Orientador: Iguatemy Lourenço Brunetti / Banca: Silvia de Paula Gomes / Banca: Renata Pires de Assis / Resumo: O diabetes mellitus (DM) é uma desordem metabólica crônica caracterizada por distúrbios no metabolismo de carboidratos, lipídeos e proteínas, como consequência da deficiência na produção de insulina pelas células beta do pâncreas e/ou ao aumento na resistência à insulina nos tecidos, resultando em hiperglicemia. A manutenção da hiperglicemia por longos períodos participa do estabelecimento de diversos distúrbios no equilíbrio pró-oxidante/antioxidante, os quais levam ao estresse oxidativo, o qual culmina em perda de funcionalidade de biomoléculas e assim participa do estabelecimento das complicações microvasculares e macrovasculares do DM. Para amenizar estas complicações, fármacos anti-hiperglicêmicos têm sido utilizados no tratamento do DM. Contudo, tem sido postulado que mesmo com o controle glicêmico, as complicações do DM ainda podem se desenvolverem em indivíduos diabéticos, via uma condição denominada "memória metabólica", sendo que o estresse oxidativo participa deste processo. Intervenções terapêuticas complementares à terapia anti-hiperglicêmica para o auxílio na prevenção do progresso das complicações do DM incluem o combate ao estresse oxidativo com produtos naturais. Inúmeros estudos têm demonstrado os efeitos benéficos à saúde da curcumina (diferuloilmetano), pigmento amarelo extraído dos rizomas de Curcuma longa L., com ênfase em suas propriedades antioxidantes e anti-hiperglicêmicas. O presente estudo teve o objetivo investigar as mudanças temporais relacionad... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Diabetes mellitus (DM) is a chronic metabolic disorder characterized by disturbances in the metabolism of carbohydrates, lipids and proteins, as a consequence of the deficiency in the production of insulin by pancreatic beta cells and/or the increase in the insulin resistance in tissues, leading to hyperglycemia. The hyperglycemia maintenance for long periods has been involved in the onset of several disorders in the pro-oxidant / antioxidant balance, which lead to oxidative stress, culminating loss of biomolecule functionality and thus participates in the establishment of microvascular and macrovascular complications of DM. To alleviate these complications, oral antihyperglycemic drugs have been used in the treatment of DM. However, it has been postulated that, even with the effective glycemia control, the complications of DM can still be developed in diabetic individuals, via a condition called "metabolic memory", having the oxidative stress as a participant. Therapeutic options complementary to the antihyperglycemic therapy to prevent the progression of DM complications include diminishing the oxidative stress with natural products. Numerous studies have demonstrated the beneficial health effects of curcumin (diferuloylmethane), a yellow pigment extracted from the rhizomes of Curcuma longa L., with an emphasis on its antioxidant and antihyperglycemic properties. The objective of the present study was to investigate the temporal changes in oxidative stress of diabetic animals and treated with insulin or yoghurt enriched with curcumin. Normal (N) and diabetic rats (D, 3 days after induction of DM with streptozotocin, STZ) were treated at the following periods: 0, 7, 15, 30 and 74 days, according to the following groups: NYOG and DYOG rats, treated with yoghurt (1 mL/day); NCUR and DCUR, rats treated with yoghurt enriched with curcumin... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Ana Claudia Pavarina / Banca: Eunice Teresinha Giampaolo / Banca: Claudia Helena Lovato da Silva / Resumo: O surgimento da resistência antifúngica aos tratamentos convencionais tem exigido o desenvolvimento de novas modalidades terapêuticas para o tratamento da candidíase bucal. Nesse contexto, a Terapia Fotodinâmica (Photodynamic Therapy - PDT) tem sido sugerida como método alternativo para a inativação de microorganismos patogênicos. O sucesso da PDT depende, dentre outros fatores do tempo de pré-irradiação (TPI), que é o tempo em que o fotossensibilizador (FS) permanece em contato com os micro-organismos previamente à iluminação. O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade da PDT mediada pela curcumina (Cur), associando diferentes TPIs, concentrações e doses de luz, na redução da viabilidade celular de três espécies de Candida ATCC (C. albicans ATCC 90028; C. glabrata ATCC 2001; C. dubliniensis ATCC 7987), em culturas planctônicas e biofilmes. A Cur foi ativada por um aparelho de LED (luz emitida por diodo) que emite luz no espectro azul, com comprimento de onda predominante de 455 nm. Inicialmente, suspensões celulares padronizadas dos micro-organismos foram transferidas para placas de 96 orifícios, e tratadas com três diferentes concentrações de Cur (5, 10 e 20 YM), ou mantidas nos poços por 48 horas para formação dos biofilmes, seguida de tratamento com outras três concentrações de Cur (20, 30 e 40 YM). As culturas celulares foram deixadas em contato com a Cur por 1, 5, 10 ou 20 minutos, anteriormente à iluminação. Em seguida, as culturas planctônicas foram expostas à dose de luz de 5,28 J/cm2. Os biofilmes, por sua vez, foram tratados com duas doses de luz (5,28 e 10,56 J/cm2). Suspensões/biofilmes adicionais foram tratados somente com as três concentrações de Cur (pelo maior tempo usado em cada estudo) ou apenas com a maior dose de luz. Amostras controle não foram tratadas com Cur e não receberam luz. Após a PDT, as suspensões celulares... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The emergence of antifungal-resistant yeasts to conventional therapy has demanded the development of new therapy modalities against oral candidiasis. On this context, Photodynamic Therapy (PDT) has been suggested as a possible alternative treatment for inactivation of pathogenic microorganisms. PDT success depends, among other factors, on the pre-irradiation time (PIT). The aim of this study was to evaluate the effectiveness of curcumin (Cur)-mediated PDT associating different PITs, Cur concentrations and light doses, against planktonic and biofilm cultures of three different Candida species (C. albicans ATCC 90028; C. glabrata ATCC 2001; C. dubliniensis ATCC 7987). Cur was activated by a LED (light emitting diode) device, which emits light on the blue spectrum, with predominant wavelength at 455 nm. Standardized cell suspensions were treated with three different concentrations of Cur (5, 10 e 20 YM), or kept into the wells for 48 hours to allow adhesion and biofilm formation. The biofilms were treated with other three different concentrations of Cur (20, 30 e 40 YM). The cultivated fungus (planktonic and biofilms) were maintained in the dark in contact with the PS for either 1, 5, 10 or 20 minutes before irradiation. The suspensions were exposed to LED light dose of 5.28 J/cm2, while the biofilms were exposed to either 5.28, or 10.56 J/cm2. Additional samples of suspensions/biofilms were treated only with the three Cur concentrations (for the highest incubation period used in the study), without illumination, or only with the highest light dose, without Cur. Control samples had neither light nor Cur. After PDT, suspensions were plated on Sabouraud Dextrose Agar (SDA) in duplicate, while biofilm results were read using the XTT-salt reduction method. The results for the planktonic cultures were statistically analyzed by Kruskal-Wallis and Dunn, while for the biofilms, analysis of variance... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Tatiane Pereira Scarpelli (tati.scarpelli@gmail.com) on 2018-08-15T01:03:56Z No. of bitstreams: 1 Tatiane- dissertação final.pdf: 1984978 bytes, checksum: 95d87d58bd4bea79691e4ec03d530a18 (MD5) / Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2018-08-15T12:42:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 scarpelli_tp_me_sjrp.pdf: 1984978 bytes, checksum: 95d87d58bd4bea79691e4ec03d530a18 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-15T12:42:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 scarpelli_tp_me_sjrp.pdf: 1984978 bytes, checksum: 95d87d58bd4bea79691e4ec03d530a18 (MD5) Previous issue date: 2018-08-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O consumo excessivo de lipídios na dieta constitui um problema na alimentação da sociedade atual, contribuindo para o desenvolvimento de doenças e de cânceres como o de mama, de próstata e de cólon. Se tratando da próstata, os lipídios podem ter ação direta, ou por mediadores celulares deles derivados e desequilibrar os níveis de esteroides sexuais. Contudo, alguns componentes dietéticos exercem papel benéfico para a saúde prostática ou mesmo propriedades terapêuticas, como a curcumina. Existe, portanto, interesse crescente na ação da curcumina sobre a próstata, e seus análogos sintéticos vem sendo testados para aplicação no tratamento de doenças prostáticas. Sabendo-se que componentes da dieta materna podem afetar a próstata masculina permanentemente, por programação do desenvolvimento, este estudo avaliou as consequências da dieta materna enriquecida com lipídios saturados da banha de porco, durante a gestação e lactação de ratos Wistar, associada ou não à suplementação alimentar com curcumina, além da ingestão do óleo de milho comercial, sobre a histofisiologia da próstata ventral da prole na idade adulta. Ratos Wistar foram divididos em cinco grupos (n=12 por grupo; 12 semanas de idade), segundo o regime alimentar ao qual as mães foram submetidas da 8ª sem. de idade até o desmame dos filhotes: C - dieta padrão; O- dieta padrão e óleo de milho (100µL em dias alternados, via gavagem); Cm - dieta padrão e óleo de milho contendo curcumina (100mg/kg de peso corporal, em dias alternados, via gavagem); L- dieta enriquecida com banha de porco (31% de banha de porco) e LCm - dieta enriquecida com banha de porco e óleo de milho/curcumina. Após eutanásia dos animais e realizada coleta dos materiais biológicos, como a próstata ventral e o sangue, realizaram-se análises das quais se obteve aumento nos depósitos de gorduras epididimal e visceral e, consequentemente, aumento no índice de adiposidade dos grupos L e O. Os animais dos grupos O e LCm tiveram aumento nos níveis de triglicerídeos e o grupo O apresentou aumento no nível de colesterol HDL. Os animais de O, L e LCm apresentaram atrofia epitelial, evidenciada tanto pela análise da frequência de ácinos atróficos, pela altura do epitélio e pela diminuição da frequência relativa do epitélio acinar. Ainda, os animais do grupo L apresentaram aumento da frequência relativa do compartimento luminal e de fibras colágenas. Não houve alterações nos níveis de proliferação celular. A expressão de receptores de andrógenos (AR) no epitélio foi maior no grupo L e um pouco menor para os grupos O e LCm. A incidência (número de animais acometidos/número total de animais) de focos inflamatórios aumentou nos grupos O e L (C- 29%; O – 40%; L – 78%) e foi reduzida pelo consumo de curcumina (Cm- 8%; LCm- 38%). Os dados obtidos indicam que, as dietas maternas enriquecidas com lipídios causam respostas na morfologia e na fisiologia da próstata ventral, em diferentes níveis. A banha pareceu alterar a estrutura e a expressão de AR de maneira acentuada, além de propiciar inflamação na glândula, enquanto o óleo de milho altera em menor grau. Além disso, a curcumina sozinha responde positivamente na próstata. / Excessive consumption of lipids in the diet is a problem in the feeding of current society, contributing to the development of diseases and cancers such as breast, prostate and colon. Lipids can have direct action on the prostate gland, or by cellular mediators derived from them and unbalance levels of sexual steroids. However, some dietary components play a beneficial role in prostate health or even therapeutic properties, such as curcumin. There is, therefore, growing interest in the action of curcumin on the prostate, and its synthetic analogues have been tested for application in the treatment of prostatic diseases. Knowing that components of the maternal diet can permanently affect the male prostate gland by developmental programming, this study evaluated the consequences of the maternal diet enriched with lard saturated lipids during gestation and lactation of Wistar rats, associated or not with dietary supplementation with curcumin, in addition to the commercial corn oil intake, on the histophysiology of the ventral prostate of the offspring in adulthood. Wistar rats were divided into five groups (n = 12 per group, 12 weeks old), according to the diet to which the mothers were submitted from the 8th week of age until the weaning of the pups: C - standard diet; O- standard diet and corn oil (100 μL on alternate days, via gavage); Cm - standard diet and corn oil containing curcumin (100mg / kg body weight, every other day, via gavage); L - diet enriched with lard (31% of lard) and LCm - diet enriched with lard and corn oil / curcumina. After the euthanasia of the animals and the collection of biological materials, such as the ventral prostate and blood, analyzes were carried out, which resulted in an increase in the deposits of epididimal and visceral fat and, consequently, an increase in the adiposity index of the L and O groups. The animals in the O and LCm groups had an increase in triglyceride levels and the O group had an increase in the level of HDL cholesterol. The O, L and LCm animals presented epithelial atrophy, evidenced both by the analysis of the atrophic acini frequency, by the height of the epithelium and by the decrease of the relative frequency of the acinar epithelium. Still, the animals in the L group presented increased relative frequency of the luminal compartment and collagen fibers. There were no changes in the levels of cell proliferation. The expression of receptor androgen (AR) in the epithelium was higher in the L group and somewhat lower in the O and LCm groups. The incidence (number of affected animals / total number of animals) of inflammatory foci increased in the O and L groups (C - 29%, O - 40%, L - 78%) and was reduced by the consumption of curcumin (C - 8% (LC-38%). The data obtained indicate that maternal diets enriched with lipids cause responses in the morphology and physiology of the ventral prostate at different levels. The lard appeared to alter the structure and expression of AR very markedly, in addition to providing inflammation in the gland, while the corn oil changes to a lesser degree. In addition, curcumin alone responds positively in the prostate.

Esta tese de doutorado trata do desenvolvimento inédito de formas farmacêuticas sólidas contendo nanocápsulas de núcleo lipídico, facilmente redispersíveis em água, empregando a secagem por aspersão ou granulação em leito fluidizado. A estratégia visa superar limitações tecnológicas associadas às suspensões de nanocápsulas poliméricas, pela sua natureza coloidal, e avançar na fronteira do conhecimento, buscando o desenvolvimento de formulações inovadoras para a administração oral de fármacos. Foram produzidos pós e grânulos contendo nanocápsulas de núcleo lipídico (LNC), empregando a secagem por aspersão e granulação em leito fluidizado, respectivamente. A influência do número de partículas das suspensões de nanocápsulas nas propriedades de redispersão dos pós produzidos pela secagem por aspersão foi investigada. Uma mistura de maltodextrina e L-leucina (90:10 m/m) foi utilizada como adjuvante de secagem. A formulação que obteve os melhores perfis de redispersão consistiu de uma mistura da suspensão de nanocápsulas de núcleo lipídico e de uma solução contendo maltodextrina/L-leucina (10% m/v) em uma proporção 1:1 v/v. Após a redispersão dos pós produzidos em água, 75% do número inicial de partículas de nanocápsulas foi recuperado. Análises de área superficial, microscopia eletrônica de varredura e microscopia confocal Raman permitiram compreender as diferenças na organização estrutural destes pós. Estes dados, em conjunto com análises de diâmetro médio de partículas, obtidos por difratometria de laser, confirmaram a influência do número inicial de partículas das suspensões de nanocápsulas na qualidade de sua redispersão, a partir de formulações sólidas obtidas pela secagem por aspersão. Para compreender as influências dos processos de secagem e redispersão da formulação proposta no perfil de liberação in vitro e na atividade biológica de fármacos associados ao sistema, novos pós foram preparados, substituindo-se a suspensão de nanocápsulas sem fármaco (LNC) por nanocápsulas contendo uma substância ativa modelo (curcumina) (LNC-C 1 mg mL-1). A formulação seca demonstrou adequada redispersão em água e o perfil de liberação in vitro manteve-se semelhante ao da suspensão original (LNC-C), seguindo um modelo cinético de ordem zero. A atividade da curcumina nanoencapsulada foi avaliada empregando um modelo de inflamação induzida por LPS em cultura organotípica de cultura de hipocampo cerebral de ratos. Não houve alterações nas concentrações de biomarcadores pró-inflamatórios (TNF-α e IL-1β) liberados nos meios de cultura, comparando-se as LNC-C em suspensão ou a redispersão dos pós secos. Portanto, a produção de pós facilmente redispersíveis não implica em alterações no controle da liberação in vitro e na atividade biológica da substância ativa nanoencapsulada. Na última etapa, a obtenção dos grânulos empregando granulador em leito fluidizado foi estudada utilizando maltodextrina, como material de suporte, e suspensões de nanocápsulas de núcleo lipídico estabilizadas com polissorbato 80 (LNC) ou com revestimento catiônico (C-LNC), como líquidos aglutinantes. A influência do revestimento catiônico das nanocápsulas nas características tecnológicas dos grânulos obtidos foi avaliada. Propriedades como o tamanho de partícula, rendimento, teor de umidade, características morfológicas, propriedades de fluxo e perfil de redispersão foram estudados. Os rendimentos do processo de granulação foram próximos a 90%, resultando em grânulos com teor de umidade inferior a 4%. Valores calculados de índice de Carr, fator de Hausner e índice de coesão indicaram que as formulações de grânulos propostas neste estudo apresentam melhores características de fluxo em relação à maltodextrina (matéria-prima). O revestimento catiônico das nanocápsulas melhorou tanto as propriedades de fluxo quanto o perfil de redispersão em água dos grânulos contendo C-LNC, demonstrado a partir das análises de diâmetro médio de partículas por difratometria de laser. Em conclusão, os processos de secagem por aspersão e granulação em leito fluidizado, empregados neste estudo, para a produção de formas farmacêuticas sólidas intermediárias e/ou finais contendo nanocápsulas de núcleo lipídico, mostraram-se alternativas viáveis para a produção de pós e grânulos facilmente redispersíveis em água, com potencial aplicação para administração oral de fármacos nanoencapsulados. / This thesis proposes the development of novel easily redispersible solid dosage forms containing lipid-core nanocapsules, produced by spray drying or fluidized bed granulation. The strategy aims to overcome the technological limitations associated to polymeric nanocapsule suspensions, due to their colloidal nature, aiming the development of innovative oral formulations. Powders and granules containing lipid-core nanocapsules (LNC) were produced by spray-drying and fluidized bed granulation, respectively. The influence of the number of particles of the nanocapsule suspensions on the redispersion properties of the spray-dried powders was investigated. A mixture of maltodextrin and L-leucine (90:10 m/m) was used as a drying adjuvant. The formulation that obtained the best redispersion profiles consisted of a mixture of the lipid-core nanocapsule suspension and a solution containing maltodextrin/L-leucine (10% w/v) in a 1:1 v/v ratio. After the aqueous redispersion, 75% of the initial number of particles in the nanocapsules suspension was recovered. Analysis of surface area, by scanning electron microscopy and by Raman confocal microscopy allowed understanding the differences in the structural organization of the powders produced. These results along with the mean diameter analysis by laser diffractometry confirmed the influence of the initial number of particles of the nanocapsule suspensions on the redispersion properties of the spray-dried powders. In order to understand the influence of the drying and redispersion processes on the in vitro release profile and the biological activity of substances associated to this system, new powder formulations were prepared by replacing the unloaded suspension of nanocapsules (LNC) by nanocapsules containing an active substance (curcumin) (LNC-C 1 mg mL-1). The spray-dried powder showed good aqueous redispersion profile and its in vitro release profile remained similar to that of the original LNC-C suspension, according to the zero-order kinetic model. The biological activity of nanoencapsulated curcumin was assessed by a model of LPS-induced inflammation in organotypic hippocampal slice cultures. There were no changes in the concentration of pro-inflammatory biomarkers (TNF-α and IL-1β) released in the culture media, comparing the LNC-C as the initial suspension or the aqueous redispersion of their spray-dried powders. The drying process does not imply changes in the control of in vitro release and in the biological activity of the nanoencapsulated active substance. In the last stage, granules were produced using a fluidized bed granulator and maltodextrin, as support material. Lipid-core nanocapsules suspensions stabilized with polysorbate 80 (LNC) or with a cationic coating (C-LNC) were used as binder liquids. The influence of the cationic coating of the nanocapsules on the technological characteristics of the produced granules was evaluated. Properties such as particle size, yield, moisture content, morphological characteristics, flow properties and redispersion profile were also studied. Granulation process yields were close to 90%, resulting in granules with moisture content of less than 4%. Calculated values of Carr index, Hausner ratio and cohesion index indicated that the granule formulations proposed in this study present better flow characteristics in relation to the maltodextrin raw material. The cationic coating of the nanocapsules improved the flow properties and the aqueous redispersion profile of the granules containing C-LNC, as demonstrated by laser diffraction analysis. In conclusion, the spray-drying and fluidized bed granulation processes used in this study are viable alternatives for the production of easily redispersible powders and granules containing lipid-core nanocapsules, showing potential application for oral administration of drug-loaded lipid-core nanocapsules.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-28Bitstream added on 2014-06-13T19:44:49Z : No. of bitstreams: 1 dovigo_ln_dr_arafo.pdf: 3524091 bytes, checksum: bd9c194e1468a342205c6be45f7e5d62 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Esta investigação teve como objetivo avaliar: 1. a viabilidade de utilização da curcumina como agente fotossensibilizador (PS) em Terapia Fotodinâmica (PDT) para inativação de uma cepa padrão de Candida albicans e seu efeito tóxico sobre culturas celulares de macrófagos; 2. a efetividade da PDT mediada pela curcumina para inativação de suspensões planctônicas e biofilmes formados por diferentes isolados clínicos de C. albicans, Candida tropicalis e Candida glabrata; 3. a fotoinativação de C. albicans, presente em candidose induzida em camundongos, por meio da utilização de diferentes concentrações de curcumina. No primeiro estudo, suspensões planctônicas de C. albicans (ATCC 90028) foram expostas a nove concentrações de curcumina (0,005; 0,01; 0,05; 0,1; 0,5; 1, 5, 10 e 20μM) e oito doses de luz (1,32; 2,64; 3,96; 5,28; 6,60; 13,20 e 26,4J/cm2). O efeito de diferentes tempos de pré-irradiação (PIT), a possível captação de curcumina pelas células fúngicas e participação do oxigênio singlete na fotoinativação também foram avaliados. Adicionalmente, a PDT mediada pela curcumina foi avaliada em biofilmes formados pela cepa de referência de C. albicans e sobre culturas celulares de macrófagos. Além disso, as características ópticas da solução de curcumina foram investigadas em função da dose de luz utilizada. Os resultados foram submetidos à análise descritiva, Análise de Variância (ANOVA) e Kruskal-Wallis (α= 5%). As suspensões planctônicas de C. albicans foram completamente inativadas com a utilização de 20μM de curcumina e 5,28J/cm2. Além disso, foi observada redução significativa na viabilidade celular dos biofilmes de C. albicans. O efeito fotodinâmico foi acentuado pela presença da curcumina durante a iluminação... / The aim of this investigation was to evaluate: 1. the Photodynamic Therapy (PDT) mediated by curcumin for in vitro inactivation of a reference strain of Candida albicans and its citotoxic effects against a macrofage cell line; 2. the effectiveness of PDT mediated by curcumin to inactivate clinical isolates of C. albicans, Candida tropicalis and Candida glabrata, both in planktonic and biofilm phases; 3. the photoinactivation of C. albicans in a murine model of oral candidiasis using different curcumin concentrations. In the first study, suspensions of C. albicans were treated with nine curcumin concentrations (0.005; 0.01; 0.05; 0.1; 0.5; 1, 5, 10 and 20μM) and exposed to LED light at different fluences (1.32; 2.64; 3.96; 5.28; 6.60; 13.20 and 26.4J/cm2). The effect of the pre-irradiation time (PIT) on PDT effectiveness, the uptake of curcumin by C. albicans cells and the possible involvement of singlet oxygen in the photodynamic action was also evaluated. In addition, curcumin-mediated PDT was assessed against biofilms. Similar protocols were tested on a macrophage cell line and the effect was evaluated by MTT and SEM analysis. The optical properties of curcumin were investigated as a function of illumination fluence. Data were analyzed with Analysis of Variance (ANOVA), and Kruskal-Wallis test (α= 5%). The results showed a statistically significant reduction in C. albicans viability after PDT (p<0.05), for both planktonic and biofilm cultures. Photodynamic effect was greatly increased with the presence of curcumin in the surrounding media and the PIT of 20 minutes improved PDT effectiveness. Although PDT was phototoxic to macrophages, the therapy was more effective in inactivating the yeast cell than the defense cell. The spectral changes showed a high photobleaching rate of curcumin. In the second study, planktonic... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-12-02T11:16:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-10-21Bitstream added on 2014-12-02T11:21:14Z : No. of bitstreams: 1 000681505.pdf: 1855418 bytes, checksum: 77e9f62fa9efa050254d87aa50d63c9a (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Curcumin, um polifenol derivado do tumérico (Curcuma longa) modula a atividade dos fatores de transcrição NF-ĸB e AP-1 e reduz a expressão de uma série de mediadores inflamatórios. Suas aplicações terapêuticas têm sido estudadas em uma variedade de condições, tais como colite, artrite reumatóide, câncer, psoríase; mas este é o primeiro estudo avaliando seus efeitos na doença periodontal in vivo. O inicio e progressão da doença periodontal ocorre como consequência da resposta do hospedeiro aos microorganismos do biofilme dental. Uma resposta imune imprópria induz à produção exagerada de citocinas inflamatórias e consequentemente à perda de inserção periodontal e reabsorção óssea. No estudo in vitro, uma linhagem celular de macrófagos de camundongo (Raw 264.7) foi estimulada com LPS de E.coli na presença e ausência de concentrações não citotóxicas de curcumin e de inibidores bioquímicos de NF-ĸB e p38 MAPK. RT-qPCR e ELISA foram usados para determinar a expressão de IL-6, TNF-alpha, COX-2/PGE2 em nível de mRNA e proteína. O efeito do curcumin sobre a ativação das MAPKinases e NF-kB induzida por LPS foi avaliado por westernblot. No estudo in vivo, a doença periodontal experimental foi induzida em ratos pela colocação de ligaduras ao redor dos primeiros molares inferiores e injeção de LPS nos tecidos gengivais da região palatina entre os primeiros molares superiores (30 ug LPS, 3 vezes/semana por 2 semanas). Curcumin foi administrado aos animais diariamente por gavagem oral em duas doses (30 e 100 mg/Kg) durante as duas semanas do experimento, iniciando no dia anterior à indução da doença periodontal. Os animais controle receberam ligaduras e injeções de LPS, mas somente o veículo óleo de milho por gavagem. Os animais do grupo controle negativo não foram manipulados. RT-qPCR e ELISA foram usados para determinar a expressão de IL-6, TNF-alpha e PGE2 no... / Curcumin, a polyphenol derived from turmerics (Curcuma longa), has been shown to down regulate the activity of transcription factors NF-ĸB and AP-1 and to inhibit the expression the several inflammatory mediators. Its therapeutic applications have been studied in a variety of conditions, including as colitis, rheumatoid arthritis, cancer, psoriasis; but this is the first study to assess the effects of curcumin on periodontal disease in vivo. Periodontal disease initiation and progression occurs as a consequence of the host response to microorganisms of the dental biofilm. An improper immune response leads to overproduction of inflammatory cytokines and consequently periodontal attachment loss and bone resorption. In vitro study, we stimulated Raw 264.7 murine macrophages with E.coli LPS in the presence and absence of noncytotoxic concentrations of curcumin and of the biochemical inhibitors of NF-kB and p38 MAPK. RT-qPCR and ELISA were used to determine the expression of IL-6, TNFalpha and Cox-2/PGE2 at mRNA and protein levels. Western-blot was used to assess the effect of curcumin on LPS-induced activation of MAPKinases and NF-kB. In the vivo study, experimental periodontal disease was induced in rats by placing cotton ligatures around both lower first molars and injecting LPS in the gingival tissues on the palatal aspect of upper first molars (30 ug LPS, 3 times/week for 2 weeks). Curcumin was given to the rats by daily oral gavage in two doses (30 and 100 mg/Kg) during the 2 week-duration of the experiment. Control animals received ligatures and injection of LPS but only the corn oil vehicle by gavage and negative control animals were untouched. RT-qPCR and ELISA were used to determine the expression of IL-6, TNFalpha and PGE-2 synthase on the gingival tissues. The inflammatory status was evaluated by stereometric analysis, whereas modulation of p38 MAPK and NK-kB signaling was assessed by western...

Made available in DSpace on 2014-12-02T11:16:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-20Bitstream added on 2014-12-02T11:21:28Z : No. of bitstreams: 1 000799149.pdf: 16911809 bytes, checksum: 5ae0f4f9ce082f48f090a3e32c1d47fb (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O câncer de mama representa a neoplasia mais comum entre as mulheres, sendo classificado como o segundo mais frequente no mundo. O crescimento do tumor requer a formação de novos vasos que são estimulados por fatores angiogênicos e seus receptores. As células neoplásicas são capazes de modificar seu fenótipo para promover alterações funcionais e estimular a produção de proteínas envolvidas na angiogênese. A curcumina, componente do extrato de Curcuma longa L, é utilizada como alimento e na medicina tradicional, no entanto algumas evidências indicam que esse extrato possui ação oncostática em diferentes tipos de câncer. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do tratamento com curcumina na progressão tumoral e angiogênese em modelo experimental de câncer de mama. Células da linhagem de câncer de mama receptor triplo negativo (MDA-MB-231) foram cultivadas e a taxa de viabilidade celular verificada pelo ensaio MTT após tratamento com diferentes doses de curcumina. Para o estudo in vivo, as células foram implantadas em camundongos nude atímicos, os quais foram aleatoriamente divididos em animais tratados (n = 5) e controles (n = 8). Os animais receberam diariamente 300 mg/kg de curcumina ou veículo administrados intraperitonealmente durante 21 dias, cinco vezes por semana. O tamanho do tumor foi avaliado semanalmente com paquímetro digital. Ao final do tratamento, a angiogênese foi verificada in vivo pela técnica de tomografia computadorizada por emissão de fóton único (SPECT), com o radiotraçador Tc-99m acoplado a proteína recombinante VEGF-c, que possui afinidade pelos receptores VEGFR2/3. Além disso, a expressão de VEGF-A, VEGF-C, VEGFR2/3, marcador de proliferação celular (Ki-67) e o fator de Von Willebrand (vWF) foram verificados pelo procedimento imuno-histoquímico. No estudo in vitro, houve diminuição da taxa de viabilidade das células tratadas com curcumina, quando comparadas ... / Breast cancer is the most common cancer in women being rated as the second most common in the world. Tumor growth requires the formation of new vessels that are stimulated by angiogenic factors and their receptors. The neoplastic cells are able to modify their phenotype to promote functional changes and stimulate the production of proteins involved in angiogenesis. Curcumin, a component of the extract of Curcuma longa L, is used both as food and in traditional medicine, however some evidence indicates that this extract has oncostatic effects in different types of cancer. The aim of this study was to evaluate the effects of treatment with curcumin in tumor progression and angiogenesis in an experimental model of breast cancer. The cell line of human breast cancer (MDA-MB-231) was cultured and the rate of cell viability was measured by MTT assay after treatment with different doses of curcumin. For in vivo study, the cells were implanted in female athymic nude mice, which were randomly divided into treated (n = 5) and control animals (n = 8). The animals received daily 300 mg/kg of curcumin or vehicle daily, starting in the same day as tumor implantation and continued for 21 days five times per week. Tumor size was measured weekly with a digital caliper. The end of treatment, angiogenesis was assessed in vivo by the technique of computed tomography single photon emission tomography (SPECT) with the radiotracer Tc-99m-HYNIC-VEGF-c protein coupled recombining, which has affinity for VEGFR2/3. Furthermore, the expression of VEGF-A, VEGF-C e VEGFR2/3 marker of cell proliferation (Ki-67) and von Willebrand factor (vWF) receptors were verified by immunohistochemical. Curcumin treatment in vitro was able to significantly decrease cell viability (p < 0.05) Animals treated with curcumin showed less tumor volume (232.5 ± 53.2 mm 3) compared to control animals (282.0 ± 88.5 mm3), however, no significant difference (p > 0,05). The radioactivity of ...

Submitted by Maria Medeiros (maria.dilva1@ufcg.edu.br) on 2018-07-12T10:26:45Z No. of bitstreams: 1 MILENA COSTA DA SILVA - DISSERTAÇÃO (PPGCEMat) 2015.pdf: 4566309 bytes, checksum: ac360eb84cc411c27af09b604719adc6 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-12T10:26:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MILENA COSTA DA SILVA - DISSERTAÇÃO (PPGCEMat) 2015.pdf: 4566309 bytes, checksum: ac360eb84cc411c27af09b604719adc6 (MD5) Previous issue date: 2015-08-19 / Capes / A curcumina é um fármaco natural que apresenta propriedades medicinais dentre elas destaca-se a propriedade antineoplásica, nesta pesquisa a curcumina tem sido associada com a quitosana com a função de portador eficaz para a preparação de formulações na liberação de fármaco. Portanto o objetivo deste trabalho foi desenvolver arcabouços de quitosana/curcumina, pelo método de agregação de esferas, através da solução de gelatina (5%) com e sem reticulação. O fármaco foi incorporado na quitosana empregando a técnica de reação de soluções e adsorção. As esferas foram caracterizadas por Espectroscopia na Região Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR), Difração de Raios X (DRX), Microscopia Ótica (MO), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Termogravimetria (TG), Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC) e Grau de Intumescimento (GI). E os arcabouços por MO, MEV, Porosidade por três diferentes métodos, propriedade mecânica de resistência a compressão e GI, também foram realizadas a validação do método analítico e a liberação da curcumina por UV/VIS, modelos matemáticos de cinética de liberação também foram aplicados, seguido dos ensaios de citotoxicidade com linha celular de fibroblastos (L929) e câncer de mama (MCF-7). As análises morfológicas de MO e MEV mostraram a presença do fármaco no interior das esferas, e nos arcabouços a adesão das esferas a partir da gelatina. Por FTIR sugeriu-se a interação da quitosana com a curcumina. Os resultados de DRX e TG mostraram que a presença do fármaco na matriz de quitosana, não alterou de forma significativa a cristalinidade e nem a estabilidade térmica do material, respectivamente. Por DSC verificou-se na amostra quitosana/curcumina, o desaparecimento do pico de fusão da curcumina. Constatou-se ainda que os arcabouços obtidos com gelatina reticulada apresentaram menor absorção de água no ensaio de GI, menor tamanho de poros e menor porosidade, como também um perfil prolongado de liberação de fármaco. A partir do ensaio de compressão observou-se que todos os sistemas apresentaram valores semelhantes de resistência a compressão do tecido adiposo humano. Na análise dos modelos matemáticos observou-se que os modelos de Korsmeyer-Peppas e de Higuchi foram os que mais adequaram aos sistemas e pelos resultados de citotoxicidade com a linha celular L929 verificou-se que os arcabouços não apresentaram toxicidade, já a amostra quitosana/curcumina(adsorção)-reticulada, apresentou perfil tóxico para a linha celular MCF-7. Dessa forma, constatou-se que o arcabouço de quitosana/curcumina (adsorção)-reticulada é promissor para o estudo em tratamento de câncer de mama, por apresentar, estrutura, tamanho de poro e perfil de liberação adequada para o tratamento, como também maior toxicidade nas células cancerígenas MCF-7. / Curcumin is a natural drug that has medicinal properties, among which are the anticancer property, thus, in this research, curcumin has been studied associated with chitosan that is an effective carrier for the preparation of formulations of drug delivery. Therefore the aim of this study was to develop scaffolds of chitosan/curcumin, by the ball aggregation method through gelatin solution (5%) with and without crosslinking. The drug was incorporated in chitosan employing the solutions reaction technique and adsorption. The beads were characterized by Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR), X-ray diffraction (XRD), Optical Microscopy (OM), Scanning Electron Microscopy (SEM), Thermogravimetry (TG), Differential Scanning Calorimetry (DSC) and Degree of Swelling (DS). And the scaffolds by OM, SEM, porosity by three different methods, mechanical properties by Compressive Strength and DS. The validation of the analytical method and the release of curcumin by UV / VIS were carried out, mathematical models of release kinetics were also applied, followed by cytotoxicity tests with fibroblast cell line (L929) and breast cancer (MCF-7). Morphological analysis of OM and SEM showed the presence of the drug inside the spheres, and in the scaffolds, the adhesion of the spheres from the gelatin. From the FTIR technique it was noticed the probable interaction of chitosan with curcumin. The results of XRD and TG showed that the drug present in the chitosan matrix did not significantly change neither the crystallinity nor the thermal stability of the material, respectively. By DSC,it was found in the chitosan / curcumin sample, the disappearance of the melting peak of curcumin. It was also found that the scaffolds obtained from cross-linked gelatin had lower water absorption in the GI assay, smaller pore size and lower porosity as well as an extended drug release profile. From the compression test it was observed that all systems had similar amounts of adipose tissue compression strength. Analyzing the mathematical models, it was observed that the Korsmeyer-Peppas and Higuchi models were the ones best adapted to most systems, and from the cytotoxicity results with the L929 cell line it was found that the scaffolds did not show toxicity, while the chitosan / curcumin (adsorption)-crosslinked sample showed toxicity profile for the cell line MCF7. Thus, it was found that the chitosan / curcumin (adsorption) - crosslinked scaffolds is promising for the study in treating breast cancer, because it presented structure, pore size and adequate release profile for the treatment, as well as greater toxicity in cancer cells MCF-7.

Orientador: Debora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Banca: Sônia Maria Oliani / Banca: Angelo Gustavo Zucca Matthes / Resumo: O câncer de mama representa a neoplasia mais comum entre as mulheres, sendo classificado como o segundo mais frequente no mundo. O crescimento do tumor requer a formação de novos vasos que são estimulados por fatores angiogênicos e seus receptores. As células neoplásicas são capazes de modificar seu fenótipo para promover alterações funcionais e estimular a produção de proteínas envolvidas na angiogênese. A curcumina, componente do extrato de Curcuma longa L, é utilizada como alimento e na medicina tradicional, no entanto algumas evidências indicam que esse extrato possui ação oncostática em diferentes tipos de câncer. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos do tratamento com curcumina na progressão tumoral e angiogênese em modelo experimental de câncer de mama. Células da linhagem de câncer de mama receptor triplo negativo (MDA-MB-231) foram cultivadas e a taxa de viabilidade celular verificada pelo ensaio MTT após tratamento com diferentes doses de curcumina. Para o estudo in vivo, as células foram implantadas em camundongos nude atímicos, os quais foram aleatoriamente divididos em animais tratados (n = 5) e controles (n = 8). Os animais receberam diariamente 300 mg/kg de curcumina ou veículo administrados intraperitonealmente durante 21 dias, cinco vezes por semana. O tamanho do tumor foi avaliado semanalmente com paquímetro digital. Ao final do tratamento, a angiogênese foi verificada in vivo pela técnica de tomografia computadorizada por emissão de fóton único (SPECT), com o radiotraçador Tc-99m acoplado a proteína recombinante VEGF-c, que possui afinidade pelos receptores VEGFR2/3. Além disso, a expressão de VEGF-A, VEGF-C, VEGFR2/3, marcador de proliferação celular (Ki-67) e o fator de Von Willebrand (vWF) foram verificados pelo procedimento imuno-histoquímico. No estudo in vitro, houve diminuição da taxa de viabilidade das células tratadas com curcumina, quando comparadas ... / Abstract: Breast cancer is the most common cancer in women being rated as the second most common in the world. Tumor growth requires the formation of new vessels that are stimulated by angiogenic factors and their receptors. The neoplastic cells are able to modify their phenotype to promote functional changes and stimulate the production of proteins involved in angiogenesis. Curcumin, a component of the extract of Curcuma longa L, is used both as food and in traditional medicine, however some evidence indicates that this extract has oncostatic effects in different types of cancer. The aim of this study was to evaluate the effects of treatment with curcumin in tumor progression and angiogenesis in an experimental model of breast cancer. The cell line of human breast cancer (MDA-MB-231) was cultured and the rate of cell viability was measured by MTT assay after treatment with different doses of curcumin. For in vivo study, the cells were implanted in female athymic nude mice, which were randomly divided into treated (n = 5) and control animals (n = 8). The animals received daily 300 mg/kg of curcumin or vehicle daily, starting in the same day as tumor implantation and continued for 21 days five times per week. Tumor size was measured weekly with a digital caliper. The end of treatment, angiogenesis was assessed in vivo by the technique of computed tomography single photon emission tomography (SPECT) with the radiotracer Tc-99m-HYNIC-VEGF-c protein coupled recombining, which has affinity for VEGFR2/3. Furthermore, the expression of VEGF-A, VEGF-C e VEGFR2/3 marker of cell proliferation (Ki-67) and von Willebrand factor (vWF) receptors were verified by immunohistochemical. Curcumin treatment in vitro was able to significantly decrease cell viability (p < 0.05) Animals treated with curcumin showed less tumor volume (232.5 ± 53.2 mm 3) compared to control animals (282.0 ± 88.5 mm3), however, no significant difference (p > 0,05). The radioactivity of ... / Mestre

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5345.pdf: 1839849 bytes, checksum: 117cb76c1a10deab4b3e8c9df4d797f3 (MD5) Previous issue date: 2012-03-30 / In Brazil there was an increase of post-surgical infections by rapidly growing mycobacteria, mainly Mycobacterium massiliense, leading the Agency for Sanitary Surveillance (ANVISA) to establish standards for the mandatory notification of cases occurring nationwide. In order to deal with a major public health problem, this study aimed to determine the efficiency of using antimicrobial photodynamic inactivation (PDIa) in Mycobacterium massiliense for future use in the treatment of agent infections. The objective was to test in vitro technique the PDI to control Mycobacterium massiliense to determine the best light dose and concentration of each photosensitizer (FS). To accomplish this search were used two FS: Photogem® and salt Curcumin (N-Methyl-D-Glucominato of Curcumin, 31.8%). As a light source for radiating a BioTable ® operated at 630nm (red light) for Photogem ® and 460nm (blue light) to the salt of curcumin. After the standardized inoculum was added to the sample analyzed in triplicate to a 24 well plate which contained 500&#956;l aliquots of the inoculum +500 &#956; l of the FS for the study groups tested, and the control group containing 1 ml of inoculum, and five minutes as time incubation (protected from light). After expiration of the irradiation time in accordance with the previously analyzed fluences of the tested groups and subsequent dilution of the sample to the value of 10-5, 100mL sample were plated in triplicate on 7H10 agar + OADC 10% and maintained at 37 for about 5 days with subsequent counting of colony forming units. Based on the results, they showed that FS Photogem ® until the concentration of 1000 &#956;g/Ml was not effective in reducing the number of CFU of M. massiliense. In contrast, the FS Salt Curcumin was effective at concentrations of 1300 &#956;g/Ml with a light dose 50 J/cm2 compared to controls. Thus, these data suggest that the salt FS Curcumin in photodynamic action is a viable alternative for reducing M massiliense when tested in vitro. / No Brasil houve um crescimento de infecções pós-cirúrgicas por micobactérias de crescimento rápido, principalmente por Mycobacterium massiliense, levando a Agência de Vigilância Sanitária (ANVISA) estabelecer normas de notificação obrigatória dos casos ocorridos em todo território nacional. Tendo em vista de se tratar de um grande problema de saúde pública, o presente trabalho visou determinar a eficiência da atividade antimicrobiana utilizando Inativação Fotodinâmica (IFD) em Mycobacterium massiliense para futura utilização no tratamento de infecções por esse agente. O objetivo foi testar in vitro, a técnica da IFD no controle de Mycobacterium massiliense, para determinar a melhor dose de luz e concentração de cada fotossensibilizador (FS). Para realizar esta pesquisa foram utilizados dois FS: Photogem® e Sal de Curcumina (N-Metil-D-Glucominato de Curcumina, a 31,8%). Como fonte de luz para irradiação, uma BioTable® operou em 630nm (luz vermelha) para o Photogem® e em 460nm (luz azul) para o Sal de Curcumina. Após padronizado o inóculo, a amostra analisada foi adicionada em triplicata a uma placa de 24 poços a qual continha alíquotas de 500&#956;l do inoculo +500&#956;l do FS para os grupos de estudos testados, e o grupo controle contendo 1ml do inoculo, tendo 5 minutos como tempo de incubação (protegido da luz). Após decorrido o tempo de irradiação de acordo com as fluências previamente analisadas dos grupos testados e com posterior diluição da amostra até o valor de 10-5, 100&#956;l da amostra foram semeadas em triplicada em placas contendo Agar 7H10 + OADC 10% e mantidas a 37o por aproximadamente 5 dias com posterior contagem das unidades formadoras de colônias. Com base nos resultados obtidos, estes mostraram que o FS Photogem® até a concentração de 1000&#956;g/ml não foi efetivo na redução do número de UFC de M. massiliense. Em contraponto, o FS Sal de Curcumina foi efetivo a partir da concentração de 1300 &#956;g/ml com dose de luz a 50 J/cm2 comparado ao grupo controle. Assim, estes dados sugerem que o FS Sal de Curcumina sob ação fotodinâmica é uma alternativa viável para a redução de M. massiliense quando testadas in vitro.