Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-19T09:04:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T22:12:46Z : No. of bitstreams: 1 183508.pdf: 5773999 bytes, checksum: f865d19bfab88fc2da0c933006380b92 (MD5) / A doença de Parkinson (DP) é um distúrbio neurodegenativo caracterizada pelo aparecimento de alterações motoras e comprometimento das funções cognitivas. A base neuroquímica da DP, está associada à degeneração de neurônios dopaminérgicos (DAérgicos) nigroestriatais e conseqüente redução dos níveis estriatais de dopamina (DA). Fenômenos semelhantes podem ser observados em modelos animais da DP, utilizando uma neurotoxina seletiva para os neurônios DAérgicos - 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridina (MPTP). O presente estudo teve como objetivos avaliar os efeitos comportamentais e neuroquímicos da administração de MPTP na substância negra compacta (SNc) de ratos, avaliados em um teste de aprendizagem e memória - esquiva ativa de duas vias . Além disso, verificar se o tratamento com de L-DOPA/ benserazida, ou cafeína reverte o prejuízo cognitivo observado neste animais. Os resultados demonstraram que a lesão induzida pelo MPTP reduziu os níveis estriatais de DA e seus metabólitos e prejudicou os processos de aquisição e retenção, necessários para execução do teste de esquiva ativa de duas vias. O tratamento com L-DOPA/benserazida, promoveu a reposição dos níveis estriatais de DA, mas não reverteu o déficit cognitivo dos ratos lesados com MPTP e ainda prejudicou o desempenho dos animais controles neste teste. Por outro lado, a cafeína em doses baixas melhorou os escores de aprendizagem e memória envolvidos neste modelo. Estes dados demostram que este procedimento experimental parece ser efetivo como um modelo animal para o estudo de déficits cognitivos observados nos estágios iniciais da DP. Ressaltam ainda a importância do sistema DAérgico nigroestriatal e sua interação com o sistema adenosinérgico, em processos de aprendizagem e memória, afetados em pacientes parkinsonianos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T23:17:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 296786.pdf: 1619266 bytes, checksum: 4c4959b572f948a62f2ff59a3e260ce3 (MD5) / O Brasil é atualmente o maior produtor mundial de café, representando 30% do mercado, com um volume equivalente a soma dos outros seis países de maior produção. A grande produção e também o consumo de café levam a geração de uma enorme quantidade de resíduos. Devido à importância dos diferentes compostos presentes nos resíduos de café, a obtenção de extratos a partir dessas fontes seria uma alternativa de agregação de valor de valor a um subproduto agroindustrial tão abundante. Assim, o objetivo deste estudo foi a obtenção de extratos de casca e de borra de café, utilizando tecnologia supercrítica e métodos de extração a baixa pressão, a fim de avaliar o potencial antioxidante e a composição dos extratos, e ainda fazer a determinação dos parâmetros cinéticos do processo de ESC. Os extratos obtidos pelos métodos a baixa pressão (soxhlet e ultrassom) mostraram maiores rendimentos quando comparados à extração supercrítica. O potencial antioxidante foi avaliado pelos métodos DPPH, ABTS e Folin-Ciocalteau, sendo que os melhores potenciais antioxidantes foram verificados para os extratos de casca de café obtidos à baixa pressão. A quantificação e identificação dos extratos foram avaliadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Os principais compostos identificados foram cafeína e ácido clorogênico.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-24T05:56:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 251125.pdf: 818028 bytes, checksum: da250f7004be5c38103ebbfd5873e03a (MD5) / O transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH) é um dos transtornos psiquiátricos mais comuns em crianças e adolescentes, afetando cerca de 2 a 12% das crianças em idade escolar. A linhagem de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) tem sido utilizada como principal modelo animal para o estudo deste transtorno, já que estes animais apresentam características comportamentais (hiperatividade, impulsividade e prejuízo atencional) e neuroquímicas semelhantes às observadas neste transtorno em humanos. Trabalhos recentes demonstraram que a administração de cafeína, um antagonista adenosinérgico não seletivo, reverteu os prejuízos apresentados pelos ratos SHR nas tarefas de aprendizado espacial e de memória social. Sendo assim o objetivo do presente estudo foi caracterizar o prejuízo apresentado por ratos SHR machos e fêmeas na tarefa de reconhecimento de objetos quando comparados aos ratos Wistar (WIS). Investigamos ainda o efeito agudo do metilfenidato, cafeína e de antagonistas seletivos de receptores adenosinérgicos na idade adulta e também o efeito da administração repetida de metilfenidato e cafeína na idade adulta ou durante a adolescência. Os resultados demonstraram que os ratos WIS discriminam todos os objetos apresentados, enquanto que os ratos SHR discriminam apenas os objetos com grandes diferenças estruturais. Foi também observado que o tratamento intraperitoneal com metilfenidato (2 mg/kg), cafeína (1-10 mg/kg), antagonistas adenosinérgicos seletivos para receptores A1 - DPCPX (5 mg/kg), antagonistas adenosinérgicos seletivos para receptores A2A - ZM241385 (1 mg/kg) e também a associação de doses não efetivas de DPCPX (3 mg/kg) + ZM241385 (0,5 mg/kg) na idade adulta reverteram o prejuízo apresentado pelos ratos SHR na tarefa de reconhecimentos de objetos, sem alterar a atividade locomotora ou a hipertensão apresentada por esses animais. Além disso, o tratamento repetido de metilfenidato (2 mg/kg) ou cafeína (3 mg/kg) durante a idade adulta ou durante a adolescência reverteram de forma persistente o prejuízo apresentado nesta tarefa pelos ratos SHR, no entanto a administração de ambas as drogas durante a adolescência causou prejuízo na capacidade discriminatória dos ratos WIS quando testados na idade adulta. Surpreendentemente não ocorreram diferenças entre as linhagens, na expressão de receptores adenosinérgicos do subtipo A1 e A2A avaliada através da técnica de imuno-histoquímica. Estes resultados sugerem que o desempenho dos ratos SHR na tarefa de reconhecimento de objetos parece estar relacionado com prejuízos no aprendizado discriminatório, aos déficits atencionais e não com a capacidade de armazenar informações. O presente estudo demonstra também que os antagonistas seletivos e não seletivos de receptores adenosinérgicos revertem o prejuízo apresentado pelos ratos SHR, sendo que os efeitos da administração repetida destas drogas podem persistir mesmo após o termino do tratamento, sugerindo assim o potencial destas drogas para o tratamento dos prejuízos cognitivos associados ao TDAH. Attention deficit hyperactivity disorder (ADHD) is one of the most common childhood psychiatric disorders, affecting between 2 and 12% of primary-school children. The spontaneously hypertensive rat (SHR) is considered a genetic model for the study of this disorder since it displays behavioral and neurochemical characteristics of ADHD. Recent studies demonstrated that administration of the non selective adenosine receptor antagonist caffeine improved memory impairments in SHR rats. Therefore the objective of this study was to investigate whether adult male and female SHR exhibit altered short-term object recognition abilities compared to Wistar rats (WIS). The acute effects of methylphenidate, caffeine, or selective adenosine receptor antagonists in the performance of adults WIS and SHR rats in the object recognition task and the effects of repeated administration of methylphenidate and caffeine in adult age and adolescence were also evaluated. The results show that WIS rats displayed discrimination ability for all the objects employed while, SHR only discriminated #distinct# pairs of objects, they were not able to discriminate pairs of objects with subtle structural differences. In addition, the acute intraperitoneal (i.p.) injection of methylphenidate (2 mg/kg), caffeine (1#10 mg/kg), the selective adenosine A1 receptor antagonist DPCPX (5 mg/kg), the selective adenosine A2A receptor antagonist ZM241385 (1.0 mg/kg) or association with low doses with DPCPX (3 m/kg) and ZM242385 (0,5 mg/kg), reversed the impairment of object recognition in SHR, without altering the locomotion or hypertensive state. The repeated treatment with methylphenidate (2 mg/kg) and caffeine (3 mg/kg) in the adult age or in adolescence improved the object recognition deficits in the SHR rats. However, in WIS rats these treatments during adolescence impaired the recognition task. Interestingly, no major differences in the immunoreactivity of adenosine A1 and A2A receptors were observed in brain areas of WIS and SHR rats. These findings suggest that the previously described inability of SHR in cognitive paradigm may not be associated with their capacity to store information for short-term periods but rather may reflect discriminative learning impairments associated with attentional deficits. The present work also shows that selective and non selective adenosine receptors antagonists improved the cognitive impairment in SHR rats. Moreover, the effects of repeated administration of these drugs were persistent after the end of treatment, suggesting the potential of adenosinergic drugs for the treatment of cognitive impairment associated to ADHD.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-01Bitstream added on 2014-06-13T19:20:16Z : No. of bitstreams: 1 ferraz_gc_dr_jabo.pdf: 350223 bytes, checksum: b891797f003f4d37b95356d6323dbe68 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Metodos costumeiramente empregados no estudo da fisiologia do exercicio podem ser utilizados para avaliar os efeitos de substancias licitas (ergogenicos) ou ilicitas (doping) sobre a capacidade atletica. Estudaram-se algumas respostas endocrinas, metabolicas, cardiacas e hematologicas de equinos, treinados, da raca Puro Sangue Arabe (PSA) submetidos ao exercicio intenso e a administracao isolada de cafeina (CAF), aminofilina (AM) ou clembuterol (CL), 30 minutos antes do esforco fisico, nas doses de 5 mg.kg-1, 10 mg.kg-1 e 0,8 Êg.kg-1 de peso corporeo, respectivamente. Para avaliacao dos efeitos do exercicio e farmacos empregou-se exercicios testes em esteira rolante, utilizando-se inclinacao de 10% com incrementos de velocidade, sendo realizadas colheitas de sangue 15 segundos antes do termino de cada etapa. Nas amostras de sangue foram quantificados hematocrito, contagem de hemacias, hemoglobina e leucocitos totais, alem da glicemia, lactacidemia, insulinemia, cortisolemia. Tambem avaliou-se a frequencia cardiaca. Para todas analises estatisticas realizadas, estabeleceu-se como nivel de significancia p.0,05. Os resultados mostram que a CAF elevou significativamente a lactacidemia, glicemia e o hematocrito, mas reduziu a insulinemia e a cortisolemia. Para AM houve elevacao significativa da glicemia no inicio do exercicio e reducao nas etapas de exercicio maximo, sendo tambem observado aumento da lactacidemia. O CL provocou elevacao significativa da frequencia cardiaca e insulinemia. A cafeina prejudicou a capacidade aerobica, mas aumentou metabolismo anaerobico. Ja a aminofilina parece interferir na homeostase da glicemia durante o exercicio intenso, mas melhorou a via glicolitica anaerobica. Finalmente, o clembuterol nao melhorou a capacidade aerobica e, marcadamente, prejudicou a resposta cardiaca, bem como aumentou a insulinemia. / Currently, equine exercise physiology is in a considerable development in Brazil. The use of scientific methods for the evaluation of the exercise and training protocols is fundamental for the maximization of equine performance. It also can be applied to evaluate the effects of legal (ergogenics) and/or illegal substances during competitions on athletic horses. Some metabolic, endocrine, cardiac and hematologic responses of trained Arab horses submitted to intense exercise and to the administration of caffeine, aminophylline and clenbuterol, a single dose given at 30 minutes before the effort. Doses were, respectively, 5 mg.kg-1, 10 mg.kg-1 and 0,8 Êg.kg-1. A treadmill was employed for the evaluation of exercise and drug effects, with 10% slope and speed increments. Blood samples were withdrawn 15 seconds before the end of each exercise bout. Hematocrit, erythrocytes and leucocytes count, hemoglobin, glucose, lactate, insulin and cortisol concentration, were determined. Heart rate was also monitored at the same time points. A minimum criterion of P.0,05 was adopted for statistical significance. Our results revealed significant variations in all physiologic parameters studied. Caffeine impaired the aerobic capacity but improved the aerobic potency. Aminophylline interfered in glycemic curve during intense exercise, but improved anaerobic performance. Finally, clenbuterol did not improve the parameters association with aerobic metabolism, but, markedly, impaired cardiac response, and increased insulin concentration compromising glycemic control during intense exercise.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-08-07Bitstream added on 2014-06-13T20:31:11Z : No. of bitstreams: 1 longo_dp_me_arafcf.pdf: 1190234 bytes, checksum: b0c008283bedbe34e959757962ddfb37 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A mistura de óleo, água e tensoativo é capaz de formar estruturas e sistemas variados, dependendo das características e da proporção dos componentes utilizados. Sistemas microestruturados, como cristais líquidos e microemulsões, são utilizados para encapsular fármacos e substâncias ativas em produtos farmacêuticos e cosméticos. O objetivo desse trabalho foi desenvolver sistemas microestruturados para a incorporação da cafeína com finalidade de uso tópico para otimizar o tratamento da hidrolipodistrofia ginóide. A mistura direta de PPG-5-Ceteth-20 (tensoativo), adipato de dibutila (fase oleosa) e água em diferentes proporções possibilitou a obtenção de formulações com formas de estruturação variadas, como microemulsão, emulsão e mesofases líquido-cristalinas. As formulações obtidas foram caracterizadas por meio de microscopia de luz polarizada, determinação de índice de refração, densidade relativa e condutividade e comportamento reológico. Estudos de solubilidade mostraram que os sistemas foram capazes de solubilizar cerca de 1,5% de cafeína. Estudos de liberação in vitro, que utilizaram modelo de célula de difusão em sistema estático do tipo Franz adaptada ao equipamento de dissolução indicaram que as formulações apresentaram características de sistemas reservatórios de liberação prolongada. Para o estudo de permeação in vivo foram utilizados suínos machos, Landrace x Large White, submetidos ao tratamento com formulação acrescida ou não de cafeína. Fragmentos de pele e hipoderme foram retirados para a análise histológica. A formulação com características de cristal líquido de fase hexagonal foi eficaz em aumentar a permeação cutânea à cafeína, facilitando assim sua ação. A cafeína aplicada desta forma fez com que houvesse uma redução significativa da espessura da hipoderme. O sistema atua como promotor de permeação e garante a eficácia da cafeína no tratamento da celulite. / Oil, water and surfactant mixture may form a variety of structures and phases accordingly to the characteristics and the ratio of the used components. Microcompartmented systems as liquid crystals and microemulsions are used to encapsulated drugs and active substances in pharmaceutical and cosmetic products. The objective of this research was the development of microcompartmented systems for incorporation of caffeine with the purpose of topical use on treatment of the gynoid lipodystrophy. The direct mixture of PPG-5-Ceteth-20 (surfactant), dybutyl adipate (oil phase) and water in differents proportions made possible to obtain formulations with different structuring forms as microemulsions, emulsions and liquid crystalline mesophases. The formulations were characterized through the polarization light microscopy, refractive index, relative density, conductivity and behavior rheological. Solubility studies were accomplished showed that the systems were capable to solubilize about 1,5% of caffeine. In vitro release studies using the cell of diffusion model in static system of Franz's type adapted to the dissolution equipment indicated formulations with characteristics of reservoirs systems. The permeability study in vivo used male pig (Landrace x Large White) and they were submitted to the treatment. Formulations with or without caffeine were applied. Skin's fragments and hypoderm of them were removed for histology analysis after the treatment. The formulation with liquid crystal of hexagonal phase characteristics was efficient in increasing skin permeability to the caffeine, thus facilitating its drug action. The application of caffeine this way led to a significant reduction of the hypoderms thickness. The developed system is adjusted for topical use, is skin penetration enhancers and it guarantees the effectiveness of the caffeine in the treatment of the cellulite.

A literatura recente sobre drogadicção trata a sensibilização produzida pela pré-exposição a estimulantes como um possível fator na aquisição, manutenção e recaída na dependência gerada por essas drogas. O objetivo desse trabalho foi verificar se a pré-exposição a dietilpropiona (DEP) e cafeína (CAF) sensibilizava ratos ao efeito reforçador da DEP. Quatro experimentos foram realizados. No Experimento 1 um grupo de ratos foi pré-exposto i.p. a DEP, enquanto outro grupo de ratos recebia veículo. Posteriormente foi medido o efeito agudo i.p. de três doses de DEP (1,0, 2,5 e 5,0 mg/kg) sobre a atividade motora. No Experimento 2, o procedimento de pré-exposição foi similar ao descrito para o Experimento 1. Posteriormente, foi medida a preferência condicionada de lugar (CPP) produzida por três doses de DEP (1,0, 2,5 e 5,0 mg/kg). O Experimento 3 constou de duas partes. Na primeira parte, ratos adultos foram pré-expostos a CAF i.p., enquanto que outro grupo recebia veículo. Posteriormente foi medida a CPP induzida por 2,5 mg/kg de DEP. Na segunda parte desse experimento, ratos adolescentes foram pré-expostos oralmente a CAF por 56 dias consecutivos, enquanto que outro grupo de ratos recebia água. Posteriormente foi medida a CPP induzida por 1,0 mg/kg de DEP. No Experimento 4, ratos adolescentes foram submetidos a um procedimento de pré-exposição similar ao descrito para a segunda parte do Experimento 3. Posteriormente foi medido o desempenho sob um esquema de razão progressiva (PR), em que os animais eram reforçados oralmente com uma solução de DEP. Os resultados do Experimento 1 mostraram que as doses de 2,5 e 5,0 mg/kg de DEP aumentaram a atividade motora. Também foi observado que, na dose de 5,0 mg/kg de DEP, esse efeito era maior para os animais que tinham sido pré-expostos, indicando que a CAF sensibilizou o efeito da DEP sobre a atividade motora. Os resultados do Experimento 2 indicaram que as doses de 2,5 e 5,0 mg/kg de DEP produziram CPP, mostrando com isso valor reforçador; porém, não foi observada sensibilização desse efeito. Os resultados do experimento 3 revelaram que nem a pré-exposição oral a CAF desde a adolescência até a idade adulta, nem a pré-exposição i.p. na idade adulta, sensibilizou o valor reforçador da DEP quando medido pelo modelo de CPP. Os resultados do Experimento 4 mostraram que a pré-exposição oral a CAF desde a adolescência até a idade adulta sensibilizou o valor reforçador da DEP quando medido pelo modelo de PR. Os resultados são discutidos em relação aos comportamento medidos pelos modelos usados para medir o valor reforçador da DEP ao potencial de dependência da DEP e à importância do consumo precoce de cafeína na vulnerabilidade à dependência de drogas. / Recent literature considers sensitization resulting from pre-exposure to psychostimulants as a possible factor in drug addiction acquisition, maintenance and relapse. The aim of this study was to verify if pre-exposure to the psychostimulants diethylpropion (DEP) and caffeine (DEP) would sensitize rats to the reinforcing value of DEP. Four experiments were conducted. In Experiment 1 a group of rats was pre-exposed to DEP while another group received vehicle. After that, the acute effect of i.p. DEP (1.0, 2.5 or 5.0 mg/kg) on motor activity was measured. A similar pre-exposure procedure was conducted in Experiment 2. After that, Conditioned Place Preference (CPP) induced by i.p. DEP (1.0, 2.5 or 5.0 mg/kg) was measured. Experiment 3 was subdivided in two parts. In the first one adult rats were pre-exposed to i.p. CAF while a control group received vehicle. After that, CPP induced by 2.5 mg/kg i.p. DEP was measured. In the second part of this experiment, adolescent rats were pre-exposed to oral CAF for 56 consecutive days, while a control group received water. After that, CPP induced by 1.0 mg/kg i.p. DEP was measured. In Experiment 4, adolescent rats were submitted to a pre-exposure procedure similar to that described for the second part of Experiment 3. After that, their responses reinforced by a DEP solution on a progressive ratio schedule (PR) were measured. Experiment 1 results showed that 2.5 and 5.0 mg/kg DEP increased motor activity. At 5.0 mg/kg this effect was more pronounced in pre-exposed animals. In Experiment 2, the doses of 2.5 and 5.0 mg/kg DEP induced CPP, demonstrating their reinforcing value. However, no sensitization effect was observed. Experiment 3 results revealed that neither pre-exposure to oral CAF from adolescence to adulthood nor i.p. CAF pre-exposure in adulthood sensitized DEP reinforcing value as measured by CPP. Experiment 4 results showed that oral CAF pre-exposure from adolescence to adulthood induced sensitization of DEP reinforcing value as measured by PR breaking point. Results are discussed in terms of the animal models to assess reinforcing value, the abuse potential of DEP and the relevance of early caffeine consumption on the vulnerability to drug dependence.

A literatura recente sobre drogadicção trata a sensibilização produzida pela pré-exposição a estimulantes como um possível fator na aquisição, manutenção e recaída na dependência gerada por essas drogas. O objetivo desse trabalho foi verificar se a pré-exposição a dietilpropiona (DEP) e cafeína (CAF) sensibilizava ratos ao efeito reforçador da DEP. Quatro experimentos foram realizados. No Experimento 1 um grupo de ratos foi pré-exposto i.p. a DEP, enquanto outro grupo de ratos recebia veículo. Posteriormente foi medido o efeito agudo i.p. de três doses de DEP (1,0, 2,5 e 5,0 mg/kg) sobre a atividade motora. No Experimento 2, o procedimento de pré-exposição foi similar ao descrito para o Experimento 1. Posteriormente, foi medida a preferência condicionada de lugar (CPP) produzida por três doses de DEP (1,0, 2,5 e 5,0 mg/kg). O Experimento 3 constou de duas partes. Na primeira parte, ratos adultos foram pré-expostos a CAF i.p., enquanto que outro grupo recebia veículo. Posteriormente foi medida a CPP induzida por 2,5 mg/kg de DEP. Na segunda parte desse experimento, ratos adolescentes foram pré-expostos oralmente a CAF por 56 dias consecutivos, enquanto que outro grupo de ratos recebia água. Posteriormente foi medida a CPP induzida por 1,0 mg/kg de DEP. No Experimento 4, ratos adolescentes foram submetidos a um procedimento de pré-exposição similar ao descrito para a segunda parte do Experimento 3. Posteriormente foi medido o desempenho sob um esquema de razão progressiva (PR), em que os animais eram reforçados oralmente com uma solução de DEP. Os resultados do Experimento 1 mostraram que as doses de 2,5 e 5,0 mg/kg de DEP aumentaram a atividade motora. Também foi observado que, na dose de 5,0 mg/kg de DEP, esse efeito era maior para os animais que tinham sido pré-expostos, indicando que a CAF sensibilizou o efeito da DEP sobre a atividade motora. Os resultados do Experimento 2 indicaram que as doses de 2,5 e 5,0 mg/kg de DEP produziram CPP, mostrando com isso valor reforçador; porém, não foi observada sensibilização desse efeito. Os resultados do experimento 3 revelaram que nem a pré-exposição oral a CAF desde a adolescência até a idade adulta, nem a pré-exposição i.p. na idade adulta, sensibilizou o valor reforçador da DEP quando medido pelo modelo de CPP. Os resultados do Experimento 4 mostraram que a pré-exposição oral a CAF desde a adolescência até a idade adulta sensibilizou o valor reforçador da DEP quando medido pelo modelo de PR. Os resultados são discutidos em relação aos comportamento medidos pelos modelos usados para medir o valor reforçador da DEP ao potencial de dependência da DEP e à importância do consumo precoce de cafeína na vulnerabilidade à dependência de drogas. / Recent literature considers sensitization resulting from pre-exposure to psychostimulants as a possible factor in drug addiction acquisition, maintenance and relapse. The aim of this study was to verify if pre-exposure to the psychostimulants diethylpropion (DEP) and caffeine (DEP) would sensitize rats to the reinforcing value of DEP. Four experiments were conducted. In Experiment 1 a group of rats was pre-exposed to DEP while another group received vehicle. After that, the acute effect of i.p. DEP (1.0, 2.5 or 5.0 mg/kg) on motor activity was measured. A similar pre-exposure procedure was conducted in Experiment 2. After that, Conditioned Place Preference (CPP) induced by i.p. DEP (1.0, 2.5 or 5.0 mg/kg) was measured. Experiment 3 was subdivided in two parts. In the first one adult rats were pre-exposed to i.p. CAF while a control group received vehicle. After that, CPP induced by 2.5 mg/kg i.p. DEP was measured. In the second part of this experiment, adolescent rats were pre-exposed to oral CAF for 56 consecutive days, while a control group received water. After that, CPP induced by 1.0 mg/kg i.p. DEP was measured. In Experiment 4, adolescent rats were submitted to a pre-exposure procedure similar to that described for the second part of Experiment 3. After that, their responses reinforced by a DEP solution on a progressive ratio schedule (PR) were measured. Experiment 1 results showed that 2.5 and 5.0 mg/kg DEP increased motor activity. At 5.0 mg/kg this effect was more pronounced in pre-exposed animals. In Experiment 2, the doses of 2.5 and 5.0 mg/kg DEP induced CPP, demonstrating their reinforcing value. However, no sensitization effect was observed. Experiment 3 results revealed that neither pre-exposure to oral CAF from adolescence to adulthood nor i.p. CAF pre-exposure in adulthood sensitized DEP reinforcing value as measured by CPP. Experiment 4 results showed that oral CAF pre-exposure from adolescence to adulthood induced sensitization of DEP reinforcing value as measured by PR breaking point. Results are discussed in terms of the animal models to assess reinforcing value, the abuse potential of DEP and the relevance of early caffeine consumption on the vulnerability to drug dependence.

[pt] A presente pesquisa de mestrado relaciona-se ao desenvolvimento e à validação de um método analítico para detecção de substâncias proibidas em matrizes biológicas de cavalos de corrida e seu impacto na confiabilidade metrológica de serviços laboratoriais voltados à atividade turfística visando (i) a especificação de desempenho de um laboratório antidoping capacitado para identificar a presença de substâncias proibidas acordadas pela indústria de carreiras de cavalo; (ii) a adequação às condições brasileiras dos métodos analíticos aplicáveis à determinação antidoping em matrizes biológicas de animais em competição e (iii) a definição de um padrão de excelência harmonizado aos critérios da International Federation of Horseracing Authorities entendidos como instrumentos para a conquista do credenciamento do laboratório antidoping e subseqüente participação em acordos internacionais de reconhecimento mútuo. Para fundamentar o desenvolvimento da pesquisa, o trabalho considerou como estudo de caso o Laboratório Antidoping do Jockey Club Brasileiro (LAD/JCB). Original no seu escopo, o trabalho contribui para ampliar a abrangência da atividade de acreditação laboratorial no Brasil tendo em vista tratar-se de uma nova categoria de laboratório de ensaio ainda não existente na matriz laboratorial credenciada cuja confiabilidade laboratorial foi desenvolvida à luz dos critérios da norma internacional ISO/IEC 17025. No contexto do desenvolvimento são ainda discutidos aspectos relevantes relacionados ao sistema da gestão laboratorial; expressão das incertezas de medição associadas à determinação antidoping em consonância a práticas e procedimentos internacionalmente consensados; capacitação de pessoal técnico especializado; rastreabilidade ao Sistema Internacional de Unidades (SI) e validação e adequação de metodologias analíticas utilizadas em laboratórios antidoping. Atenção particular é direcionada ao Methode Alcalins Sur C- 18, desenvolvido pelo Laboratoire LAB-Contrôle antidopage da França, aplicável a determinação da presença de substâncias dopantes em matrizes biológicas (urina) de cavalos de corrida, utilizado como método fonte para o desenvolvimento de um método alternativo adequado às condições laboratoriais do Laboratório Antidoping do Jockey Club Brasileiro e moldado à detecção de substâncias dopantes mais freqüentes na atividade turfística brasileira. Tendo a cafeína sido estatisticamente identificada a substância mais presente nas análises realizadas pelo Laboratório Antidoping do Jockey Club Brasileiro ao longo de seus sete anos de atuação, o Methode Alcalins Sur C-18 foi adequado e validado para sua determinação analítica. À pesquisa desenvolvida atribuem-se, também, créditos pela introdução de um novo atributo na validação qualitativa da metodologia, denominado valor- limite de determinação, subsidiando a determinação de uma faixa de concentração, para que resultados incorretos (falso-positivos e falso- negativos) não constem de laudos emitidos. Adicionalmente à adequação e validação do método analítico desenvolvido, a pesquisa de mestrado contribuiu não apenas para atribuir visibilidade a uma nova categoria de laboratórios, mas, principalmente, para preparar o Laboratório Antidoping do Jockey Club Brasileiro para demonstrar sua competência técnica como estratégia de conquista de um credenciamento internacionalmente reconhecido. A presente pesquisa de mestrado voltada ao equacionamento de um problema inédito no Brasil de interesse da indústria relacionada à atividade turfística desenvolveu-se no contexto do Convênio FINEP/MCT no. 22.01.0692.00, Referência 1974/01, que aportou recursos do Fundo Setorial Verde Amarelo para direcionar o esforço de pesquisa em metrologia para a solução de dez projetos-piloto de interesse da indústria. No c / [en] This Master s Degree dissertation addresses the development in adjustment and validation and the metrological reliability of laboratory services covering horseracing activities. The work includes (i) the specification of the performance of an antidoping laboratory capable of identifying the presence of forbidden substances, as defined by the horse-racing industry; (ii) the validation of analytical methods applicable in doping tests of biological matrices of competing animals to Brazilian laboratories conditions, and (iii) the definition of a standard of excellence in harmony with the criteria of the International Federation of Horseracing Authorities as the tools utilized for the accreditation of the antidoping laboratory and the subsequent participation in international agreements of mutual recognition. In order to validate the methodology, the Brazilian Jockey Club Antidoping Laboratory (LAD/JCB) was used as a studycase. Original in its scope, this work contributes towards the widening of the accreditation of laboratories in Brazil, considering the fact this new category of testing laboratories is still nonexistent within the Brazilian network of accredited testing laboratories which considers the international standard ISO/IEC 17025 as the basic criteria. With regard to development, some relevant aspects are still being discussed in relation to the laboratory management system: the unreliability of the measurements for the determination of doping, in view of internationally accepted practices and procedures; qualification of specialized technical personnel; traceability of SI (the International Unit System) and the validation and adjustment of analytical methodologies utilized in antidoping laboratories. Special attention is dedicated to Methode Alcalins Sur C- 18, developed by Laboratoire LAB-Contrôle Antidopage in France, applicable to the determination of the presence of doping substances in the biological matrix (urine) of racehorses, used as method source for the development of an alternative method adjusted to the Antidoping Laboratory of the Brazilian Jockey Club conditions and molded to detection of the more frequents doping substances in the brazilian horserancing activities. Having the caffeine been the doping substance statistically identified as the most frequent in the tests carried out by the Brazilian Jockey Club Antidoping Laboratory, along its seven years of services, the Methode Alcalins Sur C-18 was adapted and validated for its analytical determinations. The applied research carried out was also credited with the introduction of a new attribute to the methodology qualitative validation, designated as limit- value for determination, which provides key-information for the determination of a concentration band, in order that incorrect results (false-positive and false- negative) do not appear in the laboratory reports usually issued. Besides the adaptation and validation of the analytical method thus developed, this Master s Degree dissertation contributes not only towards greater visibility of a new category of laboratories, but mainly to the preparation of the Brazilian Jockey Club Antidoping Laboratory to demonstrate its technical capacity as a policy and strategy for becoming in the near future an internationally recognized accredited laboratory. The present M.Sc. Dissertation addresses the metrological reliability of antidoping laboratories, a pioneering issue in Brazil, aiming at the solution of a problem related to the horse-racing industry. It was developed under the financial support of the FINEP/MCT Agreement no. 22.01.0692.00, Reference 1974/01 (Green-Yellow governmental Sectoral Fund) which droved research cooperative efforts in metrology to the solution of ten pilot-projects. In this case specifically, cooperated to the development of the M.Sc. research entitled Metrological reliability of the Antidoping Laboratory of the Brazilian Jockey Club

El control d'herbicides i altres anàlits orgànics presents en el medi ambient constitueix una pràctica habitual en els laboratoris des de l'establiment de legislacions que limiten la seva concentració. Per aquesta raó, cal el desenvolupament de noves metodologies analítiques per al seguiment de compostos orgànics en el medi. Molt sovint aquests anàlits es troben a nivells traça en aigües i sòls, conjuntament amb un alt contingut de substàncies húmiques i fúlviques. Així, un dels reptes existents és el tractament de la mostra (extracció, concentració i "clean-up" d'aquests anàlits per a una bona quantificació). Aquests processos han de venir complementats per tècniques cromatogràfiques que permetin la mesura final dels anàlits.La investigació que es presenta en aquesta tesi es centra en el desenvolupament d'un mètode per a la determinació de 2,4-D i MCPA i els seus metabòlits fenòlics i d'un altre per a la determinació de cafeïna. El primer dels procediments desenvolupats s'ha aplicat al seguiment dels herbicides i els metabòlits fenòlics en sòls d'un camp de golf, mentre que el segon s'ha emprat per a la determinació de cafeïna en aigües naturals i, posteriorment, en aigües residuals. / The control of herbicides and other organic pollutants present in the environment has become a routine practise in many laboratories since the establishment of legislations that indicates the maximum allowed levels for these compounds. For this reason, it is necessary to develop new analytical methodologies for the monitoring of organic compounds in the environment. These analytes are often found at trace levels in waters and soils, with a high humic and fulvic organic matter content associated. One of the most important challenges in this field is the sample treatment (i.e. extraction, concentration and clean-up of the compounds to obtain a correct quantification). These procedures have to be coupled to chromatographic techniques to allow the determination of the compounds. This study is devoted to the development of a method for the determination of 2,4-D, MCPA and their phenolic metabolites and another method for the determination of caffeine. The first method has been applied for the monitoring of the herbicides and their metabolites in soils from a golf course; the second has been applied to the determination of caffeine in natural and urban wastewaters.