Today we can easily find the most diverse kind of information about a particular medicinal plant, but without scientific basis, making their use a potential risk to health. Overall, the findings on the safety and efficacy are based on precarious evaluations and popular use. There is a need for qualified professionals to access, critical analyze and assign such information in a way that it could be easily understood, not only by health professionals, but also by the users of these products. One example of these plants used in popular medicine, but without scientific evidence, is Euphorbia tirucalli L., popularly known as Dog-Stick, Pencil tree, or more commonly as Aveloz. This plant has been used for the treatment of many diseases, such as microbial diseases, immunossupression problems, and even in the cancer treatment. However, some works reveal precisely the opposite, namely that the latex of Euphorbia tirucalli can cause immunosuppression, and often is associated to the appearance of Burkitt's Lymphoma, a type of cancer. Lupeol was isolated and identificated from hexane fraction by GC-MS for the first time for the plant, among other 3 hydrocarbons, 7 long chain fat acids, 2 steroids, and 3 compounds of the vegetal metabolism. A preliminary phytochemistry screening allowed to the visualization of the principal groups in the plant. Polyphenols and condensed tannins contents were determined in the crude extract and fractions. Ethyl ether and ethyl acetate fractions showed the greatest antioxidant activity in the DPPH test. Antimicrobial activity was observed mainly against Candida albicans, Candida glabrata and Saccharomyces cereviseae, as well as for the opportunist algae Prototheca zopfii. A preliminary study of toxicity using Artemia saline and acute oral toxicity in mice, indicate the plant as low toxicity. The latex of the E. tirucalli, even in small doses (1%) can cause in vitro inhibition over the human Acetylcholinesterase enzyme. A prominent in vitro inhibitory activity over human platelets aggregation was also observed. The effects of the extract of the plant over the blood cells in a culture medium using ex-vivo blood samples of male Wistar rats were evaluated. The results demonstrated that the extract caused thrombocytopenia, leucopenia and lymphopenia. / Atualmente podemos encontrar facilmente as mais diversas informações sobre uma determinada planta medicinal, mas que carecem de fundamento científico, tornando assim seu uso um potencial risco a saúde. Em geral, as conclusões sobre segurança e eficácia são baseadas em avaliações precárias do uso popular. Portanto, há necessidade de que profissionais qualificados possam, além de acessar tais informações, analisá-las criticamente para disponibilizá-las de forma que sejam facilmente compreendidas, não só por profissionais da saúde, mas também pelos usuários destes produtos. Um exemplo destas plantas utilizadas na medicina popular, mas sem comprovação científica, é a Euphorbia tirucalli L., conhecida popularmente como Graveto-do-cão, Árvore Lápis, ou mais comumente como Aveloz. Esta planta tem sido utilizada para o tratamento de inúmeras enfermidades, como afecções microbianas, problemas de imunossupressão, cicatrização de berrugas e até mesmo no tratamento do câncer. Entretanto, alguns trabalhos revelam justamente o contrário, ou seja, que o látex da Euphorbia tirucalli pode causar imunossupressão, e freqüentemente encontra-se associado ao aparecimento do Linfoma de Burkitt, que é um tipo de câncer. Foram isolados e identificados por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas, 03 hidrocarbonetos, 07 ácidos graxos de cadeia longa, 02 esteróides, 03 compostos do metabolismo vegetal e 01 triterpeno, não relatado até o momento, o qual foi isolado da fração hexânica e identificado como sendo o lupeol. Foi realizada uma análise fitoquímica preliminar, o que permitiu a visualização dos grupos de compostos presentes na planta. A quantidade de polifenóis e taninos condensados foi determinada na planta e suas frações. Realizou-se o teste de atividade antioxidante e com ele verificamos uma excelente atividade das frações éter etílico e acetato de etila. Analisou-se a atividade antimicrobiana da planta e obtivemos resultados excelentes para os fungos Candida albicans, Candida glabrata e Saccharomyces cereviseae, bem como para a alga oportunista Prototheca zopfii. Realizou-se um estudo de toxicidade sobre a Artemia salina e estudo de toxicidade oral aguda. Os resultados apontam a espécie como sendo não tóxica. O látex da E. tirucalli, mesmo em doses pequenas (1%) pode causar inibição (in vitro) a enzima Acetilcolinesterase Humana. Uma acentuada atividade inibitória sobre a agregação plaquetária foi observada. O extrato da planta sobre cultura de células sanguíneas de ratos Wistar (exvivo) causou diminuição do número de leucocitos, linfócito e plaquetas.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 parte1.pdf: 1844799 bytes, checksum: c45c18425ecd99744a816e6d2e894e3f (MD5) Previous issue date: 2009-11-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Richardia brasiliensis Gomes (Rubiaceae), a herbaceous plant known as "ervanço", "poaia" and "ipeca", is popularly used as emetic, anti-diabetic, worms and the treatment of eczema, burns, bronchitis, influenza, hemorrhoids and avian malaria. Pharmacological studies have shown antimicrobial and antioxidant activity and phytochemical previous investigations resulted in the isolation of terpenoids, flavonoids and coumarin. This study aimed to contribute to the knowledge of the Richardia genus and Rubiaceae family through the phytochemical and pharmacobotanical study of Richardia brasiliensis Gomes. For this, the plant material was collected in João Pessoa - Paraíba and deposited in the Herbarium Prof. Lauro Pires Xavier (JPB) with the code Tenorio-Souza 01. In the pharmacobotanical study, the external morphology of the plant was to the naked eye and with a stereomicroscope. The microscopical morphodiagnosis were performed paradermic and transverse sections of leaves (blade and petiole), as well as transverse sections of stems and roots, which were cleared, stained, mounted between slide and coverslip and examined under the light microscope. The macroscopic anatomy of all organs revealed aspects that are common to species belonging to the family Rubiaceae, such as simple opposite leaves, interpetiolar stipules, flowering tops, flowers bisexual and actinomorphic, aestivation valve and inferior ovary. Microscopically, the leaf presents presenting the upper and lower epidermis, stomata and simple trichomes. The main vein has collateral vascular bundle. The petiole has vascular bundle arc-shaped and four small lateral bundles. In cross section, the stem secondary growth is cylindrical and the vascular system provides continuous siphonostele ectophloic organization, already has a tap root cortical parenchyma with idioblasts containing raphides and system with vascular bundle organization protostele in lateral roots and protostele radiated in the main root. For phytochemical study, vegetable, dried and pulverized, was subjected to extraction processes, and partition chromatography to isolate the chemical constituents. The chemical structure has been assessed by spectroscopic methods such as IR, Mass and uni-dimensional 1H and 13C NMR and comparisons with literature data. The hexane phase was obtained a mixture of steroids (β-sitosterol and stigmasterol) and 151-hydroxy-(151- S)- porfirinolactone a; CHCl3 phase was isolated and identified four coumarins: cedrelopsin, norbraylin, braylin and 5,6 -dimethoxy-7,8-[2'-(prop-1-en-2-yl)-(2'-S)- 2',3'-dihydrofuran]coumarin (cumarineletefin), the latter being first reported the literature, and the AcOEt phase was obtained the flavonoid kaempferol, contributing therefore to the chemotaxonomy of the Richardia genus and Rubiaceae family. / Richardia brasiliensis Gomes (Rubiaceae), planta herbácea conhecida por ervanço , poaia e ipeca , é utilizada popularmente como emética, antidiabética, vermífuga e no tratamento de eczema, queimadura, bronquite, gripe, hemorróida e malária avícola. Estudos farmacológicos revelaram atividade antimicrobiana e antioxidante e investigações fitoquímicas anteriores resultaram no isolamento de terpenóides, flavonóide e cumarina. Este trabalho objetivou contribuir para o conhecimento do gênero Richardia e da família Rubiaceae por meio do estudo farmacobotânico e fitoquímico de Richardia brasiliensis Gomes. Para isto, o material vegetal foi coletado em João Pessoa Paraíba e depositado no Herbário Prof. Lauro Pires Xavier (JPB) com o código Tenório-Souza 01. No estudo farmacobotânico, a morfologia externa do vegetal foi analisada à vista desarmada e com auxílio de estereomicroscópio. Para as morfodiagnoses microscópicas, foram realizados secções paradérmicas e transversais das folhas (lâmina e pecíolo), bem como, secções transversais do caule e das raízes, que foram clarificadas, coradas, montadas entre lâmina e lamínula e analisadas ao microscópio óptico comum. A caracterização macroscópica de todos os órgãos evidenciou aspectos que são comuns às espécies pertencentes à família Rubiaceae, tais como, folhas simples opostas, estípulas interpeciolares, inflorescência cimosa, flores bissexuadas e actinomorfas, prefloração valvar e ovário ínfero. Microscopicamente, a folha é anfiestomática apresentando nas epidermes superior e inferior, estômatos paracíticos e tricomas tectores simples. A nervura principal apresenta feixe vascular colateral. O pecíolo possui feixe vascular em forma de arco e quatro pequenos feixes vasculares laterais. Em secção transversal, o caule em crescimento secundário é cilíndrico e o sistema vascular apresenta organização sifonostélica contínua ectoflóica, já a raiz principal apresenta parênquima cortical com idioblastos contendo ráfides e sistema vascular anficrival com organização protostélica nas raízes laterais e protostélica radiada na raiz principal. Para o estudo fitoquímico, o vegetal, após secagem e pulverização, foi submetido a processos de extração, partição e cromatografia para isolamento dos constituintes químicos. A estrutura química dos mesmos foi determinada por métodos espectroscópicos, tais como: Infravermelho, Massas e Ressonância Magnética Nuclear de 1H e 13C uni e bidimensionais e comparações com modelos da literatura. Da fase hexânica obtevese uma mistura de esteróides (β-sitosterol e estigmasterol) e 151-hidroxi-(151-S)- porfirinolactona a; da fase CHCl3 foi isolado e identificado quatro cumarinas: cedrelopsina, norbraylina, braylina e 5,6-dimetoxi-7,8-[2 -(prop-1-en-2-il)-(2 -S)-2 ,3 - diidrofurano]cumarina (cumarineletefina), sendo esta última relatada pela primeira vez na literatura; e da fase AcOEt obteve-se o flavonóide canferol, contribuindo, portanto para a quimiotaxonomia do gênero Richardia e da família Rubiaceae.

Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2013-04-09T15:57:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Alessandra (4).pdf: 2685859 bytes, checksum: 5365f2b719ecbda7464c4a77b11585ec (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Hilda Fonseca(anahilda@ufba.br) on 2013-04-18T17:37:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Alessandra (4).pdf: 2685859 bytes, checksum: 5365f2b719ecbda7464c4a77b11585ec (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-18T17:37:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Alessandra (4).pdf: 2685859 bytes, checksum: 5365f2b719ecbda7464c4a77b11585ec (MD5) Previous issue date: 2009 / CAPES / O presente trabalho é uma contribuição à pesquisa de plantas medicinais, e descreve o estudo farmacognóstico das espécies Averrhoa bilimbi e Poiretia bahiana no que diz respeito aos aspectos botânicos, fitoquímicos e à avaliação de atividade biológica. As folhas e frutos da espécie A. bilimbi foram caracterizados pelos aspectos morfoanatômicos, e apenas de seus frutos foram realizadas extrações com metanol, seguido de fracionamento para obtenção dos extratos brutos hexânico, clorofórmio e acetato de etlia. Estes extratos foram avaliados quanto ao potencial citotóxico através do bioensaio com o microcrustáceo Artemia salina. Os extratos brutos clorofórmio e acetato de etila foram submetidos ao fracionamento e isolamento de substâncias através de técnicas cromatográficas. A identificação das substâncias isoladas foi realizada através de métodos espectroscópicos, tais como RMN de 1H e 13C. Para a espécie P. bahiana, o estudo envolveu a caracterização anatômica de suas folhas e obtenção de extratos brutos hexânico, clorofórmio, acetato de etlia e hidroalcoólico através de técnicas cromatográficas. Os extratos obtidos foram avaliados quanto ao potencial citotóxico frente a A. salina, e a capacidade seqüestradora de radical livre, medida pelo método DPPH (2,2-difenilpicril- hidrazil). Os resultados apresentados no estudo farmacobotânico das espécies A. bilimbi e P. bahiana permitiram levantar características muito peculiares nos aspectos morfoanatômicos. A espécie A. bilimbi apresentou um elevado potencial citotóxico, evidenciado pela morte de 100% dos microcrustáceos em todos os extratos avaliados. A partir do fracionamento e isolamento das substâncias presentes nos extratos acetato de etila e clorofórmio da espécie A. bilimbi foram isoladas as substâncias 3β-O-β-D-glicopiranosil sitosterol e 3,5-dimetoxi-benzaldeído, até então não descritas para a espécie. Já a espécie P. bahiana apresentou apenas citotoxicidade nos extratos hexânico e clorofórmio, entretanto foi observada atividade antioxidante dos extratos hidroalcoólico, clorofórmio e acetato de etila através do teste com o DPPH, demonstrando ter potencial como fonte de substâncias antioxidantes. / Salvador

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-05-11T16:48:03Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 26198719 bytes, checksum: b949b51e61e8fb26cca513cba05f5ef2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-11T16:48:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 26198719 bytes, checksum: b949b51e61e8fb26cca513cba05f5ef2 (MD5) Previous issue date: 2002-07-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Oito acessos de Eclipta alba, foram estudados quanto aos padrões isoenzimáticos, caracteres morfométricos e quantificação dos coumestanos demetilwedelolactona e wedelolactona. Nas plantas dos acessos estudados detectou-se polimorfismo para os sistema esterase (EST), fosfoglucoisomerase (PGI), malato desidrogenase (MDH), fosfoglucomutase (PGM), sendo o sistema esterase o mais polimórfico. Utilizando-se da matriz de dissimilaridade obtida pelo complemento Aritmético do Índice de Similaridade de Jaccard, agruparam-se os indivíduos pelo Método de Otimização de Toccher e formaram-se quatro grupos. Nos acessos AFR e CEM houve superioridade na maioria dos caracters morfométricos, destacando-se número de capítulo por axila com média de 4,40 e nos demais acessos com média 2,0. Invertendo a situação os dois acessos produziram o menor teor de wedelolactona nas folhas e capítulos florais, com média de 0,6510 mg/g de matéria seca foliar, enquanto nos outros seis acessos detectou-se 4,6906 mg/g da matéria seca. Nos capítulos florais, a média foi de 0,3282 mg de wedelolactona/g de matéria seca nos acessos AFRe CEM e de 2,3959 mg/g de matéria seca nos demais. Os caracteres morfométricos, bioquímicos e químicos diferenciais entre os acessos permitiram o estabelecimento de duas variedades taxonômicas. Utilizando três genótipos carcterizados pelo sistema esterase, estudou-se a interação genótipo x ambiente e a plasticidade fenotípica de caracteres morfométricos e das substâncias fitofarmacêuticas, visando o conhecimento dos fatores ambientais e genéticos que influenciam na produção desta espécie como medicinal. Os três genótipos foram cultivados em quatro ambientes, constituídos pela combinação de dois tratamentos de adubação (sem adubação e com adubação orgânica – humus de minhoca) e dois ambientes (casa-de-vegetação, com sombrite 30% e em ambiente, a pleno sol). No estudo da interação genótipo-ambiente foi possível eleger o genótipo C como o mais produtivo, de demetilwedelolactona na raiz, e o genótipo A como o mais produtivo de wedelolactona na parte aérea; e ambos devem ser cultivados no substrato com ausência de humus de minhoca e a pleno sol. No estudo da plasticidade fenotípica, nos caracteres morfométricos relacionados com a produção de biomassa detectoram-se os maiores valores nos três genótipos, enquanto que os caracteres fitoquímicos foram menos influenciados pelo ambiente, apresentando os menores valores de plasticidade. / Eigth accessions of Eclipta alba were studied the patterns concerning isozimatic, characteres morphometric and quantification of isoflavonoids demethylwedelolactone and wedelolactone. The plants of acessions studied presented polymorphism in systems esterase (EST), phosphoglucoisomerase (PGI), phosphoglucomutase (PGM), malate dehydrogenase (MDH), nevertheless the system esterase was more polymorphic. Using the dissimilarity matrix obtained by Jaccard Arithmmetics Complement of similarity Index, the individuals were put into four groups by Tocher`s Optimization Method. Whatever characteres morphometric in accessions AFR and CEM detected superiority between whole acessions, detaching number of capitula by armpit with average of 4.40 and others acessions with average 2.0. Reversing the situation the two accession producted the minor content of wedelolactone in leafs and capitulas with average of 0.6510 mg/g dry weight, while others six accessions detected 4.6906 mg/g of dry weigth. In capitula the average were of 0.3282 mg/g dry weight in accessions AFR and CEM and 2.3959 in the others. The differentiated morphometric, biochemichal and phytopharmaceutical characteres between the accessions enabled the establishement of two taxonomic varieties. Using three genotypes appropriatement characterized through system esterase studied the interaction between genotypes and environment and the phenotypic plasticity characteres morphometric and of chemical substance, directing the knowledge of the factor environmental and genetics that influence in the production of this species as medicinal plant. The three genotypes were grown in four environments, constituted by combination of two treatments fertilizer (without fertilization, with organic fertilization- eartworm humus) and were utilized two environments (in greenhouse, with 30% of shading and absolute sun, in environment). In the interaction between genotypes and environment was possible to elect the genotypes C how the most productive of demethylwedelolactone in root and the genotype A how the most productive of wedelolactone in the aerial part, and both need to be cultivated in substrate without eartworn humus and absolute sun. The study of phenotypic plasticity the morphometric characteres which related with the biomass production showed the greastest values of plasticity in the three genotypes, while in phytochemical characteres were less influencied by environment showing (presented) minores values of plasticity. / Tese importada do Alexandria

Made available in DSpace on 2016-03-15T14:17:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 5.pdf: 731938 bytes, checksum: 10ae8cfa98b79462e48442ff66508e04 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos/Farmanguinhos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / O bom emprego de recursos na pesquisa e desenvolvimento (P&D) pode possibilitar o tratamento dos indivíduos com novos medicamentos, como os fitoterápicos. O objetivo foi estimar custo das atividades da fase Fitoquímica de um projeto de pesquisa e desenvolvimento de um medicamento à base de uma espécie vegetal. O recorte das atividades da fase Fitoquímica permitiu acesso aos dados dos processos de extração, fracionamento e isolamento. A seguir, foram coletadas todas as informações que possibilitavam o cálculo do custo da pesquisa, sendo organizadas para a obtenção dos custos da matéria prima por unidade, o valor do homem/hora, o preço dos equipamentos e a depreciação dos mesmos. Com base nestas informações foi possível calcular os seguintes custos parciais: Materiais, MOD (mão de obra direta) e Custo Total dos Equipamentos (Depreciação). O emprego do modelo de custeio variável sugeriu as seguintes considerações: a mão de obra direta representou a maior participação entre os custos apurados (73,9%), indicando que o tempo de execução das tarefas tem impacto no custo total da Fitoquímica. O emprego do modelo de organização e apuração dos custos como referência de comparação e análise; estudos semelhantes podem ser aplicados para a obtenção dos custos das demais atividades para cada fase do projeto de P&D de modo a se chegar aos valores totais; o presente trabalho permitiu a elaboração de equações algébricas para representar o processo de aferição dos custos das atividades, possibilitando uma orientação para a padronização do cálculo. / The good use of resources in research and development (R & D) may enable the treatment of patients with new medicines, such as herbal medicines. The goal was to estimate the cost of the activities of Phytochemistry phase of a research project and development of a drug based on a plant species. The clipping of the activities of Phytochemistry phase allowed access to the data extraction processes, fractionation and isolation. Next, we collected all the information that enabled the calculation of the cost of research, obtaining the costs of raw materials per unit, the value of man / hour, the price of the equipment and of their depreciation. Based on this information it was possible to calculate the following partial costs: materials, MOD (direct labor) and Total Cost of equipment (depreciation). The use of variable cost model suggested the following considerations: the direct labor accounted for the largest share among the calculated costs (73.9%), indicating that the runtime of tasks impacts the total cost of Phytochemistry. The use of variable cost model made it possible to establish a criterion for the collection of information, organization and determination of costs as compared to reference and analysis; similar studies can be applied to obtain the costs of other activities for each phase of the project R & D in order to reach the total amounts; this work has enabled the development of algebraic equations to represent the process of benchmarking of the activities costs, providing guidance to standardize the calculation.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The present work describes the phytochemistry study and antimicrobial activity of the aerial parts and bark root of three species from Rhamnaceae family: Discaria americana Gilles & Hook, Colletia paradoxa Sprengel and Gouania ulmifolia Hook & Arnott. Four new cyclopeptide natural, discarene C (154), discarene D (155), discarine M (156), discarine N (157) and nine cyclopeptide alkaloids, adoutine Y (92), adoutine Y' (47), franganine (66), frangulanine (67), discarine A (59), discarine B (58), discarine C (100), discarine D (101) and myrianthine A (105), a pentacyclic triterpenoid, acid betulinic (192) and three sterols, β-Sitosterol (195), β-sitosterol-3-O-6-β-D-glucopyranoside (196) and β-sitosterol-3-O-6-stearoyl-β-D-glucopyranoside (197), were isolated of the bark root of D. americana, along with three compounds already described 192, 195, 196, two pentacyclic triterpenoids, ursolic acid (194) and ceanotic acid (193) and an ester derived from ferulic acid (198) of the aerial parts. From the aerial parts of C. paradoxa it was isolated a new compound, called seco-3,4-germanicone (205), along with the known compounds ursolic acid (194), lupeol (199), betulinic acid (192), ceanothic acid (193), taraxerol (200), taraxerone (201), seco-3,4-taraxerone (202), germanicol (203), germanicone (204), β-sitosterol (195) and β-sitosterol-3-O-6-β-D-glucopyranoside (196). From the bark root it was isolated zizyberenalic acid (206), along with compounds 192, 193, 194, 195 and 196. The extracts of the aerial parts of Gouania ulmifolia, two new pentacyclic triterpenoids were isolated, 2-hydroxy-2-nor-20(29)-lupen-27,28-dioic acid (208)and 24-hydroxy-A(1)-nor-2,20(29)-lupadien-27,28-dioic acid (209), along with the known compounds lupeol (199), betulinic acid (192), alphitolic acid (207), β-sitosterol (195) and β-sitosterol-3-O-6-β-D-glucopyranoside (196). All compounds are being described for the first time in the species. Additionally, antimicrobial activity of extracts, fractions and isolated compounds of Discaria americana, Colletia paradoxa and Gouania ulmifolia was analyzed, through the bioautography technique, measuring the inhibitory activity of the growth on different microorganisms, three Gram positive bacteria (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Staphylococcus epidermidis) and four Gram negative bacteria (Klebsiella pneumonia, Salmonella setubal, Escherichia coli and Pseudomona aeruginosa) and the fungus (Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans). / O presente trabalho descreve o estudo fitoquímico e antimicrobiano das partes aéreas e casca da raiz de três espécies pertencentes à família Rhamnaceae: Discaria americana Gilles & Hook, Colletia paradoxa Sprengel e Gouania ulmifolia Hook & Arnott. Quatro novos ciclopeptídeos naturais, discareno C (154), discareno D (155), discarina M (156), discarina N (157) e nove alcalóides ciclopeptídicos, adoutina Y (92), adoutina Y (47), franganina (66), frangulanina (67), discarina A (59), discarina B (58), discarina C (100), discarina D (101) e miriantina A (105), um triterpeno pentacíclico, ácido betulínico (192) e três esteróides, β-sitosterol (195), β-sitosterol glicosilado (196) e β-sitosterol 6'-O-acil glicosilado (197), foram isolados da casca da raiz de D. americana, juntamente com três compostos já descritos 192, 195, 196, dois triterpenos pentacíclicos, ácido ursólico (194) e ácido ceanótico (193) e um éster derivado ácido ferúlico (198) das partes aéreas. Das partes aéreas de C. paradoxa isolou-se um novo metabólito, denominado seco-3,4-germanicona (205), juntamente com os compostos conhecidos, ácido ursólico (194), lupeol (199), ácido betulínico (192), ácido ceanótico (193), taraxerol (200), taraxerona (201), seco-3,4-taraxerona (202), germanicol (203), germanicona (204), β-sitosterol (195) e β-sitosterol glicosilado (196). Da casca da raiz foi isolado ácido ziziberenálico (206), juntamente com os compostos 192, 193, 194, 195 e 196. Dos extratos das partes aéreas de Gouania ulmifolia foram isolados dois novos triterpenos pentacíclicos, ácido 2-hidroxi-2-nor-20(29)-lupen-27,28-dióico (208) e ácido 24-hidroxi-A(1)-nor-2,20(29)-lupadien-27,28-dióico (209), juntamente com os compostos conhecidos lupeol (199), ácido betulínico (192), ácido alfitólico (207), β-sitosterol (195) e β-sitosterol glicosilado (196). Todos compostos estão sendo descritos pela primeira vez na espécie. Adicionalmente, foram analisadas as atividades antimicrobianas dos extratos, frações e metabólitos isolados de Discaria americana, Colletia paradoxa e Gouania ulmifolia, através da técnica de bioautografia, medindo-se as atividades inibitórias do crescimento sobre diferentes microorganismos, três bactérias Gram positivas (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Staphylococcus epidermidis) e quatro bactérias Gram negativas (Klebsiella pneumonia, Salmonella setubal, Escherichia coli e Pseudomona aeruginosa) e os fungos (Saccharomyces cerevisiae e Candida albicans).

Plants from Brazilian flora were chosen and studied for their in vitro and in vivo antioxidant and in vivo hepatoprotetive activity, especially in relation to phenolic compounds which have several health benefits. These plants include Phyllanthus niruri, Solanum fastigiatum, Solidago microglossa and Baccharis trimera. The aqueous extracts of leaves showed inhibition against thiobarbituric acid reactive species (TBARS), induced by different pro-oxidants (10 μM FeSO4 and 5 μM sodium nitroprusside) in rat liver and brain homogenates. The extracts also lowered the formation of TBARS in phospholipid extracted from egg yolk. On the lipid peroxidation assay the order of antioxidant activity was Solidago microglossa>Phyllanthus niruri> Solanum fastigiatum> Baccharis trimera. The free radical scavenging activities of the extract were determined by the quenching of a stable 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical. The IC50 value of Solidago microglossa (3.8± 0.1 μg/ml), Phyllanthus niruri (43.4 ± 1.45 μg/ml), Solanum fastigiatum (68.96±1.25 μg/ml) and Baccharis trimera (415.2±15.2 μg/ml) indicates that the order of antioxidant activity is Solidago microglossa > Phyllantus niruri > Solanum fastigiatum > Baccharis trimera. The hepatoprotective activity of the extracts were also demonstrated in vivo against paracetamol-induced liver damage, as evidenced by the decrease in serum glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), and glutamate pyruvate transaminase (GPT), and decreased catalase activity in the liver in treatment groups, compared to the control. The aqueous extract also showed significant (p<0.05) hepatoprotective activity that was evident by enzymatic examination and brought back the altered levels of TBARS, non-protein thiol and ascorbic acid to near the normal levels in a dose dependent manner. Acute toxicity studies of Solanum fastigiatum revealed that the LD50 value of the extract is more than the dose 4 g/kg body weight of mice whereas, the genotoxicity of Solidago microglossa was tested using comet assay. The results obtained on the comet assay revealed that under the experiment used the extract was not genotoxic to human lymphocytes at a relatively high concentration of 0.5 mg/ml. The content of phenolics was determined using Folin Ciocalteu,s assay. The phenolic content was found to be the highest in Solidago microglossa and the lowest in Baccharis trimera. Phytochemical analysis of these plants was carried out on the basis of TLC/HPLC. The TLC analysis showed the presence of rutin in aqueous extract of Phyllanthus niruri, while, Solanum fastigiatum showed the presence of rutin and quercetin. The Phenolic profile of Solidago microglossa and Baccharis trimera was determined by using High performance liquid chromatography. On the basis of the HPLC data, quercetin (254.88±5.1 μg/ml), rutin (342.2±7.1 μg/ml) and gallic acid (2320.8±13.2 μg/ml) have been identified and quantified in the ethanolic extract of Solidago microglossa. Whereas, HPLC analysis revealed the presence of gallic acid (76.8±7.2 μg/ml) as a major compound while, rutin (20.1±2.5 μg/ml) and quercetin (10.1±1.4 μg/ml) relatively showed minor contribution in the aqueous extract of Baccharis trimera. In conclusion, the crude extract of these plants showed high antioxidant and free radical scavenging activities which are related to the presence of phenolic compounds. These results may have implications in the use of the extracts as a therapeutic agent in the prevention of oxidative stress related diseases. / Plantas da flora Brasileira foram escolhidas e estudadas por sua atividade antioxidante tanto in vivo como in vitro e também por sua atividade hepatoprotetora in vivo, especialmente relacionadas a compostos fenólicos que possuem inúmeros benefícios para a saúde. Essas plantas incluem Phyllanthus niruri, Solanum fastigiatum, Solidago microglossa e Baccharis trimera. O extrato aquoso destas folhas mostraram inibição contra a produção de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), induzidas por diferentes prooxidantes (10 μM FeSO4 e 5 μM de nitruprussiato de sódio) em homogeneizado de fígado e cérebro de ratos.Esses extratos também diminuiram a formação de TBARS em fosfolipídios extraídos de gema de ovo. No ensaio para peroxidação lipídica a ordem de atividade antioxidante foi Solidago microglossa> Phyllanthus niruri > Solanum fastigiatum > Baccharis trimera. A atividade detoxificante de radicais livres dos extratos foi determinada pela quelação do radical 2,2-difenil-1-picrilhydrazil (DDPH). Os valores de IC50 para Solidago microglossa (3.8 ± 0.1 μg/ml), Phyllanthus niruri (43.4 ± 1.45 μg/ml), Solanum fastigiatum (68.96 ± 1.25 μg/ml) e Baccharis trimera (415.2 ± 15.2 μg/ml) indicam que a ordem de atividade antioxidante é Solidago microglossa> Phyllanthus niruri > Solanum fastigiatum > Baccharis trimera. Também foi demonstrada a atividade hepatoprotetora dos extratos contra o dano hepático induzido por paracetamol in vivo, evidenciado pela diminuição nos níveis séricos da glutamato oxaloacetato transaminase (GOT) e glutamato piruvato transaminase (GPT), decréscimo na atividade da catalase no fígado do grupo tratado em comparação com o controle. O extrato aquoso mostrou também significativa (p<0,05) atividade hepatoprotetora a qual foi evidenciada por verificação de atividade enzimática e restauração dos níveis de TBARS, além disso, restauração a valores normais de forma dose dependente dos níveis de tiol não-proteico e dos níveis de ácido ascórbico. Estudos sobre a toxicidade aguda da Solanum fastigiatum revelaram que o valor da LD50 para o extrato são maiores que 4 g/Kg de peso corporal de camundongos enquanto que a genotoxicidade da Solidago microglossa foi avaliada usando o teste do cometa. Os resultados obtidos no teste do cometa revelaram que nesta condição experimental o extrato não foi genotóxico para linfócitos humanos sob concentrações relativamente altas de 0.5 mg/ml. O conteúdo fenólico foi determinado usando o teste Folin Ciocalteu. A Solidago microglossa apresentou o maio teor fenólico enquanto que a Baccharis trimera apresentou a menor quantidade. Análises fitoquímicas dessas plantas foram realizadas através de TLC/HPLC. As análises TLC revelaram a presença de rutina no extrato aquoso de Phyllanthus niruri, enquanto que na Solanum fastigiatum foi observado à presença de rutina e quercetina. O perfil fenólico da Solidago microglossa e da Baccharis trimera foi determinado por cromatografia líquida de alto desempenho. Baseado nos dados do HPLC foi identificado: quercetina (254.88 ± 5.1 μg/ml), rutina (342.2 ± 7.1 μg/ml) e ácido gálico (2320.8 ± 13.2 μg/ml) no extrato etanólico da Solidago microglossa. Além disso, analises no HPLC revelaram a presença de ácido gálico (76.8 ± 7.2 μg/ml) como o principal constituinte, enquanto que a rutina (20.1 ± 2.5 μg/ml) e quercetina (10.1 ± 1.4 μg/ml) apresentaram uma menor contribuição no extrato aquoso de Baccharis trimera . Concluindo, o extrato cru dessas plantas apresentou alta atividade antioxidante e detoxificadora de radicais livres as quais estão relacionadas à presença de compostos fenólicos. Esses resultados implicam no uso dos extratos como agentes terapêuticos na prevenção de doenças relacionadas ao estresse oxidativo.

The phytochemical and biological study of the species S. lentiscifolius, S. terebinthifolius, S. molle and S. polygamus known as ―aroeiras‖ (Anacardeaceae) distributed in Rio Grande do Sul, was carried out to establish the chemical composition of volatile oils obtained by hydrodistillation of aerial parts of leaves, flowers and fruits collected in different seasons. In addition, leaves and fruits were analyzed and compared to determine seasonal variations in the oils constitution. The oils chemical composition was determined by Gas Chromatography coupled with a Mass Spectrometry (GC-MS). The yields of the studied species oils essential aerial parts ranged from 0.14-2-13%, depending on the stage of development and part collected. One hundred and thirty-five compounds were identified from the oils essential, representing approximately 90% of the oils from leaves, flowers and fruits collected between spring and summer in 2005 to 2011. The volatile oils of the analyzed species showed a constant qualitative standard in the compounds: α-pinene, β-pinene, δ-2- carene, limonene for majority monoterpenes; germacrene-D, bicyclogermacrene, δ-cadinene, spatulenol, caryophyllene oxide and -cadinol for majority sesquiterpenes in the leaves oil; α- pinene, mircene epi-cubenol, cubenol and spatulenol for majority sesquiterpenes in the flowers oil; α-pinene, β-pinene mircene, epi-cubenol, cubenol, spatulenol, caryophyllene oxide and -cadinol for majority sesquiterpenes in the oil fruits. The quantitative variations among the different constituents in oils of different species were quite relevant. Additionally, considering the therapeutic potential and the compounds described, the phytochemical study and antioxidant and antimicrobial activity were evaluated in the oils, crude extracts, aqueousextracts, isolated and derivative compounds. The aqueous extracts obtained by 9 hydrodestillation, in part were dried by lyophilization and in part were subjected to a liquidliquid partition using hexane solvent, ethyl acetate and n-butanol. Besides these, the crude extract was prepared from the leaves of S. lentiscifolius. The chromatographic fraction of crude extract and ethyl acetate led to the isolation and identification of nonadecanol (1) and moronic acid (2). From moronic acid (2) by employing NaBH4 reduction reaction were obtained the derivatives morolic acid (3) and 3-epi-morolic acid (4). The analysis of S. lentiscifolius ethyl acetate aqueous extract led to the isolation of the compound FLA-1 (5) and galic acid (6), from this was obtained the derivative methyl gallate (7). The S. molle nbutanol aqueous extract led to the isolation of the flavonoid quercetin (8) and rutin (9). The substances were identified by physical data and spectroscopic techniques (1H NMR, 13C, COSY, HMQC, HMBC), mass spectrometry and X-rays. The aqueous extracts analysis by High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) led to the characterization of galic acid (6), quercetin (8) and rutin (9) comparing to the existing laboratory standards. All extracts present galic acid (6), except to S. molle. The oils antimicrobial activity of the species S. lentiscifolius, S. terebinthifolius, S. molle and S. polygamus were evaluated by microdilution method using a collection of pathogenic microorganisms composed of bacteria and fungi. The results showed that the obtained oils from different plants were active using the most of the microorganisms tested. Best results were found in the fruits oils of S. terebinthifolius. The extracts and fractions of S. lentiscifolius, S. terebinthifolius and S. molle have also been tested as antibacterial and antifungal activity. Best results were found for the extract of S. lentiscifolius with a Minimum Inhibitory Concentration (MIC) from 31.2 to 12.5 mg/mL. In addition, isolated compounds extracts were evaluated as antioxidant activity using 2,2-diphenyl-picrylhydrazyl (DPPH). All extracts and compounds tested showed inhibition results for free radical DPPH. / O estudo fitoquímico e biológico das espécies S. lentiscifolius, S. terebinthifolius, S. molle e S. polygamus conhecidas como ―aroeiras‖ (Anacardiaceae), distribuídas no Rio Grande do Sul, foi realizado visando o estabelecimento da composição química de óleos voláteis obtidos por hidrodestilação das partes aéreas (folhas, flores e frutos) coletadas em diferentes estações do ano. Além disso, folhas e frutos foram analisados e comparados para determinar as variações sazonais na constituição dos óleos. A composição química dos óleos foi determinada através de Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CGEM). Os rendimentos dos óleos essenciais das partes aéreas das espécies estudadas variaram de 0,14-2,13%, dependendo do estágio de desenvolvimento e da parte coletada. Aproximadamente cento e trinta e cinco compostos foram identificados a partir dos óleos essenciais, representando aproximadamente 90% dos óleos das folhas, flores e frutos, coletados entre a primavera e o verão no período 2005 a 2011. Os óleos volatéis das espécies analisadas apresentaram um padrão qualitativo constante dos compostos: α-pineno, β-pineno, δ-2-careno, limoneno como monoterpênicos majoritários; germacreno-D, biciclogermacreno, δ-cadineno, espatulenol, óxido de cariofileno -cadinol com os esquiterpenos majoritários no óleo das folhas; α-pineno, mirceno epi-cubenol, cubenol, espatulenol como sesquiterpenos majoritários no óleo das flores; α-pineno, β-pineno mirceno como monoterpenos e epicubenol, cubenol, espatulenol, óxido de cariofileno e -cadinol como sesquiterpenos majoritários no óleo dos frutos. As variações quantitativas entre os diferentes constituintes 7 nos óleos das diferentes espécies foram marcantes. Adicionalmente, considerando-se o potencial terapêutico e os compostos descritos para o gênero, foi realizado o estudo fitoquímico e avaliadas as atividades antimicrobianas e antioxidantes dos óleos, dos extratos brutos, dos aquosos, dos compostos isolados e dos derivados. Os extratos aquosos obtidos do processo de hidrodestilação, parte foi seco por liofilização parte foi submetido à partição líquido-líquido com os solventes hexano, acetato de etila e n-butanol. Além desses, foi preparado o extrato bruto das folhas de S. lentiscifolius. O fracionamento cromatográfico do extrato bruto de acetato de etila de S. lentiscifolius levou ao isolamento do álcool graxo (119), ácido morônico (120). Também foram obtidos dois derivados do ácido morônico (120), por reação de redução empregando NaBH4, os quais foram caracterizados como ácido morólico (121) eácido 3-epi- morólico (122). A análise do extrato aquoso de acetato de etila de S. lentiscifolius levou ao isolamento do composto FLA-1 (115) e do ácido gálico (116), do qual foi obtido o derivado galato de metila (118). Do extrato aquoso n-butanólico de S. molle foi isolado o flavonóide quercetina (90) e rutina (117). As substâncias foram identificadas por dados físicos e técnicas espectroscópicas (RMN de 1H, 13C, COSY, HMQC e HMBC) espectrometria de massas e raios-X. A análise dos extratos aquosos por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) levou à caracterização do ácido gálico (116), quercetina (90) e rutina (117) por comparação com padrões existentes no laboratório. Todos os extratos apresentaramo ácido gálico (116), exceto nos extratos de S. molle. A atividade antimicrobiana dos óleos das espécies S. lentiscifolius, S.terebinthifolius, S.molle e S. polygamus foram avaliadas pelo método de microdiluição frente uma coleção de microorganismos patogênicos, compostos por bactérias e fungos. Os resultados demonstraram que os óleos obtidos das diferentes plantas foram ativos frente à maioria dos microorganismos testados. Os melhores resultados foram encontrados para os óleos dos frutos de S. terebinthifolius. Os extratos brutos e frações de S. lentiscifolius, S. terebinthifolius e S. molle foram testados também quanto à sua atividade antibacteriana e antifúngica. Os melhores resultados foram encontrados para o extrato de S. lentiscifolius com uma Concentração Inibitória Mínima (CIM) 31,2- 12,5μg/mL. Além disso, os extratos e os compostos isolados foram avaliados quanto à atividade antioxidante, utilizando-se 2,2-difenil-picrilhidrazil (DPPH). Todos os extratos e compostos testados apresentaram resultados de inibição ao radical livre DPPH.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6344.pdf: 28928980 bytes, checksum: e00be5b82af995a60fd2dc884613b411 (MD5) Previous issue date: 2014-03-26 / Financiadora de Estudos e Projetos / This paper describes the variation of the chemical profile study of citros after inoculation of the bacterium "Candidatus Liberibacter asiaticus", responsible for Huanglongbing (ex greening), one of the most serious diseases causing several losses in the Brazilian citrus industry. The bacterium "Ca. Liberibacter " was inoculated in seedlings of the" Valencia "(Citrus sinensis (L.) Osbeck) grafted on "Swingle" (Poncirus trifoliata x Citrus paradisi) and was evaluated the change of secondary metabolites by the development of analytical methods such as HPLC-UV, LC-MS/MS, LC-UVSPE- NMR and chemometric tools. The chemometric methods PCA and S-PLOT applied to data obtained in the studies by LC-MSE allowed to discriminate infected plants from healthy plants, and also allowed the characterization of the compounds that most contribute to this differentiation. By analyzing the change in the chemical profile of citrus studied by HPLC-UV-SPE-NMR, it was able to detect the change of some coumarins in the roots and stem from rootstock, and glycosides flavonoid in leaves, indicating that these compounds may be involved in defense mechanism of the plant, and may be acting as a Phytoanticipins. Aiming to better interpret this change observed, also performed a quantitative variation of some secondary metabolites, as coumarin identified in the roots, and flavonoids identified in leaves. This technique showed an increase of coumarins in infected plants, while there was a decrease in all the flavonoids in the leaves in infected treatment, indicating that the plant defense is in the roots. Finally, a phytochemical study of citrus was performed aiming obtain patterns compounds, and this study resulted in the isolation of 13 substances, from several classes of secondary metabolites. / O presente trabalho descreve o estudo da variação do perfil químico de citros após a inoculação da bactéria Candidatus Liberibacter asiaticus , responsável pelo Huanglongbing (ex-greening) que é uma das doenças mais sérias causadoras de prejuízos na citricultura brasileira. Para isso, inoculou-se a Ca. Liberibacter em mudas de a Valência (Citrus sinensis (L.) Osbeck) enxertadas em Swingle (Citrus paradisi X Poncirus trifoliata) e avaliou-se a variação dos metabólitos secundários através do desenvolvimento de métodos analíticos como HPLC-UV, LC-MS/MS, LC-UV-SPE-NMR e de ferramentas quimiométricas. As ferramentas quimiométricas (PCA e S-PLOT) aplicadas aos dados obtidos nos estudos de LC-MS/MS permitiram discriminar as plantas infectadas daquelas sadias, e também permitiram a caracterização dos compostos que mais contribuem para essa diferenciação. Ao analisar a variação do perfil químico dos citros doentes e sadios através da HPLC-UV-SPE-NMR foi possível detectar a variação principalmente de algumas cumarinas nas raízes e caule do porta enxerto, e flavonoides glicosilados nas folhas, indicando que estes compostos podem estar envolvidos no mecanismo de defesa da planta, e podem estar atuando como uma fitoantecipina. Para melhor interpretar essa variação observada, realizou-se também a variação quantitativa de alguns metabólitos secundários, como cumarinas identificadas nas raízes, e flavonóides identificados nas folhas. A partir dessa técnica foi possível verificar o aumento das cumarinas nas plantas infectadas com a bactéria, enquanto nas folhas observou-se a diminuição de todos os flavonóides no tratamento infectado, indicando que a defesa da planta parece estar nas raízes. Por fim, foi realizado um estudo fitoquímico de citros com o objetivo de obter substâncias padrões, que resultou no isolamento de 13 metabólitos secundários de diversas classes.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissPVA.pdf: 9142806 bytes, checksum: 948d3cc5bc8ab3c444a18bb8a31d7d51 (MD5) Previous issue date: 2006-08-04 / This work describes sixteen substances isolated by C. limonia: xanthyletin, seselin, xanthoxyletin, trans-kellactone, trans-decursidinol, junosmarin, scopoletin, isoscopoletin, demethylsuberosin, xanthoarnol, clausarin, limonianin, 5,4 - dihydroxy-6-(3 -methyl-2 -buthenyl)-2 ,2 -dimethylpyrano(5 ,6 -7,8)flavanone, &#946;- sitosterol, estigmasterol e campesterol. Three of them are especially important: 5,4 -dihydroxy-6-(3 -methyl-2 -buthenyl)-2 ,2 -dimethylpyrano(5 ,6 -7,8)flavanone that was unknown in the literacy, trans-kellactone and trans-decursidinol that weren t found previously in the Rutaceae family but at Apiaceae family. The chemical constituents isolated by the upper and low parts from the grafted plant (C. sinensis on C. limonia) and from ungrafted C. limonia were compared. It indicated that the grafted plant has a metabolic translocation process. The Minimum Inhibitory Concentration of many substances isolated from plants of Rutaceae family was related. The test was against the bacteria Xylella fastidiosa that causes Citrus Variegated Chlorosis. The successful classes the pyranocoumarins and flavones whose MIC was 1,0 mg/mL. We have studied the plant-insect interaction and discovered that the grafted plant (C. sinensis on C. limonia) undergoes chemical alteration of the volatile compounds and essential oils when it is in contact with the sharpshooter. The sharpshooters Oncometopia facialis belongs to the Cicadellidae family and carries the Xylella fastidiosa. This chemical alteration was greater in the volatile compounds than in the essential oils of the plants. Different amounts of Hesperidin were found in the grafted plant when different species of Citrus were analized: C. limonia without CVC, C. reticulata without CVC, C. sinensis on C. limonia with and without CVC. The C. limonia presented the lower amount of the secondary metabolic and the C. sinensis on C. limonia presents the higher amount. The higher amounts of Hesperidin were found in sick plants witch corresponds the metabolic alteration that occurs when the plant is infected by the bacteria. / Neste trabalho estão descritas dezesseis substâncias isoladas de C. limonia: xantiletina, seselina, xantoxiletina, trans-kelactona, trans-decursidinol, junosmarina escopoletina, isoescopoletina, demetilsuberosina, xantoarnol, clausarina, limonianina, 5,4 -diidróxi-6-(3 -metil-2 -butenil)-2 ,2 -dimetilpirano(5 ,6 -7,8) flavanona, &#946;-sitosterol, estigmasterol e campesterol; sendo uma destacada, a 5,4 - diidróxi-6-(3 -metil-2 -butenil)-2 ,2 -dimetilpirano(5 ,6 -7,8) flavanona, por ser inédita na literatura; e duas, a trans-kelactona e trans-decursidinol, não isoladas anteriormente em plantas da família Rutaceae, apenas na família Apiaceae. Uma comparação entre os constituintes químicos isolados da parte superior e inferior da planta enxertada C. sinensis sobre C. limonia e do C. limonia não enxertado foi realizada, indicando que a planta enxertada possui um processo de translocação metabólita. São relatadas as Concentrações Mínimas Inibitórias de diversas substâncias, todas isoladas de plantas da família Rutaceae, contra a bactéria causal da Clorose Variegada dos Citros, Xylella fastidiosa. As classes promissoras foram as piranocumarinas e flavanonas, sendo a Xantiletina e a Catequina, com MIC igual a 1,0 mg/mL. Foi realizado um estudo de interação planta-inseto, o qual indicou que a planta enxertada C. sinensis sobre C. limonia apresenta uma alteração na composição química dos seus voláteis e em seus óleos essenciais quando em contato com as cigarrinhas Oncometopia facialis, pertencentes a família Cicadellidae, as quais são transmissores de Xylella fastidiosa, correspondendo a uma resposta da planta ao ataque. A modificação dos constituintes químicos e suas porcentagens foi mais perceptível nos voláteis do que nos óleos essenciais das plantas. A planta enxertada também sofreu uma alteração em um metabólito secundário, a Hesperidina, quando foi feita a análise do teor desta substância em diferentes espécies de Citrus, C. limonia sem CVC, C. reticulata sem CVC, C. sinensis sobre C. limonia com e sem CVC. O C. limonia foi a espécie que apresentou menor quantidade de Hesperidina e C. sinensis sobre C. limonia foi o que apresentou o maior teor. O estudo comparativo da quantidade de Hesperidina da planta enxertada com e sem sintomas de CVC indicou que esta possui uma maior quantidade da substância quando doente, correspondendo a uma alteração metabólita que ocorre na planta quando infectada pela bactéria.