Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Cattleya violacea Rolfe (1889) é considerada a orquídea símbolo de Roraima, sendo muito apreciada por colecionadores, orquidófilos e produtores, que almejam cultivar essa espécie em suas coleções. Objetivou-se com este trabalho desenvolver um protocolo de cultivo in vitro para a C. violacea utilizando meios de cultura alternativos ao ágar e aos sais e vitaminas que compõem o meio tradicional Knudson C, no intuito de reduzir os custos dessa forma de reprodução de orquídeas. As plântulas utilizadas nesta pesquisa foram oriundas da germinação in vitro de C. violacea estriata com 1,0 cm de altura e com 02 folhas. Os meios de cultura testados foram compostos por ágar, vermiculita e carvão vegetal adicionados de 60,00 g L-1 de polpa das frutas regionais cupuaçu (Theobroma grandiflorum Schum [Willd. Ex. Spreng]), buriti (Mauritia flexuosa L.), cajá (Spondiaslutea L.), açaí (Euterpe oleracea Mart.), graviola (Anona muricata L.) e murici (Birsonima crassifolia L.) acrescidos de 40,0 ml L-1 de água de coco, de 2,0 g L-1 de carvão ativado e 20,0 g L-1 de sacarose. O pH do meio foi ajustado para 5,7 0,1. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com 18 tratamentos e 05 repetições contendo 05 plântulas por frasco. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância multivariada (AMOVA) e utilizou-se o teste de Tukey a 5% de significância. Os parâmetros biométricos avaliados nas plântulas após seis meses de subcultivo nos meios testados foram, altura da parte aérea, número de folhas, número de raízes, comprimento da maior raiz e número de brotos. Observou-se que os meios compostos por ágar e frutas proporcionaram os maiores crescimentos das plântulas de C. violacea quanto à altura da parte aérea, número de folhas e número de raízes, do que o meio tradicional Knudson C. Sendo que o meio composto por ágar e buriti promoveu o maior desenvolvimento das plântulas e o meio formado por buriti e vermiculita (BU2), em relação à variável número de brotos, influenciou positivamente na escolha do melhor meio de cultura estudado para o subcultivo de C. violacea. / Cattleya violacea Rolfe (1889) is considered the orchid symbol of Roraima, very appreciated by collectors, orchid growers and producers, that aims to cultivate this species in their collections. The objective of this work is to develop an in vitro cultivation protocol for C. violacea using alternative culture media to the agar and salts and vitamins that make up the traditional medium Knudson C in order to reduce costs for this form of reproduction of orchids . Seedlings used in this study were from in vitro germination of C. violacea estriata with 1.0 cm and 02 leaves. The tested media were composed of agar, vermiculite and charcoal added 60.00 g L-1 pulp regional fruit cupuaçu (Theobroma grandiflorum Schum [Willd. Ex. Spreng]), Buriti (Mauritia flexuosa L.) caja (Spondiaslutea L.), açaí (Euterpe oleracea Mart.), soursop (Annona muricata L.) and murici (Birsonima crassifolia L.) plus 40.0 L-1 ml of coconut water, 2.0 g L -1 activated and 20.0 g L-1 sucrose coal. The pH was adjusted to 5.7 0.1. The experimental design was completely randomized, with 18 treatments and 05 repetitions containing 05 seedlings per bottle. The data were subjected to multivariate analysis of variance (AMOVA) and used the Tukey test at 5% significance level. The biometric parameters evaluated in seedlings after six months of subculture media tested were, shoot height, number of leaves, number of roots, the greater root length and number of shoots. It was observed that the means consisting of agar, and fruit resulted in the highest growth of C. violacea as the seedling shoot height, number of leaves, number of roots, than the traditional means Knudson C. Since the medium composed of agar and Buriti promoted the further development of seedlings and the medium formed by Buriti and vermiculite (BU2), in relation to the shoot number, positively influenced the choice of the best culture medium studied for the subculture of C. violacea.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O norte do estado de Roraima é caracterizado por apresentar características importantes nos elementos da paisagem. Esses atributos naturais têm proporcionado à região avanços importantes nas áreas de pesquisas e turismo. Este estudo tem por objetivo analisar a relação da distribuição tipológica da fitofisionomia x relevo e fitofisionomia x pedologia no topo da serra, através da utilização de dados de Sensoriamento Remoto, compartimentação geomorfológica, classes dos solos e dados de campo. Para alcançar esses objetivos foi utilizada uma imagem do sensor OLI, a bordo do satélite Landsat 8, e realizada a correção da interferência dos constituintes atmosféricos por meio do método de subtração do pixel escuro. Foram realizadas operações de realce, ampliação linear do contraste e conversão para composição colorida RGB. As imagens referentes à composição colorida 6R5G8B e banda 5, serviram de referência para a classificação supervisionada por meio do classificador pixel a pixel de máxima verossimilhança (MAXVER). Na fase de treinamento, foram identificados na imagem os pixels correspondentes a cada uma das classes fitofisionômicas pretendidas. Para concretização desse estudo foi realizado trabalho de campo, análises químicas, físicas e matéria orgânica do solo, que analisados de forma integrada resultaram em um mapa de solos e da fitofisionomia da serra. O processamento dos dados foi realizado nos softwares PCI Geomatica versão 10.2, Spring versão 5.2 e ArcGis versão 10. As análises de solos demonstraram solos quimicamente pobres, ácidos, com elevado índice de saturação por alumínio. Na avaliação da classe textural dos perfis, houve predominância da textura Franco-Argilo-Arenosa. A caracterização da geomorfologia para esse estudo foi utilizado uma base de dados de estudos anteriores. Com o desenvolvimento desse trabalho foi possível a elaboração do mapa da fitofisionomia com 3 classes de vegetação, sendo áreas de florestas, savana arbórea e savana graminosa. Igualmente foi elaborado o mapa de solos do topo da serra do Tepequém distribuído em 7 classes de solos incluindo Cambissolo Háplico, Neossolo Litólico, Neossolo Quartzarênico, Plintossolo Pétrico, Latossolo Vermelho-Amarelo, Gleissolo Háplico e Argissolo vermelho-Amarelo. A análise integrada desses produtos do relevo e solo x vegetação do topo da serra apresentou resultados importantes, até mesmo numa análise visual de sobreposição dos mapas é possível perceber expressiva relação entre os elementos da paisagem. No tratamento estatístico dos dados entre as relações dos elementos envolvidos, utilizou-se a razão simples entre a freqüência observada e freqüência esperada (Fo/Fe) obtidas através dos cruzamentos das classes. Foi utilizado o teste X (Qui-quadrado) e submetido as análises à correção de Yates. Os resultados estatísticos confirmam significativa relação entre Vegetação x Geomorfologia e Vegetação x Pedologia, determinando então a rejeição da hipótese H0 (não existe relação entre os elementos da paisagem) e aceitação da hipótese H1 (existe relação entre os elementos da paisagem). A área de floresta apresentou maior relação com os Cambissolos e vales encaixados. A savana arbórea apresentou afinidade com Neossolos e encosta enquanto a savana graminosa teve maior relação com Gleissolo e relevos de morros alinhados e planícies. / The northern state of Roraima is characterized in that distinction from other regions flaps peculiar characteristics of landscape elements that compose it. In the surroundings of this region, the municipality of Amajarí stands out with the Tepequém saw presenting diverse fitopaisagem, high lands and vast scenic beauty. This study aims to analyze the relationship of the typological distribution of vegetation type and vegetation type x x relief pedology at the top of the Sierra, through the use of remote sensing data, geomorphological subdivision, soil classes and field data. To achieve these goals we used a picture of OLI sensor onboard Landsat 8, and performed to correct the interference of atmospheric constituents through the dark pixel subtraction method. Enhancement operations were performed, linear expansion of contrast and conversion to RGB color composite. Images related to 6R5G8B colorful composition and band 5, served as reference for the supervised classification by pixel classifier pixel maximum likelihood (MAXVER). In the training phase, were identified in the corresponding image pixels to each of the required phytophysionomic classes. To achieve this study was conducted fieldwork, chemical, physical and soil organic matter, which analyzed in an integrated manner resulted in a map of soil and vegetation type of the Sierra. Data processing was carried out in PCI Geomatica software version 10.2, Spring 5.2 and ArcGIS version 10. The soil analysis showed chemically poor soils, acids, with high content of aluminum saturation. In evaluating the textural class of profiles, a predominance of Franco-Clay-Sandy texture. The characterization of the geomorphology used for this study was a previous study database. With the development of this work was possible the structure of the vegetation type map with 3 vegetation classes, with areas of forest, wooded savanna and savanna graminosa. It was also designed the top of the soil map of Tepequém saw distributed in seven soil classes including Cambisol, Udorthent, Quartzipsamment, Plinthosol Petrico, Oxisol, Epiaquic Haplustult and red Argisoil. The integrated analysis of these products relief and soil x the top of the mountain vegetation presented important results, even a visual analysis of overlap of maps you can see significant relationship between landscape elements. In the statistical treatment of data between the relationships of the elements involved, we used the simple ratio of the observed frequency and expected frequency (Fo / Fe) obtained from the intersections of classes. We used the X test (chi-square) and submitted the analysis to Yates. Statistical results confirm significant relationship between vegetation and vegetation x x Geomorphology Pedology, then determining the rejection of the hypothesis H0 (no relationship between landscape elements) and acceptance of the hypothesis H1 (there is a relationship between landscape elements). The forest area showed higher with Cambisols and deep valleys. The tree savannah showed affinity with Neossolos and slope while graminosa Savannah had a greater relationship with Gleysol and reliefs lined hills and plains.

Piava juveniles (7-13 cm; 25-30 g) were exposed to different NH3 (mg L-1): 0.003 (control), 0.1, 0.3, 0.7, 1.4, and dissolved oxygen levels (mg L-1): 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, and 6.0, for 4 days (96h). Na+, K+, Cl-, and NH4 + plasma levels were measured, as well as metabolics and enzyme activity in tissues (liver, kidney, gills, and muscle). The lethal concentration (LC50-96h) for piava was 0.27 (0.21 0.34) mg L-1 NH3, and Na+ and NH4 + plasma levels increased and K+ decreased with the increase of waterborne NH3 levels. Na+, K+ -ATPase activity increased in the gills and decreased in the kidney with the increase of waterborne NH3 levels. Glucose levels in the liver and muscle decreased as waterborne NH3 concentrations raised. NH4 + levels in the tissues presented a positive correlation with waterborne NH3 levels. Na+, Cl-, K+ and NH4 + plasma levels and Na+, K+ -ATPase activity in the gills increased with dissolved oxygen reduction in the water. Glucose levels in the liver and muscle and ammonia in all tissues also increased with the reduction of dissolved oxygen levels in the water, but glycogen levels decreased. Consequently, ammonia is a stressor agent for this species, leading to an accumulation of ammonia in plasma and other tissues. In piava, hypoxia led to physiological changes in both osmoregulatory and metabolic parameters. / Juvenis de piava (7-13 cm; 25-30 g) foram expostas a diferentes níveis de NH3 (em mg L-1): 0,003 ( controle); 0,1; 0,3; 0,7; 1,4, e oxigênio dissolvido: 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 e 6,0 mg O2 L-1, por 4 dias (96h). Foram analisados os níveis plasmáticos de Na+,K+, Cl- e NH4 +, bem como metabólicos e enzimas nos tecidos (fígado, rim, brânquias e músculo esquelético). A CL50-96h para a piava foi de 0,27 (0,21 - 0,34) mg L-1 NH3, as concentrações plasmáticas de Na+ e NH4 + aumentaram com a crescente concentração de NH3 na água, já o K+ diminuiu e o Cl- manteve-se estável. A atividade da Na+, K+ -ATPase nas brânquias aumentou com a elevação da concentração de NH3 na água, enquanto que no rim houve redução da atividade. Os níveis de glicose no fígado e músculo reduziram proporcionalmente com o aumento da concentração de NH3. Os níveis de NH4 + nos tecidos tiveram correlação positiva em relação à concentração de NH3 na água. Em piavas expostas a diferentes níveis de oxigênio dissolvido, as concentrações plasmáticas de Na+, Cl-, K+ e NH4 + diminuíram e a atividade da Na+, K+ -ATPase nas brânquias aumentou com a redução do oxigênio na água. Os níveis de glicose no fígado, rim e músculo aumentaram de acordo com a redução do oxigênio dissolvido na água. Porém os níveis de glicogênio reduziram. A concentração de amônia aumentou em todos os tecidos de acordo com a redução do oxigênio dissolvido na água. Na piava, a hipóxia provocou mudanças fisiológicas, tanto na osmorregulação como nos parâmetros metabólicos, após a exposição a diferentes níveis de oxigênio dissolvido. Portanto, o experimento confirmou que a amônia é um agente estressor para o peixe, inclusive em baixas concentrações, causando acumulação de amônia no plasma e em outros tecidos.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-11-03T14:35:17Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3446884 bytes, checksum: a5bb307c1e391c1e8ae2a49d2cdf94b5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-03T14:35:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3446884 bytes, checksum: a5bb307c1e391c1e8ae2a49d2cdf94b5 (MD5) Previous issue date: 2015-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O gênero Trigona é um dos maiores e mais amplamente distribuídos táxons de abelhas da tribo Meliponini. A citogenética comparativa permite através de suas técnicas de bandamento clássica e molecular entender sobre a evolução do cariótipo em diversos organismos. As informações citogenéticas disponíveis para o gênero Trigona mostram um número diplóide constante (2n=34), além disso, as espécies do gênero compartilham um cromossomo acrocêntrico totalmente eucromático (Ae). Este trabalho buscou (i) verificar se existem variações cromossômicas e como estas se distribuem entre as populações de espécies com ampla distribuição, Trigona spinipes (ii) descrever citogeneticamente algumas espécies do gênero e por fim, (iii) buscar alguns caracteres citogenéticos para entender a evolução cariotípica em Trigona. Os resultados obtidos neste trabalho reforçam a homogeneidade do número diploide entre as espécies do gênero Trigona. O mapeamento do microssatélite (GA)15 mostrou-se mais efetivo para separar populações de T. spinipes do que as espécies do mesmo gênero. O gene rDNA 18S apresentou variações interespecíficas, contudo não foram observadas diferenças numéricas e de posicção desse gene entre as popT. spinipes. Uma comparação usando os marcadores citogeneticos (quantidade de heterocromatina, rDNA 18S e cromossomo Ae) sugere um processo de eliminação da heterocromatina no gênero Trigona. Por fim, esse estudo ressalta a importância de se usar técnicas de citogenética molecular em estudos com populações, e de citogenética comparativa de espécies com baixo polimorfismo cromossômico, como as abelhas da tribo Meliponini. / The Trigona is a genus of the stingless bees rich in species and it is widely distributed.The comparative cytogenetics allows us understanding the karyotype evolution in various organisms. Cytogenetic informations available for Trigona showed a constant diploid number (2n = 34) and a euchromatic acrocentric chromosome (Ae) is shared among their species. This study aimed to (i) check for chromosomal variations among populations with wide distribution, such as Trigona spinipes (ii) describe cytogenetically some species of the genus and finally, (iii) seek some cytogenetic characters to understand karyotype evolution of Trigona. The results corroborate the homogeneity of chromosome number among the species of the genus Trigona. The mapping of microsatellite (GA)15 was more effective to separate populations of T. spinipes, than species of the same genus. In contrast, the location of the 18S rDNA varied among species. A comparison using cytogenetic markers (amount of heterochromatin, rDNA 18S and chromosome Ae) suggests the elimination of heterochromatin in Trigona. Therefore, this study points out the importance of molecular cytogenetics in population studies and in the comparative citogenetics of species with a few chromosomal variations, such as stingless bees.

Submitted by Amauri Alves (amauri.alves@ufv.br) on 2015-11-04T11:59:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1259029 bytes, checksum: f58ecc9bd94860500a42f7572182e255 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-04T11:59:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1259029 bytes, checksum: f58ecc9bd94860500a42f7572182e255 (MD5) Previous issue date: 2015-03-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As infecções causadas pelos vírus dengue representam a principal arbovirose em nível mundial e são de grande importância para o nosso país. O controle desta doença se baseia na tentativa de eliminar os mosquitos transmissores, pois não existem vacinas disponíveis comercialmente para este vírus, o qual é representado por quatro sorotipos diferentes. Pesquisas recentes com desenvolvimento de vacinas contra a dengue têm explorado o uso de expressão de antígenos recombinantes em vetores de expressão, chamados vacinas de DNA. Recentemente tem sido estudado o uso de nanotubos de carbono para aplicações na área biológica, como transporte e disponibilização de drogas, proteínas e genes em células. No presente estudo foi utilizado um candidato vacinal de DNA tetravalente contra a dengue, o qual possui genes para a expressão do domínio III da proteína E dos quatro sorotipos do vírus. Foi feita a conjugação do mesmo com nanotubos de carbono de paredes múltiplas e foi verificado quanto a sua expressão tanto em cultura de células como em modelos animais, com avaliação do padrão de resposta imunológica gerado. Pelos resultados obtidos foi possível observar que o candidato vacinal de DNA tetravalente desenvolvido obteve uma resposta pouco satisfatória quando testado in vitro e in vivo, uma vez que o único resultado interessante foi com relação ao aumento de células B e a produção de citocinas pró-inflamatórias IFN- γ e IL-6. Além disso, foi demonstrado que a conjugação do candidato vacinal com o MWCNT não gerou aumento da resposta imune nos camundongos, sendo que o único resultado obtido foi um aumento de células B quando os camundongos foram tratados com esse composto. / Infections caused by dengue viruses are the main arbovirus infection worldwide and are of great importance for our country. Control of this disease is based on the attempt to eliminate the mosquitoes, because there are no commercially available vaccine for this virus, which is represented by four different serotypes. Recent research in development of vaccines against dengue have explored the use of recombinant expression vectors for expression of antigens, called DNA vaccines. Recently there has been studied the use of carbon nanotubes for applications in the biological field such as transportation and delivery of drugs, proteins and genes into cells. In the present study it was used a tetravalent DNA vaccine candidate against dengue, which has genes for the expression of domain III of the E protein of the four serotypes of the virus. The conjugation was performed with multi-walled carbon nanotubes and was checked for its expression in both cell culture and animal models, to evaluate the pattern of immune response generated. By the results, it was observed that the tetravalent DNA vaccine candidate obtained an unsatisfactory response when tested in vitro and in vivo, since the only interesting result was related to the increase of B cells and the production of the pro-inflammatory cytokines IFN-γ and IL-6. Furthermore, it was shown that the conjugation of the vaccine candidate with the MWCNT did not cause an increase of the immune response in mice and the only result was an increase of B cells when mice were treated with this compound.

Submitted by Amauri Alves (amauri.alves@ufv.br) on 2015-11-10T14:55:27Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 6235319 bytes, checksum: f05b70ae5d5554be5f69fb53db7ff002 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-10T14:55:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 6235319 bytes, checksum: f05b70ae5d5554be5f69fb53db7ff002 (MD5) Previous issue date: 2014-12-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As doenças tropicais negligenciadas persistem ainda como graves problemas de saúde pública em vários países, incluindo o Brasil. Dentre elas estão: a doença de Chagas e as Leishmanioses, causadas por Trypanosoma cruzi e espécies do gênero Leishmania, respectivamente. As ectonucleotidases da família das E- NTPDases são enzimas capazes de hidrolisar nucleotídeos tri e/ou difosfatados, que atuam como sinalizadores em vários processos celulares. A hidrólise de ATP extracelular possui papel na infectividade e virulência de T. cruzi, bem como para Leishmania. As enzimas NTPDase-1 de T. cruzi (TcNTPDase-1) e NTPDase-2 de Leishmania infantum chagasi (LicNTPDase-2) demonstraram serem moléculas pró-adesão, agindo como facilitadores na infecção de células VERO e macrófagos, respectivamente. Uma expressão ubíqua dessas duas enzimas sugere ainda que elas podem estar envolvidas em diferentes processos biológicos, e apresentar funções desconhecidas. A detecção da LicNTPDase-2 em tecidos de cães diagnosticados com leishmaniose visceral, indica uma importância das ENTPDases na infecção natural. A descoberta de moléculas envolvidas com o processo de infecção é uma alternativa em potencial para o desenho racional de novas drogas. Para a doença de Chagas, atualmente, somente duas drogas são utilizadas para o tratamento, porém ambas apresentam sérios efeitos colaterais e não são efetivas na fase crônica da doença. Sendo assim, é urgente o desenvolvimento de um tratamento menos nocivo e mais eficiente. A TcNTPDase-1 recombinante foi expressa e purificada, e foram encontrados extratos capazes de abolir totalmente sua atividade nucleotidásica. A partir de um desses extratos foi extraído o composto puro bioativo responsável pela inibição. A ligação deste composto ao sítio ativo da enzima foi avaliada por modelagem molecular. Esses e outros extratos e vicompostos foram testados sobre o parasito e células de mamíferos. Um composto da classe das isobenzofuranonas apresentou eficiência contra os parasitos comparável à da droga de referência, o benzonidazol. A baixa toxicidade apresentada pelo composto para as células hospedeiras foi revertida ao final de 72 horas. O estudo desses compostos e sua modificação e otimização poderia fornecer ferramentas para o desenvolvimento de novos compostos, com potencial para uma nova droga para o tratamento da doença de Chagas. / Neglected tropical diseases persist as major public health problem in many countries, including Brazil. These include: Chagas disease and Leishmaniasis, caused by Trypanosoma cruzi and Leishmania species, respectively. The ectonucleotidases of the E-NTPDase family are enzymes that hydrolyze tri and / or diphosphate nucleotides, which act as signaling molecules in various cellular processes. Extracellular ATP hydrolysis has role in infectivity and virulence of T. cruzi and Leishmania. The enzymes NTPDase-1 of T. cruzi (TcNTPDase-1) and NTPDase-2 of Leishmania infantum chagasi (LicNTPDase-2) were demonstrated to be pro- adhesion molecules, acting as facilitators at the infection of VERO cells and macrophages, respectively. A ubiquitous expression of these two enzymes suggests that they may be involved in different biological processes, and present unknown functions. Detection of LicNTPDase-2 in dog tissues diagnosed with visceral leishmaniasis indicates an importance of ENTPDases in natural infection. The discovery of molecules involved in the infection process is a potential alternative to rational design of new drugs. For Chagas disease, currently, only two drugs are used for treatment, but both have serious side effects and are not effective in the chronic phase of the disease. Therefore, it is urgent to develop a less harmful and more efficient treatment. Recombinant TcNTPDase-1 was expressed and purified, and a few extracts were able to abolish its ectonucleotidase activity. From one of these extracts was extracted a pure bioactive compound, responsible for the inhibition. The binding of this compound to the active site of the enzyme, was evaluated by molecular modeling. These and other extracts and compounds were tested upon the parasite and mammalian cells. A compound of the isobenzofuranonas class presented efficiency against the parasites comparable to the reference drug, benznidazole. The low toxicity of the compound toward host cells was reversed after 72 hours. The study of these compounds and their modification and optimization viiicould provide tools for the development of new compounds with potential for a new drug for the treatment of Chagas disease.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-12T14:57:17Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1524148 bytes, checksum: 532c85124f737066f3d9d77a94ae8a1a (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-12T14:57:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1524148 bytes, checksum: 532c85124f737066f3d9d77a94ae8a1a (MD5) Previous issue date: 2015-08-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O tratamento da insuficiência cardíaca em decorrência do infarto do miocárdio (IM) conta atualmente com diversos tipos de intervenções. O treinamento físico (TF) e a terapia com células-tronco mesenquimais (CTM) têm sido utilizados, contudo, os efeitos da associação dessas terapias são pouco estudados. Este estudo teve como objetivo verificar se o exercício físico de baixa intensidade associado à terapia com CTM poderia afetar de modo benéfico o remodelamento e a função cardíaca de ratos infartados. Ratos Wistar (idade: 30 dias, peso corporal: 118 ± 11g) foram divididos nos grupos: sedentário sham (SED SH); sedentário infartado (SED IM); sedentário infartado + CTM (SED IM CT); exercitado sham (EX SH); exercitado infartado (EX IM) e exercitado infartado + CTM (EX IM CT). Animais dos grupos IM foram submetidos à toracotomia e ligadura da artéria coronária anterior descendente esquerda. O programa de treinamento consistiu de 60 minutos, 5x/semana, 60% da velocidade máxima de corrida, iniciado 24 horas após o IM com duração de 12 semanas. Células-tronco mesenquimais da medula óssea do fêmur de ratos Wistar (concentração: 1 x 106 células) foram injetadas de forma alogênica via veia caudal imediatamente após o IM. Foram avaliados: teste físico em esteira; análise ecocardiográfica; tamanho do IM; conteúdo de colágeno; percentual de vasos; hipertrofia cardíaca e celular; expressão proteica de AKT, mTOR, calcineurina, NFAT e VEGF; expressão gênica de α-actina esquelética, FNA, α-MCP e -MCP. O IM promoveu alterações deletérias ao coração, aumentando os parâmetros: massa cardíaca, índice cardiossomático, diâmetro da parede do ventrículo esquerdo, diâmetro da câmara ventricular esquerda, comprimento e volume dos cardiomiócitos e fibrose intersticial, além de prejudicar parâmetros funcionais como fração de ejeção e fração de encurtamento. O protocolo de exercício aeróbio de baixa intensidade em esteira melhorou a capacidade física dos animais, induziu a bradicardia de repouso, aumentou a fração de ejeção e fração de encurtamento, reduziu o tamanho do infarto e a fibrose intersticial no ventrículo esquerdo, reduziu a expressão de genes marcadores de hipertrofia cardíaca patológica (actina α-esquelética, FNA e -MCP) e aumentou a relação de α/ -MCP. A terapia celular com CTM, por sua vez, reduziu o tamanho do infarto e a fibrose intersticial e melhorou os parâmetros de fração de ejeção e encurtamento nos animais sedentários. A associação dos tratamentos não causou alterações significativas nos parâmetros avaliados. Conclui-se que os tratamentos, avaliados de forma isolada, causaram adaptações benéficas que resultaram em melhora da função cardíaca geral. No entanto, ao serem associados, não mostraram sinergia que pudesse potencializar seus benefícios. / The treatment of heart failure as a consequence of myocardial infarction (MI) has currently various types of interventions. The exercise training (ET) and therapy with mesenchymal stem cells (MSC) has been used, however, the effects of the combination of these therapies are poorly studied. This study aimed to verify if the exercise of low intensity associated with MSC therapy could affect beneficially the cardiac function and remodeling in infarcted rats. Male Wistar rats (age: 30 days; body weight: 118 ± 11g) were divided into six groups: sedentary sham (SED SHAM), sedentary infarction (SED MI), sedentary infarction plus stem cells (SED MI SC), trained sham (TR SHAM), trained infarction (TR MI) and trained infarction plus stem cells (TR MI SC). Animals from MI groups were subjected to throcotomy ligation of the anterior descending coronary artery. Animals from TR groups were submitted to a progressive treadmill running training for 12 weeks, being the final duration and intensity of 60 min and 60% of maximal running speed. MSCs from the Wistar rat femoral bone marrow were used to allogenic cell transplantation through the tail vein immediately after MI (concentration: 1 x 106 cells). There were assessed: physical capacity; hemodynamic analysis; MI size; collagen content; vessels percentage; cellular and cardiac hypertrophy; protein expression of AKT, mTOR, calcineurin, NFAT and VEGF; gene expression of actin-α-skeletal, ANF, α- and MHC-MHC. The IM promoted deleterious changes to the heart, increasing the parameters following: cardiac mass, cardiac somatic index, diameter of the left ventricular wall, diameter of the left ventricular chamber, length and volume of cardiomyocytes; interstitial fibrosis, and impair functional parameters as the fractions of ejection and shortening. The aerobic exercise protocol of low intensity treadmill improved the physical capacity of the animals, induced rest bradycardia, increased shortening and ejection fraction, reduced infarct size and interstitial fibrosis in the left ventricle, reduced the expression of pathological cardiac hypertrophy markers genes (α-skeletal actin, atrial natriuretic factor (ANF) and - myosin heavy chain ( -MHC) and increased the ratio of α / -MHC. Cell therapy with MSC, in turn, reduced infarct size and interstitial fibrosis and improved shortening and ejection fraction parameters in the sedentary animals. The combination of the treatments did not cause significant changes in the evaluated parameters. In conclusion, the treatments evaluated in isolation, caused beneficial adaptations which resulted in improved overall cardiac function. However, when combined, they showed no synergy that could enhance their benefits.

Submitted by Amauri Alves (amauri.alves@ufv.br) on 2015-11-16T15:20:48Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1293935 bytes, checksum: b779340631eccc4bf24d086b2784d036 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-16T15:20:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1293935 bytes, checksum: b779340631eccc4bf24d086b2784d036 (MD5) Previous issue date: 2015-07-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A dengue é a doença mais importante causada por um arbovírus no mundo. O vírus da dengue pertence à família Flaviviridae e possui 4 sorotipos antigenicamente distintos. São vírus de RNA fita simples, polaridade positiva, com o genoma de aproximadamente 11 Kb que é traduzido em uma poliproteína subdividida em três proteínas estruturais e sete proteínas não- estruturais (que estão relacionadas com a replicação viral, expressão das proteínas virais e virulência dos sorotipos). Nos últimos vinte anos têm sido observado um incremento significativo na atividade epidêmica, expansão da distribuição geográfica e transmissão contínua dos diferentes sorotipos em áreas onde a doença não era prevalente. Um dos eventos mais alarmantes tem sido o aumento do número de casos da Febre da Dengue Hemorrágica (FDH) nas Américas. Um ponto ainda limitante dos testes diagnósticos que capturam o anticorpo presente no soro de pacientes infectados consiste na dificuldade de obtenção de baixo custo e produção em grande escala dos antígenos. Diante destas considerações objetivou-se expressar a proteína não-estrutural (NS1) do vírus dengue-2 em plantas transgênicas de Arabidopsis thaliana. O gene da proteína NS1 foi otimizado para a expressão em plantas e clonado no plasmídeo pCAMBIA3301. O vetor de expressão pCAMBIA3301/NS1 foi utilizado para transformação de Arabidopsis thaliana. A terceira geração de plantas transformadas foi selecionada em homozigose dominante. A transformação de Arabidopsis thaliana foi evidenciada pela imunolocalização da proteína NS1 marcada dentro do lúmen do retículo endoplasmático em tecidos foliares. Este sistema será utilizado para obtenção do antígeno NS1 com finalidade de aplicação em testes de diagnóstico da dengue. / Dengue fever is the most important disease caused by an arbovirus in the world. The dengue virus belongs to the Flaviviridae family and has four antigenically distinct serotypes. They are single stranded RNA viruses, positive polarity, with a genome of approximately 11 Kb which is translated into a polyprotein subdivided in three structural proteins and seven non-structural proteins (that are related to viral replication, expression of viral proteins and virulence of serotypes). In the last twenty years, it was observed a significant increase in the epidemic activity, expansion of the geographical distribution and streaming of different serotypes in areas where the disease was not prevalent. One of the most alarming events was the increase in the number of cases of dengue hemorrhagic fever (DHF) in the Americas. A further limiting point of the diagnostic tests that capture antibody present in the serum of infected patients is the difficulty of obtaining low-cost and large-scale production of the antigens. Due to this factor, we aimed to build a system in transgenic Arabidopsis thaliana expressing the nonstructural protein (NS1) of the dengue-2 virus. The gene of the NS1 protein was optimized for expression in plants and cloned into the plasmid pCAMBIA3301. The expression vector pCAMBIA3301/NS1 was used for transformation of Arabidopsis thaliana. The third generation of transformed plants were selected by dominant homozygous. The construction of a transgenic Arabidopsis thaliana system was demonstrated by immunolocalization of the NS1 protein into the lumen of the endoplasmic reticulum in the leaf tissues. This system will be used to obtain the NS1 antigen with application purpose of dengue diagnostic tests.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-23T15:50:47Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 28606307 bytes, checksum: 86f96165df54d75c9fd92683b3346e19 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-23T15:50:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 28606307 bytes, checksum: 86f96165df54d75c9fd92683b3346e19 (MD5) Previous issue date: 2015-07-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O Aedes aegypti é o principal vetor dos vírus causadores da Dengue. Uma das formas de se controlar a transmissão da doença é o combate desse vetor através do uso de inseticidas. Um dos mecanismos de resistência pode estar ligado ao metabolismo de inseticidas por diferente órgãos ou células, incluindo os enócitos. Os enócitos são células de origem ectodérmica ricas em retículo endoplasmático liso e responsáveis pelos processos de metabolismo de lipídeos e desintoxicação. Nosso trabalho teve como objetivo geral avaliar os efeitos subletais da deltametrina no comportamento larval e nos enócitos pupais e do inseto em duas populações diferentes, susceptível e resistente, de A. aegypti. Para isso foram utilizados larvas de quarto instar (L4) e pupas de populações resistente e susceptível a deltametrina. L4 das duas populações foram submetidas a diferentes concentrações do inseticida: 0,001; 0,003; 0,005; 0,007 ppm e a sobrevivência foi aferida. Após a exposição ao inseticida, L4 foram submetidas a bioensaios comportamentais. Pupas com dois dias de idade após a pupação foram dissecadas e os grupos de enócitos processados para microscopia eletrônica de transmissão (MET) e reação de TUNEL de insetos expostos a 0,003 e 0,005 ppm de inseticida. A 0,007 ppm a deltametrina apresentou efeitos letais sobre as L4 susceptível, enquanto que as resistentes sobreviveram a todas as concentrações testadas. L4 susceptíveis apresentaram um comportamento letárgico e taxa de atividade e natação bem menor do que o controle. Provavelmente, isso ocorreu devido a ação neurotóxica do inseticida. Já nas L4 resistentes observou-se hiperexcitação a 0,005 ppm de deltametrina. Não foram observados efeitos subletais e morte celular significativos tanto em enócitos da população susceptível quanto da resistente expostas à deltametrina. Nossos resultados contribuem para o melhor entendimento das diferentes respostas à exposição subletal à deltametrina em populações susceptíveis e resistentes de A. aegypti e sua relação com o comportamento das formas aquáticas e a estrutura dos enócitos nessa espécie. / The mosquito Aedes aegypti is the main vector of Dengue virus. One strategy to control the transmission of these pathogens by this vector is by means insecticide use. The maj or problems related to this strategy is the emergence of resistance. The mechanisms of resistance may be linked to the metabolism of insecticides by different cells, including oenocytes. The oenocytes are ectodermal cells rich in smooth endoplasmic reticulum and responsible for lipid metabolism and detoxification. This work aimed at evaluating the sublethal effects of deltamethrin on the behavior and structure of oenocytes in immature mosquitoes, of susceptible and resistant A. aegyptistrains. Fourth instar larvae (L4) of both strains were exposed to different concentrations of deltamethrin: 0.001; 0.003; 0.005; 0.007 ppm, and the survival rate was measured. After exposition, L4 of both populations were subjected to behavioral bioassays with the aid of the program View Point Application Manager-Video Track. To study the effects of insecticide in the ultrastructure and cell integrity after insecticide exposure (0.003 and 0.005 ppm), two-days old pupae after pupation were dissected and their oenocytes were processed for transmission electron microscopy (TEM) and TUNEL. The concentration of 0.007 ppm had lethal effects on susceptible L4, while the resistant L4 survived under all the tested concentrations. Susceptible L4 are lethargic and had the swimming activity much lower than control. This probably was due to neurotoxic action of the insecticide. On the other hand, the resistant L4 were hyperexcitated under the treatment With 0.005 ppm. This might result from the inhibitory action of the insecticide on the neurotransmitter GABA. There were no sublethal effects and significant cell death in both susceptible and resistant oenocytes exposed to deltamethrin. Our results revealed the different responses of susceptible and resistant strains of A. aegypti under deltamethrin sublethal exposures, and how these two different strains differs in terms of immature stage behaviors and the structure of oenocytes under exposures. / Arquivo não criptografado, pois as páginas ficam em branco após o processo.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-12-15T15:32:16Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2395088 bytes, checksum: 005286bddfe20cd81f6646f736142ce4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-15T15:32:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2395088 bytes, checksum: 005286bddfe20cd81f6646f736142ce4 (MD5) Previous issue date: 2016-10-03 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Objetivo: Investigar o efeito da aplicação tópica da pomada à base de Strycnos pseudoquina nas concentrações 5 e 10% na cicatrização de feridas cutâneas em ratos diabéticos. Material e Método: Amostras de S. pseudoquina foram coletadas no Município de Rio Verde, Goiás, Brasil e em seguida submetido a prospecção fitoquímica. O extrato foi emulsificado em lanolina nas concetrações 5% e 10%. Foram utilizados trinta ratos Wistar que após a indução do diabetes com estreptozotocina, foram divididos em 5 grupos de 6 animais: Sal: feridas tratadas com 0,9% de solução salina; VH (veículo da pomada): feridas tratadas com 0,6 g de creme de lanolina; SS (Sulfadiazina de Prata): feridas tratadas com 0,6 g de creme de Sulfadiazina de Prata (0,01%); ES5: feridas tratadas com pomada a base de S. pseudoquina (5%); ES10: feridas tratadas com pomada a base de S. pseudoquina (10%). Três feridas circulares de 12 mm de diâmetro foram realizadas no dorso dos animais e fragmentos das feridas foram retirados para análises histológicas e bioquímicas a cada 7 dias durante 21 dias. Resultados: Os grupos que receberam o extrato de S. pseudoquina nas concentrações 5 e 10% apresentaram maior taxa de fechamento das feridas, maior quantidade de células, vasos sanguíneos e aumento do colágeno III e I. Os marcadores de estresse oxidativo foram menores nos grupos ES5 e ES10, e os níveis de enzimas antioxidantes foram maiores nestes mesmos grupos. Conclusão: Os resultados deste trabalho demonstraram que a aplicação tópica de pomada à base de S. pseudoquina promove um reparo cutâneo rápido e eficaz em ratos diabéticos / Objective: Investigate the effect of topical application of the ointment of Strychnos pseudoquina in concentrations of 5 to 10% in the skin wound healing in diabetic rats. Material and Methods: Samples of S. pseudoquina were collected in Rio Verde, Goiás, Brazil, and then submitted to phytochemical prospection. The extract was emulsified in lanolin at concentrations of 5% and 10%. Thirty rats were used which after diabetes induction with streptozotocin, were divided into 5 groups of 6 animals: Sal: wounds treated with 0.9% saline solution; VH (Ointment vehicle): wounds treated with 0.6 g of lanolin cream; SS (Silver Sulfadiazine): wounds treated with 0.6 g of silver sulfadiazine cream (1%); ES5: wounds treated with ointment base S. pseudoquina (5%); ES10: wounds treated with ointment base S. pseudoquina (10%). Three circular wounds of 12mm in diameter were made on the animal‟s back and fragments of the wounds were removed for histological and biochemical analysis each 7 days for 21 days. Results: The groups that received concentrations of 5 and 10% of S. pseudoquina extract had higher closing rate of wounds and increase of cells, blood vessels, collagen III and I. The oxidative stress markers were lower in the groups ES5 and ES10 and levels of antioxidant enzymes were higher in the same groups. Conclusion: The results of this work have shown that topical application of S. pseudoquina ointment promotes fast and effective skin repair in diabetic rats.