INTRODUÇÃO: A Mini-Addenbrooke\'s Cognitive Examination (M-ACE) consiste em um teste de avaliação cognitiva breve composta de cinco itens que visam avaliar quatro domínios cognitivos principais (orientação, memória, linguagem e função viso-espacial) com pontuação máxima de 30 pontos e um tempo de administração de cinco minutos. OBJETIVO: Avaliar o desempenho de idosos cognitivamente saudáveis, com CCL e DA leve na versão brasileira da M-ACE. MÉTODOS: o teste foi aplicado um grupo de 23 pacientes com DA provável leve, 36 CCL e 25 idosos cognitivamente saudáveis. Todos os participantes incluídos tinham idade >= 60 anos. Foram excluídos pacientes com demência de intensidade moderada ou grave, demência de outra etiologia, comorbidades graves com potencial de comprometer a cognição e uso de medicação psicotrópica. A acurácia do teste foi avaliada por meio da análise das curvas ROC. Para analisar a relação entre os escores da M-ACE e os demais testes cognitivos aplicados foram utilizados os coeficientes de correlação de Spearman. Para analisar a consistência interna da M-ACE e suas três versões foi utilizado o coeficiente alfa de Cronbach. RESULTADOS: Houve um predomínio do gênero feminino, a média de idade foi de 73 anos, com faixa etária predominante de 60-69 anos. A média de escolaridade obtida foi de 11 anos. A M-ACE apresentou alta consistência interna (alfa de Cronbach > 0,8; IC 95% 0,776 a 0,869) e mostrou ser extremamente capaz de diferenciar o grupo DA dos demais participantes, com uma acurácia superior ao MEEM. O ponto de corte de 20 foi o de maior sensibilidade e especificidade (95,6% e 90,16% respectivamente), com área sob a curva considerada alta (ASC = 0,805; IC 95% 0,705 -0,904). A M-ACE apresentou melhor precisão em diferenciar os três grupos quando comparado com o MEEM (71,43 versus 60,71). Observou-se ainda uma precisão mais robusta em diferenciar DA de CCL com a M-ACE (63,89 versus 30,56 no MEEM). O escore total da M-ACE não sofreu considerável influência da idade e escolaridade. A M-ACE apresentou forte correlação com MEEM (cor = 0,78), bem como todos os itens (exceto percepção) da BBRC e QAF (cor = -0,76). CONCLUSÃO: A M-ACE pode ser considerada um teste rápido de rastreio com elevada acurácia no diagnóstico de DA. O ponto de corte sugerido neste estudo é de 20 para DA e 27 para CCL / INTRODUCTION: The Mini-Addenbrooke\'s Cognitive Examination (M-ACE) consists of a brief cognitive assessment test composed of five items that aim to evaluate four main cognitive domains (orientation, memory, language and visuospatial function) with a maximum score of 30 points and a time of administration of five minutes. OBJECTIVE: Evaluate the performance of cognitively healthy elderly, MCI and mild AD in the Brazilian version of M-ACE. METHODS: The test was applied to a group of 23 patients with mild probable AD, 36 MCI and 25 cognitively healthy elderly. All included participants were aged >= 60 years. Patients with moderate or severe dementia, dementia of another etiology, severe comorbidities with potential to compromise cognition and use of psychotropic medication were excluded. The accuracy of the test was evaluated by analyzing the ROC curves. Spearman\'s correlation coefficients were used to analyze the relationship between the M-ACE scores and the other cognitive tests applied. In order to analyze the internal consistency of the M-ACE, the Cronbach\'s alpha coefficient was used. RESULTS: There was a predominance of females, mean age was 73 years, with a predominant age range of 60-69 years. The average level of schooling was 11 years. MACE presented high internal consistency (Cronbach\'s alpha > 0.8, 95% CI 0.776 to 0.869) and showed to be extremely capable of differentiating the AD group from the other participants, with a higher accuracy than the MMSE. The cutoff point of 20 was the one with the highest sensitivity and specificity (95.6% and 90.16%, respectively), with an AUC considered to be high (AUC = 0.805, 95% CI 0.705-0.904). The M-ACE presented better accuracy in differentiating the three groups when compared to the MMSE (71.43 versus 60.71). It was also observed a more robust precision in differentiating DA of MCI with M-ACE (63.89 versus 30.56 in MMSE). The total M-ACE score was not very influenced by age and schooling. M-ACE showed a strong correlation with MMSE (spearman = 0.78), as well as all items (except perception) of BBRC and QAF (spearman = -0.76). CONCLUSIONS: M-ACE can be considered a brief screening tool with high accuracy in the diagnosis of AD. The cutoff point suggested in this study is 20 for AD and 27 for MCI

O envelhecimento da população mundial no último século elevou significativamente o número de casos da doença de Alzheimer (DA), bem como os custos para os sistemas de saúde pública. Apesar de avanços significativos no entendimento da fisiopatologia da doença, pouco se sabe a respeito dos mecanismos moleculares que desencadeiam a perda de memória e a morte neuronal. Resultados recentes sugerem que o acúmulo de bases oxidadas no DNA mitocondrial e alterações nas vias que removem essas lesões desempenham um papel importante na morte neuronal observada em DA. A maioria das lesões em DNA induzidas oxidativamente são removidas pela via de reparo por excisão de bases (BER, do inglês Base Excision Repair). Resultados da literatura mostraram que a atividade da via BER está reduzida no lóbulo parietal e no cerebelo de pacientes com DA, quando comparadas com amostras de indivíduos com cognição normal da mesma faixa etária. Entretanto, esse trabalho mediu a atividade de BER apenas em extratos celulares totais. No presente estudo, foram medidas as atividades de BER em extratos mitocondriais de cérebros de indivíduos com DA, uma vez que lesões no DNA mitocondrial acumulam mais significativamente nos pacientes. Para testar a hipótese que alterações em BER mitocondrial estão associadas ao desenvolvimento da doença, foram analisadas atividades de BER em mitocôndrias em duas regiões cerebrais de indivíduos normais, indivíduos com DA e um grupo de indivíduos que apresentam alterações neuropatológicas de DA (agregados proteicos), porém que se mantiveram cognitivamente normais, nomeados DA assintomático. A atividade da enzima AP endonuclease apresentou-se elevada no cerebelo do grupo DA assintomático, enquanto que não apresentou variação no córtex temporal. Esses resultados sugerem que a preservação de APE1 no grupo DA assintomático pode exercer um papel protetor às lesões neuropatológicas, bem como indicar que as regiões cerebrais apresentam suscetibilidade distinta aos danos. Já a atividade de uracil DNA glicosilase está reduzida no cerebelo tanto em indivíduos com DA quanto com DA assintomático, quando comparados ao grupo controle, enquanto que, no córtex temporal, a redução é verificada somente no grupo DA. Além disso, observou-se que a atividade de UDG e o critério Braak apresentam uma correlação negativa. Os resultados referentes à enzima UDG sugerem que a redução da sua atividade compromete a viabilidade neuronal tornando as células mais propensas às lesões da DA. Assim, o comprometimento da via BER em mitocôndriais de cérebros humanos pode contribuir para os eventos moleculares que ocasionam a morte neuronal associada ao desenvolvimento de DA. / The number of Alzheimer\'s disease cases (AD) has increased steadly over the last century, paralleling a sharp rise in mean Iife expectancy. Consequently, AD- associated public health costs have also increased. Despite several important findings in AD physiopathology, a clear understanding of the molecular events leading to memory loss and neuronal death is still lacking. Recent results show that oxidized DNA lesions accumulate in mitochondrial DNA in neurodegenerative diseases, including AD. Moreover, alterations in DNA repair may also play a causative role in neuronal death. Most oxidized lesions are repaired by the Base Excision Repair (BER) pathway. It has been recently shown that BER activities are reduced in whole cell extracts from parietal lobule and cerebellum from AD patients, when compared with age-matched controls. As accumulation of oxidized bases is seen more prominently in mitochondrial DNA, here we investigated whether changes in BER activities in mitochondria are associated with the development of AD. Thus, we measured BER activities in mitochondria from two brain regions from age-matched normal individuais, AD patients and a group of individuais that show AD-like neuropathological alterations but remained cognitively normal, thus called asymptomatic AD. AP endonuclease activity is elevated in asymptomatic AD cerebellum, while not changed in temporal cortex. Theses results suggest that APE1 activity in asymptomatic AD may play a protective role against neuropatological lesions, and indicate that brain regions show different susceptibility to damage. On the other hand, uracil DNA glycosylase activity is reduced in cerebellum in both AD and asymptomatic individuais, when compared to controls. In temporal cortex, this reduction is observed only in AD group. In addition, UDG activity and Braak stage showed a significant negative correlation. These results indicate that decreased UDG activity may compromise neuronal viability, making the cells more prone to AD lesions. Thus, impairtment of BER in human brain mitochondria may contribute to the molecular events that cause neuronal death during the development of this disease.

O presente estudo comparou o efeito do tratamento crônico com lítio em doses subterapêuticas (0,02mM e 0,2mM) e dose terapêutica (2mM) em cultura primária de neurônios corticais e hipocampais. As amostras foram analisadas e comparadas com o grupo controle (sem tratamento) tanto para os neurônios corticais, como para os neurônios hipocampais. O objetivo do estudo foi: 1) avaliar, nessas culturas celulares, a atividade de diferentes quinases (PKA, CaMKII, AKT e GSK3beta), diferentes sítio de fosforilação da Tau (Ser, 199, 205, 214, 396, C-terminal e seis isoformas), a partir da inibição da PLA2 pelo lítio; 2) Investigar as vias de sinalização envolvidas na modulação do estado de fosforilação da proteína tau a partir da inibição da PLA2 em culturas primárias de neurônios; 3) avaliar, simultaneamente, a expressão de fatores neurotróficos (BDNF) e citocinas (GM-CSF, IL-1b, IL-2, IL-4, IL-5, IL6, IL-10, IL-12, IFN-y e TNF-alfa) mediante o tratamento de neurônios primários com lítio e 4) avaliar expressão gênica por microarray das culturas tratadas com diferentes doses, subterapêuticas e terapêutica, de cloreto de lítio. Nossos resultados sugerem uma dissociação de efeitos em neurônios corticais dos observados em neurônios hipocampais. O lítio aumentou a atividade enzimática da iPLA2 e da cPLA2, tanto em neurônios corticais como em neurônios hipocampais. A atividade da GSK3beta foi inibida pelo tratamento crônico com lítio em neurônios hipocampais e apresentou efeito contrário em neurônios corticais. Observamos comportamentos diferentes das diferentes proteínas analisadas em culturas de neurônios corticais e hipocampais, e não tivemos significância estatística para as alterações na proteína tau. O tratamento nas doses subterapêuticas aumentou a secreção de citocinas pró-inflamatórias tanto em neurônios corticais quanto em neurônios hipocampais / The present study compared the effect of lithium chronic treatment with subtherapeutic doses (0.02mM and 0.2mM) and therapeutic dose (2mM) in primary cortical and hippocampal neurons cell culture. This samples were analyzed and compared with the control group (no treatment). The study\'s goal was: 1) to evaluate in these Cell Culture a different activity kinases (PKA, CaMKII, AKT and GSK3beta), different phosphorylation site of the Tau (199, 205, 214, 396, C-terminal and Six isoforms) and PLA2 inhibition; 2) To investigate how signaling pathways involved in modulation of tau phosphorylation from the inhibition of PLA2 in primary cultures of neurons; 3) analyze an expression of neurotrophic factors (BDNF) and cytokines (GM-CSF, IL-1b, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IFNy TNFalfa 4) to evaluate gene expression via microarray with different doses of lithium treatment. Our results suggest a dissociation effects on cortical and hippocampal neurons cell culture. Lithium increased the enzyme activity of iPLA2 and cPLA2, in both cortical and hippocampal neurons. The GSK3beta the activity was inhibited by chronic treatment with lithium in hippocampal neurons and presented contrary effect on cortical neurons. We observe not statistics significance on tau protein. The treatment at subtherapeutic and therapeutic doses increased the secretion of pro and anti-inflammatory cytokines both in cortical and hippocampal neurons

(Contexto) Segundo a Organização Mundial da Saúde, as demências são um problema de custo social elevado, cujo manejo é um desafio para as próximas décadas. Demências comuns incluem a Doença de Alzheimer (DA), bastante conhecida. Outra síndrome menos conhecida, o Comprometimento Cognitivo Leve (CCL), é relevante por ser o estágio inicial clinicamente definido da DA. Embora o CCL não seja tão conhecido do público, pessoas com um tipo especial dessa síndrome, o CCL amnéstico, evoluem para a DA a uma taxa bastante maior que a da população em geral. O diagnóstico das demências e síndromes relacionadas é feito com base na análise de aspectos linguísticos e cognitivos do paciente. Testes clássicos incluem testes de fluência, nomeação, e repetição. Entretanto, pesquisas recentes têm reconhecido cada vez mais a importância da análise da produção discursiva, especialmente de narrativas, como uma alternativa mais adequada, principalmente para a detecção do CCL. (Lacuna) Enquanto uma análise qualitativa do discurso pode revelar o tipo da doença apresentada pelo paciente, uma análise quantitativa é capaz de revelar a intensidade do dano cerebral existente. A grande dificuldade de análises quantitativas de discurso é sua exigência de esforços: o processo de análise rigorosa e detalhada da produção oral é bastante laborioso, o que dificulta sua adoção em larga escala. Nesse cenário, análises computadorizadas despontam como uma solução de interesse. Ferramentas de análise automática de discurso com vistas ao diagnóstico de demências de linguagem já existem para o inglês, mas nenhum trabalho nesse sentido foi feito para o português até o presente momento. (Objetivo) Este projeto visa criar um ambiente unificado, intitulado Coh-Metrix-Dementia, que se valerá de recursos e ferramentas de Processamento de Línguas Naturais (PLN) e de Aprendizado de Máquina para possibilitar a análise e o reconhecimento automatizados de demências, com foco inicial na DA e no CCL. (Hipótese) Tendo como base o ambiente Coh-Metrix adaptado para o português do Brasil, denominado Coh-Metrix-Port, e incluindo a adaptação para o português e inserção de vinte e cinco novas métricas para calcular a complexidade sintática, a densidade de ideias, e a coerência textual, via semântica latente, é possível classificar narrativas de sujeitos normais, com DA, e com CCL, em uma abordagem de aprendizado de máquina, com precisão comparável a dos testes clássicos. (Conclusão) Nos resultados experimentais, foi possível separar os pacientes entre controles, CCL, e DA com medida F de 81,7%, e separar controles e CCL com medida F de 90%. Os resultados indicam que o uso das métricas da ferramenta Coh-Metrix-Dementia é bastante promissor como recurso na detecção precoce de declínio nas habilidades de linguagem. / (Backgroung) According to the World Health Organization, dementia is a costly social issue, whose management will be a challenge on the coming decades. One common form of dementia is Alzheimers Disease (AD). Another less known syndrome, Mild Cognitive Impairment (MCI), is relevant for being the initial clinically defined stage of AD. Even though MCI is less known by the public, patients with a particular variant of this syndrome, Amestic MCI, evolve to AD in a considerably larger proportion than that of the general population. The diagnosis of dementia and related syndromes is based on the analysis of linguistic and cognitive aspects. Classical exams include fluency, naming, and repetition tests. However, recent research has been recognizing the importance of discourse analysis, specially narrative-based, as a more suitable alternative, specially for MCI detection. (Gap) While qualitative discourse analyses can determine the nature of the patients disease, quantitative analyses can reveal the extent of the existing brain damage. The greatest challenge in quantitative discourse analyses is that a rigorous and thorough evaluation of oral production is very labor-intensive, which hinders its large-scale adoption. In this scenario, computerized analyses become of increasing interest. Automated discourse analysis tools aiming at the diagnosis of language-impairing dementias already exist for the English language, but no such work has been made for Brasilian Portuguese so far. (Goal) This project aims to create a unified environment, entitled Coh-Metrix-Dementia, that will make use of Natural Language Processing and Machine Learning resources and tools to enable automated dementia analysis and classification, initially focusing on AD and MCI. (Hypothesis) Basing our work on Coh-Metrix-Port, the Brazilian Portuguese adaption of Coh-Metrix, and including the adaptation and inclusion of twenty-five new metrics for measuring syntactical complexity, idea density, and text cohesion through latent semantics, it is possible to classify narratives of healthy, AD, and MCI patients, in a machine learning approach, with a precision comparable to classical tests. (Conclusion) In our experiments, it was possible to separate patients in controls, DA, and CCL with 81.7% F-measure, and separate controls and CCL with 90% F-measure. These results indicate that Coh-Metrix-Dementia is a very promising resource in the early detection of language impairment.

INTRODUÇÃO: a Doença de Alzheimer (DA) cursa com declínio cognitivo e funcional, e alterações comportamentais, porém poucos estudos relatam a correlação existente entre o declínio motor, considerando o equilíbrio especificamente, e a implicação na capacidade funcional e na ocorrência de quedas nesta população. OBJETIVOS: como objetivo principal, verificar a correlação entre o equilíbrio e a capacidade funcional, e secundariamente, verificar a correlação destas variáveis com a ocorrência de quedas. MÉTODOS: trata-se de um estudo transversal em que 40 idosos sem comprometimento cognitivo e 48 idosos com DA (25 em fase leve e 23 em fase moderada), com idade superior a 65 anos, de ambos os sexos, foram avaliados pela escala Berg Balance Scale (BBS) quanto ao equilíbrio, pela escala Disability Assessment for Dementia (DAD) quanto à capacidade funcional, e questionados quanto à ocorrência de quedas no último ano. Outros fatores que pudessem interferir no equilíbrio e na capacidade de realizar atividades funcionais foram controlados, como presença de déficit visual, de depressão e utilização de medicamentos associados a quedas. RESULTADOS: foi observada diferença no desempenho do equilíbrio dos idosos com DA mais acentuada na fase moderada da doença (p = 0,001), assim como um declínio da capacidade funcional, progressivo e proporcional à fase da doença. Quanto às quedas, os idosos com DA tenderam a cair mais que os controles, não havendo, porém, diferença estatisticamente significante entre eles (controles: 45%, DA: 50%). Não foi observada diferença no desempenho do equilíbrio e da capacidade funcional comparando-se os indivíduos que caíram (\"caidores\") e não caíram (\"não-caidores\") em função do estágio da doença. Considerando a amostra dos controles, foi encontrada correlação moderada (-0,640, p < 0,001) entre número de quedas e pontuação na DAD, e fraca (-0,383, p = 0,015) entre o número de quedas e equilíbrio. No grupo CDR 1 a correlação obtida ocorreu apenas entre o DAD realização efetiva e o equilíbrio (-0,474, p = 0,017), e no grupo CDR 2 foi encontrada uma correlação moderada entre a ocorrência de quedas e o equilíbrio (-0,613, p = 0,045). CONCLUSÃO: Os dados deste estudo sugerem que há um declínio do equilíbrio associado à Doença de Alzheimer, que é proporcional à evolução clínica da doença, sendo um dos fatores, mas não o mais importante, associados à ocorrência de quedas nesta população. O declínio da capacidade funcional está associado à evolução da doença, porém não associado a maior ocorrência de quedas. Por fim, o déficit de equilíbrio isoladamente não foi suficiente para determinar o declínio funcional nos idosos com DA. / INTRODUCTION: Alzheimer\'s Disease (AD) causes cognitive and functional decline and behavioral alterations. Few studies however, show the correlation between motor function loss, more specifically balance, and its effects in the functional ability and the occurrence of falls in this population. OBJECTIVES: to identify the correlation between balance and functional ability and to verify the correlation between these two variables with the occurrence of falls. METHODS: a transversal study of 40 subjects without cognitive impairment (control group) and 48 AD patients (25 in the mild stage and 23 in the moderate stage) with more than 65 years, of both sexes. Subjects were evaluated with the Berg Balance Scale (BBS) and the Disability Assessment for Dementia (DAD) scale for functional ability. Subjects also answered a questionnaire about fall occurrence in the last one-year period. Other factors that may have influenced balance and functional ability and may be associated with falls such as visual impairment, depression and the use of medication were taken into account. RESULTS: Subjects with moderate AD showed a significant difference in balance (p = 0.001) as well as low functional ability, which is progressive and proportional to the stage of the disease. In relation to falls, AD subjects had a greater tendency to fall than the control group, however this difference was not statistically significant (control group 45%, AD group 50%). There was no difference in the balance and functional ability when comparing \'fallers\' with \'non-fallers\'. Considering the control group, there was a moderate correlation (-0.640, p < 0,001) between number of falls and the DAD score, and mild correlation between falls and balance (-0.383, p = 0.015). In the CDR 1 group, it was found correlation only between DAD (effective performance item) and balance (-0.474, p = 0.017) and in the CDR 2 group, it was observed a moderate correlation between falls and balance (-0.613, p = 0.045). CONCLUSION: our findings suggest that there is a decline of balance related to AD that is proportional to the clinical progression of the disease and it is a factor, albeit not the most relevant factor associated to the occurrence of falls in the AD population. The loss of functional ability is associated with the disease\'s progress but not to a higher occurrence of falls. Finally the deficit of balance, itself, was not enough to determine a functional decline in subjects with AD.

A doença de Alzheimer (DA) é uma doença neurodegenerativa e a principal causa de demência em idosos. Os mecanismos fisiopatológicos mais envolvidos na DA são: o acúmulo do peptídeo beta amiloide (A?) em agregados extracelulares, e a formação dos emaranhados neurofibrilares (ENF). A Proteína Precursora do Amiloide (APP) é clivada pelas secretases alfa (ADAM10), beta (BACE1) e y (Presenilina 1 [PSEN1]). As plaquetas contêm 95% da APP circulante e possuem toda a maquinaria necessária para estudar perifericamente a APP e suas secretases. A pesquisa de biomarcadores na DA tem como objetivo identificar, em vida, os indicadores do processo patogênico em fluídos corporais e/ou por métodos de imagem cerebral. O objetivo do presente estudo foi investigar proteínas envolvidas no metabolismo da APP em plaquetas de pacientes com DA e o potencial de modificação destas vias pela ação do tratamento com cloridrato de donepezila. Para tanto foram analisadas amostras de 23 pacientes com DA leve ou moderada, avaliados antes e depois de 6 meses de tratamento e 38 indivíduos idosos cognitivamente saudáveis (controles). As variáveis de desfecho estudadas foram: (1) expressão protéica de ADAM10, BACE1 e PSEN1; (2) expressão protéica dos metabólitos secretados da APP de 110 e 130kDa, possibilitando o cálculo da razão de APP (rAPP); e (3) atividade enzimática das APP-secretases ADAM10 e BACE1. Foram utilizados os métodos de western blotting e o fluorimétrico. Encontramos, nos pacientes com DA pré-tratamento, uma diminuição da rAPP em relação aos controles; porém, não identificamos diferenças após seis meses de tratamento. Os níveis de ADAM10 mostraram-se menores em pacientes com DA na avaliação basal quando comparados aos controles, mas também sem modificação com o tratamento, o tratamento mostrou-se associado a uma redução da expressão de BACE1 em pacientes com DA, embora não tenhamos encontrado diferenças entre pacientes e controles na avaliação basal. A expressão de PSEN1 mostrou-se menor nos pacientes com DA pré-tratamento quando comparada aos controles, sem contudo haver alteração em resposta ao tratamento. Quanto à atividade enzimática de ADAM10 e BACE1, não observamos diferenças nos valores pré e pós-tratamento. Nossos achados reforçam a utilidade da utilização de plaquetas como matriz biológica para o estudo do metabolismo da APP em tecidos periféricos e para a investigação de efeitos modificadores da patogenia da DA a partir do tratamento com drogas antidemência / Alzheimer\'s disease (AD) is a neurodegenerative disease and the major cause of dementia in the elderly. The main mechanisms in AD are: extracellular aggregates of beta amyloid peptide (Abeta) and neurofibrillary tangles formation (NFT). Amyloid Precursor Protein (APP) is cleaved by the secretases alfa (ADAM10), beta (BACE1) and ? (Presenilin 1 [PSEN1]). Platelets containing 95% of the circulating APP and possess all the machinery necessary to study peripherically APP and its secretases. The search for biomarkers in AD aims to identify, in life, the pathogenic process indicators in body fluids and/or brain image methods. The aim of this study was to investigate proteins involved in APP metabolism in platelets of AD patients, and the potential modification of these pathways by treatment with Donepezil hydrochloride. Therefore, 23 patients with mild to moderate AD evaluated before and after 6 months treatment and 38 healthy elderly subjects (controls) were analyzed. Outcome variables were: (1) ADAM10, BACE1 and PSEN1 expression; (2) APP secreted metabolites expression (110 and 130kDa), allowing the APP ratio (rAPP) estimate; (3) APP-secretase ADAM10 and BACE1 enzymatic activity. Western blotting and fluorimetric methods were used. We found in AD patients pre-treatment, a decrease of rAPP compared to controls; however, we did not identify differences of this parameter after six months of treatment. The ADAM10 levels were lower in AD patients at baseline when compared to controls, however no differences were observed after treatment. Treatment was associated with a reduction of BACE1 expression in AD patients, although we have not found differences between patients and controls at baseline. PSEN1 expression was lower in pre-treatment AD patients compared to controls. No differences were observed after treatment. Concerning to BACE1 and ADAM10 enzymatic activity, we did not observe differences in pre and post-treatment. Our findings strengthen the use of platelets as a biological matrix for the APP metabolism as well as the modifying effects on AD pathogenicity of antidementia drugs

INTRODUÇÃO: Os estudos epidemiológicos apresentam limitações para a investigação dos fatores relacionados à senescência e à senilidade cerebral. A correlação clinicopatológica é o padrão-ouro para o diagnóstico definitivo de doença de Alzheimer (DA) e permite identificar os casos de DA em fase pré-clínica. Ainda há controvérsia acerca da existência de um limiar neuropatológico separando o envelhecimento normal da DA ou se há constituição de uma reserva cognitiva que protegeria idosos contra os achados cerebrais desta deonça. Este estudo visa investigar os mecanismos do processo de envelhecimento cerebral, através da busca de fatores associados com o processo natural de envelhecimento, DA pré-clínica e demência causada por DA. MÉTODOS: Estudo post-mortem, avaliando 141 indivíduos com idade igual ou superior a 80 anos, participantes do Banco de Cérebros do Projeto Envelhecimento Cerebral. Avaliação cognitiva foi realizada através de entrevista com informante de convívio próximo com o falecido, aplicando as escalas CDR e IQCODE. Avaliação neuropatológica foi realizada através de técnicas de imunohistoquímica, valendo-se do critério neuropatológico do CERAD e do NIA-RI e do estadiamento de Braak e Braak. Os participantes foram classificados como envelhecimento natural se: CDR=0 e CERAD=0 ou A e estágio de BraakIII, como DA pré-clínica se CDR=0 e CERAD B ou C e estágio de Braak IV e como portadores de demência por DA quando apresentaram CDR2 e CERAD B ou C e estágio de Braak IV. Dados demográficos, perfil funcional e comportamental, tabagismo, etilismo, hipertensão arterial, diabetes mellitus, doenças cardio e cerebrovascular e depressão foram comparados entre os grupos. A presença de alterações microvasculares foi registrada. RESULTADOS: Porcentagem considerável dos indivíduos portadores de CDR=0 preencheu um ou mais critérios neuropatológicos para DA. (29,8%, 31,6% e 19,3%, de acordo com o estadiamento de Braak e Braak e critérios do CERAD e NIA-RI, respectivamente). Gênero feminino foi mais prevalente no grupo demência por DA (OR:6,35 IC95%:1,58-25,51). Tabagismo foi mais prevalente entre os indivíduos do grupo envelhecimento normal quando comparado ao grupo DA pré-clínica (OR:4,44 IC95%:1,04-19,01) e ao subgrupo de mulheres portadoras de demência por DA (OR:9,00 IC95%:1,56-51,87). Maior nível educacional foi encontrado no grupo DA pré-clínica, comparado ao envelhecimento normal, de acordo com o estadiamento de Braak e Braak (OR:1,22 por ano estudado IC95%:1,01-,147). CONCLUSÕES: Um limiar neuropatológico associado à DA não pode ser determinado com base nos critérios neuropatológicos atuais. Em uma população muito-idosa, indivíduos com cognição intacta podem frequentemente abrigar achados cerebrais disseminados típicos de DA. Estes indivíduos provavelmente possuem maior reserva cognitiva, influenciada pelo nível de escolaridade. O tabagismo associa-se com menor concentração de achados cerebrais típicos de DA / BACKGROUND: Epidemiologic studies are limited to investigate the factors related to brain senescence and senility. The clinicopathological assessment is the gold standard for an accurate diagnosis of Alzheimer disease (AD) and permits the identification of the pre-clinical AD cases. It is a matter of debate whether there is a threshold for AD-type pathology to become clinically manifested or a cognitive reserve protecting individuals against cerebral burden. This study attempts to investigate the mechanisms related to brain aging process by searching for the factors associated with normal aging, pre-clinical AD and AD dementia. METHODS: A post-mortem study evaluating 141 cases, aged 80 years or older, randomly selected from the Brain Bank of the Brazilian Aging Brain Study. Cognitive evaluation was gathered through the CDR and the IQCODE, applied with a knowledgeable informant of the deceased. Neuropathologic examinations were performed using immunohistochemistry and were classified according to the CERAD and NIA-RI criteria and Braak and Braak staging. Cases were classified as normal aging if: CDR = 0, IQCODE <3.20, CERAD = 0 or A and Braak and Braak stage III. The pre-clinical AD group included subjects with CDR=0, IQCODE <3.20, CERAD B or C and Braak stage IV. Cases were considered as AD dementia when presented CDR 2, IQCODE > 3.80, CERAD B or C and Braak and Braak stage IV. Demographical data, functional and behavioral profile, history of cigarette smoking, alcohol abuse, hypertension, diabetes, stroke, cardiovascular disease and depression were compared between the groups. Microvascular findings were registered. RESULTS: A considerable percentage of CDR=0 subjects fulfilled one or more neuropathologic criteria for AD. (29.8%, 31.6% and 19.3%, according to Braak and Braak staging, CERAD and NIA-RI criteria, respectively). Female gender (OR:6.25 95% CI: 1.58-25.51) was associated to AD when compared to normal aging group. Cigarette smoking was more prevalent among the individuals of the normal aging group when compared to both the pre-clinical AD group (OR: 4.44 95%CI:1.04-19.01) and the female gender AD dementia subgroup. (OR: 9.00 95%CI:1.56-51.87). A higher educational level was found significant on the preclinical AD group when compared to normal aging group, according to Braak and Braak staging (OR: 1.22 per year of education 95%CI:1.011,47). CONCLUSION: A minimum neuropathologic threshold for AD cannot be determined based on current diagnostic criteria. On a very-old population, cognitively normal subjects can frequently harbor disseminate pathology of AD. These individuals probably have a higher cognitive reserve in which educational level may play an important role. Cigarette smoking is associated with lower burdens of AD-like pathologic findings in the brain

A Doença de Alzheimer (DA) é a causa mais comum de demência e é caracterizada clinicamente por comprometimentos cognitivos. Histologicamente é caracterizada pela formação de placas senis e de emaranhados neurofibrilares intracelulares resultantes de alterações do metabolismo do peptídeo A e da hiperfosforilação da proteína tau, respectivamente. Essas alterações parecem, em parte, ser uma decorrência de uma deficiência na sinalização da insulina e conseqüente resistência do encéfalo a esse hormônio, sugerindo que a DA esporádica tenha uma relação com o Diabetes mellitus. A estreptozotocina tem sido utilizada como modelo de indução do Diabetes, e mais recentemente como modelo experimental da DA quando administrado intracerebroventricular. Nosso objetivo nesse estudo foi o de caracterizar o esse modelo experimental da DA induzido pela estreptozotocina, avaliando as conseqüências agudas e a longo prazo. Foram utilizados ratos Wistar machos de quatro meses de idade que receberam injeções intracerebroventriculares bilaterais de estreptozotocina ou de veículo. Os animais foram avaliados aguda e cronicamente por testes comportamentais de memória de referência e operacional utilizando o modelo do labirinto aquático de Morris que visavam avaliar o curso temporal dos prejuízos cognitivos após a injeção da droga. Em diferentes tempos após as injeções, os ratos foram sacrificados e regiões do encéfalo submetidas à técnica de immunoblotting para avaliação de proteínas indicadoras de neurodegeneração ou à técnica histoquimica pelo método de Fluoro-Jade C. A avaliação da memória operacional em períodos agudos mostrou que os prejuízos cognitivos parecem se instalar a partir de 3 horas da injeção de estreptozotocina. A avaliação crônica das memórias operacional e de referência mostrou que os ratos exibiram um prejuízo marcante no desempenho dessas tarefas ao longo dos testes, embora seja correto afirmar que esses animais ainda são capazes de adquirir informação relevante com relação à execução da tarefa, particularmente na versão de memória de referência. A análise de immunoblotting mostrou haver aumento da expressão do peptídeo beta amilóide significante em regiões como amigdala, córtex entorrinal, núcleos da base e do hipotálamo. Também foi observado um aumento significativo da fosforilação da proteína tau na amigdala, cerebelo, córtex, prosencéfalo basal e núcleos da base. Foi observada uma diminuição da enzima de síntese de acetilcolina, a colina acetil-transferase apenas na amigdala. Fibras em degeneração foram observadas no hipotálamo, na área septal e em neurônios piramidais na região CA1 após 1 dia da injeção de estreptozotocina. Já após 15 dias da injeção podemos observar marcação em neurônios do estriado e da região CA1 do hipocampo e em fibras próximas ao giro denteado. Em resumo a injeção intracerebroventricular de estreptozotocina parece produzir um bom modelo experimental da DA, pois reproduz as características cognitivas e histológicas encontradas nos pacientes com a doença / Alzheimer´s disease (AD) is the most common cause of dementia in aged humans. Recent reports have suggested a relationship between the onset of AD and an insulin-resistant brain condition. In this context, this study aimed at evaluating the effects of intracerebroventricular (ICV) injection of streptozotocin (STZ) in rats on behavior and neurodegeneration. Four month-old adult male Wistar rats were subjected to bilateral ICV injections of either STZ or vehicle and were tested for both reference and working memories in Morris water maze. After different survival times, rats were subjected to immunoblotting (to evaluate neurodegeneration markers) or to Fluoro-Jade C histochemistry. A marked disruption of performance in working memory was already observed after 3 hours of STZ injections. Immunoblotting analysis showed a significant increase of beta amyloid peptide expression in the amygdala, entorrinal cortex, basal ganglia, and hypothalamus. A significant increase of tau phosphorylation was also observed in the amygdala, cerebellum, cortex, basal forebrain and basal ganglia. Degenerating fibers were seen in the hypothalamus and septal area 1 day postinjection and in CA1 pyramidal neurons and close to the hippocampal dentate gyrus after 15 days. ICV injection of STZ seems therefore to produce an animal model of AD, as it reproduces the characteristic cognitive and histological changes of the disease

Introdução: a desorientação topográfica é um sintoma comum em pacientes com doença de Alzheimer (DA), no entanto não tem tão estudada quanto outros sintomas da DA. Objetivos: Verificar a ocorrência da desorientação topográfica em pacientes com DA e identificar quais transtornos neuropsicológicos estão relacionados com a desorientação. Métodos: Foram avaliados vinte e sete pacientes com DA provável (12 do sexo feminino, 14 com DA com demência de leve intensidade) e 30 indivíduos controles sem demência (21 do sexo feminino). Os pacientes foram submetidos a um questionário específico sobre orientação topográfica e foram submetidos aos seguintes testes: Mini Exame do Estado Mental, extensão de dígitos, fluência verbal, teste de cancelamento, teste dos blocos de Corsi, localização de pontos no espaço, julgamento de orientação de linhas, cópia de figuras em três dimensões e figuras sem sentido e testes de rotação mental. Foram realizados testes de reconhecimento de marcos topográficos, orientação pessoal, descrição de rotas, localização de cidade no mapa do Brasil. Resultados: Pacientes e controles não apresentaram diferença quanto à escolaridade e gênero. Houve diferença entre pacientes e controles no questionário sobre orientação topográfica e em todos os testes utilizados, exceto nas tarefas de funções vísuo-espaciais. O grupo de pacientes com demência de leve intensidade demonstrou diferença no questionário sobre orientação topográfica, descrição de rotas, reconhecimento de marcos topográficos, orientação espacial julgamento de orientação de linhas e localização de cidades no mapa. Apenas o reconhecimento de marcos topográficos, foi capaz de diferenciar entre pacientes com demência de leve ou de moderada intensidade. Conclusões: O questionário sobre orientação topográfica demonstrou que até mesmo os pacientes com DA com demência de leve intensidade tiveram desorientação topográfica. Os testes de reconhecimento de marcos topográficos, xi orientação pessoal egocêntrica e alocêntrica, estão alterados precocemente e podem contribuir para a desorientação topográfica, A memória operacional espacial e as funções visuo-espaciais não estão comprometidas inicialmente e provavelmente não contribuíram para a desorientação topográfica em pacientes com demência de leve intensidade. No entanto, pacientes com demência de intensidade moderada demonstraram comprometimento nas tarefas de memória operacional especial e testes de funções vísuoespaciais, o que provavelmente contribuiu para a desorientação topográfica nestes pacientes / Background: Topographical disorientation is a common symptom in patients with Alzheimer´s disease (AD) that has not been as extensively studied as other common manifestations of this disease. Objective: To verify the occurrence of topographical disorientation in patients with Alzheimer\'s disease (AD) and to identify which neuropsychological dysfunctions are causally related to the presence of this manifestation. Methods: Twenty seven patients meeting criteria for probable AD (12 female, 14 with mild dementia) and 30 subjects (21 female) without dementia were analyzed. The subjects and the caregivers were interviewed with a questionnaire on topographical orientation. The following tests were given: Mini mental state examination (MMSE), digit span, verbal fluency, cancellation task, Corsi\'s block tapping test, point localization, line orientation judgment, three dimension and nonsense figure copy and mental rotation tests. Landmarks recognition, personal orientation, recalling routes were tested in a descriptive task and geographic knowledge was evaluated with a Brazilian map. Results: Patients and control subjects were not different regarding schooling years and gender. There were differences between patients and controls in the questionnaire on topographical orientation and in all tests except in visual spatial tasks. Patients with mild dementia had difference in the questionnaire, recalling routes, landmark recognition, personal orientation, geographical knowledge and line orientation judgment. Only the landmark recognition test was found to differentiate between patients with mild or moderate dementia. Conclusions: The topographic orientation questionnaire showed that even in mild dementia, AD patients have topographical disorientation. The landmark recognition, self-centered and world-centered orientation were precociously affected and may contribute for topographical disorientation. Spatial working memory and spatial visual functions are not compromised initially and xiii probably did not contribute for topographical disorientation in the patients with mild dementia. However, patients with moderate dementia showed impairment in spatial working memory and spatial visual tests, which may have contributed to the topographic disorientation of these patients

A Doença de Alzheimer (DA) é uma patologia senil neurodegenerativa, cujo desenvolvimento está relacionado a vários fatores, tais como deposição de proteínas, alterações no ciclo celular, disfunção mitocondrial, acúmulo de danos e deficiência dos mecanismos de reparo do DNA, entre outros. Os mecanismos moleculares associados a essas alterações ainda não foram esclarecidos. Assim, considerando a hipótese de que algumas características da DA podem ser observadas em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs, peripheral blood mononuclear cells), o presente trabalho teve como objetivo avaliar se PBMCs de indivíduos com a DA apresentam alterações nos perfis de expressão gênica, com enfoque nos processos relacionados ao ciclo celular e reparo do DNA. Além disso, o trabalho buscou verificar as consequências do nocaute da polimerase ? (Pol?), principal polimerase envolvida no reparo por excisão de bases (BER), em fibroblastos embrionários de camundongos (MEFs, mouse embryonic fibroblastos). Foram coletadas amostras de sangue de 25 pacientes com DA e 15 controles para a realização do ensaio de microarranjos de mRNAs e microRNAs. As análises de bioinformática indicaram 593 mRNAs e 12 microRNAs diferencialmente expressos nos indivíduos com DA comparados aos controles. A partir desses dados foram realizadas análises de enriquecimento de vias, as quais mostraram que processos relacionados à regulação do ciclo celular, resposta a danos no DNA, inflamação, entre outros, estavam alterados em PBMCs de DA. No entanto, a expressão proteica de PCNA avaliada por Western blot não identificou alterações na proliferação das células de pacientes DA, mas foi observada a diminuição da expressão da proteína Pol?, principalmente nos pacientes em estágio mais severo da doença. Assim, as consequências da diminuição da expressão de Pol? foram avaliadas em MEFs nocauteados ii para essa enzima, o que resultou em alterações no ciclo celular e disfunção mitocondrial. Dessa maneira, esses resultados suportam as hipóteses de que falhas nos mecanismos de reparo do DNA estão relacionadas à DA e que as PBMCs podem manifestar algumas das condições patológicas que ocorrem nos neurônios. Foram ainda destacados no presente trabalho alguns genes como potenciais alvos de estudo na busca por biomarcadores da DA. Além disso, foi também demonstrado que a deficiência de Pol? pode acarretar disfunção mitocondrial, uma característica inerente às células de pacientes com DA. / Alzheimer\'s disease (AD) is an age-related neurodegenerative pathology associated with a range of features such as deposition of proteins in the brain, alterations in cell cycle, accumulation of DNA damage, DNA repair deficiency and mitochondrial dysfunction. However, the molecular mechanisms implicated in the pathogenesis of AD are still uncertain. Thereby, the present study aimed to evaluate whether peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of AD patients display alterations in gene expression profiles, mainly focusing on processes related to cell cycle and DNA repair. Furthermore, we evaluated the implications of deficiency in polymerase ? (Pol?), which is a major polymerase involved in base excision repair (BER), in mouse embryonic fibroblasts (MEFs). Blood samples were collected from 25 AD patients and 15 age-matched controls in order to perform genome-wide mRNA and microRNA expression (microarrays). Moreover, mouse embryonic fibroblasts that are knockout for Pol? were evaluated in order to determine the effects of Pol? deficiency. In PBMCs cells, bioinformatics analysis indicated 593 mRNAs and 12 microRNAs differentially expressed in AD compared to controls. Analysis of pathway enrichment indicated that processes related to cell proliferation, DNA repair, and inflammation, among others, were altered in AD blood cells. Despite the enrichment of pathways associated with cell cycle regulation, PCNA protein expression (related to cell proliferation) analyzed by Western blot did not show difference in AD. However, Pol? expression was decreased in AD blood cells, especially in patients stricken with severe AD, in spite of the lack of alterations in terms of transcript expression. Based on the results regarding decreased Pol? expression in AD cells, we studied the consequences of Pol? knockout in MEFs, and the results clearly showed mitochondrial dysfunction along time. Thus, our study demonstrated that iv PBMCs of AD patients present alterations in cell cycle and DNA repair processes, as proposed for AD neurons, reinforcing the hypothesis that failures of DNA repair mechanisms are related to AD, and PBMCs can somehow express some of pathological conditions that may occur in neurons. We also found some genes that represent potential targets to be studied as biomarkers of the disease. Furthermore, this study demonstrated that Pol? deficiency can lead to mitochondrial dysfunction, which is an inherent characteristic of AD.