Señala que los recientes avances en el campo de la tecnología del medicamento han estimulado la necesidad de desarrollar cápsulas blandas como una alternativa de formas farmacéuticas sólidas orales. Para garantizar la calidad desde el diseño, es necesario determinar los factores de variación que influencian sobre los atributos de calidad de las cápsulas blandas (disolución y tiempo de desintegración, integridad de sellado, aspecto, valoración del contenido del principio activo, uniformidad de contenido, peso promedio, contenido de agua e impurezas). Si bien es cierto que la cantidad de aldehídos presente en la formulación podría causar entrecruzamiento (cross-linking) y retardar la disolución del principio activo, existen otros factores asociados a la formulación tales como el pH del material de relleno, valor Bloom de la gelatina, el tipo de plastificante y el tamaño de partícula del principio activo, así como también factores asociados al encapsulado tales como índice de sellado, espesor de lámina de gelatina y el tiempo de secado; que impactan sobre las características físico-químicas de las cápsulas blandas. Esta investigación evidencia la relación entre la formulación y la etapa de encapsulado con respecto a la estabilidad y a los atributos de calidad de las cápsulas blandas. / Tesis

El capítulo de "Resultados" ha sido retirado siguiendo indicaciones de la autora, al existir participación de empresas, convenio de confidencialidad o la posibilidad de generar patentes. / El principio activo sometido a estudio es irosustat, un novedoso inhibidor irreversible de la sulfatasa esteroidal (STS), que actúa bloqueando la síntesis de estrógenos que están implicados en el desarrollo y progresión del cáncer de mama hormonodependiente. El objetivo principal de esta investigación es evaluar las características farmacocinéticas preclínicas de irosustat. Para ello, se investigan en tres especies animales, rata, perro y mono, los procesos de absorción, distribución y eliminación que intervienen en el paso del compuesto por el organismo. El primer aspecto característico del producto, y relevante desde un punto de vista farmacocinético, es su unión reversible a la anhidrasa carbónica II (CA II) del interior de los eritrocitos. La farmacocinética de irosustat depende de la magnitud de dicha unión: el aumento de la unión a CA II prolonga su semivida en sangre, mientras que un desplazamiento de dicha unión provoca una aceleración en la eliminación. Este fenómeno ha supuesto una dificultad para el estudio farmacocinético de irosustat, especialmente en cuanto a la manipulación y conservación de las muestras biológicas. Por un lado, se han determinado simultáneamente las concentraciones de irosustat en plasma y sangre, mediante una metodología consistente en cromatografía líquida de alta eficacia acoplada a espectrometría de masas, con un límite de cuantificación de 0.025 ng/ml en ambas matrices biológicas. Por otro lado, se ha establecido el protocolo a seguir para manipular correctamente las muestras de plasma y sangre. La absorción de irosustat es relativamente rápida, puesto que los valores de Cmax en plasma se alcanzan generalmente alrededor de 1 hora post administración en rata, perro y mono. En plasma de rata y perro, la biodisponibilidad absoluta de irosustat en 1% metilcelulosa es incompleta y decrece al incrementar las dosis. Los valores hallados en rata oscilan entre 27.0% y 11.9% en el intervalo de dosis de 3 a 300 mg/kg, y en perro entre 84.1% y 44.5% a las dosis de 0.25 a 25 mg/kg. Cuando la biodisponibilidad se calcula a partir de las concentraciones de irosustat en sangre, los resultados hallados son muy superiores debido al efecto protector que ejercen los eritrocitos frente a la degradación y/o el metabolismo. La ausencia de linealidad cinética a las dosis superiores se ha atribuido a una falta de absorción de irosustat, debido a su limitada solubilidad. En referencia a la distribución, irosustat presenta una alta fijación a proteínas plasmáticas (>96%). Al administrar 14C irosustat a la rata, se observa que la radioactividad se distribuye ampliamente en los tejidos y no existe un fenómeno de fijación asociada a la melanina. Utilizando las herramientas de la farmacocinética poblacional, se ha construido un modelo no lineal de efectos mixtos en rata y perro, que se caracteriza por incorporar un proceso de distribución no lineal que considera la entrada inmediata de irosustat al interior de los eritrocitos para explicar el comportamiento farmacocinético de irosustat en plasma y sangre. El aclaramiento plasmático de irosustat es de 0.129 l/h en la rata y de 31.9 l/h en el perro, con variabilidades interindividuales de 3.8% y 33%, respectivamente. El volumen de distribución poblacional es de 0.11 l en la rata y de 4.5 l en el perro, no pudiéndose incluir variabilidad interindividual para este parámetro. Irosustat se elimina extensivamente metabolizado por el hígado y su principal vía de excreción es mayoritariamente la vía renal en las tres especies ensayadas. / The compound under study is irosustat, a novel irreversible inhibitor of steroid sulfatase (STS), which works by blocking the synthesis of estrogen that are involved in the development and progression of hormone dependent breast cancer. The main objective is to evaluate the preclinical pharmacokinetic properties of irosustat. Thus, the processes of absorption, distribution and elimination are investigated in rat, dog and monkey. The main characteristic of irosustat, that affects its pharmacokinetic behavior, is its reversible binding to carbonic anhydrase II (CA II) within erythrocytes. In order to gain insight into how binding to CA II within erythrocytes influences irosustat pharmacokinetics, we comparatively assess its concentration in plasma and blood following different dose levels. Irosustat absorption is relatively rapid, since the plasma Cmax values are usually reached about 1 hour after administration in rat, dog and monkey. In rat and dog plasma, the absolute bioavailability of irosustat in 1% methylcellulose is incomplete and decreases with increasing dose levels. The values found in the rat range between 27.0% and 11.9% at doses of 3 to 300 mg/kg, and in the dog range between 84.1% and 44.5% at doses of 0.25 to 25 mg/kg. When the bioavailability is calculated from irosustat concentrations in blood, the results found are much higher due to the protective effect of erythrocytes against degradation and/or metabolism. About distribution, irosustat exhibits high plasma protein binding (> 96%). When 14C irosustat is administered to rats, radioactivity is distributed widely in tissues. Using the tools of population pharmacokinetics, it has been built a model in rat and dog, characterized by incorporating a nonlinear distribution process that considers irosustat immediate entry into erythrocytes to explain the pharmacokinetic behavior of the compound in plasma and blood. The plasma clearance of irosustat is 0.129 L/h in rats and 31.9 L/h in dogs, with interindividual variability of 3.8% and 33%, respectively. The population volume of distribution is 0.11 L in the rat and 4.5 L in the dog, without being possible to include interindividual variability for this parameter. Irosustat is eliminated extensively metabolized by the liver and its major route of excretion is via the kidney in the three animal species tested.

Objetivos: 1.- Determinar la variabilidad interindividual de la concentración valle en plasma de los fármacos inhibidores de la transcriptasa inversa no análogos de los nucleósidos (ITINAN) y de los inhibidores de la proteasa (IP) del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), así como la proporción de pacientes infectados por el VIH en tratamiento antirretroviral con concentraciones valle de los fármacos por debajo de la concentración mínima eficaz en la practica clínica habitual. 2.- Evaluar la influencia de la co-infección por el virus de la hepatitis C (VHC) y el grado de fibrosis hepática asociado a la misma en la exposición a lopinavir y ritonavir en un grupo de pacientes infectados por el VIH sin evidencia de insuficiencia hepática. 3.- Desarrollar y validar un modelo farmacocinético poblacional simultáneo para lopinavir y ritonavir incluyendo las características individuales que explican parte de la variabilidad cinética de los fármacos observada en la práctica clínica así como la interacción entre lopinavir y ritonavir.Métodos: Para alcanzar el primer objetivo de realizó un estudio transversal en el que se determinó la concentración valle de los ITINAN e IP en todos los pacientes que acudieron a a unidad de VIH del Hospital Universitari Germans Trias i Pujol durante un periodo de dos semanas. Para alcanzar el segundo y tercer objetivos se realizó un estudio en el que se determinó la concentración de lopinavir y ritonavir en plasma en un grupo de pacientes en tratamiento estable con lopinavir/ritonavir, inmediatamente antes y durante las 12 siguientes a la administración de una dosis de lopinavir/ritonavir de 400/100 mg. Para lograr el segundo objetivo se realizó un análisis farmacocinético no compartimental mediante el programa informático WinNonlin (Versión 2.0; Pharsight, Mountain View, CA). El modelo farmacocinético poblacional simultáneo para ritonavir y lopinavir se desarrolló mediante el programa informático NONMEM.Resultados: La variabilidad interindividual de la concentración valle de los ITINAN e IP se estimó en aproximadamente el 50% (coeficiente de variación), y un 12% de los pacientes infectados por el VIH presentaban concentraciones valle de ITINAN o IP en plasma inferiores a la concentración mínima eficaz. Utilizando un análisis de datos no compartimental, los pacientes co-infectados por el VHC que tenían fibrosis hepática avanzada (F3-F4) mostraron un aumento significativo del volumen de distribución aparente de lopinavir así como una reducción del 50% en el aclaramiento y una mayor exposición a ritonavir que los pacientes no co-infectados o que los co-infectados sin fibrosis hepática avanzada. El mejor modelo farmacocinético poblacional que mejor describió la evolución temporal de las concentraciones de lopinavir y ritonavir fue un modelo monocompartimental con absorción y eliminación de primer orden. El análisis poblacional confirmó a reducción del aclaramiento de ritonavir en los pacientes co-infectados por el VHC en presencia de grados avanzados de fibrosis hepática. Además, el aclaramiento y el volumen de distribución aparentes de lopinavir se relacionaron de forma inversa con la concentración plasmática de alfa-1 glicoproteína ácida. Aunque la inhibición del aclaramiento de lopinavir por parte de ritonavir se describió en función del área bajo a curva de concentración-tiempo y de la concentración de ritonavir en cada punto de tiempo, la segunda estrategia proporcionó una mejor descripción de los datos observados. Utilizando un modelo de efecto máximo, se estimó que ritonavir podía ser capaz de inhibir por completo el aclaramiento de lopinavir (Imax 1), y la concentración de ritonavir necesaria para inhibir el aclaramiento de lopinavir fue de 0.36 mg/L. El modelo final fue posteriormente validado mediante simulaciones y en un grupo de pacientes no empleado para el desarrollo del modelo, sin objetivarse desviaciones sistemáticas y con una precisión adecuada. / Objectives: 1.- To assess interindividual variability in trough concentrations in plasma of non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NNRTI) and protease inhibitors (PI) among HIV-infected adults as well as the proportion of patients with drug concentrations below the proposed minimum effective concentration in an outpatient routine clinical practice setting. 2.- To assess the influence of hepatitis C virus (HCV) co-infection and the extent of liver fibrosis on lopinavir and ritonavir pharmacokinetics in HIV-infected subjects without evident liver function impairment. 3.- To develop and validate a simultaneous population pharmacokinetic model for lopinavir and ritonavir in a population of HIV-infected adults. The model sought was to incorporate patient characteristics influencing variability in drug concentration and the interaction between the lopinavir and ritonavirMethods: To achieve the first objective, a cross-sectional study was performed. Trough concentration of NNRTI and PI in plasma was determined in patients who consecutively attended the HIV Unit of the Hospital Universitari Germans Trias i Pujol during a two weeks period for routine outpatient blood tests and who were receiving antiretroviral therapy which included NNRTI or PI. To achieve the second and third objectives, lopinavir and ritonavir concentrations in plasma were determined in a group of patients on stable therapy with lopinavir/ritonavir immediately before and during 12 hours following the administration of a lopinavir/ritonavir 400/100 mg dose. To reach the second objective, a pharmacokinetic analysis was performed using a non-compartmental approach by means of Winnonlin (Version 2.0; Pharsight, Mountain View, CA). Population analysis was performed using non-linear effects modeling (NONMEM, version V)Results: Interindividual variability in NNRTI and PI plasma concentrations was approximately 50% (coefficient of variation), and12% of the patients showed drug concentrations below the minimum effective concentration. Using a non-compartmental pharmacokinetic analysis, HCV co-infected patients who had advanced liver fibrosis (F3-F4) showed a significant increase in lopinavir apparent volume of distribution as well as a reduction of 50% in ritonavir clearance and an increase in ritonavir exposure compared with not co-infected patients or with co-infected patients without advanced liver fibrosis. The best population pharmacokinetic model which described the time course of lopinavir and ritonavir concentrations was a monocompartmental model with first order absorption and elimination. The population analysis confirmed the reduction in ritonavir clearance in HCV co-infected patients with advanced liver fibrosis. In addition, lopinavir clearance and volume of distribution were inversely correlated to concentration of α1-acid glycoprotein in plasma. Although, the inhibition of lopinavir clearance by ritonavir was assumed to be dependent on ritonavir area under the time-concentration curve or on ritonavir concentration at each time point, the second strategy resulted in a better description of the observed data. Using a maximum effect equation, it was estimated that lopinavir metabolism could be completely inhibited at high ritonavir concentrations (Imax 1), and the estimated ritonavir concentration necessary for producing half-inhibition of lopinavir CL/F was 0.36 mg/L. The population pharmacokinetic model was validated by means of simulations in a set of patients not included during the model-building step, showing absence of evident bias and good precision.

La incidencia de infecciones fúngicas ha aumentado en los últimos años debido al incremento de situaciones clínicas que comportan alteraciones en los mecanismos de defensa del organismo tales como neoplasias, pacientes portadores de un trasplante y tratados con fármacos inmunosupresores o síndrome de la inmunodeficiencia adquirida (SIDA), entre otros. La anfotericina B (AnB), comercializada en 1956, continúa siendo el fármaco de elección para el tratamiento de las micosis sistémicas, aunque su utilización no está exenta de toxicidad. Las nuevas formulaciones lipídicas de AnB comercializadas a partir de 1995, han supuesto en la práctica clínica una mejora en la optimización de la terapia ya que su administración ha demostrado estar asociada a una menor incidencia de reacciones adversas. Antes de la comercilaización de éstas, ha sido frecuente la utilización de AnB vehiculada en un excipiente de características lipófilas como es el Intralipid 20%, preparada como formulación magistral en el momento de la infusión endovenosa por no disponer de estudios de estabilidad. La aspergilosis pulmonar invasiva es una infección fúngica que puede aparecer como complicación en la clínica de pacientes inmunodeprimidos cuya profilaxis con la formulación de AnB en solución acuosa para inhalación, ha demostrado una buena eficacia clínica exenta de los efectos adversos y toxicidad asociados a la administración endovenosa. En esta memoria se presentan los resultados de tres trabajos en formato de publicaciones en los cuales se estandariza y valida un método para la determinación de AnB en muestras biológicas (suero, secreciones respiratorias) y muestras lipídicas con aplicación a estudios farmacocinéticos y de estabilidad química de AnB cuando ésta se administra en diferentes formas farmacéuticas. / The incidence of fungal infection has increased in recent years due to the increment of clinical situations wich alter the defence mechanisms of the body such as neoplasia, transplantation patients treated with immunosupressive drugs or acquired immunodeficiency (AIDS), among others. Amphotericin B (AmB), licenced in 1956, continues to be the drug of choice for the treatment of systemic mycosis, although its use is not exempt from toxicity. The new AmB lipid formulations licenced from 1995 onwards, have represented in clinical practice an improvement in therapy since its administration has been associated with a declining incidence of adverse reactions. Prior to AmB commercialization, it was normal to inclued AmN in an excipient of lipofilas-like-characteristics such as Intralipid 20%, prepared as a magistral formulation at the moment of intravenous infusion, for lack of stability studies. Invasive pulmonary aspergillosis is a fungal infection which may appear as a complication in immunodepressed patients whose prophylaxis with AmN formulation in aqueous solution for inhalation, has shown good clinical efficacy free from adverse effects and toxicity associated with intravenous administration. In this thesis the results of three studies are presented, in whcih a standardized and validated method for the determination of AmB in biologic samples (serum, respiratory secretions) and liquid samples with application to pharmacokinetic studies and chemical stability of AmB when administered using pharmaceutical procedures.

El presente trabajo se realizó con el propósito de evaluar la influencia de cuatro tipos de materiales de empaque que son empleados regularmente para tabletas, sobre una formulación de lamivudina 150 mg tabletas recubiertas obtenida por compresión directa. Para realizar este estudio se elaboró un lote piloto de lamivudina 150 mg tabletas recubiertas, luego se acondicionó en cuatro tipos de materiales de empaque: PVC/Aluminio, PVC/PVDC / Aluminio, Aclar / Aluminio y Alupol / Alupol, y fueron sometidos a un estudio de estabilidad acelerada de seis meses, a condiciones de temperatura y humedad recomendadas para el Perú según the United States Pharmacopeia 27 (USP 27). Para determinar el material de empaque adecuado se realizaron los respectivos ensayos fisicoquímicos durante el estudio de estabilidad. Al final del estudio, todos los materiales de empaque evaluados garantizaron la calidad del producto. A continuación, se realizó el análisis económico de cada material de empaque empleado, para establecer cuál permite ahorrar costos sin afectar la calidad de producto final. Finalmente considerando los aspectos de calidad, logísticos, costos y marketing, se concluye que el PVC es el material de empaque mas adecuado para el producto de manera integral. / The aim of this the present study was to evaluate the influence of four different primary package materials that are used regularly for tablets, over a formulation by direct compression of lamivudine 150 mg coated tablet. The pilot-size batch was packed in the next primary package material used in this study: PVC (polyvinyl chloride) / Aluminum, PVC/PVdC (polyvinylidene chloride) / Aluminum, PVC/PCTFE (Polychlorotrifluoroethylene) / Aluminum and polyethylene aluminum foil “Alupol/Alupol”. At last these product were include in an accelerated stability study during six months to conditions of recommended temperature and humidity for Peru (zone IV) according to the United States Pharmacopeia 27 (USP27). In order to determine the material of suitable packing parameters test were developed during the stability study. At the end of the study, all the evaluated materials of packing guarantee the quality of the product. Then the economic analysis of each material of used packing was achieved, to establish which material allows to save costs without affecting the quality of the product. Finally considering the aspects of quality, logistic, cost and marketing, it is concluded that the PVC is the material of suitable packaging but for the product of integral way.

La farmacocinética de la amoxicilina fue determinada en equinos sanos y en equinos en los cuales se indujo artritis aséptica mediante toxina de Escherichia coli. El antibiótico fue administrado por vía IV, IM y VO y se realizó un seguimiento de los parámetros farmacocinéticos, en suero y en líquido sinovial, así como se desarrolló un modelo de inducción de artritis aséptica caracterizando los sintomas clínicos, midiendo variables fisiológicas como frecuencia cardíaca, frecuencia respiratoria, temperatura rectal, y cambios hematológicos y del líquido sinovial. La disposición cinética de la droga administrada por vía IV fue mejor descrita por un modelo bicompartimental. Una fase de distribución lenta fue seguida por una fase de eliminación rapida, con una semivida de eliminación de 1.19 + - 0.113 horas. Las concentraciones de la droga y la vida media de eliminación sugieren su efectividad por esta vía, para su utilización en patologias infecciosas causadas por bacterias Gram positivas, y Gram negativas utilizando dosajes frecuentes. Tras la administración vía IM de la droga en suspensiones acuosas al 10 y 17 por ciento se observó una fase de distribución más rápida para la primera y una semivida superior para ésta también. La absorción fue completa para la suspensión al 10 por ciento a las 24 horas e incompleta para la suspención al 17 por ciento al mismo tiempo. Fue concluido que es preferible la administración de amoxicilina a equinos por la vía intramuscular en suspención al 10 por ciento sobre la suspención al 17 por ciento. El fundamento es el incremento en biodisponibilidad que se logra con la mayor dilución. Las concentraciones observadas tras el uso de la droga por esta vía fueron superiores a las CIM para bacterias Gram positivas y algunas Gram negativas, involucradas en sepsis comunes en equinos para las dos suspenciones. En líquido sinovial las concentraciones de antibiótico tras la administración IM, superaron las CIM para bacterias Gram positivas y fueron inferiores en comparación con las concentraciones séricas, con una persistencia inferior para las dos suspensiones utilizadas. Luego de la administración por vía oral se determino en líquido sinovial una vida media corta con rápida absorción y eliminación, desapareciendo las concentraciones de la droga totalmente a las 12 horas post-administración, La experiencia sugiere utilizar esta vía solamente para bacterias Gram positivas altamente susceptibles a la amoxicilina y utilizando un dosaje frecuente. En animales con artritis experimentas la cinética sérica de amoxicilina no fue diferente de la descripta en animales sano. En sinovia, sin embargo, las concentraciones fueron mucho más elevadas en animales con artritis aséptica respecto de los sanos. El uso de amoxicilina por vía IV podría ser efectiva para el tratamiento de patologías sépticas articulares, al igual que la vía IM en suspención al 10 por ciento. Como recomendación, se sugiere iniciar el tratamiento con la administración IV de la droga, continuando con administraciones IM. / The pharmacokinetic profile of amoxicillin (AMX) was determined in healthy horses and in horses in which aseptic arthritis was produced. Aseptic arthritis was induced using Escherichia coli toxin. AMX was administered by IV, IM and PO routes and pharmacokinetic and bioavalability parameters were estimated. Some physiological variables were measured after the induction arthritis. The kinetic disposition of the drug was best described by a 2 comportment open model. A slow distribution phase was followed by a rapid elimimation phase and the mean half life was of 1.19 + - 0.113 hours. Drug concentrations and mean half life suggests the effectiveness of amoxicillin when used against infectious pathologies caused by Gram positive bacteria, and Gram negative especially if frequent dosing schemes are used. After IM administration as 10 and 17 . aqueous suspensions a faster distribution phase was observed in the case of the former and the mean half life was also longer. There was a complete absorption for the 10. suspension in 24 hours. The absortion process was not completed by the 17. one by the same time. Drug concentrations after IM administration were higher than the MIC for Gram positive and some Gram negative microorganisms involved in common horses infectious processes for both suspenssions. It was concluded that, amoxicillin should be administered to horses as 10. rather than a 17. suspension. In sinovial fluid, the antibiotic concentration after IM administration were higher than the MIC for Gram positive bacteria and showed lower concentrations than serum whith a shorter persistence period as well. After PO administration rapid absorption and elimination of AMX from synovial fluid took place. No drug presence was noticed after 12 hours. The use of PO administration is recommended only for highly susceptible Gram positive bacteria, if a high frequency dosage regime is implemented. In animals with experimental aseptic arthritis, the serum kinetics of amoxycillin was not different from that described in healthy animals. In synovial fluid, however, the concentrations resulted much higher in arthritic animals in comparison with healthy animals. IV administration of AMX would probably act with high efficacy to treat septic articular pathologies in horses. IM (10. ) administration in high dosages could be very useful too. PO administration should be used only in the treatment of highly susceptible Gram positive bacteria, using high dosages. As a recommendation, the suggestion of starting the treatment with IV administration continuing with IM administration is made.

En la actualidad, la CIM asume un papel fundamental en el cálculo de los parámetros farmacocinéticos/farmacodinámicos, T>CIM; AUC/CIM y Cmax/CIM, considerados como predictores de la eficacia antimicrobiana. Sin embargo, la importancia de la CIM como parámetro de la eficacia in vivo de un antimicrobiano es controversial. Las condiciones estandarizadas de la prueba (tamaño de inóculo definido, medios artificiales y concentraciones estáticas) son realmente diferentes de las esperadas en el sitio de infección. Dichas controversias han obligado a los investigadores ha diseñar modelos experimentales in vivo. Sin embargo los modelos diseñados hasta el momento no poseen enfoques adecuados para una correcta evaluación de lo que ocurre durante el tratamiento antimicrobiano de un proceso infeccioso, limitándose a conclusiones de eventos particulares y estáticos. Basado en lo expuesto, en la actualidad se carece de un modelo in vivo aceptable que permita estudiar de forma integrada la farmacocinética y farmacodinamia de los antimicrobianos, que produzca información de calidad científica y al mismo tiempo respete el bienestar de los animales experimentales. En la presente tesis se propuso el desarrollo y la validación de un modelo de estudio in vivo completamente novedoso, que podría subsanar las debilidades encontradas en los modelos anteriores. Para cumplir este objetivo, se diseñó un dispositivo de implantación subcutánea (DIS) que permitió el estudio in vivo del crecimiento bacteriano y su modificación por la aplicación de diferentes estrategias terapéuticas. El modelo permitió la integración PK/PD y la identificación de correlaciones entre los diferentes parámetros farmacocinéticos y las curvas de muerte bacteriana. En resumen, el modelo experimental presentado en el presente trabajo de tesis resultaría adaptable para el estudio de la mayoría de los componentes del proceso infeccioso, como ser formación de biofilm, persistencia bacteriana, efecto inóculo, etc. A su vez es un modelo que ofrece la posibilidad de trabajar con animales sanos sin producir septicemia y respetando el bienestar de los mismos. / Nowadays, MIC is considered fundamental for parmacokinetic/ pharmacodynamic parameter calculation, T>CIM; AUC/CIM y Cmax/CIM, consider as efficacy predictors. However, the importance of MIC as an in vitro efficacy parameter for antimicrobials is controversial. Standardized conditions on MIC test (inoculums size, artificial culture mediums and static concentrations) are really different to that expected at the site of infection. Mentioned controversies have forced researches to develop in vivo experimental models. However, models designed so far lack of appropriate focus for a proper evaluation of the scenario during an antimicrobial treatment of an infectious process; conclusions, then, are limited to particular and static events. Based on the previously presented information, there is not an acceptable in vivo model allowing the integrated study of antimicrobials pharmacokinetics and pharmacodynamics, which would produce high quality scientific information, and at the same time, sustain animal welfare. In the present Thesis, for covering the weaknesses of older models, the development and validation of a novel and original in vivo model was proposed. For achieving this goal, a device for subcutaneous implantation was designed and validated. This device allowed the in vivo study of bacterial growing together with its modification by different therapeutic interventions. The model allowed PK/PD integration and identification of correlation between PK parameters and bacterial death curves. In summary, the experimental model presented in this thesis is flexible and can be adapted for studying most of the components of the infectious process, such as, biofilm formation, bacterial persistence, inoculum-effect, etc. Also, the model allows to work with healthy experimental animals, avoiding septicaemia induction and then, sustaining welfare.

Orientador: Maria Palmira Daflon Gremião / Coorientador: Rosângela Gonçalves Peccinini / Banca: Sílvia Stanisçuaski Guterres / Banca: Marcos Luciano Bruschi / Banca: Marlus Chorilli / Banca: Beatriz Stringhetti Ferreira Cury / Resumo: A zidovudina (AZT) é o fármaco de primeira escolha no tratamento da AIDS, mas sofre metabolismo pré-sistêmico e possui efeitos adversos dose-dependentes. A via nasal é uma alternativa que pode promover a rápida absorção do fármaco e evitar o metabolismo pré-sistêmico. Porém, ela possui mecanismos de depuração mucociliar que pode eliminar rapidamente a formulação da cavidade nasal. Sistemas de liberação mucoadesivos podem aumentar a fixação da formulação, controlar e aumentar a absorção de fármacos através da mucosa nasal. Sistemas compostos por tensoativos podem formar estruturas líquido-cristalinas in situ e promover a mucoadesão. O objetivo deste trabalho foi desenvolver sistemas precursores de cristais líquidos compostos pelo tensoativo álcool cetílico etoxilado 20 OE e propoxilado 5 OP (PPG-5-CETETH-20) para administração nasal do AZT. O comportamento de fases dos sistemas foi investigado pela construção de diagramas de fases binários e ternários combinando o tensoativo com água e fosfatidilcolina ou ácido oleico. As amostras escolhidas foram caracterizadas por microscopia de luz polarizada (MLP), reologia, análise mecânica e de obtenção da força mucoadesiva utilizando texturômetro. Foram realizados estudos de permeação ex vivo e testes pré-clínicos em ratos. Os resultados mostram que é possível obter um sistema composto por PPG-5-CETETH-20/ ácido oleico/água com escoamento adequado para administração nasal e alta capacidade de solubilização do AZT. A mistura do sistema com muco artificial forma uma matriz líquido-cristalina com características reológicas, perfil de textura e força mucoadesiva adequados para promover a mucoadesão na cavidade nasal. O ensaio de permeação utilizando... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Zidovudine (AZT) is the first choice drug for AIDS treatment, but it undergoes presystemic metabolism and exhibits dose-dependent side effects. The nasal route is an alternative that promotes the rapid absorption of the drug and avoids its presistemic metabolism. However, the mucociliary clearance mechanism can rapidly eliminate the formulation from the nasal cavity. Mucoadhesive drug delivery systems may raise the fixation of the formulation, control and increase AZT absorption through the nasal mucosa. Systems composed of surfactants can form in situ liquid crystalline structures and promote the mucoadhesion. The objective of this work was to develop liquid crystal precursor systems composed of the surfactant polyoxypropylene (5) polyoxyethylene (20) cetyl alcohol (PPG-5-CETETH-20) for the nasal administration of AZT. The phase behavior of the systems was investigated by the construction of binary and ternary phase diagrams combining the surfactant with water, phosphatidylcholine or oleic acid. The chosen samples were characterized by polarized light microscopy (PLM), rheology, and mechanical analysis and by obtation of the mucoadhesive force using a texturometer. It was performed ex vivo drug permeation studies and pre-clinical tests in rats. The results showed that it is possible to obtain a liquid system composed of PPG-5-CETETH-20/ oleic acid/ water with high capacity for AZT solubilization. The mixture of the system with artificial mucus forms a liquid crystalline matrix with suitable rheological characteristics, texture profile and mucoadhesive force for promoting the mucoadhesion in the nasal cavity. The permeation assay using porcine nasal mucosa showed that the formulation does not retain AZT release and increases the flux J (0.871 g/min.cm) and the permeability coefficient Kp... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-25Bitstream added on 2014-06-13T21:05:07Z : No. of bitstreams: 1 silva_hc_dr_jabo.pdf: 504257 bytes, checksum: 30971c736221bcad39aac3ecca19f149 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Uma nova formulação medicamentosa contendo ivermectina 1,5% + abamectina 0,5%, administrada via tópica “pour-on”, foi avaliada em 12 experimentos, incluindo o estabelecimento de parâmetros farmacocinéticos e determinação de resíduos destes compostos em bovinos medicados. Quanto à atividade ectoparasiticida, foram conduzidos nove ensaios, sendo quatro contra Rhipicephalus (Boophilus) microplus (três com infestação natural e um com infestação artificial). Os outros cinco tiveram como alvo Haematobia irritans (dois), dois em Cochliomyia hominivorax (miíases escrotais naturais) e o último em larvas de Dermatobia hominis (berne, infestação natural). Uma avaliação anti-helmíntica (24 necropsias), completou os 12 experimentos realizados. A associação (ivermectina + abamectina) apresentou eficácia anti-ixodídica superior a 95% até o 28o dia pós-tratamento (DPT) nos três experimentos a campo. No “stall test” alcançou 100% de eficácia em oito datas observacionais e eficácia superior a 95% do 8o a 43o DPT. Contra H. irritans os valores de eficácia foram superiores a 90% do 3o ao 14o DPT, em ambos experimentos conduzidos. Eficácia bernicida acima de 90% foi observada do 7o ao 42o DPT. A nova formulação apresentou eficácia anti-helmíntica máxima (100%) contra sete das 11 espécies de helmintos diagnosticadas. Contra Haemonchus placei e Cooperia punctata os percentuais de eficácia foram de 92,22% e 95,77%, respectivamente. Os estudos farmacocinéticos revelaram valores da área sob a curva (AUC) de 1089,34 ± 237,17 ng dia/mL e de 634,34 ± 121,49 ng dia/mL, para ivermectina 1,5% e abamectina 0,5%, respectivamente. O pico de concentração máxima (Cmax) da ivermectina 1,5% (70,62 ng/ml) foi superior ao da abamectina... / A new association containing of ivermectin 1,5% + abamectin 0,5%, topical route of administration (pour-on), was evaluated in 12 experiment, incluse the pharmacokinetic parameters and residues determination this compounds in cattle medicados. As ectoparasiticide activity, was nine study, four against Rhipicephalus (Boophilus) microplus (tree with natural infestation and one with artificial infestation). The other five had like target Haematobia irritans (two), two in Cochliomyia hominivorax and last in the larvaes of Dermatobia hominis (natural infestation). An anthelmintic avaliation (24 necropsias), completed the 12 experiments. The association (ivermectin + abamectin) presented efficacy antiixodidic higher than 95% up to the 28th day post-treatment (DPT) in the tree field experiments. In the “stall test” showed 100% of efficacy in eight experimentally time and efficacy higher than 95% on the 8th to 43th DPT. Against H. irritans the efficacy values were higher than 90% on the 3th to 14th DPT, in the both experiments conducted. Efficacy anti- D. hominis higher than 90% on the 7th to 42th DPT. The new formulation presented maximal efficacy (100%) against seven of the eleven helminth especies diagnostic. Against Haemonchus placei and Cooperia punctata the percentiles efficacy were the 92,22% and 95,77%, respectivelly. The studies pharmacokinetics showed iverrmectin, present in the association, showed values area under the plasma concentration-time curve AUC of 1089,34 ± 237,17 ng day/mL and 634,34 ± 121,49 ng day/mL, for the ivermectin and abamectin, respectivelly. The time to peak plasma concentration (Cmax) of the ivermectin 1,5% (70,62 ng/ml) was higher up to abamectin 0,5% (49,33 ng/ml), in the 5th and 6th DPT (Tmax)...(Complete abstract, click electronic access below)

Orientador: Francisco José Teixeira Neto / Banca: Stelio Pacca Loureiro Luna / Banca: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: Adriano Carregaro / Banca: Juliana Tabarelli Brondani / Resumo: A metadona é um opióide que possui potência analgésica semelhante à da morfina. Doses elevadas de metadona intravenosa (0,5-1,0 mg/kg), apesar de reduzirem a concentração alveolar mínima do isoflurano (CAMISO), resultam em maior depressão cardíaca que a observada com a morfina intravenosa (1,0 mg/kg) em cães. Com a hipótese de que a metadona peridural poderia proporcionar vantagens clínicas em relação à metadona intravenosa (maior potencialização da anestesia inalatória e maior eficácia analgésica), os estudos apresentados objetivaram comparar aspectos farmacocinéticos e farmacodinâmicos destas vias de administração da metadona em cães. Nos dois estudos iniciais (Capítulos 1 e 2), os mesmos seis animais foram anestesiados com isoflurano e tratados com metadona (0,5 mg/kg) peridural ou intravenosa em ocasiões distintas. No primeiro estudo (Capítulo 1), para comparação da farmacocinética destas duas vias de administração, a concentração de metadona foi determinada no plasma e no líquor da cisterna magna antes e durante 450 minutos após a administração do opióide. No segundo estudo (Capítulo 2), a CAMISO foi mensurada antes e após 2,5 e 5 horas da administração da metadona, mediante a aplicação da estimulação nociceptiva em membro pélvico e torácico (via peridural) ou em membro pélvico apenas (via intravenosa). No último estudo (Capítulo 3), cadelas apresentando tumores mamários, após serem tratadas de forma preemptiva com metadona (0,5 mg/kg) peridural ou intravenosa (10 animais por grupo), foram submetidas à mastectomia unilateral. Nesta etapa, avaliou-se a concentração expirada de isoflurano (ETISO) necessária à realização da mastectomia e, no período pós-operatório, avaliou-se os escores de dor, limiares nociceptivos mecânicos (LNM) das cadeias mamárias e requerimento de resgates analgésicos. No estudo do Capítulo 1, a via... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Methadone is an opioid that has analgesic potency comparable to that of morphine. High doses of intravenous methadone (0.5-1.0 mg/kg), in spite of reducing the minimum alveolar concentration of isoflurane (MACISO), cause greater cardiac depression than intravenous morphine (1 mg/kg) in dogs. The studies presented here aimed to compare some pharmacokinetic and pharmacodynamic aspects of peridural and intravenous methadone in dogs, testing the hypothesis that peridural methadone could result in clinical advantages when compared to intravenous methadone (greater reduction in anesthetic requirements and greater analgesic efficacy). In the first 2 studies (Chapters 1 and 2), the same six animals underwent isoflurane anesthesia and were treated with methadone (0.5 mg/kg) administered via the peridural or intravenous routes during different occasions. During the first study (Chapter 1), in order to compare the pharmacokinetics of these two administration routes, methadone concentrations were determined in plasma and in the cisternal cerebrospinal fluid before and for 450 minutes after opioid injection. During the second study (Chapter 2), MACISO was measured before, 2.5 and 5 hours after methadone injection via nociceptive stimulation of the thoracic and pelvic limb (peridural) or the pelvic limb (intravenous). During the last series of studies (Chapter 3), bitches presented with mammary gland tumors were preemptively treated with peridural or intravenous methadone (0.5 mg/kg) (10 animals per group) and underwent unilateral mastectomy. The end-tidal isoflurane concentration (ETISO) necessary for maintaining surgical anesthesia was evaluated and, during the postoperative period, parameters evaluated included Glasgow pain scores, mechanical nociceptive thresholds (MNT) in the mammary glands, and requirement for supplemental analgesia. In first study (Chapter 1), peridural methadone prolonged... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor