Adenotonsillar hypertrophy (ATH) seems to be more frequent and persistent in children with sickle cell disease (SCD), which causes a negative impact since it increases the recurrence of pharyngitis and leads to sleep-disordered breathing (SDB), thus increasing the risk of polymerization of hemoglobin S and thereby vaso-occlusive crisis and other complications. The objectives of the study were to determine the frequency of ATH in preschool children with SCD; observe whether there is an association between ATH and age within the age group studied, assess whether the subscale of SDB is associated with the diagnosis of ATH in preschool children with or without SCD and correlate the presence of ATH with features and clinical complications in preschool children with SCD. It is an analytical observational study, consisting of a study group composed of 48 children with SCD and a control group of 35 children without such disease. All children underwent oropharyngoscopy with front light and nasal video endoscopy, while parents and / or guardians answered the questions of SDB subscale of the Sleep Disturbance Scale for Children (SDSC). The presence of ATH was considered when palatine tonsils were grades three or four of Brodsky scale (1989) and / or when pharyngeal tonsil occluded choanaes in at least 70% (1st criterion) or 50% (2nd criterion). In children with SCD were also surveyed on records the following characteristics and clinical complications of SCD: level of hemoglobin F (HbF), child's age when they began presenting specific symptoms of SDC, history of transfusions and hospitalizations due to painful crises, cerebrovascular accident (CVA) and acute chest syndrome (ACS). Twelve children from the study group (25%) and eight children in the control group (20%) had ATH when we used the 1st criterion of obstruction by the pharyngeal tonsil. When used the 2nd criterion, 18 (37.5%) children in the study group and 13 (37.1%) children in the control group received this diagnosis, with no significant difference between the frequencies in both groups regardless of the obstruction criteria used (p = 0.246 and p = 0.061, respectively). There was only association between ATH and age in the control group and only when the 1st criterion of obstruction by the pharyngeal tonsil was used (p = 0.043). The SDB subscale of EDSC joined the diagnosis of ATH regardless of pharyngeal obstruction criteria used both in the study group (p = 0.0025 for 1st criterion and p = 0.008 for the 2nd), as in the control group (p = 0.0026 for 1st criterion and p = 0.0018 for 2nd). Among the features and clinical complications of SDC, the ATH showed a correlation only with a higher percentage of HbF. It was concluded that ATH was not associated with SDC in preschool children in the study sample; the age of five years was the most affected by ATH in children without the diagnosis of SDC, when used 1st criterion of pharyngeal obstruction; the SDB subscale of SDSC presented itself as a useful tool for the suspected diagnosis of ATH in preschool children with or without SDC; ATH was associated with a higher percentage of HbF in children with SCD. / A hipertrofia adenotonsilar (HAT) parece ser mais frequente e com tendência a prolongar-se em crianças com doença falciforme (DF), o que traz um impacto negativo na medida em que aumenta a recorrência de faringites e leva a distúrbios respiratórios do sono (DRS), elevando assim o risco de polimerização da hemoglobina S e, consequentemente, fenômenos vasoclusivos e outras complicações. Os objetivos do trabalho foram: verificar a frequência de HAT em pré-escolares portadores de DF; observar se há associação entre HAT e idade dentro da faixa etária estudada, avaliar se a subescala de DRS associa-se ao diagnóstico de HAT em pré-escolares com ou sem DF e correlacionar a presença de HAT com características e complicações clínicas nos pré-escolares portadores de DF. Trata-se de um estudo observacional analítico, constituído por um grupo-estudo composto por 48 crianças com DF e de um grupo-controle formado por 35 crianças sem a referida doença. Todas as crianças foram submetidas a orofaringoscopia com luz frontal e vídeo-endoscopia nasal, enquanto os pais e/ou responsáveis responderam às três questões da subescala de DRS da Escala de Distúrbio do Sono em Crianças (EDSC). A presença de HAT era considerada quando as tonsilas palatinas situavam-se nos graus três ou quatro da escala de Brodsky (1989) e/ou quando a tonsila faríngea ocluía as coanas em no mínimo 70% (1º critério) ou 50% (2º critério). Em relação às crianças com DF foram ainda pesquisadas em prontuário as seguintes características e complicações clínicas da doença: porcentagem de hemoglobina F (HbF), idade da criança quando se iniciaram os sintomas específicos da DF, histórico de transfusões e internamentos decorrentes de crises álgicas, acidente vascular encefálico (AVE) e síndrome torácica aguda (STA). Doze crianças do grupo-estudo (25%) e oito crianças do grupo-controle (20%) apresentaram HAT quando foi utilizado o 1º critério de obstrução pela tonsila faríngea. Quando utilizado o 2º critério, 18 (37,5%) crianças do grupo-estudo e 13 (37,1%) crianças do grupo-controle receberam este diagnóstico, não havendo diferença significativa entre as frequências nos dois grupos independentemente do critério de obstrução utilizado (p=0,246 e p=0,061, respectivamente). Só houve associação entre HAT e idade no grupo-controle e somente quando utilizado o 1º critério de obstrução pela tonsila faríngea (p=0,043). A subescala de DRS da EDSC associou-se ao diagnóstico de HAT independentemente do critério de obstrução faríngea utilizado, tanto no grupo-estudo (p=0,0025 pelo 1º critério e p=0,008 pelo 2º), quanto no grupo-controle (p=0,0026 pelo 1º critério e p=0,0018 pelo 2º). Dentre as características e complicações clínicas da DF, a HAT demonstrou associação somente com uma porcentagem mais alta de HbF. Concluiu-se que a HAT não esteve associada à DF em pré-escolares na amostra estudada; a idade de cinco anos foi a mais acometida por HAT em crianças sem o diagnóstico de DF, quando utilizado o 1º critério de obstrução faríngea; a subescala de DRS da EDSC apresentou-se como um instrumento útil para a suspeita diagnóstica de HAT em pré-escolares com ou sem DF; a HAT esteve associada a uma maior porcentagem de HbF nas crianças com DF.

INTRODUCTION: The ulcers of the lower limbs are cited as the main cutaneous manifestation of sickle-cell anemia. Infection of sickle-cell leg ulcers is often considered inevitable, but its role in the emergence and perpetuation of the injury remains controversial. This study aims to characterize the microbiota of leg ulcers in patients with sickle-cell anemia and compare it to the microbiota of ulcers of other etiologies. METHODS: This was a descriptive cross-sectional study, consisting of two groups (patients with sickle-cell leg ulcers and patients with ulcers of other etiologies), where was studied the lesion microbiota and its antimicrobial susceptibility. The material was collected with aseptic technique, by curettage of the ulcer, and was analyzed by standard and automated methods. RESULTS: Each group consisted of 19 patients, and was observed in patients with sickle-cell leg ulcer the prevalence of only one bacteria (57.9%), with 31.6% of sterile cultures, and Staphylococcus aureus (31.6 %) and Pseudomonas aeruginosa (26.3%) were the major microorganisms isolates. In the evaluation of antimicrobial resistance were observed 2 cases (40%) of P. aeruginosa resistant to aminoglycosides, 1 case (20%) to Ciprofloxacin and 3 cases (60%) to Cefepime, and 2 cases (33.3%) of S. aureus resistant to Oxacillin and 1 case (16.7%) to Linezolid. On ulcers of other etiologies were seen bacterial growth in 100% of the 19 cases, with higher microbial diversity and predominance of Gram-negative (89.5%), especially of Pseudomonas spp., Klebsiella spp. and Proteus mirabilis. The antibiogram demonstrated greater resistance, with evidence of resistance to fourth generation´s cephalosporins, carbapenems and aminoglycosides. In contrast, the lesions not related to sickle-cell disease showed more frequent bacterial isolation, higher microbial diversity and less favorable antimicrobial resistance profile. The study results suggest a weak relationship between the local flora and the evolution of sickle cell ulcers. / INTRODUÇÃO: As úlceras em membros inferiores são citadas como a principal manifestação cutânea da anemia falciforme. A infecção das úlceras falcêmicas é frequentemente considerada inevitável, porém seu papel no surgimento e perpetuação das lesões ainda permanece controverso. O presente estudo propõe caracterizar a microbiota da úlcera de membro inferior em pacientes com anemia falciforme e compará-la à microbiota de úlceras de outras etiologia. MÉTODO: Trata-se de um estudo descritivo e transversal, composto por dois grupos (pacientes com úlcera falcêmica e pacientes com úlceras de outras etiologias), sendo estudadas a microbiota lesional e sua suscetibilidade antimicrobiana. A coleta foi realizada com técnica asséptica, por curetagem, sendo o material analisado por técnica padrão e por método automatizado. RESULTADOS: Cada grupo foi composto por 19 pacientes, sendo observado nos pacientes com anemia falciforme e úlcera cutânea o predomínio de uma biota unimicrobiana (57,9%), com 31,6% das culturas estéreis, sendo o Staphylococcus aureus (31,6%) e a Pseudomonas aeruginosa (26,3%) os principais germes isolados. Na avaliação da resistência antimicrobiana, foram observados 2 casos (40%) de P. aeruginosa resistentes a aminoglicosídeos, 1 caso (20%) à Ciprofloxacina e 3 casos (60%) à Cefepima, além de 2 casos (33,3%) de S. aureus resistentes à Oxacilina e 1 caso (16,7%) à Linezolida. Por outro lado, as úlceras de etiologia não falcêmica demonstraram crescimento bacteriano em 100% dos 19 casos, com maior diversidade microbiológica, sendo isolados predominantemente Gram negativos (89,5%), principalmente Pseudomonas spp., Proteus mirabillis e Klebsiella spp.. O antibiograma do grupo demonstrou maior resistência, com evidência de resistência à cefalosporinas de quarta geração, carbapenêmicos e aminoglicosídeos. Em comparação, as lesões não falcêmicas demonstraram isolamento bacteriano mais frequente, maior diversidade microbiológica e perfil de resistência antimicrobiana menos favorável que na anemia falciforme. Os resultados do estudo sugerem uma fraca relação entre a microbiota local e o aparecimento e evolução das úlceras falcêmicas.

Sickle cell anemia is a disorder of genetic hemoglobin more common around the world, characterized by the presence of abnormal hemoglobin S. The phenomena of vaso-occlusion and anemia characteristics cause tissue damage leading to organ damage, including the kidneys. The various types of renal abnormalities occur primarily in the renal medulla. Clinical manifestations of sickle cell nephropathy start early, often before one year of age with glomerular hyperfiltration, hyposthenuria, renal tubular acidosis distal and, over time, increase in albuminuria. The lactate dehydrogenase (LDH) is considered a useful marker of hemolysis and its levels are very high in the presence of intravascular hemolysis, as indicated by some authors as associated with various complications related to hemolysis, including renal complications. In order to identify laboratory variables associated with renal injury in patients with sickle cell anemia, a cross-sectional study was conducted in children, teenagers and young adults treated in the hematology ward of the HU-UFS, from October 2010 to June 2011. Laboratory tests were performed in 124 patients with sickle cell anemia, mean age 13.3 + 6.4 years (2 - 32 years), 56.5 % were male. There was a frequency of microalbuminuria and proteinuria 19.4 % and 18.5% respectively. The frequency of glomerular hyperfiltration was 63.7 %. Elevation of LDH occurred in 95 % of patients and correlated positively with microalbuminuria, with percentages of reticulocytes and inversely with average rates of hemoglobin. Although univariate analysis revealed a significant positive correlation between the levels of LDH and microalbuminuria, these values were not significantly different between patients with or without microalbuminuria, suggesting that the association with renal injury is not specific, since it was also associated with markers of hemolysis. It is concluded that, levels of LDH present variability independently of microalbuminuria, because LDH levels were not able to distinguish patients with and without microalbuminuria. / A Anemia Falciforme é uma desordem da hemoglobina de caráter genético, mais comum em todo o mundo, caracterizada pela presença da hemoglobina anormal S. Os fenômenos de vaso-oclusão e anemia característicos da doença causam danos aos tecidos levando à lesão de órgãos, entre eles os rins. Os vários tipos de anormalidades renais ocorrem principalmente na medula renal. Manifestações clínicas de nefropatia falciforme começam cedo, muitas vezes antes de um ano de idade com hiperfiltração glomerular, hipostenúria, acidose tubular renal distal e, ao longo do tempo, aumento de albuminúria. A desidrogenase láctica (DHL) é considerada um marcador útil de hemólise e seus níveis encontram-se bastante elevados na presença de hemólise intravascular, sendo apontada por alguns autores como associadas a várias complicações relacionadas à hemólise, inclusive complicações renais. Com o objetivo de identificar variáveis laboratoriais associadas à lesão renal em portadores de anemia falciforme, foi realizado um estudo transversal em crianças, adolescentes e jovens adultos, atendidos no ambulatório de hematologia do HU-UFS, no período de outubro de 2010 a junho de 2011. Exames laboratoriais foram realizados em 124 pacientes com anemia falciforme, idade média de 13,3 + 6,4 anos (2 a 32 anos), 56,5 % do sexo masculino. Observou-se uma frequência de microalbuminúria e proteinúria de 19,4 % e 18,5 % respectivamente. A frequência de hiperfiltração glomerular foi de 63,7 %. Elevação de DHL ocorreu em 95 % dos pacientes e correlacionou-se positivamente com a microalbuminúria, com a contagem de reticulócitos e inversamente com taxas médias de hemoglobina. Apesar de a análise univariada revelar uma correlação positiva significativa entre os níveis de DHL e microalbuminúria, estes valores não foram significativamente diferentes entre os pacientes com ou sem de microalbuminúria, sugerindo que a associação com lesão renal não é específica, uma vez que houve também associação com marcadores de hemólise. Conclui-se que, níveis de DHL apresentam variabilidade de forma independente da microalbuminúria, pois níveis de DHL não foram capazes de discriminar pacientes com ou sem microalbuminúria.

Orientador: Maria de Fatima Sonati / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T21:21:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_MagnunNueldoNunesdos_M.pdf: 1780393 bytes, checksum: f42ac636ab51c50a200800b4e28c33c3 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O estresse oxidativo, particularmente no endotélio, exerce forte influência na gênese da vaso-oclusão e, assim, na evolução clínica e sobrevida de pacientes com Doenças Falciformes (DF). A fisiopatologia das DF está centralizada na propriedade de polimerização da desoxi-hemoglobina (Hb) S, mas fatores genéticos têm atuado como moduladores de suas complicações clínicas. A haptoglobina (Hp) é uma glicoproteína plasmática cuja função primordial é se ligar à Hb livre no plasma, impedindo a excreção renal de ferro e protegendo os vasos dos seus efeitos oxidativos. É ainda uma proteína de fase aguda positiva, com capacidade imunomodulatória. Dois alelos codominantes, HP1 e HP2, resultam em 3 genótipos/fenótipos principais, Hp1-1, Hp2-1 e Hp2-2, que correspondem a proteínas com características físico-químicas e funcionais distintas. Recentemente foi sugerido que o genótipo Hp2-2 tem sua freqüência diminuída com o aumento da idade de pacientes com DF e pode estar relacionado a um pior prognóstico. Experimentos in vitro têm demonstrado menor capacidade antioxidante e maior reatividade inflamatória relacionadas a esse fenótipo (Hp2-2). Assim, o objetivo do presente trabalho foi determinar, por PCR alelo-específica, os genótipos de Hp em 775 pacientes com DF (599 HbSS, 94 HbSC, 81 HbS/ß talassemia e 1 HbS/Deer Lodge), acompanhados no Hospital HEMOPE (Hemocentro de Pernambuco, região nordeste do Brasil) e subdivididos em 5 faixas etárias (de 3 meses a 5anos de idade - n = 237, de 6 a 10 anos- n = 96, de 11 a 15 anos - n = 89, de 16 a 20 anos - n = 95 e acima de 20 anos - n = 258). Os pacientes com idade superior a 20 anos foram ainda comparados a controles saudáveis (236 doadores de sangue da mesma região do país, ajustados para a proporção entre os sexos e pareados com os pacientes por idade e características étnicas predominantes); ambos os grupos foram também fracionados em faixas de 21 a 30 anos (140 pacientes e 111 controles) e superior a 30 anos de idade (118 pacientes e 125 controles). As distribuições das freqüências genotípicas de Hp não diferiram significativamente entre os cinco principais grupos de pacientes (p=0,7908), mesmo quando estes, adicionalmente, foram subdividos em faixas de idade de 3 meses a 16 anos (grupo pediátrico - n = 447) e superior a 16 anos (grupo adulto - n = 328) (p=0,7421). Quando os pacientes foram comparados ao grupo controle, as freqüências do genótipo Hp2-2 se mostraram inferiores (22,06% na média dos cinco grupos de pacientes - ou 22,48% no grupo V, versus 28,39% nos controles); nos pacientes com mais de 20 anos, ela sofreu redução com o aumento da idade, enquanto entre os controles se manteve estável (dado observado da comparação entre os subgrupos com idade de 21 a 30 anos - 25% de Hp2-2 nos pacientes versus 28,83% nos controles, e superior a 30 anos - 19,49% de Hp2-2 nos pacientes versus 28% nos controles). Estas diferenças, no entanto, não foram suficientes para que o nível de significância estatística fosse atingido (p = 0,6479 e 0,3780, respectivamente). Nossos resultados indicam uma redução nas freqüências do genótipo Hp2-2 dos pacientes em relação à população normal, intensificada com a progressão da idade a partir da vida adulta, mas também sugerem que as conseqüências eventualmente advindas de sua presença sejam, in vivo, minimizadas por mecanismos compensatórios inerentes aos organismos complexos. A casuística aqui analisada foi bastante expressiva, mas ainda não atingiu o tamanho amostral ideal para ser considerada representativa da população de pacientes com DF como um todo. Esses resultados se aplicam, então, exclusivamente ao grupo de pacientes ora estudado. Outras comparações efetuadas em busca da existência de interação entre o polimorfismo da Hp e os níveis de Hb Fetal, a presença de talassemia a (deleção -a3,7) e os haplótipos do cluster ß também não revelaram quaisquer dferenças significativas. / Abstract: Oxidative stress, particularly in the endothelium, exerts a strong influence on the genesis of sickle cell disease (SCD) vasoocclusion and, consequently, on patients' clinical evolution and survival. The pathophysiology of SCD is centered on the polymerization property of the desoxy-hemoglobin (Hb) S, but genetic factors can act as modulators of its clinical complications. Haptoglobin (Hp) is a plasma glycoprotein whose primary function is to bind to free hemoglobin, preventing excretion of iron by the kidneys and protecting blood vessels from its oxidative effects. It is also an acute phase positive protein with immunomodulatory capacity. Two codominant alleles, HP1 and HP2, result in 3 main genotypes / phenotypes, Hp1-1, Hp2-1 and Hp2-2, which correspond to proteins with different functional characteristics. Recently, it has been suggested that the Hp2-2 genotype frequency reduces with age in SCD patients and that this reduction may be associated with a worse prognosis. In vitro experiments have shown lower antioxidant capacity and higher inflammatory reactivity related to the phenotype (Hp2-2). Thus, the aim of this study was to determine, by allele-specific PCR, the Hp genotypes in 775 patients with SCD (599 HbSS, 94 HbSC, 81 HbS/ß-thalassemia and 1 HbS/ HbDeer Lodge), followed at HEMOPE (Pernambuco Blood Center, in the northeast region of Brazil), divided into 5 different age groups (3 months - 5 years - n=237, 6-10 years - n=96, 11-15 years - n=89, 16-20 years - n=95 and > 20 years - n=258). Those over 20 years of age were also compared with healthy controls (n=236, blood donors in the same country region, adjusted for the ratio between the gender and matched with patients by age and predominant ethnic characteristics); both groups were subdivided into 2 different age groups: 21 to 30 years (140 patients and 111 controls) and more than 30 years-old (118 patients and 125 controls). The distributions of Hp genotypic frequencies did not differ significantly among the five main groups of patients (p=0.7908), even when they, additionally, were divided into age groups from 3 months to 16 years (pediatric group - n= 447) and more than 16 years (adult group - n = 328) (p=0.7421). When the patients were compared to the control group, the frequencies of genotype Hp2-2 were lower (22.06% in means of five groups of patients - or 22.48% of group V versus 28.39% in controls); in patients over 20 years, this genotype was reduced with increased age, while it remained stable in controls (as seen from the comparison of the subgroups from 21 to 30 years of age - 25% of Hp2-2 in patients versus 28,83% in controls, and more than 30 years-old - 19.49% of Hp2-2 in patients versus 28% in controls). These differences, however, were not statistically significant (p = 0.6479 and 0.3780, respectively). Our results indicate a reduction in Hp2-2 genotype frequencies of patients, compared to the healthy controls, intensified with the progression of age from adulthood, but also suggest that the consequences resulting from their presence in vivo are probably minimized by compensatory mechanisms inherent in complex organisms. The population analyzed here was very expressive, but was not ideal to be considered as representative of SCD patients as a whole yet. These results apply only to the group of patients studied here. Other comparisons performed in search of the existence of interaction among the Hp polymorphism and Hb Fetal levels, a-thalassemia and cluster ß haplotypes also revealed no significant differences. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T14:17:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bezerra_MarcosAndreCavalcanti_D.pdf: 919225 bytes, checksum: 5524005c5d425fe7e16e9c36cfd7275b (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O estado inflamatório crônico que ocorre na doença falciforme (DF) é decorrente de diversos fatores que se interligam e se retroalimentam, formando um ciclo inflamatório permanente. Estudos prévios sobre as propriedades adesivas e funcionais das células são restritos à forma homozigota do gene da HbS (SS). No entanto, trabalhos que avaliem essas características celulares, que possam contribuir para o esclarecimento da heterogeneidade clínica em outros grupos de DF e talassemia intermediária (TI), são escassos na literatura. O objetivo desse trabalho foi avaliar a capacidade adesiva de células vermelhas, neutrófilos e plaquetas, quimiotaxia dos neutrófilos, os níveis plasmáticos das citocinas inflamatórias e o stress oxidativo na DF e ß-TI. Dessa maneira foram selecionados pacientes com DF: SS (n=20), SC (n=20), 3 grupos com S/ß talassemia - S/ß-IVS-I-6 (T->C) (n=17), S/ß-IVS-I-5 (G->C) (n=16), S/ß-Códon39 (C??T) (n=12) - e TI homozigotos para a mutação IVS-I-6 (T->C) (n=20), acompanhados na Fundação HEMOPE. As técnicas utilizadas no desenvolvimento desse estudo foram: ensaio de quimiotaxia (ChemoTx) para avaliação da capacidade migratória dos neutrófilos, adesão estática para determinação da adesão basal das células, citometria de fluxo para avaliar a produção de ROS e a expressão de moléculas de adesão, e ELISA para determinar a atividade da superóxido dismutase (SOD) e a dosagem das citocinas. Para avaliação de nossos resultados, todos os grupos de pacientes foram comparados ao grupo controle AA: a adesão de neutrófilos e plaquetas mostrou-se significativamente aumentada em todos dos grupos de DF; somente os grupos SS e SC apresentaram capacidade quimiotática significativamente aumentada, assim como a adesão de células vermelhas e a expressão das moléculas de adesão CD36 e CD49d. Os níveis plasmáticos das citocinas IL1-ß, IL-6, IL-8 e TNF-a mostraram-se significativamente aumentados no grupo SS, e nos demais grupos de DF apresentaram uma distribuição heterogênea. Observamos um aumento significativo na produção de ROS em células vermelhas, mononucleares e neutrófilos de todos os grupos de DF, exceto para os grupos S/ß nas células vermelhas. Além disso, a atividade plasmática da SOD mostrou-se reduzida nos grupos SS, SC e S/ß-Cd39. A adesão dos neutrófilos, células vermelhas e plaquetas foi significativamente maior nos pacientes com TI, assim como a expressão das moléculas CD36 e CD49d nas células vermelhas e a capacidade quimiotática dos neutrófilos. Nesses pacientes, a produção de ROS e os níveis plasmáticos das citocinas foram significativamente aumentados, enquanto que a atividade enzimática da SOD foi significativamente reduzida. Apesar da doença SC possuir uma clínica mais branda, nossos dados sugerem que neutrófilos, glóbulos vermelhos e plaquetas desses pacientes possuem características adesivas e quimiotáticas semelhantes às encontradas nas células de pacientes com AF. Além disso, nossos resultados sugerem que quanto maiores os níveis de HbA na S/ß talassemia, menor a adesão de neutrófilos, células vermelhas e plaquetas, podendo explicar as diferenças clínicas encontradas nesses pacientes em função do genótipo. É possível que o aumento da aderência, da capacidade quimiotática, da produção de ROS, das citocinas e diminuição do mecanismo antioxidante, observados neste estudo, contribuam nas complicações clínicas encontradas na ß-TI, tais como hipertensão pulmonar e úlceras de perna. Estudos adicionais podem contribuir para o entendimento das diferenças na apresentação clínica desses pacientes. / Abstract: The chronic inflammatory state that occurs in sickle cell disease (SCD) is due to several factors that are interlinked and feeds back to a permanent inflammatory cycle. Previous studies about the adhesive properties and functional cells are restricted to the homozygous form of the HbS gene (SS). However, studies that assess the cellular characteristics that may contribute to the clarification of clinical heterogeneity in other groups of SCD and thalassemia intermedia (TI), are scarce in the literature. The aim of this study was to evaluate the adhesive properties of red blood cells (RBC), platelets and neutrophils (NS), NS chemotaxis, inflammatory cytokine plasma levels and oxidative stress in SCD and ß-TI patients. Thus, we selected patients with different SCD genotypes: SS (n=20), SC (n=20), three groups of HbS/ß thalassemia - HbS/ß39 (C->T) (n=12), HbS/IVSI- 5 (G->C) (n=16), and HbS/IVS-I-6 (T->C) (n=17) - and patients with homozygous thalassemia intermedia IVS-I-6 (T->C) - followed regularly at the Fundação HEMOPE - Brazil. The techniques used in the development of this study were: chemotaxis assay (ChemoTx) to evaluate the migratory ability of neutrophils, basal adhesion was compared using static adhesion assays, flow cytometry to assess the production of ROS and expression of adhesion molecules, and ELISA to determine the superoxide dismutase (SOD) activity and cytokine plasma levels. For evaluation of our results, all groups of patients were compared with the AA control group: the neutrophil and platelet adhesions were significantly increased in all groups of SCD, only the SS and SC groups showed significant increase in the chemotactic ability, as well as the RBC adhesion and the expression of adhesion molecules CD36 and CD49d. All the SCD groups investigated showed an increase in IL-6 plasma levels. IL1-ß levels were significantly higher in the S/ß-IVS-I-5 (G??C), S/ß-Cd39 and SS groups. Plasma levels of IL-8 were increased only in the SS and SC groups, however TNF-a levels were significantly higher in SS and the three groups with HbS-ß thalassemia. NS and mononuclear cell ROS production was significantly increased in all SCD groups, however red blood ROS production was higher only in the SS and SC groups. Moreover, the SOD plasma activity was shown to be reduced in groups SS, SC and S/ß-Cd39. The NS, RBC and platelets adhesion was significantly higher in TI patients, as well as the expression of molecules CD36 and CD49d in RBC and chemotactic ability of NS. In these patients, the ROS production and cytokines plasma levels were significantly increased, while SOD plasma activity was significantly reduced. Although SC disease has a milder clinical manifestations, our data suggest that NS, RBC and platelets of these patients have chemotactic and adhesive characteristics similar to those found in cells of patients with SS. Moreover, our results suggest that the higher levels of HbA in S/ß thalassemia reduce the NS, RBC and platelets adhesion and may explain the clinical differences found in these patients, according to genotype. It is possible that the increase in the cell adherence, chemotactic capacity, ROS production, of cytokines levels and the reduction in antioxidant mechanism, observed in this study, contribute to several clinical complications of ß-TI, such as pulmonary hypertension and leg ulcers. Further studies may contribute to our understanding of the differences in the clinical presentation of these patients. / Doutorado / Medicina Experimental / Doutor em Fisiopatologia Medica

Orientador: Luciana de Lione Melo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T05:49:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_CarmenCunhaMello.pdf: 2382013 bytes, checksum: 90391c82a06d6e9eeafbc3c439192c88 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A doença falciforme é a doença hereditária monogênica mais comum do Brasil e, embora tratável, ainda é incurável. O tratamento precoce aumenta a sobrevivência das crianças afetadas e melhora a sua qualidade de vida, contudo a problemática que envolve o conviver com uma doença crônica está sempre presente. Trata-se de um estudo fenomenológico cuja proposta foi compreender o sendo-com a criança com doença falciforme na perspectiva da mãe. Foram entrevistadas 12 mães de crianças com doença falciforme diagnosticadas na triagem neonatal, em seguimento no Centro Infantil Boldrini há pelo menos um ano. As entrevistas abertas foram realizadas no domicílio das mães e tiveram a seguinte questão norteadora: "conte-me como está sendo conviver com o seu(sua) filho(a) e a doença falciforme". As entrevistas foram gravadas em fita K7 e, posteriormente, transcritas na íntegra. A fim de compreender o significado do ser-mãe de criança com doença falciforme, os discursos maternos foram analisados à luz dos passos de Giorgi (1985) e Martins & Bicudo (2004). O fenômeno se desvelou em três categorias temáticas: a doença tornando-se presente no cotidiano das mães, sendo-com o outro na dor e descortinando um novo universo. Este estudo possibilitou a compreensão de algumas facetas do ser-mãe de uma criança com doença falciforme e o vislumbrar de diversas perspectivas para um novo cuidar. Entretanto, o fenômeno é infinito e sempre repleto de novas possibilidades. Espero que este estudo, sensibilize e revele que o cuidar autêntico é possível e essencial / Abstract: The sickle cell disease is more common monogenic hereditary illness of Brazil and, even so treatable, still it is incurable. The precocious treatment increases the survival of the affected children and improves its quality of life, however, the problematic one that it involves coexisting a chronic illness is always present. One is about a phenomenological study whose proposal was to understand be-with the child with sickle cell disease in the perspective of the mother. Twelve mothers of children with sickle cell disease diagnosed in the neonatal screening had been interviewed, in follow up at Centro Infantil Boldrini for at least one year. The open interviews had been carried through in the domicile of the mothers and had had the following question: "it counts to me as it is being to live with your child and the sickle cell disease". The interviews had been recorded in K7 ribbon and, later, transcribing in the complete one. In order to understand the meaning of the be-mother of child with sickle cell disease, the maternal speeches had been analyzed to the light of the steps of Giorgi (1985) and Martins & Bicudo (2004). The phenomenon disclose itself in three thematic categories: the illness becoming present in the diary life of the mothers, disclosing a new universe and be-with the other in pain. This study became possible the understanding of the some face of bemother of a child with sickle cell disease and glimpsing of diverse perspectives for a new to take care of. However, the phenomenon is infinite and always full of new possibilities. I wait that this study sensibilizes and discloses that the authentic taking care of it is possible and essential / Universidade Estadual de Campi / Enfermagem e Trabalho / Mestre em Enfermagem

Orientador: Elizete Aparecida Lomazi da Costa Pinto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T19:54:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gumiero_AnaPauladosSantos_M.pdf: 1871009 bytes, checksum: 1d48409780e8bf7e61ec1a9519c9cd4d (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Introdução- A anemia falciforme (AF) causa hemólise crônica e acelerada que é reconhecida como um fator de risco para desenvolvimento de colelitíase. Esta complicação pode ocorrer em mais de 50% da população adulta com AF. A colecistectomia é a conduta consensual para pacientes sintomáticos, mas nos assintomáticos a sua indicação é controversa. Objetivos- Relatar a freqüência de colelitíase em pacientes com AF e descrever a opção de conduta médica em caso de diagnóstico desta complicação, numa coorte de pacientes seguidos num centro terciário de hematologia pediátrica. Pacientes e métodos- Estudo descritivo e retrospectivo, com revisão dos prontuários de 225 pacientes e registro dos dados relacionados à evolução clínica. Resultados- A freqüência cumulativa de colelitíase foi de 44,9%, sendo que metade dos pacientes eram assintomáticos. As idades médias no diagnóstico de colelitíase e no momento do tratamento cirúrgico foram, respectivamente, 12,5 anos (DP = 5 anos) e 14 anos (DP = 5,4 anos). A prevalência de colelitíase foi maior nos pacientes com fenótipos SS e Sß Talassemia, comparada à prevalência nos pacientes com fenótipo SC (?2= 0,001). Entre os pacientes sintomáticos (50%), a dor abdominal inespecífica foi o único sintoma ou o sintoma mais freqüentemente referido. Entre pacientes que realizaram colecistectomia (N = 44), 39 tiveram melhora ou resolução de seus sintomas após o procedimento. Durante o seguimento clínico dos pacientes assintomáticos e não tratados cirurgicamente (7 anos ± 4,8 anos), nenhuma criança apresentou complicação relacionada a colelitíase. Conclusões- A freqüência de colelitíase na população estudada foi de 44,9%. Um terço dos pacientes foi diagnosticado antes dos 10 anos de idade. Pacientes com fenótipos SS e Sß associaram-se à maior freqüência de litíase biliar. Os pacientes assintomáticos e não operados não apresentaram complicações num período de 7 anos de seguimento / Abstract: Background- Sickle cell disease (SCD) causes chronic and recurrent hemolysis which is a recognized risk factor for cholelithiasis. This complication occurs in 50% of adults with SCD. Surgery is the consensual therapy in symptomatic patients, but the surgical approach is still controversial in asymptomatic individuals. Aims- To describe the frequency and the outcome of children with SCD complicated with gallstones followed up in a tertiary pediatric hematology center. Patients and methods- In a retrospective and descriptive study, 225 charts were reviewed and data regarding patient¿s outcome were recorded. Results- The prevalence of cholelithiasis was 44,9% and half of the patients had no symptom. The mean age diagnosis of cholelithiasis and surgical treatment were 12.5 years (SD= 5) and 14 years (SD= 5.4), respectively. The prevalence of cholelithiasis was higher in patients with SS and Sß thalassemia when compared to patients with SC disease (?2 = 0.001). In 50% of symptomatic patients, recurrent abdominal pain was the single or predominant symptom. Thirty-nine of 44 operated patients reported symptom relieve after surgical procedure. Asymptomatic non-operated individuals were followed up for 7 years (SD = 4.8), and none of them presented complications related to cholelithiasis during this period. Conclusions- Cholelithiasis frequency in studied children was 44,9%. One-third of patients were diagnosed before 10 years of age. Patients with the SS or Sß phenotype showed higher frequency of cholelithiasis. About 50% of patients with gallstones had no symptom and most of them did not undergo surgery and did not present complications during a 7-year follow-up period / Mestrado / Pediatria / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientadores: Fernando Ferreira Costa, Nicola Conran Zorzetto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T06:25:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Canalli_AndreiaAverci_D.pdf: 1313778 bytes, checksum: 1832f98c252279d3722a62951dcfc9c0 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A hemoglobina S (HbS) é decorrente de uma mutação de ponto que ocasiona a troca do ácido glutâmico pela valina na cadeia polipeptídica da globina beta. A polimerização da HbS desoxigenada (pouco solúvel), torna as hemácias menos flexíveis e favorece a impactação das mesmas na microcirculação com subseqüente obstrução da luz do endotélio e vaso-oclusão, seguida de lesões a orgãos alvos, responsáveis pela morbi-mortalidade associada a essa doença. Numerosas evidências sugerem que outros fatores participem da fisiopatologia da vaso-oclusão e do processo inflamatório crônico característico da anema falciforme (AF). A redução da biodisponibilidade do óxido nítrico (NO) pode ser um fator que favoreça a vaso-oclusão, uma vez que ele é um gás vasodilatador e pode inibir a adesão leucocitária. Nesse contexto, os objetivos do presente trabalho foram avaliar as propriedades adesivas dos neutrófilos de pacientes com AF e investigar o papel da via de sinalização do NO e dos nucleotídeos cíclicos (AMPc e GMPc) nos processos de vaso oclusão na AF. Os neutrófilos de pacientes com AF apresentaram maior adesão in vitro para ambos ligantes, fibronectina (FN) e molécula de adesão intercelular (ICAM-1), quando comparados à adesão de neutrófilos de controles. A co-incubação dos neutrófilos de pacientes com AF com agentes doadores de NO, nitroprussiato de sódio (SNP), dietilamina NANOato (DEANO) e com estimulador da guanilato ciclase solúvel (GCs), BAY 412272, diminuíram significativamente o aumento da adesão dos neutrófilos à FN e ao ICAM-1. O oxidiazolo [4,3-a]quinoxalin-1-one, um inibidor da GCs, reverteu a inibição da adesão provocada pelo SNP e DEANO à FN, indicando que a sinalização ependente de GMPc participa desse mecanismo. Os níveis intracelulares de GMPc foram significativamente maiores nos neutrófilos de pacientes que fizeram uso de terapias com hidroxiurea (HU). Em concordância com esses resultados, a adesão dos neutrófilos à FN e ao ICAM-1 foi significativamente menor em pacientes com AF em uso de HU se comparada com os neutrófilos de pacientes com AF sem terapia com HU. Adicionalmente, a co-incubação dos neutrófilos de pacientes com AF com KT5720 (um inibidor de PKA) reduziu a adesão basal enquanto que a co-incubação das células com KT5823 (inibidor de PKG) não alterou a adesão dos neutrófilos à FN. O estímulo dos neutrófilos de pacientes com AF com interleucina 8 (IL-8) aumentou significativamente a adesão à FN e esse aumento na adesão foi reduzido pela KT5720. Esses dados indicam que a regulação da sinalização da via dependente de AMPc tem um importante papel na alteração das propriedades adesivas nos pacientes com AF. Tal alteração pode ter implicação na fisiopatologia da AF e tanto a via PKA dependente de AMPc pode representar um alvo terapêutico para reduzir a alteração na função leucocitária, como agentes que estimulam a via de NO dependente de GMPc podem ter efeitos benéficos na função leucocitária desses pacientes / Abstract: Increased leukocyte adhesion to vascular endothelium contributes to vaso-occlusion in sickle cell disease (SCD). Since nitric oxide (NO) bioavailability is decreased in SCD and NO may inhibit leukocyte adhesion, we determined whether stimulation of NO-signalling pathways can decrease the adhesive properties of neutrophils from SCD individuals (SCDneu). SCDneu presented greater adhesion, in vitro, to both fibronectin (FN) and ICAM-1 than control neutrophils; co-incubation of SCDneu with the NO-donor agents, sodium nitroprusside (SNP) and dietheylamine NONOate (DEANO), and the guanylate cyclase stimulator, BAY41-2272, all significantly diminished increased adhesion to FN/ICAM-1. Oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one, a guanylate cyclase inhibitor, reversed SNP/DEANO-diminished adhesion to FN, implicating cGMP-dependent signalling in this mechanism. Interestingly, intracellular cGMP was significantly higher in neutrophils from SCD individuals on hydroxyurea (SCDHUneu) and, accordingly, SCDHUneu adhesion to FN/ICAM-1 was significantly lower than that of SCDneu. In addition, co-incubation of SCDneu with KT5720 (an inhibitor of PKA), but not KT5823 (inhibitor of PKG), abrogated increased basal SCDneu adhesion. Stimulation of SCDneu with IL-8 also significantly augmented SCDneu adhesion to FN and this increase in adhesion was abolished by KT5720. Data indicate that up-regulated cAMP signalling plays a significant role in altered adhesive properties in SCDneu. Such alterations may have significant implications for the pathophysiology of the disease and the cAMP-PKA pathway may represent a therapeutic target for the abrogation of altered leukocyte function. Agents that stimulate the NO/cGMP-dependent pathway may have beneficial effects on leukocyte function if used in these individuals / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao everaldo.pdf: 356154 bytes, checksum: f56d49f9d8ed7b255a8e3bab2f78946d (MD5) Previous issue date: 2009-10-20 / Hemoglobinopathies are the most common inherited disorders in humans; the most frequent are hemoglobins S and C. This study evaluates the prevalence of hemoglobin patterns at the city of Goiânia, state of Goiás, Brazil, using neonatal screennig. Prevalence was compared between exams from the public and private systems. Blood samples from 90,127 newborns were obtained. Hemoglobinopathies were identified in a total of 61 (7:10.000) newborns. The prevalence in public and private systems was 7 and 3 per 10,000 respectively (p=0.081). In 3,243 (371:10,000) hemoglobinopathy traits were detected. The public system´s prevalence was 400:10,000 and in the private system it was 177:10,000 (p=0.0001). The prevalence of sickle cell disease was 4.3:10,000 live birth overall; in the public system, it was 5:10,000 and in the private system it was 2:10,000 (p=0.133). We can conclude that sickle disease is of high prevalence in children at public and private systems. The neonatal screening information is of paramount importance for early diagnosis of sickle disease and people with sickle traits / As hemoglobinopatias são as desordens hereditárias mais comuns nos seres humanos, sendo as mais freqüentes as hemoglobinas S e C. O presente estudo avaliou a prevalência de hemoglobinopatias no Município de Goiânia através da análise da triagem neonatal, e comparou as prevalências de hemoglobinopatias entre a rede pública e privada. Amostras de sangue de 92.127 recém-nascidos foram analisadas. Um total de 61 recém-nascidos apresentaram hemoglobinopatia (7:10.000). Na rede pública e privada a prevalência foi de 7 e 3 por 10.000, respectivamente (p=0,081). Traço de hemoglobinopatia foi observado em 3.423 amostras (371:10.000); a rede pública com prevalência de 400:10.000 e a privada com 177:10.000 (p=0,0001). A doença falciforme teve prevalência de 4:10.000 nascimentos, sendo 5:10.000 na rede pública com e 2:10.000 na privada (p=0,133). Conclui-se que a doença falciforme apresenta alta prevalência e acomete crianças usuárias das redes pública e privada de saúde. A triagem neonatal é de extrema importância para a detecção precoce de pacientes com doença falciforme e de portadores assintomáticos

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Nesse trabalho, propomos o uso da Microscopia de ForÃa AtÃmica para a investigaÃÃo das propriedades mecÃnicas e morfolÃgicas dos eritrÃcitos de pacientes com anemia falciforme, visando propor que parÃmetros fÃsicos tais como curvatura, rugosidade, elasticidade e viscosidade, possam ser utilizados na investigaÃÃo laboratorial dessa doenÃa. Em cada etapa experimental, foram medidas as propriedades mecÃnicas de cinco cÃlulas por indivÃduo. Nessa pesquisa analisamos o sangue de cinco pacientes em tratamento no Centro de Hematologia e Hemoterapia do Estado do Cearà (HEMOCE) e, como controle, cinco doadores sadios voluntÃrios. Os resultados indicam a diminuiÃÃo da rugosidade da superfÃcie citoplasmÃtica da membrana eritrocitÃria dos doadores com a doenÃa. A anÃlise de elasticidade das hemÃcias dos pacientes com anemia indica que mÃdulo de Young, em mÃdia, à cerca de trÃs vezes maior do que o mÃdulo encontrado nas hemÃcias de doadores sadios. A anÃlise da histerese de curvas de forÃas sobre os eritrÃcitos revela que as hemÃcias contendo a hemoglobina anormal dissipam menos energia e, portanto, sÃo mais viscosas que as hemÃcias advindas de doadores sadios.