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Resistência a fungicidas estrobilurinas em populações de Pyricularia oryzae de áreas de trigo no Brasil

Oliveira, Samanta Cristiene de [UNESP] 19 December 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-13T12:10:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-19. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-13T12:25:26Z : No. of bitstreams: 1 000835322.pdf: 1349402 bytes, checksum: 6824fb0da8e130401e3643e5692b2aad (MD5) / A brusone, causada por Pyricularia oryzae, é a doença mais importante do trigo em todo Centro-Sul do Brasil. Seu controle tem dependido, fortemente do uso de fungicidas estrobilurinas, inibidores de quinona oxidase, QoI. Resistência aos fungicidas QoI (QoI-R) já foram constatadas para diversos patossistemas em todo o mundo. Neste trabalho testou-se a hipótese principal de que as populações brasileiras de P. oryzae associadas com o trigo permanecem sensíveis aos fungicidas QoI. Em contraste, foi testada a hipótese alternativa de que o uso extensivo e consecutivo de fungicidas QoI nas duas últimas décadas para o manejo da brusone do trigo na região Centro-Sul do Brasil, levou à emergência e a distribuição generalizada de QoI-R em populações de P. oryzae associadas ao trigo nas principais áreas de cultivo do país. Determinou-se, também, se outras espécies de plantas poáceas adjacentes a campos de trigo hospedavam populações QoI-R de P. oryzae, servindo como um reservatório de inóculo do patógeno resistente. Os principais objetivos foram estudar a ocorrência e a distribuição da resistência aos fungicidas QoI em populações de P. oryzae associadas ao trigo e a outras espécies de plantas poáceas adjacentes a campos de trigo no Centro-Sul do Brasil, examinando as mutações no gene citocromo b (cyt b) e determinando a sensibilidade dos isolados de P. oryzae a azoxistrobina em experimentos in vitro. Foi analisada a distribuição generalizada de QoI-R em populações de P. oryzae em campos brasileiros de trigo de 325 isolados, dos quais 198 foram derivados de trigo e 91 de outras plantas poáceas amostradas nos mesmos campos de trigo, em 2012, e 36 isolados de trigo obtidos em 2005. O sequênciamento do gene cyt b distinguiu nove haplótipos, dois compartilhados entre trigo e outras plantas poáceas e sete exclusivos de outras plantas poáceas. Quatro desses haplótipos... / Wheat blast disease caused by Pyricularia oryzae is the most important across central- southern Brazil. Its control has relied strongly on strobilurin fungicides (Quinone oxidase inhibitors, QoI). Resistance to QoI (QoI-R) has been reported for several pathosystems worldwide. In this study we tested the hypothesis that the main Brazilian populations of P. oryzae associated with wheat remain sensitive to QoI fungicides. In contrast, the alternative hypothesis that extensive and consecutive use of QoI fungicides in the last two decades for the management of wheat blast in the Center-South region of Brazil was tested, led to the emergence and widespread distribution QoI-R in populations P. oryzae associated with the wheat in the main growing areas of the country. It is determined also whether other species of grasses adjacent fields of wheat plants housed QoI R-populations of P. oryzae, serving as a resistant pathogen inoculum reservoir. The main objectives were to study the occurrence and distribution of resistance to QoI fungicides in P. oryzae populations associated with wheat and other species of plants grasses adjacent to wheat fields in South-Central Brazil, examining mutations in the cytochrome b gene (cyt b) and determining the sensitivity of the isolates of P. oryzae azoxystrobin in vitro experiments. In this study, we report the widespread distribution of QoI-R in populations of P. oryzae from Brazilian wheat fields of 325 isolates, of which 198 derived from wheat fields and 91 from weeds within wheat fields sampled in 2012, and 36 from wheat sampled in 2005. Sequencing of cytB gene distinguished nine haplotypes, two of which shared between wheat and weeds-derived isolates, and seven exclusive to weed isolates. Four of these haplotypes had the G143A mutation associated with resistance to QoI (QoI-R). While 90% of the wheat isolates of P. oryzae and 48% of the weed-derived ones sampled in 2012 ...
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Proliferação celular em gestações naturais e de conceptos bovinos transgênicos e clonados, que expressam a proteína fluorescente verde (GFP)

Oliveira, Fernanda Paes de [UNESP] 10 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:41Z : No. of bitstreams: 1 000843813.pdf: 1500567 bytes, checksum: 2816e72bf804aaefb588c0028a1aa523 (MD5) / Para o crescimento placentário e a nutrição fetal, altas taxas de crescimento e diferenciação celular são necessárias para um balanço adequado entre proliferação e morte celular das células placentárias. Estas células possuem propriedades específicas em relação a suas funções metabólicas, endócrinas e angiogênicas, sendo fundamentais para o desenvolvimento do concepto ao longo da prenhez. Neste estudo, foi avaliada a ocorrência de proliferação celular em placentônios provenientes de conceptos bovinos transgênicos clonados (n=5) e de inseminação artificial (IA) (n=18), nos períodos de 60 e 90 dias de gestação, que tiveram seu desenvolvimento interrompido e houve a recuperação do útero gestante. As amostras de placentônio foram recortadas e fixadas em solução aquosa de paraformoldeído a 4% em tampão fosfato de sódio (PBS) a 0,1M pH 7.4, para verificação da morfologia, e realização da técnica de imuno-histoquímica. Os resultados obtidos foram comparados entre bovinos clonados transgênicos e de IA. Em todos os grupos e períodos gestacionais, o epitélio fetal apresentou marcação positiva para proliferação celular. Aos 60 dias a marcação positiva no epitélio uterino das gestações manipuladas foi pouco evidente em relação às de gestações naturais. Por sua vez aos 90 dias a imunorreatividade dos placentônios dos conceptos clonados, foi muito intensa não só no epitélio, mas também no tecido conjuntivo fetal, fato não observado na gestação natural, onde a reação positiva foi pouco evidente no tecido conjuntivo fetal. Neste estudo foi demonstrado um possível desequilíbrio nos padrões de proliferação celular nos conceptos bovinos clonados transgênicos, pois no início da gestação (60 dias) apresentaram menor atividade proliferativa e aos 90 dias um aumento, podendo ser este fato um dos fatores que levam às anormalidades placentárias. Desse modo os resultados da verificação.. / For the placental growth and fetal nutrition, high rates of growth and differentiation are necessary for a proper balance between proliferation and cell death of placental cells. These cells have specific properties in relation to its metabolic, endocrine and angiogenic function and they are fundamental to the development of the fetus throughout pregnancy. In this study, the occurrence of cell proliferation was assessed in placentomes by cloned transgenic bovine conceptuses (n=5) and by artificial insemination (AI), in the 60 and 90 days of gestation, and they development were interrupted and recovering the pregnant uterus. The samples were cut and fixed in paraformaldehyde 4% aqueous solution in sodium phosphate buffer (PBS) 0.1M at pH 7.4, for verification of the morphology and performing immunohistochemistry. The results were compared with bovine cloned and AI. The reults obtained were compared between transgenic cloned bovine conceptuses and AI. In all groups and gestational periods, the fetal epithelium presents positive labeling to cell proliferation. In 60 days gestation the positive labeling of the manipulated gestations was less evident in relation to the natural gestations. On the other hand, in 90 days gestation the immunoreactivity of the placentomes of the cloned conceptuses was more intense, not just in the epithelium, but also in the fetal connective tissue, fact not observed in the natural gestation, were the positive reaction was less evident in the fetal connective tissue. In this study was noted a possible imbalance in the patterns of the cell proliferation in the transgenic cloned bovine conceptuses, because in the early gestation (60 days) they presented a lesser proliferative activity, and in the 90 days a increase, may be this fact one of the factors leading to placental abnormalities. Therefore, the results of verification of cell proliferation and understanding are important for the understanding of possible fails...
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Descrição cariótica e novas ocorrências de cromossomos supranuméricos em Moenkhausia Eigenmann, 1903 (Characiformes: Characidae)

Nascimento, Cristiano Neves do [UNESP] 20 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-20. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:34Z : No. of bitstreams: 1 000841299.pdf: 1117680 bytes, checksum: 82417d01cae798e91cfee1b8826da5bf (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O mapeamento cromossômico de sítios de DNA repetitivo vem sendo realizado em vários estudos citogenéticos em peixes e tem permitido uma melhor caracterização da biodiversidade e evolução genômica da ictiofauna Neotropical. Dentre as diversas espécies de peixes distribuídas nesta importante área geográfica, podemos destacar o gênero Moenkhausia, um dos mais especiosos grupos de peixes da família Characidae. Do ponto de vista citogenético, este gênero demonstra variação do número diploide de 48 a 50 cromossomos, bem como a presença de microcromossomos B descritos para diferentes espécies/populações. No entanto, estudos citogenéticos de espécies de Moenkhausia coletadas em riachos de cabeceira da bacia Amazônica e bacia do Alto rio Paraguai ainda são incipientes, bem como os estudos relativos à distribuição de DNAs repetitivos nos genomas de diferentes espécies de Moenkhausia. Neste sentido, o presente trabalho teve como objetivo a caracterização cariotípica de Moenkhausia cosmops, M. cf. forestii, M. cf. nigromarginata, M. oligolepis e Moenkhausia sp. coletadas em diferentes rios e riachos de cabeceira da bacia Amazônica e bacia do Alto rio Paraguai. Todas as espécies foram analisadas através de técnicas citogenéticas clássicas (coloração com Giemsa, localização das RONs pela impregnação por Nitrato de Prata e bandamento C) e molecular (hibridação in situ fluorescente com sondas de DNAr 5S e 18S, histona H1, snDNA U2 e sequências teloméricas (TTAGGG)n). Todas as espécies/populações analisadas apresentaram 2n=50 cromossomos, porém com fórmulas cariotípicas distintas entre elas. O bandamento C revelou um padrão de bandas heterocromáticas similar entre essas espécies, exceto em M. cf. nigromarginata. A impregnação por Nitrato de Prata evidenciou Ag-RONs simples em todas as espécies analisadas. A FISH utilizando o DNAr 18S como sonda confirmou os resultados obtidos com o Nitrato de Prata e... / The cytogenetic mapping of repetitive DNA has been applied in several studies in fish, which allowed a better characterization about the biodiversity and genomic evolution of Neotropical ichthyofauna. Among the several fish species living in this area, the genus Moenkhausia, one of the specious groups inside Characidae, is remarkable. From a cytogenetic point of view, this genus show variations in diploid numbers of 48 to 50 chromosomes, as well as the occurrence of B chromosomes in different species/populations. However, cytogenetic studies in Moenkhausia collected at different rivers from the Amazon and Upper Paraguay River basins are scarce, as well as studies investigating the chromosomal distribution of repetitive DNAs in different species. In this sense, the present study aimed to characterize the karyotypes of Moenkhausia cosmops, M. cf. forestii, M. cf. nigromarginata, M. oligolepis and Moenkhausia sp. collected at different sites in the Amazon and Upper Paraguay River basins. All species were analyzed using classical (conventional staining with Giemsa, localization of NORs by impregnation with Silver nitrate and C-banding) and molecular (fluorescent in situ hybridization with 5S and 18S rDNA, H1 histone, U2 snDNA and telomeric sequences (TTAGGG)n probes). All the herein analyzed species showed 2n=50 chromosomes, with different karyotype formulas. C-banding evidenced similar patterns of heterochromatin distribution in all species, except in M. cf. nigromarginata. Silver nitrate staining evidenced simple Ag-NORs in all species and FISH with 18S rDNA probes confirmed these results e revealed additional sites in M. oligolepis. The 5S rDNA was interstitially located in multiple sites in all species. Notably, both ribosomal sites were found in synteny in one population of M. oligolepis. The H1 histone sites were co-located in a single pair with 18S rDNA and the U2 snDNA was located at multiple sites in all species. Additionally, the ...
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Estrutura genética de populações de Rhizoctonia oryzae-sativae do arroz em São Paulo, Brasil, e em meta, Colômbia, e potencial adaptativo do patógeno à Urochloa spp

Pereira, Danilo Augusto dos Santos [UNESP] 30 March 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:27:02Z : No. of bitstreams: 1 000843759.pdf: 1198801 bytes, checksum: a7d728ac692d7c1e17e88074d6859d76 (MD5) / O complexo de manchas da bainha do arroz engloba três doenças causadas por diferentes espécies de Rhizoctonia: a queima-da-bainha (causada R. solani AG-1 IA), a mancha agregada da bainha (R. oryzae-sativae) e a mancha da bainha (R. oryzae). Distinguir os agentes causais é um passo crítico para manejá-los eficazmente. Em levantamento recente efetuado em cinco áreas de cultivo de arroz no Vale do Paraíba, Brasil, e nos Llanos na Colômbia, R. oryzae-sativae, o patógeno da mancha agregada da bainha, foi a espécie predominante em ambos os países. Neste estudo, nosso principal objetivo foi determinar a estrutura genética das populações de R. oryzae- sativae do arroz no agroecossistema da região do Vale do Paraíba e nos Llanos Colombianos. Inferiu-se sobre o fluxo gênico entre populações do patógeno, dentro e entre os países, e sobre o modo reprodutivo predominante. Nosso segundo objetivo foi determinar o potencial de duas populações brasileiras de R. oryzae-sativae em adaptar-se a espécies forrageiras do gênero Urochloa. Uma vez que essas espécies de forrageiras são cultivadas em áreas adjacentes ou em rotação com arroz, podem estar exercendo elevada pressão de seleção sobre as populações de R. oryzae- sativae. Análises da estrutura genética de populações foram baseadas na genotipagem de isolados de quatro populações do patógeno usando cinco marcadores microssatélites. Populações próximas e distantes apresentaram indícios de fluxo gênico. Evidências de reprodução sexuada nas populações do patógeno e a baixa fração clonal, indicaram a predominância de um sistema reprodutivo recombinante. É provável que basidiósporos desempenhem papel mais importante no ciclo da doença do que se supunha anteriormente. Isolados das duas populações brasileiras de R. oryzae-sativae foram patogênicos e apresentaram variação na agressividade à Urochloa spp., porém com baixos índices de herdabilidade,... / The rice sheath-blight complex comprises three diseases caused by different Rhizoctonia species: sheath blight (caused by R. solani AG-1 IA), aggregated sheath spot (R. oryzae-sativae), and sheath spots (R. oryzae). To be able to distinguish among the causal agents is a critical step in order to manage them effectively. In a recent survey in five rice cropping areas from the Paraíba Valley region, Brazil, and from the Llanos in Colombia, R. oryzae-sativae (the aggregated sheath spot pathogen) was the predominant species on both countries. In this study, our primary objective was to determine the genetic structure of populations of R. oryzae-sativae from rice paddy fields sampled from the Paraiba Valley and the Colombian Llanos. We inferred about gene flow among populations within and between countries and the pathogen's main reproductive mode. The second objective was to infer the potential of the two brazilian populations of R. oryzae-sativae to adapt and become pathogen of forage pastures of the genus Urochloa. Once these forage species are intensively cropped in adjacent areas or under rotation with rice, they might be exerting strong selection pressure on R. oryzae-sativae populations. Population structure analyses were based on genotyping fungal isolates from four populations of the pathogen using five microsatellites markers. Gene flow was detected among geographically close and distant populations. Evidences of sexual reproduction and low clonal fraction found in the populations, indicated the predominance of a mixed reproductive system. It is plausible that basidiospores play a more important role on the disease cycle than previously thought. Isolates from the two brazilian populations of R. oryzae-sativae were pathogenic and varied on aggressiveness to Urochloa spp. However, low levels of heritability for aggressiveness were detected, indicating a yet limited adaptation to Urochloa spp
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A origem de populações emergentes do patógeno da queima-da-folha (Rhizoctonia solani AG-1 IA) da Urochloa spp. na Amazônia e seu potencial de adaptação a outros agroecossistemas brasileiros

Chavarro Mesa, Edisson [UNESP] 30 March 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:27:01Z : No. of bitstreams: 1 000843674.pdf: 2444912 bytes, checksum: a4d2c1b7a344bcd75cb87ab093f77f2d (MD5) / No início dos anos 90, o fungo Rhizoctonia solani AG-1 IA emergiu como um patógeno importante associado à queima foliar e podridão do coleto em pastagens do gênero braquiária (Urochloa spp.), na América do Sul. Este fungo surgiu pela primeira vez na Colômbia em áreas onde o cultivo de arroz (um hospedeiro altamente suscetível ao fungo) foi substituído por Urochloa, em resposta ao aumento da demanda por pecuária extensiva. Urochloa é uma forrageira de extrema importância para a pecuária da América Latina tropical. Descrito na primeira parte de nosso estudo, um amplo levantamento foi realizado na Amazônia nos estados do Pará, Rondônia, Roraima, e nos Cerrados de Mato Grosso e em áreas de várzeas do Vale do Paraíba, em São Paulo, entre 2012 e 2013. Nossas descobertas revelaram que Rhizoctonia solani AG-1 IA predominou como patógeno associado à queima-da-folha da braquiária no bioma Amazônico Brasileiro, especialmente em Rondônia. Na segunda parte de nosso estudo, descrevendo a estrutura genética de populações de R. solani AG-1 IA que infectam braquiária, arroz ou soja, testou-se a hipótese de que a emergência desse patógeno ocorreu devido a troca ou pulo de hospedeiros, dada a sobreposição geográfica de espécies hospedeiras. Para estudar a estrutura genética das populações, um total de 335 isolados de R. solani AG-1 IA foram coletados de campos de U. brizantha, de Urochloa híbrido Mulato, de arroz ou de soja, na Colômbia ou no Brasil. Esses isolados foram genotipados usando nove loci microssatélites. Padrões históricos de migração entre populações hospedeiro-distintas indicaram a origem provável das populações atuais que infectam braquiária na Colômbia, a partir de população que originalmente infectava o arroz. No Brasil, em contraste, não foi possível estabelecer o mesmo padrão claro assimétrico de migração histórica, uma vez que a migração entre as populações brasileiras de... / The fungus Rhizoctonia solani AG-1 IA emerged in the early 1990s as an important pathogen causing leaf blight and collar rot on pastures of the genus Urochloa (signalgrass) in South America. This pathogen first emerged in Colombia in areas where rice, a host highly susceptible to the fungus, was replaced with Urochloa in response to increased demand for extensive livestock farming. Urochloa is an extremely important forage grass crop for livestock farming in tropical Latin America. Described in the first part of our study, a broad survey was conducted in the Amazon in Pará, Rondônia, Roraima states and in Mato Grosso Cerrado areas, and paddy plains in the Paraíba Valley, in São Paulo, between 2012 and 2013. Our findings revealed that R. solani AG-1 IA was the predominant pathogen associated with the leaf blight on Urochloa in the Brazilian Amazon biome, especially in Rondônia. In the second part of our study, describing the population genetic structure of different host and regional populations of R. solani AG-1 IA infecting Urochloa, rice and soybean, we tested the hypothesis that the emergence of this pathogen occurred due to host shift or jump as a result of geographical overlapping of the host species. To study the genetic structure of populations, a total of 335 R. solani AG-1 IA isolates were sampled from fields of U. brizantha, Urochloa hybrid Mulato, rice and soybeans in Colombia and Brazil. These isolates were genotyped using nine microsatellite loci. The historical patterns of migration of populations from different hosts indicated that the populations currently infecting Urochloa in Colombia most likely originated from a population that originally infected rice. In contrast, in Brazil a similar clear asymmetric pattern of historical migration was not established because the migration rates among Brazilian R. solani AG-1 IA populations from Urochloa, soybean and rice were all symmetric in magnitude (average 20 migrants ...
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Estudo intra e interpopulacional de Pachycoris Torridus (Scopoli, 1772) (Heteroptera: Scutelleridae)

Firmino, Tatiani Seni de Souza [UNESP] 18 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-18. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:49:11Z : No. of bitstreams: 1 000845666_20160326.pdf: 104852 bytes, checksum: 4ffda9827d2a02d6fd93c8b2864ec2f2 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-28T13:37:43Z: 000845666_20160326.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-28T13:38:47Z : No. of bitstreams: 1 000845666.pdf: 859287 bytes, checksum: 2d08325891b29c4e02f7534921c2c16a (MD5)
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Análise de Alterações Cromossômicas, Mutações no Éxon 1 e do Padrão de Metilação da Região Promotora do Gene FOXO3 em Síndrome Mielodisplásica

Freitas, Paula Curi de [UNESP] 23 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-23. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:49:04Z : No. of bitstreams: 1 000844399_20160223.pdf: 224797 bytes, checksum: eac9ea801964c01cce92113640cd3a45 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-24T11:27:46Z: 000844399_20160223.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-24T11:28:32Z : No. of bitstreams: 1 000844399.pdf: 789622 bytes, checksum: 305923b9824e29cd4093940a21443c11 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Síndromes Mielodisplásicas (SMD) ou mielodisplasias compreendem um conjunto heterogêneo de doenças hematopoéticas caracterizadas por hematopoese ineficaz, que geralmente apresentam citopenias no sangue periférico, diferenciação celular displásica e propensão ao desenvolvimento de leucemia mielóide aguda. São classificadas em vários tipos e a incidência anual é estimada entre quatro casos por 100.000 pessoas da população em geral, e em até 50 casos por 100.000 indivíduos com idades avançadas. A análise cromossômica das células da medula óssea (MO) ao diagnóstico detecta alterações relacionadas com diagnóstico e prognóstico, mas alguns genes também já foram relacionados à etiologia das mielodisplasias, por apresentarem mutações e alterações epigenéticas que podem resultar em alterações na hematopoese. O gene FOXO3, um supressor de tumor, é um dos genes que mais se expressa no tecido hematopoético normal, o que faz dele um possível candidato ao envolvimento na etiopatogenia das doenças da MO. Entretanto, não foram encontrados estudos sobre FOXO3 em SMD. Alterações neste gene poderiam resultar em hematopoese anormal. O objetivo deste trabalho foi estudar células da MO de 100 indivíduos com SMD de qualquer tipo, ao diagnóstico, para investigar mutações no éxon 1 e o padrão de metilação da região promotora do FOXO3, além da presença de alterações cromossômicas. Para a análise molecular foi extraído o DNA, realizada à amplificação gênica por PCR e realizado o sequenciamento direto do éxon 1; para o estudo epigenético, foi feita a conversão do DNA por bissulfito e a MSP-PCR, e a análise citogenética foi realizada em metáfases submetidas ao bandamento GTG. No éxon 1 foi observado o polimorfismo 159C>T em 26% pacientes e em 16% controles, o que não diferiu estatisticamente (p>0,05). O estudo do padrão de metilação da ilha CpG estudada da... / Myelodysplastic syndromes (MDS) or myelodysplasia constitute a heterogeneous group of hematopoietic diseases characterized by ineffective hematopoiesis usually withperipheral bloodcytopenias, dysplastic cell differentiationanda tendency to evolve toacute myeloid leukemia. They are classified invarious typesand the annual incidence is estimated at between four cases per 100,000 individualsin the general population and up to 50 cases per 100,000 with advanced ages. A chromosomal analysis of bone marrow cells at diagnosis identifie schanges related with diagnosis and prognosis, but some genes are also associated to the etiology of myelodysplasia, for presenting mutations and epigenetic changes that may result in alteration in hematopoiesis. The FOXO3 gene, tumor suppressor, isone of the most commonly expressed genesin normal hematopoietic tissue, which makes it a possible candidate for involvement in the pathogenesis of diseases of the bone marrow. However, no studies were found on FOXO3in MDS. The changesin this genecould there for eresultina b normalhe matopoiesis. The aim of this work was to study bone marrow cells from 100 patients diagnosed with anytypeof MDS, to investigate mutations in exon 1 and the methylation pattern of FOXO3 promoter region, and the presence of chromosomal alterations. For molecular analysis, DNA was extracted, gene amplification was achieved bypolymerase chain reaction and direct sequencing of exon 1 was performed, for epigenetic study, the bisulfite conversion of DNA, and subsequently carrying out the MSP -PCR was performed, and cytogenetic analysis was performed on metaphases submitted to GTG banding. Inexon 1 was observed the 159C > Tpolymorphismin 26% patients andin 16% healthy controls, wich not statistically significant (p>0,05)...
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Estresse oxidativo na anemia falciforme: antioxidantes endógenos como possíveis alvos terapêuticos

Silva, Danilo Grünig Humberto da [UNESP] 26 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:48:51Z : No. of bitstreams: 1 000845679_20180226.pdf: 1467589 bytes, checksum: 4b51e0f80674d8e6f61050b763d6a0d9 (MD5) Bitstreams deleted on 2018-03-02T12:39:58Z: 000845679_20180226.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-03-02T12:40:55Z : No. of bitstreams: 1 000845679.pdf: 5122878 bytes, checksum: 18392e0bed2ec3726bfcd459567ee23f (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A anemia falciforme (AF) é caracterizada por um curso clínico altamente variável. Essa variabilidade reflet a complexidade de sua fisiopatologia que é afetada por diversos moduladores, como polimorfismos genéticos associados a eventos clínicos e a resposta ao tratamento com hidroxiureia (HU), assim como pelo quadro inflamatório e estresse oxidativo crônico. O presente estudo objetivou avaliar a influência de marcadores genéticos sobre o perfil oxidativo de pessoas com AF, e a sua relação com uso de HU e manifestações fenotípicas; e, verificar possíveis efeitos antioxidantes diretos e indiretos da melatonina (MEL), usando suspensão de células falciformes como modelo experimental. Após consentimento informado, os grupos estudados foram divididos de acordo com o tipo de experimentação a qual foram submetidos. Análises in vivo: composto por 95 indivíduos com AF, independente do gênero, com idade variando de 10 a 59 anos, em acompanhamento clínico regular no Hemocentro do Rio de Janeiro (RJ). Todos os pacientes estudados estavam sob tratamento profilático com ácido fólico (5 mg/dia), enquanto 41 (43,2%) deles estavam sob uso de HU (dose média: 22mg/Kg/dia) por pelo menos 90 dias. Para a confirmação diagnóstica da AF, foram utilizados métodos citológicos, eletroforéticos, cromatográficos e moleculares. Foram investigados polimorfismos genéticos nos genes de enzimas envolvidas em diferentes vias metabólicas : metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR; c.677C>T;rs1801133), cistationina beta-sintese... / Sickle cell anemia (SCA) is characterized by a clinical course highly variable. This feature reflects the complex pathophysiology of SCA which can be affected by a number of modifying factors including polymorphisms associated with clinical aspects and with hydroxyurea (HU) treatment response, and chronic inflammation and oxidative states. Thus, this study aimed to evaluate the influence of genetic markers on oxidative profile os SCA patients. We also correlated these results with hydroxyurea (HU) therapy and with phenotypic manifestations. Moreover we verified a potential direct and indirect antioxidant effects of melatonin (MEL), using a sickle cell suspension as experimental model. After informed consent, the studied groups were divided according to the experimentation manner. Analysis in vivo: the group was composed by 95 SCA patients, regardless gender, and age ranging from 10-59 years old. All subjects were regularly in clinical follow-up in the Blood center of Rio de Janeiro (RJ) and received a prophylactic treatment with folic acid of 5 mg/day since the SCA diagnosis, while 41 (43,2%) of them were under HU treatment...
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Produtividade em espécies de Drosophila do subgrupo saltans (grupo saltans, subgênero Sophophora): efeitos da infecção por Wolbachia em linhagens normais e introgredidas

Patarro, Thais de França [UNESP] 06 March 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-06. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:48:35Z : No. of bitstreams: 1 000845669_20160306.pdf: 285697 bytes, checksum: 31a6836e707fa9458fac599525f577da (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-07T11:06:14Z: 000845669_20160306.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T11:07:06Z : No. of bitstreams: 1 000845669.pdf: 1141164 bytes, checksum: 3bf7c568fe9454678b74118810132337 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Mecanismos de isolamento reprodutivo são agentes que impedem ou diminuem a troca de genes entre duas espécies ou populações de uma mesma espécie que se encontram em processo de especiação. Esses mecanismos são compreendidos por uma serie de processos que atuam em diferentes níveis da reprodução, incluindo desde barreiras pré-zigóticas até barreiras pós-zigóticas. Nas ultimas décadas, muitos estudos têm indicado que a ausência de híbridos pode também ser promovida por interações entre microorganismos simbiontes e seus hospedeiros. Um dos principais simbiontes capazes de interagir com os insetos, levando a modificações do processo reprodutivo, são as alfaproteobactérias do gênero Wolbachia. No presente estudo, foram analisados os efeitos da infecção pela Wolbachia causados no parâmetro produtividade (número de descendentes), em intra e intercruzamentos de linhagens de Drosophila. saltans, D. prosaltans (espécies próximas pertencentes ao subgrupo saltans) e mais duas linhagens, obtidas por introgressão a partir de híbridos F1 do intercruzamento dessas duas espécies. Análises preliminares para detecção da infecção pela Wolbachia nas linhagens de Drosophila mostraram que cada uma das seis linhagens estava infectada com uma linhagem do simbionte. Os resultados quanto à produtividade foram obtidos de intra e intercruzamentos das linhagens nas condições infectadas e não infectadas A eliminação do simbionte foi realizada por tratamento com o antibiótico tetraciclina. O principal mecanismo resultante da interação simbionte-hospedeiro mencionado na literatura é chamado incompatibilidade citoplasmática (IC) e ocorre nos intercruzamentos de fêmeas não infectadas com machos infectados. Considera-se que nos machos infectados ocorrem alterações nos espermatozoides que somente os ovócitos de fêmeas infectadas podem reverter, reestabelecendo a produtividade. Os resultados obtidos, neste trabalho, sobre a... / Reproductive isolation mechanisms are agents that prevent or decrease the exchange of genes between species or populations of the same species that are in process of speciation. These mechanisms are comprised of a series of processes operating at different levels of reproduction, ranging from pre-zygotic to post-zygotic barriers. In recent decades, studies have indicated that the absence of progeny can also be promoted by interactions of symbiont microorganisms and their hosts. Presently, the most known endosymbionts capable of interact with the insects, interfering in the reproductive process, are the alphaproteobacteria of the genus Wolbachia. In the present study, we investigated the Wolbachia effects on reproduction, focusing the parameter productivity (number of progeny) in crosses involving four strains of Drosophila saltans and D. prosaltans (close species belonging to the saltans group, Sophophora subgenus) and two introgressed strains started with F1 hybrids of these two species. Preliminary tests for screening Wolbachia showed that each of the six strains was infected with one strain of the symbiont. The results on productivity were obtained from intra and intercrosses of the strains in the conditions infected or uninfected. The elimination of Wolbachia was performed by treatment of the strains with the antibiotics tetracycline. The main mechanism resulting from the interaction symbiont-host described in the literature is called cytoplasmatic incompatibility (CI) and occurs in the intercrosses of uninfected females with infected males. It is considered that, in infected males, there are changes in the sperm that only the oocytes of infected females are able to correct, reestablishing the productivity. The present results on Wolbachia infection of the species from the saltans group were variable. In several crosses of the strains, the combinations that are sterile or almost sterile when CI effect occurs, were the most productive ...
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Variabilidade genética de Colletotrichum gloeosporioides e Colletotrichum acutatum em seringueira (Hevea brasiliensis) no Brasil

Sierra Hayer, Juan Fernan [UNESP] 07 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-07Bitstream added on 2014-08-13T18:01:21Z : No. of bitstreams: 1 000766190.pdf: 2070584 bytes, checksum: 9a03514bca85630b682825636e50389c (MD5) / A seringueira [Hevea brasiliensis (Wild. ex Adr. de Juss.) Muell-Arg] é a maior fonte de borracha natural, amplamente cultivada, e de grande importância comercial devido a sua alta capacidade produtiva. Atualmente ela vem sendo atacada por várias doenças que causam enormes prejuízos econômicos. Dentre essas a antracnose, causada pelos fungos Colletotrichum gloeosporioides e Colletotrichum acutatum, está presente em todos os lugares heveícolas do mundo. Estes fungos causam vários danos na planta como lesões nos folíolos, nos ponteiros, nos ramos, nos frutos e cancros no painel de sangria. Diante desta situação e da alta incidência destes patógenos na cultura da seringueira, o presente trabalho teve como objetivo identificar a variabilidade genética dos isolados de C. gloeosporioides e C. acutatum associados à seringueira. Ferramentas filogenéticas e populacionais foram utilizados para determinar a distribuição e a frequência de cada um dos possíveis haplótipos. As 79 amostras coletadas em campo foram amplificadas por PCR com primers específicos das regiões espaçadores ITS e dos genes 18S, 28S e 5,8S. Posteriormente as regiões amplificadas foram sequenciadas pelo método Sanger. Para complementar as análises foram adicionadas sequências disponíveis no NCBI, totalizando uma matriz de dados de 263 amostras. As árvores geradas, a partir de análises filogenéticas Bayesiana, Máxima Verossimilhança e Neighbour-Joining, mostraram a divisão dos grupos de C. gloeosporioides e C. acutatum, possibilitando a separação da matriz em duas espécies específicas. As análises ... / The rubber tree [Hevea brasiliensis (Wild. ex Adr. Than Juss. ) Muell - Arg] is the largest source of natural rubber, widely cultivated, and of great commercial importance due to its high production capacity. Currently the rubber trees are being attacked for various diseases, causing huge economic losses. Among them, the anthracnose, caused by Colletotrichum gloeosporioides and Colletotrichum acutatum, is in all rubber crops places of the world. These fungi causes various damage, such as injuries on leaves, branches, fruits, as well as cankers in the taping panel. Given this situation, and the high incidence of this pathogen in the rubber crop, this study aimed to identify the genetic variability of the isolates of C. gloeosporioides and C. acutatum associated to rubber crop. Phylogenetic and population tools were performed to determine the distribution and frequency of each possible haplotypes. The 79 samples collected in the field were amplified by PCR by specific primers of the ITS spacers regions and the 18S, 28S and 5.8 S genes. Subsequently, the amplified regions were sequenced by the Sanger method. Several sequences available in NCBI were added, to complement the analysis, totaling a data matrix of 263 samples. Phylogenetic analyses generated by Bayesian, Maximum Likelihood and Neighbour -Joining methods, showed the division of the C. acutatum and C. gloeosporioides groups, enabling the separation of the matrix in two specific species. The population analysis showed some very common haplotypes distributed around the world, as well as another haplotypes with very restricted distribution, such as H1 haplotype of ...

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