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Avaliação in vitro e in vivo da atividade de frações e compostos isolados de Phyllanthus amarus contra o Schistosoma mansoni linhagem BH / In vitro and in vivo evaluation of the activity of fractions and coumpounds isolated from the ethanolic extract of Phyllanthus amarus against Schistosoma mansoni BH strain

Oliveira, Claudineide Nascimento Fernandes de, 1979- 10 September 2012 (has links)
Orientadores: Silmara Marques Allegretti, Vera Lúcia Garcia Rehder / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-23T02:12:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_ClaudineideNascimentoFernandesde_D.pdf: 6645819 bytes, checksum: c09a778f460110b77585bd22b8da5344 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A propagação da esquistossomose e a ameaça de tolerância e resistência ao fármaco de escolha, o praziquantel, têm intensificado as pesquisas utilizando plantas medicinais com o intuito de promover o desenvolvimento de novos fármacos esquistossomicidas. A planta Phyllanthus amarus (quebra-pedra) possui atividades antiinflamatória e hepatoprotetora já comprovadas cientificamente, o que fez com que a mesma fosse selecionada para este estudo, uma vez que a principal patologia da esquistossomose é a formação de granulomas (processo inflamatório) no fígado. Esse trabalho teve como objetivo fazer um fracionamento biomonitorado do extrato etanólico de P. amarus por meio de ensaios in vitro e in vivo com o intuito de verificar a ação esquistossomicida dessa planta contra o S. mansoni linhagem BH. Para a realização dos testes in vitro, os vermes adultos coletados foram incubados em placas contendo meio de cultura RPMI 1640, um casal de verme e amostras de extrato etanólico bruto, frações de diferentes polaridades ou lignanas isoladas nas concentrações 200, 100, 50 e 25 ?g/mL. Os vermes foram observados por um período de 72 horas, sendo avaliados a taxa de mortalidade, a oviposição, o acasalamento e as alterações tegumentares. A melhor atividade in vitro foi observada com a fração 2 butanólica, pois foi letal para 100% dos vermes em 48 h de observação, sendo assim selecionada para os testes in vivo. A fração 2 butanólica é composta majoritariamente por lignanas, por isso algumas delas (nirantina, filantina + nirantina e filantina + filtetralina + nirtetralina), mesmo não sendo efetivas nos testes in vitro, foram selecionadas para avaliação in vivo. Nos testes in vivo camundongos Balb/c foram tratados oralmente, 45 ou 60 dias após a infecção. No 45° dia de infecção os animais foram tratados com 100 e 200 mg/kg da fração 2 butanólica, 100 mg/kg das lignanas nirantina, filantina + nirantina e filantina + filtetralina + nirtetralina em dose única e 100 mg/kg da fração 2 butanólica distribuídos em 3 dias consecutivos. Já no 60° dia de infecção o tratamento foi feito em dose única com a fração 2 butanólica, nirantina, filantina + nirantina e filantina + filtetralina + nirtetralina (100mg/kg). A atividade in vivo foi avaliada com base nos seguintes parâmetros: ação sobre os vermes adultos, ovos eliminados nas fezes, oograma, formação das reações granulomatosas, e ação sobre o tegumento (feita por microscopia eletrônica de varredura - MEV). Os tratamentos mais efetivos no 45° dia de infecção foram apresentados pelos grupos tratados com filantina + nirantina e nirantina (100mg/kg). A lignana nirantina apresentou taxa de redução do número de ovos de 90,3% e a associação da filantina + nirantina, 63,8%. Os resultados referentes aos demais parâmetros (redução do total de vermes, de vermes fêmeas e do número de granulomas) foram semelhantes, apresentando taxas de redução em torno de 58%. Além dessas alterações, as imagens obtidas por MEV mostraram extensas lesões no tegumento dos vermes machos. No 60° dia de infecção, a associação de lignanas filantina + nirantina e a fração 2 butanólica (100mg/kg) apresentaram as taxas de redução mais significativas: 50,8% e 46,7% para o número total de vermes, 47,2% e 42,7% para o número de vermes fêmeas, 87,5% e 98,3% para o número de ovos e 44% e 18% para o número de granulomas, respectivamente. Assim sendo, de acordo com os parâmetros biológicos avaliados neste trabalho, a associação das lignanas filantina: nirantina na concentração de 100 mg/kg revelou um efeito esquistossomicida promissor, uma vez que foi efetiva nos dois períodos estudados / Abstract: The dissemination of schistosomiasis and the threat of its causing agents becoming resistant to the drug of choice, i.e., praziquantel, have intensified the research with medicinal plants to promote the development of new schistosomicidal drugs. Phyllanthus amarus (stone-breaker) is a plant whose anti-inflammatory and hepatoprotective activities have already been attested, which is the reason why it was chosen for this study, as the main pathology of schistosomiasis is the formation of granulomas (inflammatory process) in the liver. The aim of this work was to carry out a bioguided fractionation of the ethanol extract of P. amarus by means of in vitro and in vivo assays in order to verify the schistosomicidal potential of that plant against S. mansoni, BH strain. To carry out the in vitro assays, the collected adult worms were incubated in plates containing RPMI 1640 medium, a pair of mating worms, and samples of crude ethanol extract, fractions of different polarities or isolated lignans at the concentrations of 200, 100, 50 and 25 ?g/mL. The worms were observed over a period of 72 hours, in which mortality rate, egg laying, mating, and tegumentary changes were evaluated. The best in vitro activity was provided by butanol fraction 2, as it proved lethal for 100% of the worms over 48 hours of observation, and so it was used in the in vivo assays. Butanol fraction 2 is mainly composed of lignans, and some of them (nirantin, filantin: nirantin, and filantin + filtetralin + nirtetralin), albeit not effective in the in vitro assays, were selected for in vivo evaluation. In the in vivo assays, Balb/c mice were treated orally 45 or 60 days following infection. On the 45th day following infection, the animals were treated with 100 and 200 mg/kg of butanol fraction 2, 100 mg/kg of filantina:nirantin and filantin + filtetralin + nirtetralin in a single dose, and 100 mg/kg of butanol fraction 2 distributed over 3 consecutive days. On the 60th day following infection, the treatment was carried out in a single dose with 100 mg/kg of butanol fraction 2, nirantin, filantina:nirantin, and filantin + filtetralin + nirtetralin. The in vivo activity was evaluated based on the following parameters: action on adult worms, eggs eliminated in the stool, egg counting, granulomatous reactions, and action on the tegument of the worms (using scanning electron microscopy (SEM). The most effective treatments on the 45th day were those carried out with 100 mg/kg of filantina:nirantin, and nirantin. The association of filantina:nirantin provided a reduction of 63.8% in the number of eggs, whereas nirantin achieved a reduction rate of 90.3%. The results for the other parameters (reduction in the total number of worms, number of females, and number of granulomas) were similar with reduction rates around 58%. In addition to such changes, images obtained by SEM showed extensive lesions on the tegument of male worms. On the 60th day following infection, the filantin + nirantin association and butanol fraction 2 at 100 mg/kg achieved the most significant xxiii reduction rates: 50.8% and 46.7% in the total number of worms, respectively; 47.2% and 42.7% in the number of females, respectively; 87.5% and 98.3% in the number of eggs, respectively; and 44% and 18% in the number of granulomas, respectively. Therefore, according to the biological parameters evaluated in this work, the association of the lignans filantina:nirantin at 100 mg/kg has a promising schistosomicidal activity, as it was effective over two periods of treatment / Doutorado / Parasitologia / Doutora em Parasitologia
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Microclima do canal auditivo de cães e efeito do Rosmarinus officinalis L. e do Triticum vulgare no tratamento da otite externa experimental / Microenvironment of ear canal in dogs and effect of Rosmarinus officinalis L. and Triticum vulgare in the treatment of otitis externa experimental

Mueller, Eduardo Negri 16 November 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_eduardo_negri_mueller.pdf: 1762619 bytes, checksum: a9e8ea647471ee1e308c249dfa91f25d (MD5) Previous issue date: 2011-11-16 / The aim of this study was to evaluate the microenvironment of the ear canal of dogs and determine the effect of Rosmarinus officinalis L. (rosemary) and Triticum vulgare (wheat) in healthy ears and in the treatment of experimental noninfectious external otitis of Wistar rats. For analysis of the microenvironment of the ear canal 141 healthy dogs were used, 30 to evaluate the ear canal pH and 111 to measure the ear temperature. Dog ears with absent to mild, moderate or intense cerumen were studied, and the auditory canal was washed for pH measurements. The rectal temperature (TR) was measured with a mercury thermometer and the ear temperature with an infrared thermometer. The difference between TR and TAM (average ear temperature), was classified in the following scores: A=TAM<TR until 1.2°C and B=TAM<TR more than 1.2°C, and these results were related to ear type. For the evaluation of the effects of plant extracts in the experimental external otitis in Wistar rats an inoculation of 80μL of croton oil 5% in acetone was performed and in 24 hours the clinical score of the ears was evaluated. The animals were divided in 5 groups and the topic treatment was realized for up to seven days with rosemary aqueous extract 25% in propylene glycol (Group I), rosemary essential oil 25% (Group II), wheat aqueous extract 0.2% in propylene glycol (Group III), propylene glycol (Group IV) and NaCl 0.9% (Group V). At days four (4d), six (6d) and ten (10d), the ears of four animals were clinically evaluated and the animals were euthanized for hystopathological evaluation. For the evaluation of the effects of plant extracts on the healthy ear 48 Wistar rats were distributed in five groups according previously described and classified for clinical score. In the analysis of the microenvironment of the ear canal the pH values ranged from 5.0 to 8.0 and there was a negative correlation between cerumen quantity and pH (p=0.0271). The ear type did not affect the TAM and predominated ears score B regardless of the type. In the evaluation of the treatment for experimental otitis groups I, II and V had an increase in clinical score until the fourth day then decreased gradually. Groups III and IV had the scores lower tha day 0 for almost all experimental period. Group III showed a progressive decrease; group II showed the highest score at days four and six and the group V at day ten. There was hyperplasia in all groups at the end of the experiment, and in groups II and IV it was more frequent. All groups had otitis with predominantly histiocytic infiltrate at the beginning, although at 10 days with a suppurative infiltration in groups II, III and V. In healthy ears at four days, all groups showed an increase of clinical scores, which was higher in groups I (2.6), II (3.6) and III (2.4), but only the essential oil of rosemary 25% in propylene glycol was topically irritant. There was a progressive decrease of the scores in groups I, II and III starting at day four and at day 10 the highest score was observed in groups I (2.0) and II (2.0). It is concluded that the pH of the ear canal of dogs is neutral and can acidify with increased amount of cerumen; the average ear temperature is lower than the rectal temperature by 1.53°C±0.75 and the conformation of the ear does not influence the average ear temperature; aqueous extract of Rosmarinus officinalis L. 25% and aqueous extract of Triticum vulgare 0.2% reduced the clinical scores, while the essential oil of Rosmarinus officinalis L. 25% is not effective in noninfectious otitis externa in Wistar rats and the aqueous extract of Rosmarinus officinalis L. 25% and the aqueous extract of Triticum vulgare 0.2% are non-irritating topics, while the essential oil of Rosmarinus officinalis L. 25% irritates the auditory epithelium. / Objetivou-se avaliar o microclima do canal auditivo de cães e determinar o efeito do Rosmarinus officinalis L. (alecrim) e do Triticum vulgare (trigo) em orelhas hígidas e no tratamento da otite externa experimental não infecciosa de ratos Wistar. Para análise do microclima do canal auditivo foram considerados 141 cães hígidos, destes 30 utilizados para avaliação do pH do canal auditivo e 111 para aferição das temperaturas auditivas. Os cães foram distribuídos em dois grupos de acordo com a quantidade de cerúmem ausente a leve e moderado a intenso e o canal auditivo foi lavado para aferição do pH. A diferença entre a temperatura retal (TR), aferida com termômetro coluna de mercúrio e a temperatura auditiva média (TAM), aferida com termômetro infravermelho, foi avaliada para classificação em escores: A=TAM<TR em até 1,2ºC e B=TAM<TR em mais de 1,2ºC, relacionando-as com a conformação da orelha. Para avaliação do efeito dos extratos vegetais na otite externa, 64 ratos Wistar foram submetidos à inoculação no conduto auditivo de 80µL de óleo de cróton 5% em acetona e, em 24h as orelhas foram avaliadas por escore clínico. Os animais foram divididos em cinco grupos, sendo o tratamento tópico realizado por até sete dias com extrato aquoso de alecrim 25% em propilenoglicol (grupo I), óleo essencial de alecrim 25% em propilenoglicol (grupo II), extrato aquoso de trigo 0,2% em propilenoglicol (grupo III), propilenoglicol (grupo IV) e com NaCl 0,9% (grupo V). Aos quatro (4d), seis (6d) e dez dias (10d) as orelhas de quatro animais de cada grupo foram avaliadas clinicamente e, os mesmos foram eutanasiados para histopatologia. A avaliação do efeito dos extratos vegetais na orelha hígida foi realizada utilizando 48 ratos Wistar, os quais foram distribuídos em cinco grupos de acordo com o tratamento, conforme descrito acima e classificados em escore clínico. Na análise do microclima do canal auditivo observou-se que o pH variou de 5,0 a 8,0 e houve correlação negativa entre quantidade de cerúmen e pH (p=0,0271). Ainda, o tipo de orelha não influenciou a TAM e predominaram orelhas no escore B independente do tipo. Na avaliação do tratatmento da otite externa experimental os grupos I, II e V aumentaram os escores aos quatro dias, em seguida decresceram. Os grupos III e IV mantiveram os escores menores que o dia zero por quase todo o período experimental. O grupo III apresentou diminuição progressiva, o II apresentou o escore mais elevado aos quarto e seis dias e o grupo V aos 10 dias. Havia hiperplasia em todos os grupos e no final do experimento, nos grupos II e IV em maior freqüência. Todos os grupos tinham otite no início com predomínio de infiltrado histiocitário, embora aos 10 dias com infiltrado supurativo nos grupos II, III e V. Nas orelhas hígidas aos quatro dias, todos os grupos apresentaram aumento dos escores clínicos sendo maior nos grupos I(2,6), II(3,6) e III(2,4), porém somente o óleo essencial de alecrim 25% em propilenoglicol apresentou efeito irritante tópico. Houve uma diminuição progressiva dos escores nos grupos I, II e III a partir do dia quatro e no dia 10 o maior escore foi observado nos grupos I (2,0) e II (2,0). Concluise que o pH do canal auditivo de cães é neutro e pode acidificar com o aumeno da quantidade de cerúmen; a temperatura auditiva média é menor que a retal 1,53°C±0,75 e a conformação da orelha não influencia na temperatura auditiva média em cães; o extrato aquoso de Rosmarinus oficinalis L. 25% e o extrato aquoso de Triticum vulgare 0,2% reduzem os escores clínicos, enquanto o óleo essencial do Rosmarinus oficinalis L. 25% não é efetivo na otite externa não infecciosa em ratos Wistar e, o extrato aquoso de R. officinalis L. 25% e o extrato aquoso de T. vulgare 0,2% não são irritantes tópicos, enquanto que o óleo essencial de R. officinalis L. 25% irrita o epitélio auditivo.
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Monitoramento da secagem de milho em secador intermitente de coluna e cavalete / Monitoring corn drying in intemittent columns nand trestle dryers

Sulzbacher, Adair Luiz 27 December 2012 (has links)
Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2016-10-10T13:56:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) dissertacao_adair_luiz_sulzbacher.pdf: 2874156 bytes, checksum: be82ddc953675e2900d6439a9cf188a7 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-10-11T21:03:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_adair_luiz_sulzbacher.pdf: 2874156 bytes, checksum: be82ddc953675e2900d6439a9cf188a7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2016-10-11T21:05:13Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertacao_adair_luiz_sulzbacher.pdf: 2874156 bytes, checksum: be82ddc953675e2900d6439a9cf188a7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T21:05:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertacao_adair_luiz_sulzbacher.pdf: 2874156 bytes, checksum: be82ddc953675e2900d6439a9cf188a7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2012-12-27 / Sem bolsa / O processo de secagem de grãos e sementes é etapa fundamental no recebimento dos produtos agrícolas e sua correta aplicação permite menores perdas qualitativas durante os períodos de beneficiamento e armazenamento. Diante deste cenário, é importante que se domine e se planeje as operações de secagem, tirando o máximo proveito dos equipamentos sem prejudicar a qualidade do grão ou semente, escolhendo o equipamento e processo que melhor se adaptem a sua necessidade e realidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade dos grãos (trincas relacionadas a variação de temperatura) grãos de milho em dois secadores: intermitente de colunas e cavalete, variando a temperatura de secagem do ar durante a secagem. Durante o processo foram monitorados os parâmetros físicos (amostras, umidade, temperatura ar de secagem, temperatura da massa de grãos). Foi utilizado o sistema Sitrad para monitoramento da temperatura do ar de secagem, e foram coletadas amostras para analise. Observou-se que o aumento da temperatura na entrada do secador na câmara quente, não e proporcional na torre de secagem, ou seja, que à partir de uma determinada temperatura o adicional de temperatura é lançado para atmosfera pelos ventiladores. Com software de monitoramento de temperatura constatou-se que, durante a noite, tem-se muito picos de temperatura, ou seja, leva-se a temperatura ao máximo para demorar mais tempo para alimentação da fornalha e, assim não se mantem uma temperatura constante. Pode-se concluir que há uma tendência de menos trincas no secador de cavalete utilizando o resfriamento da massa de grãos. / The drying process of grains and seeds is a fundamental step for agricultural products and its correct application allows smaller qualitative losses during periods of processing and storage. Given this scenario, it is important to master the drying process, taking full advantage of equipment without harming the quality of the grain or seed, choosing the equipment and process that best suit the needs. The main objective of this study was to evaluate the grain quality (cracks related to temperature variation) of corn in two dryers: intermittent columns and trestle, varying the temperature of the drying air. During the process it was monitored physical parameters ( moisture, drying air temperature, temperature of the seed). Sitrad system was used to monitor the temperature of the drying air, and samples were collected for analysis. It was observed that increasing the inlet temperature of the dryer hot chamber is not proportional to the drying tower, that is, starting from a certain temperature the temperature is further released to the atmosphere by the fans. Temperature monitoring software showed that during the night, there is plenty peak temperatures,and so does not maintain a constant temperature . It can be concluded that there is a trend of fewer cracks using a seed mass cooling system.
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ATIVIDADE ANTIOXIDANTE DE EXTRATOS DE PRÓPOLIS COMERCIALIZADOS EM SANTA MARIA - RS E APLICAÇÃO EM LINGÜIÇA TOSCANA REFRIGERADA / ANTIOXIDANT ACTIVITY OF EXTRACTS OF PROPOLIS MARKETED IN SANTA MARIA RS AND YOUR APPLICATION IN CHILLED TUSCANY SAUSAGES

Alves, Elizângela 13 November 2009 (has links)
This study aimed to characterize commercial extracts of propolis and apply it in different concentrations in Tuscany sausage. The characterization of propolis in the first experiment was carried out by their compositions and phenolic flavonoids, by colorimetry techniques. The extracts were also characterized as the antioxidant activity through the techniques of metal chelating and sequestering DPPH free radical. After the extracts were compared, which showed the best result was used in the second experiment, the concentrations of 0.1%, 0.2%, 0.3% and 0.4% in the manufacture of sausages, which were analyzed under cold storage. The physicochemical properties of the sausages were made up of moisture, protein, ash, fat, pH and TBARS. The acceptability of these tests was determinated with sensory analysis within 1 week after production, propolis compared to green tea as the standard 0.03%. Were performed the same experiment, on days zero, 5, 10, 15, 20 and 27 days of storage, analysis of pH, TBARS and microbiological growth. The microbiological aspects evaluated were higher at day zero: the total count of mesophilic and / or psicotrophic, Salmonella, coliforms, sulfite reducer clostridia and Staphylococcus aureus, the other days of analysis was only the total count of mesophilic and / or psychrotrophic. The physicochemical parameters of the propolis extracts were all in accordance with the standards required by safety standards. With respect to sensory characteristics, the Tuscan sausages were accepted as the taste and appearance, and the use of propolis have decreased lipid oxidation and microbial growth, promoting quality during the days of storage. / Este trabalho teve como objetivo caracterizar extratos de própolis comerciais e aplicá-lo em diferentes concentrações em lingüiça Toscana. A caracterização da própolis no primeiro experimento realizou-se pelas suas composições de fenólicos e flavonóides totais, por técnicas colorimétricas. Os extratos também foram caracterizados quanto a atividade antioxidante através das técnicas quelante de metal e sequestrante de radicais livre DPPH. Após os extratos serem comparados, o que obteve melhor resultado foi utilizado, no segundo experimento, nas concentrações de 0,1%, 0,2%, 0,3% e 0,4% na fabricação de lingüiças que foram analisadas sob armazenamento refrigerado. As análises físico-químicas das lingüiças foram compostas por umidade, proteínas, cinzas, gordura, pH e TBARS. Os testes de aceitabilidade das lingüiças foram determinados através da análise sensorial na 1ª semana após a produção, compararam a própolis ao chá-verde como padrão a 0,03%. Foram realizados no mesmo experimento, nos dias zero, 5º, 10º, 15º, 20º e 27º dias de armazenamento, análises de pH, TBARS e crescimento microbiológico. Os aspectos microbiológicos avaliados foram maiores no dia zero: contagem total de mesofílicos e/ou psicotróficos, Salmonella, Coliformes, Clostrídio sulfito redutores e Staphylococcus aureus; nos demais dias de análises apenas ocorreu a contagem total de mesofílicos e/ou psicrotróficos. Os parâmetros físicoquímicos dos extratos de própolis estavam todos de acordo com os padrões exigidos nas normas de segurança. Com relação às características sensoriais, as lingüiças Toscanas foram aceitas quanto ao gosto e aparência e o uso da própolis diminuiu a oxidação lipídica e o crescimento de microrganismos, promovendo a qualidade durante os dias de armazenamento.
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Utilização da borra de soja na terminação de novilhos em confinamento / Use of soybean soapstock on feedlot finishing of steers

Callegaro, álisson Marian 28 February 2011 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of the present study was to evaluate the viability of the use of soybean soapstock on feedlot finishing of steers. Thirty castrated males, with initial average age and live weight of 20 months and 328.3 kg, , respectively, from Laboratório de Bovinocultura de Corte, were used. The steers were confined per a period of 84 days, until reach appropriate finishing degreed. Each treatment was composed by six animals, Charolais Nellore crossbred. During the experimental period, the animals received a diet containing roughage:concentrate relation of 40:60 (dry matter basis). The roughage used was the corn silage and the concentrate from hull, bran and soapstock of soybean, sodium chloride and limestone. The steers were distributed into treatments: .0; 3; 6; 9 and 12% of soybean soapstock in diet, which contained 2.9; 4.05; 5.26; 6.52 and 7.8% of ether extract, respectively. Dry matter, crude protein and digestible energy intakes, when expressed in kg/day, in % of live weight and in unit of metabolic weight, were similar between treatments (P>.05). However, the intakes of ether extract, neutral and acid detergent fiber decreased (P<.05) with the inclusion of soybean soapstock in diet (CEE = .303+.035BS; CFDN = 5.71-.11BS; CFDA = 3.89=.08BS in kg/day, respectively), ether extract efficiency, neutral detergent fiber and acid presented a decreased linear behavior (P>.05). The performance of steers was similar between treatments, with daily weight gain of 1,542 kg, slaughter weight 457.95 kg and feed conversion of 6.35 kg MS/kg PV. In relation to ingestive behavior, the increase of soybean soapstock in diet didn t change (P>.05) time spent with feeding, rumination and idle, with values of 3.11; 5.55 and 13.33 hours, respectively. The inclusion of soybean soapstock didn t alter (P>.05) number of bolus chewed per day, time of chew per bolus and number of chews per bolus ruminated. The animals that consumed higher level of soybean soapstock were less efficient in rumination of neutral detergent fiber (ERFDN = 859.11-22.69BS). The use of soybean soapstock until the limit of 7.8% of ether extract in diet of feedlot steers is practicable, due to not change ingestive behavior and animal response. / O objetivo do presente estudo foi avaliar a viabilidade da borra de soja na terminação de bovinos confinados. No experimento foram utilizados 30 machos castrados com idade e peso vivo médio inicial de 20 meses e 328,3 kg, respectivamente, oriundos do Laboratório de Bovinocultura de Corte. Os bovinos permaneceram em confinamento por um período de 84 dias, até atingir acabamento adequado, sendo que cada tratamento foi composto por seis animais experimentais, cruzas Charolês - Nelore. Durante o experimento os animais receberam dieta com relação volumoso: concentrado de 40:60 (base na matéria seca), sendo utilizado como volumoso a silagem de milho e concentrado a base de casca de soja, farelo de soja, borra de soja, cloreto de sódio e calcário calcítico. Os novilhos foram distribuídos nos seguintes tratamentos: 0,0; 3,0; 6,0; 9,0 e 12,0% de borra de soja na dieta, os quais continham 2,90; 4,05; 5,26; 6,52 e 7,80% de extrato etéreo na dieta, respectivamente. Os consumos de matéria seca, proteína bruta e energia digestível, expressos em kg/dia, em % do peso vivo e por unidade de tamanho metabólico não diferiram (P>0,05) entre os tratamentos. Entretanto, o consumo de extrato etéreo, de fibras detergente neutro e ácido decresceram (P<0,05) com o aumento da inclusão de borra de soja na dieta (CEE = 0,303+0,035BS; CFDN = 5,71 0,11BS; CFDA = 3,89 0,08BS em kg/dia, respectivamente), a eficiência de extrato etéreo, de fibra detergente neutro e ácido apresentaram comportamento linear decrescente (P<0,05). O desempenho dos novilhos foi semelhante (P>0,05) entre os tratamentos, com ganho médio diário de 1,542 kg, peso de abate 457,95 kg e conversão alimentar de 6,35 kg MS/kg PV. Em relação ao comportamento ingestivo o aumento no nível de inclusão de borra de soja na dieta, não influenciou (P>0,05) o tempo despendido com alimentação, ruminação e ócio, com valores de 3,11; 5,55 e 13,33 h, respectivamente. A inclusão de borra de soja não influenciou (P>0,05) no número de bolos mastigados por dia, tempo de mastigação por bolo e no número de mastigadas por bolo ruminado. Os animas que consumiram maior quantidade de borra foram menos eficientes na ruminação da fibra em detergente neutro (ERFDN = 859,11 22,69BS). O uso da borra de soja até o limite de 7,8% de extrato etéreo na dieta de bovinos confinados é viável, em função de não alterar o comportamento ingestivo e a resposta animal.
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Efeitos biológicos do óleo essencial e do extrato hidro alcóolico das folhas de Psidium guajava var. pomifera L. / Biologic effects of essential oil and hidroalcoolic estract of Psidium guajava var pomifera L.

Pinho, Antonio Ivanildo 17 December 2015 (has links)
The Myrtaceae family has 145 genera. In Brazil are recorded 23 genera and about 1,013 species. Several plants of this family are used in food stuffs, for example, Psidium guajava L. fruits, commonly known as guava. In folk medicine Psidium guajava L. leaves are used for colic, colitis, diarrhea, dysentery, and stomach illness. The objective of this study was to evaluate the biological effects of essential oil (OEPGP) and hydro alcoholic extract (HEPG) of Psidium guajava var. pomifera L. To evaluate the OEPGP bioinseticide effect Drosophila melanogaster were used. The flies exposure to OEPGP was performed by a fumigation protocol: Adult flies (males and females) were placed in glass vials containing a filter paper soaked in 1% sucrose. Then, a filter paper was set on the inner side of the cover containing the OEPGP (0, 3, 7.5, 15, 23.5 and 30 μg/ml). The flies mortality was assessed 6, 12, 24 and 48 h. In turn, to assess antioxidant and chelating action against inorganic mercury, DPPH, TBARS, and 1,5 diphenylcarbazone assays were carried out using 0, 0.1, 0.2, and 0.4 mM HgCl2 and 0, 25, 33, 50, 100 and 200 μg/ml of EHAPGP. Cell growth was assessed using Sacharomices cerevisiae, which were exposed to concentrations of 100, 125 and 150 mM of HgCl2 and 0, 0.25, 0.5, 1, 1.25, 2.5, and 5 μg/ml of HEPG. Our results showed that OEPGP has a bioinseticide action when flies were exposed to concentrations of 23.5 and 30 μg/ml. Locomotor activity was impaired at concentrations of 15, 23.5, and 30 μg/ml during the first 6 hours of treatment. The OEPGP caused an increase in TBARS levels and in antioxidant enzymes activities. In turn, the HEPG has high concentrations of phenols and flavonoids and showed antioxidant activity, as demonstrated in the DPPH and TBARS assays. The chelating action of HEPG was proven by the test of 1.5 difenilcarbazone and the dosages of Hg levels by ICP-AES. The HEPG partially prevented the cell death caused by HgCl2. Our study indicated that HEPG has antioxidant and HgCl2 protection purposes, while the essential oil presents a bioinseticide action to trigger a pro-oxidant action. / A família Myrtaceae possui 145 gêneros. No Brasil são registrados 23 gêneros e cerca de 1.013 espécies. Muitas plantas desta família são utilizadas na alimentação, como os frutos da Psidium guajava L., popularmente conhecidos como goiaba. As folhas da goiabeira são utilizadas na medicina popular para cólicas, colite, diarréia, disenteria e dor de barriga. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos biológicos do óleo essencial (OEPGP) e do extrato hidro alcóolico (HEPG) das folhas de Psidium guajava var. pomifera L. Para avaliar a ação bioinseticida do OEPGP foram utilizadas Drosophila melanogaster. A exposição das moscas ao OEPGP foi realizada por um protocolo de fumigação: moscas adultas (machos e fêmeas) foram colocadas em frascos de vidro, contendo um papel filtro embebido em 1% de sacarose. Um papel filtro foi fixado no lado interior da tampa para aplicação de diferentes doses de óleo essencial (0, 3, 7,5, 15, 23,5 e 30 μg/mL). A mortalidade das moscas foi avaliada 6, 12, 24 e 48 h. Por sua vez, para avaliar a ação antioxidante e quelante contra o mercúrio foram elaborados ensaios de DPPH, TBARS e 1,5-difenilcarbazona, nas concentrações de 0, 0,1, 0,2 e 0,4 mM de HgCl2 e concentrações de 0, 25, 33, 50, 100 e 200 μg/mL do HEPG. O crescimento celular foi avaliado utilizando Sacharomices cerevisae, os quais foram expostos a concentrações de 100, 125 e 150 μM de HgCl2 e 0, 0,25, 0,5, 1, 1,25, 2,25 e 5 μg/mL de HEPG. Os resultados mostram que o OEPGP apresenta uma ação bioinseticida quando as moscas foram expostas às concentrações de 23,5 e 30 μg/mL. A atividade locomotora foi comprometida nas concentrações de 15, 23,5, e 30 μg/mL nas primeiras 6 h de tratamento. O OEPGP causou aumento nos níveis de TBARS e na atividade das enzimas antioxidantes GST e CAT. Por sua vez, o HEPG apresenta elevadas concentrações de fenóis e flavonoides e apresentou atividade antioxidante, comprovada nos ensaios de TBARS e DPPH. A ação quelante do HEPG foi comprovada pelo ensaio da 1,5-difenilcarbazona e pelas dosagens dos níveis de Hg por ICP-AES. O HEPG evitou parcialmente a morte celular causada por HgCl2. Nosso estudo indicou que HEPG tem efeitos antioxidantes e de proteção contra o estresse oxidativo causado pelo HgCl2, enquanto que o óleo essencial apresenta uma ação bioinseticida por desencadear uma ação pró-oxidante.
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Avaliação dos produtos naturais na diminuição da replicação viral dos BoHV-1 colorados em embriões murinos infectados experimentalmente. / Evaluation of natural products in the reduction of viral replication of BoHV-1 Colorado in murine embryos experimentally infected.

Eduardo Gimenes Palazzi 31 March 2015 (has links)
As biotécnicas da reprodução animal, amplamente difundidas no Brasil, tem possibilitado maior controle em relação à transmissão de agentes patogênicos, porém, a transmissão de doenças continua a ser uma preocupação justificável para a busca de melhores meios de controle. O objetivo do trabalho foi o de avaliar a diminuição da replicação viral (BoHV-1 Colorado) em embriões murinos após tratamentos com Produtos Naturais (PN). Trabalhamos com 3 grupos de PN, totalizando 18 tratamentos: Oléos Essenciais (OE) de Chamomilla recutita, Allium sativum, Zingiber officinale, Syzygium aromaticum, Illicium verum Hook f., Punica granatum e Melissa officinalis; Extratos Etanólicos (EE) das mesmas plantas anteriores com acréscimo de Pterodon emarginatus (casca e semente) e Extrato Aquoso (EA) de Própolis e Agaricus blazei. Inicialmente encontramos concentrações não tóxicas em células MDBK (Madin Darby Bovine Kidney) relacionada a cada PN (ampla sintonia) para posteriormente verificarmos as concentrações não tóxicas para os zigotos/embriões murinos (sintonia fina). Após encontrarmos as concentrações não tóxicas, os zigotos foram divididos em quatro grupos: G1 (Controle), G2 (expostos aos vírus BoHV-1 Colorado à 108 TCID50/mL), G3 (expostos aos PN) e G4 (expostos aos vírus e PN). Os grupos foram mantidos a 37,5 ºC em meio TCM199 (100 &mu;L) com 10% de soro fetal bovino em estufa a 5% de CO2 e 95% de umidade. Após 24h, analisamos a taxa de clivagem (Teste Exato de Fisher_p&lt;0,05), a morfologia (por microscopia óptica), a n-PCR e a titulação dos embriões em co-cultura com células MDBK após mais 72h do tratamento com os PN (Teste de Mann Whitney_ p&lt;0,05). Dentre as 18 análises, os embriões murinos tratados com EA de Própolis, EE de Punica granatum e de Pteron emarginatus (Casca) apresentaram resultados satisfatórios: sem alterações morfológicas, taxa de clivagem semelhante aos controles e apesar da constatação da partícula viral junto aos embriões pela n-PCR, houve diminuição da concentração viral após tratamentos com estes extratos, o que sugere interferência destes tratamentos no ciclo viral do BoHV-1 Colorado. / The biotech Animal reproduction widespread in Brazil, has allowed greater control over the transmission of pathogens, however, the disease transmission remains a justifiable concern for the pursuit of the best means of control. The aim of this study was to evaluate the reduction of viral replicarion (Colorado BoHV-1) in murine embryos after treatments with natural products (NP). We work with groups \'3 \'PN, totaling 18 treatments: essential oils (EO) of Chamomilla recutita, Allium sativum, Zingiber officinale, Syzygium aromaticum, Illicium verum Hook f., Melissa officinalis and Punica granatum; ethanol extracts (EE) of the same plants prior to adding Pterodon emarginatus (skin and seed) and Aqueous Extract (EA) Propolis and Agaricus blazei. Initially we find non-toxic concentrations in MDBK (Madin Darby Bovine Kidney) related to each PN (broad line) then we check for the non-toxic concentrations for zygotes / embryos murine (fine tuning). After finding the non-toxic concentrations, zygotes were divided into four groups: G1 (control), G2 (exposed to viruses BoHV-1 at 108 Colorado TCID50/mL), G3 (exposed to PN) and G4 (exposed to viruses and PN .) The groups were maintained at 37.5 °C in TCM199 (100 mL) with 10% fetal bovine serum in an incubator at 5% CO2 and 95% humidity. After 24h, we analyzed the cleavage rate (Exact Test Fisher_p &lt;0.05), morphology (light microscopy), the n-PCR and titration of embryos in co-culture with MDBK cells after 72 h of treatment with more NPs (Mann Whitney_ p &lt;0.05). Among the 18 analyzes, murine embryos treated with EA Propolis, EE Punica granatum and Pteron emarginatus (bark) showed satisfactory results: no morphological changes, cleavage rate similar to controls, and despite the finding of the viral particle with the embryos by n-PCR, decreased the viral concentration after treatment with these extracts, suggesting interference of these treatments in the viral cycle of BoHV-1 Colorado.
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Triagem fitoquímica e avaliação da sensibilidade antimicrobiana e da genotoxicidade de Sedum praealtum DC. (Bálsamo) / Phytochemical screening and evaluation of antimicrobial susceptibility and genotoxicity of Sedum praealtum DC (Balsam)

Marques, Milene Bueno 25 February 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-05-02T13:55:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Milene Bueno Marques-Dissertacao.pdf: 825475 bytes, checksum: cd33a50c8ba95cbc3e9504abcf1d976c (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / Sedum praealtum DC. (Crassulaceae) is one of 350 species pharmacologically active from the genus Sedum, whose actions in treatment of eyes (pain and swelling) and ulcer, inflammatory problems, as contraception and anti-fertilization, antinociceptive and anti-inflammatory have been reported. The objective was to evaluate the hydroethanolic extract of S. praealtum regarding their potential antimicrobial in vitro (some bacteria, yeasts and micobactéria strains), cytotoxic in vitro and genotoxic in vivo. A fast phytochemical screening of this extract was also performed. The antimicrobial activities were carried out by microdilution in broth and agar diffusion methods (CLSI). The genotoxic effects and systemic toxic and cytotoxicity were evaluated by micronucleus assay in mice bone marrow and cell cultures of Aedes albopictus, respectively. The selectivity index was also established (SI = CI50/MIC). Dosages of flavonoids and phenolic compounds were done by colorimetric and precipitation techniques. A high amount of phenolic compounds were identified in S. praealtum root. The S. praealtum leaves showed broad spectrum of action and variables MICs: Gram-negative bacteria (E. aerogenes, E. coli, P. aeruginosa, P. mirabilis, S. marcescens and S. typhimurium), gram-positive (B. cereus, B. subtilis, E. faecalis, M. luteus and S. aureus) and yeast (S. cerevisiae). The stem and root were restricted to gram-positive bacteria and S. cerevisiae, other than E. coli (stem) and P. mirabilis (root) microbicidal action microorganism- and anatomical part-dependent (leaf, stem or root). S. praealtum showed no inhibition against C. albicans, M. tuberculosis and M. bovis. The root showed acceptable SI (SI &#61502; 1) for P. mirabilis; B. subtilis; B. cereus; M. luteus; E. faecalis; S. aureus and S. cerevisiae, whereas the sheet only for S. cerevisiae. The hydroalcoholic extract of S. praealtum leaves revealed no genotoxic effects (no clastogeny and/or aneugeny) and toxicity in bone marrow of mice, dose (0.5-2 g.Kg-1) and time-independent (24-48 hours), but sex-dependent (male and female). This was the first scientific study of this nature involving S. praealtum and partially the results provide a theoretical basis for comprehensive development and utilization of plant resources. However, advanced phytochemical characterization together with the various pharmacological and pharmacogenomic studies should be conducted in order to characterize their effects and, importantly, for the establishment of limits for human consumption, the delineation of potential risks to human health, and for rational strategies for implementing chemo-preventive measures. / Sedum praealtum DC. (Crassulaceae) é uma das 350 espécies farmacologicamente ativas do gênero Sedum, cujas ações no tratamento dos olhos (dores e inchaços) e úlcera, de problemas inflamatórios, como contraceptivo e antifertilização, antinociceptiva e anti-inflamatória foram relatadas. O objetivo foi avaliar o extrato hidroetanólico de S. praealtum quanto aos seus prováveis potenciais antimicrobiano in vitro de algumas cepas de bactérias, de leveduras e de micobactérias, citotóxico in vitro e genotóxico in vivo. Uma rápida triagem fitoquímica desse extrato também foi realizada. As atividades antimicrobianas foram realizadas empregando-se os métodos de microdiluição em caldo e em difusão em agar (CLSI). Os efeitos genotóxicos e tóxicos sistêmicos e a citotoxicidade foram avaliados pelo ensaio do micronúcleo na medula óssea de camundongos e pelas culturas celulares de Aedes albopictus, respectivamente. O índice de seletividade também foi estabelecido (IS = CI50/CIM). Dosagens de flavonoides e compostos fenólicos foram feitas usando técnicas colorimétricas e de precipitação. Uma elevada quantia de compostos fenólicos foi identificada na raiz de S. praealtum. As folhas de S. praealtum mostraram ação de amplo espectro e CIM variáveis: bactérias gram-negativas (E. aerogenes, E. coli, P. aeruginosa, P. mirabilis, S. marcescens e S. typhimurium), gram-positivas (B. cereus, B. subtilis, E. faecalis, M. luteus e S. aureus) e levedura (S. cerevisiae). O caule e a raiz foram restritos às bactérias gram-positivas e S. cerevisiae, exceto E. coli (caule) e P. mirabilis (raiz) ação microbicida micro-organismo-dependente e parte anatômica-dependente (folha, caule ou raiz). S. praealtum não apresentou ação contra C. albicans, M. tuberculosis e M. bovis. A raiz mostrou IS aceitável (IS &#61502; 1) para P. mirabilis; B. subtilis; B. cereus; M. luteus; E. faecalis; S. aureus e S. cerevisae, enquanto que a folha apenas para S. cerevisae. O extrato hidroalcoólico das folhas de S. praealtum revelou efeitos não genotóxicos (ausência de clastogenia e/ou aneugênia) e efeitos tóxicos na medula óssea de camundongos, dose- (0,5-2 g.Kg-1) e tempo-independente (24-48h), porém sexo-dependente (macho e fêmea). Este foi o primeiro estudo científico dessa natureza envolvendo S. praealtum e, parcialmente, os resultados fornecem uma base para a utilização e para o desenvolvimento compreensivo de recursos vegetais. Todavia, a caracterização fitoquímica avançada aliada aos diversos estudos farmacológicos e farmacogenômicos deveriam ser conduzidos a fim de caracterizar os seus efeitos e, mais importante, estabelecer limites para o consumo popular, delinear os riscos potenciais à saúde humana, e implementar estratégias racionais e medidas quimio-preventivas.
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Inibição do sistema quorum sensing AI-1 por Capsicum frutescens e Capsicum annuum em bactérias Gram-negativas / Inhibition of AI-1 quorum-sensing system by Capsicum frutescens and Capsicum annuum in Gram-negative bacteria

Milagros Liseth Castillo Rivera 22 March 2018 (has links)
A inibição do quorum sensing (QS) altera a comunicação bacteriana, reduzindo a expressão de fatores de virulência e a formação de biofilmes, o que pode conferir menor pressão seletiva em comparação aos antibióticos tradicionais. As frutas e hortaliças constituem uma fonte rica em compostos com propriedades potenciais de inibição do QS. Entretanto, há pouca referência sobre o potencial de pimentas do gênero Capsicum e de seus compostos isolados como inibidores do QS. Esse trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de extratos orgânicos obtidos das variedades de pimenta-malagueta e pimentão vermelho sobre o sistema QS dependente do sinalizador AI-1 (acil homoserina lactona - AHL) em bactérias Gram-negativas. Os extratos foram obtidos por extração em fase sólida e separados em uma fração metanólica e outra amônica; sendo os compostos característicos identificados e quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A atividade antimicrobiana dos extratos foi avaliada pela determinação da concentração inibitória mínima (MIC) e pela curva de crescimento de Chromobacterium violaceum ATCC 12472, Serratia liquefaciens MG1 e Pseudomonas aeruginosa PAO1. O efeito anti-QS dos extratos foi avaliado pelos testes de difusão em ágar e quantificação da produção de violaceína em meio líquido por C. violaceum e sobre a formação de biofilme, avaliado pelo ensaio de cristal violeta e microscopia confocal, em S. liquefaciens e P. aeruginosa nas temperaturas 30 ºC e 37 ºC. Os resultados obtidos pela CLAE indicaram que o extrato metanólico de pimenta-malagueta (EMPM) continha capsaicinoides como a capsaicina e dihidrocapsaicina, luteolina e outros compostos não identificados; já o extrato amônico desta não continha os compostos capsaicinoides. Ambos os extratos de pimentão vermelho continham luteolina e compostos não identificados, mas não apresentaram capsaicinoides. Como o EMPM era representativo dos demais extratos, por conter tanto capsaicinóides quanto luteolina, o foco deste trabalho foi avaliar os efeitos do EMPM sobre fenótipos microbianos nas concentrações 5; 2,5; 1,25 e 0,625 mg/ml, além de utilizar a capsaicina como controle comparativo em concentrações equivalentes às do extrato (25, 50 e 100 &#181;g/ml). Os resultados da atividade antimicrobiana mostraram inibição parcial do crescimento das bactérias nas concentrações sub-MIC (MIC >5 mg/ml) de 5 e 2,5 mg/ml de EMPM. A capsaicina também inibiu parcialmente o crescimento das bactérias a 100 &#181;g/ml, com exceção de S. liquefaciens a 37 ºC, cujo crescimento foi induzido em 50 e 25 &#181;g/ml. A produção de violaceína foi reduzida pelo EMPM a 1,25 e 0,625 mg/ml, sem afetar o crescimento de C. violaceum. Ensaios com C. violaceum CV026, estirpe biosensora capaz de produzir o pigmento na presença de AI-1 exógeno, sugerem que o possível mecanismo de atuação do extrato sobre o sistema QS em C. violaceum 12472 é sobre a síntese do sinalizador, já que não foi observada inibição da produção de violaceína em CV026 pelo extrato. Contrariamente, a capsaicina incrementou a produção do pigmento na estirpe 12472, mas ensaios com a estirpe CV026 indicaram que a capsaicina não atua como sinalizador do QS, uma vez que esta não induziu a produção de violaceína nesta estirpe. Já a formação de biofilme foi incrementada na presença do EMPM, sendo consideravelmente maior em P. aeruginosa a 30 ºC. Igualmente, observou-se indução da formação de biofilme por capsaicina em S. liquefaciens (37 ºC) e P. aeruginosa (30 ºC). Porém, a capsaicina não teve efeito sobre a formação de biofilme de S. liquefaciens quando cultivada a 30 ºC, nem P. aeruginosa a 37 ºC. Os resultados revelam que a produção de violaceína em C. violaceum ATCC 12472 é inibida pelo EMPM, mas não pela capsaicina. Já, o EMPM e a capsaicina, de forma geral, não inibem a formação de biofilme de S. liquefaciens MG1 nem P. aeruginosa PAO1. Outros estudos são necessários para elucidar os mecanismos pelos quais o EMPM e a capsaicina agem sobre os fenótipos avaliados neste trabalho. / Quorum sensing inhibition alters bacterial communication by reducing virulence factors expression and biofilm formation, exerting less selective pressure compared to antibiotics. Fruits and vegetables are rich sources of compounds with potential QS-inhibition properties. However, there are few references about the potential of peppers belonging to the genus Capsicum and its isolated compounds as QS inhibitors. This study aimed to assess the effect of organic extracts obtained from Capsicum varieties, pimenta-malagueta (red chili) and pimentão vermelho (red bell pepper), on the AI-1 dependent QS system. The extracts were obtained by solid phase extraction and split into a methanolic and an ammonic fraction. Characteristic compounds were identified and quantified by high performance liquid chromatography (HPLC). The antimicrobial activity of the extracts was assessed by determining the minimal inhibitory concentration (MIC) and the growth curve of Chromobacterium violaceum ATCC 12472, Serratia liquefaciens MG1 and Pseudomonas aeruginosa PAO1. The anti-QS effect of the extracts was evaluated by the agar diffusion assay and the quantification of violacein production was assessed in liquid medium by C. violaceum, as well as in the biofilm formation test determined by the crystal violet assay and confocal microscopy with S. liquefaciens and P. aeruginosa at 30 ºC and 37 ºC. HPLC results showed that the methanolic extract of pimenta-malagueta (EMPM) contained capsaicinoids such as capsaicin and dihidrocapsaicin, luteolin and other unidentified compounds in lower concentrations; while its ammonic extract did not have capsaicinoids. Both pimentão vermelho extracts contained luteolin and other unidentified compounds in low concentrations, but they did not contain capsaicinoids. As EMPM was representative among the extracts because it contained capsaicinoids and luteolin, the focus of this work was to assess the effect of EMPM over microbial phenotypes at concentrations of 5, 2.5, 1.25 and 0.625 mg/ml, using capsaicin as a comparative control at equivalent concentrations to those in EMPM (25, 50 and 100 &#181;g/ml). Antimicrobial activity assays showed a partial inhibition growth of bacteria at sub-MIC concentrations (MIC >5 mg/ml) of EMPM at 5 and 2.5 mg/ml. Similarly, capsaicin partially inhibited bacterial growth at 100 &#181;g/ml, except for S. liquefaciens at 37 ºC in which growth was induced at 50 and 25 &#181;g/ml. Violacein production was reduced by EMPM at 1,25 and 0,625 mg/ml without affecting C. violaceum growth. Assays with C. violaceum CV026, a biosensor strain that produces violacein in the presence of exogenous AI-1, suggest that EMPM reduced violacein production in C. violaceum 12472 by interfering with the AI-1 synthesis. In contrast, capsaicin incremented violacein synthesis in strain 12472, but experiments with strain CV026 revealed that capsaicin does not function as an analog of AI-1. Biofilm formation was increased in EMPM presence, being remarkably superior in P. aeruginosa cultivated at 30 ºC, as opposed to cultivation at 37 ºC. Similarly, capsaicin induced biofilm formation in S. liquefaciens (37 ºC) and P. aeruginosa (30 ºC). However, capsaicin did not affect biofilm formation on S. liquefaciens cultured at 30 ºC, neither on P. aeruginosa at 37 ºC. These results show that violacein production in C. violaceum ATCC 12472 is inhibited by EMPM, but not by capsaicin. In general, EMPM and capsaicin did not inhibit biofilm formation in S. liquefaciens MG1 neither in P. aeruginosa PAO1. More studies are necessary to elucidate the mechanisms by which EMPM and capsaicin affect the studied phenotypes in this work.
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Utilização de agentes antimicrobianos, probióticos, prebióticos e extratos vegetais como promotores do crescimento de leitões recém-desmamados / Antimicrobial agents, probiotics, prebiotics and herbal extracts as growth promoters of weanling pigs

Carlos Eduardo Utiyama 09 November 2004 (has links)
O objetivo do trabalho foi estudar os efeitos de probióticos, prebióticos e extratos vegetais como alternativas ao uso de agentes antimicrobianos como promotores do crescimento de leitões recém-desmamados, por meio da morfologia de órgãos, frequência de diarréia, microbiologia intestinal, histologia de epitélio intestinal, digestibilidade dos nutrientes e desempenho. Foram realizados dois experimentos em blocos casualizados, nos quais foram testados cinco tratamentos: controle - ração basal; antimicrobiano - basal com 50 ppm de bacitracina de zinco + 50 ppm de olaquindox; probiótico - basal com 1300 ppm de probiótico à base de Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis; prebiótico - basal com 3000 ppm de mananoligossacarídeo; extrato vegetal – basal com 500 ppm de extrato vegetal (alho, cravo, canela, pimenta, tomilho, cinamaldeído e eugenol). No Experimento I utilizaram-se 40 leitões desmamados aos 21 dias de idade, distribuídos a 20 gaiolas suspensas com dois leitões (um macho castrado e uma fêmea) em cada gaiola (unidade experimental) e quatro repetições por tratamento. Durante a última semana do período experimental foi realizado o ensaio de digestibilidade dos nutrientes, por meio da metodologia da coleta parcial de fezes, tendo o óxido crômico (Cr2O3) como marcador. Ao 35º dia, um animal de cada unidade experimental foi abatido para a coleta de dados referentes à morfometria de órgãos, de amostras do epitélio intestinal para análise histológica e de amostras do conteúdo do jejuno/íleo para análise microbiológica. No Experimento II, foram utilizados 120 leitões desmamados aos 21 dias de idade, alocados em 60 baias com dois animais (um macho castrado e uma fêmea) por baia (unidade experimental), perfazendo 12 repetições por tratamento. As variáveis de consumo diário de ração, ganho diário de peso e conversão alimentar foram coletadas e analisadas nos períodos de 1-14, 15-35 e 1-35 dias de experimentação. Também foi avaliada a frequência de diarréia. Apesar da diferença não ser significativa (P>0,05), em valores numéricos, os agentes antimicrobianos melhoraram o ganho diário de peso nos períodos de 15-35 (+22%) e 1-35 (+21,4%) dias de experimentação. Também melhoraram (P<0,05) a digestibilidade aparente de nutrientes (P<0,05) em relação ao tratamento controle. O prebiótico mananoligossacarídeo foi a melhor alternativa aos antimicrobianos, proporcionando um ganho diário de peso, numericamente (P>0,05), 25,7% superior ao tratamento controle e equivalente ao tratamento antimicrobiano, nos primeiros 14 dias de experimentação. Entretanto, o prebiótico mananoligossacarídeo não melhorou a conversão alimentar (P>0,10). Nos períodos de 15-35 dias e no período total, o desempenho dos animais do tratamento prebiótico foi intermediário entre o tratamento controle e antimicrobiano. O probiótico não melhorou o desempenho (P>0,10) e não proporcionou nenhuma alteração nas outras variáveis estudadas. Os extratos vegetais aumentaram o peso relativo do pâncreas (P<0,05) e melhoraram a digestibilidade aparente da matéria seca da dieta (P<0,05). No entanto, os extratos vegetais não melhoraram (P>0,10) o desempenho dos leitões. / The purpose of this work was to evaluate the probiotics, prebiotics and herbal extracts as alternatives to antimicrobial agents as growth promoters of weanling pigs, based on the morphometry of organs, fecal score, intestinal microbiology, intestinal histology, nutrient digestibility and performance. Two randomized complete block design experiments were carried out to compare five treatments: control - basal diet; antimicrobial - basal diet plus Zn bacitracin and olaquindox (50 ppm of each); probiotic - basal diet plus 1300 ppm of probiotic (Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis); prebiotic - basal diet plus 3000 ppm of mannanoligosaccharide; herbal extract - basal diet plus 500 ppm of herbal extract (garlic, clove, cinnamon, pepper, thyme, cinnamaldehyde and eugenol). In Experiment I, forty 21-d-weaned pigs were alloted to 20 suspended pens, with two pigs (a barrow and a gilt) per pen (experimental unit) and four replications per treatment. In the last week, the digestibility assay was carried out, using the method of the partial faeces collection, with the chromium oxide (Cr2O3) as fecal marker. On 35th day, an animal of each experimental unit was slaughtered to collect the morphometry data, the intestinal epithelium samples for histological analysis, and the content of the jejunum/ileum for microbiological analysis. In Experiment II, one hundred and twenty 21-d-weaned pigs were used, with 12 replications per treatment and two animals (a barrow and a gilt) per experimental unit. The daily feed intake, the average daily gain and the feed conversion were analyzed for 1-14, 15-35 and 1-35 days of experimental periods. The fecal score was also evaluated. Although not significant (P>.05), the antimicrobial agents improved the average daily gain of weanling pigs, during 1-35 (+21.4%) and 15-35 (+22%) days of experimental periods, compared to pigs fed control diet. The nutrient apparent digestibility of pigs fed antimicrobial were higher (P<.05) than of those fed control. The prebiotic mannanoligosaccharide showed to be the most efficient alternative to antimicrobials. The average daily gain of pigs fed mannanoligosaccharide was, in numerical values (P<.05), 25.7% higher than of those fed control (P>.05) and similar (P>.05) to the animals of the antimicrobial treatment, during 1-14 days of experimental period. However, the feed conversion was not improved (P>.10). During 15-35 and 1-35 days of experimental periods, the performance of animals fed mannanoligosaccharide was intermediate between of those fed control and antimicrobial diet. The probiotic did not improve the growth performance of pigs (P>.10) and did not cause any effect. The herbal extracts increased the relative weight of pancreas (P<.10) and improved the dry matter apparent digestibility of the diet (P<.05), compared to control treatment. However, the herbal extracts did not improve pig performance (P>.10) in any period.

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