Made available in DSpace on 2016-04-28T20:17:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mestrado-Alzimiro Marcelo Conteiro Castilho.pdf: 399125 bytes, checksum: f42c772f226470430fe65c4d260420dd (MD5) Previous issue date: 2005-07-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / This survey was carried out under laboratory and field conditions for evaluating the efficiency of entomopathogenic fungi to control the ants Atta sexdens rubropilosa and Atta bisphaerica. The isolates from Agronomy National school (Escola Nacional de Agronomia) ENA1, ENA2, ENA3 and ENA4 of Metarhizium anisopliae as well as the isolates ENA6, ENA7, ENA13 and ENA14 of Beauveria bassiana were tested and inoculated on soldiers ants. After to have been collected, the soldiers were separated by groups of 10 individuals and wetted on a conidia suspension of 1.0 x 106 to 1.0 x 1011 conidia/ml .Each ants group was placed on a wet chamber and kept under no feeding condition at 27 ? 1 0C. Both fungi were pathogenic , although the isolates ENA 4 of Metarhizium anisopliale and ENA 6 and ENA 13 of Beauveria bassiana were considered the most virulent ones for A. bisphaerica, and for A. sexdens rubropilosa the isolates ENA 4 of Metarhizium anisopliae and ENA 14, ENA 13 and ENA 6 of Beauveria bassiana among the tested ones as well .The greatest mortality percentage was performed by these isolates with Lethal time (LT50) of 1.15 days for the isolate ENA 4, 1.39 days for ENA 6 and 1.44 days for ENA 13 ,for A. bisphaerica soldiers. For A. sexdens rubropilosa the Lethal time (LT50) was 1.37 days for the isolate ENA 4, 1.68 days for ENA 14, 1.95 days for ENA 13 and 2.14 days for ENA 6. In regard to the mortality index, the percentage of dead soldiers at the tested concentrations ranged from 45% to 71,67% . The isolates ENA 4, ENA 14, ENA 13, and ENA 6 caused the greater soldiers mortality averages in a shorter time period. The isolates ENA 4 and ENA 14 were applied by pulverization and spraying over plus 3 years old adult ants nests and 30 days after the entomopathogenic fungi application there still was some activity on the underground galleries. / Este trabalho foi conduzido em condi??es de laborat?rio e campo para se observar a efici?ncia de fungos entomopatog?nicos no controle de Atta sexdens rubropilosa e Atta bisphaerica. Foram utilizados os isolados ENA 1 (Escola Nacional de Agronomia) ENA 2, ENA 3 e ENA 4 de Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana, ENA 6, ENA 7, ENA 13 e ENA 14, inoculados em soldados. Ap?s coleta, exemplares de soldados foram separados em grupos de 10 indiv?duos e banhados em suspens?es de con?dios de 1,0 x 106 a 1,0 x 1011 con?dios.mL-1. Cada grupo de formiga foi transferido para c?mara ?mida e mantido sob regime de fome a 27 ? 1? C. Os dois fungos foram patog?nicos, embora os isolados ENA 4 de M. anisopliae e ENA 6 e ENA 13 de B. bassiana tenham sido os mais virulentos para A. bisphaerica e para A. sexdens rubropilosa dentre os testado. Esses isolados foram aqueles que apresentaram maior porcentagem de mortalidade confirmada, com TL50 de 1,15 dias para o isolado ENA 4, 1,39 dias para o ENA 6 e 1,44 dias para o ENA 13, para soldados de A. bisphaerica. Para A. sexdens rubropilosa a TL50 foi de 1,37 dias para o isolado ENA 4, 1,68 dias para o isolado ENA 14, 1,95 dias para o ENA 13 e 2,14 dias para o ENA 6. Quanto ao par?metro mortalidade, as concentra??es testadas proporcionaram a porcentagem de soldados mortos que variou de 45,0 a 71,67 %. Os isolados ENA 4, ENA14, ENA 13 e ENA 6 causaram as maiores m?dias de mortalidade de soldados em menor espa?o de tempo. Os isolados ENA 4 e ENA 14 foram aplicados na forma de pulveriza??o e polvilhamento, em formigueiros adultos com mais de tr?s anos de idade, e ap?s 30 dias da aplica??o dos fungos entomopatog?nicos, os olheiros ainda apresentavam ativos.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-07-26Bitstream added on 2014-06-13T20:37:46Z : No. of bitstreams: 1 gassen_mh_me_botfca.pdf: 980092 bytes, checksum: a7aea2398252653858d4b98ef8212123 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Secretaria Agricultura / O trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar a patogenicidade dos fungos Beauveria bassiana (isolado IBCB 66), Metarhizium anisopliae (isolado IBCB 425) e Lecanicillium lecanii (isolado JAB 02) sobre o psilídeo da goiabeira Triozoida sp. (HEMIPTERA: PSYLLIDAE) e a compatibilidade destes isolados com agrotóxicos. Os psilídeos, provenientes do campo, foram transferidos para ramos de goiabeira, contidos em tubos de PVC cuja extremidade inferior estava apoiada em placas de Petri com papel filtro umedecido. Cada ramo de goiaba foi pulverizado com 20mL das seguintes concentrações do patógeno: 5 OE 106, 1 OE 107, 5 OE 107, 1 OE 108 e 5 OE 108 conídios/mL, mais uma testemunha (água esterilizada). A partir das porcentagens de mortalidade de Triozoida sp., que variaram entre 26 e 77% para B. bassiana, 26 e 43% para M. anisopliae e 74 e 90% para L. lecanii, foi determinada a CL50 de 3,02 OE 107, 3,43 OE 1011 e 1,53 OE 107, para as três espécies respectivamente. A compatibilidade em laboratório foi observada incorporando-se os agrotóxicos ao meio de cultura BDA que, após a solidificação, foi inoculado com os fungos em três pontos eqüidistantes da placa de Petri, a qual foi mantida em câmara tipo B.O.D. por um período de 15 dias. Após este período, foram avaliados o crescimento vegetativo, esporulação, viabilidade e virulência dos entomopatógenos. Em condições de semi-campo, preparações dos produtos químicos e dos entomopatógenos foram pulverizadas em mudas de goiaba de três diferentes formas, a saber: a) primeiramente os produtos químicos e depois o fungo; b) primeiro o fungo e posteriormente o produto químico e c) os dois simultaneamente. 2 Após a aplicação, três folhas de cada ramo foram coletadas e lavadas obtendo-se uma suspensão que foi plaqueada em BDA para avaliação da esporulação, viabilidade e virulência dos conídios dos fungos. Observou-se... . / This study was carried out to evaluate the pathogenicity of the fungi Beauveria bassiana (IBCB 66 isolate), Metarhizium anisopliae (IBCB 425 isolate) and Lecanicillium lecanii (JAB 02 isolate) on the guava psyllid Triozoida sp. and their compatibility with agrochemical products. The psyllids were transferred to guava branches, inside a plastic tube hold between Petri dishes containing a wet filter paper. The insects were sprayed with 20 mL of dosages containing 5 OE 106, 1 OE 107, 5 OE 107, 1 OE 108 e 5 OE 108 conidia/mL, for the control, sterilized water was sprayed on. The mortality rates of Triozoida sp., ranged from 26 to 77% for B. bassiana, 26 to 43% for M. anisopliae and 74 to 90% for L. lecanii. The LC50 were 3,02 OE 107, 3,43 OE 1011 and 1,53 OE 107, respectively. The compatibility to agrochemicals was verified by adding the products to the PDA medium. After solidification, the medium was inoculated with each fungus in three different points of the Petri dish, which were maintained in acclimatized chamber BOD for a 15 days period. After this period, the evaluated parameters were the vegetative growth, sporulation, viability and virulence of the entomopathogens. In semi-field conditions, the chemical products mixed with the fungi were sprayed on guava plants at three different ways: a) the fungi were sprayed on after the pulverization of the chemical products; b) chemical products were sprayed on after the pulverization of the fungi; c) chemical products and fungi were sprayed on all together. Subsequently, three leaves of each treatment were collected and washed to obtain a suspension that were inoculated on PDA medium to evaluate the sporulation, viability and virulence of the fungus. In laboratory conditions, most of the fungicides and insecticides was classified as toxic or very toxic for the 4 three fungi evaluated. In semi-field conditions, a large variation of conidia... (Complete abstract, click electronic address below).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-09-21Bitstream added on 2014-06-13T20:24:20Z : No. of bitstreams: 1 thuler_amg_dr_jabo.pdf: 1407432 bytes, checksum: d7e6ed286b2d4a2ad8e9b2120b24b7ca (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Genética de Bactérias e Biotecnologia Aplicada (LGBBA) da FCAV-UNESP. Foram caracterizados geneticamente, por PCR, isolados de Bacillus thuringiensis, provenientes de três coleções brasileiras, quanto aos tipos de genes cry1, avaliando-se o efeito dos mesmos sobre uma população de Plutella xylostella caracterizando-se também os isolados de B. thuringiensis quanto à presença de enterotoxinas HBL, NHE e o regulador pleitrópico PLC, por verificação biomolecular, avaliando a variabilidade, bem como a estruturação genética de populações de B. thuringiensis, por PCR-RFLP. Verificou-se que existe uma distribuição homogênea das subclasses cry1 dentro do banco de isolados de B. thuringiensis, com maior porcentagem de isolados portadores dos genes cry1Ab (42,12%) e com menor porcentagem de representantes da subclasse cry1Db (0,6%). Nos bioensaios observou-se 100% de mortalidade para lagartas de P. xylostella com os isolados utilizados, indicando que combinações de tipos diferentes de genes cry1 apresentam ação tóxica para larvas de P. xylostella. Analisando a estrutura populacional de B. thuringiensis foram obtidos 78 haplótipos, definidos para as populações das diferentes coleções, e 76 haplótipos, definidos para as populações de diferentes regiões brasileiras, retratando a variabilidade genética para os loci hblA, plcR, nheBC e cry1 analisados. Segundo valores FSTs, de comparação duas a duas, diferenças significativas entre coleções e populações de B. thuringiensis provenientes das regiões brasileiras foram verificadas. Mesmo assim, alguns grupos formados são constituídos por uma população clonal de isolados da bactéria. / The work was developed in the Laboratory of Bacterias’ Genetics and Applied Biotechnology (LGBBA) at UNESP/ Jaboticabal Campus. There were genetically characterized, by PCR, isolates of B. thuringiensis, belonging to three Brazilian collections basead on cry1 gene content, evaluating their effects on Plutella xylostella. They were also characterized concerning their enterotoxins production such as HBL, NHE and the PLC virulence factor, using molecular techniques, so as to evaluate their gene diversities, as well as their population genetic, using the PCR-RFLP approach. It was observed a homogeneous distribution of the cry1 subclasses within B. thuringiensis strain collections studied, with bigger percentage of isolates showing the cry1Ab genes (42.12%) and with lower percentage of isolates for subclass cry1Db (0.6%). The bioassays have revealed 100% mortality to P. xylostella larvae meaning that the effectiveness of B. thuringiensis as a biological control agent does not depend at the cry genes content. When the B. thuringiensis population structure was considered, 78 haplotypes were defined for the strains contents of different collections and 76 haplotypes were defined for strains of different Brazilian regions, exhibiting the great genetic variability for hblA, plcR, nheBC and cry1 loci. According to the FSTs values for establish pair comparisons, significant differences among the B. thuringiensis collections and populations, were observed. Nevertheless some of the formed groups were considered as bacterial clonal population.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-11-01Bitstream added on 2014-06-13T18:45:54Z : No. of bitstreams: 1 wenzel_im_dr_botfca.pdf: 544393 bytes, checksum: f67161337e2bde1fdbfde14613c06462 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Secretaria Agricultura / Este trabalho teve como objetivo avaliar a patogenicidade do isolado JAB 02 de Lecanicillium lecanii (Zimm.) Zare & Gams ao ácaro rajado Tetranychus urticae e a sua compatibilidade com agrotóxicos, nematóides entomopatogênicos e ácaros predadores. Os conídios do fungo, produzidos em arroz, foram avaliados nas concentrações de 5 x 106, 1 x 107, 5 x 107, 1 x 108 e 5 x 108 conídios/mL. A partir das porcentagens de mortalidade de T. urticae, que variaram entre 49 e 90% no décimo dia de avaliação, foi determinada a CL50 de 5,25 x 106 con./mL. A compatibilidade em laboratório foi verificada misturando-se os agrotóxicos em meio de cultura BDA e os parâmetros utilizados para a avaliação foram crescimento vegetativo, esporulação e viabilidade do entomopatógeno. Em condições de estufa, as suspensões dos produtos químicos e, posteriormente, a do fungo foram pulverizadas em plantas de crisântemo. Após a aplicação, quatro folhas foram coletadas e lavadas obtendo-se uma suspensão que foi plaqueada em BDA, sendo então avaliado o crescimento das colônias do fungo. Verificou-se, em laboratório, que a maioria dos inseticidas e os acaricidas foram compatíveis ao fungo, com exceção do inseticida Thiodan® classificado como muito tóxico. Todos os fungicidas testados foram classificados como tóxico e muito tóxico. Em condições de estufa, no tratamento com o fungicida Rovral® foi observado um número de colônias fúngicas formadas compatível com a testemunha. Essa compatibilidade repetiu-se para os produtos Alto 100® e Thiodan® em alguns dos tempos avaliados. No teste de patogenicidade, os conídios produzidos em meio de cultura com inseticidas e acaricidas, a partir da compatibilidade em laboratório, não tiveram sua viabilidade afetada e foram patogênicos ao ácaro rajado Tetranychus urticae. Além disso, foram realizados... / The objective of this study was to evaluate the pathogenicity of Lecanicillium lecanii (Zare & Gams), isolate JAB 02, to the two-spotted mite Tetranychus urticae (Koch), its compatibility with agrochemical products and its selectivity to entomopathogenic nematodes and predatory mites. The pathogenicity of the fungus produced in rice to T. urticae was evaluated at the concentrations of 5 x 106, 1 x 107, 5 x107, 1 x 108 and 5 x 108 conidia/mL. The mortality rates of T. urticae ranged from 49 and 90 % in the tenth evaluation day and the LC50 was 5,25 x 106 conidia/mL. The compatibility in laboratory was verified by adding chemical products to the PDA media and the evaluated parameters were the vegetative growth, sporulation and viability of the entomopathogen. In greenhouse, L. lecanii were sprayed on chrysanthemum plants after the pulverization of the chemical products; subsequently, four leaves of each treatment were collected and washed to obtain a suspension that were transferred to PDA medium to evaluate the growth of the fungus colonies in laboratory conditions. The acaricides and the most of insecticides were compatible to the isolate JAB 02, except the insecticide Thiodan®, which was classified as very toxic. All the evaluated fungicides were classified as toxic or very toxic. In greenhouse assays, the fungicide Rovral® produced a number of grown colonies similar to those of the control and this compatibility was also showed by the products Alto 100® and Thiodan® in some of the evaluated periods. In another pathogenicity test, when L. lecanii were grown in culture media containing the insecticides, the conidia viability were not affected and the fungus were pathogenic to T. urticae, with mortality rates superior to the control in some cases. Also, compatibility bioassays involving L. lecanii at 5 x 106, 1 x 107 and 5 x 107 con./mL and the entomopathogenic nematodes Steinernema sp. (CB n6) and Heterorhabditis indica (CB n5) were conducted.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-08-10Bitstream added on 2014-06-13T19:56:01Z : No. of bitstreams: 1 almeida_amb_me_jabo.pdf: 563129 bytes, checksum: 02996595fd1963684492476407b56da9 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A traça-das-crucíferas Plutella xylostella é relatada como uma das principais pragas das crucíferas no Brasil e no mundo. Sua principal forma de controle ainda é o químico, mas seu uso indiscriminado tem causado problemas de resistência de algumas populações, além de matar seus inimigos naturais e trazer malefícios para o ambiente e para o homem. Alguns estudos de controle biológico vêm sendo realizados para o controle dessa praga, dentre eles destacando-se o uso de fungos entomopatogênicos e de parasitóides. Assim, foi realizado um estudo com o objetivo de determinar a concentração e tempo letal 50 e 90 dos fungos entomopatogênicos Beauveria bassiana, Isaria fumosorosea e Metarhizium anisopliae para lagartas de P. xylostella, e a patogenicidade de isolados deste fungos para ovos, lagartas, pupas e adultos da praga. Foram utilizados cinco isolados de cada espécie fúngica, sendo que os mais patogênicos à todas as fases do ciclo de vida do inseto foram utilizados para investigar a interação dos entomopatógenos com os parasitóides Trichogramma pretiosum e T. exiguum e com o predador Podisus nigrispinus. As CL90 para B. bassiana, I. fumosorosea e M. anisopliae foram 2 x 108, 8,65 x 107 e 1,77 x 108 conídios mL-1, respectivamente, sendo que estas foram utilizadas em todos os experimentos posteriores. Os isolados CB 75 e IBCB 133 de I. fumosorosea mostraram uma ação patogênica eficiente para ovos da praga, causando, respectivamente, 66 e 70% de mortalidade. Para a fase de lagarta os isolados E9 e o IBCB 425 de M. anisopliae, causaram, respectivamente, 98 e 96% de mortes. Considerando a mortalidade total de pupas tratadas e seus adultos emergidos, a ação dos isolados AM 09, JAB 07, IBCB 74 e IBCB 87 não diferiu significativamente (p<0,01) causando, respectivamente, 94, 92, 82 e 100% de mortalidade do inseto. Para os adultos não houve diferença significativa... / The diamondback moth Plutella xylostella is related as one of mainly pests in crucifers in Brazil. Its mainly control way still is chemical, but its indiscriminate use has been causing resistance in some populations, besides to kill its natural enemies and bring bad things for environment and human. Some studies of biological control have been made, outsdanding entomopathogenic fungi and parasitoids. Thus, it was determinated the lethal time and concentration 50 and 90 of entomopathogenic fungi Beauveria bassiana, Isaria fumosorosea and Metarhizium anisopliae to larvae of P. xylostella, and the pathogenicity of strains of these fungi to eggs, larvae, pupae and adults of the pest. It was used five strains of each fungal specie, and the most pathogenic were used to investigate the interaction between entomopathogens and the parasitoids Trichogramma pretiosum and T. exiguum and with the predator Podisus nigrispinus. The LC90 for B. bassiana, I. fumosorosea and M. anisopliae were 2 x 108, 8,65 x 107 e 1,77 x 108 conidia ml-1, respectively, being used in the following bioassays. The strains CB 75 and IBCB 133 of I. fumosorosea showed an efficient pathogenic action for the eggs of the pest, causing, respectively, 66 and 70% of mortality. For larvae the isolates E9 and IBCB 425 of M. anisopliae, caused, respectively, 98 and 96% of death. Considering the total mortality of treated pupae and its emerged adults, the action of AM 09, JAB 07, IBCB 74 and IBCB 87, did not differ significantly (p<0,01) causing, respectively, 94, 92, 82 e 100% of insect mortality. For adults there was no statistical difference between the B. bassiana strains. The isolates CB 75 and IBCB 133 of I. fumosorosea caused, respectively, 98 and 94% of adults death of P. xylostella and the strains E9, IBCB 159 and IBCB 425 of M. anisopliae, caused 100, 92 and 96% of death. For the obtained results in all the stages of this study... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-06-02T18:57:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3301.pdf: 2183873 bytes, checksum: 12beff93e53de268cf4d5a4852e131e5 (MD5) Previous issue date: 2010-08-13 / Spittlebugs are the main pests of pasture of America Tropical, among which the genera Deois and Mahanarva stand out. These pests have been causing serious losses in the Brachiaria bryzantha pasture of the Rondônia State, Brazil. The fungus entomopathogenic Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin is considered an efficient agent for the biological control of many insects that represent plagues of agriculture. The objective of this research was to evaluate the efficiency of spraying Brachiaria bryzantha pasture with the fungus M. anisopliae (isolate ESALQ 1037) against naturally infestation with the cattle tick spittlebug nymphs was evaluated. In this work the efficacy the fungus of applied at in twice formulations (concentrated emulsifiable oil and wettable powder), trhee doses (1,0 x109, 1,5 x109, 2 x109 viable conidias ha-1) in once for twice during the pest infested with period. The study was conducted from December 2008 to February 2009 at the Daiane farm in Corumbiara, Rondônia State, Brazil. The fungus was applied from 05 pm, under average temperature of 18 ºC and relative air humidity of 69%. The volume of the solution utilized was 300 liter ha-1 with sprayer. The evaluations were performed at the beginning (day 0), and 15, 32, 45, 61 e and 75 days, being one evaluation before the applications, and five after the applications of this fungus, counting the spittlebugs (nymphs) per 0.0625 m² (0.25 m x 0.25 m square). At 0 days the infestation was of 153,6 nymphs/m². It was verified that the levels of nymphs were reduced after the sprayings of M. anisopliae in all treatments. The stinkbug in efficiency control levels were higher of spittlebug nymphs for aplication fungus isolate, between 85,30% to 93,72%, in 75 days the applications, of this fungus. From these data, we conclude that M. anisopliae isolate ESALQ 1037 was efficient to control spittlebug in the B. bryzantha pasture, thus being a promising choice for use as a microbial insecticide and thus being promising choice familiar agriculture integrated pest management of in the Rondônia State / As cigarrinhas-das-pastagens constituem as principais pragas de gramíneas forrageiras em toda a América Tropical, destacando-se os gêneros Deois e Mahanarva. Essas pragas vêm causando sérios danos a Brachiaria bryzantha cv. Marandu no Estado de Rondônia. O fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin é considerado um eficiente agente para o controle biológico de grande número de insetos-pragas, como cigarrinha da cana-deaçúcar e das pastagens. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a eficiência da aplicação de Metarhizium anisopliae (isolado ESALQ 1037) no controle da infestação de cigarrinhas-das-pastagens em capim-Marandu (B. bryzantha) submetida ao pastejo com bovinos. Avaliou-se o efeito do fungo aplicado em duas formulações, três dosagens e duas épocas ao longo do período de infestação da praga. As dosagens aplicadas foram de 1,0 x109, 1,5 x109, 2,0 x109 conídios viáveis/ha, nas formulações de concentrado emulsionável e Pó molhável. O estudo foi conduzido no Sítio Daiane, município de Corumbiara, RO, no período de dezembro de 2007 a fevereiro de 2008. O isolado foi aplicado a partir das 17h, sob temperatura média de 18° C e umidade relativa de 69%. O volume de calda foi de 300 L/ha, utilizando-se pulverizador costal manual. As avaliações procederam-se aos 0, 15, 32, 45, 61 e 75 dias, contando-se as cigarrinhas (ninfas) por ponto de 0,0625 m² (quadrado de 0,25 m x 0,25 m). Aos 0 dias a infestação era de 153,6 ninfas/ m². Foi observada a diminuição das ninfas das cigarrinhas-das-pastagens em todos os tratamentos com a aplicação do fungo M. anisopliae. Os níveis de eficiência de controle das ninfas das cigarrinhas com a aplicação do Metarril® variaram de 85,30% e 93,72%, aos 75 dias. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que M. anisopliae (isolado ESALQ 1037) é eficiente para o controle das cigarrinhaspastagens em capim-Marandu (B. bryzantha), constituindo-se em uma alternativa promissora para ser utilizado como inseticida microbiano em programas de manejo integrado de pragas para o Estado de Rondônia.

The growing demand for strawberries has imposed challenges, especially regarding the control of pests. Many farmers report problems with reduced chemical control efficiency, probably due to selection of resistant populations of insects and mites. An alternative is the use of biological control using pathogenic fungi as a tool in integrated pest management. Metarhizium spp. (Hypocreales: Clavicipitaceae) are generalist entomopathogenic fungi with worldwide distribution and can cause diseases in a large number of hosts. Many studies on the development of Metarhizium as a biological control agent were performed, but this bulk of knowledge is in remarkable contrast to the lack of research on the fundamental ecology of Metarhizium in agroecosystems. This thesis aimed to evaluate the establishment, persistence and dispersal of these entomopathogenic fungi in strawberry crop soil in Inconfidentes, Minas Gerais, Brazil; and to study the diversity and abundance of species of Metarhizium isolated from organic and conventional strawberry crop soils, and the field margins in Brazil and Denmark. The effectiveness of new species of Metarhizium recently found in Brazil, was evaluated against two spotted spider mite, Tetranychus urticae. Applied isolates of M. anisopliae (ESALQ1037) and M. robertsii (ESALQ1426) were able to persist for up to 12 months after the application within the soil, and disperse to other plots and colonize the rhizosphere of strawberry plants. In the plots where ESALQ1037 and ESALQ1426 were applied, 25% and 87.5% of the isolates recovered after 12 months consisted of the same isolates inoculated. A new taxonomically unassigned lineage, referred to as Metarhizium sp. Indet. 5 in this study, was found in strawberry crop margins. The dominant species of Metarhizium in Brazil and Denmark was Metarhizium robertsii and M. brunneum respectively. Further, Metarhizium pemphigi was first detected in Denmark in this study. Soil in organically grown strawberries harbored a more diverse population of Metarhizium spp. compared with conventionally grown strawberries. These studies showed for the first time the potential of new species of Metarhizium as spider mite biological control agents, the lowest median lethal time (LT50 = 4 ± 0.17 days) was observed in mites treated with the isolate ESALQ1638 of Metarhizium sp. indet. 1. The best isolates were ESALQPL63 of B. bassiana, ESALQ1608 and ESALQ1638 of Metarhizium sp. indet. 1 and ESALQ3069 and ESALQ3222 of M. pingshaense based on the survival curve, total mortality, percentage of sporulated cadavers and LT50. Knowledge of the diversity of Metarhizium spp. and persistence in strawberry soil generated in this study may be useful in developing conservation strategies and maximize the natural biological pest control. / A crescente demanda por morangos vem impondo desafios, especialmente quanto ao controle das pragas. Muitos agricultores relatam problemas com a redução da eficiência do controle químico, provavelmente devido à seleção de populações resistentes de insetos e ácaros. Uma alternativa é o uso de controle biológico com fungos entomopatogênicos como ferramenta dentro do manejo integrado de pragas. Metarhizium spp. (Hypocreales: Clavicipitaceae), são fungos entomopatogênicos generalistas com distribuição cosmopolita e que podem causar doenças em um grande número de hospedeiros. Muitos estudos sobre o desenvolvimento de Metarhizium como agente de controle biológico foram realizados, mas este leque de conhecimento está em contraste com a notável falta de investigação sobre a ecologia de Metarhizium nos agroecossistemas. Esta tese teve como objetivo avaliar o estabelecimento, persistência e dispersão destes fungos entomopatogênicos em solo de morangueiro em Inconfidentes, Minas Gerais, Brasil; bem como estudar a diversidade e abundância de espécies de Metarhizium isolados do solo de cultivos orgânico e convencional de morangueiro, e das margens das plantações no Brasil e Dinamarca. A eficácia de novas espécies de Metarhizium, encontradas recentemente no Brasil, foi avaliada contra o ácaro rajado, Tetranychus urticae. Os isolados inoculados de M. anisopliae (ESALQ1037) e M. robertsii (ESALQ1426) foram capazes de persistir por até 12 meses após a aplicação no solo, além de dispersar para outras parcelas e colonizar a rizosfera dos morangueiros. Nas parcelas onde ESALQ1037 e ESALQ1426 foram aplicados, 25% e 87,5% dos isolados recuperados após 12 meses consistiam dos mesmos isolados inoculados. Uma nova linhagem não taxonomicamente identificada, referida neste trabalho como Metarhizium sp. Indet. 5, foi encontrada nas margens de morangueiros cultivados. A espécie dominante de Metarhizium no Brasil e Dinamarca foi Metarhizium robertsii e M. brunneum, respectivamente. Além disso, Metarhizium pemphigi foi detectado pela primeira vez na Dinamarca neste estudo. Solos de cultivo orgânico de morangueiro em geral apresentaram uma diversidade maior de Metarhizium do que solos de cultivos convencionais. Estes estudos revelaram pela primeira vez o potencial de novas espécies de Metarhizium como agentes de controle biológico do ácaro rajado, sendo o menor tempo letal mediano (TL50= 4 ± 0.17 dias) observado em ácaros tratados com o isolado ESALQ1638 de Metarhizium sp. indet. 1. Os melhores isolados foram ESALQPL63 de B. bassiana, ESALQ1608 e ESALQ1638 de Metarhizium sp. indet. 1 e ESALQ3069 e ESALQ3222 de M. pingshaense baseado na curva de sobrevivência, mortalidade total, porcentagem de cadáveres esporulados e TL50. O conhecimento da diversidade de Metarhizium spp. e persistência em solos de morango, gerados neste estudo, poderão ser úteis no desenvolvimento de estratégias de conservação e maximizar o controle biológico natural de pragas.

Neozygites floridana is an important natural enemy of Tetranychus urticae in many crops, including strawberry. In this crop there has been some changes in the production system from open field to low tunnel. This new system presents benefits to strawberry production, moreover this system increases problems with spider mites and some fungal plant pathogens; consequently increasing the use of pesticides. In order to integrate N. floridana in the management of spider mites in strawberry there are still many important aspects to be revealed on the biology, epizootiology of the fungus and the effect of crop systems on its prevalence in the field. For this, three studies were performed, being the first one about the effect of strawberry production systems (low tunnel and open field) and pesticide application on population dynamics of two-spotted spider mite T. urticae, its natural enemies (N. floridana and predatory mites), and plant diseases, the experiment was performed in Inconfidentes-MG. The population of T. urticae attained the highest level in treatments with chemical control of pest, independently of the crop system, low tunnel or open field. The fungus N. floridana was observed late in both crop seasons, in treatments with and without inoculative releases, and has suggested that it might be a natural occurrence of the fungus. The highest prevalence of the fungus were observed in treatments with high densities of T. urticae. The predatory mites occurred naturally during the two crop seasons, and the most abundant species was Neoseiulus anonymus (Chant) (57.5%). The incidence of fungal plant diseases are greater in the open field than in low tunnel, however it seems that the crop system do not affect the new disease \"vermelhao\". The second study aimed to reveal the abiotic and biotic factors involved in the regulation of resting spores formation in the hosts T. urticae and T. evansi. The Brazilian isolate ESALQ1420 produced a large number of resting spores (51.5%) in T. urticae at a temperature 11 °C, photoperiod of 10L:14D, light intensity of 42-46 (?mol m-2s-1), on non-senescent plants. Small percentages of mites with resting spores (0-5 %) were found for the Norwegian isolate NCRI271/04 under the conditions tested, and very low percentages of resting spores (up to 1%) were observed in T. evansi infected by the Brazilian isolate ESALQ1421.The third study was therefore conducted phylogenetic analysis of isolates of N. floridana and develops efficient real-time PCR-based analysis for detection and quantification of N. floridana propagules from the soil. The phylogenic three showed that Neozygites is a fungal group far from other Entomophthoromycota and that N. floridana present high intra-specific variability. This data indicates that the isolates from different Tetranychus species may be in fact different Neozygites species, not described yet. We developed a real-time PCR probe for detection and quantification of N. floridana in the soil. This molecular probe was successful in quantifying N. floridana at relatively high DNA concentrations seeded into the soil. / Neozygites floridana é um importante inimigo natural de Tetranychus urticae em diversas culturas, incluindo morango. Nesta cultura tem havido uma mudança no sistema de produção, passando de cultivo em campo aberto para túnel baixo. Este novo sistema apresenta benefícios na produção de morango, no entanto pode aumentar problemas com ácaros fitófagos e algumas doenças fúngicas, consequentemente aumentando o uso de agrotóxicos. Para a integração de N. floridana no manejo de ácaros fitófagos em morango, existem ainda muitos aspectos importantes a serem conhecidos sobre a biologia, epizootiologia do fungo e efeito dos sistemas de cultivo sobre a sua prevalência em campo. Para isso três estudos foram realizados, sendo o primeiro estudo sobre o efeito de sistemas de produção de morango (túnel baixo e campo aberto) e da aplicação de agrotóxicos sobre a dinâmica populacional do acaro rajado T. urticae, seus inimigos naturais (N. floridana e ácaros predadores) e doenças de plantas, o experimento foi realizado em Inconfidentes-MG. A população de T. urticae atingiu altos níveis em tratamentos com controle químico de pragas, independente do sistema de cultivo, túnel baixo ou campo aberto. O fungo N. floridana foi observado no final de ambos os ciclos de cultivos, nos tratamentos com e sem liberações inoculativas, sugerindo que houve incidência natural do fungo. As maiores prevalências do fungo foram observadas em tratamentos com altas densidades de T. urticae. Os ácaros predadores ocorreram naturalmente durante os dois ciclos de cultivo, sendo Neoseiulus anonymus (Chant) a espécie mais abundante (57.51%). A incidência de doenças fúngicas foi maior em campo aberto do que em túnel baixo, no entanto parece que o sistema de cultivo não afetou a incidência da nova doença vermelhão. No segundo estudo objetivou-se conhecer os fatores abióticos e bióticos envolvidos na formação de esporos de resistência nos hospedeiros T. urticae e Tetranychus evansi. O isolado brasileiro ESALQ1420 produziu um grande número de esporos de resistência (51.5%) em T. urticae, a uma temperatura de 11 ° C, fotoperíodo de 10F:14E, intensidade de luz de 42-46 (?mol m-2s-1), em plantas senescentes. Pequenas percentagens de ácaros com esporos de resistência (0-5%) foram encontrados para o isolado Norueguês NCRI271/04 sob as condições testadas, e muito baixas percentagens de esporos de resistência (ate 1%) foram observados em T. evansi infectados pelo isolado brasileiro ESALQ1421. O terceiro estudo objetivou analisar filogeneticamente os isolados de Neozygites patogênicos a ácaros, e desenvolver ferramenta utilizando PCR em tempo real para a detecção e quantificação de propágulos de N. floridana a partir do solo. A arvore filogenética mostrou que Neozygites e um grupo de fungos distante dos demais Entomophthoromycota, e que estes fungos apresentaram alta variabilidade intraespecífica entre isolados de N. floridana. Estes resultados indicam que isolados provenientes de diferentes espécies hospedeiras do gênero Tetranychus podem ser de fato diferentes espécies de Neozygites não descritas ainda. Desenvolveu-se uma sonda molecular para detecção e quantificação de N. floridana no solo utilizando PCR em tempo real. Esta sonda foi eficiente na quantificação de N. floridana, em concentrações relativamente altas de DNA inoculado no solo.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-30T14:00:30Z No. of bitstreams: 1 Vando Miossi Rondelli.pdf: 326776 bytes, checksum: dcb87ae6833a0da7386f1f749cabbc4a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-30T14:00:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vando Miossi Rondelli.pdf: 326776 bytes, checksum: dcb87ae6833a0da7386f1f749cabbc4a (MD5) Previous issue date: 2010-02-01 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The diamondback moth (DBM), Plutella xylostella (L.) (Lep.: Plutellidae) is considered the most important pest of brassicas productive systems. Due to the high use of pesticides for DBM control, alternative methods to be applied against DBM are necessary. The use of the enthomopathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. and vegetable oils present as promising alternatives to control DBM. Thus, 17 isolates of B. bassiana were studied aiming to select isolates to be used for DBM control. The commercial formulation Boveril® WP (isolate ESALQ-PL63) was also included in the bioassays. Among the evaluated isolates, the isolates CCA/UFES-4, 18, 31 e 35 were selected because they caused mortality confirmed for 2nd-instar larvae greater than 90%. The standard isolate ESALQ-447 and the commercial formulation (Boveril® WP) had similar results and were also selected. In addition, the isolates CCA/UFES-4, 18, 31, ESALQ-447 and Boveril® WP were considered efficient for DBM control based on the lethal concentrations LC50-values. The castor bean oil has its efficacy and stability evaluated, as its compatibility with B. bassiana upon P. xylostella as well. The castor bean oil 1-d old caused53.9% mortality for P. xylostella. The insecticidal activities, however, were unstable over timewhich requires further studies. The results also indicate compatibility between the oil of castor bean and B. bassiana. / A traça-das-crucíferas, Plutella xylostella (L.) (Lep.: Plutellidae) é considerada a principal praga no mundo nos sistemas produtivos de brássicas. Devido a grande utilização de agrotóxicos para o seu controle, métodos alternativos para o manejo dessa praga se fazem necessários, e o uso do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. e óleo vegetal apresentam-se como alternativas. Desta forma, 17 isolados desse fungo foram estudados objetivando selecionar isolados para ser utilizado no controle da traça-das-crucíferas. O formulado comercial Boveril® PM (isolado ESALQ-PL63) também foi incluído nos bioensaios. Entre os isolados avaliados, os isolados CCA/UFES-4, 18, 31 e 35 foram selecionados por causarem mortalidade confirmada de larvas do segundo instar superior a 90%. O isolado padrão ESALQ-447 e o formulado comercial (Boveril® PM) tiveram resultados semelhantes e também foram selecionados. Adicionalmente, os isolados CCA/UFES-4, 18, 31, ESALQ-447 e o Boveril® PM foram considerados eficientes para o controle da traça-das-crucíferas, mediante os resultados das estimativas da CL50. O óleo de mamona foi avaliado quanto a sua eficiência e estabilidade, como também a sua compatibilidadecom B. bassiana sobre P. xylostella. O óleo de mamona com 1 dia proporcionou mortalidade de 53,9% para P. xylostella. As atividades inseticidas, no entanto, foram instáveis ao longo dotempo, sendo necessários estudos adicionais. Os resultados também indicam compatibilidade entre o óleo de mamona e B. bassiana.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Brazil is the world's leader in productivity of Eucalyptus plantations, with approximately 6 million hectares of planted area and optimistic expansion projections in the coming years. Native to Oceania, the species was introduced to Brazil, and its production has been supported by the development of silvicultural and breeding techniques and a wide genetic base for clonal production. However, poor phytosanitary measures have led to the occurrence of exotic pests, which are potentiated by the absence of specific natural enemies and plantation homogeneity. This fact increases the cost with forest protection and directly interferes with the country's competitiveness in foreign markets. Thaumastocoris peregrinus is a key-pest in Eucalyptus plantations,that occurs worldwide, being detected in Brazil in 2008. The pest feeds on the sap of leaves, resulting in chlorosis, followed by tanning; in severe infestations, the damage can lead to leaf abscission and plant death. Chemical control (Bifenthrin) is used in emergency cases. However, environmental certification systems do not recommend this practice due to the high toxicity to humans and the environment. Therefore, alternative control strategies have been studied, such as biological control, which is potentially less toxic and is in compliance with the social and environmental aspects of forest plantations, according to environmental certification systems. Microbial control has been extensively and successfully studied in the country, such as entomopathogenic fungi, and thus, this procedure has been considered as a potential alternative to combat Thaumastocoris peregrinus. The first pathogens associated with insects control can be found naturally or isolated, or can be massively produced and stored for use in the field. Due to the possibility of being isolated and massively produced, a market for entomopathogenic fungi has been created, which enabled the development of mycoinseticide products. The fungi Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea and Beauveria brongniartii have been used in this industry. The present study aimed to evaluate the efficiency of microbial control applied to T. Peregrinus in field conditions as a viable alternative to be inserted in the integrated management of this pest. The most effective treatment is the chemical control (Bifenthrin), followed by the biological control with I. fumosorosea, B. bassiana, and Metarril®. The entomopathogenic fungi I. fumosorosea and B. bassiana proved to be potential alternatives for biological control in the Integrated Management of T. peregrinus. / Líder mundial de produtividade em plantações de eucalipto, o Brasil possui, aproximadamente, 6 milhões de hectares com a cultura e tem otimistas projeções de expansão do setor nos próximos anos. Com sua origem na Oceania, o eucalipto foi introduzido no Brasil e alicerçado em técnicas silviculturais e de melhoramento. Com isso, o país desenvolveu a eucaliptocultura e uma ampla base genética para a produção clonal. No entanto, falhas em fronteiras fitossanitárias possibilitam a introdução de pragas exóticas potencializadas pela ausência de inimigos naturais específicos e pela homogeneidade das plantações. Como consequência, os custos com a proteção florestal são elevados e interferem diretamente na competitividade do país no mercado externo. Presente em todo o mundo e detectado no Brasil em 2008, o Thaumastocoris peregrinus é praga-chave na eucaliptocultura. Esta praga dispersou-se para todo o país associado à cultura do eucalipto que ao utilizar a sua seiva na alimentação, provoca danos que levam a clorose, seguida de bronzeamento e, em infestações severas, pode levar a absição da folha e morte da planta. Emergencialmente, utiliza-se o controle químico com Bifentrina, no entanto, não é recomendado devido à alta toxidade ao homem e ao meio ambiente e não sugerido por sistemas de certificação ambiental. Assim, estratégias de controle alternativos vêm sendo estudadas, como o controle biológico, potencialmente menos tóxico, que atestam os aspectos sócio-ambientais das plantações florestais para tais sistemas de certificação. Com uma ampla gama de estudos e casos de sucesso no país, o controle microbiano, integrante do controle biológico, é visto como uma alternativa potencial; em destaque está o uso de fungos entomopatogênicos. Os primeiros patógenos associados ao controle de insetos podem ser encontrados naturalmente, reisolados, produzidos massalmente e armazenados para a utilização em campo. Concebendo a criação de um mercado para tal, os fungos entomopatogênicos possibilitaram a criação de produtos micoinseticidas Entre os fungos mais utilizados destacam-se o Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea e Beauveria brongniartii. O presente trabalho objetivou avaliar a eficiência do controle microbiano do T. peregrinus em condições de campo, a fim de obter uma alternativa viável a ser inserida do Manejo Integrado do T. peregrinus. O tratamento mais eficiente foi com o controle químico (Bifentrina), seguido dos controles biológicos com I. fumosorosea, B. bassiana e Metarril®. Sendo assim, os fungos entomopatogênicos I. fumosorosea e B. bassiana são alternativas potenciais para a inserção do controle biológico no Manejo Integrado do T. peregrinus. / São Cristóvão, SE