Neste trabalho, ingredientes naturais antimicrobianos foram adicionados em filme biodegradável (biofilme) à base de fécula de mandioca tendo como plastificantes sacarose e açúcar invertido. A seleção dos ingredientes antimicrobianos (cravo em pó, canela em pó, pimenta vermelha em pó, óleo essencial de laranja, café em pó, mel e extrato de própolis) foi conduzida por meio de um delineamento experimental (fatorial fracionado 27-3) e os biofilmes foram analisados quanto às suas propriedades de barreira (permeabilidade ao vapor de água e taxa de permeabilidade ao vapor de água) e propriedades mecânicas (resistência máxima à tração e porcentagem de alongamento na ruptura). Os biofilmes apresentaram valores inferiores aos apresentados pelo biofilme controle quanto às propriedades mecânicas. Em geral, a taxa de permeabilidade ao vapor de água nos biofilmes antimicrobianos manteve-se estatisticamente igual ao do controle. Na segunda etapa do trabalho, a otimização dos ingredientes selecionados foi realizada através de delineamento experimental, com somente adição de cravo e canela em pó, que apresentaram resultados mais promissores na etapa anterior. Foi constatado que a adição de cravo e canela em pó alterou as propriedades mecânicas, porém as alterações foram menos intensas com a adição da canela em pó do que com o cravo em pó, o que pode ser justificado pela diferença de granulometria entre eles. A taxa de permeabilidade diminuiu até certa concentração dos ingredientes (0,34% para a canela em pó e 0,20% para o cravo em pó). O efeito antimicrobiano dos biofilmes foi investigado como embalagem de fatias de pão tipo forma e foi constatado que a atividade de água dos biofilmes aumentou após 7 dias de contato. É provável que os biofilmes tenham se tornado meios propícios para o desenvolvimento de bolores e leveduras visto que estes microrganismos cresceram de forma similar ou mais intensa nas fatias de pão na presença do que na ausência dos biofilmes. A partir dos resultados obtidos, não é possível avaliar de forma clara, o efeito antimicrobiano dos ingredientes incorporados na matriz dos biofilmes contra o crescimento de bolores e leveduras em fatias de pão tipo forma. / In this work, natural antimicrobial ingredients were added to biodegradable film (biofilm) based on cassava starch with sucrose and inverted sugar as plasticizers. The selection of the antimicrobial ingredients (clove powder, cinnamon powder, red pepper powder, orange essencial oil, coffee powder, honey and propolis extract) was carried out applying an experimental design (incomplete factorial 27-3) and the barrier properties (water vapour permeability and water vapour permeability rate) and mechanical properties (tensile strength and elongation at break) of the biofilms were determined. The biofilms presented lower data regarding mechanical properties when compared to biofilm control. In general, the water vapour permeability rate of the antimicrobial biofilms was statistically equal to the control. In the second phase of the work, the optimization of the selected ingredients was carried out applying an experimental design, with the addition of only clove and cinnamon powder due to the fact that they showed the most promissing results at the previous phase. The addition of clove and cinnamon powder modified the mechanical properties but the modifications resulted by the addition of cinnamon powder were less intense tha n the ones resulted by the addition of clove powder, which can be justified by the particle size differences between them. The water vapour permeability rate decreased by specific ingredients concentration (0.34% for the cinnamon in powder and 0.20% for the clove in powder). The biofilms antimicrobial effect was investigated as packaging of pan bread slices and it was verified that the biofilms water activity increased after 7 days of contact. Probably, the biofilms became suitable substrates for yeast and mold development due to the fact that these microorganisms grew equally or more intensely in the pan bread slices when the biofilms were present in comparison to the cases of its absence. According to the results, it is not possible to evaluate clearly the antimicrobial effect of the added ingredients to the biofilm matrix against yeast and mold development in pan bread slices.

O uso inadequado de antimicrobianos é fator determinante para disseminação da resistência bacteriana. Vários países têm usado como estratégias políticas de restrição para tornar o uso mais racional. Principalmente em hospitais, onde a utilização é mais prevalente. Embora o uso empírico seja a opção de tratamento em muitas condições clínicas, sabe-se que exames microbiológicos de cultura e teste de sensibilidade antimicrobiana (TSA), podem orientar uma prescrição mais racional. Para se avaliar a adequação de prescrições de antimicrobianos de uso restrito no Hospital São Vicente de Paulo de Passo Fundo, considerando resultados de exames microbiológicos e protocolos clínicos da instituição, foram analisadas 372 prescrições de pacientes internados. O tipo de infecção foi a única justificativa apresentada para o uso de antimicrobianos, sendo a maior freqüência para infecções do trato respiratório inferior (59,4%) seguido das do trato urinário (10,8%). O tratamento inicial empírico ocorreu em 89% dos casos. Dos pacientes com uso empírico (331/372), 66,7% apresentaram pneumonia. Nesta situação, devido à dificuldade de coleta de material, o tratamento é baseado nos prováveis agentes causadores e o uso empírico é aceitável. O exame de cultura foi solicitado em menos da metade das prescrições 48,7%(181/372), e o TSA foi realizado nos casos de cultura positiva (121/181). O resultado do TSA apontou que o tratamento inicial prescrito estava adequado em 76% dos casos (92/121). A necessidade de troca do esquema terapêutico inicial foi identificada em 12,7% (23/181) dos casos que realizaram cultura e TSA. A troca de esquema ocorreu em 65,2% (15/23) dos casos, nos demais o médico optou por não alterar devido à resposta clínica do paciente. Das prescrições avaliadas conforme protocolos, 71,9% (192/267) demonstraram indicação terapêutica de acordo com a recomendação. De acordo com os protocolos, observou-se uma freqüência maior de adequação das prescrições e das condutas laboratoriais quando comparada com outros estudos. Estes resultados podem estar associados às políticas de restrição de uso adotadas pela instituição. / The inadequated use of antimicrobials is the determinant fact to the dissemination of the resistance of the bacteria. Many countries have used as a strategy the politics of the restriction to become this use more rational, mainly in the hospitals, where the utilization is more prevalent. Although the empiricist use is the option of the treatment in many clinical conditions, we know that microbiological exams of culture and the test of antimicrobial sensibility (TSA) can conduct to a more rational prescription. To evaluate the adjustment of the prescriptions of antimicrobials in restrict use at São Vicente de Paulo Hospital, in Passo Fundo, and considering the results of the microbiological exams and clinical protocols of the institution, 372 interned patients prescriptions were analyzed. The type of the infection was the unique justify showed to the use of the antimicrobials, being the biggest frequency to the infections in the lower respiratory tract (59.4%), followed by the urinary tract (10.8%). The initial empiricist treatment occurred in 89% of the cases. Within the patients with the empiricist use (331/372), 66.7% showed pneumonia. In this situation, due to the difficulty of the material collecting, the treatment is based in the probable causer agents and the empiricist use is acceptable. The exam of the culture was required in the less of the half prescriptions (48.7%) (181/372) and TSA was executed in the cases of the positive culture (121/181). The results of TSA showed that the initial treatment prescribed was adjusted in 76% of the cases (92/121). The necessity of the changing of the initial therapeutic scheme was identified in 12.7% (23/181) of the cases where the culture and TSA were found. In the others, the doctor opted to not to modify it due to the clinical answer of the patient. According protocols, evaluated prescriptions 71.9% (192/267) showed therapeutic indication according the recommendation. According with the protocols, it was observed a major frequency of adaptation of the prescriptions and of the lab behaviors when it is compared with other studies. These results can be associated with the restriction policies of adopted using for the institution.

Orientador: Arnaldo Yoshiteru Kuaye / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-13T20:24:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_CleberRogeresde_M.pdf: 596844 bytes, checksum: 15d3d487c41dde041190ba43246ff0ae (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O queijo Serra da Canastra é fabricado a dezenas de anos de maneira empírica e tradicional. Devido a produção artesanal a partir de leite cru, este tipo de queijo é preocupante do ponto de vista de saúde pública, pois pode ser uma importante via de transmissão de microrganismos patogênicos. No processamento emprega-se o ¿pingo¿, um fermento natural obtido durante a etapa de salga do queijo. Em alguns tipos de queijos artesanais, Enterococcus é apontado como o gênero predominante. Estudos mostram que as enterocinas produzidas a partir destas bactérias possuem alta especificidade contra vários microrganismos, entre eles a Listeria spp. Entretanto, a atuação de espécies de enterococos como agente etiológico de infecção humanas também é conhecida. Os objetivos do presente estudo foram avaliar a adequação de amostras de queijo Minas Serra da Canastra comercializados em estabelecimentos varejista na cidade de Araras-SP, a padrões de qualidade; isolar e identificar espécies de enterococos provenientes das amostra; avaliar o espectro de atividade antimicrobiana dos isolados frente a linhagens de Listeria monocytogenes, Bacillus cereus e Staphylococcus aureus, e avaliar a ocorrência de fatores de virulência e resistência a antimicrobianos dos isolados e identificados como Enterococcus. Foram analisados vinte e sete amostras de queijo Serra da Canastra, para determinação de: Coliformes termotolerantes, estafilococos coagulase positiva, Salmonella e Listeria monocytogenes, conforme ¿ RDC n°12 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária, acrescido da determinação de B. cereus. Para coliformes termotolerantes 70,4% (19/27) das amostras apresentaram valores detectáveis (<3 NMP/g), 29,6% (8/27) continham valores entre 7 e 210 NMP/g - valores estes dentro dos limites (5 x 103), legais (ANVISA, 2001). A ocorrência de estafilococos coagulase positiva foi observada em 22,2% (6) das amostras analisadas, com contagens variando de 1,5 x 10 1 a 2,1 x 10 3, das quais 7,40% (2) com valores acima do limite estabelecido pela legislação (10 3 UFC/g). B. cereus foi detectado em 11,1% (3) das amostras com contagens entre 1,5 x 102 a 2,0 x 102 UFC/g. Não foi verificada a presença de Salmonella e Listeria monocytogenes nas amostras analisadas. Cento e quarenta e sete isolados (121 Enterococcus faecium identificados por PCR e 26 isolados presuntivos através de provas bioquímicas) foram pesquisados quanto à presença de fatores de virulência, através de provas fenotípicas (gelatinase e hemólise), sendo encontrados resultados positivos para apenas dois isolados a prova de gelatinase. A sensibilidade a antimicrobianos foi testada utilizando o método de disco-difusão em ágar e 21,5% dos isolados identificados como E. feacium apresentaram resistência a quatro, cinco, seis ou sete dos antimicrobianos testados (vancomicina, gentamicina, clorofenical, eritromicina, ampicilina, teicoplamina e tetraciclina). Dentre os antibióticos testados, a maior freqüência (38,8%) de resistência foi observada frente ao teste de sensibilidade a tetraciclina. No teste de sensibilidade a vancomicina, 29,4% dos isolados analisados apresentaram resistência. Cinqüenta e seis isolados de E. faecium identificados por PCR, selecionados, foram testados para determinação do espectro de atividade antimicrobiana frente aos microrganismos L. monocytogenes, B. cereus e S.aureus. Nenhum dos isolados testados (100%) ocasionaram a formação de halo de inibição / Abstract: The Canastra¿s cheese is developed for decades in a traditional and empirical way. Such product is crafted from raw milk in the farm. The use of the raw milk for the development of this kind of cheese is worrying because this could be an important vessel of transmission of many pathogens. The traditional cheese made in the farm utilizes the ¿pingo¿, a natural ferment obtained during the step of cheese¿s salting. In some kinds of crafted cheese, Enterococcus is pointed as the predominant. Studies shows that the enterocines produced from those bacteria have high specificity against various microorganisms, among them the Listeria spp. However, the performance of species of Enterococos like etiologic agent of humans infections is know. The objective of the recent study was evaluate the adequacy of samples of Serra da Canastra's cheese marketed in establishments and retailers in the city of Araras-SP, in patterns of quality, isolate and identify species of Enterococos from samples through PCR, evaluate the spectrum of antimicrobial activities of isolate on the Listeria monocytogenes lines, Bacillus cereus and Staphylococcus aureus, evaluate the occurrence of virulence factors and resistance to antimicrobials of isolated know as Enterococcus. Twenty seven samples of Serra da Canastra's cheese were analyzed for the determination of: thermotolerant coliforms, positive coagulase Staphylococcus, Salmonella and Listeria monocytogenes, according ¿ RDC nº 12 of the Agência Nacional de Vigilância Sanitária, plus the determinarion of B. cereus. In the determination of thermotolerant coliforms 70;37% (19/27) they show not detectable values (> 3 NMP/g), being that 29,62% (8/27) had thermotolerant coliforms between 7 and 210 NMP/g, values that are under the limits (5 x 10³), established by RDC nº 12/2001 (ANVISA, 200). Occurrence of positive coagulase staphylococi was observed in 22,22% (6) of the analyzed samples, with counts ranging 1,5 x 10¹ to 2,1 x 10³ , of which 7,40% (2) with values above the limit established by law (10³ UFC/g). For certain values for B. cereus, there was that 11,11% (3) of the Canastra cheese samples showed counting between 1,5 x 10² to 2,0 x 10² UFC/g. It was not verified the presence of Salmonella and Listeria monocytogenes in the analyzed samples. One hundred forty-seven isolate (121 Enterococcus faecium identified by PCR and 26 presumptive isolate) were searched for the presence of virulence factors, through phenotypic tests (gelatinase and haemolysis). The sensitivity to antimicrobials was tested using the method of disk-diffusion in agar. Two isolates showed positive results for the galatinase test and none of the isolates produced hemolysis. As for the sensitivity profile to antimicrobials, 21,5% of the isolates identified as E. feacium showed resistance to 4,5,6 or 7 of the antimicrobials tested (vancomicine, gentaminice, clorofenical, eritrocimine, ampilicine, teicoplamine and tetracycline). Among the tested antibiotics, the highest frequency of resistance was observed from the test of sensibility to tetracycline, since 38,8% of the isolates showed resistance to those antimicrobials. In the sensibility test to vancomicine, 29,4% of the analyzed isolates showed resistance. Fifty-six isolates of E. faecium identified by PCR, selected were tested to the determination of the spectrum of the antimicrobial activity front the microorganisms L. monocytogenes, B. cereus and S. aureus. None of the isolates tested (100%) led to the formation of halo of inhibition / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-10-21T16:50:44Z No. of bitstreams: 2 Tese - Dunya Mara Cardoso Moraes - 2014.pdf: 1962001 bytes, checksum: 0651e62e269992f431e635168bd6edf9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2016-11-08T17:37:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Dunya Mara Cardoso Moraes - 2014.pdf: 1962001 bytes, checksum: 0651e62e269992f431e635168bd6edf9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-08T17:37:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Dunya Mara Cardoso Moraes - 2014.pdf: 1962001 bytes, checksum: 0651e62e269992f431e635168bd6edf9 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-04-11 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The purpose of this research was to investigate presence of Salmonella sp. by conventional bacterial identification and real-time PCR on eggshell, albumen, and yolk of washed and unwashed commercial white and brown eggs; in samples of flooring material from transport crates (meconium); raising environment (swab of cages and drinking fountains); cloacal swab; food and insects from growing, rearing and production phases in a commercial group of laying hens. Also, was examinated the susceptibility profile of Salmonella isolates to 14 antimicrobials: sulfamethoxazole (25μg), trimethoprim-sulfamethoxazole (25μg), enrofloxacin (5μg), tetracyclin (30μg) sulphonamides (300μg), ciprofloxacin (10μg), amoxicillin and clavulanic acid (3μg), ampicillin (20μg), ceftiofur (30μg), gentamicin (10μg), oxytetracycline (30μg), neomycin (30μg), doxycycline (30μg) and apramycin (15μg); and evaluated the presence of virulence gene spvC and resistence genes intl1, sul1 and blaTEM. A total of 68 dozens of white eggs and 61 dozens of brown eggs were randomly collected in poultry houses and 30 dozens and 34 dozens of white and brown eggs, respectively, were collected in egg-storage room (on the farm). Each collected dozen corresponded to three sample units: eggshell, albumen and yolk, totaling 387 samples. Salmonella spp. was detected by conventional bacteriology in 5.4% of analyzed samples and in 16% by qPCR. Salmonella Agona represented 18.2% of identified serovars, Salmonella enterica subs. enterica O:4.5 18.2%, Salmonella Schwarzengrund 18.2%, Salmonella Cerro 13.6%, Salmonella Anatum 13.6%, Salmonella Enteritidis 9.1%, Salmonella Johannesburg 4.5%, Salmonella Corvallis 4.5%, Salmonella Livingstone and Salmonella Senftenberg. From 864 samples collected (248 samples originated from growing, 392 from rearing and 224 from production phase), 2,8% where positives in bacteriologic technique and 15,3% in qPCR. Contamination was higher in growing and rearing phases and declined in production phase. Twenty four isolations of Salmonella where typified as Salmonella Agona (41,7%), Salmonella Livingstone (33,3%), Salmonella Cerro (16,7%), Salmonella Senftenberg (4,2%) and Salmonella Schwarzengrund (4,2%). The highest resistance percentage observed were to sulfamethoxazole (91,0%), sulphonamides (51%) and ceftiofur (28,9%) and 0% to ciprofloxacin. Only Salmonella Johannesburg and Salmonella Corvallis showed resistance to only one antibiotic and others serovars were resistant to at least two antimicrobials, noting that Salmonella Schwarzengrund presented resistance to 13 of them. The gene spvC was dectected only in serovar Enteritidis, while intl1 was present in six of ten analyzed serovars and the gene sul1 in three of them, always in association with intl1. The gene blaTEM was not identified. In conclusion, this research points numerous serovars circulating in commercial egg structures and phenotypic antimicrobials resistance investigation, along with antimicrobial resistance genes in isolates of Salmonella sp. are important investigation tools to determinate genetic profile of these bacteria. / Objetivou-se com esta pesquisa investigar a presença de Salmonella sp por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia por bacteriologia convencional convencionalconvencionalconvencionalconvencionalconvencional convencionalconvencional e PCR em tempo real em casca, albúmen e gema de ovos comerciais brancos e vermelhos, lavados e não lavados; em amostras de forros de caixa de transporte, amostras de ambientes de criação (suabes de gaiola e bebedouro), suabes de cloaca, ração e insetos oriundos das fases de cria, recria e produção de um lote de poedeiras comerciais e investigar o perfil de suscetibilidade de isolados de Salmonella frente 14 antimicrobianos sulfametoxazol (25μg), sulfametoxazol-trimetoprim (25μg), enrofloxacina (5μg), tetraciclina (30μg), sulfonamidas (300μg), ciprofloxacina (10μg), amoxilina ácido clavulânico (3μg), ampicilina (20μg), ceftiofur (30μg), gentamicina (10μg), oxitetraciclina (30μg), neomicina (30μg), doxiciclina (30μg) e apramicina (15μg) e avaliar a presença do gene de virulência spvC e dos genes de resistência intl1, sul1 e blaTEM. Foram colhidas, nos galpões, 68 dúzias de ovos brancos e 27 dúzias de vermelhos e nos entrepostos, após classificação e sanitização, 30 e 34 de dúzias de ovos brancos e vermelhos, respectivamente. Cada dúzia de ovos correspondeu a três amostras: uma amostra de pool casca, uma de pool de albúmen e uma de pool gema, totalizando 387 amostras. Obteve-se pela bacteriologia convencional 5,4% (21/387) e PCR em tempo real 16,0% (62/387) de amostras positivas para Salmonella. Os sorovares identificados foram Salmonella Agona, Salmonella enterica subs. enterica O:4,5, Salmonella Schwarzengrund, Salmonella Cerro, Salmonella Anatum, Salmonella Enteritidis, Salmonella Johannesburg e Salmonella Corvallis. Foram coletadas também 864 amostras no fluxo de produção de ovos e Salmonella sp. foi isolada pela bacteriologia convencional em 2,8% das amostras e pelo PCR em tempo real em 15,3%, sendo que 248 amostras foram originadas da cria, 392 na recria e 224 na produção. De acordo com a analise estatística a infecção evoluiu da fase de cria para a recria e ao chegar a fase de produção o nível de infecção declinou. Os 24 isolados de Salmonella foram tipificados e os sorovares identificados foram Salmonella Agona, Salmonella Livingstone, Salmonella Cerro, Salmonella Senftenberg e Salmonella Schwarzengrund. Foram analisadas também 45 isolados de Salmonella pertencentes aos sorovares Agona, Livingstone, Cerro, Schwarzengrund, Salmonella enterica subs. enterica O:4,5, Anatum, Enteritidis, Johannesburg, Corvallis e Senftenberg. Os maiores percentuais de resistência foram para sulfametoxazol (91,0%), sulfonamidas (51,0%) e ceftiofur (28,9%). O gene spvC foi detectado somente no sorovar Enteritidis, enquanto o gene intl1 esteve presente em seis dos dez sorovares analisados, o gene sul1 em três deles sempre em associação com intl1 e o gene blaTEM não foi identificado. Conclui-se com essa pesquisa que existe uma variedade de sorovares circulantes em granjas de postura e em ovos comerciais; a investigação fenotípica de resistência aos antimicrobianos aliada a pesquisa dos genes de virulência e de resistência aos antibióticos em isolados de Salmonella sp. circulantes em granjas de postura comercial são importante ferramenta de investigação para determinação do perfil genético dessas bactérias. Palavras

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-03-02T18:38:49Z No. of bitstreams: 2 Tese - Andrea de Mello Mobiglia - 2017.pdf: 1228581 bytes, checksum: 4651c264bc6e1dc88ad98290bd0dd413 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-03-03T11:35:58Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Andrea de Mello Mobiglia - 2017.pdf: 1228581 bytes, checksum: 4651c264bc6e1dc88ad98290bd0dd413 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-03T11:35:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Andrea de Mello Mobiglia - 2017.pdf: 1228581 bytes, checksum: 4651c264bc6e1dc88ad98290bd0dd413 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective was to evaluate the effects of antimicrobial additives and the inclusion of roughage during adaptation period in diet containing whole shelled corn (WSC, 85% WSC + 15% pelleted concentrate) on performance of Zebu bulls (Exp. 1). The Exp. 1 was realized in randomized complete block design with 2x2 factorial and five replicates. A hundred bulls were fed for 105 d with diet containing monensin (MON, 30 mg/kg DM) ou virginiamycin (VM, 25 mg/kg DM) and with or without inclusion of sugarcane bagasse as roughage (ROU or NO-ROU) in adaptation period. The Exp. 2 was parallel conducted in randomized design with two treatments (MON, 30 mg/kg DM or VM, 25 mg/kg DM) and five replicates. Ten fistulated steers were used and fed with the same diet than Exp. 1 without inclusion of roughage. A laboratorial experiment (Exp. 3) was realized at Kansas State University and its objective was to evaluate the capacity of Megasphaera elsdenii (ME) strain 41125 metabolizes a range of alternative substrates as carbon source. The experiment was designed in randomized complete blocks with six replicates. Viable cell counting, pH, and optical density were measured in media containing glucose, fructose, galactose, arabinose, xylose, maltose, sucrose, lactose, lactate, trehalose, raffinose, Fructooligosaccharide, potato starch, soy protein, succinate. In Exp. 1 and Exp. 2, antimicrobial additives, MON and VM, added to diet containing 85% WSC and 15% pellet concentrate had equal results for performance, ruminal fermentation, and apparent total tract digestibility of nutrients (P≥0.05). However, lower intake was observed in animals fed with monensin includes on diet (P≤ 0.027). Although the additive used had no effect on performance on Exp. 1, the inclusion of roughage in adaptation period showed tendentiously greater final body weight, average daily gain, and efficiency (P≤ 0.088; P≤ 0.075 e P≤ 0.094, respectively) for adaptation period (1 to 20 d) and entire feedlot period (1 to 105 d). There were no treatment effects and interactions for carcass characteristics as hot carcass weight, dressing percentage, carcass daily gain (P≥0.05). In Exp. 3, Megasphaera elsdenii was able to metabolize alternative substrates as glucose, maltose, lactate, Fructo-oligosaccharide, and fructose. However, ME had greater growth in media containing fructose, but the viable cell counting did not show consistent results with optical density. Investigations must be done to clarify the ME metabolism when fructose is used as carbon source. Accord to results obtained in this study, a roughage sorce might be included on adaptation period in diet contenting 85% whole flint corn plus 15% concentrate pellete to obtain greater animal performance. Thus, Megasphaera elsdenii is able to use alternative substrates as lactate, glucose, fructose, and maltose, maintaining their population in rumen. / Objetivou-se avaliar os efeitos de aditivos antimicrobianos e a inclusão de volumoso durante a adaptação em dietas contendo alto teor de grão de milho inteiro (85% milho + 15% concentrado peletizado) sobre o desempenho de touros zebuínos (Experimento 1). O Exp. 1 foi conduzido em delineamento de blocos casualizados em esquema fatorial 2x2 e cinco repetições. Foram utilizados 100 touros alimentados durante 105 d com dieta contendo monensina (MON, 30 mg/kg MS) ou virginiamicina (VM, 25 mg/kg MS) e com a inclusão ou não de bagaço de cana-deaçúcar como volumoso (ROU ou NO-ROU) no período de adaptação. Paralelamente foi conduzindo o Experimento 2 com o objetivo de avaliar os efeitos dos aditivos antimicrobianos sobre a fermentação ruminal e digestibilidade dos nutrientes. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado com dois tratamentos (MON, 30 mg/kg MS ou VM, 25 mg/kg MS) e cinco repetições. Dez bois fistulados no rúmen foram utilizados e alimentados com a mesma dieta do Exp. 1 sem a inclusão de volumoso. Experimento laboratorial (Experimento 3) foi conduzido na Kansas State University com o objetivo de avaliar a capacidade da cepa 41125 de Megasphaera elsdenii (ME) em metabolizar uma variedade de substratos como fonte de carbono. O experimento foi delineado em blocos casualizados com seis repetições. Número de células viáveis, pH e densidade ótica foram mensuradas em meios de cultura contendo glicose, frutose, galactose, arabinose, xilose, maltose, sucrose, lactose, lactato, trehalose, rafinose, frutooligossacarídeos, amido de batata, proteína de soja e succinato. No Exp. 1 e Exp. 2 os aditivos antimicrobianos, MON e VM, adicionados a dieta contendo 85% de grão de milho inteiro e 15% de concentrado peletizado tiveram resultados iguais para desempenho, fermentação ruminal, e digestibilidade aparente no trato total dos nutrientes (P≥0,05). Porém foi observado redução no consumo em animais alimentados com dieta contendo monensina (P≤ 0,027). Embora o aditivo utilizado não tenha tido efeito no desempenho no Exp. 1, a inclusão de volumoso na fase de adaptação apresentou tendencialmente um aumento no peso corporal final, ganho de peso diário e eficiência alimentar (P≤ 0,10), tanto na fase de adaptação (1 a 20 d) como para o período total de confinamento (1 a 105 d). Não houve efeito dos tratamentos ou interações entre os fatores para características de carcaça como peso de carcaça quente, rendimento e ganho de carcaça diário (P≥0,05). No Exp. 3 Megasphaera elsdenii foi capaz de metabolizar diferentes substratos, como glicose, maltose, lactato, fruto-oligossacarídeo e frutose. Entretanto, no meio de cultura contendo frutose a ME apresentou melhor curva de crescimento, mas o número de células viáveis não apresentou resultados consistentes com a densidade ótica. Investigações devem ser feitas para esclarecer o metabolismo da ME quando frutose é utilizada como fonte de carbono. Com os resultados obtidos nesta pesquisa, conclui-se que uma fonte de volumoso de baixa qualidade deve ser incluída no período de adaptação à dieta contendo 85% grão de milho inteiro e 15% de pelete proteica concentrado a fim de se obter melhores resultados no desempenho. Ainda, Megasphaera elsdenii é capaz de utilizar diferentes substratos além do lactato como glicose, frutose e maltose, garantindo sua população no rúmen.

Cristais líquidos são sistemas que se apresentam em um estado intermediário entre o estado sólido e líquido. A monoleína é um lipídio polar com capacidade de formar diferentes tipos de cristais líquidos liotrópicos na presença de água, caracterizados como fase lamelar, cúbica e hexagonal. Devido à capacidade de controlar a liberação dos fármacos incorporados e às propriedades mucoadesivas, estes sistemas são considerados potenciais veículos para a liberação controlada de fármacos na mucosa bucal. Sabendo que o desenvolvimento da cárie e doença periodontal está relacionado com a formação do biofilme, é necessário seu controle e prevenção para manutenção da saúde bucal. Dentre os agentes químicos disponíveis para prevenir e/ou diminuir a formação do biofilme, cloreto de cetilpiridínio (CCP), polihexametileno biguanida (PHMB) e Triclosan® têm sido amplamente utilizados. Em vista disso, o objetivo deste estudo foi desenvolver e caracterizar sistemas líquido-cristalinos de fase lamelar e cúbica formados por monoleína e água contendo antimicrobianos com aplicabilidade bucal. Os sistemas foram desenvolvidos usando monoleína e água e os antimicrobianos avaliados foram o CCP, o PHMB e o Triclosan®. A formação das fases líquido-cristalinas com e sem a presença de cada fármaco estudado foi identificada por microscopia de luz polarizada. Além disso, foi avaliado o intumescimento dos sistemas contendo os fármacos estudados após contato com saliva artificial; a atividade antimicrobiana e o perfil de liberação in vitro, bem como o tempo de permanência e a força de mucoadesão ex vivo em mucosa de bochecha de porco. Foi possível obter os sistemas líquido-cristalinos para os fármacos avaliados, e o intumescimento de todos os sistemas foi caracterizado como cinética de segunda ordem. Os resultados do perfil de liberação e da atividade antimicrobiana in vitro para PHMB e Triclosan® foram favoráveis para aplicação bucal, no entanto, o CCP não é adequado para veiculação neste sistema. O perfil de liberação dos fármacos à partir desses sistemas foi influenciado pelas propriedades físico-químicas e concentração dos fármacos, bem como pelo intumescimento. Ainda, a fase lamelar apresentou maior tempo de permanência que a fase cúbica e a força de mucoadesão média da fase lamelar foi de 1,02 ± 0,50 N e da fase cúbica foi de 0,45 ± 0,10 N. Logo, os sistemas líquido-cristalinos de monoleína e água são um interessante veículo com potencial para liberação controlada dos antimicrobianos PHMB e Triclosan® na mucosa bucal com o objetivo de otimizar a eficácia destes fármacos. / Liquid crystals are systems which are in an intermediate state between solids and liquids. Monoolein is a polar lipid capable of forming different types of lyotropic liquid crystals in aqueous environment, which can be classified into lamellar, cubic and hexagonal mesophases. Due to its ability to control drug release and its mucoadhesive properties, these systems have been considerated as potential vehicle to control drug release on buccal mucosa. Based on the knowledge that the development of caries and periodontal disease is related to the biofilm formation, it is necessary their control and prevention to maintain the buccal health. Among the available chemical agents to prevent and/or reduce biofilm formation, cetylpyridinium chloride (CPC), polyhexamethylene biguanide (PHMB) and Triclosan® have been widely used. Based on these facts, the objective of this study was to develop and characterize liquid-crystalline systems formed by monoolein and water, containing antimicrobial agents with buccal applicability. The systems were developed using monoolein and water, and the antimicrobial agents evaluated were CCP, PHMB and Triclosan®. The liquid-crystalline phases with and without the presence of each drug was identified by polarized light microscopy. Furthermore, it was evaluated the swelling of the systems containing the drugs studied after contact with artificial saliva; the in vitro antimicrobial activity and its release profile, as well as the residence time and ex vivo mucoadhesion strength on pig cheek mucosa. It was possible to obtain liquid-crystalline phases for all drugs, and the swelling of all systems was characterized according to second-order kinetics. The results of release profile and antimicrobial activity in vitro to PHMB and Triclosan® were favorable for buccal application, however CCP is not suitable to be released from these systems. The drug release profile from these systems was influenced by the physicochemical properties and loading of the drugs, as well as by swelling. Furthermore, the lamellar phase showed greater residence time that the cubic phase and the mucoadhesion strength average of lamellar phase was 1.02 ± 0.50 N and for cubic phase was 0.45 ± 0.10 N. Thus, the liquid crystalline systems forming by monoolein and water are an interesting vehicle with potential to control release of the PHMB and Triclosan® on the buccal mucosa in order to optimize the drug effectiveness.

Orientador: Susanne Rath / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-21T08:01:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Doretto_KeityMargareth_D.pdf: 2722057 bytes, checksum: d4c5a2090af2c524cc8d28125e30eaa2 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Antimicrobianos, entre eles as sulfonamidas, têm sido amplamente utilizados em medicina veterinária para fins terapêuticos e profiláticos. Uma vez excretados os fármacos e/ou metabólitos podem levar a contaminação do meio ambiente e estudos sobre o impacto ambiental ainda são escassos. Em adição, no Brasil, ainda não existe uma fiscalização de medicamentos veterinários. A não conformidade dos medicamentos reflete diretamente na saúde animal, como também é um tópico relevante quanto à segurança alimentar. Assim sendo, métodos foram desenvolvidos e validados para a determinação de sulfadiazina (SDZ), sulfadimetoxina (SDM) e sulfaquinoxalina (SQX) em medicamentos de uso veterinário por cromatografia líquida de alta eficiência associada a um detector de arranjo de fotodiodos (HPLC-DAD). Os resultados obtidos indicam a necessidade de controle de qualidade dos fármacos de uso veterinário comercializados no Brasil. Ainda, o trabalho estudou a sorção da SDZ, SDM e SQX em quatro solos característicos do Estado de São Paulo. Os estudos foram conduzidos conforme recomendação do Guia OECD 106. As sulfonamidas foram quantificadas nas soluções de solo por um método HPLC-DAD previamente validado. Os dados de adsorção/dessorção das sulfonamidas nos quatro solos foram ajustados com isotermas de Freundlich na forma linear ou logarítmica. Um fenômeno de histerese de adsorção/dessorção foi evidente em todos os solos. Os baixos valores do coeficiente de Freundlich (KF) obtidos sugerem fraca adsorção das sulfonamidas nos solos avaliados e, portanto, estas tendem a ser lixiviados e, por sua vez apresentam potencial para contaminar águas superficiais e subterrâneas / Abstract: Antimicrobials, including sulfonamides, have been widely used in veterinary medicine for therapeutic and prophylactic purposes. Once excreted, drugs and/or metabolites can contaminate the environment. Environmental impact studies are still scarce. In addition, in Brazil, there is no surveillance of veterinary medicines. The poor quality of drugs may reflect directly on animal health and is also a topic relevant to food safety. Therefore, methods were developed and validated for the determination of sulfadiazine (SDZ), sulfadimethoxine (SDM) and sulfaquinoxaline (SQX) in veterinary drugs, using high performance liquid chromatography coupled to a photodiode array detector (HPLC-DAD). The obtained results indicate the need for a quality control program of veterinary drugs comercialized in Brazil. Moreover, the present work aim studied the sorption of sulfonamides (SDZ, SDM and SQX) in four characteristic soils of the State of São Paulo. The studies were conducted as recommended by the OECD Guidelines 106. The sulfonamides were quantified in the soil solutions by a previously validated HPLC-DAD method. Adsorption/desorption data of sulfonamides in soils were fitted to Freundlich isotherms in the linear or logarithmic forms. A hysteresis of adsorption/desorption was evident in all four soils evaluated. The low values of the Freundlich coefficient (KF) obtained suggest weak adsorption of sulfonamides in soils, and therefore they tend to be leached and present high potential to contaminate surface and groundwater / Doutorado / Quimica Analitica / Doutora em Ciências

Les contaminations des surfaces constituent un problème majeur de santé public rencontré dans plusieurs secteurs tels que les milieux hospitaliers et l’industrie alimentaire. Cette contamination consiste en l’adhésion de bactéries pathogènes ou opportunistes qui peuvent former des biofilms. Ces biofilms sont potentiellement des sources de développement et de prolifération des bactéries. Une voie efficace de lutte contre la contamination microbienne est l’élaboration de surfaces bactéricides visant à empêcher ou diminuer l’adhésion bactérienne. Basé sur le savoir-faire du laboratoire de Chimie des Substances Naturelles dans le domaine des polysaccharides, nous avons entrepris d’élaborer des supports antibactériens en fixant de manière covalente des molécules aux propriétés antibactériennes sur des fibres lignocellulosiques de pâte à papier (la pâte Kraft). Le lien triazole formé est stable vis-à-vis de l’hydrolyse acide ou basique, et subsiste dans des conditions oxydantes et réductrices. Nous avons choisi de nous intéresser dans un premier temps à la fixation de manière covalente d’un antibactérien commercial connu, le triclosan, sur des fibres lignocellulosiques de la pâte à papier ; puis dans une deuxième approche nous nous sommes orientés vers la fixation de porphyrines sur ces supports. Enfin dans une troisième approche, nous avons fixés des molécules aromatiques qui n’acquièrent leur potentiel antimicrobien qu’après greffage sur le support via le lien triazole. L’étude de l’effet antimicrobien des différents matériaux a montré pour une activité bactéricide du matériau Pâte Kraft-triclosan vis-à-vis notamment de trois souches fréquemment trouvées en milieu hospitalier: Pseudomonas aeruginosa, Bacillus cereus et Escherichia coli ; Dans le cas du greffage de photosensibilisateurs, seul le matériau pâte Kraft-Porphyrine neutre a permis une photoinactivation des souches après irradiation. / Surface contamination by pathogens constitutes a major public health problem encountered in many areas such as hospitals, environment and food industry. This contamination consists in the adhesion of pathogenic or opportunistic bacteria that can attach to a biotic or abiotic surface and lead to the formation of biofilm. An effective way to fight against microbial contamination is the development of antibacterial surfaces, in order to prevent or reduce bacterial adhesion. Based on the expertise of the Laboratoire de Chimie des Substances Naturelles in the field of polysaccharides, we have undertaken the development of antibacterial materials by grafting through covalent bonds molecules presenting antibacterial properties onto lignocellulosic fibers (in this case Kraft pulp fibers). Triazoles are resistant to acid and basic hydrolysis, reductive and oxidative conditions. This moiety is also relatively resistant to metabolic degradation and is not posing particular toxicity problems. The study of the antibacterial effect has shown a bactericidal activity of the triclosan-Kraft pulp sheet against three strains frequently found in hospitals: Pseudomonas aeruginosa, Bacillus cereus and Escherichia coli. In the case of grafting photosensitizers, only the neutral porphyrin-Kraft pulp sheet material displayed a strong photobactericidal activity after irradiation.

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Os antimicrobianos promotores de crescimento na alimentação animal tem proporcionado melhora considerável no desempenho. Porém, seu uso vem sendo proibido em diversos países e, face a esta restrição, tem-se buscado alternativas aos antimicrobianos promotores de crescimento. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar aditivos fitogênicos, butirato de sódio, assim como a colistina sobre o desempenho, histologia intestinal, pH, morfometria de órgãos, digestibilidade dos nutrientes e freqüência de diarréia de leitões recém-desmamados. Um experimento em blocos casualizados, com 34 dias de duração foi realizado para testar cinco tratamentos: controle (T1) - ração basal; antimicrobiano (T2) basal com 40 ppm de sulfato de colistina; fitogênico (T3) dieta basal com 500 ppm de aditivos fitogênicos; butirato de sódio (T4) dieta basal com 1500 ppm de butirato de sódio; fitogênico+butirato de sódio (T5) dieta basal com 500 ppm de aditivos fitogênicos + 1500 ppm de butirato de sódio. Para o desempenho e frequência de diarréia foram utilizados 120 leitões, com idade de 24 dias e peso inicial de 6,10 ± 1,21 kg, oito repetições por tratamento e três leitões por unidade experimental. No ensaio de digestibilidade (quatro primeiras repetições), utilizou-se o método da coleta parcial de fezes e o óxido de cromo como marcador. Ao final do experimento, um animal de cada baia, das quatro primeiras repetições, foi abatido para análise de histologia, pH e morfometria dos órgãos. Foram testados contrastes específicos de interesse. O desempenho, a frequência de diarréia e o pH da digesta não foram influenciados pelos tratamentos (P>0,05). Os leitões dos tratamentos fitogênico e butirato apresentaram a média de digestibilidade da energia superior (P=0,07) a dos leitões do tratamento fitogênico+butirato de sódio. Para a morfometria dos órgãos, a média dos tratamentos T2, T3, T4 e T5 para a relação peso:comprimento do intestino delgado foi menor (P=0,02) que a do tratamento controle. Para o peso relativo do ceco, a média dos tratamentos fitogênico e butirato de sódio foi menor (P=0,09) do que a do tratamento fitogênico+butirato de sódio. Em relação à histologia intestinal, no duodeno, a média da densidade de vilosidades (DV) dos leitões dos tratamentos fitogênico e butirato de sódio foi maior (P=0,06) do que a dos leitões do tratamento fitogênico+butirato de sódio. Foi observado, também, maior DV (P=0,02) para os animais do tratamento fitogênico em relação aos animais do tratamento butirato de sódio. No jejuno, a média da DV dos leitões dos tratamentos T2, T3, T4 e T5 foi maior (P=0,03) do que a dos leitões do tratamento controle. Os animais do tratamento butirato apresentaram maior DV do que os animais do tratamento fitogênico (P=0,08). Assim, em condições de creche experimental, não ficou evidenciado efeito dos aditivos fitogênicos e do butirato de sódio como promotores de crescimento de leitões recém-desmamados, alimentados com dietas complexas e altamente digestíveis. Há, também, indicações de que os aditivos fitogênicos e o butirato de sódio, individualmente adicionados às dietas dos leitões, podem melhorar a digestibilidade e algumas características histológicas e morfométricas. / The antimicrobials growth promoters in the animal feed have been related to an increase on animal performance. However, due to the restriction of many countries to the use of antimicrobial as growth promoters, alternatives are being studied. So, the purpose of this work was to evaluate the effect of phytobiotic additives, sodium butyrate and even colistina on performance, intestinal histology, digesta pH, organs morphometry, nutrients digestibility and diarrhea incidence of weanling pigs. A 34-d randomized complete block design experiment was carried out to compare five treatments: control (T1) basal diet; antimicrobial (T2) basal diet with 40 ppm of colistin sulfate; phytobiotic (T3) basal diet with 500 ppm of natural phytobiotics; sodium butyrate (T4) basal diet with 1500 ppm of sodium butyrate; and phytobiotic+sodium butyrate (T5) basal diet with 500 ppm of natural ptytobiotics + 1500 ppm of sodium butyrate. One hundred and twenty piglets (average age around 24 d and initial live weight of 6.10 ± 1.21 kg), eight replications per treatment, and three animals per experimental unit were used for performance data and diarrhea incidence. For digestibility assay, 60 piglets of first four replications were considered, using chromium oxide as fed marker. At the end of experimental period, an animal of each pen of first four replications was slaughtered for histology analysis, digesta pH and organs morphometry. Specific contrasts of practical importance were tested. No differences were found in performance data (P>.05). The treatments did not show any effect (P>.05) on diarrhea incidence and on digesta pH. Energy digestibility coefficient average of phytobiotic additives and sodium butyrate was higher (P=.07) than that of phytobiotic+sodium butyrate. Organs morphometry showed that the average of treatments T2, T3, T4 e T5 for weight:length ratio of small intestine was lower (P=.02) than that of control treatment. The average of phytobiotic and sodium butyrate treatments for caecum relative weight was lower (P=.09) than that of the phytobiotic+sodium butyrate treatment. For intestinal histology of duodenum, the average of villous density (DV) of phytobiotic and sodium butyrate treatments was higher (P=.06) than that of phytobiotic+sodium butyrate treatment. Piglets of phytobiotic treatment showed higher DV (P=.02) than those of sodium butyrate treatment. Jejunum DV average of treatments T2, T3, T4 e T5 was higher (P=.03) than that of control treatment. Piglets of sodium butyrate treatment showed higher DV than those of phytobiotic treatment (P=.08). Therefore, there was no evidence of natural phytobiotic and sodium butyrate as growth promoters of weanling pigs fed complex diet with high digestibility raised in experimental nursery. However, there are some indications that both phytobiotic and sodium butyrate added individually to weanling pig diets, may improve energy digestibility and some histology and morphometry traits.