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Atividade antibacteriana, antioxidante e citotóxica in vitro do extrato etanólico da entrecasca da planta Ouratea hexasperma (EEEOH) (A. St-Hil.) Baill var. Planchonii EnglCOSTA, Glauber Vilhena da 17 September 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-09-17 / Ouratea hexasperma (Ochnacea), popularmente conhecida como “barbatimão do cerrado”, é uma planta muito comum na região do cerrado brasileiro e, vem sendo utilizada para o tratamento de infecções microbianas e inflamações. Por isso, este estudo teve como objetivo avaliar as atividades antioxidante, quantificar teores flavonoides totais (TFT), antibacteriana e citotoxicidade do extrato etanólico da entrecasca da Ouratea hexasperma (EEEOH), bem como realizar sua caracterização fitoquímica. A planta foi coletada no estado do Amapá e em seguida foi realizada extração da entrecasca seca através de maceração à frio com solução etanólica 96% na proporção 2:8 (p/v) durante 1 dia, formando o EEEOH. A caracterização fitoquímica foi realizada através de ensaios cromáticos/precipitação em tubo e o teor de flavonoides foi mensurado através do ensaio com complexação com alumínio utilizando como padrão uma curva de quercetina (40–0,62μg/mL), e a capacidade antioxidante total através do método espectrofotométrico de descoloração do radical ABTS•+ (2,2´azino-bis-3-etilbenzotiazolin 6-ácido sulfônico) - TEAC. A atividade antimicrobiana do EEEOH foi testada frente às bactérias gram-positivas e gram-negativas, através das técnicas de microdiluição em caldo com coloração por resazurina, para a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM), e de cultivo em placa de petri com posterior contagem das unidades formadoras de colônias (UFC) para a obtenção da Concentração Bactericida Mínima (CBM). A citotoxicidade do EEEOH, foram testadas utilizando leucócitos humanos do sangue periférico, células mononucleares, com diferentes concentrações do extrato e sem nenhum estímulo (controle negativo), e incubação e mantidos a 37ºC, 98% de umidade e 5% de CO2, durante 24h, NO e MDA foram lidas de ELISA e espectrofotômetro em diferentes leituras óticas. A análise fitoquímica preliminar do EEEOH mostrou a presença de taninos, saponinas e flavonóides. O TFT no extrato foi de 1467 ± 264μg equivalentes em quercetina/g de EEEOH. A capacidade antioxidante pelo método de TEAC apresentaram elevada atividade antioxidante, não havendo diferença na capacidade antioxidante (TEAC) entre as concentrações do extrato testadas. O EEEOH apresentou boa ação antibacteriana, principalmente contra as bactérias gram-positivas. Na citotoxicidade por regressão linear se obteve a concentração capaz de matar 50% das células (CC50%), cujo valor foi de 2231,5mg/mL, confirmando que o extrato bruto tem baixa citotoxicidade frente a leucócitos humanos, nas condições testadas. Na produção de NO e MDA verificou-se que o EEEOH não foi capaz de induzir a produção de NO das concentrações testadas. Como também, nenhuma concentração induziu aumento de MDA quando comparado ao controle negativo (RPMI), confirmando a baixa citotoxicidade do extrato in vitro. As análises estatísticas foram realizadas pelo teste Anova uma via e Turkey. Conclui-se que EEEOH possui atividade antibacteriana, antioxidante e baixa citotoxicidade. / Ouratea hexasperma (Ochnacea), popularly known as "cerrado barbatimão" is a very common plant in the brazilian cerrado region and has been used for the treatment of microbial infections and inflammation. Therefore, this study aimed to evaluate the antioxidant activities, quantifying total flavonoid content (TFT), antibacterial and cytotoxicity of ethanol extract of the bark of Ouratea hexasperma (EEBOH) as well as perform their phytochemical characterization. The plant was collected in the state of Amapá, and then was held extraction of dry bark through the cold maceration with 96% ethanol solution in a 2: 8 (w/v) for 1 day, forming the EEBOH. The phytochemical characterization was performed by testing chromatic/precipitation tube and flavonoid content was measured by assay complexation with aluminum using quercetin as standard (40-0,62μg/mL), and the total antioxidant capacity by the spectrophotometric method discoloration radical ABTS•+ (2,2'azino-bis-3-etilbenzotiazolin 6-sulfonic acid) - TEAC. The antimicrobial activity of EEBOH was tested against gram-positive and gram-negative bacteria, using the microdilution techniques broth with staining by resazurin, to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC), and grown in petri dish with subsequent count of colony forming units (CFU) for obtaining the Minimum Bactericidal Concentration (MBC). The evaluation of the cytotoxicity of EEEOH human peripheral blood leukocytes. Mononuclear peripheral blood cells incubated with different concentrations of the extract and without stimulation (negative control). The cytotoxicity of EEEOH were tested using human peripheral blood leukocyte, mononuclear cells, with different extract concentrations and without stimulation (negative control), and incubated and maintained at 37 ° C, 98% humidity and 5% CO2 for 24 hours, NO and MDA were read in an ELISA spectrophotometer and different optical readings. The primary EEBOH phytochemical analysis showed the presence of tannins, saponins and flavonoids. The TFT in the extract was 1467 ± 264μg equivalents quercetin/g EEBOH. The antioxidant capacity by TEAC method showed high antioxidant activity, with no difference in antioxidant capacity (TEAC) between those concentrations of the extract. The EEBOH showed good antibacterial activity, mainly against gram-positive bacteria. The cytotoxicity was obtained by linear regression concentration able to kill 50% of cells (CC 50%) whose amount was 2231,5mg/mL, confirming that the crude extract has low cytotoxicity against human leukocytes, under the conditions tested. In the production of NO and MDA it found that the EEOC was not able to induce NO production of the concentrations tested. As well, no increase MDA of concentration induces changes when compared to the negative control (RPMI), confirming the low in vitro cytotoxicity of the extract. Statistical analyzes were performed by ANOVA one way and Turkey. In concluded that the EEBOH have antibacterial, antioxidant and low cytotoxicity.
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Efeitos anti-inflamatórios e neuroprotetores do extrato de gergelim (Sesamum indicum L.) em um modelo experimental de lesão aguda da medula espinhal de ratos / Neuroprotective and anti-inflammatory effects of gergelim (Sesamum indicum L) extract in an experimental model of acute spinal cord injury in ratsPENHA, Nelson Elias Abrahão da 10 June 2016 (has links)
Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-22T12:40:44Z
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Previous issue date: 2016-06-10 / A medula espinhal é o componente do sistema nervoso central (SNC) com funções cruciais para o estabelecimento da locomoção, habilidades motoras, somestesia e controle autonômico. Lesões medulares estão entre as condições patológicas mais graves e mais debilitantes à saúde humana, com grande incidência em todas as regiões do mundo. A reprodução dos diferentes tipos de lesão da medula espinhal (ME) em animais de experimentação e o entendimento de sua fisiopatologia, bem como a busca de tratamentos que minimizem os danos neurológicos e estimulem a recuperação morfofuncional do indivíduo afetado são temas de grande relevância científica e clínica. Neste estudo, investigamos os possíveis efeitos neuroprotetores e/ou anti-inflamatórios do extrato supercrítico de gergelim (Sesamun indicum L.) em tempos agudos após lesão experimental da medula espinhal (ME) de ratos adultos. Ratos machos adultos foram submetidos à hemissecção da ME em uma mesa estabilizadora em nível de T8. Os grupos controle e sham (falso operado) foram tratados com tween a 5% (veículo) e o grupo tratado recebeu injeções intraperitoneais de extrato de gergelim (150 mg/kg divido em duas doses diárias) em tempos agudos e sub-agudos de sobrevida após a lesão (1, 3 e 7 dias). Foram obtidas secções de 20 μm da ME com auxílio do um criostato. Estas seções foram coradas com azul de metileno, hematoxilina-eosina (HE), tricrômico de gomori, violeta de cresila e imunomarcadas por anticorpos específicos para a identificação de neutrófilos (anti-MBS-1) e micróglia (anti-ED1). Avaliou-se a força muscular por registro eletromiográfico realizados nos animais controle e tratados com gergelim, 1 e 7 dias após o trauma da ME. Os animais controle apresentaram cavitação progressiva da ME concomitante com recrutamento de neutrófilos e ativação microglial/macrofágica. O tratamento com extrato de gergelim induziu preservação tecidual e diminuição considerável do recrutamento de neutrófilos nos tempos de 1 e 3 dias após a indução da lesão experimental, o que foi confirmado por análise quantitativa (p<0.05). O tratamento com gergelim também diminuiu a ativação microglial/macrofágica no tempo de 7 dias após a lesão (P<0.05). Os registros eletromiográficos revelaram que o tratamento com gergelim induziu cerca de 50% de recuperação da força muscular em relação aos animais controle. Os resultados sugerem que o extrato de sementes de gergelim preto é anti-inflamatório, neuroprotetor e induz recuperação da força muscular em ratos adultos submetidos à trauma experimental da medula espinhal. Estudos futuros devem confirmar que fitoterápicos à base de gergelim podem ser usados como possíveis agentes neuroprotetores para tratamento da lesão da medula espinhal humana. / The spinal cord is a component of central nervous system (CNS) with crucial functions for locomotion, motor skills, somatosensory and authonomic control. Spinal injuries are among the more serious and debilitating pathological conditions to human health with large worldwide. The use of experimental models of spinal cord injury (SCI) is pivotal to understandthe SCI pathophysiology as well as search for treatments to minimize the neurological deficits and improve functional recovery. In this work, we aimed to investigate the neuroprotective and anti-inflammatory effects of supercritical gergelim (Sesamum indicum L.) extract in the acute phase of SCI in adult rats. Male Adult rats were submitted to spinal cord (SC) hemissection at T8. The sham (non lesioned) and control animals were treated with 5% tween(veicle), while treated animals received intraperitoneal (i.p) injections of Gergelim extract (150 mg/kg divided in two doses per day). Animals were allowed to recovery and were perfused at 1, 3 and 7 days post-lesion. 20 μm sections were obtained using a cryostat and stained with methylen blue, hematoxylin-eosin (HE), trichromic of Gomori and cresyl violet for gross histopathology. In addition, sections were immunolabeled with specific antibodies against neutrophils (anti-MBS-1) and activated microglia/macrophages (anti-ED1). The muscle force was assessed through electromiographic records performed in both control and treated animals at 1 and 7 days postlesion. The control animals presented progressive SC cavitation concomitant with neutrophil recruitment and microglia/macrophage activation. The treatment with gergelim extract induced tissue preservation and considerable decrease of neutrophil recruitment at 1 and 3 days, which was confirmed by quantitative analysis (ANOVA-Tukey, p<0.05). The gergelim treatment also decreased the microglia/macrophage activation at 7 days (ANOVA-Tukey, p<0.05). The electromiographic records revealed that the gergelim treatment improved the muscular force in about 50% compared to control animals. The results suggest that black gergelim seed extract is anti-inflammatory, neuroprotective and induces muscle force recovery in adults rats submitted to acute SCI. Future studies should confirm that a phytotherapic obtained from black sesame extract can be used as possible neuroprotective agent for human SCI.
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Potencial cicatrizante do extrato cetônico de Pentaclethra macroloba no processo de reparo de lesões excisionais na pele de camundongos diabéticosGOMES, Mauricio Ferreira 25 May 2017 (has links)
Submitted by Nathalya Silva (nathyjf033@gmail.com) on 2017-06-28T19:48:52Z
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Previous issue date: 2017-05-25 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Diabetes Mellitus (DM), uma doença que desperta o interesse de muitos profissionais da saúde, é uma patologia crônica que nos últimos anos tornou-se motivo de preocupação para a saúde pública. A doença divide-se em diabetes tipo 1 e tipo 2, a qual causa uma disfunção na fisiologia da insulina/glicose. Essa desregulação causa alterações significativas em alguns eventos biológicos, dentre eles, o processo de cicatrização. O surgimento de uma lesão em uma pessoa normal desencadeia uma cascata de reações celulares e bioquímicas com objetivo de reparar o tecido lesionado. Em pacientes portadores de diabetes o reparo é mais lento. Vários mecanismos são descritos como fatores importantes no retardo do processo de cicatrização em diabéticos, entre eles, a produção excessiva de Espécies Reativas de Oxigênio (ROS), diminuição do Óxido Nítrico (NO), diminuição da reposta aos Fatores de Crescimento (GFs) e das proteínas da via de sinalização da insulina. A busca por formas terapêuticas que possam auxiliar o processo de reparo tecidual apresenta uma grande demanda, devido o índice de pessoas portadoras de diabetes estar aumentando aos longos dos anos. Sendo assim visa-se, encontrar alternativas farmacológicas para este aspecto, no presente estudo foi realizada a caracterização do efeito farmacológico da aplicação tópica do extrato cetônico da semente Pentaclethra macroloba (Pracaxi), no processo de regeneração tecidual em animais diabéticos. Para avaliação do efeito cicatrizante foi criada uma ferida cutânea excisional com punch de biopsia nos animais diabéticos e posteriormente foram tratados por aplicação tópica do extrato para avaliação do potencial cicatrizante da semente. O efeito do tratamento foi avaliado mediante alguns aspectos, tais como: a contração da ferida, reepitelização, quantidade de células inflamatórias, organização tecidual e formação de colágeno na matriz extracelular. Os resultados encontrados demonstram que o extrato de pracaxi apresentou efeito cicatrizante em camundongos diabéticos, estimulando a reestruturação tecidual após lesões cutâneas. Desta forma, o pracaxi torna-se uma possível alternativa para o tratamento de lesões teciduais em diabéticos devido estimular a cascata de cicatrização promovendo a melhor formação da matriz extracelular. / Diabetes Mellitus (DM), a disease that attracts the interest of many health professionals, is a chronic pathology that has become a public health concern in recent years. The disease is divided into diabetes type 1 and type 2 , which causes a dysfunction in insulin / glucose physiology. This deregulation causes significant alterations in some biological events, among them, the cicatrization process. The emergence of injury in to a normal person triggers a cascade of cellular and biochemical reactions Aiming to repair the injured tissue. In patients with diabetes, the repair is slower. Several mechanisms are described as important factors in the delay of the healing process in diabetics, among them, excessive production of reactive oxygen species (ROS), reduction of nitric oxide (NO), reduction of the response to growth factors (GFs) And proteins the insulin signaling pathway . The search for therapeutic forms that can help the tissue repair process is in great demand, Because the rate of people with diabetes is increasing over the years. Thus, it is aimed to find pharmacological alternatives for this aspect, in the present study the characterization of the pharmacological effect of the topical application of the ketone extract of the seed Pentaclethra macroloba (Pracaxi) on the tissue regeneration process in diabetic animals was performed. To evaluate the healing effect, an excisional cutaneous wound with biopsy punch was created in diabetic animals and were subsequently treated by topical application of the extract to evaluate the healing potential of the seed. The effect of the treatment was evaluated by some aspects, such as: wound contraction, Reepithelialization, quantity of inflammatory cells, tissue organization and formation of collagen in the extracellular matrix. The results showed that the pracaxi extract presented a healing effect in diabetic mice, stimulating the tissue reconstruction after skin lesions. In this way, the pracaxi becomes a possible alternative for the treatment of tissue lesions in diabetics because it stimulates the healing cascade promoting the best formation of the extracellular matrix.
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Produção de bacteriocina por Bifidobacterium lactis a partir de leite desnatado / Bacteriocin production by Bifidobacterium lactis from skimmed milk.Castillo Martinez, Fabio Andres 12 September 2013 (has links)
Existe um número muito limitado de estudos referentes à produção de componentes antimicrobianos ou bacteriocinas produzidas por espécies de bifidobactérias. Nesse âmbito, o objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de bifidobacteriocina em leite desnatado (LD). Para tanto, o estudo foi dividido em três etapas. A primeira etapa constituiu na preparação dos meios de cultura Man, Rogosa e Sharpe (MRS), Bifidus Selective Medium (BSM) e LD suplementado com 1% (p/v) de Tween 80 (T80), Inulina (I) ou Extrato de levedura (YE). Nesta etapa, os processos fermentativos foram conduzidos em shaker, nas condições: 50 rpm/37ºC/48h. Foram realizadas análises de pH, concentração de açúcares e ácidos, crescimento celular e determinação da atividade da bifidobacteriocina pelo método de difusão em ágar contra L. monocytogenes. Na segunda etapa, e baseado nos resultados obtidos, foi desenhado um delineamento composto central (CCD) construído a partir dos seguintes parâmetros: temperatura (34, 37, 40 °C) e concentração de YE (0,5; 1,0; 1,5 g/L). Na terceira etapa do trabalho, foram realizados os cultivos em biorreator de 2 L, contendo 10% de leite desnatado, nas seguintes condições: 200 rpm, 36°C, 2,0 g/L de YE, 48h de incubação em anaerobiose. Obteve-se em LD suplementado com YE (1%), combinado ao método de difusão em placa modificado (prévia refrigeração das placas por 12h), contra L. monocytogenes (2130 AU/mL), com uma fase exponencial de 24h, µm de 0,604/h. A otimização feita através do CCD permitiu atingir níveis de atividade de 3.000 AU/mL a 3.100 AU/mL (ensaios 7, 11 e 14, blocos 3 e 1) contra L. monocytogenes, em condições ótimas de crescimento de YE: 2,0 g/L1 e T°C: 36°C. A análise de regressão mostrou ser estatisticamente significativa a relação entre as variáveis: \"concentração de \"YE e temperatura\". Os resultados indicaram que o leite desnatado é um meio adequado para produção de bifidobacteriocina. / There are few publications that have been reported about bacteriocin production by Bifidobacterium species. Therefore, the aim of this work was measure bacteriocin production in skim milk by B. lactis. Consequently, this work was divided in three stages. First, MRS, BSM and LD medium were tested with additives (Tween 80 (T80), Inuline (I) or Yeast extract (YE)) for bacteriocin production and cellular growth. Fermentation processes were conducted in shaker under specific conditions: 50 rpm/37ºC/48h. pH; sugars; acids; biomass, and bacteriocin activity against L. monocytogenes, L. plantarum, E. coli, L. sakei e S. aureus strains were analyzed . In the second stage, based on the obtained results, a central composite design (CCD) was created using the parameters: temperature (34, 37, 40 ºC), and concentration of YE (0.5, 1.0, 1.5 g/L). After, the activity was measured by two methods of plates pre-diffusion (cooling and addition of Tween 20). Third step consisted of 2 L bioreactor cultivations containing 10% skim milk diluted in 1.5 L of water (6.5 pH), under 200 rpm, 36 ºC, 2.0 g/L of YE, 48h, under anaerobic condition. Finally, the cultures supplemented with LD and YE (1%) with a modified plate diffusion method (cooling plates for 12 h) showed bacteriocin activity against L. monocytogenes (2130 AU/mL) with an exponential phase of 24 h, µm of 0.604/h. The optimization performed using CCD resulted in a higher level of activity 3000 AU/mL to 3100 AU/mL mL (Run 7, 11 and 14, blocks 3 and 1) against L. monocytogenes, also with ideal growth conditions of YE: 2,0 g/L1 and T °C: 36 °C. The pH value varied between 6.4 and 4.0. Concentration of produced acid lactic varied from 3.03 to 4.72 g/L and biomass concentration from 3.4 to 11.1 Lg UFC/mL. Regression analysis was significant to the variables: YE concentration and temperature. Results indicated that skim milk is a proper medium for \"Bifidobacteriocin\" production.
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Utilização de Hypocrea lixii para produção de nanopartículas de cobre em escala laboratorial. / Use of hypocrea lixii for the production of copper nanoparticles in laboratory scale.Marangoni, Mariana 12 May 2016 (has links)
No presente trabalho foi avaliada a capacidade de síntese de nanopartículas de cobre pelo fungo filamentoso Hypocrea lixii. Para tanto, o cultivo do fungo foi otimizado em função da concentração celular e do aspecto das hifas. Verificou-se que o cultivo realizado com inóculo de suspensão de esporos congelados em meio contendo extrato de malte forneceu concentração celular de 10g/L consistentemente, além de um aspecto sem aglomerados de células. A capacidade de biossorção de íons cobre (II) da biomassa não viável do fungo Hypocrea lixii foi avaliada, utilizando-se isotermas de biossorção. Verificou-se que o valor máximo de remoção calculado através do modelo de Langmuir é de 17,4mg/g, que foi considerado condizente com o valor reportado na literatura para o mesmo fungo. Para a síntese de partículas, inicialmente foram utilizadas biomassa viável e não viável do fungo. Após análise de microscopia eletrônica de transmissão (MET) constatou-se a formação de nanopartículas de diâmetro médio de 15nm no interior e na parede das células para a biomassa não viável. Para a biomassa viável verificou-se a formação de partículas apenas no exterior das células, com diâmetro médio de 30nm. Foi investigado o uso de extratos de suspensão de biomassa viável e não viável, obtidos através do contato das biomassas com água deionizada por 24 horas. Análises de microscopia eletrônica para esses extratos indicaram a formação de partículas de diâmetro médio de 12nm, para o extrato de biomassa viável, e de 10nm para o extrato de biomassa não viável. Um método de obtenção de extrato através de centrifugação de células não viáveis também foi investigado para a síntese de nanopartículas. Análises de microscopia eletrônica de transmissão confirmaram a formação de nanopartículas de diâmetro médio igual a 13nm. Foi realizada análise de EDS (energy dispersive X-ray spectroscopy) nas partículas obtidas em amostras de extrato proveniente de centrifugação de células não viáveis e verificou-se que são compostas apenas de cobre, confirmando a capacidade de síntese de nanopartículas metálicas. Outras técnicas de caracterização como difração de raios-X (DRX), espectroscopia de infravermelho (FT-IR) e espectrofotometria (UV-Vis) foram realizadas, porém não forneceram resultados conclusivos. Como forma de verificar os compostos que poderiam estar envolvidos na síntese das partículas através dos diferentes extratos, foram realizadas análises de espectrometria de massas (MALDI-TOF) e cromatografia gasosa. Através dessas análises foi possível verificar que os compostos que interagem com os íons cobre (II) são aminoácidos, ácidos graxos e açúcares. Apenas no extrato de centrifugação de células não viáveis foi possível verificar a presença de compostos com peso molecular na faixa entre 4kDa e 20kDa, compatível com proteínas. Uma vez confirmada a capacidade de síntese através de diferentes métodos, foi realizado um delineamento de experimentos central rotacional completo como forma de investigar a influência dos parâmetros pH e temperatura no diâmetro das partículas formadas com o extrato de centrifugação de células não viáveis. O diâmetro das partículas sintetizadas em cada ensaio foi medido através de análise de espalhamento de luz dinâmico (DLS). Através dos resultados, um modelo de segundo grau foi calculado utilizando-se o software Minitab® e verificou-se que tanto o pH quanto a temperatura não possuem contribuição significativa no tamanho das partículas sintetizadas. Além disso, observou-se que os diâmetros obtidos para os ensaios foram consideravelmente maiores que o obtido através das análises de microscopia eletrônica de transmissão (MET). Considerou-se que essa observação é resultado da presença de ligantes que atuam como estabilizadores das partículas e que contribuem para o aumento virtual do diâmetro medido. Esses ligantes podem ser compostos presentes no extrato e que não aparecem nas análises de microscopia por falta de contraste. Além disso, a análise de DLS é uma medida indireta de diâmetro e são necessárias outras análises para confirmar os resultados obtidos. Através dos resultados obtidos no presente trabalho, houve confirmação da capacidade de síntese de nanopartículas de cobre do fungo Hypocrea lixii e apresentação de metodologias promissoras que podem, após mais estudos, tornar-se um processo industrial. / In this work, the synthesis of copper nanoparticles using fungus Hypocrea lixii was evaluated. Therefore, the culture of the fungus was optimized in terms of cell concentration and hyphae qualitative aspect. It was found that cultures inoculated through frozen spore suspensions and using nutrient rich medium containing malt extract reached cell concentrations of 10g/L consistently, in addition to an aggregates-free hyphae aspect. The biossorption of copper (II) ions using non-viable biomass of Hypocrea lixii was measured, and sorption isotherms were constructed. It was found that the maximum removal calculated using the Langmuir model was 17,4mg/g, which was considered consistent with the value previously reported for this fungus. For the nanoparticle synthesis, the viable and non-viable biomasses of the fungus were initially used. Transmission electron microscopy (TEM) analysis demonstrated the formation of nanoparticles of 15nm of mean diameter inside the cells and in the cell wall for the non-viable biomass. For the viable biomass the particles obtained had 30nm of mean diameter and were located exclusively outside the cells. The use of viable and non-viable biomass suspension extracts was also investigated. The extracts were obtained after contact with double deionized water for 24 hours. Transmission electron microscopy (TEM) analysis showed the formation of particles with mean diameter of 12nm, for the viable biomass extract, and 10nm for the non-viable biomass extract. A method of obtaining cell extracts through centrifugation was also evaluated for the synthesis of copper nanoparticles. Transmission electron microscopy (TEM) analysis confirmed the formation of nanoparticles with mean diameter of 13nm. Energy dispersive X-ray spectroscopy (EDS) was performed on the particles found in samples of the centrifuged cells extract and they were found to be composed of copper only, endorsing the ability of synthesis for this extract. Other characterization techniques such as X-ray diffraction (XRD), Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) and spectrophotometry (UV-Vis) were performed but the results were inconclusive. In order to define which compounds present in the cell extracts could be involved in the synthesis reaction, mass spectrometry (MALDI-TOF) and gas chromatography analyses were performed for the different extracts produced. Through the results of those analyses it was seen that the compounds that interact with the copper (II) ions are amino acids and sugars. Only for the centrifuged cells extract it was possible to confirm the presence of compounds with molecular weights between 4kDa and 20kDa, compatible with proteins. Having confirmed the ability of the fungus of synthesizing copper nanoparticles through different methods, a central rotational composite design of experiments was established as a way of assessing the influence of the pH and temperature on the diameter of the particles formed using the centrifuged cells extract. The diameter of the particles was measured using dynamic light scattering (DLS). Through the results, a second order model was calculated using the software Minitab® and it was found that neither the pH nor the temperature had significant contributions to the size of the particles. Moreover, the diameter found for the experiments were considerably larger than the observed through transmission electron microscopy. It was considered that this observation was a result of the presence of ligands that act as stabilizers for the particles and that contribute to a virtual increase of the diameter measured. These ligands are compounds present in the extract and that are not shown in electron microscopy due to the lack of contrast. Furthermore, the DLS analysis is an indirect measurement of the diameter and other analyses are needed to confirm the results obtained. Through the results found in this work, there was a confirmation of the ability of the fungus Hypocrea lixii to synthesize copper nanoparticles. Promising methodologies were proposed that might, after further studies, become an industrial process.
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Syzygium cumini (L) Skeels-jambolão: estudo farmacognóstico, otimização do processo extrativo, determinação da atividade antimicrobiana do extrato e avaliação da atividade anti-séptica de um sabonete líquido contendo o referido extratoMigliato, Ketylin Fernanda [UNESP] 09 March 2005 (has links) (PDF)
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migliato_kf_me_arafcf.pdf: 1875341 bytes, checksum: d481230199181f6f022dc8cadc5234d6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Considerando-se a qualidade dos fitoterápicos, é importante salientar que a preocupação com esta questão inclui rigoroso acompanhamento das diferentes etapas do desenvolvimento e produção destes produtos, desde a coleta do vegetal até a disponibilidade do produto final. Neste trabalho foi realizado o estudo farmacognóstico do fruto de Syzygium cumini (L.) Skeels, popularmente conhecido como jambolão, no qual foram destacadas a otimização do processo extrativo, a determinação da atividade antimicrobiana do extrato bruto e a avaliação desta atividade após sua incorporação em um sabonete líquido. Análise fitoquímica preliminar dos frutos de S. cumini (L.) Skeels evidenciou taninos, flavonóides, antocianidinas, iridóides, alcalóides e heterosídeos fenólicos simples. Tendo como parâmetros o resíduo seco e a atividade antimicrobiana, os extratos foram testados frente aos microrganismos Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Candida albicans e Candida krusei. Por meio da análise fatorial dos resultados do planejamento experimental, onde foi empregada granulometria de 0,302 mm do pó seco do fruto, constatou-se que a percolação constitui o melhor procedimento extrativo, e a mistura etanol: água (50:50) constitui o melhor solvente. Para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) do extrato foram usados os microrganismos S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa, C. albicans, C. krusei e C. parapsilosis, partindo de uma concentração inicial de 10000 ìg/100 ìL. A concentração bactericida mínima (CBM) foi de 1250 ìg/100 ìL para a S. aureus, 625 ìg/100 ìL para a S. epidermidis e 2500 ìg/100 ìL para a P. aeruginosa e para a concentração fungicida mínima (CFM) foi de 2500 ìg/100 ìL. A incorporação do extrato de S. cumini... .
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Estudo qu?mico e de atividade biol?gica de Plectranthus neochilus Schltr. (Lamiaceae)Viana, Abra?o Jos? Silva 16 September 2011 (has links)
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Previous issue date: 2013-02-19 / O trabalho apresentado nesta disserta??o descreve o estudo fitoqu?mico e de atividade biol?gica das folhas e caules e flores de Plectranthus neochilus Schltr., esp?cie pertencente ? fam?lia Lamiaceae. A planta ? uma erva arom?tica conhecida popularmente no Brasil como ?boldo? ou ?boldo-gamb??, e assim como as esp?cies P. barbatus Andrews (?boldo-brasileiro") e P. ornatus Codd. ("boldinho"), tem o ch? de suas folhas utilizadas na medicina tradicional no tratamento de insufici?ncia hep?tica e dispepsia, em substitui??o a Peumus boldus Molina (?boldo-do-chile?). O estudo fitoqu?mico do extrato hex?nico das folhas e caules de P. neochilus forneceu dois triterpenos: ?-amirina (PN1) e friedelina (PN2). PN1 foi isolada como um ?ster de ?cido graxo ligado na posi??o C-3. Deste extrato foi obtida tamb?m a mistura dos ester?ides sitosterol e estigmasterol (PN3). O estudo fitoqu?mico conduzido com o extrato em acetato de etila das folhas e caules forneceu a flavona metoxilada nas posi??es C-6 e C-7, a cirsimartina (PN4). Todos os compostos obtidos foram descritos pela primeira vez na esp?cie. A elucida??o estrutural dos compostos isolados, baseou-se na an?lise espectrosc?pica de RMN 1D, CLAE, ESI e por compara??o com dados encontrados na literatura. O extrato metan?lico das folhas e caules de P. neochilus mostrou significativa atividade antioxidante quando avaliado pelo m?todo de DPPH, seguido pelo extrato em acetato de etila e hex?nico. Foi avaliado tamb?m o extrato metan?lico das flores da esp?cie, que apresentou atividade inferior aquele observado para o extrato metan?lico das folhas e caule, sendo estas atividades confirmadas pelo conte?do fen?lico dos extratos. A atividade anticolinester?sica dos extratos das folhas e caules e das flores de P. neochilus foi avaliada, sendo observada a inibi??o da enzima acetilcolinesterase para todos os extratos pesquisados. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Qu?mica, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2011. / ABSTRACT
The present work describes the phytochemical and pharmacological investigation on extracts of the leaves and stems and flowers of the species Plectranthus neochilus Schltr. belonged to the family Lamiaceae. The plant is aromatic herb popularly known in Brazil as ?boldo? or ?boldo-gamb??, and as the species P. barbatus Andrews (?boldo-brasileiro") e P. ornatus Codd. ("boldinho"), according to ethnopharmacological survey, is often used in the treatment of hepatic insufficiency and dyspepsia, replacing the Peumus boldus Molina (?boldo-do-chile?). The phytochemical investigation of the hexanic extract of the P. neochilus leaves and stems yielded two triterpenes: ?-amyrin (PN1) e friedelin (PN2). The compound ?-amirin was isolated as a fatty acid ester in position C-3. In this extract was also obtained the mixture of the steroids sitosterol and stigmasterol (PN3). The phytochemical study conducted with the ethyl acetate extract of the leaves and stems gave the methoxy flavone at positions C-6 and C-7, the cirsimartin (PN4). All compounds obtained were first described in the species. Structural elucidation of isolated compounds was based on spectroscopic analysis of 1D NMR, HPLC, ESY and by comparison with data found in literature. The methanol extract of leaves and stems of P. neochilus showed significant antioxidant activity when evaluated by the DPPH method, followed by the extract in ethyl acetate and hexane. We also evaluate the methanol extract of flowers of the species that showed activity lower than that observed for the methanolic extract from leaves and stems, and these activities confirmed for the content of phenolic extracts. The anticholinesterase activity of extracts of leaves and stems and flowers of P. neochilus was evaluated and found to inhibit the enzyme acetylcholinesterase to all extracts studied.
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Obtenção, caracterização e avaliação da estabilidade de extrato do urucum nanoencapsulado em goma do cajueiro / Obtenção, caracterização e avaliação da estabilidade de extrato do urucum nanoencapsulado em goma do cajueiroAguiar, Nágela Martins Oliveira January 2013 (has links)
AGUIAR, Nágela Martins Oliveira Aguiar. Obtenção, caracterização e avaliação da estabilidade de extrato do urucum nanoencapsulado em goma do cajueiro. 2013. 78 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrária, Departamento de Tecnologia de Alimentos, Fortaleza-CE, 2013 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-06-22T12:53:13Z
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Previous issue date: 2013 / Consumers demands for healthier eating are increasing, which has led the industry to invest more persistent in the use of natural products. One of more relevant segment is natural substances acting as pigments, replacing the artificial coloring. Due his high instability, several researches have been directed to determine favorable conditions of use of these substances. Among the compounds studied we have bixin, a natural pigment, carotenoid, lipid-soluble annatto seed extract (Bixa orellana L.). Most carotenoids are sensitive to factors such as high temperature, light, oxygen and low pH, which restricts its use as a pigment in some food products. The use of nanoencapsulation has been an alternative for improving the stability of pigments such as bixin, making possible its incorporation into food systems without loss of its qualities. Considering that, the present study aimed to obtain, characterize and assess the stability of nanocapsules containing annatto extract, employing the cashew gum as wall material. To obtain these nanocapsules were performed steps of preparation of the emulsion and spray drying. The nanocapsules were characterized and showed a average size of 24.17nm + 3.71 with distribution by volume of 97.33% + 2.08, demonstrating high degree of homogeneity in size. The solubility of the nanocapsules was 74.13% + 3.68 and the efficiency achieved in the process of nanoencapsulation was 44.74% + 4.38. Stability tests were made with nanocapsules storing them in conditions of absence and presence of light. During ten days, for forty days, was made the determination of colorimetric coordinates a*, b*, L*, C*, Hue angle and the determinations of the levels of total bixin and superficial bixin. The total bixin had a reduction of 78,48% for the nanocapsules exposed to light, while in condition of absence of light the reduction was only 41.88%. The values of surperficial bixin or unencapsulated, ranged from 27.64 mg/100g to 8.65 mg/100g, for samples subjected to light, and from 27,64 mg/100g + 2,13 a 16,45 mg/100g + 0,80 for samples stored in absense of light. The nanocapsules showed greater stability when stored away from light, confirming the deleterious light effect in annatto extract and therefore not full protection of cashew gum as wall material. Were also found in this study the antioxidant activities (using the system β-caroteno/ acid linoleic) and antimicrobial (by disk diffusion) of nanocapsules containing annatto extract. In relation to the antioxidant activity (inhibition of the oxidation of β-carotene) was obtained average perceptual corresponding to 61.90%, 54.576%, and 51.73% for containing extracts of nanocapsule concentration of 40 mg/L, 30 mg/L and 20 mg/L. The results suggests antimicrobial activity of the nanocapsules, making an inhibition zone against Staphylococcus aureus using concentrations of 1 mg/L, 2 mg/L and 10 mg/L, however there was observed the formation of inhibition zones for Escherichia coli and Salmonella choleraesuis. In this study, nanocapsules containing annatto extract were applied to the model system (buffer) and food system (yogurt). The stability of these systems was measured using the colorimetric parameters, during five days, for 40 days. It was observed that the system model may have promoted the nanocapsule stability, retaining their nucleus. When applied in yoghurt gave the nanocapsules to this food yellow / orange coloration and during the storage period was reduced values of a* and increased b* and C* parameters. / As exigências dos consumidores por uma alimentação mais saudável são cada vez maiores, o que tem levado a indústria a investir de forma mais persistente no uso de produtos naturais. Um dos segmentos de investimento de destacada importância, é o de substâncias naturais que atuem como pigmentos, em substituição aos corantes artificiais. Devido à alta instabilidade destas substâncias, diversas pesquisas têm buscado determinar condições favoráveis para seu uso. Dentre as substâncias estudadas tem-se a bixina, um pigmento natural, carotenoide, lipossolúvel, extraído da semente do urucuzeiro (Bixa orellana L.). A maioria dos carotenóides é sensível a fatores como alta temperatura, luz, oxigênio e baixo pH, o que restringe o seu emprego como pigmento em alguns produtos alimentícios. O uso da nanoencapsulação tem sido uma alternativa para melhorar a estabilidade de pigmentos como a bixina, tornando possível sua incorporação em sistemas alimentícios sem a perda de suas propriedades. Considerando o exposto, o presente trabalho teve por objetivo obter, caracterizar e avaliar a estabilidade de nanocápsulas contendo extrato do urucum, empregando a goma do cajueiro como material de parede. Para a obtenção das nanocápsulas foram realizadas as etapas de preparo da emulsão e atomização. As nanocápsulas obtidas foram caracterizadas e apresentaram tamanho médio de 24,17 nm + 3,71, com distribuição por volume de 97,33% + 2,08, o que demonstrou considerado grau de homogeneidade de tamanho. A solubilidade das nanocápsulas foi de 74,13% + 3,68 e a eficiência alcançada no processo de nanoencapsulação foi de 44,74% + 4,38. Os testes de estabilidade das nanocápsulas foram feitos armazenando-as em condições de ausência e presença de luz. A cada dez dias, durante quarenta dias, fez-se a determinação das coordenadas colorimétricas a*, b*, L*, C* e ângulo Hue e as determinações dos teores de bixina total e bixina superficial. A bixina total teve uma redução de 78,48% para as nanocápsulas expostas à luz, enquanto que na condição de ausência de luz essa redução foi de apenas 41,88%. Os valores de bixina superficial, ou não encapsulada, oscilaram de 27,64 mg/100g a 8,65 mg/100g, para amostras submetidas à luz, e de 27,64 mg/100g + 2,13 a 16,45 mg/100g + 0,80 para amostras armazenadas na ausência de luz. As nanocápsulas mostraram maior estabilidade quando armazenadas ao abrigo da luz, comprovando o efeito deletério da luz ao extrato de urucum e, portanto, a não total proteção da goma de cajueiro como material de parede. Também foram verificadas nesta pesquisa as atividades antioxidante (utilizando-se o sistema β-caroteno/Ácido Linoléico) e antimicrobiana (pelo método de disco-difusão) das nanocápsulas contendo extrato do urucum. Em relação à atividade antioxidante, obteve-se percentual médio de inibição da oxidação do β-caroteno correspondente a 61,90%, 54,576% e 51,73%, para os extratos contendo concentrações de nanocápsulas de 40 mg/L, 30 mg/L e 20 mg/L. Os resultados obtidos sugerem atividade antimicrobiana das nanocápsulas, com formação de halo de inibição frente ao Staphylococcus aureus utilizando-se as concentrações de 1 mg/L, 2 mg/L e 10 mg/L, porém não foi observada a formação de halos de inibição para os microrganismos Escherichia coli e Salmonella choleraesuis. Neste estudo as nanocápsulas contendo o extrato do urucum foram aplicadas em sistema modelo (solução-tampão) e em um sistema alimentício (iogurte). A estabilidade desses sistemas foi medida através dos parâmetros colorimétricos, a cada cinco dias, durante 40 dias. Observou-se que o sistema modelo pode ter promovido estabilidade às nanocápsulas, conservando seus núcleos. Quando aplicadas em iogurte as nanocápsulas conferiram a este alimento uma coloração amarelo/alaranjado e durante o período de armazenamento houve redução dos valores de a* e aumento dos parâmetros b* e C*.
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Efeito dos extratos orgânicos de Annona muricata L. e Annona squamosa L. (Annonaceae) sobre o pulgão Aphis gossypii (Glover, 1887) (Hemiptera:Aphididae) e seletividade ao predador Eriopis connexa (Germar, 1824) (Coleoptera: Coccinellidae) / Effect of organic extracts of Annoma muricata L. and Annoma squamosa L. (Annonaceae) on the Aphid nymphs (Glover, 1887) (Hemiptera: Aphididae) and selectivity to the predator Eriopis connexa (German, 1824) (Coleoptera: Coccinellidae)Santos , Lindinalva dos 20 July 2016 (has links)
The use of botanical extracts has been reported as an alternative to control insect pests in agricultural crops, but the harmful effects of these natural products on the beneficial insect fauna of agricultural ecosystems have to be assessed. The aim of this study was to evaluate the efficiency of seed extracts of sugar apple (Annona squamosa L.) and soursop (Annona muricata L.) on Aphis gossypii (Glover, 1887) (Hemiptera: Aphididae) and its natural enemy, the ladybug Eriopis connexa (Germar, 1824) (Coleoptera: Coccinellidae). Therefore, bioassays were performed with hexane and ethanol extracts at concentrations of 0.125; 0.25; 0.3; 0.4; 0.5; 1.0; 1.5 and 2.0%, to estimate by Probit analysis their lethal concentrations. For the ladybird, it was tested the action by contact, residual effect and ingestion to evaluate survival, oviposition and viability of the eggs. The CL50 and CL99 estimated for A. gossypii were, respectively, 0.39 and 5.47% for the ethanolic extract of sugar apple (EEP); 0.23 and 1.19% for the ethanolic extract of soursop (EEG); 0.47 and 4.39% for the hexanic extract of sugar apple (EHP); 0.42 and 6.38% for the hexanic extract of soursop (EHG). Considering the action of the extracts by contact, the EEG (0.23%) was considered innocuous, on the other hand, the EHG (0.42%) promoted mortality of 30% of insects and is classified as slightly harmful for 1st instar larvae; for adults, only EEP (5.47%) was classified as slightly harmful and the other treatments were classified as harmless, including for the residual effect. Regarding the selectivity of the extracts, the LC50 of EEG and EHG did not affect the survival rate of the ladybirds. By contrast, the EEP in both tested concentrations (0.39 and 5.47%) reduced the rate of survival to zero in less than 7 days, resembling the chemical treatment with Decis®. All treatments reduced the consumption of Anagasta kuehniella eggs, alternative prey, treated with the extracts, reducing the predation and causing as a consequence, oviposition to a decrease in lower concentrations and no egg laid for higher concentrations, affecting fertility and predator the viability of the eggs. The EEG in the concentration of 0.23% was effective in controlling A. gossypii, and its selective natural enemy E. connexa, not interfering with the survival rate of these. / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Alagoas / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O uso de extratos botânicos é uma alternativa de controle de insetos-praga em cultivos agrícolas, mas os efeitos desses produtos naturais sobre a entomofauna benéfica dos agroecossistemas são necessários. Com isso, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência dos extratos de sementes de pinha Annona squamosa L. e graviola Annona muricata L. sobre o pulgão Aphis gossypii (Glover, 1887) (Hemiptera: Aphididae) e seu inimigo natural, a joaninha Eriopis connexa (Germar, 1824) (Coleoptera: Coccinellidae). Para isso, foram realizados bioensaios com os extratos hexânico e etanólico nas concentrações: 0,125; 0,25; 0,3; 0,4; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0%, visando estimar por análise de Probit as concentrações letais. Para a joaninha, foi testada a ação por contato, efeito residual e ingestão para avaliação da sobrevivência, oviposição e viabilidade dos ovos. As CL50 e CL99 estimadas para A. gossypii foram respectivamente, 0,39 e 5,47% para extrato etanólico de pinha (EEP); 0,23 e 1,19% para extrato etanólico de graviola (EEG); 0,47 e 4,39% para extrato hexânico de pinha (EHP); 0,42 e 6,38% para extrato hexânico de graviola (EHG). Na ação dos extratos por contato, o EEG a 0,23% foi considerado inócuo, por outro lado, o EHG a 0,42% promoveu mortalidade de 30% dos insetos, sendo classificado como levemente nocivo para larvas de 1o instar; para adultos apenas o EEP (5,47%), foi classificado como levemente nocivo e os demais tratamentos foram classificados como inócuos, inclusive para o efeito residual. Quanto à seletividade dos extratos às joaninhas por ingestão, as CL50 do EEG e EHG não interferiram na taxa de sobrevivência dos predadores, por outro lado, o EEP nas duas concentrações testadas (0,39 e 5,47%) reduziram a zero a taxa de sobrevivência dos insetos em menos de 7 dias, se assemelhando ao tratamento químico Decis®. Todos os tratamentos reduziram o consumo de ovos de Anagasta kuehniella, presa alternativa, tratados com os extratos, diminuindo a capacidade predatória e, causando como consequência, a diminuição na oviposição para as concentrações menores e nenhum ovo posto para as maiores concentrações, afetando a fecundidade do predador e a viabilidade dos ovos. O EEG na concentração de 0,23% foi eficiente no controle de A. gossypii, e seletivo ao inimigo natural E. connexa, não interferindo na taxa de sobrevivência destes.
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Solidago chilensis Meyer : desenvolvimento de métodos analíticos, extratos secos qualificados, avaliação farmacológica in vivo e produção de comprimidosMarin, Rafaela January 2014 (has links)
Infusos e decoctos preparados com as partes aéreas de Solidago chilensis são utilizados na medicina popular para tratar distúrbios gástricos, úlceras intestinais, inflamações, reumatismo, além de outros empregos tais como diurético e analgésico. Diversos estudos têm sustentado conhecimento popular, como por exemplo, a atividade anti-inflamatória e gastroprotetora das partes aéreas de Solidago chilensis. Em modelos in vitro, in vivo e estudo clínico realizados com extratos obtidos com diversos solventes, foi observada tanto a resposta aguda quanto a crônica à inflamação. O mesmo ocorre para a ação gastroprotetora evidenciada para extratos aquosos em modelos in vivo. Com ampla e abundante ocorrência, essa espécie nativa do Brasil integra a Relação Nacional de Plantas Medicinais de Interesse do SUS (Renisus), inserindo-se na Política Nacional de Práticas Integrativas e Complementares (PNPIC). No entanto, não há relatos na literatura sobre a avaliação química e obtenção de produtos tecnológicos padronizados e ativos, o que constitui uma importante limitação para a produção de medicamento fitoterápico. Neste sentido, este trabalho objetivou, primeiramente, avaliar parâmetros de controle de qualidade e estabelecer critérios químicos que permitam identificar e caracterizar a espécie bem como compará-la a outras do gênero, que possuem amplo uso terapêutico na Europa. Análises comparativas destas amostras foram realizadas por CCD, CLAE e teor de flavonoides totais. Análises por CCD e CLAE dos extratos metanólicos demonstraram diferenças químicas interespécie e constância química qualitativa da S. chilensis em diversos locais e anos de coleta. A determinação quantitativa de flavonoides totais envolveu a otimização das condições de hidrólise ácida (concentração de HCl e do tempo de reação) e validação de método analítico por CLAE. O teor de flavonóides totais, assim obtido, foi 154% maior do que o observado por ensaio colorimétrico com cloreto de alumínio a 425 nm. Análises por CLAE-DAD e CLAE-EM/EM também foram realizadas e revelaram a presença de rutina, quercetrina e dos ácidos 3,4-O-dicafeoilquinico e 4,5-O-dicafeoilquinico. Além desses ensaios, ainda como parte da caracterização da droga vegetal, foi avaliado o teor e composição do óleo volátil presente nas folhas e inflorescências. Esses produtos demonstraram potente ação antifúngica frente a leveduras emergentes e multirresistentes, sem evidências de citotoxicidade. Em relação à obtenção do extrato seco por aspersão (PSA) a partir do extrato etanol:éter (1:1), o processo mostrou-se viável, com alto rendimento e para a sua qualificação química foram, empregadas duas técnica cromatográficas. Por CLAE foi determinada a presença dos mesmos componentes descritos para a droga. Adicionalmente, foi realizada a padronização química quantitativa da droga vegetal pela determinação dos flavonoides totais na qual foi evidenciando o teor de 82,73 mg/g expressos em quercetina. A quantificação da solidagenona foi realizada por HPTLC-densitometria e o teor médio encontrado foi de 8 mg/g. A avaliação da atividade gastroprotetora do PSA e do marcador solidagenona utilizou-se os modelos de lesão gástrica induzida por etanol e indometacina em camundongos. Nesses modelos, o PSA apresentou um índice de gastroproteção, nas doses de 50, 125 e 250 mg/kg respectivamente, de 85 ± 15%, 77 ± 3%; 83 ± 9%; 64 ± 16 % quando utilizado etanol como agente lesivo e de 63 ± 23% e 79 ± 12% quando utilizado a indometacina. A solidagenona testada na dose de 30 mg/kg, apresentou índices os índices de gastroproteção próximos aos dos padrões positivos ranitidina e carbenoloxona em doses de 100 e 200 mg/kg respectivamente. O PSA, produto intermediário com ação gastroprotetora, foi caracterizado como um pó fino com baixa densidade e baixa fluidez, tornando necessários processos de granulação por via seca para possibilitar a sua incorporação em forma farmacêutica sólida. Foram obtidos compridos de 700 mg e estes foram caracterizados em relação aos ensaios de resistência mecânica e uniformidade de conteúdo. Os resultados obtidos neste trabalho representam as primeiras contribuições para o estabelecimento de parâmetros e métodos para a caracterização que auxiliem no controle de qualidade da droga vegetal de S. chilensis. A viabilidade de produção, qualificação química e verificação de ação farmacológica do extrato seco obtido e o estudo da viabilidade tecnológica de obtenção de comprimidos contribuem enormemente para o desenvolvimento de novos produtos farmacêuticos a partir de S. chilensis. Este trabalho pode ser considerado inovador por tratar-se da associação de uma matriz complexa, rica em constituintes terpênicos e flavonoides cuja caracterização química quali e quantitativa foi estabelecida e demonstrada a viabilidade de inserção desta matriz em forma farmacêutica sólida. / Infusions and decoctions prepared with aerial parts of Solidago chilensis are used in folk medicine to treat gastric disorders, intestinal ulcers, inflammatory conditions, rheumatism, and as a diuretic and analgesic agent. The anti-inflammatory and gastroprotective activities attributed to the aerial parts have been observed in pharmacological studies, thus supporting the popular use for this species. Studies have demonstrated the inhibition of the chronic and acute inflammatory responses by extracts obtained with different solvents, through in vitro and in vivo models and also by a clinical trial. The same occurs to the gastroprotective action, evidenced for aqueous extracts in vivo. This species, native to Brazil and widespread throughout our country, is inserted in the RENISUS, which is part of the National Politics of Integrative and Complementary Practices. However, there are no reports in the literature concerning the chemical profile and the obtention of standardized technological products and their active principle, which may be an important limitation to the production of a phytomedicine. Following this line, the current work aims to add knowledge to the utilization for the species and also adds scientific evidences to the possibility of Solidago chilensis to follow into a phytotherapic productive chain. The objectives of this work are the evaluation of quality control parameters and the establishment of chemical conditions which may enable the identification and characterization of this species, as well as its comparison with other species belonging to the same genus, that share a wide therapeutic use in Europe. Comparative analyses for these samples were made by TLC, HPLC and also by the flavonoid total content profile. The analyses of methanolic extracts made by TLC and HPLC evidenced interspecies chemical differences and the qualitative uniformity for Solidago chilensis, observed in different places and years of collection. The quantitative total flavonoid determination involved the optimization of acid hydrolysis conditions (HCl concentration and time of reaction) and the validation of an analytic method by HPLC. The total flavonoid content thus obtained was 154% higher than the observed by the colorimetric assay using aluminum chloride, at 425 nm. Analyses by HPLC-PDA and HPLC-MS-MS were also conducted and revealed the presence of rutin, quercetrin, 3,4-O-cafeoyl quinic and 4,5-O-dicafeoyl quinic acids. Moreover, the vegetal drug characterization involved also the content and composition of volatile oil present in leaves and inflorescences. These products showed a potent antifungal action towards emerging and multiresistant yeast strains, without cytotoxicity evidences. The obtention of the spray-dried ethanol: ether (1:1) extracts demonstrated to be viable, with high yield, and their chemical standardization was achieved using two techniques. By HPLC, the presence of the same compounds described for the vegetal drug was determined. The quantitative content of total flavonoids was 82.73 mg/g, expressed as quercetin. Solidagenone content was assessed by HPTLC-densitometry, and was determined to be 8.0 mg/g. The gastroprotective activities of solidagenone and the Solidago chilensis spray-dried extract (SDE) were assayed using the ethanol and indomethacin-induced ulcer models. The index of ulceration induced by ethanol was reduced in the presence of SDE at the doses of 50, 125 and 250 mg/kg (85 ± 15 %, 77 ± 3 %; 83 ± 9 %; 64 ± 16 %, respectively); 64 ± 16 %, 63 ± 23 % e 79 ± 12 % in the presence of indomethacin. Solidagenone presented at the dose of 30 mg/kg an index of gastroprotection close to the reference standards ranitidine and carbenoxolone (100 and 200 mg/kg, respectively). SDE, the intermediary product with gastroprotective action, was characterized as a fine powder with a low density and a low flowability, making necessary the development of dry granulation processes to achieve its incorporation into solid dosages. This way, 700 mg tablets were obtained and characterized using the parameters mechanical resistance and uniformity of content. The results obtained in this work represent the first contributions to establish methods and parameters to the characterization and for the quality control of the vegetal drug Solidago chilensis. The viability of production, chemical standardization, assessment of the biological activity for the SPE and the technological feasibility to obtain tablets contribute to the development of new pharmaceutical products from Solidago chilensis. Considering that this complex plant matrix, enriched in terpenic and flavonoid constituents, has its qualitative and quantitative characterization already established, and that its insertion into a solid dosage has a viability of production, this can be considered innovator.
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