L’entreprise SEPROSYS est une société spécialisée dans le développement de solutions d'extraction et de séparation de molécules. Au cours de l’année 2011, l’entreprise a développé un procédé innovant de séparation et de purification fractionnée de biomolécules issues de macroalgues marines. Ce travail de thèse a pour objectif de trouver des applications aux fractions extraites selon le procédé d’extraction et de purification de la société SEPROSYS, et en particulier la fraction des polysaccharides sulfatés, dans deux domaines distincts : en pharmaceutique pour leur activité anti-coagulante et en cosmétique pour leur activité anti-âge. La première partie de nos travaux se penche sur le potentiel des polysaccharides sulfatés de macroalgues comme anti-coagulants. Pour cela, des extraits aqueux de différentes macroalgues brunes, rouges et vertes ont été préparés et leur activité anti-coagulante a été mesurée. Les algues présentant le meilleur potentiel ont ensuite été traitées au moyen du procédé SEPROSYS® afin de purifier leurs polysaccharides sulfatés et d’étudier leur activité anti-coagulante. De plus, l’objectif de ce travail consiste également à mieux comprendre la relation structure-fonction de l'activité anticoagulante d'ulvanes. A cette fin, des ulvanes issus d’Ulva sp. de pureté élevée ont été produits par le procédé SEPROSYS®, soumis à des modifications chimique (hypersulfatation) et physique (dépolymérisation) et leur activité anticoagulante a été étudiée. La deuxième partie de nos travaux concerne l’évaluation du potentiel de ces macroalgues comme agents actifs utilisables en dermo-cosmétique, en particulier pour leur activité anti-âge. Dans ce but, différentes fractions de macroalgues brunes, rouges et vertes ont été testées sur des lignées cellulaires de fibroblastes dermiques humains et leur effet sur la production de collagène par ces fibroblastes a été étudié. Enfin, le potentiel d’ulvanes extraits d’Uva sp. par le procédé de l’entreprise SEPROSYS pour stimuler la biosynthèse de collagène et d’acide hyaluronique par ces mêmes fibroblastes a été déterminé. / SEPROSYS is a company specialized in the development of solutions for the extraction and separation of molecules. In 2011, the company has developed an innovative process of fractionated separation and purification of biomolecules from macroalgae. The purpose of this thesis work is to find applications for the purified fractions from the SEPROSYS® process and in particular the sulfated polysaccharides, for two distinct biological activities : as pharmaceutical for their anti-coagulant activity and as dermo-cosmetics for their anti-aging activity. The first part of our work focus on the potential of sulfated polysaccharides from macroalgae as anti-coagulant agents. To this end, aqueous extracts from brown, red and green macroalgae were prepared and their anti-coagulant activity was measured. The best macroalgae were then processed with the SEPROSYS procedure in order to purify the sulfated polysaccharides and study their activity. Furthermore, one of the objectives of this work was to acquire a better understanding of the structure/anti-coagulant function relationship of ulvans. Ulvans of high purity were extracted from Ulva sp. with the SEPROSYS® process, submitted to chemical (hypersulfatation) and physical (depolymerization) modifications and their anti-coagulant activity was measured. The second part of our work relates to the potential of the macroalgae as active agents to be used in dermo-cosmetics, and, in particular, for their anti-aging activity. Different brown, red and green macroalgae fractions were thus tested on normal human dermal fibroblasts cell lines and their effects on the collagen production were measured. Furthermore, the capacity of different molecular weight ulvans extracted from Ulva sp. to stimulate the collagen and hyaluronan biosynthesis was studied. To this end, we developed an efficient depolymerization procedure using ion exchange resins.

In recent years, microtransactions have become a norm for monetization and a standardbusiness model in free-to-play games. This is something that affects multiple individuals andhas caused quite a stir among players. Through this research, we want to gain anunderstanding of why some microtransaction types might be considered more acceptable thanothers. In addition, to gaining potential data that could possibly give us a look into the futureof the design of microtransactions. We have gathered our data by conducting online chatbased semi-structured interviews with current and former university students studying gamedesign at Uppsala University.The research found that game design students have a predominantly negative opinion aboutmost microtransactions, especially when they were affecting the gameplay, contrary to whenthey were not.

在競爭日益激烈、資訊日益複雜的市場環境下，廠商往往已經做到了使顧客滿意，卻仍留不住顧客，因此，近來廠商所一直追求的目標便是對於品牌的忠誠度；而本研究主要是在探討怎麼樣的情況會造成顧客的滿意？怎麼樣的滿意才會造成顧客在態度上的忠誠？態度忠誠與行為忠誠之間的關係為何？並試著以交易成本理論的三個構面︰「市場資訊的複雜度」、「消費者對該公司的信任度」、「資產專屬性」來解釋滿意度、態度忠誠與行為忠誠之間的關係。整合以上研究架構，建立一整體概念模型，以一知名化妝品品牌VIP資料庫為研究對象，分別對續卡會員以及未續卡會員做研究，了解顧客滿意度與顧客忠誠度之關係以及兩群VIP之不同。 由實證結果可以了解不論是續卡會員或是未續卡會員，對於產品的失驗與消費者對該公司的信任度皆會影響產品的滿意度，而產品滿意度、服務品質與消費者對該公司的信任度也都會影響對該公司的整體滿意度，整體滿意度、消費者對該公司的信任度以及資產專屬性則會影響顧客的態度忠誠。 而續卡會員與公司之間所建立的專屬資產越多，續卡會員在行為上就越忠誠；未續卡會員則是從態度忠誠去影響行為上的忠誠，而且市場資訊的複雜度則會從影響未續卡會員的整體滿意度，並由整體滿意度去影響態度忠誠，進而再自態度忠誠影響其行為忠誠，也就是說，在各種因素影響下，未續卡會員的態度越忠誠，行為也會越忠誠。 根據實證所得結果，提供業者如何創造顧客滿意度與顧客忠誠度的建議。

Afrikaans text / Hierdie studie spreek die beperkte en eensydige beriggewing oor vroue en vroulike skoonheid in die Hebreeuse Bybel en ander antieke geskrifte aan, asook die ondergeskikte posisie wat vroue in die patriargale Ou Testamentiese samelewing beklee het. ‘n Argeologiese benadering word gevolg en beskikbare literêre bronne word gebruik. Daar word gelet op die redes waarom ‘n mooi voorkoms vir vroue so belangrik was. Hul posisie ten opsigte van staatkundige, wetlike, godsdienstige, ekonomiese en huishoudelike aangeleenthede en hul lewensverloop word bespreek. Die studie fokus hoofsaaklik op vroue van ou Israel en Egipte – vir ‘n goeie vergelyking. Inligting oor vroue van die ou Nabye Ooste en Mediterreense wêreld word waar van toepassing ook in aanmerking geneem. Vroue se skoonheidsmiddels, parfuums, juweliersware en kleredrag word bespreek – asook die invloed van vroue se skoonheidspraktyke op die ekonomie en handel van antieke tye. Die slot- hoofstuk maak sekere afleidings en dui enkele onderwerpe vir verdere navorsing aan. / This study addresses the limited and one-sided reporting about women and female beauty in the Hebrew Bible and other ancient literary sources, as well as the subservient position the women experience in the patriarchal Old Testament society. An archaeological approach is followed, although literary sources are also used. Attention is given to women’s position with reference to governmental, legal, religious and domestic issues, their course of life and the reasons why a beautiful and attractive appearance was important. The research focuses mainly on the women of ancient Israel and Egypt – for the purpose of comparison. Information on women of the ancient Near East and Mediterranean world is also taken into account. Women’s cosmetics, perfumes, jewelry and clothing are discussed – as well as the influence of women’s beauty practices on the economy and trade of ancient times. The final chapter makes certain deductions and some aspects are recommended for further study. / Biblical and Ancient Studies / M. A. (Biblical Archaeology)

A Senna occidentalis é uma leguminosa nativa das Américas largamente distribuída e utilizada popularmente em regiões tropicais do mundo, apresentando relevância na busca de novos produtos naturais biologicamente ativos. O presente trabalho teve como objetivo a avaliação da atividade antimicrobiana e citotóxica de extratos aquosos das sementes e suas trações protéicas, bem como dos extratos hidroalcoólicos das sementes e das partes aéreas dessa planta, visando a sua utilização em preparações tópicas. As atividades antibacteriana e antifúngica, frente aos microrganismos padrões farmacêuticos, foram avaliadas pela técnica de diluição em meios líquidos, adaptada para microplacas. A citotoxicidade das amostras ativas foi avaliada pelo teste do MTS, empregando-se cultura de fibroblastos NIH-3T3. Como resultado, o extrato hidroalcoólico de sementes a 0,3% (p/v) foi o que melhor demonstrou potencial antimicrobiano, além de toxicidade adequada, podendo ser um candidato para o uso como um antimicrobiano ou conservante de preparações tópicas. / Senna occidentalis is a native leguminous from America widely spread in tropical regions of the world and employed in folk medicine, showing a great importance on the search of new bioactive natural products. The aim of the present work was to evaluate the antimicrobial and cytotoxic activities of the aqueous extract seeds\' and its protein fractions, as well the hydro-alcoholic extracts seeds\' and aerial parts from this plant, considering its possible use in topic preparations. The antibacterial and antifungal activities, against the pharmaceutical standard microorganisms, were evaluated by broth dilution technique, adapted to microplates. The cytotoxicity of active samples was evaluated by the cellular viability test with MTS employing NIH-3T3 fibroblasts cell culture. As a result, the hydro-alcoholic extract seeds\' 0,3% (w/v) demonstrated a better antimicrobial potential and a suitable toxicity. In such case, this extract could be a candidate for the use as antimicrobial or preservative of topic preparations.

No presente trabalho foram estudadas as separações de 18 flavonóides (9 agliconas e 9 glicosídeos) pelas técnicas de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência em fase reversa (RP-HPLC) e Cromatografia Micelar Eletrocinética em fluxo reverso (RF-Meck). Em ambas as técnicas foram avaliados solventes puros (metanol, acetonitrila e tetrahidrofurano) e suas misturas como formas de promover a variação de seletividade, através da modificação da fase móvel em HPLC, e da natureza do aditivo orgânico em RF-Meck. Nos estudos efetuados em HPLC utilizando-se gradiente, pode-se comprovar a possibilidade da modelagem do fator de retenção em funçã da proporção de solvente utilizados (MeOH, ACN, THF e suas misturas). Pode-se ainda, com base nos dados de retenção e na análise hierárquica de c1usters, diferenciar quatro diferentes grupos de sistemas cromatográficos com diferentes seletividades para flavonóides agliconas, e outros quatro com diferentes seletividades para glicosídeos. Os sistemas cromatográficos mais ortogonais (cada um pertencente a um grupo de seletividade) foram aplicados na separação de uma planta modelo (Azadirachta indica), de onde pode-se escolher a fase móvel mais seletiva para se otimizar a separação dos flavonóides glicosilados presentes nas folhas desta planta. No método final otimizado pode-se identificar e quantificar cinco dos flavonóides majoritários presentes, sendo três glicosídeos de quercetina (rutina, isoquercitrina e quercitrina) e dois glicosídeos de kaempferol (astragalin e nicotiflorin), em amostras de duas diferentes procedências (Piracicaba-SP e Silvânia-GO). Nos estudos envolvendo a separação dos dezoito flavonóides por RFMEKC pode-se comprovar diferenças significativas de seletividade quando se varia a natureza do solvente orgânico utilizado como aditivo, além de se observar tendências na migração em função das propriedades do solvente adicionado e da estrutura molecular do flavonóide. O solvente de menor eficiência para separação dos flavonóides foi o MeOH. Através da análise dos eletroferogramas obtidos através de um planejamento experimental de misturas, e das trocas de pares críticos observadas nos vários eletrólitos utilizados, obteve-se um método de separação com apenas um par crítico em menos de 12 minutos de corrida. O coeficiente de variação obtido para o fator de retenção foi de 1,5% e para área de 3%, considerando-se cinco injeções. O método desenvolvido foi aplicado com sucesso na identificação dos flavonóides majoritários presentes na planta modelo (Neem), obtendo-se o mesmo resultado do estudo anterior. Como forma de avaliar a concentração de flavonóides totais presentes em espécies vegetais é comum a análise de extratos após hidrólise ácida (conversão de todos glicosídeos em agliconas). Desta forma otimizou-se uma metodologia de separação em RP-HPLC de 8 flavonóides agliconas comumente presentes em alimentos e extratos vegetais de uso cosmético. A otimização foi efetuada mediante um planejamento experimental de misturas, para escolha da fase móvel mais seletiva, e de um planejamento fatorial composto central, para otimização das condições de gradiente. O método obtido foi o mais rápido já visto dentro da literatura consultada. A separação em linha de base foi efetuada em menos de 15 minutos, com coeficientes de variação de área entre 0,1 e 1,8%, coeficiente de correlação de 0,9993 a 0,9994 na faixa de 5 a 100 µg/mL, e limites de quantificação estimados na faixa de 0,1 a 0,21µg/mL. O método desenvolvido foi aplicado na otimização das condições de hidrólise de um extrato de Neem. A otimização foi efetuada através de metodologia de superfície de resposta, levando-se em consideração a concentração de ácido adicionada, o tempo de reação, a temperatura, e a concentração de um antioxidante (ácido ascórbico) adicionado. O resultado da otimização foi uma metodologia de hidrólise com tempo de reação igual a 5 minutos, utilizando-se 1,4 mol/L de HCI, 119°C e 500 µg/mL de ácido ascórbico. Através das metodologias de análise e de hidrólise desenvolvidas pode-se constatar a presença e quantificar no extrato de Neem os flavonóides agliconas quercetina, kaempferol e miricetina. Com o objetivo de se avaliar quais os componentes presentes em extratos vegetais são os responsáveis pelo poder antioxidante atribuído a determinadas plantas, foi montado um sistema de avaliação de poder antioxidante \"on-line\" com reação pós-coluna em HPLC (baseado na literatura) utilizando-se como \"radical livre modelo\" o ABTS. A análise da planta modelo (Neem) neste sistema mostrou que os flavonóides glicosilados identificados nas partes anteriores deste trabalho são os responsáveis pelo poder antioxidante atribuído a esta planta. De posse desta informação, e visando a obtenção de extratos para aplicações cosméticas com poder antioxidante, modelou-se a extração dos flavonóide do Neem em função da composição do solvente extrator (água, etanol , propilenoglicol e suas misturas), de acordo com um planejamento simplex centróide ampliado. Além da previsão da concentração dos princípios ativos pode-se ainda prever outras propriedades dos extratos obtidos, tais como, índice de refração e densidade, muitas vezes constituintes de especificações técnicas de acordo com as aplicações a que se destinam (cremes, xampús, etc). / At this work, separation of 18 flavonoids (9 aglycones and 9 glycosides) using High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Reduced Flow Micellar Electrokinetic Chromatography (RF-MEKC) were evaluated. For both techniques, pure solvents (methanol, acetonitrile and tetrahydrofuran) e their mixtures were evaluated as an approach of varying selectivity by changing mobile phase in HPLC and organic additive type in RF-MEKC. For HPLC studies using gradient elution, it was possible to guarantee the modeling for retention factor in function of organic solvent used (methanol, acetonitrile and tetrahydrofuran and theirs mixtures). It can be also confirmed, based on retention data and hierarquical clusters analysis, four different chromatographic groups with different selectivity for flavonoid aglycone, and four groups with different selectivity for glycosides. More orthogonal chromatographic systems (each one belonging to a selectivity group) were applied to Neem (Azadirachta Indica) analysis. From this study, it can be chosen the most selective mobile phase composition and optimize flavonoid glycosides separation present at Neem leaves. Applying optimized method, five major flavonoids can be identified and quantified, three quercetin glycosides (rutin, isoquercitrin and quercitrin) and two kaempferol glycosides (astragalin and nicotiflorin), at two samples from different origins (Piracicaba-SP and Silvânia-GO). For studies regarding eighteen flavonoids separation by RF-MEKC can be proved significant selectivity differences when distinct organic solvent are used as additive. Moreover, it can be noted tendencies in migration behaviour depending of solvent used and molecular structure of flavonoids. The solvent with less efficiency to f/avonoid separation is methanol. Analyzing electropherograms obtained by a design of mixtures and by criticai pairs changes observed in diverse electro/ytes, a separation method with only one criticai pair and 12 minutes run was obtained. Coefficient of variation obtained for retention factor was 1.5% and 3% for area (n=5). Developed method was applied to identify major flavonoids at model plant (Neem) and same results observed at previous work were obtained. In order to evaluate total flavonoid concentration present in a plant is a common approach to analyse extracts after acid hydrolyze (convert ali glycosides to aglycones). A method was optimized to separate 8 flavonoid aglicones by RPHPLC usually present in food and vegetal extracts to cosmetic use. Optimization was performed by a mixture factorial design to select the most selective mobile phase composition and one facto ria I design with central point to optimize gradient parameters. Developed methodology is the faster reported in literature until now. Baseline separation was achieved in less than 15 minutes, with coefficients of variation between 0.1 and 1.8%, correlation coefficient from 0,9993 to 0,9994 at 5-100 µg/mL concentration range and quantification limits from 0.1 to 0.21 µg/mL. Developed method was used to optimize hydrolize parameters for a Neem extract. Optimization was realized by a response surface methodology, having concentration of acid added, reaction time, temperature and antioxidant (ascorbic acid) concentration added as parameters. From this study was developed a hydrolyze methodology with 5 minutes of reaction time, using 1.4 mol/L HCI, 119°C and 500 µg/mL of ascorbic acid. Applying method of analysis and hydrolyze developed at Neem extracts it can be identified and quantified aglicones quercetin, kaempferol and miricetin. Aiming to evaluate which compounds in a vegetal extract have antioxidant activity credited to some plants, an on-line system with post-column reaction was built in HPLC (based on literature), using ABTS as free radical mode!. Neem analysis at this system showed that flavonoid glycosides identified before are the responsible for antioxidant activity described for this plant. Based on this information and intending to obtain vegetal extracts with antioxidant activity for cosmetic use, Neem extraction procedure was modeled in function of solvent mixture used (water, ethanol, propylene glycol and their mixtures), following a simplex centroid designo Besides the concentration of active components prediction it can also be predict other properties like refractive index and density, properties that might be included at technical specifications depending of the intended use (creams, shampoos, etc).

O hidrolisado de proteína do arroz (Oryza sativa) apresenta à habilidade de aumentar à produção de fibroblastos e colágeno, devido a esta especificidade, cada vez mais a indústria cosmética mostra interesse em utilizar peptídeos como ativo de suas formulações.O presente trabalho tem como objetivo a avaliação da estabilidade de formulações cosméticas com ou sem a presença das amostras da proteína hidrolisada do arroz por métodos físico-químico e térmico. Ainda como objetivo desenvolvimento de metodologias analíticas para a separação e identificação das amostras de hidrolisada de proteína do arroz; e a verificação de sua atividade antioxidante. Foram desenvolvidas formulações cosméticas para a incorporação destas amostras e realizou-se um estudo de estabilidade físico-química e térmica. As características físicas e organolépticas do estudo em questão foram obtidas. As formulações aprovadas apresentaram um pequena variação no valor do pH. Em seguida as formulações aprovadas foram estudadas com a incorporação dos ativos de hidrolisado de proteína do arroz e aprovadas. Para a determinação da estabilidade térmica das amostras de hidrolisado de proteína do arroz nas preparações cosméticas foi utilizada a termogravimetria/termogravimetria derivada para a pesquisa. Foi desenvolvido método para avaliação da atividade antioxidante das amostras de hidrolisado de proteína do arroz que mostrou uma variação de atividade ± de 4 vezes entre as amostras. Foram desenvolvidos métodos por cromatografia líquida de alta eficiência e cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao espectrômetro de massas para a separação e identificação dos peptídeos presentes no estudo nas amostras contendo hidrolisado de proteína do arroz. / The peptides are being widely used in cosmetics, since they act on specific receptors in cells and organs. In particular the hydrolyzed rice (Oryza sativa) protein has the ability to increase the production of fibroblasts and collagen. This study aims to assess the stability of cosmetic formulations, with or without the presence of hydrolyzed samples of rice protein, by thermal and physical-chemical methods, the development of analytical methodologies for the separation and identification of samples of hydrolyzed rice protein and the determination of the antioxidant activity of these samples. Cosmetic formulations have been developed and studies of physical and chemical stability and heat resistance were carried out. The physical and organoleptic characteristics were also studied. It was observed that the approved formulations presented small pH variation. They were then studied with the incorporation of hydrolyzed rice protein samples, and approved. To determine the thermal stability of hydrolyzed rice protein samples in cosmetic preparations, analytical techniques as thermogravimetry / derivative thermogravimetry were used in this research. A method was developed to evaluate the antioxidant activity of hydrolyzed rice protein samples, which showed a variation of activity ± 4 times between samples. Methods have been developed by high performance liquid chromatography and high performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry for separation and identification of peptides present in the studied samples containing hydrolyzed rice protein.

O potencial farmacológico de espécies do gênero Lippia no tratamento de infecções é conhecido popularmente, assim foi considerado o estudo da atividade da Lippia salviaefolia nativa do cerrado brasileiro. O objetivo do trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de extratos de Lippia salviaefolia Cham. e sua citotoxicidade, visando aplicação como conservante natural em formulações cosméticas. O ensaio antimicrobiano foi realizado através do método de difusão em placa e determinação do CMI por de microdiluição em microplacas, utilizando os microrganismos: P. aeruginosa ATCC 9027, S. aureus ATCC 6538, E. coli ATCC 8739, C. albicans ATCC 10231. Desenvolveu-se e avaliou-se a estabilidade acelerada de cremes, geis e xampus contendo o extrato de Lippia salviaefolia. As formulações de melhor desempenho quanto à estabilidade foram submetidas ao teste de eficácia de conservante. Avaliou-se segurança das formulações in vitro, em substituto cutâneo dermo-epidérmico por meio de estudos histológicos e o teste de citotoxicidade em cultura de queratinócitos humanos. No teste de atividade antimicrobiana verificou-se que a fração de acetato de etila e a fração de clorofórmio foram frações mais ativas com CMI de 0,2 % para bactérias e fungos. Os testes de eficácia de conservante das formulações contendo fr. ac. etila de L. salviaefolia apresentaram atividade antimicrobiana para bactérias e C. albicans em creme, gel e xampu, para A. niger apresentaram atividade adequada somente em xampu. No teste de citoxicidade foi verificado segurança em concentrações a partir de 0,05 %. Sendo que na concentração de 0,2 %, correspondente ao CMI, se atinge a faixa de segurança apenas com meia hora de contato. Os resultados sugerem que a fração de acetato de etila da Lippia salviaefolia Cham. pode ser utilizada como conservante natural em produtos cosméticos. / The pharmacological potential of species of the Lippia in the treatment of infections has been known popularly, thus was considered the study of the activity of the native salviaefolia Lippia of the Brazilian Cerrado. The purpose of the work was to evaluate the antimicrobial activity of extracts of Lippia salviaefolia Cham. and its citotoxicy aiming the application as natural preservative in cosmetic formulations. The assay antimicrobial was carried through the method of diffusion in plate and determination of the MIC by microdilution, having used the microorganisms: P.aeruginosa ATCC 9027, S. aureus ATCC 6538, E. coli ATCC 8739, C. albicans ATCC 10231. It has developed and evaluated the stability of creams, gels and xampus with the extract of Lippia salviaefolia Cham. The formulations of the best stability performance have submitted to preservative efficacy test. The safe of the formulations has histological evaluated by in vitro. In the test of antimicrobial activity it has verified that the ethyl acetate and the chloroform fraction have been the most active and with CMI of 0.2 % for bacteria and fungus. The tests of effectiveness of preservatives have showed of the formulations contend the ethyl acetate fraction presented antimicrobial activity for bacteria and C. albican in cream, gel and shampoo. On the other hand, against A.niger it has been suitable activity in shampoo. In the citotoxity test, the 0,05 % ethyl acetate fraction has presented interval of security. And in the concentration of 0,2%, corresponding to CMI, safety\'s strip is just reached with half hour of contact. The results have suggested that the ethyl acetate extract of the Lippia salviaefolia Cham. should be used as natural preservative in cosmetic products.

O desenvolvimento de métodos analíticos e o estudo de estabilidade de formulações cosméticas e farmacêuticas fazem parte do processo de garantia de qualidade, o qual tem por objetivo assegurar a eficácia e segurança no uso de tais produtos pelo consumidor. O ácido kójico é um agente despigmentante que pode estar associado ao ácido glicólico, um agente esfoliante, a fim de ter sua ação potencializada. O objetivo do presente trabalho foi o desenvolvimento de um método analítico para determinação do ácido kójico a 1% associado ou não ao ácido glicólico a 5% em formulações tópicas na forma creme e gel, a base de excipientes comumente utilizados em farmácias de manipulação, e a realização de um estudo acelerado para avaliar a estabilidade das mesmas. Para a determinação do ácido kójico isolado empregou-se a espectrofotometria derivada de 1ª ordem no ultravioleta (UVD), usando-se o método \"zero crossing\" a 256,8 nm, onde a interferência dos excipientes da matriz foi anulada. Para a determinação dos dois ativos associados, foi validado um método por CLAE em fase reversa, compareamento iônico, empregando-se coluna Synergi Hidro® C18, fase móvel tampão NH4H2PO4/H3PO4 30 mM pH 3,0 com TBA (brometo de tetrabutilamônio) 2 mM : acetonitrila (95:5), vazão 0,7 mL/min e detector PDA fixado em 220 nm. As amostras foram extraídas sem grande complexidade e os ativos puderam ser determinados em 12 min. As mesmas condições experimentais foram usadas para o desenvolvimento de um método para a determinação do ácido kójico isolado nas formulações creme e gel por CLAE, sendo que a comparação com o método UVD não mostrou diferença estatisticamente significante para p = 95% quanto à precisão e exatidão. As amostras submetidas ao estudo de estabilidade acelerado, com duração de 90 dias, foram armazenadas em estufa a 40±2ºC e luz a 25±2ºC e também acompanhadas em armário fechado à temperatura ambiente, sendo avaliadas quanto aos caracteres organolépticos, pH, doseamento e comportamento reológico. As formulações submetidas ao estudo mostraram-se estáveis fisicamente, mas as amostras apresentaram decaimento do teor de ácido kójico acima de 5% quando armazenadas em estufa a 40±2ºC. Considerada a condição normal de armazenagem as formulações mantiveram-se dentro da faixa de 90% do teor inicial, podendo o prazo de validade de 90 dias ser considerado como referência para formulações semelhantes em composição e embalagem, desde que guardadas em temperatura ambiente e ao abrigo da luz. / The development of analytical methods and the stability study of cosmetics and pharmaceuticals are part of the quality assurance, which has for objective to guarantee the effectiveness and security in the use of such products for the consumer. Kojic acid is a depigmentant agent that can be used in association with glycolic acid, an exfoliant agent, in order to have its action maximized. The aim of this work was the development of an analytical method to assay kojic acid 1% associated or not with 5% glycolic acid in cream and gel form, based on excipients normally used in compounding formulations, and carried out an accelerated study to evaluate its stability. To determine kojic acid in such formulations it was employed an UV first-derivative spectrophotometric method (UVD), with \"zero crossing\" set in 256,8 nm, where the excipients interference could be annulled. To assay both acids in association it was validated a reversed phase HPLC method with ion pairing, employed a Synergi Hidro® C18 column, mobile phase NH4H2PO4/H3PO4 buffer 30 mmol -1 pH 3,0 plus TBA (tetrabutylammonium bromide) 2 mM : acetonitrila (95:5), flow rate of 0,7 mL/min and detector PDA set in 220 nm. The samples were easily extracted and the run time was 12 min. The same experimental conditions were used to the development of a HPLC method in order to determine the kojic acid isolated in cream and gel formulations. The UVD e HPLC methods were not statistically different in terms of accuracy and precision (p = 95%). The samples submitted to the accelerated stability study, for 90 days, were stored at 40±2ºC and light 25±2ºC. All samples were also stored at room temperature protected from light. Appearance, pH, rheology and amount of kojic and glycolic acids (by HPLC) were evaluated. At the end of the study, all the samples showed physical stability, but presented decline in kojic acid above 5% at 40±2ºC. Samples stored at not accelerated conditions preserved 90% of kojic acid concentration. Therefore, a 90 days expiration date may be considered for formulations with similar composition and packing, when stored at room temperature and protected from light.

Nos últimos anos vários produtos cosméticos contendo alfahidroxiácidos (AHAs) têm sido desenvolvidos e estão disponíveis no comércio, causando uma grande revolução em relação ao tratamento da pele fotoenvelhecida. Com o aumento da produção desses produtos, torna-se necessário o desenvolvimento e validação de novas metodologias analíticas para determinar os AHAs contidos em preparações cosméticas, tanto para o controle da qualidade do produto como para a segurança do consumidor. Nesta pesquisa os AHAs tartárico, glicólico, lático e mandélico foram analisados simultaneamente por eletroforese capilar (CE) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Os métodos foram validados avaliando-se os parâmetros de linearidade, limite de quantificação, precisão e exatidão. A separação e determinação quantitativa por CE dos ácidos glicólico, tartárico e lático foram realizadas empregando-se um capilar de sílica fundida com comprimento total de 57 cm e 50 cm de comprimento até o detector, 75 &#181;m d.i.; eletrólito constituído de hidrogenoftalato de potássio 10 mmol.L-1, CTAB 0,5 mmol.L-1, pH 4,1; tensão aplicada de -20 kV com detecção UV indireta a 254 nm; temperatura de 35°C. A separação e determinação quantitativa dos ácidos glicólico, tartárico e lático por CLAE foram realizadas empregando-se coluna Sinergy Hydro RP-18 Phenomenex&#174;, fase móvel constituída de solução fosfato de amônio 15 mmol.L-1, tetrabutilamônio 3 mmol.L-1, pH 2,0, vazão 0,7 mL/min e detecção no UV 220 nm. Para determinação do ácido mandélico por CLAE, foi empregada coluna RP-18 Lichrospher&#174; Merck, fase móvel constituída de solução de fosfato de amônio 15 mmol.L-1 / acetonitrila (80/20, v/v) , pH 2,5, vazão 1,0 mL/min. Os métodos propostos apresentaram boa linearidade com coeficiente de correlação (r) > 0,9999, boa especificidade, repetibilidade aceitável com desvio padrão relativo (RSD) < 1% para determinação nas amostras comerciais e exatidão com percentual de recuperação entre 99 e 101%. Os métodos propostos podem ser aplicados para determinação e quantificação de AHAs contidos em produtos cosméticos em curto espaço de tempo. / In recent years many new cosmetic products containing alpha-hydroxy acids (AHAs) have been developed and are commercially available, causing a great revolution to the treatment of the photoaging. With the increase of the production of these products, there is a need of development and validation of analytical methods for quantitative determination of AHAs, both for quality control purposes and to avoid excessive concentrations that could cause consumers undesirable side-effects. In this research, AHAs like tartaric, glycolic, lactic and mandelic acids were analyzed simultaneously using capillary electrophoresis (CE) and high performance liquid chromatography (HPLC). The methods were validated evaluating the parameters of linearity, limit of quantitation, precision and accuracy. The separation and determination for tartaric, glycolic and lactic acids using CE involved an uncoated silica capillary with 75 &#181;m i.d. and total length of 57 cm, 50 cm to the detector, with a solution containing 10 mmol.L-1 potassium phthalate as the background electrolyte and 0.5 mmol.L-1 cetyltrimethylammonium bromide as the electroosmotic flow modifier, pH 4.1, the applied voltage was -20 kV with indirect detection at 254 nm, the operating temperature was 35°C. The separation and determination for tartaric, glycolic and lactic acids using HPLC involved an Sinergy Hydro RP-18 Phenomenex&#174; column, a mobile phase constituted of 15 mmol.L-1 ammonium dihydrogen phosphate and 3 mmol.L-1 tetrabutylammmonium bromide, pH 2.0, a flow-rate of 0.7 mL.min-1 and UV detection at 220 nm. For the determination of the mandelic acid using HPLC involved an LiChrospher&#174; 100 RP-18 Merck column, a mobile phase constituted of 15 mmol.L-1 ammonium dihydrogen phosphate / acetonitrila (80/20, v/v) pH 2.5, a flow-rate of 1.0 mL.min-1 and UV detection at 220 nm. The proposed methods presented good linearity with correlation coefficients more than 0.9999, good specificity, acceptable repeatability, with relative standard deviation (RSD) were less than 1% for commercial samples determination, and recoveries were between 99% and 101 %. The proposed methods can be readily applied to commercially available cosmetic product for quantitative analysis with speed.