Orientador: Carlos Henrique Ribeiro Camargo / Coorientador: Bruno das Neves Cavalcanti / Banca: Marcia Carneiro Valera / Banca: Caio Cesar Randi Ferraz / Resumo: Os cimentos endodônticos utilizados na obturação endodôntica permanecem em íntimo contato com os tecidos, e dependendo da sua constituição química podem promover uma resposta inflamatória de extensão e duração indeterminada. Diante disso, é necessário que estes materiais sejam bem tolerados pelos tecidos e, se possível, auxiliem no processo de reparo. Este estudo teve como objetivos analisar a citotoxicidade, por meio dos testes XTT e SRB, de quatro compostos presentes em cimentos endodônticos, bem como a expressão gênica da fosfatase alcalina (ALP) e sialoproteína óssea (BSP), em culturas primárias de fibroblastos de polpa humana. Os métodos do XTT e SRB foram selecionados para avaliação da citotoxicidade dos extratos dos seguintes compostos: BisGMA (bisfenol A glicidil metacrilato), UDMA (uretano dimetacrilato), óleo resina da copaíba e polímero da mamona. Após a obtenção dos extratos originais dos materiais foram realizadas sete diluições seriadas e as mesmas permaneceram em contato com fibroblastos de polpa humana pelo período de 24 h. Após a determinação de duas diluições de média toxicidade dos extratos testados, foi verificada a expressão dos genes da fosfatase alcalina (ALP) e sialoproteína óssea (BSP) pelo método qRT-PCR. Os testes de citotoxicidade indicaram que a sobrevivência celular foi do mais para o menos tóxico: BisGMA > Copaíba > UDMA > Mamona. Em relação ao estudo da expressão gênica, apenas o gene ALP foi utilizado devido à ausência de resultados consistentes em relação à padronização do gene BSP, provavelmente devido a sua baixa expressão nestas células. Assim para o gene ALP, apenas as amostras tratadas com a mamona revelaram um aumento significante na expressão do gene para as duas diluições selecionadas, contudo testes funcionais são necessários a fim... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Endodontic sealers remain for long periods in contact with apical tissues, and depending on their chemical constitution, these periods may be indeterminate. Therefore, it is necessary that these materials be well tolerated by tissues and, if possible, assists in the repair process. This study aims to examine the cytotoxicity by XTT and SRB of monomers and natural extracts presents in endodontic sealers, as well as evaluate the gene expression of alkaline phosphatase (ALP) and bone sialoprotein (BSP) in cultures of human pulp fibroblasts. XTT and SRB will evaluate the cytotoxicity of the following compounds extracts: BisGMA (bisphenol-A-glycidylmethacrylate), UDMA (diurethane dimethacrylate), Copaiba oil resin and castor oil polymer. After obtaining the original extracts materials seven serial dilutions were performed and they remained in contact with the pulp human fibroblasts for a period of 24 h. After determination of two dilutions of low toxicity, gene expression of alkaline phosphatase (ALP) and bone sialoprotein (BSP) were evaluated by the method qRT-PCR. Cytotoxicity test has showed: BisGMA > Copaíba > UDMA > Mamona. For gene expression studies, only the ALP gene was used due to lack of consistent results to standardizing the gene BSP, probably due to the low expression in these cells. Thus, ALP gene for the samples treated with castor revealed an increase in gene expression for the two dilutions selected, however the functional tests are necessary to verify if indeed increased gene expression generated conversion... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-11T17:26:02Z No. of bitstreams: 2 TESE Gibson Gomes de Oliveira.pdf: 5790719 bytes, checksum: a8655e085c416ddd34efe710ba637725 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T17:26:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Gibson Gomes de Oliveira.pdf: 5790719 bytes, checksum: a8655e085c416ddd34efe710ba637725 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-05-29 / CAPES e FACEPE / Adenocalymma imperatoris-maximilianii (Wawra) L.G. Lohmann (Bignoniaceae) é uma liana conhecida como cipó-amarelo no Nordeste brasileiro, utilizada para afecções da pele e como alimento para caprinos. O presente estudo teve como objetivo caracterizar a morfoanatomia, histoquímica, realizar prospecção fitoquímica e atividades biológicas, frente a vírus, bactérias e linhagens de células tumorais, dos extratos aquosos, metanólicos, hexânicos, clorofórmicos, diclorometânicos e acetato de etila, das raízes, caules, folhas e flores. Para o estudo anatômico foram utilizadas técnicas para montagem de lâminas semipermanentes. Na prospecção fitoquímica preliminar (extrato metanólico) utilizou-se cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatográfia a gás- acoplada a espectométria de massa-CG-EM (extratos: hexano, clorofórmio, diclorometano e acetato de etila). Para a análise antiviral, foi utilizada linhagem celular BHK-21-rep-FA17D-LucNeoIres. Para os testes antibacterianos utilizou-se metodologia de Concentração Inibitória Mínima e Bactericída frente á Staphylococcus aureus (CIM e CBM). Para análise citotóxica frente ás linhagens celulares: NCI-H292-carcinoma mucoepidermoide de pulmão humano; HEp-2-carcinoma de laringe humana; HL-60 -leucemia promielocitica aguda e MCF-7-câncer de mama humano, utilizou-se o método do MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromido). Anatomicamente foram videnciados: estômatos paracíticos, anisocíticos e ciclocíticos, cutícula espessa, flange cuticular, presença de cristais prismáticos, tricomas glândulares e tectores, calotas de esclerênquima circundando os feixes vasculares, histoquímicamente evidenciou-se polifenóis totais, amido e lipídeos totais no mesofilo dos foliólos. Preliminarmente, foram evidenciados por CCD: flavonóides, açucares redutores, taninos, derivados cinâmicos, terpenos/esteróides, heterosídeos saponinícos. Na análise por CG-EM: Lupeol, lupenona, stigmasterol, β–amirina, β–sitosterol, esqualeno, neofitadieno, ácido octadeca-9,12-dienóico éster metílico, Ácido 1,2-benzeno, bis-(2-etil-hexil). No presente trabalho, foram identificados dez alcalóides pela primeira vez para família Bignoniaceae. O extrato bruto aquoso das raízes, caules e folhas testados frente ao vírus da febre amarela, não apresentou atividade, e o extrato bruto metanólico das raízes, caules e folhas não foram tóxico frente ás linhagens de células tumorais tratadas (NCI-H292-carcinoma mucoepidermoide de pulmão humano; HEp-2-carcinoma de laringe humana; HL-60 -leucemia promielocitica aguda e MCF-7-câncer de mama humano). Os extratos brutos das partes vegetativas apresentaram atividade antibacteriana (CIM e CBM) que variaram de 32 á 1024μg/mL, frente á Staphylococcus aureus Multiresistente e Multisensíveis. Face ao exposto, a espécie Adenocalymma imperatoris-maximilianii, pode ser considerada uma fonte promissora de moléculas bioativas para terapêutica moderna. Estas são as primeiras contribuições químicas e biológicas para a espécie.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-05T13:59:53Z No. of bitstreams: 1 Ana Paula Castor Batista.pdf: 5193246 bytes, checksum: 330cdf055cf956cd9138d5c1adc67230 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-05T13:59:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Paula Castor Batista.pdf: 5193246 bytes, checksum: 330cdf055cf956cd9138d5c1adc67230 (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Among the tumor models can highlight the Ehrlich ascites tumor (TAE) cells and CaCO2. These experimental models are a useful resource for the study of tumorigenesis by allowing quantification and analysis of growth and regression of the tumor mass. Among the substances oncostáticas melatonin has shown effectiveness in limiting tumor cell proliferation. Thus the study investigated the action of melatonin on cell proliferation of human colon carcinoma (Caco-2) cells obtained from a murine model of Ehrlich ascites tumor. We evaluated tumor growth, time and percentage of survival, metastasis and ultrastructure of cells in mice undergoing TAE pinealectomy or not, underwent dose of 150 and 300 μg/30g animal weight of melatonin for 12 consecutive days. For cells CaCo-2 investigated the effect of different concentrations (50, 25, 12.5, 6.25, 3.125, 1.56 and 0.78 mg / mL) of melatonin in order to check the cytotoxicity and ultrastructural . According to the results it was found that the abdominal circumference of melatonin-treated mice was significantly reduced, more significant at a dose of 300 μg. Significant reduction, regardless of the dose, the volume of ascites fluid and cell viability TAE, and increasing the lifespan of the animals. Ultrastructurally TAE cells after treatment with melatonin showed morphological changes, with the cell surface displaying numerous projections, and some with fork. In the cytoplasm was evidenced process of degeneration of mitochondria and abundant vacuoles. The nucleus appeared quite fragmented and without evidence of heterochromatic nucleolus Histopathology of organs showed metastasis in the lungs and kidneys, only the control group animals. Lung tumor cells were found in the alveoli and bronchioles. Kidney revealed the presence of tumor cells both in cortical region but also in the spinal region. No metastasis was observed in liver, small intestine and large intestine in any of the animals of the experimental groups. Cytotoxicity was inversely proportional to the concentrations of melatonin, the concentration 0.78 μg/mL to that caused greater toxicity in Caco-2 cells, followed by concentration 1.56 μg/mL, and the concentration of 50μg/mL was that showed the lowest cytotoxicity not differing from the other concentrations and control. The ultrastructural aspect of cells treated with melatonin did not show formation of monolayers. In the group in which cells showed less cytotoxicity CaCo-2 (50 μg /mL melatonin) was visualized changes in cell morphology, presence of microvilli, large nucleus with peripheral heterochromatin areas, with numerous cytoplasmic vacuoles, mitochondrial degeneration, abundant ribosomes and reduction of reserves glycogen. However, treatments that showed cytotoxicity medium and high (1.56 and 0.78 μg/ml of melatonin, respectively), CaCo-2 cells also showed altered morphology, but with characteristics degeneration of cells in the presence of numerous vacuoles and absence of microvillus. It was also observed absence of glycogen, a significant reduction of ribosomes, mitochondrial degeneration, vacuoles, sometimes containing electron-lucent substance, and nuclear fragmentation. Thus, we can conclude that daily doses of 150 and 300 μg/30g of body weight of melatonin for 12 consecutive days have a very effective oncostática activity on cells TAE and that doses of 1.56 and 0.78 μg/mL Melatonin promotes cytotoxicity in cells CaCo-2 / Dentre os modelos tumorais podemos destacar o tumor ascítico de Ehrlich (TAE) e as células caco2. Esses modelos experimentais constituem um recurso útil para o estudo da gênese tumoral, por permitir quantificação e análise do crescimento e regressão da massa tumoral. Dentre as substâncias oncostáticas a melatonina tem mostrado eficácia em limitar a proliferação das células tumorais. Assim a pesquisa investigou a ação da melatonina sobre a proliferação de células do carcinoma colônico humano (caco-2) e células obtidas de um modelo murino do tumor ascítico de Ehrlich. Avaliou-se o crescimento tumoral, tempo e percentual de sobrevivência, ultraestrutura e metástase das células TAE em camundongos submetidos ou não a pinealectomia, utilizando-se as dosagens de 150 e 300μg/30g peso do animal de melatonina por 12 dias consecutivos. Para as células caco2 investigou-se o efeito de diferentes concentrações (50; 25; 12,5; 6,25; 3,125; 1,56 e 0,78μg/mL), in vitro, de melatonina com a finalidade de verificar a citotoxicidade e a ultra-estrutural. De acordo com os resultados verificou-se que a circunferência abdominal dos camundongos tratados com melatonina foi reduzida significativamente, sendo mais expressiva na dosagem de 300μg. Houve redução significativa, independente da dosagem, do volume do líquido ascítico e da viabilidade das células TAE, além do aumento do tempo de vida dos animais. Ultra-estruturalmente as células TAE após tratamento com melatonina mostraram alterações morfológicas, com a superfície celular apresentando numerosas projeções, sendo algumas com bifurcação. No citoplasma evidenciou-se processo de degeneração das mitocôndrias e abundantes vacúolos. O núcleo apresentou-se fragmentado e bastante heterocromático sem evidencias de nucléolo A análise histopatológica dos órgãos revelou metástase nos pulmões e rins, apenas nos animais dos grupos controle. Nos pulmões foram evidenciadas células tumorais nos alvéolos e bronquíolos. Nos rins evidenciou-se a presença das células tumorais tanto na região cortical como também na região medular. Não foi observada metástase no fígado, intestino delgado e intestino grosso em nenhum dos animais dos grupos experimentais. A citotoxicidade foi inversamente proporcional às concentrações de melatonina, sendo a concentração 0,78 μg/mL a que causou maior toxicidade nas células caco-2, seguida da concentração 1,56 μg/mL, e a concentração de 50 μg/mL foi a que apresentou a menor citotoxicidade não diferindo das demais concentrações e do controle. O aspecto ultra-estrutural das células tratados com melatonina não mostrou a formação de monocamadas. No grupo em que as células caco2 apresentaram menor citotoxicidade (50 μg/mL de melatonina) foi visualizado alteração na morfologia celular, presença de microvilosidades, núcleo volumoso com áreas heterocromáticas periféricas, citoplasma com numerosos vacúolos, degeneração mitocondrial, ribossomos abundantes e redução das reservas de glicogênio. No entanto, nos tratamentos que mostraram média e alta citotoxicidade (1,56 e 0,78 μg/mL de melatonina, respectivamente), as células caco2 apresentaram-se também com morfologia alterada, porém com características de células em degeneração pela presença de numerosos vacúolos e ausência de microvilosidades. Foi observado ainda ausência de glicogênio, redução significativa de ribossomos, degeneração mitocondrial, vacúolos, às vezes contendo substância elétron-lucente, além de fragmentação nuclear. Assim, podemos concluir que doses diárias de 150 e 300μg por 30g de peso do animal de melatonina por 12 dias consecutivos teve uma atividade oncostática bastante efetiva sobre as células TAE e que concentrações de 1,56 e 0,78 μg/mL de melatonina promove citotoxicidade nas células caco2.

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Paula R Nunes.pdf: 2497503 bytes, checksum: 2a22fb8d4cdc25835230841f6fc7b21d (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 / The complex of gold K[Au(CN2)], for example, was introduced at the beginning of the twentieth century for the treatment of tuberculosis and then replaced for the gold thiolates (I), which were used in the decade of 30 for the treatment of Rheumatoid Arthritis. The exploration of gold complexes for the use as an anti-cancer agent, in an attempt to find a drug less toxic that cisplatin. The current study aimed to evaluate potential cytotoxic and genotoxic, as well as the mechanism of cell death of three new gold-based compounds, which is bioactive substance of synthetic origin, using different cell lines in vitro. In the cytotoxicity assay the effects of the three gold complexes were evaluated in four tumor cell lines (B16-F10, K562 and A20) and in two normal lines (L-929, MRC-5) through MTT test, the compounds at different concentrations (0.2, 2, 20, 50, 100, 200 μM) per 48 hours of treatment. The study was conducted to test electrophoresis on agarose gel at concentrations corresponding to IC50 of the strains tested. Were also performed cell cycle analysis and comet test. In statistical analysis for comparison between treated groups and control them, was used Anova, in a single criterion and Dunnet's Post-test (GraphPad Prism 3.02). The results obtained with MTT assay the tested strains MRC-5, L-929, B-16-F10, A20, K562, for the Spar Au compound was (104, 65.1, 45, 48.3, 61 2, respectively) for the Au Levo compound was (52.8, 181, 28.8, 48.9, 50, respectively) and the Au Nor compound was (65.1, 79.2, 26 6, 24.9, 55, respectively). After the screening of compounds, more specific tests were performed only with some strains that showed more promising results. For K562 cells and B16-F10 treated with Au Levo and Au Spar, respectively, observed that the test showed no degradation of DNA by apoptosis in the tests performed with 48 hours of treatment with the compounds. The line B16-F10 treated with the compound Au Spar did not significantly alter cell cycle kinetics and no reported significant damage to DNA after 48 hours of treatment. More specific tests have to be made in order to deepen the mechanism of cell death, since the tests were not enough to demonstrate how the compound is acting. / O complexo de ouro K[Au(CN)2], por exemplo, foi introduzido na virada do século XX para o tratamento da tuberculose e logo após substituído pelos tiolatos de ouro (I), que foram usados nos anos 30 para o tratamento da artrite reumatóide. A exploração de complexos de ouro para uso como agente anticâncer foi iniciada na tentativa de se obter uma droga menos tóxica que a cisplatina. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o potencial citotóxico e genotóxico, assim como o mecanismo de morte celular de três novos compostos a base de ouro, que tem como substância bioativa de origem sintética utilizando diferentes linhagens celulares in vitro. No ensaio de citotoxicidade os efeitos dos três complexos de ouro foram avaliados frente quatro linhagens tumorais (B16-F10, K562 e A20) e duas linhagens normais (L-929 e MRC-5) através do teste de MTT, em diferentes concentrações dos compostos (0,2; 2; 20; 50; 100; 200 μM) por 48 horas de tratamento. Foi realizado para o estudo o ensaio de eletroforese em gel de agarose nas concentrações correspondentes a IC50 das linhagens testadas (Sambrook, 2001), foram realizados também análises de ciclo celular e teste cometa. Análise estatística para comparação entre os grupos tratados e controle foi utilizado Anova segundo um único critério e pós-teste Dunnet s (software GraphPad Prism V4). Os resultados obtidos através do ensaio de MTT frente às linhagens testadas MRC-5, L-929, B16- F10, A20 e K562 para o composto Au Spar foi (104; 65,1; 45; 48,3; 61,2, respectivamente) para o composto Au Levo foi (52,8; 181; 28,8; 48,9; 50, respectivamente) e para o composto Au Nor foi ( 65,1; 79,2; 26,6; 24,9; 55, respectivamente). Após a triagem dos compostos, testes mais específicos foram realizados apenas com algumas linhagens que apresentaram resultados mais promissores. Para a linhagem K562 e B16-F10 tratadas com Au Levo e Au Spar respectivamente, observou-se que no ensaio de degradação de DNA não apresentaram padrão de degradação por apoptose nos ensaios realizados com 48 h de tratamento com os compostos. A linhagem B16-F10 tratada com o composto Au Spar não alterou significativamente a cinética celular, além de não apresentar danos significativos ao DNA após 48 h de tratamento. Testes mais específicos devem ser realizados com a finalidade de aprofundar no mecanismo de morte das células, visto que os testes realizados não foi o bastante para demonstrar qual é a via pelo qual o composto está agindo.

Orientadores: Patrícia da Silva Melo, Priscyla Daniely Marcato Gaspari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T07:03:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DePaula_LarissaBarbosa_M.pdf: 38500312 bytes, checksum: 3a0fd9c71b979fe937cf40664c0df057 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Queimaduras representam um problema de saúde pública, gerando um gasto anual de cerca de R$ 55 milhões ao Sistema Único de Saúde (SUS). Os produtos destinados ao tratamento de queimaduras são em sua grande maioria importados, tornando relevantes estudos que visem ao desenvolvimento de materiais com características adequadas ao tratamento e produzidos a partir de matérias-primas de baixo custo e fácil obtenção. O objetivo deste trabalho foi avaliar os possíveis efeitos tóxicos e o potencial de cicatrização de S-Nitrosoglutationa (GSNO) encapsulado em nanopartículas poliméricas (alginato-quitosana e poli (?-caprolactona) (PCL) recobertas por quitosana) e de nanopartículas de prata (AgNPs). O GSNO foi sintetizado através de reação de S-Nitrosação direta de glutationa e caracterizado por espectrofotometria. As nanopartículas de alginato-quitosana (AG/CS) contendo GSNO foram preparadas através do método de gelificação iônica. As nanopartículas de PCL recobertas por quitosana (PCL/CS) e contendo GSNO foram preparadas através do método de dupla emulsão (água/óleo/água) e evaporação do solvente. Ambas as nanopartículas foram caracterizadas por espectroscopia de correlação de fótons (ECF) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). As AgNPs foram produzidas extracelularmente por método biotecnológico utilizando-se o fungo Fusarium oxysporum e caracterizadas por ECF e microscopia eletrônica de transmissão (MET). A toxicidade in vitro das nanopartículas foi avaliada através de ensaios de citotoxicidade utilizando-se cultura de células de linhagens pré-estabelecidas e o potencial de cicatrização foi avaliado através de indução de queimadura térmica em ratos Wistar machos, os quais foram posteriormente eutanaziados para avaliação da toxicidade in vivo das nanopartículas. As AG/CS contendo GSNO apresentaram diâmetro médio de 321,0 ± 12,2 nm e potencial Zeta de +37,6 ± 0,6 mV. As PCL/CS contendo GSNO apresentaram-se esféricas, com diâmetro médio de 448,6 ± 35,38 nm e potencial Zeta de +23,11 ± 4,75 mV. As AgNPs apresentaram-se esféricas e altamente estáveis, com diâmetro médio de 7,3 ± 3,0 nm e potencial Zeta de -31,1 ± 2,09 mV. As nanopartículas apresentaram-se pouco tóxicas in vitro e in vivo. O tratamento das lesões com as nanopartículas reduziu a área lesionada em praticamente 100% após 35 dias, diminuindo o tempo necessário para a diferenciação de fibroblastos em miofibroblastos, e revertendo o processo inflamatório mais rapidamente. Nossos resultados indicam que os sistemas nanoparticulados estudados podem fornecer uma nova e eficaz direção terapêutica para o tratamento de queimaduras / Abstract: Burn injuries represent a public health problem, generating an annual cost of about R$ 55 million to the Brazilian Unified Health System. The products for the treatment of burns are mostly imported, so studies aimed at developing materials with appropriate characteristics to the treatment and produced from cheap raw materials and easily obtained are relevant. The aim of this study was to evaluate the possible toxic effects and healing potential of S-Nitrosoglutathione (GSNO) encapsulated in polymeric nanoparticles (alginate-chitosan and chitosan-coated poly (?-caprolactone) (PCL)) and silver nanoparticles (AgNPs). GSNO was synthesized by direct S-Nitrosation reaction of glutathione (GSH) and characterized by spectroscopic analysis. Alginate-chitosan nanoparticles (AG/CS) loaded with GSNO were prepared through ionic gelation method. Chitosan-coated PCL nanoparticles (PCL/CS) loaded with GSNO were prepared by the double emulsion method (water/oil/water) and solvent evaporation. Both of the nanoparticles were characterized by dynamic light scattering (DLS) and scanning electron microscopy (SEM). AgNPs were produced extracellularly by a biotechnological method using the fungus Fusarium oxysporum and characterized by DLS and transmission electron microscopy (TEM). The in vitro toxicity of the nanoparticles was assessed through cytotoxic assays using cell culture of predetermined strains and healing potential was evaluated through thermal burn induced in male Wistar rats, which were subsequently euthanized for evaluation of the in vivo toxicity of the nanoparticles. AG/CS loaded with GSNO had an average diameter of 321.0 ± 12.2 nm and Zeta potential of +37.6 ± 0.6 mV. PCL/CS loaded with GSNO were spherical, with an average diameter of 448.6 ± 35.38 nm and Zeta potential of +23.11 ± 4.75 mV. AgNPs were spherical and highly stable, with an average diameter of 7.3 ± 3.0 nm and Zeta potential of -31.1 ± 2.09 mV. The nanoparticles were slightly toxic in vitro and in vivo. The treatment of the burns with the nanoparticles reduced the burned area in almost 100% after 35 days, decreasing the required time for fibroblasts differentiation into myofibroblasts, and reversing the inflammatory process faster. Our results showed that the studied nanoparticulated systems may provide a novel and effective therapeutic direction for the treatment of burn injuries / Mestrado / Bioquimica / Mestra em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Italo Odone Mazali / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-26T13:56:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Corbi_FabianaCristinaAndrade_D.pdf: 10094232 bytes, checksum: 10529e501237e454e749493b87002f92 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Na busca de um material multifuncional, esta Tese propõe a síntese de uma nanoestrutura hierárquica caroço@casca, sendo o caroço de magnetita e a casca de sílica mesoporosa. Desta combinação surge uma plataforma magneto-porosa que, além das propriedades magnéticas, pode apresentar outras propriedades de acordo com a espécie incorporada na camada de sílica. As partículas do caroço magnético foram obtidas via síntese solvotérmica a partir de cloreto de ferro(III) controlando-se a fase cristalina e a morfologia. A casca de sílica mesoporosa foi obtida via método sol-gel a partir do tetraetilortossilicato (TEOS), sendo o brometo de cetiltrimetilamônio o agente direcionador na formação dos poros. A fase cristalina foi caracterizada por medidas de difração de raios X (XRD), espectroscopia no infravermelho (IR) e Raman, e termogravimetria (TGA/DTA). A morfologia e a nanoestruturação do sistema foram analisadas por microscopia eletrônica de varredura (SEM), enquanto que as propriedades magnéticas foram determinadas por magnetometria de amostra vibrante (VSM), SQUID e hipertermia magnética. Em um primeiro momento, investigou-se a potencialidade do sistema no carregamento e liberação de fármacos utilizando-se um fármaco antibacteriano, a levofloxacina. Para a plataforma carregada com levofloxacina foram realizados ensaios de atividade antibacteriana, os quais demonstraram que o sistema apresenta atividade contra cepas Gram-positivas e Gram-negativas. Ensaios de citotoxicidade mostraram que tanto as partículas de magnetita quanto a plataforma magneto-porosa não são citotóxicas para células saudáveis (NIH/3T3) o que viabiliza sua aplicação biológica. O complexo luminescente diaquatris(tenoiltrifluoroacetonato)európio(III) foi incorporado à plataforma e o monitoramento do tempo de vida da emissão do complexo em função da temperatura revelou que o sistema funciona como uma sonda de temperatura, considerando-se que foi obtida uma variação linear de temperatura na faixa de interesse biológico (entre 36-45 °C). Nas medidas de hipertermia magnética a plataforma magneto-porosa elevou a temperatura da água em 8 °C. Aliando a este resultado à propriedade de sonda de temperatura, teríamos um termômetro que poderia ser utilizado in situ em procedimentos de terapia do câncer por aquecimento. Portanto, o conjunto de resultados obtidos revela que foi possível obter uma plataforma magneto-porosa multifuncional, e que diferentes ensaios podem ser realizados com o sistema visando diversas aplicações / Abstract: Due to the high versatility, the core@shell nanostructures represent a class of materials in the interface between chemistry and different areas, in which they find applications. Among them, the biomedical and pharmaceutical, catalysis and photoluminescence applications can be emphasized. Searching for a multifunctional material, this Thesis proposes the synthesis of a hierarchical nanostructure core@shell, being the core of magnetite and the shell of mesoporous silica. From this arrangement a magneto-porous platform is obtained, in which besides the magnetic property other properties can be achieved according to the species incorporated into the silica layer. The magnetic core was obtained by solvothermal synthesis from iron(III) chloride by controlling the crystalline phase and morphology. The shell of mesoporous silica was obtained by the sol-gel method from tetraethylorthosilicate (TEOS), being the cetyltrimethylammonium bromide the directing agent in the formation of pores. The crystalline phase was characterized by X-ray diffraction (XRD) measurements, infrared (IR) and Raman spectroscopies and thermogravimetry (TGA/DTA). The morphology and the nanostructure of the system were analyzed by scanning electron microscopy (SEM), while the magnetic properties were determined by vibrating magnetometry sample (VSM), SQUID and magnetic hyperthermia. At first, we investigated the potential of the system in the loading and releasing of drugs using the antibiotic levofloxacin. Antibacterial assays have demonstrated that the system is active against Gram-positive and Gram-negative bacterial strains. Cytotoxicity assays showed that the particles of magnetite and the magneto-porous platform are not cytotoxic to healthy cells (NIH/3T3), which enables its biological application. The diaquatris(tenoyltrifluoroacetonate)europium(III) luminescent complex was incorporated into the platform and studies of monitoring lifetime of the emission of the complex as a function of temperature revealed that the system operates as a temperature probe, since a linear variation was observed in the temperature range of biological interest (between 36-45 °C). In magnetic hyperthermia measurements, in the presence of the magneto-porous platform the water temperature was elevated by 8 ° C. Combining this result to the property of temperature probe, we could have a thermometer that may possibly be used in situ in cancer therapy procedures by heating. Therefore, the set of results show that it is possible to obtain a magneto-porous multifunctional platform and different assays may be performed with the system aiming for diverse applications / Doutorado / Quimica Inorganica / Doutora em Ciências

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Iara.pdf: 1398731 bytes, checksum: 09725a515b6fb603a60d85a3604b669e (MD5) Previous issue date: 2008-03-11 / Synadenium umbellatum Pax is a vegetable belonging to Euphorbiaceae, popularly known as cola-nota , milagrosa , and cancerola , is empirically used as a natural remedy for fighting cancer. In this study we assessed the antitumoral and antiangiogenic activity in vitro and in vivo of ethanolic crude extract and hexanic and chloroformic fractions of S. umbellatum. Citotoxicity assessment tests in vitro were carried out through MTT reduction and Trypan blue exclusion methods, by using Ehrlich ascitic tumor cells and K-562 lineage. Antitumoral and antiangiogenic activity in vivo essays were carried out through Ehrlich ascitic tumor experimental model in Swiss mice. Ethanolic crude extract was tested in 5, 10 and 25 mg/kg/day doses, whereas chloroformic fraction was tested in 1.2; 2.3 and 5.8 mg/kg/day doses, and hexanic fraction in 0.4; 0.8; and 1.9 mg/kg/day doses, for 10 days. The results showed concentration-dependent citotoxic activity, presenting through MTT method the inhibitory concentrations of 50% (Cl 50) 0.4, 0.1, and 0.08 mg/ml for ethanolic crude extract, chloroformic and hexanic fractions, respectively. And in the Trypan blue exclusion test, cell inhibition was 75%, 68%, and 80%, and 95%, 58%, and 64% for Ehrlich ascitic tumor cells and K-562 lineage, respectively. Ethanolic crude extract in the 25mg/kg/day dose increased the animals survival rate, parallely with the reduction of the amount of tumoral cells, beyond present activity on the tumor angiogenesis, and reduce vascular endothelial growth factor levels. Chloroformic and hexanic fractions, in in vivo essays, did not present significant outcomes. Thus, can conclude in the condition this study, that S. umbellatum shows antitumoral and antiangiogenic activity / Synadenium umbellatum Pax é uma planta pertencente à família Euphorbiaceae, conhecida popularmente como cola-nota , milagrosa e cancerola . É usado empiricamente como remédio natural para o combate ao câncer. Neste trabalho avaliou-se a atividade antitumoral e antiangiogênica in vitro e in vivo do extrato bruto etanólico e das frações clorofórmica e hexânica de S. umbellatum. Testes in vitro de avaliação de citotoxicidade foram realizados, usando os métodos de redução do MTT e de exclusão do azul de Tripano, utililizando células do tumor ascítico de Ehrlich e da linhagem K-562. Ensaios in vivo de atividade antitumoral e antiangiogênica foram realizados usando o modelo experimental do tumor ascítico de Ehrlich, em camundongos Swiss. O extrato bruto etanólico foi testado nas doses 5, 10 e 25 mg/kg/dia, enquanto a fração clorofórmica foi testada nas doses 1,2; 2,3 e 5,8 mg/kg/dia e a fração hexânica nas doses de 0,4; 0,8 e 1,9 mg/kg/dia, por 10 dias. Os resultados obtidos mostraram atividade citotóxica de forma concentraçãodependente, apresentando pelo método de MTT as concentrações inibitórias 50% (CI50) 0,4; 0,1 e 0,08 mg/ml para o extrato bruto etanólico, fração clorofórmica e fração hexânica, respectivamente. Já no teste de exclusão do azul de Tripano, a inibição celular foi de 75, 68 e 80% e 95, 58 e 64% para as células do tumor ascítico de Erlich e linhagem K-562, respectivamente. O extrato bruto etanólico na dose de 25 mg/kg/dia aumentou a sobrevida dos animais paralelamente com a redução do número de células tumorais, além de apresentar atividade sobre a angiogênese do tumor e reduzir os níveis de fator de crescimento endotelial vascular. As frações clorofórmica e hexânica, nos ensaios in vivo, não apresentaram resultados significativos. Assim, pode-se concluir nas condições deste estudo, que o S. umbellatum apresenta atividade antitumoral e antiangiogênica

As plantas do gênero Copaifera mais bem conhecidas como \"copaibeira\" são árvores tropicais, reconhecidas pela produção de uma oleorresina extraída do tronco, a qual vem sendo empregada por mais de 500 anos na medicina tradicional popular. Entre as espécies mais abundantes no Brasil destaca-se Copaifera langsdorffii L., que nas suas folhas têm um grande número de compostos fenólicos com potencial atividade biológica como antioxidante. Este estudo teve como finalidade isolar compostos das classes de flavonoides e galoilquínicos presentes nas folhas de C. langsdorffii e investigar seus possíveis efeitos citoprotetores frente à intoxicação com metais pesados. Foi obtido o extrato hidroalcoólico das folhas, e foi submetido a partições líquido-líquido. A fração em acetato de etila foi fracionada através de cromatografia contracorrente de alta velocidade (HSCCC), e a fração em n-butanol por cromatografia de exclusão em gel Sephadex. Foram isolados e identificados por RMN, dois flavonoides (quercitrina e afzelina) da fração em acetato de etila e dez derivados galoilquínicos da fração n-butanólica. Os flavonoides e dois derivados galoilquínicos (AGQ3 e AGQ4), foram avaliados em ensaios de citotoxidade com o protocolo de alamar blue nas linhagens celulares de hepatocarcinoma humano (HepG2) e feocromocitoma da medula suprarrenal de rato (PC12), em três diferentes concentrações (1, 10 e 100 ?M) por 24 h. A segurança do composto AGQ4 também foi avaliada através do ensaio de eficiência clonogênica contra a linhagem de pulmão de hamster chinês (V79). Após foram feitos ensaios de associação realizando pré-tratamentos de 1 hora com os compostos, para posterior exposição a doses tóxicas dos metais. Os ensaios de citotoxidade demostraram que nenhuma das concentrações avaliadas dos quatro compostos afetou a viabilidade das linhagens celulares. O ensaio de eficiência clonogênica mostrou que apenas uma concentração de 3,8 mM consegue reduzir significativamente a viabilidade na linhagem V79, mostrando o AGQ4 como um composto seguro para o uso in vitro. Os ensaios de associação mostraram que os quatro compostos têm efeito citoprotetor significativo na linhagem HepG2, contra mercúrio e chumbo a exceção do AGQ3 que em concentração de 100 ?M não mostrou proteger contra o chumbo. Por outro lado, os compostos não foram ativos contra o mercúrio na linhagem PC12, mostrando efeito contrário, pois os tratamentos metal-composto diminuíram a viabilidade em comparação com os tratamentos só com o metal. Apenas nas concentrações de 1 e 10 ?M se evidenciou efeito protetor dos compostos contra o chumbo. Em geral também foi observado um efeito de menor atividade na maior concentração do composto, que pode estar relacionado ao efeito pró-tóxico que alguns polifenóis apresentam em concentrações maiores. Tanto os flavonoides quanto os derivados galoilquínicos isolados de C. langsdorffii se mostraram com potencial na citoproteção contra a exposição ao chumbo e ao mercúrio / The Copaifera plants, better known as \"copaibeira\", are tropical trees recognized by the production of an oleoresin extracted from the tree trunk, which has been used for more than 500 years in traditional folk medicine. Among the most abundant species in Brazil is Copaifera langsdorffii L., which in its leaves have a large number of phenolic compounds with potential biological activity as antioxidant. Then, this study aimed to isolate compounds of the classes of flavonoids and galloylquinic derivatives present in the leaves of C. langsdorffii and to investigate their possible cytoprotective effects against heavy metal poisoning. The hydroalcoholic extract of the leaves was obtained and submitted to liquid-liquid partitions. The ethyl acetate fraction was subjected to high-speed countercurrent chromatography (HSCCC), and the fraction in n-butanol was subjected to Sephadex gel exclusion chromatography. Two flavonoids (quercitrin and afzelin) from the ethyl acetate fraction and ten galloylquinic derivatives of n-butanolic fraction were isolated and identified by NMR, using semi-preparative high performance liquid chromatography (CLAE-UV). Flavonoids and two galloylquinic acids (AGQ3 and AGQ4) were evaluated in alamar blue cytotoxicity assays in HepG2 cell lines (human hepatocarcinoma cells) and PC12 (rat adrenal pheochromocytoma cells), in three different concentrations (1, 10 and 100 ?M) for 24 h. The safety of compound AGQ4 was also assessed by the clonogenic efficiency assay against V79 (Chinese hamster lung) cell line. Once was proved that compound concentrations did not affect cell viability, association assays were performed by one hour pre-treatments of the compounds for further exposure to toxic doses of the metals. Cytotoxicity assays demonstrated that none of the evaluated concentrations of the four compounds affected the viability of the cell lines. The clonogenic efficiency assay showed that only a concentration of 3.8 mM of AGQ4 can significantly reduce viability in the normal cell line, showing the galloylquinic derivative as a highly safe compound for in vitro use. The association assays showed that the four compounds have a significant cytoprotective effect for the HepG2 cell line against Hg and Pb, except for AGQ3 which at 100 ?M concentration did not show protection against lead. Also the compounds did not show activity against Hg in the cell line PC12 and, in addition, they gave the opposite effect by decreasing cell viability in comparison with the treatments with only the metal. Only the concentrations of 1 and 10 ?M showed a protective effect of the compounds against lead. In general, a lower activity effect was also observed at the higher concentrations of the compounds, which may be related to the protoxic effect of some phenolic compounds. Both flavonoids and galloylquinic acid derivative compounds showed potential on the cytoprotection for exposure to lead and methylmercury.

Alguns estudos têm sido realizados sobre a associação de materiais restauradores odontológicos e soluções antissépticas, pois, em especial a clorexidina (CHX), além dos benefícios apresenta efeitos colaterais. Assim tornam-se necessários estudos de soluções alternativas tão eficazes quanto à CHX, porém sem os efeitos colaterais destas. Neste anseio, foi que se pesquisou Casearia sylvestris (CS) que é uma planta medicinal que oferece benefícios, mas, no entanto, pouco se sabe sobre o efeito desta sobre materiais restauradores estéticos (MRE) e algumas dúvidas permanecem sobre seu potencial antimicrobiano e sua toxidade sobre células. O objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades biológicas do óleo essencial (OE) de CS e o efeito deste sobre MRE. Assim, o OE foi obtido por hidrodestilação e caracterizado por Cromatografia a gás acoplada a Espectrometria de massas (CG-EM) e os valores de concentração inibitória e bactericida mínimas foram determinados pelo método de microdiluição frente às espécies Streptococcus (mutans, mitis, sanguinis e salivarius) e Enterococcus faecalis. Avaliou-se também a citotoxidade do OE de CS e da formulação de enxaguatório bucal contendo o OE bioativo em fibroblastos de camundongos. Para a avaliação da rugosidade superficial (RS), cor, microdureza superficial (MS) e a análise qualitativa da superfície (Microscopia Eletrônica de Varredura - MEV) dos MRE submetidos às soluções em estudo, foram confeccionados 60 espécimes (n=10), 30 de cada MRE (resina composta e cimento de ionômero de vidro modificado por resina- CIV), os quais foram subdivididos em 3 grupos para serem submetidos: G1 - CHX, G2 - enxaguatório experimental a base do OE de CS e G3 - Água destilada. As leituras foram realizadas com os aparelhos adequados para cada um dos ensaios, após o polimento dos espécimes e após 24h do término do período experimental. Os resultados obtidos foram avaliados de acordo com os Conceitos da Estatística Clássica, após análise exploratória dos dados. O rendimento do OE obtido foi 0,85mL/100g folhas secas; os constituintes majoritários detectados e identificados no OE foram o β-cariofileno, germacreno-D, biciclogermacreno, δ-cadideno, óxido de cariofileno, espatulenol e α-elemol; o OE e a formulação de enxaguatório desenvolvida apresentaram atividade antimicrobiana significativa frente aos micro-organismos testados, exceto para o OE contra Enterococcus faecalis; o OE nas diferentes concentrações testadas e a formulação de enxaguatório apresentaram citotoxidade frente a fibroblastos gengivais L929 menor estatisticamente que a CHX; a citotoxidade do OE é tempodependente; a formulação desenvolvida proporcionou maior alteração de cor para a resina Z250 do que a CHX e a água destilada, sendo essa mudança em função do Tempo nos parâmetros de cor (L*, a* e b*) analisados isoladamente, enquanto que para o CIV não houve diferença estatisticamente significante para a cor sob as diferentes soluções testadas; as soluções em estudo não tiveram efeito significante sobre a RS da resina composta, enquanto que para o CIV houve um aumento estatisticamente significante na RS quando o mesmo foi submetido a CHX; não houve diferença estatisticamente significante na MS de ambos os MRE testados; e o MEV mostrou deteriorações superficiais principalmente nos corpos de prova de CIV submetidos a CHX. / Researches has been developed associating dental material and mouthwashes, due to the side effects caused presenting in the products, especially chlorhexidine (CHX). Therefore, it becomes necessary studies involving alternative solutions containing the CHX efficacy, but without its collateral effects. Regarding to this, it was studied the specie Casearia sylvestris (CS), a medicinal plant with confirmed benefits, although its effect on dental materials (DM) it is poorly studied (described, talvez fique melhor) and its antimicrobial potencial and cytotoxicity remains controversial. The aim of this study was to evaluate the biological properties of CS essential oil and its effect on DM. The CS essential oil was obtained and characterized through gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration values were determined using the microdilution of Streptococcus species (mutans, mitis, salivarius and sanguinis) and Enterococcus faecalis. It was also evaluated the cytotoxicity on mouse fibroblasts of both essential oil and mouthwash formulation containing the bioactive essential oil. To the superficial roughness, color, superficial microhardness and surface qualitative analysis (Scanning electron microscope SEM) of DM submitted to studied solutions, it was prepared 60 specimens (n = 10), 30 of each DM (composite resin, resin modified glass ionomer- CIV), which were subdivided into 3 groups to the submission: G1 - CHX, G2 - mouthwash containing CS essential oil and G3 - distilled water. The lectures were performed with appropriate equipaments(apparatus, acho que fica melhor): posteriorly specimens polishing and 24h after the experimental period end. The obtained results were evaluated according to the classical statistics concepts, after data exploratory analysis. The yield of essential oil obtained was 0.85 mL/100 g dried leaves; the major constituents detected and identified in the essential oil were β-caryophyllene, germacrene-D, bicyclogermacrene, δ- cadideno, caryophyllene oxide, α-and spathulenol elemol; both mouthrinse containing essential oil as the formulation developed showed significant antimicrobial activity against the tested microorganisms, except Enterococcus faecalis; the different concentrations tested of the essential oil and the mouthwash formulation showed statistically lower cytotoxicity against gingival fibroblasts L929 than CHX; cytotoxicity essential oil is time-dependent; the formulation provided higher color change to resin Z250 when compared with CHX and distilled water, and this change occurred in the factor time of all color parameters (L *, a * and b *) when analyzed alone, while to CIV color the difference was not statistically significant for the different solutions studied, there was a statistically significant increase in CIV surface roughness when submitted to CHX, while to composite resin the difference was not statistically significant; there was no statistically significant difference in microhardness of both restorative materials tested, and SEM showed surface deterioration mostly in the specimens submitted to CHX.

Alguns estudos têm sido realizados sobre a associação de materiais restauradores odontológicos e soluções antissépticas, pois, em especial a clorexidina (CHX), além dos benefícios apresenta efeitos colaterais. Assim tornam-se necessários estudos de soluções alternativas tão eficazes quanto à CHX, porém sem os efeitos colaterais destas. Neste anseio, foi que se pesquisou Casearia sylvestris (CS) que é uma planta medicinal que oferece benefícios, mas, no entanto, pouco se sabe sobre o efeito desta sobre materiais restauradores estéticos (MRE) e algumas dúvidas permanecem sobre seu potencial antimicrobiano e sua toxidade sobre células. O objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades biológicas do óleo essencial (OE) de CS e o efeito deste sobre MRE. Assim, o OE foi obtido por hidrodestilação e caracterizado por Cromatografia a gás acoplada a Espectrometria de massas (CG-EM) e os valores de concentração inibitória e bactericida mínimas foram determinados pelo método de microdiluição frente às espécies Streptococcus (mutans, mitis, sanguinis e salivarius) e Enterococcus faecalis. Avaliou-se também a citotoxidade do OE de CS e da formulação de enxaguatório bucal contendo o OE bioativo em fibroblastos de camundongos. Para a avaliação da rugosidade superficial (RS), cor, microdureza superficial (MS) e a análise qualitativa da superfície (Microscopia Eletrônica de Varredura - MEV) dos MRE submetidos às soluções em estudo, foram confeccionados 60 espécimes (n=10), 30 de cada MRE (resina composta e cimento de ionômero de vidro modificado por resina- CIV), os quais foram subdivididos em 3 grupos para serem submetidos: G1 - CHX, G2 - enxaguatório experimental a base do OE de CS e G3 - Água destilada. As leituras foram realizadas com os aparelhos adequados para cada um dos ensaios, após o polimento dos espécimes e após 24h do término do período experimental. Os resultados obtidos foram avaliados de acordo com os Conceitos da Estatística Clássica, após análise exploratória dos dados. O rendimento do OE obtido foi 0,85mL/100g folhas secas; os constituintes majoritários detectados e identificados no OE foram o β-cariofileno, germacreno-D, biciclogermacreno, δ-cadideno, óxido de cariofileno, espatulenol e α-elemol; o OE e a formulação de enxaguatório desenvolvida apresentaram atividade antimicrobiana significativa frente aos micro-organismos testados, exceto para o OE contra Enterococcus faecalis; o OE nas diferentes concentrações testadas e a formulação de enxaguatório apresentaram citotoxidade frente a fibroblastos gengivais L929 menor estatisticamente que a CHX; a citotoxidade do OE é tempodependente; a formulação desenvolvida proporcionou maior alteração de cor para a resina Z250 do que a CHX e a água destilada, sendo essa mudança em função do Tempo nos parâmetros de cor (L*, a* e b*) analisados isoladamente, enquanto que para o CIV não houve diferença estatisticamente significante para a cor sob as diferentes soluções testadas; as soluções em estudo não tiveram efeito significante sobre a RS da resina composta, enquanto que para o CIV houve um aumento estatisticamente significante na RS quando o mesmo foi submetido a CHX; não houve diferença estatisticamente significante na MS de ambos os MRE testados; e o MEV mostrou deteriorações superficiais principalmente nos corpos de prova de CIV submetidos a CHX. / Researches has been developed associating dental material and mouthwashes, due to the side effects caused presenting in the products, especially chlorhexidine (CHX). Therefore, it becomes necessary studies involving alternative solutions containing the CHX efficacy, but without its collateral effects. Regarding to this, it was studied the specie Casearia sylvestris (CS), a medicinal plant with confirmed benefits, although its effect on dental materials (DM) it is poorly studied (described, talvez fique melhor) and its antimicrobial potencial and cytotoxicity remains controversial. The aim of this study was to evaluate the biological properties of CS essential oil and its effect on DM. The CS essential oil was obtained and characterized through gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration values were determined using the microdilution of Streptococcus species (mutans, mitis, salivarius and sanguinis) and Enterococcus faecalis. It was also evaluated the cytotoxicity on mouse fibroblasts of both essential oil and mouthwash formulation containing the bioactive essential oil. To the superficial roughness, color, superficial microhardness and surface qualitative analysis (Scanning electron microscope SEM) of DM submitted to studied solutions, it was prepared 60 specimens (n = 10), 30 of each DM (composite resin, resin modified glass ionomer- CIV), which were subdivided into 3 groups to the submission: G1 - CHX, G2 - mouthwash containing CS essential oil and G3 - distilled water. The lectures were performed with appropriate equipaments(apparatus, acho que fica melhor): posteriorly specimens polishing and 24h after the experimental period end. The obtained results were evaluated according to the classical statistics concepts, after data exploratory analysis. The yield of essential oil obtained was 0.85 mL/100 g dried leaves; the major constituents detected and identified in the essential oil were β-caryophyllene, germacrene-D, bicyclogermacrene, δ- cadideno, caryophyllene oxide, α-and spathulenol elemol; both mouthrinse containing essential oil as the formulation developed showed significant antimicrobial activity against the tested microorganisms, except Enterococcus faecalis; the different concentrations tested of the essential oil and the mouthwash formulation showed statistically lower cytotoxicity against gingival fibroblasts L929 than CHX; cytotoxicity essential oil is time-dependent; the formulation provided higher color change to resin Z250 when compared with CHX and distilled water, and this change occurred in the factor time of all color parameters (L *, a * and b *) when analyzed alone, while to CIV color the difference was not statistically significant for the different solutions studied, there was a statistically significant increase in CIV surface roughness when submitted to CHX, while to composite resin the difference was not statistically significant; there was no statistically significant difference in microhardness of both restorative materials tested, and SEM showed surface deterioration mostly in the specimens submitted to CHX.