O pacu, Piaractus mesopotamicus, é um caracídeo neotropical autóctone, de hábito alimentar onívoro, largamente utilizado na aqüicultura brasileira. No entanto, alguns aspectos da sua nutrição permanecem controversos ou desconhecidos. O presente trabalho visou determinar a exigência em proteína, energia e aminoácidos para juvenis de pacu por meio da avaliação de parâmetros de desempenho, composição corporal e hematológicos em dois ensaios distintos. No primeiro ensaio, juvenis de pacu (15.5±0.4 g) foram alimentados durante 10 semanas, duas vezes ao dia, com dietas contendo teores de proteína bruta (PB) entre 22 e 38% (incremento de 4%) e energia digestível (ED) entre 2600 e 3400 kcal kg-1 (incremento 200 kcal kg-1), em um delineamento totalmente aleatorizado, em esquema fatorial 5 × 5 (n=3). O ganho de peso (GP) e a taxa de crescimento específico (TCE) aumentaram significativamente com a elevação da PB dietética. A retenção de nitrogênio (RN) e a taxa de eficiência protéica (TEP) diminuíram (p<0,05) com o aumento da proteína das dietas em todos os níveis de ED testados. As concentrações de ED afetaram (p<0,05) a concentração de umidade, proteína, gordura, matéria mineral e energia bruta corporal e o fator de condição. A taxa de eficiência econômica foi influenciada pela proteína (p<0,05) e energia digestível (p<0,05) das dietas e pela interação entre ambas (p<0,05). Entretanto, o índice de lucratividade econômica somente foi influenciado pela concentração de proteína bruta (p<0,05) das dietas. Efeito significativo (p<0,05) dos tratamentos nos parâmetros hematológicos foi registrado para taxa de hemoglobina, concentração de hemoglobina corpuscular média, proteína plasmática total e glicose plasmática. A exigência mínima para ganho de peso de juvenis de pacu é 27% de PB, com relação PB:ED ótima de 92,9 mg PB kcal-1 ED. As concentrações protéicas e energéticas estudadas não causaram prejuízos a saúde dos peixes. A exigência em lisina dietética para juvenis do pacu Piaractus mesopotamicus, com peso inicial de 4,3 g, foi determinada fornecendo cinco dietas experimentais isonitrogenadas (32% proteína bruta) contendo caseína, gelatina e L-aminoácidos cristalinos com níveis crescentes de lisina (0,90; 1,17; 1,44; 1,69 e 1,96% da matéria seca da dieta) por 74 dias. Cada dieta foi aleatoriamente designada para grupos (n=4) de 18 peixes alimentados três vezes ao dia até a aparente saciedade. Não foram observados mortalidade ou sinais de deficiência além da redução no desempenho dos peixes alimentados com dietas deficientes ou com excesso de lisina. O peso final (PF), GP, TCE, índice de eficiência alimentar (IEA), TEP, VPP, composição corporal, morfometria e hematologia foram afetados (p<0,05) pelas concentrações de lisina dietética. A análise polinomial quadrática indicou a exigência em lisina em 1,45, 1,51 e 1,43% da matéria seca da dieta, respectivamente para GP, IEA e VPP. Foram obtidos valores de lipídios e proteína corporais significativamente mais altos nos peixes alimentados com as dietas com 0,9 e 1,96% de lisina. Foi então determinado que a exigência em lisina para juvenis de pacu é de 1,5% da matéria seca da dieta. / Pacu, Piaractus mesopotamicus, a neotropical, omnivorous native characin, widely used in Brazilian aquaculture. However, some aspects of your nutrition are controversial or ignored. This work aimed at determining dietary protein, energy and amino acids requirements of juvenile pacu through the evaluation of performance, body composition and hematological parameters. In a first trial, pacu juveniles (15.5±0.4 g) were fed twice a day for 10 weeks until apparent saciety with diets containing crude protein (CP) from 22 to 38 % (intervals of 4%) and digestible energy levels among 2600 and 3400 kcal kg-1 (intervals of 200 kcal), in a totally randomized experimental design, 5 × 5 factorial scheme (n=3). Weight gain (WG) and specific growth rate (SGR) increased significantly with amount dietary CP. Nitrogen retention (NR) and protein efficiency ratio (PER) decreased (p<0.05) with increasing dietary protein at all tested levels of dietary energy. DE levels affected (p<0.05) whole body moisture, protein, fat, ash, gross energy and condition factor. Economic efficiency ratio was influenced by dietary protein (p<0.05) and digestible energy (p<0.05), and by interaction between the two factors. However, income was affected by dietary protein level (p<0.05) alone. Significant effect of treatments in hematological parameters were registered for mean corpuscular hemoglobin concentration, total plasma protein and plasma glucose. Crude protein requirements and optimum protein:energy ratio for weight gain of juveniles of pacu were 271 g kg-1 and 92.9 mg kcal-1, respectively. All dietary crude protein and digestible energy levels studied did not pose harms to fish health. Dietary lysine requirement of juvenile pacu Piaractus mesopotamicus (4.3 g) was determined by feeding five isonitrogenous (32% crude protein) amino acid test diets containing casein, gelatin and Lcrystalline amino acids with graded levels of lysine (0.90, 1.17, 1.44, 1.69 and 1.96% of dry diet) for 74 days, three times a day until apparent satiation, to groups (n=4) of 18 fish in a totally randomized design trial. No mortality or nutritional deficiency signs were observed; reduced growth was recorded for fish fed diets with either the lower or the higher lysine contents. Final weight (FW), WG, SGR, feed efficiency (FE), PER, NR, proximate whole body composition, morphometry and hematology were affected (p<0.05) by dietary lysine concentrations. Seconddegree polynomial regression analysis of WG and PER data indicated dietary lysine requirement of 1.45, 1,51 and 1.43% of dry diet, respectively to WG, FE and PPV. Significantly higher lipid and protein contents values were obtained for whole body of fish fed the diets with 0.9 and 1.96% of lysine. Lysine requirement of juvenile pacu was determined as being 1.5% of dry diet.

A zinco protoporfirina (ZPP) eritrocitária é um metabólito formado pela adição do zinco no sítio do ferro durante a formação da molécula de hemoglobina, quando este último está total ou parcialmente indisponível. O objetivo deste trabalho foi realizar a padronização dos valores da ZPP eritrocitária em bezerros sadios com até um mês de vida, assim como a validade da ZPP como previsora da ocorrência de anemia ferropriva em bezerros neonatos, em comparação com outros métodos. Para tanto foram utilizados 134 bezerros da raça Holandesa, com idades variando do nascimento até 30 dias de vida, provenientes de fazendas produtoras de leite localizadas no Estado de São Paulo, classificados como sadios (67 animais) e anêmicos (67 animais). Os animais foram monitorados por meio de exames físico e complementares (hemograma e reticulocitometria, teores de ferro sérico (FT) e capacidade total de ligação do ferro (CTLF), teores de bilirrubinas e de uréia séricas, e concentrações da ZPP). Durante a padronização do exame, os valores médios encontrados foram: concentração de ZPP eritrocitária das amostras de hemácias não lavadas em até 3 horas após a colheita de sangue de 30 animais sadios - 80,90 &#181;mol ZPP/mol heme; concentração de ZPP eritrocitária, após a lavagem de hemácias, determinadas até 3 horas e 12 horas após colheita de sangue do mesmo grupo - 61,40 &#181;mol ZPP/mol heme e 61,03 &#181;mol ZPP/mol heme, respectivamente. Com base nos resultados obtidos, foi possível concluir que as amostras de sangue colhidas para a mensuração da ZPP podem ser armazenadas, sob refrigeração a 4°C, por até 12 horas após a colheita, sem alterações significativas dos seus valores, sendo recomendável a lavagem das hemácias antes da mensuração dos valores da ZPP eritrocitária devido à presença de substâncias interferentes no plasma do animal. Foi encontrada diferença significativa nas concentrações da ZPP e de todos os componentes do eritrograma, assim como nos teores do metabolismo de ferro entre os animais anêmicos e sadios. As concentrações de bilirrubinas e ureia séricas apresentaram-se no intervalo fisiológico de variação, não interferindo na mensuração da ZPP nos eritrócitos dos bezerros com ou sem anemia. A correlação entre os valores encontrados dos teores de ferro sérico e da capacidade total de ligação do ferro com as concentrações de ZPP foram: rs = - 0,45, p < 0,001 (ZPP x FT) e rs = 0,51, p < 0,001 (ZPP x CTLF), respectivamente, demonstrando que quanto menores os teores de ferro, maiores serão as concentrações de ZPP. Portanto, a utilização da ZPP como previsora dos quadros de anemia ferropriva em bezerros neonatos com até um mês de vida se mostrou válida e, considerando que a hematofluorometria é um método rápido e não oneroso, pode ser recomendado como exame complementar de rotina. / The zinc protoporphyrin (ZPP) is a metabolic originated by zinc addition in the iron site during the synthesis of hemoglobin molecule, when iron is total or partially unavailable. The aim of this study was to standardize the values of zinc protoporphyrin (ZPP) in erythrocyte of healthy calves until one month of life, and to evaluate this determination as a predictor of the occurrence of iron deficiency anemia in newborn calves, compared with other methods. Therefore, 134 Holstein calves were used, aged from birth to 30 days of life, from dairy farms located in the São Paulo State, splitted into two groups, classified as healthies (67 animals), and anemics (67 animals). The animals were monitored by physical examination and laboratory assessments (complete blood cell count and reticulocytes, serum iron (SI) and total iron binding capacity (TIBC), levels of serum bilirubin and urea, and ZPP levels). During the exam standardization, the mean values found were: erythrocyte ZPP of unwashed erythrocytes within 3 hours after blood sampling of 30 healthy animals - 80.9 &#181;mol ZPP/mol heme; erythrocyte ZPP after washing of red blood cells, determined by 3 hours and 12 hours after blood collection, from the same group were 61.40 &#181;mol ZPP/mol heme and 61.03 &#181;mol ZPP/mol heme, respectively. Based on these results, it was concluded that blood samples taken for measurement of ZPP may be stored under refrigeration at 4 °C for up to 12 hours, without significant changes of the values of erythrocyte ZPP, and it is also advisable to wash the red cells before erythrocyte ZPP values measuring, due to the presence of interfering substances in the animal plasma. A significant difference was found in the ZPP levels and in all erythrogram components, as well as on the levels of iron metabolism between anemic and healthy animals. The bilirubin and serum urea levels remained within physiological variation, does not interfering with the measurement of erythrocyte ZPP of calves with or without anemia. The correlation values between SI and TIBC with ZPP levels were: rs = - 0.45, p < 0.001 (ZPP x SI) and rs = 0.51, p < 0.001 (ZPP x TIBC), respectively, i.e. decreasing biochemical levels of iron metabolism will increase levels of ZPP. Therefore, the use of ZPP as an iron deficiency anemia predictor in newborn calves up to one month of life has proven its validity, and considering hematofluorometry as a quick and inexpensive method, it might be recommended as a routine exam.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:31:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alan Soares Machado.pdf: 1017464 bytes, checksum: 18630b283438c7833dbed8bca4d63f3e (MD5) Previous issue date: 2009-02-27 / Fish biomass is one of the success factors during fish transport and pond stocking. This study aimed to evaluate the effect of tilápia stocing density on the time to homeostasis recovery of tilapia after transport. For that, 490 tilapia juvenile around 51,42±8,28g were placed in adapted transport box and transported during five hours. At the end of this period, fish were placed in 500L 18 PVC boxes, filled whit water and maintained whit a volume of 100L, and a mean water flow of 0.05L/s. The tilapia juvenile were randomly distributed in boxes in an entirely random factorial outline of 2 x 3, with two biomasses 10.3 and 15.4 g/L and, three samplings in time, 24, 68 and 168 hours after transport, with three repetitions each. Water physical and chemical parameters were analyzed before and after transport, in the water used from the reservoir, and in the PVC boxes, during the study. Fish blood was collected by puncture from the caudal vasculature, for the determination of the following variables: glucose, hemoglobin, hematocrit, total number of erythrocytes, mean corpuscular volume, cortisol and ions, Na and K. The blood was centrifuged, and the serum stored -20°C until the analyses. The obtained data were submitted to an analysis of variance whit P>0.01 and the averages compared with the Tukey test at 5%. It was concluded that glucose was the best parameter the diagnosis of the occurrence of physiological stress in juvenile tilapia, contrary to expectations. The largest biomass of stand after transport reduced the glycemic content of tilapia, contrary to expectation. There was interaction between biomass and time of storage after transport to the variables blood glucose and hematocrit. This indicates the importance of the period and the condition of proper fish conditioning after transporting on the returning to homeostasis, a procedure that could be used for increased safety in handling subsequent transport in fish farms. You can suggest new research biomass testing at intervals greater than assessed. / A biomassa é um dos fatores para o sucesso no povoamento de viveiros após o transporte de peixes. O presente estudo teve como objetivo avaliar a biomassa de estocagem e seu efeito sobre o tempo de retorno de juvenis de tilápia à homeostase após o transporte. Para tal, 490 juvenis de tilápia de 51,42±8,28g foram colocados em caixa de transporte apropriada e, realizado o transporte por cinco horas. Ao final deste manejo os peixes foram acondicionados em 18 caixas de PVC de 500L, preenchidas com água e mantidas com volume de 100L, e com vazão média de 0,05L/s. Os juvenis de tilápia foram distribuídos aleatoriamente nas caixas compondo delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 3, sendo duas biomassas 10,3 e 15,4 g/L e, três amostragens no tempo, 24, 68 e 168 horas após transporte, com três repetições. Os parâmetros físicos e químicos da água foram analisados na caixa de transporte antes e após o transporte, na água do reservatório de abastecimento, e nas caixas de PVC, durante todo o estudo. O sangue foi coletado por punção do vaso caudal, para determinação das seguintes variáveis fisiológicas: glicemia, hemoglobina, hematócrito, número total de eritrócitos, volume corpuscular médio, cortisol e íons, Na e K. O sangue foi centrifugado, e o soro armazenado a -20º C até a realização das análises. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância com 0,01 < P &#8804; 0,05, e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5%. Concluiu-se que a glicemia foi o parâmetro de melhor diagnóstico da ocorrência de estresse fisiológico em juvenis de tilápia. A maior biomassa de povoamento após o transporte reduziu o teor glicêmico da tilápia, contrariando a expectativa. Houve interação entre biomassas e tempo de estocagem após transporte para as variáveis glicemia e hematócrito. Isto indica a importância do período e da condição de condicionamento adequado dos peixes após transporte para o retorno a homeostase, procedimento que poderia ser adotado para maior segurança em manejo subsequente ao transporte nas pisciculturas. Pode-se sugerir ainda novas pesquisas testando biomassas em intervalos superiores aos avaliados.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:55:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARIA PAULA THEES PERILLO RODRIGUES.pdf: 616615 bytes, checksum: ff241c7f4362c3709564d808bc919f92 (MD5) Previous issue date: 2005-06-17 / Xylene is an aromatic hydrocarbon of oily consistency, practically insoluble in water, inflammable and toxic. Its contamination is persistent and bioaccumulative and can damage health and environment. Due to increasing amounts of work-related injuries, mainly those caused by chemical intoxication, health and safety programs have been implemented. Regulatory rules were created aiming workers&#8217; integrity and health, such as the NR7 that established biological parameters to occupational exposure to chemicals and NR15 that determined the allowed tolerance limit in an occupational setting. This study aimed evaluating hematological and immunological parameters of technicians in histological laboratories exposed to xylene and non-exposed individuals. The urine methylhippuric acid level was measured by high performance liquid chromatography. The hematological indices were evaluated in technicians exposed to xylene and non-exposed controls. The T lymphocytes (CD3+) and subpopulations (CD4+ and CD8+), NK cells (CD56+) and B cells (CD19+) were evaluated by flow cytometry. Phagocytic index was assessed in peripheral blood neutrophiles in technicians and normal controls using Saccharomyces cerevisiae yeast sensitized or not with serum. Methylhippuric acid levels present in the urine of technicians and controlled groups were within the allowed tolerance limits. No significant quantitative alterations of hematological indices were shown in technicians when compared to normal controls. However, peripheral blood neutrophils phagocytic index in technicians was significantly higher than in normal controls. Data shows that xylene use in this occupational activity does not imply in quantitative hematological and immunological alterations. Nonetheless, increased phagocytic capacity of the peripheral blood neutrophils of technicians suggest hyperactivation of these cells. / O xilol é um hidrocarboneto aromático de consistência líquida oleosa, praticamente insolúvel em água, inflamável e tóxico. Sua contaminação é persistente e bioacumulativa podendo causar danos à saúde e ao meio ambiente. Devido ao aumento de ocorrências de doenças profissionais principalmente as provocadas por intoxicação de produtos químicos, programas de saúde e segurança foram implementados. Foram criadas normas regulamentadoras que visam a saúde e integridade do trabalhador, como a NR7 que estabeleceu parâmetros biológicos à exposição ocupacional a produtos químicos, o utilizado para o xilol é o ácido metilhipúrico; e a NR15 que determinou o limite de tolerância permitido no ambiente ocupacional. O presente trabalho objetivou avaliar parâmetros hematológicos e imunológicos em histotécnicos de laboratório de anatomia patológica expostos ao xilol e indivíduos não expostos. A metodologia utilizada para a quantificação do ácido metilhipúrico na urina foi a cromatografia líquida de alta perfomance. Através do hemograma automatizado foram demonstrados os índices hematimétricos, leucocitário e plaquetário do sangue periférico de histotécnicos e controles não expostos ao xilol. A imunofenotipagem de linfócitos T totais ( CD3+) e subpopulações (CD4+, CD8+), células NK (CD56+) e células B (CD19+) foi avaliada por citometria de fluxo. O índice fagocitário foi avaliado em neutrófilos do sangue periférico de histotécnicos e controles normais utilizando leveduras de Saccharomyces cerevisiae sensibilizadas ou não. Os níveis de ácido metilhipúrico na urina dos histotécnicos e controles se apresentaram dentro dos limites de tolerância permitidos. Não foram demonstradas alterações quantitativas significativas dos índices hematimétricos, leucocitário e plaquetário de histotécnicos quando comparadas ao controles normais. Entretanto, o índice fagocitário de neutrófilos do sangue periférico de histotécnicos foi significativamente maior do que o de controles normais. Nossos dados indicam que a utilização do xilol nesta atividade ocupacional não induz alterações quantitativas hematológicas e imunológicas. Entretanto foram observadas alterações na atividade fagocitária de neutrófilos do sangue periférico sugerindo a hiperativação destas células.

O uso de amostras \"Controle Interno\" (CI) para validação de técnicas e reagentes imunohematológicos é exigido por lei e indispensável para identificar erros nos processos laboratoriais. No Brasil, as legislações que regem a hemoterapia aprovam a produção dos reagentes CI pelos serviços de hemoterapia (SH), desde que o processo seja previamente validado e tenha critérios de aceitação bem definidos. O estudo analisou a estabilidade de anticorpos anti-eritrocitários irregulares, da classe IgG, presentes nos plasma fresco congelado (PFC) de doadores e nas amostras pré-transfusionais de pacientes com o objetivo de utilizar esta matéria prima para a produção de CI nos laboratórios de imuno-hematologia. Foram avaliados o título, o escore e a reatividade (testes de potência) de 12 amostras de PFC com anticorpos anti-D, -E e -K e de 25 amostras de pacientes com anticorpos anti-D, -E, -e, -c, -C e -K, ambas estocadas em freezer (-25°C) e em geladeira (2 a 8°C), durante seis e três meses respectivamente. Nas amostras de PFC os valores iniciais do título e reatividade foram mantidos durante o estudo, sendo que as quedas ocorridas não ultrapassaram uma titulação ou graduação em freezer e geladeira. Todavia, o tempo de armazenamento dos PFC antes do início do estudo impactou negativamente o escore das amostras estocadas em freezer (p=0,021) e geladeira (p=0,027). Nas amostras de pacientes o título sofreu um impacto negativo significante, sendo afetado tanto pelo tempo prévio de seu armazenamento antes do início do estudo quanto pelo tipo de estocagem durante a execução dos testes. Amostras com tempo de armazenamento prévio prolongado entre 2 e 8°C tiveram seus títulos significantemente impactados quando estocadas em freezer (p=0,014) e geladeira (p=0,039), indicando que sua permanência demorada em temperaturas mais altas pode acarretar a degradação dos anticorpos de forma mais acentuada. As alíquotas armazenadas em geladeira durante o estudo tiveram uma significante redução do título (p=0,016), quando comparadas com as amostras armazenadas em freezer, confirmando uma menor viabilidade dos anticorpos mantidos em temperaturas menos frias. Ao avaliarmos uma possível associação entre os valores iniciais do título, escore e reatividade e uma propensão à queda nos resultados dos testes de potência, verificamos que os anticorpos com esses valores inicialmente baixos não apresentaram menor estabilidade se comparados aos anticorpos com valores mais altos. Esta característica indica que anticorpos irregulares IgG com diferentes perfis iniciais de potência podem ser utilizados para a produção de CI desde que corretamente caracterizados, armazenados e validados. É pertinente ampliar o conhecimento acerca da estabilidade das diferentes especificidades de anticorpos que podem compor um painel de CI, além das avaliadas neste estudo. / The use of \"Internal Control\" (IC) samples for immunohematological techniques and reagents validation is required by law and necessary to identify laboratory processes errors. In Brazil the hemotherapy legislation approve the IC reagents production by hemotherapic services (HS), if previously validated and with well-defined acceptance criteria. The study examined the stability of irregular red blood cell antibodies (IgG class) present in fresh frozen plasma (FFP) of donor and pre-transfusion patients samples with the aim of using this raw material to produce IC in immunohematology laboratories. The title, score and reactivity (potency tests) of 12 FFP with anti-D, -E and -K and 25 patients samples with anti-D, -E, -e, - c, -C, and -K were evaluated, both stored in freezer (-25°C) and refrigerator (2 to 8°C), for six and three months respectively. In FFP samples the initial values of title and reactivity were maintained during the study and the falls didn\'t exceed a titration or graduation in freezer and refrigerator. However, the storage time of the FFP before the study beginning impacted negatively the score of samples stored in freezer (p=0.021) and refrigerator (p=0.027). In patient samples the title had a negative impact, being affected by the previous storage time before the study beginning and by the storage type during the execution of the tests (freezer and refrigerator). Samples with prolonged previous storage time between 2-8°C had their title significantly impacted when stored in freezer (p=0.014) and refrigerator (p=0.039), indicating that the delayed stay at highter temperatures may lead to degradation of antibodies more sharply. The samples stored in refrigerator during the study had a significant reduction in the title (p=0,016) when compared to the samples stored in freezer, confirming a lower viability of the antibodies kept in less cold temperatures. When was evaluated a possible association between initial title, score and reactivity values and a tendency to fall their potency tests results, it was found that antibodies with initially low values didn\'t show lower stability when compared to antibodies with initial higher values. This feature indicates that IgG irregular antibodies with different inicial potency profiles can be used for IC production provided they are properly characterized, stored and validated. It\'s pertinent to extend the knowledge about the stability of different antibody specificities that can compose a IC panel in addition to those evaluated in this study.

O pacu, Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887 (Characiformes, Characidae), é uma das principais espécies da fauna aquática brasileira, com grande potencial para aqüicultura interior. Estudos sobre nutrição e determinação de exigências nutricionais são ferramentas para embasar a formulação de dietas completas e consolidar a piscicultura intensiva e viável da espécie. A suplementação dietética com vitamina C tem importância na eficiência alimentar, sanidade dos estoques e na economicidade das dietas e da criação. O objetivo deste projeto foi determinar as exigências nutricionais em vitamina C de alevinos de pacu. Os peixes (9,06 ± 1,40 g) foram alimentados com dietas contendo diferentes teores de vitamina C, ad libitum, duas vezes ao dia, durante 63 dias, e avaliados quanto ao desempenho, medido pelo ganho de peso (GDP), consumo de ração, conversão alimentar (CA), taxa de crescimento específico (TCE) e sanidade, considerando-se a incidência de sinais de deficiência em vitamina C e alterações hematológicas - contagem de eritrócitos (GV), hematócrito (HCT), hemoglobina (Hb), volume corpuscular médio (VCM) e leucócitos totais (GB). As rações semipurificadas foram suplementadas com dez níveis de inclusão: 0 (controle), 50, 100, 150, 200, 250, 300, 500, 700 e 900 mg de vitamina C (monofosfato de ácido ascórbico) kg -1 , em delineamento inteiramente ao acaso, com quatro repetições por tratamento. O efeito dos níveis de vitamina C sobre as variáveis foi analisado por regressão polinomial linear e regressão não-linear segmentada, para a determinação de valores ótimos de suplementação. A análise das variáveis de desempenho não detectou diferença entre os tratamentos (P>0,05). As regressões para peso final (PF) e GDP indicaram tendência linear positiva com maiores doses de vitamina C e o nível ótimo estimado para PF foi de 423,1 mg de vitamina C kg -1 . O ganho de peso relativo médio dos tratamentos foi de 460,8%. Houve efeito linear negativo das doses de vitamina C sobre as médias de CA (P=0,038) e foi determinado o valor de 635,7 mg kg -1 de dieta no ponto de quebra (P=0,068). O valor médio de CA para os tratamentos foi de 0,95. As médias de TCE não diferiram (P>0,05) e o valor médio encontrado foi de 2,72% dia -1 . As médias das variáveis hematológicas não diferiram (P>0,05). A GV teve efeito linear negativo na regressão com o aumento da vitamina C na dieta (P<0,05). Foi encontrado efeito quadrático (P=0,024) para o HCT na regressão linear e o valor ótimo determinado pela regressão não-linear segmentada foi de 254,0 mg kg -1 . Existiu fraca evidência linear positiva para os dados de VCM na análise de regressão não-linear segmentada (P=0,090), com valor estimado de 109,7 mg de vitamina C kg -1 de dieta no ponto de quebra. Houve fraca evidência linear negativa na regressão para as médias de Hb (P=0,103) e as médias de contagem de leucócitos totais (GB) não diferiram (P>0,05). Os exames radiológicos não detectaram deformidades estruturais nos peixes analisados. O nível de 254,0 mg de vitamina C kg -1 de dieta foi suficiente para garantir a sanidade e desempenho adequados para o pacu. / The pacu Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887 (Characiformes, Characidae), is one of the main species of the Brazilian aquatic fauna with great potential for inland aquaculture. Studies on nutritional requirements of the species are important tools to establish the basis for the formulation of complete diets and consolidate the intensive and viable farming of the species. Dietary vitamin C supplementation plays an important role in feed efficiency, sanity of the stocks and economical viability of fish diets. The objective of this study was to determine nutritional requirements of vitamin C of fingerling pacu (9.06 ± 1.40 g), fed diets containing different levels of vitamin C, ad libitum, twice a day for 63 days, through the performance indexes weight gain (WG), feed consumption, feed conversion rate (FCR), specific growth rate (SGR); sanity through incidence of vitamin C deficiency signals, and hematological analyses - red blood cells counting (RBC), hematocrit (HCT), hemoglobin (Hb), mean corpuscular volume (MCV), and total white blood cells counting (WBC). Semi-purified diets were supplemented with 0 (control), 50, 100, 150, 200, 250, 300, 500, 700, and 900 mg of vitamin C (ascorbic acid monophosphate) kg -1 , and fed to fish in a totally randomized design with four replicates. Effects of dietary levels of vitamin C on performance parameters were analyzed by linear polynomial regression and non-linear segmented regression. No differences were detected among treatments (P>0.05). Regression analysis for final weight (FW) and WG indicated positive, linear tendency with larger vitamin C doses, the best level for FW being 423.1 mg of vitamin C kg -1 diet. The average relative weight gain of fish was 460.8%. There was linear, negative effect of vitamin C doses on the averages FCR (P=0.038), reaching the break point at 635.7 mg vitamin C kg -1 diet (P=0.068), and average FCR=0.95 for all treatments. The average SGR (2.72% day -1 ) did not differ among treatments (P>0.05). Averages of hematological variables did not differ (P>0.05). RBC had negative linear effect with increasing dietary vitamin C (P <0.05). A quadratic effect was determined for HCT (P=0.024); the break point of the non-linear segmented regression was 254.0 mg vitamin C kg -1 diet. There was a low, positive linear evidence for MCV (P=0.090), the break point standing at 109.7 mg of vitamin C kg -1 of diet. There was low, negative linear evidence for average Hb (P=0.103), and the averages for WBC did not differ (P>0.05) among treatments. Radiological exams did not detect structural deformities in the analyzed fish. The level of 254.0 mg vitamin C kg -1 diet was enough to allow sanity and appropriate performance of fingerling pacu.

As células sangüíneas originam-se da medula óssea através da célula tronco que sofre processo de proliferação, diferenciação e maturação no microambiente hematopoiético. O microambiente hematopoiético é uma estrutura altamente organizada composta de células estromais, moléculas da matriz extracelular (MEC) e citocinas. A desnutrição protéico-energética diminui a produção de células sangüíneas e interfere na defesa do organismo. Neste trabalho estudamos os efeitos da desnutrição protéica (dieta contendo 4% de caseína) sobre a MEC da medula óssea em camundongos. Avaliamos a composição da MEC através de SDS-PAGE 7,5% e Western blot para Fibronectina (FN), laminina (LN) e trombospondina (TSP). Verificamos a capacidade da MEC aderir e sustentar proliferação da célula mielóide FDC-P1, na ausência e na presença de citocinas (GM-CSF e IL3). Avaliamos também a capacidade de ligação destas citocinas na MEC. O perfil eletroforético mostrou diferenças nas proteínas da MEC do animal desnutrido em relação ao controle. Através da densitometria dos géis observamos nas amostras obtidas do animal desnutrido, maior intensidade nas bandas de peso molecular 220, 182, 108 e 56 KDa em relação ao controle. Em 72 KDa a banda foi mais intensa nas amostras dos animais controles. A banda de 60 KDa foi evidenciada apenas nas amostras obtidas dos animais desnutridos. As bandas de 123 e 49 KDa foram evidenciadas apenas nas amostras dos animais controles. A expressão de FN, LN e TSP foi maior nas amostras obtidas dos animais desnutridos. Os ensaios de adesão e proliferação na presença e ausência de citocinas não apresentaram diferenças significativas entre as amostras. Quando avaliamos a capacidade da MEC ligar-se ao GM-CSF, houve maior interação com a MEC proveniente do animal desnutrido do que a MEC do animal controle. O teste de ligação para o IL3 não mostrou diferenças entre as amostras. Esses achados sugerem que a desnutrição protéica induz modificações na MEC, alterando o microambiente hematopoiético. / Blood cells have their origin at the bone marrow through the stem cell which undergoes a proliferation, differentiation and maturation process in the hematopoietic microenvironment. The hematopoietic environment is a highly organized structure formed by stromal cells, extracellular matrix (ECM) molecules, and cytokines. Protein-energy malnutrition reduces the production of blood cells, interfering with the defense of the organism. In the present work we have studied the effects protein malnutrition has on the ECM of bone marrow in mice. We have evaluated ECM composition by means of SDS PAGE 7,5% and Western blot for fibronectin (FN), laminin (LN) and thrombospondin (TSP). We assessed the capacity ECM has in adhesion and support of proliferation of the FDC-P1 myeloid cell both in the absence and in the presence of GM-CSF and IL3 cytokines. We have also measured the binding capacity of these cytokines in the ECM. The electrophoresis profile showed the existence of differences between the ECM proteins in the undernourished animal and the control. Using gel densitometry, we observed in samples from the undernourished animal a greater intensity of bands of 220, 182, 108, 60 and 56 KDa molecular weight as compared to control. At 72 KDa the band was more intense on samples from control animals. The 60 KDa band was evident only on samples taken from undernourished animals. The 123 and 49 KDa bands were evident on control animals only. Expression of FN, LN, and TSP was greater on samples from undernourished animals. Adhesion and proliferation assays, both in the presence and in the absence of cytokines, did not show significant differences among samples. When we evaluated the capacity ECM has to bind to GM-CSF, a greater interaction was seen with the ECM from the undernourished animal than the ECM from the control. Binding test for IL3 showed no differences existed among samples. Such findings suggest protein malnutrition causes alterations of the ECM, modifying the hematopoietic microenvironment.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-04-03T17:35:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_UsoTecnicaReacao.pdf: 38039015 bytes, checksum: 7f428bfd06dc0f92b66c083c3dbef073 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-04-17T17:01:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_UsoTecnicaReacao.pdf: 38039015 bytes, checksum: 7f428bfd06dc0f92b66c083c3dbef073 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-04-17T17:01:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_UsoTecnicaReacao.pdf: 38039015 bytes, checksum: 7f428bfd06dc0f92b66c083c3dbef073 (MD5) Previous issue date: 2003 / O HCV é um vírus esférico, que apresenta um genoma de RNA com polaridade positiva. Atualmente está classificado na família Flaviviridae num gênero separado que é o Hepacivirus, apresenta cerca de 9,4 Kb constituído por uma única e longa fase de leitura aberta (ORF) que compreende quase todo o genoma. Apresenta duas regiões não traduzidas nas extremidades 5' e 3' denominadas 5' UTR e 3' UTR. A poli proteína precursora é clivada em dez proteínas, resultando em proteínas virais estruturais e proteínas nãoestruturais. É um vírus de transmissão preferencialmente parenteral, com distribuição universal, cujo diagnóstico é feito na grande maioria de maneira acidental, sendo atualmente utilizado os testes sorológico e molecular. Este trabalho tem como objetivo comparar o teste sorológico de imunoensaio enzimático (ELISA) e a reação em cadeia da polimerase (PCR) na ocasião da seleção de pré-doadores de sangue. Foram feitos testes de detecção do vírus C por PCR em 290 amostras com resultado positivo ou indeterminado para o teste ELISA. A análise dos resultados revelou que as amostras com testes ELISA positivo/PCR positivo e ELISA positivo/PCR negativo são duas amostras diferentes e independentes (p=0,0006). Esta diferença pode ser supostamente devido a resposta imune diferenciada nas amostras que apresentaram resultado no teste PCR positivas. Esperava-se que houvesse correlação entre os resultados do DO/Cutoff (ELISA) e carga viral (PCR) como o que ocorre em outros vírus como o HIV, no entanto os resultados apresentaram-se totalmente dispersos (R2=0,025), confirmando a não correlação entre os dois testes: ELISA e PCR para o vírus C. / The HCV is a spherical virus that presents a RNA genome with a positive polarity. Actually classified into the flaviridae family, and Hepacivirus genre, presenting a 9.4 Kb constituted by a unique and long open reading frame (ORF) which comprises almost all the genome. It presents two untranslated regions (UTR) at the 5' and 3' extremities. The major polyprotein is clivated in ten minors proteins, resulting in structural and non-structural proteins. This virus shows preferentially the blood transmission and is distributed around the world. The diagnosis has been done accidentally in the most of cases while sorological and molecular screening is done. This work has as the main objective, to compare the imuno-enzematic assay (ELISA) with polimerase chain reaction test (PCR) in the occasion of pre-selection of blood donors. Detection screening by PCR was done in 290 samples that were positive or indeterminate for ELISA assay. The result analysis showed that the samples positive-ELISA/positive- PCR and positive-ELISA/negative-PCR are two different and independent samples (p=0,0006). This difference is supposed to be due a differential immunologic response of the samples that presented positive PCR result. We attended a correlation between DO/cut-off (ELISA) and viral load in PCR as we see in other virus like HIV, however the results appears totally disperse (R2=0,025), confirming the non-correlation between the two testes, ELISA and PCR for detection of virus C.

Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ivanangulo_tese.pdf: 266324 bytes, checksum: c71829299d95b25c86c9e9de934b919a (MD5) Previous issue date: 1997-12-15 / A quite different pattern of antierythrocytic antibodies was found in kidney-transplant recipients, normal blood donors and chronic renal failure patients undergoing hemodialysis and multitransfused. Kidney transplants with the same donor s ABO/Rh blood groups have low prevalence of antierythrocytic antibodies of immune type. As they are not transfused, may be exposed to fetal antigens during pregnancy. Natural antibodies could be raised by bacterial estimulus enhanced by immunosupression. Autoantibodies were found in those receiving cyclosporin, perhaps as a feature of autoimmunity by the drug. Normal blood donors have the same prevalence of natural and immune-type antibodies. Women predominate and as they were not transfused, pregnancy was the most probable stimulus again. CRF patients in São José do Rio Preto are aloimmunized against red cell antigens less frequently than other studies and have no anti-N like or -Nf, as they are not exposed to formaldehyde. Women with antibodies of immune type predominate again, probably stimulated by fetal antigens. More sensitive and specific methods will help us understand antierythrocytic antibodies production under exposure to blood group antigens in healthy and immunossupressed people under different stimulus. / Estudamos a prevalência e especificidade de anticorpos antieritrocitários em transplantados renais, doadores de sangue e pacientes portadores de insuficiência renal crônica, hemodialisados e politransfundidos. Encontramos diferenças entre os grupos. Os transplantados, compatíveis ABO/Rh com doador, apresentaram prevalência elevada em comparação com outros imunossuprimidos, tinham predominatemente anticorpos naturais, possivelmente devidos a estímulos bacterianos, e poderiam estar sendo estimulados pela imunossupressão. Os anticorpos de origem imune encontrados têm importância clínica transfusional e obstétrica. Auto-anticorpos, encontrados todos no subgrupo usando ciclosporina-A, fazem supor ação desta droga na formação de auto-imunidade. Os doadores de sangue, com prevalência semelhante a de outros trabalhos descritos na literatura, mostraram equivalência entre anticorpos de origem natural e imune. A exposição a antígenos se deu possivelmente na gravidez, pois a maioria dos portadores de anticorpos imunes de nossa região é do sexo feminino e nenhum foi transfundido há menos de 10 anos. Em hemodialisados, na sua maioria do sexo feminino, predominam os anticorpos imunes. Quanto ao anti-N encontrado, supomos não se tratar de anti-N- like ou -Nf, pelo fato de não ser utilizado formaldeído na assepsia das membranas hemodialíticas reutilizáveis. Utilizando técnicas mais sensíveis e específicas poderemos aprofundar nossos conhecimentos sobre a resposta a antígenos de grupos sanguíneos em pessoas aparentemente sadias e imunossuprimidas, conforme as vias de sensibilização (transfusão ou gravidez).

Resumo: A beta talassemia é um dos mais freqüentes distúrbios genéticos no mundo. Estima-se que 1,5% a 3% da população mundial seja portadora do traço talassêmico. Esses portadores geralmente são oligo ou assintomáticos e têm uma expectativa de vida semelhante à dos não portadores. Entretanto, níveis elevados de ferritina sérica têm sido observados em alguns estudos comparativos entre beta talassemia heterozigota e não portadores e, alguns indivíduos, que nunca foram transfundidos, apresentam sinais clínicos e laboratoriais de sobrecarga de ferro. A fisiopatologia dessa complicação continua em discussão. Vários pesquisadores têm sugerido um efeito modulador da mutação do gene da beta globina e mutações em genes codificadores de proteínas relacionadas ao metabolismo do ferro. Mutações no gene HFE são as mais freqüentemente associadas à hemocromatose hereditária. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a freqüência das mutações C282Y e H63D no gene HFE em portadores de beta talassemia heterozigota e analisar sua influência no metabolismo do ferro. Foram estudados 162 portadores de beta talassemia heterozigota, residentes na cidade de São Carlos ou região, caucasóides e, acompanhados no serviço de Hematologia. O diagnóstico de traço talassêmico foi confirmado em todos por meio do eritrograma e da quantificação da Hb A2 e Hb fetal por HPLC. O metabolismo do ferro foi avaliado pelas dosagens de ferro sérico, capacidade total de ligação do ferro, ferritina e saturação da transferrina e, a análise molecular das mutações no gene HFE, pela técnica de PCR-RLFP. Foram realizadas análises de correlação linear de Pearson por idade e gênero entre hemoglobina... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Beta thalassemia is one of the most frequent genetic disorder in the world. It is estimated that 1.5% to 3% of the world population is a thalassemia carrier. These individuals are generally slightly symptomatic or asymptomatic and they have a life expectancy similar to those who are non-carriers. However, high levels of serum ferritin have been observed in some comparative studies between heterozygous for beta thalassemia and non-carriers, and some individuals that were never transfused, present clinic and laboratories signs of iron overload. The physiopathology of this disease continues in discussion. Several researchers have suggested a modulator effect from the mutation of the beta globin gene and mutations in genes related with the iron metabolism. Mutations of the gene HFE are the most frequently associated to the hereditary hemochromatosis. The aim of this study was evaluate the frequency of C282Y and H63D mutations in the HFE gene in beta thalassemia carriers, and analyze its influence in the iron metabolism. 162 beta thalassemia carriers, Caucasoid, residing in the city of Sao Carlos or region and accompanied in the Hematology service were studied. The diagnostic of thalassemia trait was confirmed in every one through a complete erythrogram and quantification of Hb A2 and Hb fetal by HPLC. The iron metabolism was evaluated by serum iron, total iron-binding capacity, serum ferritin and percent saturation of transferring. The molecular analysis of the mutations in the HFE gene was made by PCR-RLFP. There were made analysis of linear Pearson' correlation, by age and gender, among hemoglobin, Hb A2, VCM and among reticulocytes count and the values of saturation of transferrin and serum ferritin. / Orientador: Claudia Regina Bonini Domingos / Coorientador: Antonio José Manzato / Banca: Celso Carlos de Campos Guerra / Banca: Paula Rahal Liberatore / Mestre