knowledge that adiposity and insulin resistance play a relevant role in the development of this syndrome, the genetic factors involved are still unclear in their entirety. Peroxisome proliferator activated receptor-gamma (PPAR) plays an important role in lipid homeostasis, adipogenesis and insulin resistance, which implicates a possible role for PPAR gene in predisposition to MetS. Indeed, variability in this gene, in particular, the rs1801282 (Pro12Ala) polymorphism, has been investigated as a possible predictive genetic marker for hepatic steatosis, diabetes mellitus and other conditions. However, studies addressing this issue in the context of MetS are scarce in the literature. Objective: This study aimed to determine the genotypic and allelic frequencies of the rs1801282 polymorphism in 179 controls and 154 patients with MetS from Brasilia, Brazil, and also to examine the correlation of the genotype with anthropometric, biochemical and hemodynamic variables, in the last group. Methods: DNA was extracted by the Chelex-100 method (121), and rs1801282 genotype assignments were conducted by allele-specific polymerase chain reaction. Results: The genotype frequency distribution in MetS group was not statistically different from the frequency in controls. In MetS, genotype frequency was 0,869 for the CC and 0,103 for CG, whereas allelic frequencies were 0,948 for C and 0,052 for G allele. In the control group, genotypic and allelic frequencies were 0,882 for CC, 0,117 for CG; and 0,941 for C and 0,059 for G, respectively. The GG genotype was not found in any of the two groups. Allelic and genotypic frequencies for this polymorphism were in Hardy-Weinberg equilibrium. No marker could be detected from the analysis of anthropometric, biochemical and hemodynamic variables in the MetS group. Conclusions: Our data suggest that this polymorphism is not correlated with predisposition to MetS. This result, obtained in a small sample of the population of Brasilia, is in line with previous findings reported in the literature of the prevalence of this polymorphism in PPAR in populations of diverse ethnic backgrounds.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-03-05T17:48:19Z No. of bitstreams: 1 2009_AnaClaudiadeMeloValeriano.pdf: 348938 bytes, checksum: 1dacb40fa7251b2be3b866121a3a4eab (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-03-09T01:46:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_AnaClaudiadeMeloValeriano.pdf: 348938 bytes, checksum: 1dacb40fa7251b2be3b866121a3a4eab (MD5) / Made available in DSpace on 2010-03-09T01:46:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_AnaClaudiadeMeloValeriano.pdf: 348938 bytes, checksum: 1dacb40fa7251b2be3b866121a3a4eab (MD5) Previous issue date: 2009-05-25 / Estudos baseados em genes candidatos buscam identificar polimorfismos e a prospecção de genes candidatos que estão envolvidos no processo de ovulação são ferramentas de importantes quando se pretende incrementar a eficiência reprodutiva de rebanhos e melhorar as respostas das biotécnicas de multiplicação animal. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi sequenciar e detectar polimorfismos em parte do “exon” 10 do gene do receptor do hormônio folículo estimulante (FSHR); genotipar doadoras de embriões para um SNP nos genes receptor de estrógeno (ER) e FSHR; analisar se esses genes podem ser usados como marcadores moleculares para a resposta superovulatória em bovinos. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Candidate gene based studies intend to identify polymorphisms and to prospect candidate genes evolved in ovulation process are important tools to increase the cattle reproduction efficiency and to improve animal biotechnology response. Thus, the aim of this study was to sequence and to detect polymorphisms present in exon 10 from follicle stimulation hormone receptor (FSHR) gene; to genotype estrogen receptor gene (ER1) and FSHR SNPs in embryo donors; and to verify the possibility to use these genes as molecular markers to assess the bovine ovullatory response.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós Graduação em Ciências da Saúde, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-10-18T14:52:24Z No. of bitstreams: 1 2013_LeonardoCostaPereira.pdf: 2444559 bytes, checksum: 48bcb389fa8bc06f54c9921d742aa8fe (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-10-21T11:03:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_LeonardoCostaPereira.pdf: 2444559 bytes, checksum: 48bcb389fa8bc06f54c9921d742aa8fe (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-21T11:03:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_LeonardoCostaPereira.pdf: 2444559 bytes, checksum: 48bcb389fa8bc06f54c9921d742aa8fe (MD5) / Introdução: Com o crescente envelhecimento da população brasileira estratégias que possam contribuir para a manutenção da saúde desse grupo etário são de suma relevância. Assim, estudos que abordam a prática de treino físico e a influencia genética sobre as respostas geradas no organismo de idosos vêm sendo desenvolvidos. Objetivo: A presente pesquisa teve por objetivo avaliar a relação do polimorfismo do gene promotor -174 C/G da IL-6 sobre as respostas da IL-6 sistêmica e dano muscular após treinamento de força excêntrico em homens idosos. Metodologia: Foram determinados os níveis de CK e de IL-6 nos momento pré, 0 h, 3 h, 24 h, 48 horas pós treino excêntrico para homens idosos. Foram identificadas as frequências genicas do polimorfismo do gene promotor IL6 G-174C e foram analisadas as possíveis relações genéticas com os níveis séricos da IL-6 e CK nos diferentes momentos. Para determinação da frequência genotípica foi empregado o teste de Hardy-Weinberg. Para efeito de análise estatística os sujeitos foram divididos em dois grupos genotípicos GG e CC/CG. Os dados contínuos foram expressos em média e erro padrão. Para comparar as medidas de CK e IL-6 foi utilizada ANOVA. As correlações entre o polimorfismo do gene promotor -174 C/G da IL-6 e os resultados de CK, IL-6, lipidograma, idade, altura e composição corporal foram determinadas pelo teste T independente. Resultados: Não foram encontradas diferenças significativas entre os grupos genotípicos e as variáveis antropométricas (p>0,05), perfil lipídico (p>0,05) e CK em todos os momentos (p>0,05). Foram verificadas diferenças entre os níveis de IL-6 basais e pós treino para todos os momentos entre os grupos (p=0,029). Conclusão: O treino excêntrico influenciou na modulação de CK e IL-6 independentemente do Polimorfismo do gene promotor - 174 C/G da IL-6. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: With the increasing aging of the Brazilian population, strategies that may contribute to the maintenance of the health of this age group are of supreme importance. Studies what approach the practice of physical training and the genetic influence on the responses generated in the body of the elderly are being developed. Objective: The present research purposed to assess the relationship between polymorphism of the gene promoter -174 C/G from IL-6 about the replies of systemic IL-6 and muscle damage after eccentric strength training in elderly men. Methodology: Were determined the CK and the IL-6 levels in pre moment, 0 h, 3 h, 24 h, 48 hours after eccentric training in elderly men. Were identified the gene frequencies of polymorphism of promoter gene IL6 G-174C and were analyzed the possible genetic relationships with serum levels of IL-6 and CK in different moments. For determination of the genotype frequency was employed the test of Hardy-Weinberg. For the purpose of statistical analysis the subjects were divided into two genotypic groups GG and CC/CG. Continuous data were expressed as average and standard error. To compare the measures of CK and IL-6 it was used ANOVA. The correlations between the polymorphism of the gene promoter -174 C/G of IL-6 and the results of CK, IL-6, lipidogram, age, height and body composition were determined by independent T test. Results: No significant differences were found between the genotypic groups and anthropometric variables (p>0,05), lipid profile (p>0,05) and CK in every moment (p>0,05). Differences were found between the levels of IL-6 basal and after training for all moments about the groups (p=0,029). Conclusion: The eccentric training was influenced in the modulation of CK and IL-6 independently of polymorphism of the gene promoter -174 C/G from IL-6.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-11-22T13:12:41Z No. of bitstreams: 1 2013_LilianCarlaPereiraBarbosa.PDF: 1701428 bytes, checksum: abb99f8df21806bc866cb91ce409ff1d (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-11-26T13:03:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_LilianCarlaPereiraBarbosa.PDF: 1701428 bytes, checksum: abb99f8df21806bc866cb91ce409ff1d (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-26T13:03:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_LilianCarlaPereiraBarbosa.PDF: 1701428 bytes, checksum: abb99f8df21806bc866cb91ce409ff1d (MD5) / O íon ferro é fundamental para a homeostase celular; porém, pode ser altamente danoso ao organismo quando se encontra livre, pois sua capacidade de aceitar ou doar elétrons permite catalisar a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO). Em circunstâncias normais, essa reação é minimizada pelo sequestro de ferro dentro de complexos com proteínas; na sobrecarga de ferro, os depósitos de ferro estão livres para promover a produção de ERO, sendo esta inevitável em pacientes que recebem transfusões frequentes, como na doença falciforme. A haptoglobina (Hp) é uma glicoproteína que se liga à hemoglobina (Hb) livre formando o complexo Hp-Hb que é essencial para a remoção de Hb do plasma, tendo um papel crucial contra o estresse oxidativo induzido por Hb. Outra proteína relacionada ao estresse oxidativo é a mieloperoxidase (MPO), uma enzima lisossômica com atividade microbicida oxigênio-dependente presente em monócitos e neutrófilos. Visto que ambas as proteínas apresentam polimorfismo genético que pode influenciar na proteção contra o estresse oxidativo, o objetivo do presente trabalho foi investigar a frequência dos polimorfismos nos genes da Hp e da MPO (G463A) em pacientes com doença falciforme (SS) e sua correlação com a gravidade clínica da sobrecarga de ferro, visando avaliar uma possível associação entre esses polimorfismos com a variabilidade clínica, a resposta aos tratamentos e o prognóstico, especialmente aqueles relacionados ao estresse oxidativo. Para tal, foi realizado um estudo transversal com amostra de conveniência composta por 78 pacientes com diagnóstico de doença falciforme atendidos no Hospital de Base do Distrito Federal (HBDF), sem e com sobrecarga de ferro. Os dados foram obtidos através de exames laboratoriais, questionário, pesquisa em prontuários e análises dos polimorfismos por métodos baseados na reação em cadeia da polimerase. Correlação positiva foi encontrada entre os genótipos de Hp e valores de ferritina (p=0,035; coeficiente de correlação de Spearman=0,239), tratamento com hidroxiureia (p=0,031; coeficiente de contingência= 0,369), internação por acidente vascular-cerebral (AVC) (p=0,023; coeficiente de contingência=0,379) e sequelas por AVC (p=0,031; coeficiente de contingência= 0,368), e entre os genótipos de MPO e número de internações no último ano (p=0,049; coeficiente de contingência= 0,332) e esplenectomia (p=0,024; coeficiente de contingência= 0,297). Associação significativa entre genótipos específicos da Hp e comorbidades também foram encontradas, enquanto para MPO os resultados sugeriram que a homozigose AA poderia potencializar os efeitos da asplenia. Desvio significativo no equilíbrio de Hardy-Weinberg foi observado apenas para o polimorfismo da Hp, sendo este compatível com deficiência de heterozigotos, sugerindo uma possível existência de seleção natural desfavorecendo o genótipo 1S-2 entre os pacientes com doença falciforme. Os resultados do Odds Ratio sugeriram a possibilidade de que principalmente o aumento de chances de hospitalização por AVC (OR= 6,346; IC 95%= 1,56–25,79; p=0,005) e de sequelas por AVC (OR= 6,556; IC 95%= 1,578–27,237; p=0,005) poderiam estar associados à menor frequência observada de 1S-2 em relação ao esperado. Apesar de não haver diferenças nas frequências genotípicas entre os grupos sem e com sobrecarga de ferro para nenhum dos polimorfismos analisados, quando analisadas as interações entre os polimorfismos, efeitos significativos foram mostrados apenas no grupo sem sobrecarga para o polimorfismo de Hp nos valores de proteína C-reativa ultra-sensível (PCR-us) (p=0,000) e número de transfusões (p=0,018), o mesmo ocorrendo em relação ao polimorfismo de MPO nos valores de PCR-us (p=0,000), e para a interação entre Hp/MPO também nos valores de PCR-us (p=0,000). Diferenças significativas nas comparações 2-a-2 foram observadas para MPO entre os genótipos GG e AA e entre GA e AA (p=0,000 para ambos). Apesar da associação reportada entre o fenótipo Hp1-1 e doença falciforme, nossos resultados corroboram outros indicando que existem *1diferenças entre os subtipos do alelo Hp . Esses resultados ressaltam a importância do presente estudo para um melhor entendimento do significado biológico do polimorfismo de Hp na variabilidade clínica e resposta aos tratamentos de indivíduos falcêmicos na nossa população, e também sugerem que a homozigose AA da MPO pode potencializar os efeitos da asplenia nesses indivíduos. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The iron ion is essential for cellular homeostasis; however, it can be highly damaging to the body when it is free, because its ability to accept or donate electrons allows the formation of reactive oxygen species (ROS) to be catalyzed. Under normal circumstances, this reaction is minimized by sequestering iron in complexes with proteins. However, in iron overload, iron deposits are free to promote the production of ROS, which is inevitable in patients who receive frequent transfusions, as occurs in sickle cell anemia. Haptoglobin (Hp) is a glycoprotein which binds free hemoglobin (Hb), forming the Hp-Hb complex that is essential for removal of plasma Hb, having a crucial role against oxidative stress induced by Hb. Another protein related to oxidative stress is myeloperoxidase (MPO), a lysosomal enzyme with oxygen-dependent microbicidal activity present in monocytes and neutrophils. Since both proteins show genetic polymorphisms that may influence the protection against oxidative stress, the objective of this study was to investigate the frequency of polymorphisms in the Hp and MPO ( G463A) genes of patients with sickle cell disease (SS) and its correlation with the clinical severity of iron overload, aiming to evaluate a possible association between these polymorphisms and clinical variability, response to treatment and prognosis, especially those related to oxidative stress. To this end, we conducted a cross-sectional study with a convenience sample comprising 78 patients with sickle cell disease treated at Hospital de Base do Distrito Federal (HBDF), with and without iron overload. Data were obtained from laboratory tests, questionnaires, the medical records and analysis of the polymorphisms by methods based on polymerase chain reaction. Positive correlations was found between Hp genotypes and values of ferritin levels (p=0.035, Spearman's correlation coefficient= 0.239), treatment with hydroxyurea (p=0.031, contingency coefficient= 0.369), hospitalization for stroke (p=0.023, contingency coefficient= 0.379) and sequelae of stroke (p=0.031, contingency coefficient= 0.368); and between MPO genotypes and number of hospitalizations in the past 12 months (p=0.049; contingency coefficient= 0.332) and splenectomy (p=0.024, contingency coefficient= 0.297). Significant associations between specific Hp genotypes and comorbidities were also found, while for MPO, results suggested that AA homozygosis could increase the effects of asplenia. Significant deviation from the Hardy-Weinberg equilibrium was observed only for the Hp polymorphism, which was compatible with heterozygous deficit, suggesting a possible existence of natural selection disfavoring the 1S-2 genotype among patients with sickle cell anemia. Results of the Odds Ratio suggested the possibility that mainly increased chances of hospitalization for stroke (OR= 6.346; IC 95%= 1.56–25.79; p=0.005) and of sequelae from stroke (OR= 6.556; IC 95%= 1.578–27.237; p=0.005) could be associated with less frequently observed 1S-2 than was expected. Although no differences were observed in genotype frequencies between the groups with and without iron overload for any of the polymorphisms analyzed, when the interactions between the polymorphisms were analyzed, significant effects between subjects were shown only in the group without overload for Hp polymorphism in the values of high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP; p=0.000) and number of transfusions (p=0.018), with the same occurring for MPO polymorphism (p=0.000) and the interaction between Hp/MPO (p=0.000) with hs-CRP values. Significant differences in 2-to-2 comparisons were observed for MPO between the genotypes GG and AA (p=0.000), and GA and AA (p=0.000) in the hs-CRP levels. Despite the reported association between Hp1-1 phenotype and sickle cell disease, our results corroborate others *1indicating that there are biological differences between the Hp allele subtypes. These results highlight the importance of this study to better understand the biological significance of Hp polymorphism in the clinical variability and response to treatment of individuals with sickle cell disease in our population, and also suggest that MPO AA homozygosis may increase the effects of asplenia in these individuals.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-04-08T13:52:58Z No. of bitstreams: 1 2013_AlexandreMagalhaesMartins.pdf: 3293712 bytes, checksum: ad5bfda53ed43d7d517651d2a439e4e9 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-04-28T14:29:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_AlexandreMagalhaesMartins.pdf: 3293712 bytes, checksum: ad5bfda53ed43d7d517651d2a439e4e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-04-28T14:29:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_AlexandreMagalhaesMartins.pdf: 3293712 bytes, checksum: ad5bfda53ed43d7d517651d2a439e4e9 (MD5) / Este estudo tem como foco o desenvolvimento e uso de ferramentas de bioinformática aplicadas à análise de grandes volumes de dados de sequenciamento para identificar e selecionar variações específicas de sequência de DNA, como polimorfismos de único nucleotídeo (SNP - Single Nucleotide Polymorphism), marcadores microssatélites (SSR – Single Sequences Repeats) e (indels - Insertions/Deletions), visando o seu emprego em programas de conservação de germoplasma e de melhoramento genético de Brachiaria ruziziensis. Além disto, pretende valer-se das análises in silico com base no genoma de espécies conhecidas como modelo para estudo (ex. arroz), para a caracterização do genoma de Brachiaria ruziziensis, uma espécie órfã de informação genômica. Objetivos específicos a. Sequenciar, montar de novo, analisar e caracterizar o genoma estrutural de Brachiaria ruziziensis, com ênfase no conhecimento da composição de elementos transponíveis, bem como do espaço gênico, em comparação com outras espécies; b. Desenvolver marcadores microssatélites para uso em análise genética e no programa de melhoramento de B. ruziziensis através de sequenciamento de alto desempenho (NGS – Next Generation Sequencing) do genoma nuclear de braquiária. c. Sequenciar, montar de novo, analisar e caracterizar o genoma cloroplástico das quatro principais espécies de braquiária no Brasil (B. ruziziensis, B. brizantha, B. decumbens e B. humidicola). Desenvolver e validar marcadores espécieespecíficos baseados inserções/deleções do DNA cloroplástico para a identificação de acessos destas espécies. d. Desenvolver marcadores SNPs para uso em análise genética e no programa de melhoramento de B. ruziziensis através de NGS.

Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-09T21:08:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bianchi_FabioJose_D.pdf: 1421817 bytes, checksum: 352a4371d2f423c1a37aca684518fba9 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O termo hipodontia pode ser definido como ausência congênita de um ou mais dentes e microdontia como dente com alterações dimensionais. Os dentes mais afetados são os terceiros molares, segundos pré-molares e incisivos laterais. A odontogênese pode ser afetada diretamente por fatores genéticos e ambienatis podendo ser destacado os genes PAX9 e MSX1, e a desnutrição e álcool. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência de regiões dos genes supracitados e da ingestão crônica de álcool durante a gravidez na odontogênese, através de análises de polimorfismos genéticos e morfologia de molares de ratos. No primeiro estudo foi analisado o DNA genômico de 130 indivíduos afetados com agenesia e 110 indivíduos controles. Após a obtenção e extração do DNA, a região G/C-915 do gene PAX9 (NCBI ref SNP ID: rs 2073247) foi amplificadas por reação em cadeia da polimerase (PCR), os polimorfismos foram analisados com duas seqüências diferentes de primers. Os géis foram corados pelo nitrato de prata. Os dados foram analisados através das Simulações de Monte Carlos (programa Clump) e teste Qui-quadrado ao nível de significância de 5%. As análises mostraram que o polimorfismo da região promotora do PAX9 G/C-915 teve alta freqüência em indíviduos com hipodontia de terceiros molares. No segundo estudo foram estudadas região dos genes PAX9 e MSX1, embora, não houve relação da região estudada dos introns do MSX1 com agenesia de terceiros molares, na região do gene C-160T do gene PAX9 (www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP ref 2073247) houve relação entre polimorfismo e agenesia de terceiros molares. Com relação a fatores ambientais, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos do álcool administrado durante a gravidez e na lactação em molares inferiores de ratos. Observou-se uma redução nas dimensões e microdureza Knoop desses elementos dentais / Abstract: The term hypodontia can be defined as a congenital absence of one or more teeth and microdontia teeth with alterations dimensional. The most affected teeth are the third molars, seconds premolars and lateral incisors. Genetic and environmental factors such as PAX9 and MSX1 genes malnutrition and alcohol can directly affect the odontogenesis. The objective of this study was to analyze the influence of gene regions and chronic alcohol intake during pregnancy in odontogenesis, through analysis of genetic polymorphism and morphology of rats molars. In the first study was analyzed the genomic DNA of 130 affected individuals with agenesis and 110 controls. After obtaining and extraction of DNA, the region. After DNA extraction, the region G/C-915 PAX9 gene (NCBI ref SNP ID: rs 2073247) was amplyfied by polymerase chain reaction (PCR). The polymorphic sites were analyzed by two different primers sequences. The gel bands were stained by silver nitrate. Data were analyzed by Monte Carlo simulations (Clump software) and Chi-squared test (x2)with the significance level 5%. The analysis showed that the PAX9 promoter region polymorphism of the G/C-915 had high frequency in individuals with third molars hypodontia. In the second study were studied region of genes PAX9 and, though, there was no relationship in the region of MSX1 introns with third molars agenesis, in the region of C-160T the gene PAX9 (www.ncbi.nlm.nih.gov / SNP ref 2073247) was relationship between polymorphism and third molars agenesis. About to environmental factors, the objective of this thesis was assessing the alcohol effects administered during pregnancy and lactation in lowers molars rats. There was a reduction in size and Knoop microhardness in these dental elements / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental