Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-08-01T19:55:39Z No. of bitstreams: 3 Dissertação- Reginaldo Teixeira Nunes - 2014.pdf: 2255035 bytes, checksum: 70c145eb933df8fd6b89f116a91cade4 (MD5) Ata da Defesa de Mestrado. Reginaldo Texeira Nunes.jpg: 2607204 bytes, checksum: fb38ba2b64baafd566c2d99c81304371 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-08-02T12:26:59Z (GMT) No. of bitstreams: 3 Dissertação- Reginaldo Teixeira Nunes - 2014.pdf: 2255035 bytes, checksum: 70c145eb933df8fd6b89f116a91cade4 (MD5) Ata da Defesa de Mestrado. Reginaldo Texeira Nunes.jpg: 2607204 bytes, checksum: fb38ba2b64baafd566c2d99c81304371 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T12:26:59Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Dissertação- Reginaldo Teixeira Nunes - 2014.pdf: 2255035 bytes, checksum: 70c145eb933df8fd6b89f116a91cade4 (MD5) Ata da Defesa de Mestrado. Reginaldo Texeira Nunes.jpg: 2607204 bytes, checksum: fb38ba2b64baafd566c2d99c81304371 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-07-04 / The basidiomycete Cryptococcus neoformans is a pathogenic yeast responsible for causing meningoencephalitis in patients with a compromised immune system, leading to high mortality rates worldwide. Presently available antifungal drugs for treating this disease are not always efficient and they may lead to serious side effects and sometimes to fungal resistance. This situation has caused an increasing search for natural products derived from plants with antifungal action. Cymbopogon winterianus Jowitt (Poaceae), popularly known as citronella and Thymus vulgaris L. (Labiatae), known as thyme, are two plants commonly used in folk medicine. This study aimed at evaluating the biological activity of both C. winterianus and T. vulgaris essential oils (EOs) on C. neoformans clinical isolates. We evaluated the in vitro susceptibility of C. neoformans to each EO by the broth microdilution method, the in vitro interaction between EOs and fluconazole by the checkerboard method, their toxicity on human erythrocytes and their effects on the mitochondrial metabolism of fungal cells. Both EOs showed to possess antifungal activity against the tested isolates, with minimum inhibitory concentrations (MICs) ranging from 32 to 256 μg/mL for C. winterianus and from 32 to 128 μg/mL for T. vulgaris. No synergism between the EOs and fluconazole was observed. C. winterianus and T. vulgaris EOs did not cause hemolysis on human erythrocytes at concentrations corresponding to MIC values, indicating, therefore, low toxicity. The MTT assays showed no alterations on mitochondrial metabolism of fungal cells by C. winterianus at concentrations ≤ 128μg/mL, as well as no alterations at any concentrations corresponding to MIC values by T. vulgaris, suggesting that the main mechanism of action of both EOs is not by interfering with mitochondrial activity. Results show that C. winterianus and T. vulgaris EOs may be promising on the production of new antifungal drugs. / O basidiomiceto Cryptococcus neoformans é uma levedura patogênica causadora de meningoencefalite em pacientes imunocomprometidos, levando a altas taxas de mortalidade em todo o mundo. Os antifúngicos atualmente disponíveis para o tratamento dessa enfermidade nem sempre são eficazes, podendo causar efeitos colaterais graves e levar a casos de resistência. Diante dessa situação, a busca por produtos naturais, com ação antifúngica, oriundos de plantas tem crescido consideravelmente. Cymbopogon winterianus Jowitt (Poaceae), conhecida popularmente como citronela e Thymus vulgaris L. (Labiatae), conhecida como tomilho-branco, são duas plantas comumente utilizadas na medicina popular. Este trabalho avaliou a atividade biológica dos óleos essenciais (OEs) de ambas, em isolados clínicos de C. neoformans. Foram avaliados a suscetibilidade in vitro destes isolados ao OE de cada planta pelo método de microdiluição em caldo, a interação in vitro entre os OEs e fluconazol pelo método de checkerboard, sua toxicidade em eritrócitos humanos e seus efeitos no metabolismo mitocondrial de células fúngicas. Ambos os OEs apresentaram atividade antifúngica, com concentrações inibitórias mínimas (CIMs) variando de 32 a 256μg/mL, para C. winterianus, e de 32 a 128μg/mL para T. vulgaris. Não houve sinergismo entre os OEs e fluconazol. Os OEs de C. winterianus e T. vulgaris não causaram hemólise em eritrócitos humanos nas concentrações correspondentes às CIMs, mostrando-se de baixa toxicidade. Nos ensaios com MTT, observou-se que não houve alterações no metabolismo mitocondrial das células fúngicas por C. winterianus em concentrações iguais ou inferiores a 128μg/mL, e em nenhum dos valores correspondentes às CIMs por T. vulgaris, sugerindo que o principal mecanismo de ação antifúngica desses OEs nas CIMs não ocorre por interferência na atividade mitocondrial. Os resultados obtidos demonstram que OEs de C. winterianus e T. vulgaris podem ser promissores para a produção de novos antifúngicos.

Introdução. Os efeitos antimicrobianos dos óleos essenciais têm sido relatados na literatura científica, sobretudo referentes ao óleo essencial de Tea Tree (Melaleuca alternifolia). Tal óleo essencial tem demonstrado propriedades antissépticas e pode representar uma alternativa de um produto natural para higienização das mãos nos estabelecimentos de assistência à saúde que por ora utilizam predominantemente produtos à base de triclosan e clorexidina. Objetivo. Avaliar a eficácia da higiene das mãos na redução da carga microbiana realizada com duas formulações de sabonetes líquidos já disponíveis no mercado, contendo: óleo essencial de Tea Tree 0,3% e sabonete com triclosan na concentração de 0,5%; comparar dois procedimentos referência, sendo um da metodologia oficial (soft soap) e o outro da versão draft (soft soap + propan-2-ol). Método. Foram utilizadas as diretrizes da metodologia do Comitê Europeu de Padronização, EN 1499, indicada para avaliar a eficácia antimicrobiana de produtos para higiene das mãos. A metodologia recomenda a contaminação artificial das mãos de 12 a 15 voluntários sadios com Escherichia coli K12, seguida pela higienização das mãos com cada produto em avaliação. Ainda segundo a metodologia, os resultados além de serem comparados entre si, são comparados com um sabão de referência (soft soap), no mesmo voluntário, dia e sob condições ambientais semelhantes. Foi realizada a contagem do número de microrganismos antes (pré-valores) e após (pós-valores) cada procedimento. O fator de redução logaritimica entre os pré e pós-valores representou a atividade antimicrobiana de cada produto testado, permitindo evidenciar a eficácia dos produtos em teste comparativamente ao produto referência (soft soap seguido ou não por propan-2-ol). Resultados. Em termos de redução logarítmica, o sabonete contendo óleo essencial de Tea Tree à 0,3% foi mais eficaz do que o sabonete contendo triclosan à 0,5% (3,89 log10 x 3,59 log10), porém, pelo teste de Wilcoxon, não houve diferença estatisticamente signficante. Em relação à eficácia antimicrobiana, nenhum dos dois sabonetes apresentou desempenho superior a nenhum dos dois procedimentos referência (soft soap ou soft soap + propan-2-ol). O procedimento de higienização das mãos de referência utilizando soft soap + propan-2-ol (proposto pela versão draft da metodologia EN 1499), demonstrou-se mais eficaz do que apenas o uso do soft soap (descrito na metodologia oficial). / Introduction. The antimicrobial effects of essential oils have been reported in scientific literature, especially about essential oil of Tea Tree (Melaleuca alternifolia). This essential oil has shown antiseptic properties and may represent a natural and alternative product for hand hygiene in health care establishments that currently use products based on triclosan and chlorhexidine. Objective. Evaluate the efficacy of hand hygiene in reducing microbial load performed with two differents formulations of liquid soaps available: Tea Tree essential oil 0.3% soap and triclosan 0.5% soap; compare two references procedure, one of the official methodology (soft soap) and one of the draft version (soft soap + propan-2-ol). Method. Was used the guidelines of the European Committee for Standardization, EN1499 methodology, indicated to evaluate the efficacy of antiseptics for hand hygiene. The methodology recommends the artificial contamination of hands from 12 to 15 healthy volunteers with Escherichia coli K12 followed by washing hands with each product under evaluation. According to the methodology, results should be compared between products and with a reference soap (\"soft soap\"), in the same subject, same day and under similar environmental conditions. Were counted the number of microorganisms before (pre-values) and after (post-values) handwashing. The logarithmic reduction factor between pre-and post-values represents the antimicrobial activity of each product under test, showing the efficacy of products under test compared to the reference product (soft soap follwed or not followed by propan-2-ol). Results. In terms of logarithmic reduction, the soap containing the tea tree essential oil 0.3% was more efficacious than the soap containing 0.5% triclosan (3,89 log10 x 3,59 log10). However, the Wilcoxon test does not detected statistically significant diference. Regarding the antimicrobial efficacy, none of the two soaps showed superior performance to either references procedure (soft soap or soft soap + propan-2-ol). The procedure for reference hand hygiene using soft soap + propan-2-ol, (proposed by the draft version of the methodology EN 1499) showed to be more efficacious than use only soft soap (described in the oficial methodology).

Submitted by Neusa Fagundes (neusa.fagundes@unioeste.br) on 2018-07-12T17:47:16Z No. of bitstreams: 2 Carla_Fernandez2014.pdf: 1291543 bytes, checksum: 6cd6209240711c8d9c664256a72280c8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-12T17:47:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Carla_Fernandez2014.pdf: 1291543 bytes, checksum: 6cd6209240711c8d9c664256a72280c8 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2014-12-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Laurus nobilis L. is a tree belonging to the family Lauraceae, native to Asia and cultivated in the South and Southeast of Brazil as an ornamental plant, popularly known as laurel. The essential oil was extracted by hydrodistillation in a Clevenger apparatus for 2 hours. The essential oil was fractionated in a chromatographic column to obtain the fractions. The essential oil and fractions were identified by GC/MS. Was mensured the content of phenolic compounds of essential oil and fractions, and antioxidant activity by the DPPH sequestration method, antimicrobial activity against the strains: Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 and ATCC 70603, Proteus mirabilis ATCC 7002, Pseudomonas aeruginosa 27853 and Staphylococcus aureus ATCC 25923, yeasts Candida albicans ATCC 18804, Candida krusei ATCC 20298, Candida parapsilosis ATCC 20019, Candida tropicalis ATCC 750, Cryptococcus gattii L21 / 01 and Cryptococcus neoformans H99, and the filamentous fungi Aspergillus niger IC (clinical isolate), Aspergillus flavus IMI 190443, Aspergillus fumigatus ATCC 16913 by the diffusion test on agar. The minimal inhibitory concentration (MIC) of the sensitive strains was determined by the broth dilution method. And the acaricidal activity against Rhipicephalus microplus by the test of immersion of females and larval, the larvicidal activity against Aedes aegypti by the test of larval immersion. Twenty compounds were identified in the essential oil with 99.01% of the identified peak areas. The major component of the essential oil was the 1.8-cineole with 34.01%. The essential oil of laurel presented 17.57 μg of gallic acid / mg of essential oil of phenolic compounds and showed antioxidant activity by the DPPH method with IC50 of 15.52 mg/mL and the fractions CH2Cl2:C6H14 (8: 2) 9, 96 mg/mL and CH2Cl2: C6H14 (7: 3) 3.65 mg/mL. The essential oil and the CH2Cl2: AcOEt (9:1) fraction showed antibacterial activity against the bacteria Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae and Proteus mirabilis and antifungal activity against strains of Candida albicans, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis and Cryptococcus gattii and C. neoformans with minimum inhibitory concentration (MIC) values between 10.00 and 0.31 mg/mL. In relation to the acaricide activity, the immersion test of engorged females of R. microplus had a decrease in egg mass, egg production index and egg viability were affected in the different concentrations of essential oil in relation to the control group. On the larvae of the tick, the essential oil presented LC50 of 3.52 μL/mL and LC99 of 5.94 μL/mL, among the fractions to CH2Cl2: AcOEt (8:2) was the most active with LC50 of 0.13 μL/mL and LC99 of 0.51 μL/mL and the essential oil presented on larvae of A. aegypti LC50 of 0.38 μL/mL and LC99 of 0.48 μL/mL. Therefore, it can be concluded that the essential oil has antioxidant, antimicrobial, acaricidal and larvicidal action on R. microplus and A. aegypti, and that the fractionation was of great importance for the identification of compounds with biological activity. / O Laurus nobilis L. é uma árvore pertencente à família Lauraceae, nativa da Ásia e cultivado no Sul e Sudeste do Brasil como uma planta ornamental, conhecido popularmente como louro. O óleo essencial foi extraído por hidrodestilação em aparelho de Clevenger por 2 horas. O óleo essencial foi fracionado em coluna cromatográfica para a obtenção das frações. O óleo essencial e as frações foram identificados por CG/EM. Foi mensurado o teor de compostos fenólicos do óleo essencial e das frações, e atividade antioxidante pelo método de sequestro do DPPH, atividade antimicrobiana frente as cepas: Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 e ATCC 70603, Proteus mirabilis ATCC 7002, Pseudomonas aeruginosa 27853 e Staphylococcus aureus ATCC 25923, as leveduras Candida albicans ATCC 18804, Candida krusei ATCC 20298, Candida parapsilosis ATCC 20019, Candida tropicalis ATCC 750, Cryptococcus gattii L21/01 e Cryptococcus neoformans H99, e os fungos filamentosos Aspergillus niger IC (isolado clínico), Aspergillus flavus IMI 190443, Aspergillus fumigatus ATCC 16913 de pelo teste de difusão em ágar. Foi determinada da concentração mínima inibitória (CIM) das cepas sensíveis pelo método de diluição em caldo. E a atividade acaricida frente ao Rhipicephalus microplus pelo teste de imersão de fêmeas e larval, a atividade larvicida frente ao Aedes aegypti pelo teste de imersão larval. Foram identificados 20 compostos do óleo essencial com 99,01% das áreas dos picos identificados. O composto majoritário do óleo essencial foi o 1.8-cineol com 34,01%. O óleo essencial de louro apresentou 17,57μg equivalentes de ácido gálico/mg de óleo essencial de compostos fenólicos e mostrou atividade antioxidante pelo método DPPH com IC50 de 15,52 mg/mL e as frações CH2Cl2:C6H14(8:2) 9,96 mg/ mL e CH2Cl2:C6H14(7:3) 3,65 mg/mL. O óleo essencial e a fração CH2Cl2:AcOEt (9:1) mostraram atividade antibacteriana contra as bactérias Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae e Proteus mirabilis e atividade antifúngica contras cepas de Candida albicans, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis e Cryptococcus gattii e C. neoformans com valores de concentração mínima inibitória (CIM) entre 10,00 e 0,31mg/mL. Em relação a atividade acaricida, o teste de imersão das fêmeas ingurgitadas de R. microplus houve redução da massa dos ovos, índice de produção de ovos e a viabilidade dos ovos foram afetados nas diferentes concentrações do óleo essencial em relação ao grupo controle. Sobre as larvas do carrapato o óleo essencial apresentou LC50 de 3,52 μL/mL e LC99 de 5,94 μL/mL, dentre as frações a CH2Cl2:AcOEt (8:2) foi a mais ativa com LC50 de 0,13 μL/mL e LC99 de 0,51 μL/mL E o óleo essencial apresentou sobre as larvas de A. aegypti LC50 de 0,38 μL/mL e LC99 de 0,48 μL/mL. Portanto, pode concluir que o óleo essencial possui ação antioxidante, antimicrobiana, acaricida e larvicida sobre o R. microplus e A. aegypti, e que o fracionamento foi de grande importância para a identificação de compostos com atividade biológica.

Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2017-06-20T14:50:48Z No. of bitstreams: 1 2015 - Uir? do Amaral.pdf: 1011379 bytes, checksum: cf85bc1dcca1c891320f8683e0b406b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-20T14:50:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015 - Uir? do Amaral.pdf: 1011379 bytes, checksum: cf85bc1dcca1c891320f8683e0b406b1 (MD5) Previous issue date: 2015-12-17 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Biodiversity, one of the fundamental properties of nature, is a source of immense economic potential. Brazil holds a rich biodiversity, and is considered one of the most important mega-diverse countries on the planet. Among the various links that make up this biodiversity Brazilian native flora noteworthy. Despite this, there have been few studies that promote intelligent and rational use of this genetic resource. Domestication and breeding of native plants, including those already known and used by local or regional populations, but without penetration at the national or international market is the great opportunity offered to the countries rich in genetic resources. Medicinal and aromatic plants represent a significant part of this potential market, and the lemongrass-Brazilian species (Lippia alba) is an important example of medicinal and aromatic plant, long used in folk medicine for his duties as soothing, antispasmodic, sedative, and produce various kinds of essential oils can be used by the perfume industry, food and cleaning products, beyond the control of pests and diseases in agriculture. Thus, the objective of this study was to evaluate the genetic variability, genetic parameters and the agronomic behavior of different accesses of L. alba, coming from the metropolitan region of the State of Rio de Janeiro. The experiment was conducted in November 2011 on Medicinal Plants Sector of Agronomy Institute of Rural Federal University of Rio de Janeiro, and crops were obtained in the spring of 2013 and summer of 2014. This study was divided into three chapters: Polymorphism in clones of L. alba coming from the metropolitan area of Rio de Janeiro (Chapter I); Genetic variation for morphological characters in clones of A. alba (Chapter II) and seasonality effect in producing chemotypes of L. alba (Chapter III). In Chapter I the accessions were grouped into dendrogram, five groups being formed and the group I met two similar access (UFRRJLA 17 and UFRRJLA 18). In Chapter II it was shown that the characters analyzed showed variability according to the season (spring or summer) confirming the strong influence of the environment on quantitative variables. The total dry matter and yield were higher in access UFRRJLA05 with citral chemotype, which showed the highest average values in the two seasons in which the data were evaluated. As for the essential oil yield and productivity stood out access UFRRJLA03 with limonene-carvone chemotype, both in spring and in summer. / A biodiversidade, uma das propriedades fundamentais da natureza, ? fonte de imenso potencial de uso econ?mico. O Brasil ? detentor de uma rica biodiversidade, e ? considerado um dos pa?ses megadiversos mais importantes do planeta. Dentre os v?rios elos que comp?e esta biodiversidade a flora nativa brasileira merece destaque. Apesar disto, poucos t?m sido os estudos que promovem a utiliza??o inteligente e racional destes recursos gen?ticos. A domestica??o e o melhoramento de plantas nativas, incluindo aquelas j? conhecidas e utilizadas por popula??es locais ou regionais, por?m sem penetra??o no mercado nacional ou internacional, ? a grande oportunidade que se oferece aos pa?ses ricos em recursos gen?ticos. As plantas medicinais e arom?ticas representam uma parte expressiva deste mercado em potencial, sendo que a esp?cie erva-cidreira-brasileira (Lippia alba) ? um exemplo importante de planta medicinal e arom?tica, h? muito tempo utilizada pela medicina popular por suas fun??es como calmante, antiespasm?dica, sedativo, al?m de produzir v?rios tipos de ?leos essenciais podendo ser utilizada pela ind?stria de perfumes, alimentos e produtos de limpeza, al?m do controle de pragas e doen?as na agricultura. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a variabilidade gen?tica e par?metros gen?ticos de acessos de L. alba e o comportamento agron?mico de diferentes clones oriundos da regi?o Metropolitana do Estado do Rio de Janeiro. O experimento foi instalado em novembro de 2011 no Setor de Plantas Medicinais do Instituto de Agronomia da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, e as colheitas foram obtidas na primavera de 2013 e no ver?o de 2014. Este estudo foi dividido em tr?s cap?tulos: Polimorfismo em clones de L. alba oriundos da regi?o Metropolitana do Rio de Janeiro (Cap?tulo I) e Par?metros gen?ticos e avalia??o agron?mica em clones de L. alba (Mill) N.E.Brown em duas esta??es no ano (Cap?tulo II). No cap?tulo I os acessos foram agrupados em dendrograma, sendo formados cinco grupos e o grupo I reuniu os dois acessos similares (UFRRJLA 17 e UFRRJLA 18). No cap?tulo II foi demonstrado que os caracteres analisadas apresentaram comportamento vari?vel conforme a esta??o do ano (primavera ou ver?o) confirmando a forte influ?ncia do ambiente sobre as vari?veis quantitativas. A mat?ria seca total e a produtividade foram maiores no clone com quimiotipo citral (UFRRJLA05), com os maiores valores m?dios nas duas esta??es do ano em que os dados foram avaliados. J? para o rendimento e produtividade de ?leo essencial destacou-se o acesso com quimiotipo limoneno-carvona (UFRRJLA03), tanto na primavera quanto no ver?o

Os recursos genéticos vegetais apresentam um valor real e potencial para a agricultura em razão da sua importância em programas de melhoramento e conservação. Este estudo teve como objetivo principal caracterizar a diversidade genética e química do germoplasma de gengibre do Departamento de Genética da ESALQ/USP, por meio de 18 descritores fenotípicos, 13 combinações de marcadores AFLP e análise da composição química do óleo essencial. O germoplasma foi formado por acessos procedentes de distintos estados brasileiros, além de algúns acessos introduzidos da Colômbia. Durante as coletas, foram entrevistados 34 agricultores de três estados: São Paulo (SP), Espírito Santo (ES) e Paraná (PR), constatando-se que esta espécie é cultivada principalmente por agricultores familiares cuja fonte principal de renda é a agricultura. Na análise da composição química, um total de 61 compostos foram identificados, sendo que os acessos apresentaram variabilidade química segundo a análise de variância. O óleo essencial foi rico em monoterpenos (82,35%), destacando-se geranial (20,41%) e neral (13,36%) como os compostos mais abundantes. Os compostos α-zingibereno, 1,8-cineol, linalol e β-felandreno, foram importantes na análise da diversidade química e, portanto, determinantes no agrupamento baseado no método de ligação completa (LC-VD) que classificou o germoplasma em dois grupos de acessos: cultivares e cultivares locais. Na caracterização agromorfológica, pouca variação foi observada para variáveis qualitativas, enquanto que para variáveis quantitativas houve moderada a baixa variabilidade, embora alguns acessos divergentes foram identificados. A análise de componentes principais explicou 82% da variação total nos primeiros três componentes, sendo que a distribuição dos acessos no gráfico de dispersão foi congruente com os agrupamentos formados pelo método de otimização de Tocher, destacando-se os acessos Gen-18, Gen-24, Gen-65 e Gen-42 como os mais divergentes do germoplasma fenotípicamente. Na caracterização molecular, 13 combinações de primers AFLP geraram, em média, 113,5 locos polimórficos, com uma proporção de 96,85% de polimorfísmo na coleção global. As estimativas de diversidade genética de Nei (Hj), índice de Shannon (I) e número efetivo de alelos (ne), foram superiores nos acessos colombianos (0,501; 0,396 e 1,508, respectivamente), em relação aos acessos brasileiros. A AMOVA mostrou que a maior parte da variação (63%) ocorreu entre os dois países e o índice FST=0,153 corroborou este resultado, indicando alta diferenciação genética entre eles. Os agrupamentos fornecidos pelo Structure e o dendrograma baseado no complemento do coeficiente de Jaccard, foram consistentes entre si e demonstraram que a maioria dos acessos brasileiros são altamente similares, sendo que não há influência da procedência geográfica no padrão dos agrupamentos químicos, fenotípicos e moleculares. A introdução de novos materiais genéticos no Brasil, certamente contribuirá para uma base genética mais ampla deste cultivo. / Plant genetic resources exhibit a true and potential value for agriculture due to their importance in breeding and conservation programs. This study aimed to characterize the genetic and chemistry diversity of ginger germplasm of Genetics Department of the ESALQ/USP, through 18 phenotypic descriptors, 13 AFLP markers combinations and chemical composition analysis of essential oil. The germplasm was combined by accessions coming from diferent Brazilian states, along with some accessions introduced from Colombia. During the collection, 34 farmers were interviewed in three states: São Paulo (SP), Espírito Santo (ES) and Paraná (PR). Ginger is mainly cultivated by small farmers whose main income source is agriculture. In the chemical composition analysis, a total of 61 compounds were identified. The accessions presented chemical variability according to the analysis of variance. The essential oil was rich in monoterpenes (82.35%), being the geranial (20.41%) and the neral (13.36%), both referred to as citral, the most abundant compounds. The α-zingiberene, 1,8-cineole, linalool and β-phellandrene compounds were relevant in the chemical diversity analysis of the accessions, while the dendrogram based on the complete linkage method (LC-VD) classified the germplasm into two groups: landraces and cultivars accessions. In the agro-morphologic characterization, qualitative traits showed little variation, while moderate to low variability was observed for quantitative traits, although some divergent accessions were identified. The principal component analysis explained 82% of the total variation in the first three components, wherein the accessions distribution on the scatter plot was consistent with the groups formed by the Tocher method, with the Gen-18, Gen -24, Gen-65 and Gen-42 accessions as the most divergent ones from the phenotypically germplasm. In the molecular characterization, 13 AFLP markers combinations generated an average of 113.5 polymorphic loci, with a ratio of 96.85% of polymorphism in the overall collection. Estimates of Nei genetic diversity (Hj), Shannon index (I) and alleles effective number (ne) were higher in Colombian accessions (0.501; 0.396 and 1.508, respectively). The AMOVA showed that most of the variation (63%) occurs between the two countries and the FST=0.153 index suportted this result, indicating high genetic differentiation between Brazilian and Colombian accessions. The groupings provided by Structure and the dendrogram based on Jaccard coefficient complement were consistent with each other and showed that Brazilian accessions are genetically similar. In general, there is no influence of the accesses geographic origin in the chemical, phenotypic and molecular grouping pattern. The introduction of new genetic materials in Brazil, will certainly contribute to a broader genetic basis of this species.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-28T11:53:19Z No. of bitstreams: 1 flaviadelgaudioguimaraes.pdf: 1142633 bytes, checksum: 991f1b922805b3633df3551118ec22e9 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-28T12:25:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 flaviadelgaudioguimaraes.pdf: 1142633 bytes, checksum: 991f1b922805b3633df3551118ec22e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T12:25:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 flaviadelgaudioguimaraes.pdf: 1142633 bytes, checksum: 991f1b922805b3633df3551118ec22e9 (MD5) Previous issue date: 2013-07-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A crescente frequência de microrganismos resistentes nas instituições de saúde, têm evidenciado a necessidade pela busca de novas moléculas que possam permitir uma melhoria no tratamento de infecções por organismos patogênicos resistentes a profilaxias convencionais. As plantas aromáticas, bem como os respectivos óleos essenciais, são utilizadas há séculos como flavorizantes, na fabricação de cosméticos e perfumarias, e farmacologicamente com fins medicinais, o que tem estimulado a procura por substâncias biologicamente ativas e eficazes, especialmente contra microrganismos. Os óleos essenciais de plantas do gênero Cymbopogon e seus componentes são reconhecidos por apresentarem atividade antimicrobiana, antihelmíntica, antiparasitária, antiinflamatória, anticonvulsivante e antioxidante. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade biológica in vitro do óleo essencial da planta medicinal Cymbopogon winterianus Jowitt ex Bor, popularmente conhecida como citronela. Foram utilizados os métodos: teste de difusão em discos, concentração inibitória mínima e curva de crescimento bacteriano (método indireto) frente às cepas de referência da American Type Culture Collection (ATCC) - Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Staphylococcus simulans ATCC 27851, Entrobacter cloacaceae ATCC 23355, Proteus mirabilis ATCC 15290 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Serratia marcescens ATCC 14756, Escherichia coli ATCC 35211 - e cepa de isolado clínico - Staphylococcus aureus 53581, além dos ensaios de citotoxicidade pelo método de redução do corante tretazólio (MTT), utilizando células da linhagem Vero. O óleo de citronela apresentou atividade antibacteriana contra as cepas Gram-positivas testadas enquanto que as cepas Gram-negativas utilizadas neste trabalho mostraram-se resistentes. No estudo da citotoxicidade os resultados indicaram que a viabilidade celular, manteve-se superior a 100%, demonstrando que este óleo não apresentou citotoxicidade sobre as células em estudo, nas concentrações avaliadas. / The increasing frequency of resistant microorganisms in healthcare institutions, has shown the need for searching new molecules that may allow an improvement in the treatment of infections caused by pathogens resistant to conventional prophylaxis. Aromatic plants and their essential oils have been used for centuries as a flavoring in the manufacture of cosmetics and perfume, and pharmacologically for medicinal purposes, which has stimulated the search for biologically active substances and effective, especially on microorganisms. The essential oils plants of the genus Cymbopogon and its constituents are known for having antimicrobial activities, anthelmintic, antiparasitic, anti-inflammatory, anticonvulsant and antioxidant. Therefore, the aim of this study was to evaluate in vitro the biological activity of the essential oil of Cymbopogon winterianus medicinal plant, popularly known as citronella. The methods used were: disk diffusion test, minimum inhibitory concentration and bacterial growth curve (indirect method) against reference strains from the American Type Culture Collection (ATCC) - Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Staphylococcus simulans ATCC 27851, Entrobacter cloacaceae ATCC 23355, Proteus mirabilis ATCC 15290 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Serratia marcescens ATCC 14756, Escherichia coli ATCC 35211 - and strain from clinical isolate - Staphylococcus aureus 53581, apart from cytotoxicity assays by the method of tretazólio dye reduction (MTT), using Vero cell line. The citronella oil presented antibacterial activity against Gram-positive strains tested whereas Gram-negative strains used in this study were resistant. In the study of cytotoxicity results indicated that cell viability remained above 100%, indicating that this oil had no cytotoxicity of the cells under study at the concentrations evaluated.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-07-05T17:50:48Z No. of bitstreams: 1 maynadasilveiragomide.pdf: 1825099 bytes, checksum: b38d85ac825f80bd92aced8a24024f86 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-13T16:27:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 maynadasilveiragomide.pdf: 1825099 bytes, checksum: b38d85ac825f80bd92aced8a24024f86 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T16:27:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 maynadasilveiragomide.pdf: 1825099 bytes, checksum: b38d85ac825f80bd92aced8a24024f86 (MD5) Previous issue date: 2012-12-19 / Apesar de grandes avanços no campo do tratamento e controle da progressão do câncer, grandes lacunas ainda permanecem. Terpenóides encontrados nos óleos essenciais de plantas do gênero Lippia, já foram relatados como potenciais compostos anticancerígenos para alguns tipos de tumores. Desta forma, este estudo objetivou investigar a possível propriedade farmacológica como agente anticancerígeno sobre linhagens tumorais dos compostos presentes no óleo essencial de cinco espécies de Lippia. Os resultados mostraram, através de ensaio de MTT, efeito citotóxico nas linhagens de carcinoma de cólon de camundongo CT26.WT e de melanoma de pele humano MeWo, com IC50 e comprometimento da viabilidade celular acima de 50% sob ação dos óleos essenciais de L. alba quimiotipos geraniol e carvona, L.sidoides, L. salviifolia, L. rotundifolia e L. lacunosa. O ciclo celular foi bloqueado na fase G0/G1 após 24 h de tratamento da linhagem MeWo com os óleos de L. alba quimiotipos geraniol (50 μg/mL) e carvona (100 e 150 μg/mL) e L. rotundifolia (200 μg/mL). Além disso, os óleos de L. alba geraniol (200 μg/mL por 24 h) e L. lacunosa (10, 50, 100 e 200 μg/mL) provocaram morte celular de MeWo, caracterizada por elevada fragmentação de DNA, confirmada como apoptose para o óleo de L. alba geraniol por ensaio de TUNEL. Sobre a linhagem CT26.WT, o óleo de L. alba geraniol provocou parada de ciclo celular nas fases G0/G1 (10 μg/mL por 12 h; 10 e 200 μg/mL por 24 h) e G2/M (50 e 100 μg/mL por 12 e 24 h; 87 μg/mL por 72h). L. sidoides também provocou parada em G0/G1 com 100 μg/mL por 24 h e parada em G2/M com 100 e 150 μg/mL por 12 h e 150 μg/mL por 24 h. O óleo de L. salviifolia induziu apenas parada em G2/M na concentração de 150 μg/mL por 24 h, o de L. rotundifolia, parada em G0/G1 com 50, 100 e 200 μg/mL por 12 h e 50 μg/mL por 24 h. L. lacunosa (50 μg/mL com exposição de 72 h) provocou parada em G2/M. Os óleos de L. alba geraniol e L. lacunosa, no ensaio de 72h, provocaram aumento de DNA fragmentado, mas este não atingiu níveis tão elevados quanto aqueles observados para a linhagem MeWo. Tratamento de L. alba geraniol (200 μg/mL por 12 h) sobre MeWo e de L. alba geraniol, L. lacunosa. L. rotundifolia e L. sidoides (100 μg/mL por 12 h) sobre CT26.WT foram submetidos a análise de expressão diferencial de microRNAs através de real-time PCR com painel de 95 microRNAs relacionados a câncer. Os microRNAs de MeWo apresentaram-se down-regulados em relação ao controle negativo, que pode ter sido devido ao efeito apoptótico de L. alba geraniol sobre esta linhagem. Sobre CT26.WT, 26 microRNAs para os óleos de L. alba geraniol e L. lacunosa e 35 para L. rotundifolia e L. sidoides foram encontrados significativamente (p<0,05) desregulados em relação ao controle. Os óleos essenciais das espécies de Lippia testados, portanto, comprometeram a viabilidade celular das linhagens MeWo e CT26.WT, indicando que podem ser bons candidatos como fonte de biomoléculas anticâncer. / Despite the great progress in the treatment and progressive control of cancer, significant gaps still remain. Terpenoids which were found in the essential oils of several species from the genus Lippia were reported as potential anticancer compounds for some types of tumors. Consequently, this study aimed to investigate the possible pharmacological property as anticancer agent against tumor cell lines of compounds present in the essential oil of five Lippia species. The results showed, through the MTT assay, cytotoxic effect on mouse colon carcinoma cell lines CT26.WT and human skin melanoma MeWo with IC50 and effect on the cell viability above 50% under the use of essential oils of L. alba chemotypes geraniol and carvone, L.sidoides, L. salviifolia, L. rotundifolia and L. lacunosa. The cell cycle was arrested in G0/G1 phase after 24 h treatment of of MeWo with the oils of L. alba chemotypes geraniol (50 μg/ml) and carvone (100 and 150 μg/mL) and L. rotundifolia (200 μg/mL). Additionally, the oils of L. alba geraniol (200 μg/mL for 24 h) and L. lacunosa (10, 50, 100 and 200 μg/mL) resulted in cell death of MeWo, characterized by high DNA fragmentation, and it was confirmed as apoptosis for the L. alba geraniol oil by TUNEL assay. As far as the CT26.WT cell line is concerned, the oil of L. alba geraniol caused cell cycle arrest in G0/G1 (10 μg/ml for 12 h, 10 and 200 μg/ml for 24 h) and G2/M (50 to 100 μg/ml for 12 and 24 h; 87 μg/ml for 72 h) phases. The L. sidoides also caused an arrest in G0/G1 with 100 μg/ml during 24 h and an arrest in G2/M with 100 and 150 μg/ml for 12 h and 150 μg/ml for 24 h. The L. salviifolia oil only induced stops in G2/M at a concentration of 150 μg/ml for 24 h, the oil of L. rotundifolia only stops in G0/G1 with 50, 100 and 200 μg/ml for 12 h and 50 μg/ml for 24 h. L. lacunose (50 μg/ml with 72 h of exposure) caused an arrest in G2/M. The L. alba geraniol and L. Lacunosa oils, in the 72h assay, caused an increase in fragmented DNA, but this did not reach levels as high as those observed for the MeWo cell line. Treatment of L. alba geraniol (200 μg/ml for 12 h) on MeWo and L. alba geraniol, L. lacunosa, L. rotundifolia and L. sidoides (100 μg/ml for 12 hours) on CT26.WT were subjected to analysis of differential expression of microRNAs by real-time PCR with a panel of 95 cancer-related microRNAs. All MeWo microRNAs showed downregulation compared to the negative control, which may have been due to the apoptotic effect of L. alba geraniol against this cell line. About CT26.WT 26 microRNAs for L. alba geraniol and L. lacunosa oils and 35 for L. rotundifolia and L. sidoides were found significantly desregulated (p<0.05) compared to control. The essential oils of tested Lippia species thus affected cell viability of MeWo and CT26.WT cell lines, indicating they might be good candidates as source of new anticancer biomolecules.

Orientadores: Elaine Minatel, Marcos José Salvador / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-24T16:01:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DosSantos_FernandaRapucciMoraes_M.pdf: 2129374 bytes, checksum: 6dd904b58af615db751be55933a6f841 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Os anti-inflamatórios corticosteróides são os fármacos mais utilizados no tratamento da distrofia muscular de Duchenne. Porém, devido aos severos efeitos colaterais que apresentam, é fundamental a busca por terapias alternativas que minimizem a evolução da doença e melhorem a qualidade de vida dos pacientes distróficos e ao mesmo tempo apresentem menos efeitos colaterais do que os corticosteróides. Recentes estudos, em modelos experimentais, demonstram que os óleos essenciais extraídos de espécies do gênero Citrus apresentam potencial efeito benéfico sobre doenças associadas ao estresse oxidativo e/ou inflamação. Sendo assim, o presente trabalho teve por objetivo realizar o estudo químico do óleo essencial de Citrus aurantifolia obtido a partir de prensagem a frio da casca dos frutos, seguido de destilação a vapor, comercializado sob o nome de Lima destilada e avaliar seu potencial efeito anti-inflamatório e antioxidante sobre células musculares distróficas de camundongos mdx. O estudo consistiu em duas partes. Na primeira realizou-se a caracterização do perfil químico por CG-EM e a avaliação da atividade antioxidante in vitro do óleo essencial utilizando-se os ensaios de redução do radical DPPH e ORACFL. A segunda parte consistiu na administração do óleo essencial de C. aurantifolia in vitro sobre células musculares distróficas de camundongos mdx. Após o tratamento, avaliou-se a toxicidade do óleo essencial, e realizou-se a quantificação de H2O2 e de TNF-?, NF-?B e 4-HNE nas células musculares (Western Blotting). O óleo essencial de C. aurantifolia estudado apresentou como constituintes químicos majoritários o limoneno (42,6%), ?-terpineol (11,76%), cimeno (11,80%), ?-terpineno (4,63%) e terpinoleno (5,30%), com resultados coerentes com o esperado para esta espécie vegetal; apresentou-se ativo com capacidade antioxidante in vitro nos ensaios DPPH (forte resultado antioxidante na diluição 1:250 (v/v) em metanol) e ORACFL (950 µmol/TE g -1); demonstrou não ser tóxico, uma vez que a viabilidade celular, tanto nas células controle (C57BL/10) como nas células distróficas, se manteve acima de 90%; atenuou os efeitos deletérios que ocorrem nas células musculares distróficas, no que diz respeito à inflamação (reduziu o conteúdo de TNF-?) e estresse oxidativo (reduziu o conteúdo de 4-HNE e a produção de H2O2). Diante do exposto, acreditamos que o óleo essencial de Lima destilada possa ser potencialmente útil para o tratamento farmacológico da distrofia muscular. Entretanto, são necessários estudos futuros para se verificar qual é a dosagem e o tempo de tratamento adequados para se obter o melhor efeito deste óleo essencial / Abstract: Anti-inflammatory corticosteroids are the most commonly used drugs for the treatment of Duchenne muscular dystrophy. However, due to their severe side effects, it is essential to search for alternative therapies that minimize the evolution of the disease and improve the life quality of dystrophic patients while showing fewer side effects than corticosteroids. Recent studies in experimental models have shown that essential oils extracted from genus Citrus species have a potential beneficial effect on diseases associated with oxidative stress and/or inflammation. Thus, the aim of the present study is to perform the chemical study of the Citrus aurantifolia essential oil obtained from cold pressing the peel of the fruit, followed by steam distillation, marketed under the name Lima distilled and evaluate its potential antioxidant and anti-inflammatory effects on dystrophic muscle cells of mdx mice. The project consisted of two parts. The first was carried out to characterize the chemical profile by GC-EM and evaluation of in vitro antioxidant activity of the essential oil using trials reduction of DPPH radical and ORACFL. The second part consisted of the administration of the C. aurantifolia essential oil in vitro on dystrophic muscle cells from mdx mice. After treatment, the toxicity of essential oil was evaluated, the concentration of H2O2 was detected and TNF-?, NF-kB and 4-HNE levels in muscle cells were quantified (Western blotting). Essential Distilled Lime Oil studied showed important chemical constituents as major limonene (42.6%), ?-terpineol (11,76%), cymene (11,80%), ?-terpinene (4,63%) e terpinolene (5,30%), with results consistent with expectations for this plant species; it was active with an antioxidant capacity in vitro on the DPPH and ORACFL assays (950 µmol/TE g -1); was not toxic, the cell viability in both control cells (C57BL/10) and in dystrophic muscle cells was above 90%; it also attenuated the deleterious effects that occur in dystrophic muscle cells in relation to inflammation (reduced TNF-? content) and oxidative stress (reduced 4-HNE content and H2O2 production). Therefore, we believe that the Essential Distilled Lime Oil can be potentially useful for the pharmacological treatment of muscular dystrophy. However, future studies are needed to check what is the dosage and period of treatment suitable to achieve the best effect of this essential oil / Mestrado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Mestra em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos

Orientador: Ana Lúcia Tasca Gois Ruiz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T08:33:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DellaTorre_Adriana_M.pdf: 5760504 bytes, checksum: f3ad129dc63417ce4365252cefc87c39 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A "carqueja", Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae), é uma espécie vegetal característica de regiões tropicais, muito utilizada na medicina popular como anti-inflamatória, no tratamento de problemas hepáticos e renais, bem como para disfunções estomacais e intestinais. Recentemente, estudos demonstraram potencial atividade esquistossomicida sobre vermes adultos de Schistosoma mansoni (linhagem BH) para o óleo essencial (OE). Assim, este projeto teve por objetivo avaliar as atividades antiproliferativa e mutagênica, além da composição química do OE de B. trimera cultivada no campo experimental do CPQBA/UNICAMP. Coletas mensais (Janeiro/2012 a Dezembro/2012) das partes aéreas de B. trimera foram realizadas para a preparação do OE. Além disso, na época de floração em Julho, foram coletadas amostras das partes aéreas de indivíduos machos e fêmeas de B. trimera, diferenciadas morfologicamente pelas inflorescências. Todos os OEs preparados por hidrodestilação foram analisados por cromatografia gasosa acoplada a detector de massas (CG/EM) e avaliados quanto à atividade antiproliferativa in vitro e quanto à mutagenicidade no modelo de indução de micronúcleos com bloqueio da citocinese, com e sem ativação metabólica. A análise por CG/EM indicou que os compostos majoritários dos OEs foram biciclogermacreno, E-cariofileno, germacreno D, ?-pineno, globulol, ?-mirceno e ?-cadineno. Também foi observada uma variação na proporção relativa dos compostos presentes nos OEs obtidos das plantas fêmeas em relação aos machos. No teste de atividade antiproliferativa, em linhagens tumorais e não-tumorais, observou-se um perfil de atividade citostática semelhante para todas as amostras, independente da época de coleta, com valores de GI50 maiores que 25 ?g/mL. No teste do micronúcleo (MN) sem ativação metabólica, os OEs coletados no inverno (Jul/2012) e primavera (Out/2012) induziram um aumento na frequência de MNs, em relação ao controle de células sem tratamento, nas concentrações de 25 e 12,5 ?g/mL, enquanto os OEs obtidos no verão (Jan/2012) e outono (Abr/2012) apresentaram indução de MNs, estatisticamente significativa, somente na concentração de 25 ?g/mL. Nos experimentos realizados com os OEs extraídos de partes aéreas dos indivíduos machos e fêmeas, verificou-se que as plantas fêmeas não apresentaram potencial mutagênico nas três concentrações testadas (6,25; 12,5 e 25 ?g/mL), enquanto o OE obtido a partir dos indivíduos machos induziu aumento na frequência de MNs nas mesmas concentrações. Esses resultados sugerem que os sesquiterpenos hidrocarbonetos que predominam no OE obtido das partes aéreas das plantas machos (54,07%) podem estar envolvidos na ação mutagênica. Por outro lado, no teste com ativação metabólica, verificou-se uma redução significativa na frequência de MNs induzida pelos OEs em relação ao teste sem ativação, sugerindo que a metabolização dos OEs resultou em compostos com menor potencial mutagênico. Finalmente, no teste preliminar de antimutagenicidade, evidenciou-se no pós-tratamento e no tratamento simultâneo do OE com o metilmetanosulfonato uma possível reversão ou redução da clastogenicidade causada por este indutor de MNs. Esses dados sugerem possíveis atividades antimutagênica e mutagênica do OE das partes aéreas de B. trimera, com diferença significativa no potencial indutor de MNs entre indivíduos machos e fêmeas e que essa atividade é reduzida na presença de enzimas metabólicas, sugerindo uma potencial segurança de uso in vivo / Abstract: "Carqueja", Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae) is a native species from tropical regions widely used in folk medicine as anti-inflammatory, to treat liver and kidney problems as well as stomach and intestinal disorders. Recent studies have demonstrated the potential of B. trimera essential oil (EO) as schistosomicidal on adult worms of Schistosoma mansoni (BH strain). Therefore, this project aimed the evaluation of chemical composition, antiproliferative and mutagenic activities of EO obtained from B. trimera aerial parts cultivated in CPQBA/UNICAMP experimental field. B. trimera aerial parts were collected monthly (January/2012 to December/2012) and immediately submitted to EO extraction by hydrodistillation. Moreover, samples of males and females of B. trimera aerial parts morphologically differentiated by inflorescences were collected during the flowering season (July/2012). All EOs were analyzed by gas chromatography coupled to mass detector (GC/MS). They were also evaluated for antiproliferative activity in vitro and mutagenicity in cytokinesisblock micronucleus assay (CBMN), with and without metabolic activation. GC/MS analysis indicated that EOs major compounds were bicyclogermacrene, E-caryophyllene, germacrene D, ?-pinene, globulol, ?-myrcene and ?-cadinene, besides a variation on relative proportion of compounds between EOs of female and male plants. Antiproliferative assay in tumor and nontumor cell lines showed a similar cytostatic activity profile for all samples, independent of the collection time, with GI50 values above 25 ?g/mL. In CBMN assay without metabolic activation, EOs collected in winter (Jul/2012) and spring (Oct/2012) induced at 25 and 12.5 ?g/mL an increase in micronuclei frequency in comparison to untreated control cells, whereas EOs obtained in summer (Jan/2012) and autumn (Apr/2012) showed statistically significant micronuclei induction only at 25 ?g/mL. CBMN assay performed with male and female aerial parts EOs demonstrated that female plants showed no mutagenic potential in three concentrations (6.25, 12.5 and 25 ?g/mL) whereas male aerial parts EO induced an increase in micronuclei frequency at the same concentrations. These results suggested that sesquiterpenes hydrocarbons predominately present in male aerial parts EO (54.07%) should be involved in mutagenic action. Moreover, there was a reduction in micronuclei frequency induced by EOs when CBMN assay was carried out with metabolic activation, which suggests that enzymatic metabolism of EOs resulted in compounds with low mutagenic potential. Finally, preliminary evaluation of antimutagenicity has evidenced that simultaneous and post treatments of EO with methylmetanesulfonate (MMS) could reverse and/or reduce clastogenicity caused by this inducer of MNs. These data suggest possible antimutagenic and mutagenic activities of aerial parts of B. trimera EO, with a significant difference in potential inducer of MNs between males and females plants. Moreover, mutagenic activity decreased in the presence of metabolic enzymes, suggesting a potential safe use in vivo / Mestrado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Mestra em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos

Submitted by Biblioteca da Faculdade de Farmácia (bff@ndc.uff.br) on 2017-03-23T18:09:27Z No. of bitstreams: 1 Lima, Barbara Gomes [Dissertação, 2012].pdf: 3884662 bytes, checksum: 0524ca3a870ee99db72a293200787c80 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T18:09:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima, Barbara Gomes [Dissertação, 2012].pdf: 3884662 bytes, checksum: 0524ca3a870ee99db72a293200787c80 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A espécie Eugenia sulcata, popularmente conhecida como “murtinha” pertence à família Myrtaceae, sendo rica em estruturas secretoras de óleo essencial. Neste trabalho, é descrita a análise da composição do óleo essencial de folhas e caules em que, o sesquiterpeno β- cariofileno apresenta-se como componente majoritário em ambos os óleos, 24,65% no óleo de folhas e 18,78% no óleo de caules. Além das substâncias já descritas para o óleo essencial de folhas da espécie, foram identificadas pela primeira vez as seguintes substâncias: α-cubebeno (1,15%), β-copaeno (0,54%), cis-muurola-3,5-dieno (0,61%), cis-muurola-4 (14),5-dieno (1,32%), γ-himachaleno (2,03%), epizonareno (0,89%), trans-calameneno (4,39%), trans-cadina-1,4-dieno (3,38%). A análise do óleo essencial de caules ainda não havia sido descrita. Também foram isolados e identificados pela primeira vez na espécie os ácidos triterpênicos ursólico e sumaresinólico do extrato hexânico de folhas. O óleo essencial de folhas foi avaliado quanto as atividades: antimicrobiana, anticolinesterásica, inseticida, hipotensora e anti-herpesvirus. O teste de susceptibilidade antimicrobiana utilizando cepas de Staphylococcus aureus ATCC 29213, apresentou um CMI de 500μg/mL. Na avaliação da atividade anticolinesterásica, o óleo essencial de folhas foi eficiente na inibição da enzima AChe exibindo um valor de IC50 de 4,66 μg/mL. A atividade inseticida foi avaliada frente aos fitófagos Oncopeltus fasciatus e Dysdercus peruvianus e percevejos hematófagos da espécie Rhodnius prolixus. Tanto nos fitófagos quanto nos percevejos hematófagos, o óleo essencial de folhas, na concentração 500μg/mL, exibiu uma taxa de mortalidade superior a 80%. Já na avaliação da atividade hipotensora, o óleo essencial de folhas mostrou-se um potente agente hipotensor sendo capaz de reduzir a pressão arterial sistólica e diastólica em 16% e 31% respectivamente. No teste de atividade antiviral frente ao vírus HSV, o óleo essencial de folhas na concentração de 250μg/mL, apresentou uma baixa citotoxicidade para as células Vero, utilizadas como sistema hospedeiro, (CC50 ˃ 1000), e ED50 de 114,41 μg/mL para HSV- 1 e de 197,09 μg/mL para HSV-2. É a primeira vez que são descritas para a espécie Eugenia sulcata as atividades inseticida, anticolinesterásica, hipotensora e antiviral. Como pode ser observada, a espécie possui um rico potencial biotecnológico que merece ser mais estudado / The species Eugenia sulcata is commonly known as "murtinha" and belongs to Myrtaceae’s family, it is rich in secretory structures of essential oil. This work describes the analysis of the essential oil composition from leaves and stems which the sesquiterpene β-caryophyllene was the major component in both essential oils, 24.65% and 18.78% in essential oil from leaves and stems respectivelly. Among the substances that have been already described for this spicies essential oil from leaves , were first identified the following substances: α-cubebeno (1.15%), β-copaene (0.54%), cis-muurola-3,5 - diene (0.61%), cis-muurola-4 (14) ,5-diene (1.32%), γ-himachalene (2.03%), epizonarene (0.89%), trans-calamenene (4.39%), trans-cadina-1 ,4-diene (3.38%). The analysis of the essential oil from stems had not been described yet. The triterpenes acids ursolic and sumaresinolic were also isolated and identified in the hexane extract from leaves for the first time in E. sulcata. The essential oil from leaves was evaluated for the following biological activities: antimicrobial, anticholinesterasic, insecticide, hypotensive and antiviral. The antimicrobial susceptibility testing against Staphylococcus aureus ATCC 29213 strain, showed a MIC of 500μg/mL. For the anticholinesterasic activity evaluation, the leaves essential oil was effective in inhibiting AChE enzyme and showed an IC50 value of 4.66 μg/mL. Insecticidal activity was evaluated in phytophagous species Oncopeltus fasciatus and Dysdercus peruvianus and also for the species of bedbugs Rhodnius prolixus. For all insects, the essential oil from leaves (500μg/mL), exhibited a mortality rate above 80%. The evaluation of the hypotensive activity of the essential oil from leaves showed a hypotensive effect and it was able to reduce both systolic and diastolic blood pressure without significantly changing the cardiac frequency in rats. The antiviral activity test of the essential oil from leaves at the concentration of 250μg/mL,against HSV showed a low cytotoxicity for the Vero cells used as host for the herpesvirus (CC50 ˃ 1000) and ED50 value of 114,41 μg/mL for HSV- 1 and 197,09 μg/mL forHSV-2. It is the first time that the species Eugenia sulcata is a target of a phytochemical and biological study. As can be seen, the species has a rich biotechnological potential that requires further studies