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Caracterização de anidrases carbônicas do fungo Paracoccidioides brasiliensis / Characterization of carbonic anhydrases of Paracoccidioides brasiliensisTomazett, Mariana Vieira 29 August 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-08-29 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Paracoccidioidomycosis (PCM) is the most important endemic deep mycosis in Latin
America. Understanding of the complex interactions between the fungus and host must
include the identification of gene expression patterns during infection. Carbonic anhydrase
(CA) belongs to the family of zinc metalloenzymes that catalyzes the reversible hydratation of
carbon dioxide to bicarbonate. Transcriptional studies have shown that carbonic anhydrase of
P. brasiliensis is expressed in yeast cells recovered from liver of infected mice. In the present
work, we characterized the cDNAs encoding for four carbonic anhydrases of P.brasiliensis
(PbCA1, PbCA2, PbCA3, PbCA4). Recombinant PbCA1, 3 and 4 were obtained in
heterologous systems with 33 kDa, 28 kDa and 32 kDa respectively. Mass spectrometry
analysis confirmed the sequences of the produced proteins. The expression of PbCAs
transcripts was evaluated by using real-time RT-PCR in mycelium, yeast cells and mycelium
to yeast transition, in yeast cells exposed to CO2 and yeast cells recovery directly from liver
and spleen. In the presence of CO2, PbCA1, PbCA2 and PbCA4 gene expression was reduced
in the course of time. PbCA1 transcript expression was induced during the mycelium to yeast
transition. PbCA2 and PbCA4 gene expression was higher in yeast cells, when compared to
mycelium and mycelium to yeast transition. Pbca1 was induced yeast cells recovery directly
from liver and spleen while the transcripts for Pbca2 and Pbca4 were repressed in all
condictions. The gene expression data suggest differential roles of the CAs in the fungal
physiology. / Paracoccidioidomicose (PCM) é a mais importante micose endêmica na América Latina. A
compreensão das interações complexas entre o fungo e o hospedeiro deve incluir a
identificação de padrões de expressão gênica durante a infecção. Anidrase carbônica (CA)
pertence à família de metaloenzimas de zinco que catalisa a hidratação reversível do dióxido
de carbono para bicarbonato. Estudos transcricionais têm mostrado que uma anidrase
carbônica de P. brasiliensis é expressa em células de levedura recuperadas de fígado de
camundongos infectados. No presente trabalho, nós caracterizamos os cDNAs que codificam
para quatro anidrases carbônicas de P.brasiliensis (PbCA1, PbCA2, PbCA3, PbCA4). As
recombinante de PbCA1, PbCA3 e PbCA4 foram obtidas em sistemas heterólogos com 33
kDa, 28 kDa e 32 kDa, respectivamente. Análise por espectrometria de massas confirmou as
seqüências das proteínas produzidas. A expressão dos transcritos de Pbcas foi avaliada usando
real-time RT-PCR em micélio, levedura e transição de micélio para levedura; em células de
levedura expostas a CO2 e células de leveduras recuperadas diretamente do fígado e baço. Na
presença de CO2, a expressão dos genes de Pbca1, Pbca2 e Pbca4 foi reduzida no decorrer do
tempo. A expressão do transcrito de Pbca1 foi induzida durante a transição de micélio para
levedura. A expressão de Pbca2 e Pbca4 foi maior em células de levedura, quando comparada
com micélio e transição de micélio para levedura.O transcrito para Pbca1 foi induzido em
células de leveduras recuperadas diretamente do fígado e baço, enquanto que os transcritos
para Pbca2 e Pbca4 foram reprimidos em todas as conduções. Os dados de expressão gênica
sugerem diferentes papéis das CAs na fisiologia dos fungos.
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Mapa proteômico de espécies filogenéticas do complexo Paracoccidioides / Proteomic maps of members of the Paracoccidioides complexPigosso, Laurine Lacerda 31 July 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-07-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The genus Paracoccidioides comprises a complex of phylogenetic species of dimorphic
pathogenic fungi, the etiologic agents of paracoccidioidomycosis (PCM), a disease confined to
Latin America and of marked relevance in its endemic areas due to its high frequency and
severity. The members of the Paracoccidioides genus are distributed in distinct phylogenetic
species (S1, PS2, PS3 and 01-like) that potentially differ in their biochemical and molecular
characteristics. In this work, we performed the proteomic characterization of different members
of the genus Paracoccidioides. We compared the proteomic profiles of Pb01 (01-like), Pb2
(PS2), Pb339 (S1) and PbEPM83 (PS3) using 2D electrophoresis and mass spectrometry. The
proteins/isoforms were selected based on the staining intensity of the spots as determined by
image analysis. The proteins/isoforms were in-gel digested and identified by peptide mass
fingerprinting and ion fragmentation. A total of 714 spots were detected, of which 343 were
analyzed. From these spots, 301 represented differentially expressed proteins/isoforms among
the four analyzed isolates, as determined by ANOVA. After applying the FDR correction, a
total of 267 spots were determined to be differentially expressed. From the total, 193
proteins/isoforms were identified by PMF and confirmed by ion fragmentation. Comparing the
expression profiles of the isolates, the proteins/isoforms that were related to
glycolysis/gluconeogenesis and to alcohol fermentation were more abundant in Pb01 than in
other representatives of the genus Paracoccidioides, indicating a higher use of anaerobic
pathways for energy production. Those enzymes related to the oxidative stress response were
more abundant in Pb01, Pb2 and Pb339, indicating a better response to ROS in these members
of the Paracoccidioides complex. The enzymes of the pentose phosphate pathway were
abundant in Pb2. Antigenic proteins, such as GP43 and a 27-kDa antigenic protein, were less
abundant in Pb01 and Pb2. The proteomic profile indicates metabolic differences among the
analyzed members of the Paracoccidioides genus. / O gênero Paracoccidioides compreende um complexo de espécies filogenéticas do fungo
patogênico dimórfico, agente etiológico da paracoccidioidomicose (PCM), uma doença restrita à
América Latina e de relevância acentuada em suas áreas endêmicas, devido à sua alta frequência
e gravidade. Os membros do gênero Paracoccidioides são distribuídos em espécies filogenéticas
distintas (S1, PS2, PS3 e 01-like) que diferem potencialmente nas suas características
bioquímicas e moleculares. Neste trabalho, foi realizada a caracterização proteômica de
diferentes membros do gênero Paracoccidioides. Foram comparados os perfis proteômicos de
Pb01 (01-like), Pb2 (PS2), Pb339 (S1) e PbEPM83 (PS3) utilizando eletroforese 2D e
espectrometria de massa. As proteínas / isoformas foram selecionados com base na intensidade
de coloração dos spots conforme determinado por análise de imagem. As proteínas / isoformas
foram excisadas do gel, digeridas e identificadas por PMF (Peptide mass fingerprinting) e
fragmentação iônica. Um total de 714 spots foi detectado, 343 foram analisados. A partir destes
spots, 301 apresentaram-se diferencialmente expressos entre os quatro isolados analisados,
determinado por ANOVA. Depois de aplicar a correção FDR, um total de 267 spots foram
diferencialmente expressos. Do total, 193 / isoformas proteínas foram identificadas por PMF e
confirmadas por fragmentação iônica. Comparando-se os perfis de expressão dos isolados, as
proteínas / isoformas que foram relacionados para a glicólise / gliconeogênese e fermentação
alcoólica foram mais abundantes em Pb01 do que em outros representantes do gênero
Paracoccidioides, indicando uma maior utilização das vias anaeróbias para a produção de
energia. Enzimas relacionadas com a resposta ao estresse oxidativo foram mais abundantes em
Pb01, Pb2 e Pb339, indicando uma melhor resposta às ROS nestes membros do complexo
Paracoccidioides. As enzimas da via das pentoses foram abundantes em Pb2. Proteínas
antigênicas, tal como GP43 e uma proteína antigênica de 27 kDa, foram menos abundantes em
Pb01 e Pb2. O perfil proteômico indica diferenças metabólicas entre os membros analisados do
gênero Paracoccidioides.
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Atividade analgésica, anti-inflamatóriae vasorelaxante de dois derivados pirazólicos: 5-[1-(4- fluorfenil)-1H-pirazol-4-IL]-2H-tetrazola(LQFM 020) e 5- [1-(2-fluorofenil)-1H-pirazol-4-IL]-2H-tetrazola (LQFM 039) / Analgesic, anti-inflammatory and vasorelaxant activity of the two pirazoles derivative: 5-[1-(4- fluorfenil)-1H-pirazol-4-IL]-2H-tetrazola(LQFM 020) and 5- [1-(2-fluorofenil)-1H-pirazol-4-IL]-2H-tetrazola (LQFM 039)Oliveira, Lanussy Porfiro de 31 October 2014 (has links)
Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2015-11-11T20:45:46Z
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Previous issue date: 2014-10-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Inflammation is a complex process that aims to protect the body
eliminating the harmful agent and to promote tissue repair is characterized by
classic signs: pain, heat, redness and swelling as a result of failure to resolve
the inflammatory process may occur loss of function. Control of pain and
inflammation leads to the search for new drugs both analgesic and antiinflammatory
drugs with good efficacy to aid in the treatment of these deseases.
The aim of this study was to evaluate the pharmacological effects of two
pyrazole derivatives. In acute nociception tests LQFM 020 (9, 17.5 and 35
mg/kg) and LQFM 039 (17.5, 35 and 70 mg/kg) reduced the number of writhing
dose dependent manner to 53, 48 and 35; and 57, 52, 42, respectively, while
the control group the number of writhes was 88. In the formalin test this
antinociceptive effect was confirmed by the reduction in time reactivity to pain in
both test phases, the time in the control group was 78 and 72s in the first phase
and 150 and 128s in the second phase, with LQFM for 020 and 039 LQFM in
the first phase was to reduce 50 and 47s and the second phase to 97 and 74s
respectively. In bending the tail the groups of mice treated with LQFM 020 and
LQFM 039 test were not able to increase the latency to thermal stimulus
demonstrated that the analgesic effect does not involve central mechanisms.
Furthermore, the results of the enzymatic activity of cyclooxygenase (COX) and
phospholipase (PLA2) in vitro tests indicated no part of the mechanism of
action involved in the activity of these compounds. In vascular reactivity tests
LQFM 020 promoted vasorelaxant effect presenting maximum effect (Emax) of
93% in aortic preparations with endothelium and maximum effect (Emax) of 91%
without endothelium . LQFM 039 also promoted vasorelaxant effect with
maximum effect (Emax) of 80% when tested in preparations with endothelium
and maximum effect (Emax) of 76% without endothelium, given this result, we
investigated the mechanism of action of these compounds. Our results showed
that LQFM 020 and LQFM 039 demonstrated the involvement of NO/cGMP
pathway and suggest also the involvement of sensitive Ca2+ channels in the
plasma membrane voltage. / A inflamação é um processo complexo que tem como objetivo proteger o
organismo, eliminando o agente lesivo, e promover a reparação tecidual sendo
caracterizada por: dor, calor, rubor, edema e como consequência da não
resolução do processo inflamatório pode ocorrer a perda da função. O controle
da dor e inflamação leva a busca por novos fármacos tanto analgésicos quanto
anti-inflamatórios com boa eficácia para auxiliar no tratamento destas doenças.
O objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos farmacológicos de dois
derivados pirazólicos. Nos testes de nocicepção aguda, LQFM 020 (9, 17,5 e
35 mg/kg) e LQFM 039 (17,5, 35 e 70 mg/kg), reduziram o número de
contorções abdominais de maneira dose dependente para 53, 48 e 35 e para
57, 52 e 42, respectivamente, enquanto que no grupo controle o número de
contorções foi de 88. No teste da formalina este efeito antinociceptivo foi
confirmado com a redução no tempo de reatividade à dor nas duas fases do
teste, o tempo no grupo controle foi de 78 e 72s na primeira fase e de 150 e
128s na segunda fase sendo que para LQFM 020 e LQFM 039 na primeira fase
a redução foi para 50 e 47s e na segunda fase para 97 e 74s respectivamente.
No teste de flexão de cauda os grupos de camundongos tratados com LQFM
020 e LQFM 039 não aumentaram a latência ao estímulo térmico
demonstrando que o efeito analgésico não envolve mecanismos centrais. Os
resultados dos testes de atividade enzimática de cicloxigenase (COX) e
fosfolipase (PLA2) in vitro sugere que a inibição destas enzimas não faz parte
do mecanismo de ação envolvido na atividade desses compostos. Nos testes
de reatividade vascular LQFM 020 promoveu efeito vasorrelaxante
apresentando efeito máximo (Emax) de 93% em preparações de aorta com
endotélio e efeito máximo (Emax) de 91% sem o endotélio. LQFM 039 também
promoveu efeito vasorrelaxante com efeito máximo (Emax) de 80% quando
testadas em preparações com endotélio e efeito máximo (Emax) de 76% sem o
endotélio, dado este resultado, foi investigado o mecanismo de ação desses
compostos. Os resultados mostraram que LQFM 020 e 039 LQFM demonstram
o envolvimento da via NO / GMPc e também sugerem o envolvimento de
canais de Ca2+ sensíveis à voltagem na membrana plasmática.
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Produção de filmes poliméricos a base de polissacarídeos de Anacardium occidentale L. / Polysaccharides polymeric film production of Anacardium occidentale L.Silva, Fábio Eduardo Fernandes 31 March 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In this study polysaccharides from gummous exudates of Anacardium occidentale (PEJU) were extracted and blended with polyvinyl alcohol (PVA) in order to produce films by casting procedure. The best film formulation was achieved using 6% (w/v) PVA and 6% (w/v) PEJU and 0.5 mL cm-2 ratio of solution to molds area. Under optimized conditions, the films presented 7,58 Kgf cm-2 tensile strength , 186% elongation and 49908,6 in the elastic module. After hydration the films presented good transparency, with values from 50 to 70% of light transmittance at visible spectrum. Maximum hydration occurred after immersion of the films for 20 minutes in different solutions. Hydration resulted in stable structural changes that allow classify these films as Stimule Responsive Materials (SRM). After hydration the films presented 2-fold higher area and swelling index from 1.6 to 2.2 when water and saline solution were respectively used in the process. Absence of cellular toxicity and absence of cell adhesion were observed when human fibroblasts (PDL) were grown in the presence of the PVA/PEJU films. Additionally, tissue response and wound healing were similar both in the presence or absence of the PVA/PEJU films. Immobilization of papain was maximized when reaction occurred at 5 ºC, pH 4.0 and for 60 minutes. After immobilization optimum pH was restricted to pH 8.0, but preserving activity at physiological range (pH 7.0). Immobilized papain showed high stability during storage, including when stored dried. The bioactivity achieved by immobilization of papain on PVA/PEJU films open possibilities of application of this biomaterial in several areas, mainly in the pharmaceutical. / Neste trabalho polissacarídeos extraídos de goma de Anacardium occidentale (PEJU) foram utilizados para produzir filmes em blendas com álcool polivinílico (PVA) por processo de casting. Os testes das formulações dos filmes revelaram que a melhor concentração dos componentes poliméricos era 6% (p/v) de PVA e 6% (p/v) de PEJU, numa razão ente volume da mistura e área dos moldes de 0,5 mL cm-2. Nestas condições, os filmes obtidos apresentaram 7,58 Kgf cm-2 de força tênsil, 186 % de elongação e módulo elástico no valor de 49908,6. Estes filmes, na forma hidratada, apresentaram níveis de transparência entre 50 e 70% analisadas pela transmitância de luz na região visível do espectro. A hidratação atingiu um platô após 20 minutos de imersão em diferentes soluções, e resultou em alterações estruturais significativas dos filmes, permitindo classificá-los como Materiais Sensíveis a Estímulos (Stimule Responsive Materials). Ao serem hidratados os filmes dobram a sua área e apresentam índices de intumescimento na ordem de 1,6, quando a hidratação é feita com água, até 2,2 quando feita com solução salina. As alterações dimensionais observadas no processo de hidratação/desidratação foram estáveis, sem comprometimento da rede polimérica. Testes de biocompatibilidade a nível celular mostraram ausência de citotoxicidade e ausência de adesão celular quando culturas de fibroblastos humanos (PDL) foram colocadas a crescer na presença dos filmes. De modo similar, os testes in vivo com ratos Wistar mostraram boa resposta tecidual e cicatrização similar ao controle na ausência dos filmes. A imobilização de papaína nos filmes de PVA/PEJU se deu com máximo rendimento quando conduzida em pH 4,0, a 5 ºC, com tempo de reação de 60 minutos. A imobilização reduziu a faixa ótima de pH de reação para 8,0, sem no entanto comprometer totalmente a atividade da enzima em pH fisiológico (7,0). A enzima imobilizada apresentou alta estabilidade no armazenamento, inclusive a sem. A bioatividade conferida aos filmes de PVA/PEJU pela imobilização de papaína confere a estes materiais possibilidades de aplicação em várias áreas, com especial importância para aplicações na área farmacêutica.
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Diversidade fúngica associada a abelhas sem ferrão (Melipona spp.) em Meliponários na cidade de Manaus e Iranduba, Amazonas, BrasilSouza, João Raimundo Silva de 27 November 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-11-27 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The stingless bees are responsible for even 90% of native tree pollination and variety of organism associated with them is big like as insects, mites, bacteria, yeasts and filamentous fungi. Studies have been related interaction between fungi and stingless bees and this study aimed to identify the diversity of filamentous fungi which are associated with stingless bees (Melipona spp.) in two meliponários from Manaus and Iranduba, both in Amazonas state. It has been used 48 bee collected in rainy and drought seasons on 2013. The bees were collected when they entered in the colony and transferred to sterile tubes and were carried to Microorganisms’ Genetics Laboratory from Federal University of Amazonas (LAGEM), where bees were transferred to salty solution tubes and after that they were plated in triplicate on BDA and SABOURAUD media and incubated at 28 ºC to their development and colonies isolation. After fungi structures visualized, the identification was realized from microcultivation culture development under cover slips and deposited under slides; they were stained by lactophenol blue. Were isolated 482 colonies allocated in 16 genus. Penicillium, Fusarium, Acremonium, Cladosporium, Paecilomyces and Verticilium were genus with high frequency exceeding 50% of isolates; following by Aspergillus, Moneliella, Alysidium, Scedosporium, Rhinocladiella, Tritirachium, Pestalotiopsis, Torula, Mucor and Rhizopus beyond a lot of Mycelia sterilia colony. Genetics analysis of isolates confirmed 16 genus and 12 distinct species. Therefore, in Brazil, with meliponicultivation development in last years, mainly in traditional communities from North and Northeast, is indispensable more and depth studies about existence of these fungi in the surface body of stingless bees, because this study showed the diversity of fungi which are associated with stingless bees is highest and most of this fungi wa not related yet in surface of these insects. / As abelhas sem ferrão são responsáveis por até 90% da polinização das árvores nativas, grande é a variedade de organismos associados a elas, como insetos, ácaros, bactérias, leveduras e fungos filamentosos. Estudos já realizados têm relatado a interação dos fungos com abelhas sem ferrão. Desta forma este trabalho teve como objetivo identificar a diversidade de fungos filamentosos associados a abelhas sem ferrão (Melipona spp.) em dois Meliponários de Manaus e Iranduba, Amazonas. Foram utilizadas 48 abelhas, coletadas no período chuvoso e de estiagem do ano de 2013. As abelhas foram coletadas ao adentrarem na colônia, transferidas para tubos estéreis, acondicionados sob refrigeração, levadas ao Laboratório de Genética de Microrganismos (LAGEM) da Universidade Federal do Amazonas, onde as abelhas mortas foram transferidas para tubos contendo solução salina e posteriormente plaqueadas em triplicata em meios BDA e SABOURAUD. Foram incubadas a 28 oC para desenvolvimento e isolamento das colônias. Após a visualização das estruturas fúngicas, foi realizada a identificação a partir do desenvolvimento das culturas em microcultivo sob lamínulas, depositadas sobre lâminas e coradas com azul de Lactofenol. Foram isoladas 482 colônias distribuídas em 16 gêneros. Penicillium, Fusarium, Acremonium, Cladosporium, Paecilomyces e Verticillium apresentando maior frequência, ultrapassando 50% das colônias, seguidos de Aspergillus, Moniliella, Alysidium, Scedosporium, Rhinocladiella, Tritirachium, Pestalotiopsis, Torula, Mucor, e Rhizopus, além de várias Mycelia sterilia. Análise genética dos isolados confirmaram 16 gêneros e 12 espécies distintas. Assim, com o desenvolvimento da meliponicultura no Brasil nos últimos anos, principalmente em comunidades tradicionais do Norte e Nordeste, torna-se necessário o estudo aprofundado sobre a existência desses fungos na superfície corpórea de abelhas sem ferrão, onde esse estudo mostrou que a diversidade fúngica associada a esses organismos é elevado, e alguns desses fungos aqui descritos ainda não haviam sido relatados na superfície corpórea de abelhas sem ferrão.
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Sistema distílico e biologia reprodutiva de cinco espécies de Psychotria L. (Rubiaceae) em dois fragmentos do sudeste Goiano / Distylous system and reproductive biology of five species of Psychotria L. (Rubiaceae) in two fragments southeast GoiásSá, Túlio Freitas Filgueira de 18 September 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-09-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Distyly is a reproductive strategy to promote cross-pollination
and difficult self-pollination, characterized by the presence of two floral morphs, the pin and the
thrum morph. The study aimed to describe the phenological behavior and investigate aspects
related to the distylous system of five Psychotria species, such as the pollination biology, the
floral morphology, the isoplety and the incompatibility system of the species. The studies were
performed in the "Parque Municipal da Mata do Setor Santa Cruz" and "in the Pasto do
Pedrinho", in the municipality of Catalão, Goiás. The five species of the genus Psychotria were:
P. hoffmannseggiana, P. capitata, P. prunifolia, P. deflexa. and P. trichophoroides. The flowers
were collected and fixed in 70% ethanol for the morphometric analysis. The phenology was held
for one year for each species. The incompatibility system was tested using hand pollination. The
flower visitors were collected, labeled and identified. The results indicate that P.
hoffmannseggiana, P. capitata, P. deflexa and P. trichophoroides present distyly, only P.
prunifolia was considered as pin-monomorphic . In the reproductive system, P. prunifolia was
considered as self-compatible. Although, P. hoffmannseggiana, P. capitata, P. deflexa and P.
trichophoroides presented a self-incompatibility system. Regarding to the morphs ratio , all the
distylous populations were isopletic. The floral visitors of the five species confirm the
entomophilous pollination syndrome. In the phenology, the flower buds of the populations began
to emerge in September, one month before the beginning of the flowering, with the months of
highest incidence parallel to the emission of the flowers (October to December). The analysis of
the relationship between the corolla and the height of the intramorph reproductive verticils,
reveals that the corolla considerably interfered in the length of the floral organs. In the
reciprocity analysis, the influence of the corolla on the reciprocal herkogamy, had a null or
parcial effect in the reciprocity. The present study has been carried out with only one population
per species, and it would not be possible to assign distyly with the self-incompatibility of P.
capitata, P. deflexa, P. trichophoroides and P. hoffmannseggiana, or even with the
monomorphism and self-compatibility of P. prunifolia, as a general condition for these species.
However, the results of the present study and additional information from other populations of
these same species, lead us to believe that this scenario may repeat in other regions of Brazil. / A distilia é uma estratégia reprodutiva para promover a
polinização cruzada e dificultar a autofecundação, sendo caracterizada por apresentar dois
morfos, o brevistilo e o longistilo. O estudo teve como objetivo descrever o comportamento
fenológico e investigar os aspectos ligados ao sistema distílico de cinco espécies de Psychotria,
como biologia da polinização, morfologia floral, isopletia e sistema de incompatibilidade. Os
estudos foram realizadas no “Parque Municipal da Mata do Setor Santa Cruz” e no "Pasto do
Pedrinho", áreas localizadas no município de Catalão, Goiás. As cinco espécies do gênero
Psychotria foram: P. hoffmannseggiana, P. capitata, P. prunifolia, P. deflexa. e P.
trichophoroides. As flores foram coletadas e armazenadas no álcool 70% para análise de
morfometria. A fenologia foi realizada durante um ano para cada espécie. O sistema de
incompatibilidade foi testado usando polinização manual. Os visitantes florais foram coletados,
etiquetados e identificados. Os resultados apontam que P. hoffmannseggiana, P. capitata, P.
deflexa e P. trichophoroides apresentam distilia, apenas P. prunifolia foi considerada
monomórfica longistila. No sistema reprodutivo, P. prunifolia foi considerada autocompatível,
P. hoffmannseggiana, P. capitata, P. deflexa e P. trichophoroides apresentou o sistema de
autoincompatibilidade. Quanto à razão dos morfos, todas as populações distílicas foram
isopléticas. Os visitantes florais das cinco espécies confirmam a síndrome de entomofilia. Na
fenologia os botões florais das populações de Psychotria começaram a surgir em setembro,
um mês antes do início da floração, com os meses de maior incidência paralelos ao da
emissão de flores (entre outubro a dezembro). A análise da relação da corola com a altura dos
verticilos reprodutivos intramorfo, revela que a corola interferiu, consideravelmente no
comprimento dos órgãos florais. Na análise de reciprocidade, a influência da corola sobre a
hercogamia recíproca, teve um efeito nulo ou parcial na reciprocidade. Pelo presente trabalho ter
sido realizado somente com uma população por espécie, não seria possível atribuir a distilia com
autoincompatilibilidade de P. capitata, P. deflexa, P. trichophoroides e P. hoffmannseggiana, ou
até mesmo o monomorfismo com autocompatibilidade de P. prunifolia, como uma condição
geral para essas espécies. Porém, os dados do presente trabalho e informações adicionais de
outras populações dessas mesmas espécies, levam a acreditar que esse cenário se repita em
outras regiões do Brasil.
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Prospecção e caracterização de peptaibols produzidos porlinhagem de Trichodermaasperellum / Prospection and characterization of peptaibols produced by a Trichoderma asperellum strainBrito, João Paulo Cabral de 08 August 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-08-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Trichoderma genus corresponds to free-living filamentous fungi, including species able to act as biological control agents against pathogenic fungi. It is believed that this ability is due to the synergy of several mechanisms, including a wide variety of secondary metabolites produced by these organisms. Among them, there is the production of peptaibols, an antibiotic peptide group characterized by the presence of non-proteinogenic amino acids such as α-aminoisobutyrate (Aib), presence of N-terminal modifications and amino alcohols in the C-terminal region. These peptaibols have amphipathic nature, allowing the formation of ion channels in lipid membranes, which are believed to be related to its antimicrobial activity. This study aimed to draw a profile of production and identify of secreted peptaibols from Trichoderma asperellum TR356 strain. The fungi was grown in TLE with 0.3% glucose medium for 5 days, 120 rpm in the dark. Liquid medium filtrate was used as metabolites source. These extracts were subjected to high performance liquid chromatography (HPLC) and subsequent analysis by matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry (MALDI-TOF). The results indicate the production of two classes of peptaibols for this T. asperellum strain. Primary structure of two Asperelines (A and E) and five Trichotoxins (T5D2, T5E, T5F, and T5G 1717A) has been elucidated. Most of these peptaibols had been previously described in T. viride and T. asperellum marine strains. This is the first report of some of these compounds being produced by a T. asperellumstrain from soil. Future analysis will be necessary to elucidate the three-dimensional structures and their activity against pathogens. / O gênero Trichoderma corresponde a fungos filamentosos, de vida livre, que inclui espécies capazes de agir como agentes de controle biológicoeficazes contra fungos fitopatogênicos. Acredita-se que esta capacidade é devida a sinergia de vários mecanismos, incluindo a ampla variedade de metabólitos secundários produzidos por estes organismos. Dentre eles, há a produção de peptídeos antibióticos conhecidos como “peptaibols”, compostos caracterizados pela presença de aminoácidos não proteinogênicos como α-aminoisobutirato (Aib), e por possuírem modificações N-terminais e presença de amino álcoois na região C-terminal. Estes peptaibols apresentam natureza anfipática, permitindo a formação de canais iônicos nas membranas lipídicas, o que se acredita estar relacionado com sua atividade antimicrobiana. Este trabalhoteve como objetivo traçar um perfil de produção e identificar peptaibols secretados pela linhagem de Trichoderma asperellum TR356. O isolado foi crescido em meio TLE contendo 0,3% de glicose, por 5 dias, 120 rpm no escuro. O sobrenadante filtrado foi utilizado como fonte para extração de metabólitos. Estes extratos foram submetidos a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e posterior análise pela técnica de espectrometria de massas por ionização e dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-TOF). Os resultados indicam a produção de duas classes de peptaibols por esta linhagem de T. asperellum. Foram elucidadas as estruturas primárias de duas Asperelinas (A e E), e de cinco Trichotoxinas (T5D2, T5E, T5F, T5G e 1717A). A maior parte destes peptaibols havia sido descrito anteriormente em linhagens de T. viride e linhagens de T. asperellum marinhas. Este é o primeiro relato de alguns destes compostos sendo produzidos por uma linhagem de T. asperellum proveniente do solo. Futuras análises serão necessárias para a elucidação de suas estruturas tridimensionais e atividade destes compostos contra fitopatógenos.
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Prospecção de enzimas de solo de Cerrado sob plantio de cana-de-açúcar / Study of enzymes from cerrado soil under sugarcane cultivationPurcena, Luiza Luanna Amorim 12 March 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-03-12 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / The increasing land area cultivated with sugarcane in Goiás reflects the economic
importance of this monoculture not only to Goiás, but also to Brazil. However, the native
areas of Cerrado converted to monoculture planting must be monitored since the effects
in the biochemical, biological and physicochemical characteristics of soil have already
been reported. In this study, the effect of organic (OM) and conventional management
(CM) of sugarcane on hidrolases and oxidative enzymes and the results were compared
to those for native soil of Cerrado (NS). It was quantified the activity of acid and alkaline
phosphomonesterases, β-glucosidases, peroxidases and phenol oxidases. It was also
determined the physicochemical parameters such as granulometry (percentage of clay,
silt and sand) and content of soil organic matter (SOM), pH, Inorganic phosphorus (P
+
),
calcium (Ca
+2
), Potassium (K
+
). Magnesium (Mg
+2
), Aluminum (Al
+3
), potential acidity
total (H+Al) saturation in Aluminum (M%), saturation of alkalis (V%), cation
exchangeable capacity (CEC) and the relationship between Ca/CEC, K/CEC and
Mg/CEC content as well as the relationships of the cations Ca/K, Ca/Mg, Mg/K,. The
optimum pH was assayed for phosphomonoesterases and β-glucosidases. Principal
component analyses was performed to identify which factors evaluated would permit to
differentiate NS, OM and CM. The results showed the presence of both acid and alkaline
phosphomonoesterases in NS, OM and CM; nevertheless, acid phosphomonoesterases
were predominant. The optimum pH for acid phosphomonesterase was pH 5.0 and the
factors that most interfered on the enzyme activity were pH and granulometry. Sugarcane
management did not affect alkaline phosphomonoesterase, in the contrary, acid
phosphomonestarase activity was reduced around 50% in the cultivated soils. For β-glucosidase it was observed optimum pH for OM and CM at pH 5.5 and for NS, the
enzyme presented higher activity in the pH range from 6.0 to 7.0. β-glucosidase have its
activity reduced only in CM, OM and NS presented the same pH profile and similar
enzyme activities. pH and granulometry were also the main factors correlated to β-glucosidase activity. Finally, for oxidative enzymes, it was also observed a reduction of
enzyme activity in OM and CM in about 57% for peroxidase and 36% for phenol oxidase
and pH was the crucial parameter affecting on these enzyme activities. / O crescente aumento na área destina ao cultivo de cana-de-açúcar no Estado de Goiás
reflete a importância econômica dessa monocultura na economia não só do Estado, mas
também para o Brasil. No entanto, a conversão de áreas nativas em áreas destinadas à
agricultura e o plantio de monoculturas devem ser monitorados uma vez que efeitos em
características bioquímicas, biológicas e físico-químicas do solo em áreas cultivados já
foram relatados. Neste trabalho foi estudado o efeito do manejo orgânico (MO) e
convencional (MC) em enzimas da classe das hidrolases e oxidorredutases em solos
cultivados com cana-de-açúcar e os resultados foram comparados com os obtidos para o
solo nativo do Cerrado. Foram quantificas a atividade de fosfomonoesterases ácidas e
alcalinas, β-glucosidases, peroxidases e polifenoloxidases. Foram ainda avaliados
parâmetros físico-químicos tais como textura, pH, teor de matéria orgânica, fósforo (P
+
),
cálcio (Ca
2+
), potássio (K
+
), magnésio (Mg
2+
), alumínio (Al
3+
), acidez total (H+Al),
saturação de alumínio (m%), saturação de bases (V%), capacidade de troca catiônica
(CTC) e as relações entre os teores de K/CTC, Ca/CTC, Mg/CTC, bem como as relações
entre os teores dos seguintes cátions K/Mg, Ca/Mg, Ca/K. Foi testado ainda, o pH ótimo
de fosfomonoesterases e de β-glucosidases e a análise de componente principal (APC) foi
realizada para identificar quais variáveis estudas permitem diferenciar os solos estudados.
Foi observado que nos solos testados há tanto fosfomonoesterases ácidas quanto alcalinas,
com predominância de sua forma ácida. O pH ótimo da fosfomonoesterase ácida foi o pH
5.0 e os fatores que mais interferiram na atividade enzimática foi o pH e a textura. O
manejo não alterou a atividade fosfomonoesterase alcalina. No entanto, foi observada
uma redução de cerca de 50% nos solos cultivados quando comparados com o solo nativo.
No caso da β-glucosidase foi observado que o pH ótimo da enzima foi 5.5 no solo sob
MC e o solo sob MO e o solo nativo apresentou atividade enzimática ótima na faixa de
pH entre 6.0 e 7.0. Foi ainda observado que para esta enzima, apenas o MC reduziu a
atividade enzimática. pH e textura também foram os principais parâmetros físicoquímicos que afetaram a atividade enzimática. Por fim, para peroxidase e
polifenoloxidase também foi observada uma redução na atividade enzimática, tanto no
solo sob MO quanto no MC. A redução na atividade da peroxidase foi cerca 57% e na
atividade da polifenoloxidase de cerca 36% e o pH foi a característica que mais
influenciou na atividade dessas enzimas. Dessa forma, observou-se que o manejo, em
geral, afeta a atividade de enzimas presentes no solo e que o pH e textura são as principais
características físico-químicas que interferem na atividade dessas enzimas.
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Estudo sobre o comportamento de apetência de diferentes estágios do carrapato Amblyomma cajennense (Acari: Ixoidae) / Study on the behavior of palatability of different stages of the tick Amblyomma cajennense (Acari: Ixoidae)ASSAL, Flávio Ezzeddine El 25 February 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-02-25 / This paper evaluates the behavior of appetite expressed in different stages of the ticks Amblyomma cajennense testing the hypothesis that nymphs and adults of this species have
strategy of game play while the larvae ambush. To this end, through observations, we sought to describe and propose a classification of appetite expressed by these different stages comparing strategies appetite displayed by different instars of the species with the express adult Rhipicephalus sanguineus on the same environmental conditions. Experimentally, the expressions of these behaviors
face of different stimuli (CO2, equine odor, shading, radiant heat, and the 'air control') were evaluated. For this, we collected ticks of the species in horses and dogs naturally infested Center for Zoonosis Control in Goiânia-GO, which were created in rabbits and multiplied in the vivarium of the Center for Veterinary Parasitology, Federal University of Goiás (CPV / UFG ). The ratings of the behaviors that occurred in a room of the Centre -CPV/UFG were held in a glass box with removable cover, having a dozen plastic rods for the expression of search strategies. This glass chamber showed temperature conditions (25 º C + / -3 ° C), relative humidity (80% <RH <98%) and light (12 hours light / 12 hours of darkness) known and standard in all tests. In this environment were the observation sessions, each 40 minutes long, starting when after a period of 29 hours of environment of the ticks in the study. At each session, we evaluated a group of ten ticks (the same age and species) by the methodology - scan 'scan sampling' - every minute, recording the positions of the individuals on appropriate sheet. For each stimulus were evaluated ten groups of ten individuals. For registration were considered four possible attitudes: complete inactivity (first pair of legs retracted), and only motions of searching raising the first pair of legs; stopped or partial inactivity (first
pair of legs exposed despite the immobility of the tick) and displacement by the glass box (walking). Possible locations were the twelve rods, base, walls and lid of the box. Was used factorial ANOVA to evaluation of results which, together with other elements derived from the observations, allowed the conclusion that under the conditions applied, larvae A.cajennense conduct ambush while nymphs and adults of this species are hunters of their potential hosts / O presente trabalho visou estudar o comportamento de apetência expresso pelos diferentes estágios de carrapatos da espécie Amblyomma cajennense testando a hipótese de que as ninfas e os adultos desta espécie apresentam
estratégia de caça enquanto as larvas desempenham emboscada. Para tal, através de observações, procurou-se descrever e propor uma classificação da apetência expressa por estes diferentes estágios comparando as estratégias de
apetência apresentadas pelos diferentes instares da referida espécie com a expressa por adultos da espécie Rhipicephalus sanguineus nas mesmas condições ambientais. Experimentalmente, as expressões destes comportamentos
diante de diferentes estímulos (CO2, odor de eqüino, sombreamento, calor irradiado, e no ar-controle ) foram avaliadas. Para isto, foram coletados carrapatos das referidas espécies em eqüinos e cães naturalmente infestados no Centro de Controle de Zoonoses de Goiânia-GO, os quais foram criados e multiplicados em coelhos no biotério do Centro de Parasitologia Veterinária da Universidade Federal de Goiás (CPV/UFG). As avaliações dos comportamentos, que ocorreram numa sala climatizada do referido Centro CPV/UFG, foram realizadas numa caixa de vidro com tampa removível, dotada de doze hastes plásticas para a expressão de estratégias de busca. Esta câmara de vidro apresentava condições de temperatura (25ºC +/-3ºC), umidade relativa do ar (80%<UR<98%) e luminosidade (12 horas de luz / 12 horas de escuro) conhecidas e padronizadas em todos os ensaios. Neste ambiente ocorreram as sessões de observação, cada uma com 40 minutos de duração, iniciadas sempre após um período de 29 horas de ambientação dos carrapatos em estudo. Em cada sessão avaliou-se um grupo de dez carrapatos (de mesma idade e espécie) pela metodologia de varredura - scan sampling - a cada minuto, registrando-se as atitudes e posições dos indivíduos numa planilha apropriada. Para cada estímulo foram avaliados dez grupos de dez
indivíduos. Para efeito de registro foram consideradas quatro atitudes possíveis: inatividade completa (primeiro par de patas recolhido); apenas movimentos de busca levantando o primeiro par de patas; parado ou inatividade parcial (primeiro
par de patas exposto apesar da imobilidade do carrapato); e deslocamento pela caixa de vidro (andando). As possíveis posições foram as doze hastes, a base, as paredes e a tampa da caixa. Foi utilizada a Análise de Variância fatorial para a
avaliação dos resultados os quais, conjuntamente com outros elementos oriundos das observações, permitiram a conclusão de que, sob as condições aplicadas, larvas de A.cajennense realizam emboscada enquanto ninfas e adultos desta
espécie são caçadores de seus potenciais hospedeiros
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Estudo de associação ampla do genoma bovino para lactação ajustada em 305 dias em girolando / Genome Wide Association Study of bovine lactation adjusted for 305 days in girolandoCruz, Alex Silva da 19 October 2015 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-06-08T20:29:50Z
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Previous issue date: 2015-10-19 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Genomic selection in a dairy cattle breeding is a new strategy in national livestock.
Genome wide association study (GWAS) is known as a strategy that involve the use
of molecular markers panels distributed throughout the genome which are selected
for the identification of chromosomal regions that are important for the interest traits.
The aim of this study was apply the GWAS strategy for 305-day milk yield in
Girolando cows. We did the genotype from 404 Girolando and after quality control
analysis remained 337 individuals and 45.622 markers. The GWAS analysis resulted
in 52 SNPs associated to 305-day milk yield. Of these, 23 SNPs were linked to
Known genes and only 3 SNPs were linked to NUB1, SLC24A2 and DGAT1 genes
that already were associated with cattle lactation. The other SNPs have no
relationships described in the cattle lactation literature. In addition, the milk
production QTL analysis resulted in 52 SNPs and 14 genes linked or close to 1Mb of
the SNP marker. The ARS-BFGL-NGS-414 SNP on BTA19 at 47.9Mbp is located
near to GH1 gene. This gene is commonly accepted as causal gene for Quantitative
Character Locus of milk production mainly affecting the yield in liters and solid milk
components. Thus, our data suggest that NUB1 and SLC24A2 genes could be
considered as candidate genes to understand the milk production in Girolando breed.
Like this DGAT1 and GH1 genes are valuable predictive markers to be added to
genomic selection of dairy cattle in breeding program. / A seleção genômica, aplicada em bovino em associação à produção de leite é uma
inovação estratégica na pecuária nacional, e que poderá se tornar uma ferramenta
prática importante para a atividade. Estudos de Associação Ampla do Genoma
(GWAs) caracteriza-se como uma estratégia que envolve o uso de painéis de
marcadores moleculares distribuídos por todo o genoma, selecionados para a
identificação de regiões dos cromossomos associadas com um fenótipo de
interesse. O objetivo deste estudo foi aplicar a estratégia de GWAS para a
característica de lactação total ajustada em 305 dias de vacas Girolando.
Inicialmente, foram genotipados 404 vacas Girolando que após procedimento de
controle de qualidade resultou em um total de 337 indivíduos e 45.622 marcador. O
GWAS resultou em 52 SNPs associados a lactação ajustada em 305 dias. Destes,
23 SNPs apresentaram-se ligados a genes conhecidos e somente 3 SNPs estão
ligados aos genes NUB1, SLC24A2 e DGAT1, descritos relacionados a lactação em
bovinos. Os demais SNPs não apresentam relações descrita na literatura a lactação
em bovinos. Para o QTL de produção de leite (MY), dos 52 SNPs, foram
identificados 14 genes ligados ou próximos a 1Mb de distância do SNP marcador.
Em particular, o SNP ARS-BFGL-NGS-414 associado ao QTL de lactação bovina,
constituído de aproximadamente 47,9 Mbp localizado no BTA19 está localizado
muito próximo do gene GH1 (Hormônio do Crescimento 1), comumente aceito como
gene causal para o Lócus de Caráter Quantitativo (QTL) de produção de leite,
afetando principalmente o rendimento em litros e componentes sólidos do leite.
Dessa forma, nossos dados sugerem que os genes NUB1, e SLC24A2 poderiam ser
considerados como genes candidatos para ajudar a explicar a produção de leite em
animais da raça Girolando, assim como os genes DGAT1 e GH1, são considerados
como valiosos marcadores preditivos a serem adicionados à seleção genômica do
gado leiteiro em programas de melhoramento.
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