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Distribuição do IGF-I e do seu receptor na cartilagem do processo condilar da mandíbula e na sincondrose basiesfenoidal de ratos wistar subnutridos. / Distribution of IGF-I and its receptor in the cartilage of the mandibular condyle process and basiesphenoidal synchondrosis of the undernourished wistar rats.

Bruna Cecilia Caixeta de Oliveira 22 November 2013 (has links)
A cartilagem do processo condilar (PC) e a sincondrose basiesfenoidal (SB) participam do processo de crescimento e desenvolvimento craniofacial que são determinados pelo aporte protéico, pela ação hormonal e por fatores de crescimento, sendo o IGF-I o principal deles. Objetivou-se correlacionar as alterações morfológicas no PC e na SB provenientes da subnutrição protéica. Os grupos experimentais foram formados por animais heterogêneos (n=5) com 60 dias de vida, de acordo com o teor de caseína contida nas rações, protéica (20%) ou hipoprotéica (5%), formando, respectivamente, os grupos nutrido (N) e subnutrido (S). Na microscopia de luz foi observado que a subnutrição não alterou as espessuras das camadas do PC e da SB, enquanto que através da imunohistoquímica o número de IGF-I e IGF-IR diminuiu em ambos os tecidos (N&ne;S; p<0,05). No PC, o colágeno do tipo I passou a ser do tipo II no grupo S, enquanto que na SB, o do tipo II foi destacado em ambos os grupos. A matriz extracelular do PC apresentou-se densa e com coloração homogênea nos nutridos, contrastando com o aspecto difuso dos subnutridos. Na SB, tanto no grupo N quanto no S, a MEC manteve-se com aspecto uniforme na distribuição e na homogeneidade da coloração. / The cartilage of the condylar process (CP) and the basiesfenoidal synchondrosis (BS) participate in the process of craniofacial growth and development that are determined by the protein content, the hormonal and growth factors, being the IGF-I main one. This study aimed to correlate the morphological changes in PC and SB from protein malnutrition. The experimental groups were formed by heterogeneous animals (n = 5) at 60 days of life, according to the casein contained in the feed, proteic (20%) or hypoproteic (5%), constituting respectively the nourished (N) and undernourished (U) groups. Under light microscopy it was observed that undernourished did not change the thickness of the layers of CP and BS by immunohistochemical while the number of IGFI and IGF-IR decreased in both tissues (N&ne;S; p<0,05). On the PC, the type I collagen became type II at the U group, while in the SB the type II was noted in both groups. The extracellular matrix (ECM) of the PC presented dense and homogenous coloration in the nourished, contrasting with the diffuse aspect of the undernourished. In SB, both in the N group as U, the ECM remained uniform in appearance and the distribution and uniformity of staining.
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Efeito da desnutrição protéica precocemente corrigida na morfologia da epífise de crescimento de coelhos (Nova Zelândia) / Effects of the protein malnutrítion corrected at early age on the morphology in the epiphysal of growth of rabbits (New Zealand)

Vivian Vargas de Moraes 17 July 2006 (has links)
Diversos autores comprovam a influência de um episódio de desnutrição crônica no crescimento pôndero-estatural. Entretanto, não são definidas as repercussões da desnutrição protéica precocemente corrigida sobre o potencial genético de crescimento, uma vez que é difícil distinguir o papel da desnutrição do ambiente onde habitualmente ocorre. Deste modo, esta pesquisa teve como objetivo analisar os efeitos da desnutrição protéica precocemente corrigida na morfologia da epífise de crescimento. Assim, como modelos experimentais foram utilizados 13 coelhos adultos da raça Nova Zelândia Branco, sendo 12 fêmeas designadas como matrizes e 1 macho como reprodutor. Foram estabelecidos quatro grupos de acordo com o padrão alimentar: Grupo 1 (gestação e lactação normoprotéicas), grupo li (gestação normoprotéica e lactação hipoprotéica), grupo III (gestação e lactação hipoprotéicas) e grupo IV (gestação hipoprotéica e lactação normoprotéica) Após desmame todos os animais apresentaram correção protéica em suas dietas. Para coleta dos dados, os láparos foram submetidos, semanalmente, às mensurações corpóreas: comprimento crânio-caudal, peso e perímetro cefálico No 100° dia de vida, os animais foram sacrificados para mensurações ósseas e extração da epífise de crescimento proximal da tíbia para análise histológica. Dessa forma, foi possível concluir que a desnutrição protéica precocemente corrigida acarreta efeitos detetérios sobre a morfologia da epífise de crescimento de coelhos, sendo o periodo de lactação considerado como determinante do desenvolvimento pleno do potencial genético de crescimento. / Several authors prove the influence of an episode of chronic malnutrition in the growth in weight and stature. Meantime, there are not defined the repercussion of the protein malnutrition corrected at early age on the genetic potential of growth, as soon as it is difficult distinguishes the paper of the malnutrition of environment where it usually takes place. ln this way, this research had how aim to analyse the effects of the protein malnutrition corrected at early age in the morphology of the epiphyses of growth. So, experimental modeis were used 13 adult rabbits of the race White New Zealand, being 12 females designated like wombs and 1 male like reproducer. Four groups were estabiished in accordance with the food standard: Group 1 (normal protein gestation and lactation), group II (normal protein gestation and low protein lactation), group III (10w protein gestation and lactation) and group IV (10w protein gestation and normal protein lactation) After wean ali the animais presented protein correction in their diets. For collection of the datas, the young rabbits were subjected, weekly, to the corporal measure: length skull-torrent, weight and cephalic perimeter. In the 100th day of life, the animais were sacrificed for bone measure and extraction of the epiphyses of growth proximal of the tibia for histological analysis. In this form, it was possible to end that the protein malnutrition corrected at early age brings harmful effects on the morphology of the epiphyses of growth of rabbits, being the period of lactation was considered as a determinant of the fulI development of the genetic pote ntial of growth.
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Efeitos da galactomanana de Cyamopsis tetragonolobus na osteoartrite induzida por transecÃÃo do ligamento cruzado anterior em ratos / Effects of the galactomannan of Cyamopsis tetragonolobus in the osteoarthritis induced by anterior cruciate ligament transection in rats

Rondinelle Ribeiro Castro 15 April 2008 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Using the osteoarthritis (OA) model induced by anterior cruciate ligament transection (ACLT) in rats, we have demonstred that guar gum (GG), a galactomannan extracted from Cyamopsis tetragonolobus seeds, displays analgesic activity similar to Hylan G-F 20, a hyaluronate derivate used as local therapy in human OA. In the same model, we objective to develop a parametric biochemical method for joint lesion evaluation, and to investigate the mechanism for analgesia and the chondroprotective effect of GG. Wistar rats subjected to ACLT (OA group) were sacrificed at different endpoints. Joint pain was daily measured using the test for articular incapacitation in rats, until 70 days. Joint lavage was used for NO determination. Articular cartilage was evaluated by the chondroitin-sulfate (CS) content and determination of its molar weight. Histophatologic analysis using the OARSI score system was also performed. Sham-operated groups were used for comparison. In the studies of joint pain, OA groups received indomethacin (2mg/kg/d s.c.), meloxicam (6mg/kg/d i.p.), tadalafil (0.5mg/kg/d p.o.) between days 4 and 7.Morphine (200Âg i.art.) was given at day 4 only, 30 min before the pain evaluation. Naloxone (500Âg i. art.) was given 15 min prior morphine. Sodium alendronate (30 or 240Âg i. art.) was given prophilactically, starting 3 days prior ACLT, and repeated at each 3 days, until day 6. Original or chemically modified GG (100&#956;g/50&#956;l i. art.) was given as a single dose at day 4. Galactose or mannose was co-administred (500&#956;g/50&#956;l i. art.) with original GG. In the study of chondroprotection, GG (100&#956;g/50&#956;l i. art.) was given once weekly, starting at day 14, during 8 weeks. Non-treated animals (NT) received vehicle (saline). OA animals presented maximal joint pain and NO release in the first week. Both CS content and molar weight were higher at day 70 (p<0.05). At this endpoint, important histopathologic changes were found in the OA group. Indomethacin, meloxican, tadalafil and morphine significantly reduced joint pain (p<0.05). Naloxone reverted the effect of morphine. Alendronate prevented the joint pain development. Modified GG structures were unable to promote analgesia. The analgesic effect of unmodified GG could be reverted by galactose (p<0.01), but not by mannose. GG treatment prevented the CS changes, and it reduced the histopatologic lesion (p<0.05). CS changes seem to reflect the tecidual damage, and may be used as an index for the joint lesion. The analgesic efficacy of GG is due to galactose residues. In addition, the chondroprotective effect by GG was demonstrated. This is an important contribution to propose GG as an antiarthrosic drug / No modelo de osteoartrite (OA) induzida por transecÃÃo do ligamento cruzado anterior em ratos (TLCA), havÃamos demonstrado que a goma guar (GG), uma galactomanana extraÃda das sementes de Cyamopsis tetragonolobus goma guar, apresenta atividade analgÃsica em magnitude semelhante à exibida pelo Hilano G-F 20, um derivado do Ãcido hialurÃnico utilizado em terapia intra-articular da OA humana. Utilizando o referido modelo, objetivamos desenvolver um mÃtido bioquÃmico paramÃtrico para avaliaÃÃo da lesÃo articular no referido modelo, e investigar o mecanismo para a analgesia e a eficÃcia condroprotetora da GG. Ratos Wistar submetidos à TLCA (grupo OA) foram sacrificados em diferentes perÃodos. A dor articular foi avaliada diariamente pelo teste de incapacitaÃÃo para ratos, por atà 70 dias. O lavado articular foi usado para determinaÃÃo da liberaÃÃo de NO. A cartilagem foi avaliada pela determinaÃÃo do teor de condrotin-sulfato (CS) na matriz, alÃm da avaliaÃÃo da massa molar do mesmo. A lesÃo articular foi avaliada tambÃm por anÃlise histopatolÃgica, segundo os escores OARSI. Grupos falso-operados (sham) foram utilizados para comparaÃÃo. Para estudos sobre a dor articular, animais do grupo OA receberam terapeuticamente indometacina (2mg/kg/d s.c.), meloxicam (6mg/kg/d i.p.), ou tadalafila (0,5mg/kg/d p.o.), do quarto ao sÃtimo dias. Morfina (200Âg i. art.) foi administrada apenas no quarto dia, 30 min antes da avaliaÃÃo da dor. Naloxona (500Âg i. art.) foi administrada 15 min antes de morfina. Alendronato sÃdico (30 ou 240Âg/kg s.c.) foi administrado profilaticamente trÃs dias antes da induÃÃo, e repetido a cada trÃs dias, atà o sexto dia. GG original ou quimicamente modificada foi administrada em dose Ãnica no quarto dia (100&#956;g/50&#956;l i. art.). Galactose ou manose (500&#956;g/50&#956;l i. art.) foram co-administrados à GG original. Para avaliaÃÃo sobre a lesÃo da cartilagem, GG (100&#956;g/50&#956;l i. art) foi administrada como dose Ãnica semanal, do 14 ao 63 dias. Animais nÃo tratados (NT) receberam veÃculo (salina) nas respectivas vias. O grupo OA apresentou dor articular mÃxima durante a primeira semana, perÃodo no qual houve a maior liberaÃÃo de NO. 70 dias apÃs TLCA, o teor e a massa molar do CS da matriz da cartilagem mostraram-se ambos aumentados (p<0,05). Importantes alteraÃÃes histopatolÃgicas foram encontradas no grupo OA nesse perÃodo. Indometacina, meloxicam, tadalafila e morfina reduziram significantemente a dor (p<0,05), sendo o efeito desta Ãltima revertido por naloxona. Alendronato sÃdico preveniu a ocorrÃncia da dor. As estruturas modificadas de GG nÃo exibiram eficÃcia analgÃsica. Galactose, mas nÃo manose, reverteu significativamente o efeito analgÃsico da GG nÃo-modificada (p<0,01). GG preveniu as alteraÃÃes do CS da cartilagem, e reduziu significativamente a lesÃo histopatolÃgica (p<0,05). As alteraÃÃes sofridas pelo CS parecem refletir o dano tecidual, validando tal metodologia para avaliaÃÃo da lesÃo estrutural. A eficÃcia analgÃsica da GG decorre de um efeito farmacolÃgico dependente de galactose. Mais ainda, demonstramos a eficÃcia condroprotetora in vivo para a GG, indispendÃvel para sua validaÃÃo como droga anti-artrÃsica.
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Estudo comparativo em cadáveres do uso de enxertos cartilaginosos septais e costais para aumento da área seccional externa narinária / A comparative study on cadavers of the use of septal and rib cartilage grafts to increase nostril cross-sectional area

Marcelo Wulkan 12 December 2012 (has links)
INTRODUÇÃO: A área da seccção externa da narina é a parte inferior da válvula nasal externa que é o primeiro obstáculo ao fluxo de ar. Existem dúvidas e controvérsias em relação a eficácia de tratamentos cirúrgicos nessa região do nariz durante a rinoplastia. Neste estudo, compararam-se em cadáveres o uso do enxerto de reforço alar modificado de cartilagem septal e costal para analisar o aumento da área seccional externa narinária. MÉTODOS: Trinta narinas de cadáveres foram dissecados no Serviço de Verificação de Óbito da Capital- Universidade de São Paulo. A escolha dos cadáveres foi aleatória (9 mulheres e 6 homens) excluíndo-se os casos com lesão deformante nasal ou doença intra-nasal. Todos os enxertos septais e costais apresentavam as mesmas dimensões (30 x 5 x 1 mm) e foram inseridos acima do ramo lateral das cartilagens alares de maneira aleatória. A seguir, realizaram-se fotos padronizadas e mensurações das 90 áreas seccionais externas de narina com o programa Autocad®; 30 antes de qualquer procedimento; 60 após a inclusão de enxertos (30 usando cartilagem costal e 30 usando cartilagem septal). A análise estatística foi feita com um modelo de medidas repetidas e ANOVA (análise de variância) para a variável área. A comparação das médias foi feita pelo método de Tukey, sendo o coeficiente de confiança global de 95%. RESULTADOS: A área seccional externa da narina sem tratamento, com inclusão de enxerto de reforço alar modificado septal e costal é, respectivamente, 0,76 cm2, 0,85 cm2 (aumento de 11,8%) e 0,91 cm2 (aumento de 19,7%). CONCLUSÃO: O enxerto de reforço alar modificado de costela é estatisticamente mais efetivo que o enxerto de reforço alar modificado de septo para aumentar a área de secção externa da narina / INTRODUCTION: The nostril cross-sectional area (bottom of the external nasal valve) presents the first obstacle to airflow. There are doubts and controversies regarding the effectiveness of surgical treatments in this region of the nose during a rhinoplasty. In this study, we have tested two modified strategies for alar reinforcement, one using a cartilage graft from the nasal septum and the other using rib cartilage, to analyze and compare their effectiveness in augmenting nostril cross-sectional area. METHODS: Thirty corpses nostrils were dissected in the Division of Postmortem Inspection at the University of São Paulo. Corpses were chosen at random (9 women and 6 men) excluding those with deforming nasal injury or intra-nasal disease. All nasal septum and rib grafts had the same dimensions (30 x 5 x 1 mm) and were inserted randomly above the lateral crura of the alar cartilages. Then, a total of 90 standardized photographs were taken to measure nostril cross-sectional area using the Autocad® program; one per nostril on all 15 cadavers, at three separate intervals. Thirty photos were taken prior to any procedure being performed, and 60 after the insertion in each nostril, of the two different types of cartilage grafts. After one graft was tested, it was removed and replaced with the other type. The order of the procedures was randomized. Statistical analyses were conducted using a model for repeated measures and ANOVA for the variable area. The comparison of means was done with Tukeys method and a 95% confidence coefficient. RESULTS: The nostril cross-sectional area before treatment, after modified alar reinforcement using septum cartilage graft, and after modified alar reinforcement using rib graft were 0,76 cm2, 0,85 cm2 (increase of 11,8%) and 0,91 cm2 (increase 19.7%), respectively. CONCLUSION: The modified alar reinforcement using grafts of rib cartilage is statistically more effective than the modified alar reinforcement using grafts of nasal septum in increasing the nostril cross-sectional area
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Avaliação da cartilagem da ATM por meio de ressonância magnética com a utilização de bobinas microscópicas / MRI assessment of TMJs cartilage with the use of microscopic coils

Alessandra Coutinho 02 October 2009 (has links)
Diferenças na espessura e regularidade da cartilagem da articulação temporomandibular (ATM) ocorrem como o resultado de áreas em crescimento ou em remodelamento. Esse aspecto dificulta a interpretação clínica das imagens e geralmente negligencia a presença da fibrocartilagem. O estudo, por meio da Ressonância Magnética utilizando bobinas microscópicas, possibilita uma melhor observação da cartilagem articular. Confirmamos essa evidência por meio do estudo que analisou 20 indivíduos (40 ATM), divididos em grupo sintomático (DTM) com 10 pacientes (20 ATM) apresentando queixa clínica e suspeita diagnóstica de DTM e, o grupo controle com 10 voluntários (20 ATM) assintomáticos ou que não apresentavam sinais e sintomas clínicos de DTM. As imagens de RM sagitais oblíquas ponderadas em DP SPIR da ATM foram capazes de mostrar a cartilagem com melhor evidência tanto na cabeça da mandíbula quanto na eminência articular proporcionado mensurações, as quais se apresentaram estatisticamente iguais entre os grupos e também a avaliação da regularidade com o mesmo comportamento entre os grupos e geralmente acompanhando a morfologia da cortical óssea. Em muitos casos, principalmente quando da presença de deslocamento para anterior do disco articular, a observação se torna mais difícil, requerendo mais prática para esse tipo de avaliação. Observamos que pacientes do grupo controle apresentaram deslocamento de disco. Dessa maneira, consideramos um exame muito útil como auxiliar no diagnóstico da DTM, e com o desenvolvimento de novas terapias para doenças degenerativas e traumas na cartilagem, as imagens de RM com o uso de bobina microscópica são de crescente importância clínica e poderão desempenhar um papel importante na avaliação da eficácia dessas terapias. / Differences in thickness and regularity of the temporomandibular joints (TMJ) cartilage occur as the result of areas of growth or remodeling. This fact leads to misinterpretations on diagnosis and generally neglects the presence of fibrocartilage. The present study, using MRI microscopic coils, allows better observation of the articular cartilage. This evidence was confirmed by this study that examined 20 individuals (40 TMJ), divided into: symptomatic group with temporomandibular dysfunction (TMD) of 10 patients (20 TMJ) presenting clinical complaint and TMD diagnosis; and the control group of 10 volunteers (20 TMJ) that were asymptomatic or who had no clinical signs and symptoms of TMD. On both groups were measured cartilage thickness and if the cartilage was regular or not. The oblique sagital MR images of weighted SPIR protons density (PD\'s) TMJ were able to show the best cartilage images either in the mandibles head or on the articular eminence providing measurements. Both groups presented no statistically significant differences regarding to thickness and the evaluation of the regularity presented the same result. The regularity of the cartilage generally was similar to the morphology of the cortical bone. In many cases, especially when the presence of anterior articular disc displacement, the evaluation was more difficult, requiring practice. The control group with asymptomatic patients was found also to have disc displacements. Thus, we review a very useful tool in the diagnosis of TMD and its importance to evaluate the cartilage to development new therapies for degenerative diseases and trauma. The MRI images with the use of microscopic coil are of increasing clinical importance and might play an important role in assessing the effectiveness of these therapies.
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Avaliação morfoquantitativa e ultraestrutural da cartilagem do processo condilar da mandíbula e da sincondrose basioccipital de ratos Wistar subnutridos e suplementados com resveratrol / Morphoquantitative and ultrastructural evaluation of the mandibular condylar cartilage and basioccipital synchondrosis of Wistar rats subjected to protein undernutrition and supplementation with resveratrol

Joice Naiara Bertaglia Pereira 30 September 2015 (has links)
A subnutrição é uma doença causada pela ingestão inadequada e/ou insuficiente de energia ou de outras biomoléculas, que pode comprometer o crescimento e o desenvolvimento dos tecidos. Em conjunto, a cartilagem do processo condilar da mandíbula e a sincondrose basioccipital representam os dois centros efetivos do crescimento craniofacial, que depende, dentre outros, de fatores locais como a produção do fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I) e seu receptor (IGF-IR). Alterações tanto no peptídeo quanto no receptor estão associadas a graves atrasos no crescimento e desenvolvimento ósseo. Dentre os nutrientes alternativos com a capacidade de promoção da recuperação nutricional, destaca-se o resveratrol, um polifenol contido na uva e derivados que pode promover a melhora do crescimento através de propriedades osteogênicas, além de atuar como condroprotetor. Assim, a presente pesquisa teve por objetivo avaliar os efeitos da subnutrição proteica na cartilagem do processo condilar da mandíbula (PC) e na sincondrose basioccipital (SBo) de ratos, bem como os processos de renutrição e suplementação com resveratrol nos períodos pré-púbere (21 dias) e púbere (60 dias). Os grupos nutrido (N) e subnutrido (S) foram formados por filhotes cujas mães receberam dieta normoproteica e hipoproteica, respectivamente, desde o período de acasalamento; ao completarem 21 dias de vida extrauterina, época determinada para o desmame, os filhotes foram eutanasiados. A partir do 22&deg; dia de vida, filhotes dos grupos N e S foram mantidos com as respectivas dietas até o 60&deg; dia de vida quando constituíram, respectivamente, os grupos NN e SS. Dois grupos considerados renutridos foram formados por animais do grupo S, que a partir do 22&deg; dia passaram a receber, o primeiro, a dieta normoproteica com 20% de caseína (grupo RN), e o segundo, a dieta normoproteica acrescida de resveratrol (RRv). A cartilagem do PC e a SBo foram processadas através das técnicas histológicas rotineiras e posteriormente submetidas às colorações da HE, Picrossíruis e Safranina-O, para a evidenciação dos componentes celular e colágeno e imunohistoquímica para a marcação de células reativas ao IGF-I e IGF-IR. Os aspectos ultraestruturais também foram analisados através da microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados mostraram que a subnutrição foi capaz de alterar os componentes da matriz extracelular (MEC), acarretando em modificações na secreção das fibrilas colágenas e acúmulo de proteoglicanas nos tecidos; diminuição do número de células imunorreativas ao IGF-I e IGF-IR na cartilagem do PC e atraso no crescimento ósseo endocondral, comprovado através das avaliações quantitativas e morfométricas, em ambos os tecidos. A renutrição com dieta normal foi parcialmente eficaz na recuperação dos parâmetros avaliados, e pode ter provocado uma diminuição da capacidade de resposta celular ao IGF-I. Os efeitos condroprotetores do resveratrol foram fundamentados através da recuperação dos componentes da MEC e organelas dos condrócitos e uma possível diminuição da insensibilidade ao IGF-I; o atraso no crescimento ósseo endocondral foi minimizado através do seu potencial osteogênico (mais acentuado na SBo). Muito embora a recuperação dos tecidos não tenha ocorrido totalmente, diante dos dados apresentados, pode-se afirmar que a suplementação de resveratrol na dieta auxiliou de forma mais efetiva no restabelecimento dos parâmetros afetados pela subnutrição do que somente a recuperação proteica com dieta normal / Undernutrition is a disease caused by inadequate and / or insufficient intake of energy or other biomolecules, which can compromise growth and development of tissues. Together, the mandibular condylar cartilage and basioccipital synchondrosis represent the two effective centers of craniofacial growth, which depends of the factors such as the local production of insulin like growth factor I (IGF-I) and receptor (IGF-IR). Changes in both the peptide and receptor are associated with serious delays in growth and bone development. Among the alternative nutrients to the promotion capacity of nutritional recovery, there is resveratrol, a polyphenol contained in grapes and derivatives that can promote improved growth through osteogenic properties, besides acting as chondroprotective. Thus, the present study aimed to evaluate in rats the effects of protein undernutrition in the mandibular condylar cartilage and basioccipital synchondrosis, as well renutrition and supplementation with resveratrol in pre pubertal periods (21 days) and pubertal (60 days). The nourished groups (N) and undernourished (S) were formed by young whose mothers received normal protein and hypoproteic diet respectively since the breeding season; to complete 21 days of extra-uterine life, given time to weaning, puppies were euthanized. From the 22nd day of life, puppies from N and S groups were kept with their diets until the 60th day of life when constituted, respectively, NN and SS groups. Two groups considered re-nourished were formed by the S group, which from day 22 began receiving, the first, the normal protein diet with 20% casein (RN group), and the second, the normal protein diet plus of resveratrol (RRv). The cartilage of PC and SBo were processed through routine histological techniques, and then subjected to HE, Sirius red and Safranin-O staining for the disclosure of cellular components and collagen and immunohistochemistry for marking cells responsive to IGF-I and IGF-IR. The ultrastructural aspects were also analyzed by transmission electron microscopy. The results showed that undernutrition was able to change the components of the extracellular matrix (ECM) leading to changes in the secretion of collagen fibrils and proteoglycans accumulation in the tissues; decrease in the number of immunoreactive cells to IGF-I and IGF-IR in PC cartilage and delayed endochondral bone growth, confirmed by quantitative and morphometric analysis in both tissues. Renutrition with normal diet was partially effective in recovering the parameters evaluated, and may have caused a decrease in cell responsiveness to IGF-I. The chondroprotective effects of resveratrol were founded by recovering the ECM components and organelles of chondrocytes and a possible decrease in the insensitivity to IGF-I; the delay in endochondral bone growth was minimized by osteogenic potential (more pronounced in SBo). Although the tissue recovery has not fully occurred, the resveratrol supplementation in the diet helped more effectively in restoring the parameters affected by undernutrition than just protein recovery with normal diet
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Protocolo de captação, processamento e transplante de enxertos osteocondrais homólogos a fresco na articulação do joelho / Protocol of procurement, processing and transplantation of fresh osteochondral allografts in the knee joint

Luís Eduardo Passarelli Tirico 07 April 2015 (has links)
O tratamento das lesões condrais e osteocondrais do joelho em pacientes jovens ainda permanece um desafio para os médicos ortopedistas. As técnicas de reparo destas lesões atualmente disponíveis no Brasil, como desbridamento, microfraturas e transplante osteocondral autólogo são insuficientes nos tratamentos das lesões condrais e osteocondrais maiores do que 4 cm2. O transplante osteocondral homólogo a fresco (TOF) na articulação do joelho vem sendo usado em outros países com excelentes resultados. Até o presente momento não existem relatos da utilização desta técnica no Brasil, fato que dificulta o tratamento de pacientes jovens ativos que necessitam de reparo biológico. Foram incluídos neste estudo oito pacientes de 15 a 45 anos portadores de lesões osteocondrais maiores que 4 cm2. Os enxertos a fresco foram obtidos de doadores de órgãos, sendo a articulação do joelho captada sem violação da cápsula articular e transportada ao Banco de Tecidos para processamento. O pareamento doador e receptor foi realizado conforme o tamanho, a localização e a prioridade em lista de espera de acordo com os tecidos captados, sendo os mesmos armazenados no meio de preservação Ham F-12 - GIBCO com glutamax (Invitrogen, Life Technologies, Estados Unidos) e com antibióticos. O procedimento cirúrgico foi realizado pelas técnicas de cilindro osteocondral e de superfície, sendo fixados quando necessário. Os pacientes foram avaliados através dos questionários de IKDC objetivo, IKDC subjetivo, KOOS e índice de Merle D\'Aubigne e Postel modificado. Foram realizados oito TOFs de março a outubro de 2012. A média de idade dos pacientes transplantados foi de 30,1 anos (17- 44 anos) e a média da área transplantada foi de 10,6 cm2 (4,6 - 22,4 cm2). O intervalo médio em dias entre captação e transplante foi de 15,3 (14 - 16 dias) e o número médio de cirurgias prévias ao TOF foi de 2 cirurgias (0-4 cirurgias). A pontuação na escala de IKDC objetiva no pré-operatório foi B em 12%, C em 25% e D em 63% dos pacientes; e 12% A e 88% B aos 18 meses de pós-operatório. A média da pontuação da escala IKDC subjetiva pré-operatória foi de 31,99 ± 13,4 e de 81,84 ± 9,25 em 18 meses de pós-operatório, e da escala KOOS pré-operatória foi de 46,8 ± 20,9 e de 89,58 ± 7,06 em 18 meses de pós-operatório, com melhora significativa ao longo do tempo (p < 0,01) pela análise da variância. A média da pontuação pelo índice de Merle D\'Aubigne e Postel modificado foi de 8,75 ± 2,25 no pré-operatório e de 16,75 ± 2,19 em 18 meses de pós-operatório. O resultado do teste de Friedman para amostras não-paramétricas demonstrou melhora significativa ao longo do tempo (p < 0,01). A padronização da captação, processamento e transplante de enxertos osteocondrais a fresco na articulação do joelho depende de um banco de tecidos altamente especializado e leva a excelentes resultados no tratamento de lesões osteocondrais grandes, sendo atualmente uma boa alternativa de tratamento biológico para pacientes jovens no Brasil / Treatment of chondral and osteochondral lesions of the knee in young patients is still a challenge for Orthopedic Surgeons. The techniques available nowadays in Brazil, as debridement, microfracture and autologous osteochondral transplantation are insufficient for the treatment of chondral and osteochondral lesions larger than 4 cm2. Fresh osteochondral allografts on the knee joint have been used in other countries with great success. Until the present days there are no reports of the utilization of this technique in Brazil, a fact that creates boundaries for the treatment of young active patients that need cartilage repair treatment. Eight patients with age ranging from 15 to 45 years old and osteochondral lesions larger than 4 cm2 were included in this study. Fresh grafts were obtained from organ donors and the knee joint was harvest without violation of synovium capsule and then was transported to the tissue bank for processing. Donor and receptor tissue matching occurred according to size, localization and priority on waiting list and tissue was preserved in Ham F-12 - GIBCO media with glutamax (Invitrogen, Life Technologies, United States) and antibiotics. Surgical procedure was achieved with osteochondral plugs or shell techniques, with additional fixation when needed. Patients were evaluated with IKDC objective, IKDC subjective, KOOS and modified Merle D\'Aubigne-Postel outcome scores. Eight fresh osteochondral allografts were performed from march to october, 2012. The average age was 30.1 years old (17-44) and mean graft surface area was 10.6 cm2 (4.6 - 22.4 cm2). Average time from harvest to transplantation was 15.3 days (14-16 days) and mean number of previous surgical procedures was 2 (0 - 4 procedures). Pre-operative objective IKDC score was B in 12%, C in 25% and D in 63% and was A in 12% and B in 88% in 18 months follow-up. Pre-operative IKDC subjective and KOOS score were 31.99 ± 13.4 and 46.8 ± 20.9; and in 18 months follow-up were 81.84 ± 9.25 and 89.58 ± 7.06, respectively, with a significant increase along time on variance analysis (p < 0.01). Pre-operative mean modified Merle D\'Aubigne-Postel scores were 8.75 ± 2.25 and 16.75 ± 2.19 in 18 months follow-up. Non-parametric Friedman test analysis showed a significant progression in follow-up (p < 0.01). Standards of procurement, processing and utilization of fresh osteochondral allografts in the knee joint relay on a high specialized tissue bank and promote excellent results on the treatment of large osteochondral lesions, being a good alternative of a biologic repair for young patients in Brazil
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Estudo da biocompatibilidade do gel de quitosana associada ao fosfato de glicerol para reparação de defeitos osteocondrais induzidos experimentalmente na tróclea do talus de eqüinos. / Study of chitosan - glycerol phosphate gel biocompatibility in experimentally induced equine talus osteochondral defect.

Edivaldo Aparecido Nunes Martins 29 April 2010 (has links)
Os estudos na área de engenharia de tecidos aplicada à reparação da cartilagem articular estão voltados ao desenvolvimento de uma matriz biocompatível que permita a diferenciação, proliferação e manutenção de células para produção de cartilagem hialina. A quitosana é um biomaterial e vem sendo estudada como suporte para condrócitos e para liberação controlada de substâncias. O objetivo deste trabalho foi estudar a biocompatibilidade do gel de quitosana associada ao fosfato de glicerol para reparação de defeitos osteocondrais induzidos experimentalmente na tróclea do talus de eqüinos. Foram utilizados cinco cavalos da raça Mangalarga, de três anos de idade, e por artroscopia foi criado um defeito osteocondral na tróclea lateral do talus de cada articulação. De forma aleatória um defeito foi escolhido para implante do gel de quitosana - fosfato de glicerol, e o defeito da articulação contralateral foi mantido vazio, servindo como controle. Para acompanhamento da evolução do processo de reparação da cartilagem articular foram realizados os exames físico, radiográfico e ultrassonográfico; análise do líquido sinovial (física, celularidade, quantificação de proteína, condroitim sulfato e ácido hialurônico); e análise da cartilagem articular (histológica e produção de proteoglicanos). Os resultados obtidos de todas as avaliações realizadas foram semelhantes entre os defeitos tratados e controle. O gel de quitosana fosfato de glicerol é biocompatível com o ambiente articular e pode ser indicado para futuras aplicações como suporte de células e para liberação controlada de medicamentos. / The tissue engineering studies applied to articular cartilage repair are focused on the development of scaffold biocompatibility allowing the differentiation, proliferation and cells maintenance providing production of the hyaline cartilage. Chitosan is a biomaterial that has been evaluated as a scaffold for chondrocyts implant and also as a drug-delivery control material. The aim of this work was to evaluate the chitosan glycerol phosphate gel biocompatibility in experimentally induced equine talus osteochondral defect. Five three years old Mangalarga breed horses were submitted to arthroscopy for osteochondral defect production on the lateral troclea of the talus in both tibiotarsal joints by arthroscopy. In a random form one defect was chosen for chitosan-glycerol phosphate gel implant, and the defect of the opposed joint was kept empty and used as a control. For the assessment of the articular cartilage repair process was performed the physic, radiographic and ultrassonographic exams; the synovial fluid analyze (physic, cellularity, protein quantification, chondroitin sulphate and hialuronan); and the articular cartilage analyze (hystologic and proteoglicans production). The results obtained in all evaluations performed were similar between the treated and control defects. The chitosan glycerol phosphate gel is biocompatible with the articular environment and can be indicate for future applications as an scaffold for cells support and drug-delivery control system.
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Avaliação do comportamento do hidrogel álcool de polivinil (PVA) acetalizado e irradiado como substituto da cartilagem articular implantado em joelhos de ratos / Evaluation behavior polyvinyl alcohol (PVA) hydrogel acetalized and irradiated as substitute of articular cartilage implanted in wistar rat knees

Batista, Nilza Alzira 19 August 2018 (has links)
Orientadores: William Dias Belangero, Vanessa Petrilli Bavaresco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-19T13:54:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Batista_NilzaAlzira_M.pdf: 2999795 bytes, checksum: 62c4ef5808533e1bb33930f97cede278 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Hidrogel de álcool de polivinil (PVA) foi utilizado como potencial reparador de defeitos osteocondrais da cartilagem articular. A citotoxicidade in vitro foi avaliada com células Vero e células-tronco mesenquimais da medula óssea de ratos Wistar-Kyoto. Para análise in vivo, os implantes foram colocados em defeitos produzidos nos joelhos de ratos Wistar. Após tempos de seguimento de 0, 3, 6, 12 e 24 semanas, as amostras foram analisadas por microscopia óptica convencional, ensaio mecânico de fluência à indentação, espectrometria de fluorescência raio X e microscopia eletrônica de varredura. Os resultados in vitro motraram que o hidrogel de PVA não afetou a atividade metabólica de ambas as células estudadas, nem tampouco a diferenciação osteogênica das células mesenquimais. Atividade da enzima fosfatase alcalina e formação de matriz mineralizada foram identificadas. O PVA implantado não apresentou sinais de desgastes ou qualquer mudança de aspecto quando comparado com o dia do implante. A interface do implante/tecido mostrou a formação e manutenção de tecido conjuntivo denso e osso recém-formado em todos os grupos estudados. Foi observado um aumento no módulo de fluência e concentração de cálcio e fósforo no PVA longo do tempo. O desempenho do higrogel de PVA irradiados e acetalizadas foi considerado satisfatório para a aplicação proposta / Abstract: Irradiated and acetalized polyvinyl alcohol (PVA) hydrogel was investigated as a potential material for osteochondral defect repair in articular cartilage. The in vitro cytotoxicity of the material was evaluated with Vero cells and mesenchymal stem cells from bone marrow of Wistar-Kyoto rats. For in vivo analyses, plugs of the material were implanted into defects produced in the knees of male Wistar rats-WH. After follow-up times of 0, 3, 6, 12 and 24 weeks, the samples were analyzed by conventional optical and scanning electron microscopy, X-ray fluorescence spectrometry and submitted to mechanical testing of creep indentation. The in vitro results suggest that the PVA hydrogel did not affect the viability and morphology of any of the cell types studied. The hydrogel affected neither the metabolic activity of both studied cells nor the osteogenic differentiation of the mesenchymal cells. Activity of alkaline phosphatase and mineralized organic matrix formation could be identified. The implanted plugs showed no sign of wear or aspect change. The interface plug/tissue exhibited dense connective tissue and newly formed bone in all groups. It was observed an increase in the creep modulus and in the concentration of calcium and phosphorus in the PVA over time. The performance of the irradiated and acetalized PVA was considered satisfactory for the proposed application / Mestrado / Fisiopatologia Cirúrgica / Mestre em Ciências
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Desenvolvimento de menisco de poli(álcool vinílico) (PVA) personalizado com auxílio da prototipagem rápida / Poly (vinyl alcohol) (PVA) meniscus development personalized with the aid of rapid prototyping

Wataya, Celio Hitoshi 20 August 2018 (has links)
Orientadores: Cecilia Amelia de Carvalho Zavaglia, Vanessa Petrilli Bavaresco / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica / Made available in DSpace on 2018-08-20T08:05:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wataya_CelioHitoshi_D.pdf: 3496514 bytes, checksum: a0aa09bccd8fc730f8ee1b6d7c5f5f37 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O menisco como qualquer outro órgão, possui sua importância no funcionamento total do corpo humano. O tratamento para as lesões do menisco tem sido substituído pelo reparo, entretanto, conforme a gravidade da lesão torna-se inevitável a meniscectomia (cirurgia do menisco). Diante desta situação propôs-se desenvolver uma prótese que substitua o menisco lesionado, que possua suas características dimensionais, bem como suas propriedades mecânicas e tribológicas. A utilização da tecnologia da prototipagem rápida foi fundamental para se alcançar efetivamente o objetivo proposto. O material selecionado para a obtenção dessa prótese foi o poli(álcool vinílico) (PVA), por ser um polímero de baixo custo de produção, fácil obtenção e boas características para ser utilizado como um biomaterial. Os resultados dos ensaios mecânicos confirmaram a eficácia desse material. Valores como módulo de compressão 37,4 MPa (± 1,74), o módulo de fluência a indentação E = 3,6 MPa (±0,6); módulo de tensão e deformação, respectivamente iguais a 'SIGMA' = 3,2 MPa (±0,3) e ? = 148,4% (±39), evidenciam a possibilidade de utilização do PVA também como substituto do menisco humano. Outros ensaios também foram realizados como: ensaio in vitro e in vivo, tribológico e a Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC), com resultados favoráveis a esse fim. Para a obtenção do menisco de PVA nas dimensões do menisco do paciente utilizou-se a tecnologia da prototipagem rápida (PR), primeiro para se obter o molde do menisco e depois então, o menisco por envasamento da solução de PVA no molde. Dois detalhes foram fundamentais para se chegar ao produto final, o primeiro foi o tratamento computacional dado à imagem de tomografia do joelho utilizando-se de programas livres como Invesalius e Rhinoceros e o segundo foi o uso do reticulante físico, o reagente orgânico dimetilsulfóxido (DMSO) / Abstract: The meniscus like any other organ, has its importance in the total functioning of the human body. The treatment for meniscal injuries has been replaced by the repair, however, according to the severity of the injury becomes inevitable meniscectomy (meniscus surgery). In this situation it was proposed to develop a prosthesis to replace the injured meniscus, which have their dimensional characteristics as well as their mechanical and tribological properties. The use of rapid prototyping technology was essential to effectively achieve the proposed objective. The material selected for obtaining a prosthesis is poly (vinyl alcohol) (PVA), being a polymer of low production cost, and easy to obtain good characteristics for use as a biomaterial. The results of mechanical tests have confirmed the effectiveness of this material. Values like compression module 37.4 MPa (± 1.74), the modulus of creep indentation E = 3,6 MPa (± 0.6), tensile modulus and strain, respectively equal to ' SIGMA' = 3.2 MPa (± 0.3) and ? = 148.4% (± 39) show the possibility of use of PVA as well as replacement of the meniscus human. Other tests were also conducted as in vitro and in vivo tribological and Differential Scanning Calorimetry (DSC), with results favorable to that end. To obtain the meniscus of PVA in the dimensions of the meniscus of the patient if the technology used rapid prototyping (RP), first to obtain the mold of the meniscus after then, the meniscus by filling the PVA solution in the mold. Two things were essential to reach the final product, the first treatment was given to computer tomography imaging of the knee using free programs like Rhinoceros and InVesalius and the second was the use of physical crosslinking, the organic reagent dimethyl sulfoxide (DMSO) / Doutorado / Materiais e Processos de Fabricação / Doutor em Engenharia Mecânica

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