A G6PD é expressa em todos os tecidos, onde catalisa a primeira etapa da via das pentoses-fosfato. O NADPH produzido pela ação da G6PD serve como doador de elétrons na biossíntese redutora. Pelo fato de os glóbulos vermelhos não terem mitocôndria, a via das pentoses-fosfato é a única fonte de NADPH e essencial para sua proteção contra o stress oxidativo. A deficiência da G6PD é classificada como anemia hemolítica hereditária ligada ao cromossomo X, associada a manifestações clínicas heterogêneas. O gene da G6PD possui cerca de 140 variantes moleculares já descritas, muitas dessas associadas à enzimopatia. Considerando-se a alta freqüência populacional da deficiência de G6PD, a constituição da população do Rio Grande do Sul e as dificuldades diagnósticas desta deficiência, este trabalho teve como objetivo caracterizar os aspectos laboratoriais do diagnóstico da deficiência de G6PD em nosso meio. Para a quantificação da atividade da G6PD, foi utilizado o método enzimáticocolorimétrico com normalização da hemoglobina (kit intercientífica) e para as análises moleculares foram investigadas as mutações 202, 376 e 563 por PCR/RFLP. O presente estudo revelou uma prevalência combinada de 7,9% das duas formas de deficiência de G6PD (completa e parcial) no Rio Grande do Sul, com alta prevalência de pacientes parcialmente deficientes e sem correlação com origem étnica. Usando técnicas bioquímicas e moleculares, foi caracterizada a deficiência de G6PD em amostras de Porto Alegre como sendo principalmente devida às mutações G202A e A376G, representando a variante G6PD A-, confirmando uma distribuição homogênea do padrão G6PD A- no Brasil. Os resultados apresentados aqui demonstraram que as condições de estocagem (temperatura principalmente) desempenham um papel fundamental na atividade da G6PD, especialmente nas coletas em papel filtro. Na avaliação da acurácia do método enzimático de medida da atividade da G6PD as sensibilidades e especificidades calculadas para os valores de cut-off estabelecido em uma população normal foram: para 2,9 U/gHb ( 11,4% e 100%), para 8 U/g Hb (77,1% e 94,7%) e para 11,5 U/g hb (97,1% e 76,3%). Estima-se que a deficiência de ambas as formas combinadas de G6PD seja de aproximadamente 8% numa amostra do RS. A partir de uma probabilidade pré-teste de 8,0%, após a realização do ensaio enzimático, a probabilidade pós-teste de uma pessoa ser deficiente de G6PD com nível enzimático inferior a 8 U/g Hb passa a ser 55,9%. Ao passo que para níveis superiores a 11,5 U/gHb esta probabilidade de deficiência diminui para 0,37%. Pode-se concluir que o método empregado (kit Intercientífica) foi adequado para avaliar a atividade enzimática de G6PD em amostras de sangue total. É um método capaz de detectar a deficiência de G6PD, demonstrando de forma satisfatória o grau de deficiência em indivíduos que possuem mutações que causam deficiência enzimática menos severa, inclusive mulheres heterozigotas. A análise molecular pode identificar o tipo de variante mas não pode indicar o risco real para as mulheres portadoras, que é diretamente estimado pelo nível de atividade enzimática.

A G6PD é expressa em todos os tecidos, onde catalisa a primeira etapa da via das pentoses-fosfato. O NADPH produzido pela ação da G6PD serve como doador de elétrons na biossíntese redutora. Pelo fato de os glóbulos vermelhos não terem mitocôndria, a via das pentoses-fosfato é a única fonte de NADPH e essencial para sua proteção contra o stress oxidativo. A deficiência da G6PD é classificada como anemia hemolítica hereditária ligada ao cromossomo X, associada a manifestações clínicas heterogêneas. O gene da G6PD possui cerca de 140 variantes moleculares já descritas, muitas dessas associadas à enzimopatia. Considerando-se a alta freqüência populacional da deficiência de G6PD, a constituição da população do Rio Grande do Sul e as dificuldades diagnósticas desta deficiência, este trabalho teve como objetivo caracterizar os aspectos laboratoriais do diagnóstico da deficiência de G6PD em nosso meio. Para a quantificação da atividade da G6PD, foi utilizado o método enzimáticocolorimétrico com normalização da hemoglobina (kit intercientífica) e para as análises moleculares foram investigadas as mutações 202, 376 e 563 por PCR/RFLP. O presente estudo revelou uma prevalência combinada de 7,9% das duas formas de deficiência de G6PD (completa e parcial) no Rio Grande do Sul, com alta prevalência de pacientes parcialmente deficientes e sem correlação com origem étnica. Usando técnicas bioquímicas e moleculares, foi caracterizada a deficiência de G6PD em amostras de Porto Alegre como sendo principalmente devida às mutações G202A e A376G, representando a variante G6PD A-, confirmando uma distribuição homogênea do padrão G6PD A- no Brasil. Os resultados apresentados aqui demonstraram que as condições de estocagem (temperatura principalmente) desempenham um papel fundamental na atividade da G6PD, especialmente nas coletas em papel filtro. Na avaliação da acurácia do método enzimático de medida da atividade da G6PD as sensibilidades e especificidades calculadas para os valores de cut-off estabelecido em uma população normal foram: para 2,9 U/gHb ( 11,4% e 100%), para 8 U/g Hb (77,1% e 94,7%) e para 11,5 U/g hb (97,1% e 76,3%). Estima-se que a deficiência de ambas as formas combinadas de G6PD seja de aproximadamente 8% numa amostra do RS. A partir de uma probabilidade pré-teste de 8,0%, após a realização do ensaio enzimático, a probabilidade pós-teste de uma pessoa ser deficiente de G6PD com nível enzimático inferior a 8 U/g Hb passa a ser 55,9%. Ao passo que para níveis superiores a 11,5 U/gHb esta probabilidade de deficiência diminui para 0,37%. Pode-se concluir que o método empregado (kit Intercientífica) foi adequado para avaliar a atividade enzimática de G6PD em amostras de sangue total. É um método capaz de detectar a deficiência de G6PD, demonstrando de forma satisfatória o grau de deficiência em indivíduos que possuem mutações que causam deficiência enzimática menos severa, inclusive mulheres heterozigotas. A análise molecular pode identificar o tipo de variante mas não pode indicar o risco real para as mulheres portadoras, que é diretamente estimado pelo nível de atividade enzimática.

Submitted by Gisely Teixeira (gisely.teixeira@uniceub.br) on 2018-06-12T17:33:35Z No. of bitstreams: 1 51500802.pdf: 725888 bytes, checksum: c1cb39e25c429b050db0b7867d57c41d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-12T17:33:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 51500802.pdf: 725888 bytes, checksum: c1cb39e25c429b050db0b7867d57c41d (MD5) Previous issue date: 2018 / Introdução: A glicose, também denominada dextrose ou açúcar do sangue, forma-se naturalmente no alimento ou no organismo pela digestão de carboidratos mais complexos. Objetivo: o presente estudo, que têm como objetivo investigar a resposta glicêmica a um protocolo de exercício resistido (bi-set ou método composto) irá analisar a concentração glicêmica quando comparado pré e pós-exercício resistido. Material e Métodos: A amostra foi composta por 30 indivíduos do sexo masculino com faixa etária entre 18 e 40 anos, fisicamente ativos, saudáveis, do sexo masculino praticantes recreacionais de treinamento resistido. Os voluntários foram submetidos a avaliações antropométricas preliminares, peso, altura, IMC e dobras cutâneas. Na segunda etapa das avaliações os indivíduos foram submetidos a testes de uma repetição máxima (1RM). Foram coletadas amostras da glicemia pré e pós-teste de exercício resistido bi-set 70% de 1 RM. Resultados: A glicemia não demonstrou mudanças significativas em nenhum momento tanto no grupo 1min quanto no grupo 30seg (p > 0,05). No grupo Controle, foi observado um decréscimo significativo no momento Rec15’ em comparação ao momento Pré (p = 0,010), sem diferença entre os outros momentos. Entretanto, no momento final, a glicemia no grupo 1min encontrou-se significativamente elevada em comparação ao grupo 30seg (p = 0,004) e ao grupo controle (p = 0,001) sem diferença entre controle e 30seg (p > 0,05).Discussão: Em estudo com praticantes de exercício resistido a intensidade do exercício está diretamente relacionada com a captação de glicose da circulação pelo músculo. Ao efetuar os exercícios de cargas crescentes o metabolismo de glicose ocorre imediatamente uma captação de glicose pelo músculo esquelético, resultando em aumento da quantidade de transportadores de glicose (GLUT4). Conclusão: Diante do presente estudo conclui-se que a resposta glicêmica após o protocolo de exercício resistido não obteve queda significativa.

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Fisicas e Matematicas / Made available in DSpace on 2012-10-17T08:54:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-08T23:25:50Z : No. of bitstreams: 1 110286.pdf: 10509322 bytes, checksum: 48a50059bca11a94a89531933ca2ca8f (MD5) / O estudo da oxidação da glicose foi realizado em meio tamponado com NaHCO3/Na2CO3 na presença de brometo. Foram estudados os eletrodos de platina, carbono vítreo e grafite de grau espectroscópico. A platina por ser um eletrodo com menor sobretensão para a oxidação da glicose produz reações catalíticas. O eletrodo de carbono vítreo e de grafite de grau espectroscópico, apresentaram resultados bastante semelhantes, entretanto o segundo mostrou-se mais adequado por apresentar menor custo, maior área de contato e uma superfície inerte à oxidação da glicose na ausência de mediador. A eletrossíntese foi realizada em célula de vidro contendo um anodo de grafite de grau espectroscópico e um cátodo de cobre. As melhores condições de eletrólise foram em 0,1 mol/dm3 de brometo com aplicação de corrente de 160 mA apresentando um rendimento de aproximadamente 96%. O principal produto, gliconato, foi complexado com Zn" na proporção de 2:1. Este apresenta bandas de absorção em freqüências bem características, tais como aquelas em 1602 e 1398 cm-1 correspondentes aos movimentos simétricos e assimétricos da carbonila do carboxilato, respectivamente. Observou-se a decomposição em 178°C e uma proporção de água entre duas a três moléculas. Por voltametria de redissolução anódica foi detectado traços de cobre proveniente do cátodo da ordem de 7,53 ppm. O zinco foi quantificado (12,5%) através das técnicas de varredura catódica e de redissolução anódica. A varredura catódica foi a mais adequada, pois dispensa a etapa de pré-concentração e a diluiçao prévia da amostra.

Orientador: Valber de Albulquerque Pedrosa / Banca: Paulo dos Santos Roldan / Banca: Margarida Juri Saeki / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual Paulista "Julio de Mesquita Filho", Faculdade de Ciências de Bauru / O Programa de Pós Graduação em Ciência e Tecnologia de Materiais, PosMat, tem carater institucional e integra as atividades de pesquisa em materiais de diversos campi / Resumo: This project has as main objective the development of nanowires for application in biosensors. Nanomaterials have been highlighted by high sensitivity when applied to biological sensors. As they haver virtually the same dimensions as the molecules that should detect, these nanosensors could revolutionize the diagnoses way are made in medical and biological examinations. Therefores, in this research, we prepared and characterized multithreaded nanowires usind different types of metal and polymer. These nanowires were prepared by electrochemical deposition process and characterized by scanning electron microscopy (SEM). The synthesized nanowires have been changed for the attachment of the enzyme glucose oxidase. Several experimental parameters of biosensor was evaluated as the optimization of pH (at 6), as a function of the peak current obtained from glucose; the enzyme concentration of 0,4 mg ml-1 required to prepare the biosensor; as well as the study of electrochemical potential variation, where it was observed that the ideal is to use potential less than 0,4 V. The analyitcal curve for the determination of glucose showed a slope of 7.95 uA mol-1, with a correlation coefficient of 0.997 and detection limit of the biosensor determined was 3.7 x 10-7 mol L-1. The biosensor showed high selectivity only for detection of glucose and maintained a good response to glucose sensing (85%) in 30 days. Thus, the use of nanowires for the preparation of biosensors becomes and alternative to direct detection of glucose; the enzyme concentration of 0.4 mg ml-1 required to prepare the biosensor; as well as the study of electrochemical potential less than 0.4 V. The analytical curve for the determination o glucose showed a slope of 7.95 uA mol-1, with a correlation coefficient of 0.997 and detection limit of the biosensor... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This project has as main objective the development of nanowires for application in bionsensors. Nanomaterials have been highlighted by high sensitivity when applied to biological sensors. As they have virtually the same dimensions as the molecules that should detect, these nanosensors could revolutioneze the diagnoses way are made in medical and biological examinations. Therefore, in this research, we prepared and characterized multithreaded nanowires using different types of metal and polymer. These nanowires were prepared by electrochemical deposition process and characterized by scanning electron microscopy (SEM). The synthesized nanowires have been changed for the attachment of the enzyme glucose oxidase. Several experimental parameters of biosensor was evaluated as the optimization of pH (at 6), as a function of the peak current obtained from glucose; the enzyme concentration of 0.4 mg ml-1 required to prepare the bionsensor; as well as the study of electrochemical potential variation, where it was observed that the ideal is to use potential less than 0.4 V. The analytical curve for the determination of glucose showed a slope of 7.95 uA mol-1, with a correlation coefficient of 0.997 and detection limit of the biosensor determined was 3.7 x 10-7 mol L-1. The biosensor showed high selectivity only for detection of glucose and maintained a good response to glucose sensing (85%) in 30 days. Thus, the use... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Ciência e Engenharia de Materiais, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-03-18T21:02:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 332776.pdf: 23184383 bytes, checksum: 749db9e964655ef40a4dea78d7a3d7f0 (MD5) Previous issue date: 2014 / Nos últimos anos esferas de materiais carbonáceos e híbridos de carbono com metal, de tamanho micro e nanométrico, com a possibilidade de terem suas propriedades ajustáveis tem despertado interesse de muitos pesquisadores devido as suas potenciais aplicações. Um dos métodos que tem se mostrado promissor para a produção de tais materiais é o método hidrotérmico. Esta técnica dá acesso a esferas de carbono individuais e com baixo desvio padrão de tamanho. Neste trabalho são estudadas sínteses de esferas de carbono através do tratamento hidrotérmico de glicose com o auxílio de redutores com o objetivo de entender os aspectos de reação e formação das destas esferas. Posteriormente foram criadas rotas para a produção de materiais esféricos híbridos de carbono-níquel utilizando técnicas como o método hidrotérmico, incipiente wetness e refuxo. Como rota alternativa para a produção de esferas de carbono foram utilizadas micro-ondas como fonte de energia produzindo esferas similares às produzidas pelo método convencional. Dois testes em aplicações foram feitas, esferas de carbono em teste tribológico a seco e um híbrido de carbono-níquel como oxidante de glicerol. Ambos apresentaram resultados promissores. A caracterização das amostras foi feita com as técnicas de difração de raios X (DRX), microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia eletrônica de varredura por emissão de campo (MEVEC), espectroscopia de energia dispersiva (EED), microscopia eletrônica de transmissão (MET), espectroscopia Raman, espectroscopia de infravermelho e análise elementar CHNS.<br> / Abstract : In the last years spheres of carbonaceous materials and carbonmetal hybrid materials, with size range from nano to micrometers, with tunable properties have been the interest of many researchers, due to their possible applications. One of the promising methods to synthesize such materials is the hydrothermal method. This thecnique gives access to individual carbon spheres with low size distribution. In the present work carbon spheres syntheses are studied through the hydrothermal treatment of glucose aided by reducing agents with the goal to understand the carbon spheres reaction and formation aspects. After that carbon-nickel hybrid spherical material routes were created using techniques like hydrothermal method, incipient wetness and reflux. As an alternative route microwaves were used to create carbon spheres similar to those using the conventional hydrothermal method. Two applications were tested, one with carbon spheres as dry lubricant and another with a hybrid material as glycerol oxidant. Characterization techniques used in this work were X ray diffraction, scanning electron microscopy, field emission scanning electron microscopy, transmission electron microscopy, energy dispersive X ray microscopy, Raman spectroscopy, infrared spectroscopy and elemental analisys CHNS.

VILAR, E. L. Quantificação e efluxo de colesterol total e HDL dos espermatozóides do ejaculado de caprinos. 2010. 52 f. Dissertação (Mestrado em Zootecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2010. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2014-12-10T19:05:38Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_elvilar.pdf: 952843 bytes, checksum: 18be34474bf83abf639d5c19e3054db8 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-03-18T23:20:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_elvilar.pdf: 952843 bytes, checksum: 18be34474bf83abf639d5c19e3054db8 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-18T23:20:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_elvilar.pdf: 952843 bytes, checksum: 18be34474bf83abf639d5c19e3054db8 (MD5) Previous issue date: 2010 / The objective was to measure the rate of cholesterol present in seminal plasma (SP) goats, and verify whether cholesterol efflux from sperm to the PS, and as such event occurs individually after one hour incubation at 38 ° C. The experiment was conducted at the Laboratory for Animal Reproduction, UFC. Eight goats were used intensively reared and fed according to NRC / goat (1981). The ejaculates collected were divided into three aliquots. The was first centrifuged to obtain the PS, which was packed in tubes eppendorfs and stored at -18 ° C. The second aliquot was incubated at 38 ° C / 1 h and then centrifuged to obtain the PS. These two samples were analyzed the level of total cholesterol and HDL. The third aliquot was diluted in sodium citrate - glucose and subjected to heat resistance test for evaluation of force, mobility, normal sperm cells and morphological changes in total. The design trial was a randomized block design to data analysis was used The statistical program SAS @ 9.0. There were significant reductions of force and motility between incubation times. However, in most animals parameter stabilization occurred after 60 min of incubation. Small difference was observed among individuals for these parameters. Cholesterol Total found in PS of goats increased significantly after incubation in 50% of animals. Before and after incubation, the level of total and HDL cholesterols ranged significantly among individuals. The proportion of HDL cholesterol in the ER was very high values ​​were 83.79% and 78.41% respectively. We observed a association (p <0.01) positive and moderate between the proportion of HDL and sperm vigor (r = 0.30) and between the motility and the proportion of HDL was considered small (r = 0.19). It was concluded that PS goats contains a high proportion of cholesterol and cholesterol This is the main HDL. / Objetivou-se mensurar a taxa de colesterol presente no plasma seminal (PS) de caprinos, e verificar se ocorre efluxo de colesterol dos espermatozóides para o PS, e como tal evento ocorre individualmente após uma hora de incubação a 38 °C. O experimento foi conduzido no Laboratório de Estudos em Reprodução Animal da UFC. Foram utilizados oito bodes criados intensivamente e alimentados segundo o NRC/caprinos (1981). Os ejaculados coletados foram divididos em três alíquotas. A primeira foi centrifugada para obtenção do PS, que foi acondicionado em tubos eppendorfs e armazenado a -18 °C. A segunda alíquota foi incubada a 38 °C / 1 h e depois centrifugada para obtenção do PS. Essas duas alíquotas foram analisadas quanto ao nível de colesterol total e HDL. A terceira alíquota foi diluída em citrato de sódio – glicose e submetida ao teste termorresistência, para avaliação do vigor, motilidade, células espermáticas normais e alterações morfológicas totais. O delineamento experimental empregado foi de blocos casualizados, para a análise dos dados utilizou-se o programa estatístico SAS@ 9.0. Foram observadas diminuições significativas do vigor e da motilidade entre os tempos de incubação. Entretanto, na maioria dos animais ocorreu estabilização dos parâmetros a partir de 60 min de incubação. Pequena diferença foi observada entre os indivíduos para estes parâmetros. O nível de colesterol total encontrados no PS de caprinos aumentou significativamente após a incubação em 50% dos animais. Antes e após a incubação, o nível de colesteróis total e HDL variaram significativamente entre os indivíduos. A proporção de colesterol HDL no PS foi muito elevada, os valores foram 83,79% e 78,41%, respectivamente. Foi observada uma associação significativamente (p<0,01) positiva e moderada, entre a proporção de HDL e o vigor espermático (r = 0,30) e entre a motilidade e a proporção de HDL foi considerada pequena (r = 0,19). Concluiu-se que o PS de caprinos contém uma alta proporção de colesterol e o principal colesterol presente é o HDL.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-08-28T16:27:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 347914.pdf: 1664605 bytes, checksum: 3df0a716236fa10e0c7fb3100a3f0d23 (MD5) Previous issue date: 2017 / O funcionamento correto do sistema nervoso central (SNC) depende de uma regulação estrita do metabolismo. Um desequilíbrio nesta regulação pode desencadear consequências graves ao longo do tempo, como estresse oxidativo, distúrbios emocionais, prejuízo na memória e até mesmo neurodegeneração. A linhagem SHR (Spontaneously Hypertensive Rat) caracteriza-se por desenvolver ao longo do tempo hipertensão, anormalidade no metabolismo de lipídeos e prejuízo cognitivo associado com alterações do metabolismo central e periférico de glicose. Consequentemente, a linhagem SHR tem sido proposta como modelo para o estudo de demência induzida por alterações metabólicas. Em nosso laboratório, nós desenvolvemos uma linhagem congênica, chamada SLA16 (SHR.LEW-Anxrr16), que é geneticamente idêntica a linhagem SHR, exceto por uma região do cromossomo 4. A hipótese deste trabalho foi que a área genômica diferencial (AGD) possui gene (s) que prejudicam o metabolismo de carboidratos e as tarefas de aprendizado/memória relacionados à idade das linhagens SHR e SLA16. Assim, o objetivo foi avaliar a influência genética da AGD no metabolismo e memória destas duas linhagens de ratos. Para isso foram desenvolvidos quatro blocos experimentais. No primeiro bloco foi realizada uma análise bioinformática dos genes da AGD, para avaliar a sua relação com vias/funções metabólicas e processos neurobiológicos. O segundo bloco caracterizou o perfil metabólico periférico de glicose e lipídeos e o desempenho em tarefas cognitivas dos machos jovens das linhagens SHR e SLA16. O terceiro bloco repetiu o anterior, entretanto utilizou-se machos adultos das linhagens SHR e SLA16. Finalmente, o quarto bloco, avaliou o efeito do tratamento prolongado com metformina (200 mg/kg via oral) no metabolismo de glicose e sua influência nas tarefas de aprendizado/memória nos machos jovens das linhagens SHR e SLA16. Os resultados do primeiro bloco experimental mostram que a AGD possui genes envolvidos em vias relacionadas com metabolismo de glicose, danos oxidativos, processos neurobiológicos e doenças neurodegenerativas. O segundo bloco revelou que machos jovens da linhagem SLA16 diferem significativamente no metabolismo periférico de glicose e lipídeos em relação aos machos SHR. O terceiro bloco sugeriu que a idade influenciou no prejuízo cognitivo e no metabolismo de triglicerídeos da linhagem SLA16 em comparação à linhagem SHR, sem manifestar alterações no metabolismo periférico de glicose. Finalmente, o quarto bloco sugeriu que o tratamento prolongado com metformina melhora o metabolismo de glicose e aparentemente reverte o prejuízo do aprendizado na memória espacial de longa e curta duração, somente nos animais SLA16. Estes dados, em conjunto, revelam que a AGD possui genes associados às vias metabólicas e processos neurobiológicos que alteram negativamente o metabolismo de triglicerídeos e o aprendizado/memória espacial ao longo do tempo. Eles também sugerem a linhagem SLA16 como modelo de estudo dos mecanismos subsequentes das alterações metabólicas da glicose e prejuízos de aprendizado e memória espacial, relacionados à idade.<br> / Abstract : The correct functioning of the central nervous system (CNS) depends on a strictly regulation of metabolism. An imbalance in this regulation can trigger serious consequences over time, such as oxidative stress, emotional disturbances, memory damaged and even neurodegeneration. The SHR (Spontaneously Hypertensive Rat) strain is characterized by the development of hypertension, abnormalities in lipid metabolism and cognitive impairment associated with changes in central and peripheral glucose metabolism over time. Consequently, the SHR strain has been proposed as a model for the study of dementia induced by metabolic alterations. In our laboratory, we developed a congenic strain called SLA16 (SHR.LEW-Anxrr16), which is genetically identical to the SHR strain, except for one region of chromosome 4. The hypothesis of this dissertation was that genes of the DGA impair carbohydrate metabolism and learning/memory tasks related to age in SHR and SLA16 strains. Thus, the objective of this work was to evaluate the influence of this differential genomic area (DGA) on the metabolism and memory of these two strains of rats. To accomplish this objective, four experimental blocks were developed. In the first block, a bioinformatic analysis of the DGA genes was carried out to evaluate its relation with metabolic functions and neurobiological processes. The second block characterized the peripheral metabolic profile of glucose and lipids and the performance in cognitive tasks of young males of SHR and SLA16 strains. The third block repeated the previous one, however using now adult males of the SHR and SLA16 strains. Finally, the fourth block evaluated the effect of long-term treatment with metformin (200 mg/kg) on glucose metabolism and its influence on learning/memory tasks in young males of the SHR and SLA16 strains. The results of the first experimental block show that DGA has genes related to glucose metabolism, oxidative damage, neurobiological processes and neurodegenerative diseases. The second block revealed that young SLA16 males differ significantly in peripheral metabolism of glucose and lipids in relation to SHR males. The third block suggested age influences on the cognitive impairment and triglyceride metabolism of the SLA16 compared to the SHR, without manifesting alterations in peripheral glucose metabolism. Finally, the fourth block suggested that prolonged treatment with metformin improves glucose metabolism and apparently reverses the impairment of learning in spatial memory of long-term and short-term, only in SLA16 rats. These data, together, revealed that DGA has genes associated with metabolic pathways and neurobiological processes that influence triglyceride metabolism and spatial learning/memory over time. These data also suggested the SLA16 strain as a model for the study of mechanisms following metabolic changes in glucose and age-related impairments of learning and spatial memory.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:25:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 221615.pdf: 1153264 bytes, checksum: 76630da8416a7fca95cb42457f8a1d12 (MD5)

Made available in DSpace on 2016-02-05T18:30:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-04-11. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-05T18:34:10Z : No. of bitstreams: 1 000857393.pdf: 1233316 bytes, checksum: df86cf7d2b7b3a47fa18b9bd274e26e2 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / As amilases pertencem à classe das hidrolases e são enzimas de grande importância para aplicações industriais representando de 25 a 33% do mercado mundial de enzimas. Há uma gama extensiva de aplicações e um enorme interesse na descoberta de enzimas com melhores propriedades na degradação do amido. O presente trabalho visou otimizar a tecnologia de produção de amilases por Rhizopus microsporus var. oligosporus em fermentação em estado sólido com farelo de trigo. Em uma segunda etapa o extrato enzimático foi parcialmente caracterizado e utilizado para produção de xarope de glicose. Foi determinada a concentração ideal de sais para suplementação do meio de cultivo, a influência da umidade e inóculo na produção amilolítica utilizando-se um delineamento central composto rotacional (DCCR). Estabeleceu-se o protocolo para extração enzimática e verificou-se a produção ao longo do tempo em diferentes temperaturas de fermentação. A atividade enzimática foi determinada a partir da quantificação dos açúcares redutores liberados durante reação de hidrólise de amido. A menor concentração otimizada foi de 1,25% (m/m) de sulfato de amônio, 0,25% de fosfato de potássio e 1,25% de ureia. O melhor teor de umidade para a produção amilolítica foi de 50% e a extração mais eficiente ocorreu com 10 mL de água destilada por grama de substrato. A máxima produção enzimática ocorreu nos cultivos a 30 °C durante 120 h. A melhor temperatura para atividade amilolítica foi de 60 a 65 °C. A melhor estabilidade térmica (80%) foi obtida até 50 °C por 1 hora de incubação. A enzima produzida apresentou maior atividade em uma faixa de pH entre 4,0 e 5,0. A estabilidade foi superior a 80% após 1 hora de contato em pH de 3,0 a 7,0. O extrato enzimático bruto foi capaz de realizar a conversão total de amido em açúcar redutor após 6 horas de reação a 55 °C. Para a farinha de trigo tipo II foi obtido um rendimento... / The amylases belong to the class of the hydrolases and they are enzymes of great importance to industrial applications, representing from 25% to 33% of the worldwide enzymes business. There is a wide range of applications and a huge interest in the discovery of enzymes with better properties in the starch degradation. The present work aims to optimize the technology of production of amylases by Rhizopus microsporus var. oligosporus in solid state fermentation with wheat bran. In second stage the enzymatic extract was partially characterized and used in glucose syrup production. The ideal concentration of salts to supplement the culture medium was determined, as well as the influence of moisture and inoculum on amylase production using a central composite rotational design (DCCR). The best protocol for enzymatic extraction and profiles of amylase production at different temperatures of fermentation were determined. The enzymatic activity was measured by the quantification of reducing sugars released during hydrolysis reaction of starch. The lowest optimal concentration was 1.25% (w/w) ammonium sulfate, 0.25% potassium phosphate and 1.25% urea. The best moisture level for amylolytic production was 50%, and the most efficient extraction was with 10 ml of distilled water per gram of substrate. The maximum enzyme production in the cultures was at 30 °C for 120 h. The best temperature for amylolytic activity was 60 to 65 °C, and better stability (80%) was obtained up to 50 °C for 1 hour of incubation. The enzyme produced showed greater activity in a pH range 4.0-5.0, and more than 80% of stability after 1 hour of contact in a pH range 3.0-7.0. The crude enzymatic extract was able to perform the total conversion of starch to reducing sugar in 6 hours of reaction at 55 °C. For type II wheat flour was obtained a yield of 83% in 6.5 hours, and for wheat bran, 62% in 7 hours. The product of the catalytic reaction was concentrated to obtain 20% ...