Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-11-08T19:34:30Z No. of bitstreams: 1 2011_AnaCarolinaOliveiradeAraújo.pdf: 3209514 bytes, checksum: ae2cd9ee0a8a8200911cb3ad232d7e29 (MD5) / Approved for entry into archive by Leila Fernandes (leilabiblio@yahoo.com.br) on 2011-12-20T12:52:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_AnaCarolinaOliveiradeAraújo.pdf: 3209514 bytes, checksum: ae2cd9ee0a8a8200911cb3ad232d7e29 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-12-20T12:52:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_AnaCarolinaOliveiradeAraújo.pdf: 3209514 bytes, checksum: ae2cd9ee0a8a8200911cb3ad232d7e29 (MD5) / As Hepatites virais são doenças causadas por diferentes agentes etiológicos, que possuem distribuição universal e têm em comum o hepatotropismo. Em todo mundo, as hepatites A e B continuam a ser um grande problema de saúde pública. A Organização Mundial da Saúde (OMS) estima que 170 milhões de pessoas estejam infectadas com o vírus da hepatite C (HCV) e que 300 milhões vivam com o vírus da hepatite B (HBV). O vírus da hepatite B está classificado na família Hepadnavirus, contém características como o tropismo pelas células hepáticas e material genético constituído por uma molécula de DNA com fita parcialmente dupla. O diagnóstico de qualquer uma das formas clínicas da Hepatite B realiza-se através de técnicas sorológicas. Tais técnicas revelam-se fundamentais não apenas para o diagnóstico, mas também mostram-se muito úteis no acompanhamento da infecção viral, na avaliação do estado clínico do paciente e na utilização de terapêutica específica. As importantes descobertas realizadas nas áreas da virologia e da biologia molecular desses vírus, nos últimos anos, foram progressivamente sendo incorporados à rotina diária dos laboratórios de patologia clínica, permitindo aos profissionais da área de saúde acesso às modernas técnicas capazes de avaliar a carga viral presente no indivíduo, o índice de replicação do agente infeccioso e a eficácia de novas medicações utilizadas no tratamento dessa virose. O HBsAg é uma glicoproteína antigênica exposta na superfície do envelope do HBV cuja presença no soro do paciente indica uma infecção ativa . Capaz de ativar uma resposta imunológica, o HBsAg é utilizado na confecção de vacinas e Kits diagnósticos. Este trabalho descreve a construção de um baculovírus recombinante contendo o gene do antígeno HBsAg de HBV fusionado ao gene da poliedrina do Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus (AcMNPV). O vírus reecombinante foi usado para infectar células de insetos e insetos e sua expressão analisada por SDS-PAGE. A proteina recombinante foi expressa em grande quantidade, purificada por centrifugação em gradiente de sacarose e usada como antígeno em um teste de diagnóstico comumente utilizado em latoratórios clínicos. A proteina recombinante foi reconhecida pelo soro de pacientes infectados pelo HBV e desta forma, possui potencial para ser usada em testes de diagnóstico dessa importante doença viral humana. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Viral hepatitis are diseases caused by different etiologic agents, that have worldwide distribution and have in common hepatotropism. Worldwide, hepatitis A and B remains a major public health problem . The World Health Organization (WHO) estimates that 170 million people are infected with hepatitis C virus (HCV) and 300 million are living with hepatitis B virus (HBV). Hepatitis B is classified in the Hepadnavirus family, contains commun features such as tropism for liver cells and its genetic material consists of a partial double stranded DNA molecule. The diagnosis of a clinical form of hepatitis B is carried out by serological techniques. These techniques are not only important for diagnosis but are also very useful in monitoring viral infection, in assessing the patient's clinical status and in the use of specific therapy. Important developments derived from research in virology and molecular biology of these viruses in recent years, have gradually been incorporated into the daily routine of clinical pathology laboratories, allowing healthcare professionals to access modern techniques to evaluate the viral load present the individual, the replication of the infectious agent and effectiveness of new medications used to treat this viral infection. HBsAg is a glycoprotein antigen exposed on the surface of the envelope of HBV, whose presence in the serum of the patient indicates an active infection. HBSAg is able to activate a human immune response and is used in the production of vaccines and diagnostic kits. This work shows the construction of a recombinant baculovirus containing the HBsAg gene (from HBV) fused to the polyhedrin gene of the Autographa californica multicapsid Nucleopolyhedrovirus virus (AcMNPV). The recombinant virus was used to infect insect cells and insects and the expression of the recombinant protein was analysed by SDS-PAGE. The recombinant protein was highly expressed, purified by sucrose gradient centrifugation, and used as antigen in a diagnostic test commonly used in clinical laboratories m(ELISA). The recombinant protein was shown to be recognized by serum of HBV-infected patients and therefore, have the potential to be used in diagnosis of this important human viral disease.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Saúde Coletiva, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-01-03T14:00:29Z No. of bitstreams: 1 2013_GeisyMunizdeLemos.pdf: 1008168 bytes, checksum: af238940da9d17741ff2a857a01583d7 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-01-06T13:43:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_GeisyMunizdeLemos.pdf: 1008168 bytes, checksum: af238940da9d17741ff2a857a01583d7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-01-06T13:43:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_GeisyMunizdeLemos.pdf: 1008168 bytes, checksum: af238940da9d17741ff2a857a01583d7 (MD5) / Introdução:As últimas décadas foram de grandes mudanças e notáveis conquistas no que se refere à prevenção e ao controle das hepatites virais, porém entre as doenças endêmico-epidêmicas, representa impactante problema de saúde pública no Brasil. Principal causa de morte no Brasil entre as hepatites virais entre 2000 e 2011, segundo a OMS 150 milhões de pessoas estão cronicamente infectadas pelo virus da hepatite C (HCV), e aproximadamente 1.000.000 pessoas morrem a cada ano (~ 2,7% de todas as mortes) de causas relacionadas com as hepatites virais B e C. O tratamento é caro e resposta virológica favorável, para sua sustentabilidade. Fatores internos e externos podem contribuir para o sucesso do tratamento como adesão e genótipo do vírus.O objetivo deste estudo foi definir o perfil dos casos notificados de infecção pelo HCV e a distribuição de medicamentos para o tratamento da hepatite C, no período de Julho de 2011 a junho de 2012. Métodos: Foram utilizados os registros de notificação da hepatite C do Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN), e os relacionados à quantidade de tratamentos distribuídos no período de julho de 2011 a junho 2012 do banco de Autorizações de Procedimento de Alta Complexidade (APAC) com Alfa-interferon Peguilado (IFN-PEG) associado à Ribavirina. Resultados: A notificação mostra que a maior proporção dos casos é de indivíduos do sexo masculino, com idades entre 35 a 54 anos, residentes no Sudeste. Há um aumento no número da notificação de casos em mulheres acima de 60 anos. Os registros de APAC mostram que 16.757 indivíduos iniciaram tratamento. Destes, 59,6% utilizaram o IFN-PEG Alfa 2a; 4.043 tiveram a data da primeira APAC entre abril e julho de 2011, 2 foram à óbito; 84,0% completaram pelo menos 12 semanas; 56,9%, 24 semanas e 24,8%, 40 semanas de tratamento. Discussão: O perfil da distribuição coincide com a notificação quanto à região e gênero. Porém, quanto à idade, há predomínio da faixa entre 50 e 59 anos. Questiona-se se o possível atraso no diagnóstico ou no acesso ao tratamento,sendo impossível cruzar as informações entre os sistemas. Os sistemas de informação atualmente disponíveis no SUS não conseguem fornecer dados que permitam aferir a adesão, efetividade e resposta virológica sustentada. ________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The last few decades have brought great changes and remarkable achievements in relation to the prevention and control of viral hepatitis, but between endemic and epidemic diseases, is impacting public health problem in Brazil. Leading cause of death in Brazil around viral hepatitis between 2000 and 2011, according to the WHO 150 million people are chronically infected with hepatitis C virus (HCV), and approximately one million people die each year (~ 2.7% of all deaths) by related causes viral hepatitis B and C. The treatment is expensive and virologic response needed to their sustainability. Internal and external factors can contribute to the success of treatment as adherence and virus genotype. The aim of this study was to define the profile of reported cases of HCV infection and distribution of drugs for the treatment of hepatitis C in Brazil, between July 2011 and June 2012. Methods: The records of notification of hepatitis C at the brazilian system for diseases notification (SINAN), and related to the amount of treatments distributed in the period of July 2011 to June 2012 through Authorizations High Complexity Procedures (APAC) records, with pegylated interferonalpha (PEG-IFN) ribavirin associated.Results: The notification shows that most of the cases were men, aged 35-54 years, living in the Southeast. The number of cases in women over 60 years is quite siginificant. APAC records shows that 16,757 individuals started treatment. Of these, 59.6% used PEG-IFN alpha 2a; 4043 had the date of the first APAC between April and July 2011, were the two deaths, 84.0% completed at least 12 weeks, 56.9%, 24 weeks and 24.8%, 40 weeks of treatment. Discussion: The profile of the distribution coincides with the notification for the region and gender. However, in age, there is aage difference being the records between 50 and 59 years. Wonders whether the possibilitiesto delay the diagnostic and access to the treatment, and it is impossible to cross information between systems. Information systems currently available can not provide data to evaluate adherence, effectiveness, and sustained virologic response.

Introdução: Pacientes com infecção crônica pelo VHC e superinfecção pelo vírus da hepatite A (VHA) ou o vírus da hepatite B (VHB), têm maior morbi-mortalidade quando comparados com pacientes que apresentam infecção aguda somente pelo VHA ou VHB. A mortalidade associada à hepatite A aguda pode estar particularmente elevada em pacientes com pré-existência de hepatite crônica causada pelo VHC. Por esta razão, a imunização ativa com vacinas contra o VHA e o VHB vem a ser obrigatória nesta população, e consequentemente esta sorologia deve ser determinada. Objetivos: O objetivo deste trabalho foi avaliar a prevalência de marcadores sorológicos da hepatite A e hepatite B em 1.000 pacientes com infecção crônica pelo VHC atendidos no Ambulatório de Hepatites da Divisão de Gastroenterologia e Hepatologia Clínica do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Resultados: O anti-VHA IgG foi positivo em 923 de 1000 pacientes (92,3%). Quando estratificados por idade, o anti-VHA IgG foi encontrado em 61% dos pacientes entre 20 e 29 anos, 70% entre 30 e 39 anos, 85% entre 40 e 49 anos, 94% entre 50 e 59 anos e 99% nos pacientes com mais de 60 anos . O anti-HBc total foi positivo em 244 pacientes (24%). Estratificados por idade, em 4,3% dos pacientes entre 20 e 29 anos, 17% entre 30e 39 anos, 21% entre 40 e 49 anos, 24% entre 50 e 59 anos, e 28% dos pacientes com mais de 60 anos. Dos 244 pacientes anti-HBc IgG positivos, 0,8% são HBsAg positivo, 8,5% anti-HBc IgG isolado e 16% anti-HBs positivo. Conclusões: A prevalência de anti-VHA IgG nod nossos pacientes com hepatite C crônica foi semelhante à da população geral no município de São Paulo. No entanto, o anti-HBc totaI foi maior em nossos pacientes, quando comparada historicamente à população geral dos países ocidentais, sugerindo fatores de risco semelhantes para as hepatites B e C, o que enfatiza a importância dos programas de imunização nesta população / Background and Aims: Patients with chronic HCV and superinfection by hepatitis A virus (HAV) or hepatitis B virus (HBV) have higher morbidity and mortality when compared with those without HCV. For this reason, HAV and HBV active immunization has become mandatory in this population and hence their serological markers must be determined. The aim of this study was to evaluate the prevalence of serological markers of HAV and HBV infection in patients with chronic HCV. Methods: 1.000 chronic HCV infected patients at the University of Sao Paulo School of Medicine outpatient Liver Clinic were evaluated for the prevalence of serological markers of HAV and HBV infection. Results: Anti-HAV IgG was positive in 923 of 1000 patients (92.3%). When stratified by age, the anti-HAV IgG was found in 61% of patients between 20-29 years, 70% between 30-39 years, 85% between 40-49 years, 94% between 50-59 years, and 99% over 60 years of age. Anti-HBc IgG was positive in 244 patients (24%). Stratified by age, anti-HBc IgG was found in 4.3% of patients between 20-29 years, 17% between 30-39 years, 21% between 40 -49 years, 24% between 50-59 years, and 28% of patients over 60 years of age. Of the 244 anti-HBc IgG positive patients, 0.8% were also HBsAg positive, 8.5% were anti-HBc IgG isolated and 16% were also anti-HBs positive. Conclusions: The prevalence of anti-HAV IgG was similar to the general population in the city of São Paulo. However, anti-HBc IgG was higher in our chronic HCV patients, when compared historically to the general population of western countries, suggesting similar risk factors for HBV and HCV acquisition, so emphasizing the importance of immunization programs in this population. Keywords: Hepatitis C, Chronic; Hepatitis C; Hepacivirus, Prevalence; Hepatitis A; Hepatitis B Título: Prevalência de Marcadores Sorológicos das Hepatites A e B em Pacientes com Hepatite C Crônica atendidos no Ambulatório de Hepatites do Serviço de Gastroenterologia Clínica do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo - HCFMUSP Background and Aims: Patients with chronic HCV and superinfection by hepatitis A virus (HAV) or hepatitis B virus (HBV) have higher morbidity and mortality when compared with those without HCV. For this reason, HAV and HBV active immunization has become mandatory in this population and hence their serological markers must be determined. The aim of this study was to evaluate the prevalence of serological markers of HAV and HBV infection in patients with chronic HCV. Methods: 1.000 chronic HCV infected patients at the University of Sao Paulo School of Medicine outpatient Liver Clinic were evaluated for the prevalence of serological markers of HAV and HBV infection. Results: Anti-HAV IgG was positive in 923 of 1000 patients (92.3%). When stratified by age, the anti-HAV IgG was found in 61% of patients between 20-29 years, 70% between 30-39 years, 85% between 40-49 years, 94% between 50-59 years, and 99% over 60 years of age. Anti-HBc IgG was positive in 244 patients (24%). Stratified by age, anti-HBc IgG was found in 4.3% of patients between 20-29 years, 17% between 30-39 years, 21% between 40 -49 years, 24% between 50-59 years, and 28% of patients over 60 years of age. Of the 244 anti-HBc IgG positive patients, 0.8% were also HBsAg positive, 8.5% were anti-HBc IgG isolated and 16% were also anti-HBs positive. Conclusions: The prevalence of anti-HAV IgG was similar to the general population in the city of São Paulo. However, anti-HBc IgG was higher in our chronic HCV patients, when compared historically to the general population of western countries, suggesting similar risk factors for HBV and HCV acquisition, so emphasizing the importance of immunization programs in this population

Base Teórica: Alguns estudos têm sugerido que a infecção crônica pelo HCV tem efeitos diretos e indiretos no tecido pulmonar, incluindo um declínio acelerado do VEF1. É necessário conhecer o quão prevalente é esta infecção nos pacientes com DPOC, o que pode justificar o rastreamento do HCV nesta população. Objetivos: Determinar a prevalência de infecção pelo HCV em uma amostra de pacientes com DPOC e comparar as características clínicas e funcionais entre os pacientes HCVpositivos e HCV-negativos. Métodos: Foi realizado um estudo transversal. Foram incluídos no estudo 187 pacientes ambulatoriais com diagnóstico de DPOC. A positividade ao exame anti-HCV era determinada e confirmada pelo HCV-RNA. Resultados: A prevalência de infecção pelo HCV foi de 7,5%. Os pacientes HCV-positivos tinham um VEF1 pós-broncodilatador (% do previsto) menor (34,7 ± 8,6%) que os pacientes HCV-negativos (42,7 ± 16,5%) (p = 0,011). Todos os pacientes HCV-positivos foram classificados nos estádios III e IV, de acordo com os critérios do GOLD. O escore de dispnéia na escala MMRC foi maior nos pacientes HCV-positivos (mediana = 4) do que nos pacientes HCV-negativos (mediana = 2) (p = 0,023). O índice BODE foi maior nos pacientes HCV-positivos (mediana = 6) do que nos pacientes HCV-negativos (mediana = 4) (p = 0,027). Conclusões: Nossos resultados sugerem uma alta prevalência de infecção crônica pelo HCV em pacientes com DPOC. Os pacientes HCV-positivos tinham achados sugestivos de uma doença mais grave. / Background: A number of studies have suggested that chronic HCV infection have direct and indirect effects on pulmonary tissue, including an accelerated decline of FEV1. It is necessary to know how prevalent this infection is in patients with COPD, what could justify the screening of HCV in this population. Objectives: To determine the prevalence of HCV infection in a sample of COPD patients, and to compare the clinical and functional characteristics between HCV-positive and HCVnegative patients. Methods: We performed a cross-sectional study. One hundred eighty seven COPD outpatients were included in the study. Anti-HCV antibody positivity was determined and confirmed by HCV-RNA. Results: The prevalence of HCV infection was 7.5%. The HCV-positive patients had a postbronchodilator FEV1 (% predicted) lower (34.7 ±8.6%) than HCV-negative patients (42.7 ± 16.5%) (p = 0.011). All HCV-positive patients were classified in stages III or IV (GOLD). The MMRC dyspnea scale score was higher in HCV-positive patients (median = 4) than in HCVnegative patients (median = 2) (p = 0.023). BODE index was higher in HCV-positive (median = 6) than in HCV-negative patients (median = 4) (p = 0.027). Conclusions: Our results suggest a high prevalence of chronic HCV infection in patients with COPD. The HCV-positive patients had findings suggestive of a more severe disease.

Introdução: Mais do que 50% dos pacientes infectados pelo vírus da hepatite crônica C (HCV) não respondem ao tratamento com interferon convencional (IFN) associado a ribavirina (RBV). O objetivo do nosso estudo foi avaliar a efetividade do retratamento com alfapeginterferona 2a ou 2b (PEG-IFN 2a ou 2b) concomitantemente com RBV, em pacientes com HCV, genótipo 2 e 3, que foram não-respondedores ou recidivantes ao primeiro tratamento convencional com IFN/RBV e identificar possíveis fatores preditivos de resposta virológica sustentada (RVS). Métodos: No período de setembro de 2003 a março de 2009 uma coorte de 216 pacientes portadores de hepatite C foram acompanhados em um serviço especializado, implementado no Sistema Único de Saúde-Rio Grande do Sul/Brasil. Todos os pacientes foram retratados com PEG-IFN 2a ou 2b, na dose de 180 mcg ou 1,5 mcg/Kg de peso corporal por semana, respectivamente, associado a RBV na dose de 1.000-1.250mg/dia por 48 semanas. O HCV-RNA foi testado por Polymerase Chain Reaction (PCR) nas semanas 12 (por PCR quantitativo), 48 e 72 (por PCR qualitativo). A resposta virológica (RV) nas 48 semanas e a RVS nas 72 semanas foram considerados para avaliação de eficácia do tratamento. As análises foram realizadas nos pacientes que receberam pelo menos 1 dose de PEG-IFN 2a ou 2b. Resultados: A taxa de RVS para os não-respondedores ao primeiro tratamento foi de 34,4% e para os recidivantes foi de 50% (P=0,031) através do teste exato de Fisher. Foram identificados como fatores preditivos que contribuem na melhora da RVS, a idade (P=0,005), ser recidivante ao tratamento anterior (P=0,023) e apresentar exame de biópsia hepática Metavir F0-F2 (P=0,004), os demais fatores avaliados não demonstraram diferença estatística significativa. Na avaliação do perfil de segurança 51 pacientes (23,6%) interromperam precocemente o tratamento. Destes, 18,5% por eventos adversos onde os mais freqüentes foram anormalidades laboratoriais (40%), óbito (20%) e cirrose descompensada (17,5%). Conclusões: Este é o primeiro estudo pragmático realizado no cenário da realidade do SUS brasileiro que avalia a efetividade do retratamento com PEG-IFN 2a ou 2b e RBV. Esta alternativa de retratamento para pacientes que falharam à terapias prévias anti-HCV, tem demonstrado uma promissora taxa de RVS, desde que seja feita uma seleção cuidadosa dos pacientes com fatores preditivos de resposta e monitorizados os eventos adversos.

A ciclosporina (CsA), a despeito da recente introdução de novas drogas imunossupressoras, permanece como a pedra angular da terapia antirejeição do receptor de enxerto renal. No Brasil, 30% dos pacientes em lista de espera para transplante renal são anti-VHC+, e observações prévias do nosso grupo sugerem uma farmacocinética da CsA alterada nesses pacientes. Com o objetivo de avaliar esta hipótese, dois estudos paralelos foram feitos: um estudo pré-transplante com 22 pacientes em hemodiálise aguardando transplante, 11 anti-VHC+ (ELISA3), 7 dos quais PCR+, e 11 anti-VHC-, que receberam uma dose única oral de 8 mg/kg de ciclosporina em microemulsão (CsA-ME); e um estudo no 15º dia pós-transplante, com 24 receptores consecutivos, 10 ELISA+ (6 PCR+) e 14 ELISA-, que receberam a dose oral de CsA em microemulsão indicada pela equipe assistente. Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados a partir de 13 dosagens (tempo 0-12 h pós-dose) feitas por fluorimetria polarizada com anticorpos monoclonais (Abbot Laboratories, Illinois). Aqueles HbsAg+, com transaminases elevadas, diabéticos ou usando drogas que tivessem interação farmacocinética com a CsA foram excluídos. A análise estatística foi feita pelo teste t e Mann-Whitney. As variáveis demográficas com conhecida influência sobre a farmacocinética da CsA foram similares nos dois grupos. No estudo pré-transplante, , a Cmáx foi 40% maior, a ASC0-12 42% maior (p<0,05) e a Cmin 56% maior entre os pacientes ELISA+ comparados aos ELISA-. Essas diferenças foram acentuadas comparando o subgrupo PCR+ com os pacientes VHC- (Cmáx 58% maior -p=0,05-, ASC0-12 69% maior -p<0,01-, e Cmin 91% maior -p<0,01-). No estudo pós-transplante a Cmáx, a ASC0-12/dose e a Cmin não diferiram estatisticamente entre os grupo anti-VHC+ e anti-VHC- (21%, 23% e 2% maior, respectivamente). Ao avaliar apenas os pacientes PCR+, a Cmáx foi 50% maior (p<0,01) e a ASC0-12/dose 45% maior (p<0,05) do que o grupo ELISA-. O nível de vale, acompanhado pelos 12 meses pós-transplante, foi sempre superior entre os pacientes ELISA+, a despeito de doses menores de CsA, atingindo significância aos seis meses. Concluímos que os pacientes anti-VHC+, principalmente aqueles com viremia (PCR+), têm a farmacocinética da CsA microemulsão alterada, com níveis de pico e ASC0-12/dose maiores que os controles anti-VHC-. / Cyclosporine (CsA), despite recent introduction of new immunosuppressive drugs, still remains the cornerstone of kidney transplant recipient immunosuppression. In Brazil, 30% of patients waiting for kidney transplantation are anti-HCV+, and previous observations of our group suggest an altered CsA pharmacokinetics in these patients. In order to evaluate that, two parallel studies were done: a pre-transplant study with 22 dialysis patients waiting for transplantation, 11 anti-HCV+ (ELISA third generation), 7 of them PCR+, and 11 anti-HCV-, which received a 8 mg/kg single oral dose of CsA microemulsion (CsAME); and a 15th day post-transplant study with 24 consecutive recipients, 10 ELISA+ (6 PCR+) and 14 ELISA-, which received the CsA microemulsion oral dose indicated by the assistants. Pharmacokinetics parameters were calculated from 13 dosages (time 0-12 hours post-dose) performed by fluorescence polarization immunoassay with monoclonal antibodies (Abbot Laboratories, Illinois). Those patients HbsAg+, with elevated transaminases, diabetics or using drugs interacting with CsA pharmacokinetics were excluded. Statistical analysis was done by t test and Mann-Whitney. Demographic variables with already known CsA pharmacokinetics influences were similar in both groups. In the pre-transplant study, Cmax was 40% higher, AUC0-12 42% higher (p< 0,05) and Cmin 56% higher for HCV+ patients in comparison to HCV- ones. These differences were accentuated comparing PCR+ with HCV- patients (Cmax 58% higher - p= 0,05 -, AUC0-12 69% higher - p< 0,01 -, and Cmin 91% higher- p< 0,01). In the post-transplant study Cmax was 21% higher, AUC0-12/dose 23% higher and Cmin 2% higher for HCV+ patients. When evaluating only PCR+ patients, Cmax was 50% higher (p< 0,01) and AUC0-12/dose 45% higher (p< 0,05) than ELISA- group. Trough levels, followed for 12 months PO, remained higher in HCV+ patients, despite small doses of CsA. We conclude that anti-HCV+ patients, mainly those with viremia (PCR+), have altered CsA microemulsion pharmacokinetics, with higher peak levels and drug exposure than control patients anti-VHC-.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-03-31T17:58:12Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Roeckson MEDTROP.pdf: 1220007 bytes, checksum: 14de64602635da31ee8f293596dc60ea (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-31T17:58:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Roeckson MEDTROP.pdf: 1220007 bytes, checksum: 14de64602635da31ee8f293596dc60ea (MD5) Previous issue date: 2015-02-13 / CNPQ / O extrato de vermes adultos de Ascaris suum (Asc) possui efeito anti-inflamatório e imunossupressivo, entretanto durante a hepatite autoimune experimental foi capaz de induzir a produção colágeno. A N-acetil-L-cisteína (NAC), que apresenta propriedades antioxidantes e antifibróticas, pode melhorar a ação do Asc em modelos de desordens inflamatórias, reduzindo a síntese de colágeno. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do Asc e de sua associação com a NAC como estratégia de tratamento para hepatite autoimune, que apresenta a cirrose como principal complicação decorrente de falha na terapia convencional. A hepatite autoimune experimental foi induzida pela administração intravenosa da lectina concanavalina A em animais BALB/c (HAE). Após indução, um grupo foi tratado com Asc (HAE+Asc) e outro grupo com Asc e NAC (HAE+Asc+NAC). Como controle, um grupo foi tratado com salina (HAE). Foram quantificados e comparados entre os grupos o peso hepático e sua análise anatomohistopatológica, os níveis das transaminases e imunoglobulinas totais, a produção de óxido nítrico (NO) e das citocinas interleucina (IL)-5, IL-10, IL-13 e do fator de transformação do crescimento beta (TGF-β). Nos grupos tratados, o Asc ocasionou a redução dos níveis das transaminases, imunoglobulinas totais e do infiltrado inflamatório, bem como o aumento da produção de TGF-β quando comparados com o grupo HAE. Quando a NAC foi associada ao esquema terapêutico, a produção de colágeno foi controlada e acompanhada por níveis reduzidos de NO e IL-13. No grupo HAE+Asc+NAC também foi observada redução do peso hepático e níveis elevados de IL-5 e IL-10. Dessa forma, a estratégia de tratamento para HAE foi melhorada quando a NAC foi associada ao Asc no esquema terapêutico. / The adult worm extract of Ascaris suum (Asc) has potent anti-inflammatory and immunosuppressive effect, however during experimental autoimmune hepatitis was capable of inducing collagen production. The N-acetyl-L-cysteine (NAC), which has antioxidants and antifibrotic properties, may enhance the action of Asc in models of inflammatory disorders, reducing collagen synthesis. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effects of Asc and its association with the NAC as a treatment strategy for autoimmune hepatitis, which exhibit the cirrhosis as main complication arising from failure to conventional therapy. Experimental autoimmune hepatitis was induced by intravenous administration of concanavalin A lectin in Balb/c animals (EAH). After induction, one group was treated with Asc (HAE+Asc) and another group with Asc and NAC (HAE+Asc+NAC). As a control, one group was treated with saline (HAE). Were quantified and compared between groups liver weight, aminotransferase levels and total immunoglobulins and anatomopathological analysis, nitric oxide (NO) production and cytokine interleukin(IL)-5, IL10, IL-13 and the transforming growth factor beta (TGF-β). In the treated groups, the ASC caused the reduction in levels of transaminases, total immunoglobulins and inflammatory infiltration, as well as increases TGF-β production compared with the group EAH. When the NAC was associated with the treatment regimen, collagen production was controlled and accompanied by reduced levels of NO and IL-13. In EAH+Asc+NAC group was also observed reductions in liver weight and high levels of IL-5 and IL-10. Thus, the treatment strategy for HAE were improved when NAC was associated with Asc the therapeutic regimen.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-06-05T18:24:22Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Luciana Tavares de Carvalho Barros.pdf: 978217 bytes, checksum: 9bbd97bc0d108d6999496e25f30b47df (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-05T18:24:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Luciana Tavares de Carvalho Barros.pdf: 978217 bytes, checksum: 9bbd97bc0d108d6999496e25f30b47df (MD5) Previous issue date: 2016-06-09 / A Hepatite C representa um grande impacto na saúde pública em todo o mundo. Interfere na vida dos portadores de HCV, na sociedade, no sistema de saúde e na economia. No Brasil, os medicamentos são de alto custo, apresentam terapias prolongadas e com efeitos colaterais nos tratamentos convencionais. Com evolução das novas tecnologias incorporadas ao SUS em 2015, há expectativa do aumento da resposta virológica e cura. Objetivos: Avaliar a eficácia e segurança do Daclatasvir e Sofosbuvir versus Alfapeginterferona 2A na Hepatite C Crônica. Método: Busca em dados eletrônicos: MedLine via PubMed, LILACS e Biblioteca Cochrane, com critérios: ensaios clínicos Randomizados (ECR) e Revisões Sistemáticas (RS) em Hepatite C Crônica. Resultados: Incluídos 01 ECR com a Daclatasvir e sofosbuvir com a ribavirina e 01 RS com Metanálise, somente ECR, que avaliou a terapia com interferon peguilado alfa 2A e alfa 2B associado a ribavirina, com ou sem inibidores de protease. Quanto à eficácia, o ECR identificou aqueles que contemplavam o Daclatasvir com o sofobusvir possuíam altos índices de resposta virológica sustentada. A eficácia reportada pela RS favorece ao uso da peginterferona alfa 2A. Conclusões: A segurança das intervenções foi analisada apenas no ECR na qual foi medida através do surgimento de eventos adversos durante e depois do tratamento. Como nos estudos relatam a eficácia das drogas de acordo com parâmetros diferentes, dificultando assim comparações mesmo que de forma indireta. / Introduction: Hepatitis C represents a major impact in public health worldwide.It Interferes in the lives of patients with HCV, in society, in the health system and the economy. In Brazil, medicaments are expensive and have length and side effects of conventional treatments therapies. With the evolution of new technologies incorporated into the SUS in 2015, there’s a expectation of a higher virologic response and healing. Objectives: To evaluate the efficacy and safety of Daclatasvir and sofosbuvir versus peginterferon alfa-2a in Chronic Hepatitis C. Method: Searching electronic data: Medline via PubMed, LILACS and Cochrane Library, with criteria: randomized clinical trials (RCTs) and Systematic Reviews (RS) in Chronic Hepatitis C. Results: Included with the ECR 01 and Daclatasvir sofosbuvir with ribavirin and RS 01 Metanalysis with only RCT, evaluating therapy with pegylated interferon alpha 2A and alpha-2B in combination with ribavirin, with or without protease inhibitors. As for effectiveness, the ECR identified those contemplated the Daclatasvir with sofobusvir had high rates of sustained virologic response. The efficacy reported by RS favors the use of peginterferon alfa 2a. Conclusions: The safety of interventions was only examined in the ECR in which was measured by the appearance of adverse events during and after treatment. As the studies report the effectiveness of drugs, according to different parameters, making comparisons difficult, even indirectly, about which interventions have better effectiveness.

Orientador: Jose Pedrazzoli Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T08:52:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_ClaudiaMariaFerreirada_M.pdf: 4076648 bytes, checksum: 9f937705d5cb268369689bd871166ff4 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Elevações dos níveis séricos de transaminases (AST e AL T) não refletem a gravidade da doença hepática, e a bilirrubina sérica, albumina e tempo de protrombina podem estar normais nos indivíduos que ainda não desenvolveram, ou apresentam-se em estágios iniciais de cirrose. Testes dinâmicos de função hepática como clearance de verde de indocianina, bromosulfaleína, lidocaína, galactose, têm sido utilizados paracomplementar os testes bioquímicosconvencionais. Contudo, estes testes não se alteram na presença de lesões histológicas mínimas. Neste trabalho, foi avaliada a razão plasmática hidroximetronidazol/ metronidazol em indivíduos com: cirrose hepática alcoólica, classificados de acordo com Child-Pugh nos graus A (n = 9), B (n = 9) e C (n = 8), hepatite alcoólica (n = 23), hepatite C crônica (n = 13), portadores assintomáticos de hepatite C (n = 14), que foram comparados a um grupo controle (n = 12). As concentrações plasmáticas foram medidas por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) de fase reversa com detecção por absorção ultra violeta. Para a análise estatística foram utilizados os métodos de análise de variância (ANOV A) e o teste de Student-Newman-Keuls para múltiplas comparações. A razão hidroximetronidazol/metronidazol demonstrou, de modo significativo, a redução da capacidade dos portadores de doença hepática de metabolizar o metronidazol após sua administração endovenosa, quando comparada à dos indivíduos sadios. Este fenômeno foi observado nas amostras colhidas dos diversos grupos, logo aos dez minutos após o término da infusão de metronidazol (voluntários sadios 0,078 + 0,005; hepatite alcoólica 0,045 + 0,008, p<O,OI; cirrose hepática: Child-Pugh A 0,022 + 0,005, p<O,OOI, B 0,032 + 0,008, p<O,O 1, C 0,013 + 0,004, p< 0,001; portador assintomático de hepatite C 0,043 + 0,005, p<O,OO 1; hepatite C crônica 0,034 + 0,003, p<O,OO 1) / Abstract: Aims: To evaluate plasma hydroxy-metronidazole/metronidazole ratio as a dynamic liver function test in HCV-infected individuaIs withlwithout liver disease, in the absence of liver cirrhosis. Methods: Metronidazole was intravenously administered for 20 min to healthy volunteers, asymptomatic anti-HCV-positive blood donors, and to chronic hepatitisC patients. Serology to HCV was determined by a second generation assay and confirmed by gelatin particle agglutination test using recombinant antigens C22-3 and C200. Plasma concentration of metronidazole and hydroxymetronidazole was measured by high performance liquid chromatography in samples collected 5, 10, 20 and 30 min following the end of metronidazole infusion. Results: Chronic hepatitis C patients had abnormal liver enzymes, while healthy volunteers and anti-HCV -positive blood donors had normal -liver biochemistry tests. Plasma metronidazole concentration was similar in all groups studied. Plasma hy4roxy-metronidazole/metronidazole ratio was significantly reduced in HCV -infected subjects, an effect observed 10 min after the end of drug infusion. Conclusions: Metronidazole clearance is impaired in anti-HCV -positive blood donors and chronic epatitis C patients, indicating that HCV is capable of affecting liver function at early stages of the disease. The metronidazole clearance test can detect impaired liver function in HCV -i'nfected individuaIs even in the absence of liver cirrhosis / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientador: Rogerio de Jesus Pedro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-26T09:12:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_MariaPatelliJulianiSouza_D.pdf: 35315879 bytes, checksum: ecdaf1dfad33a9015ace9a0ecb41173b (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O estudo realizado no Hospital Universitário da Pontifícia Universidade Católica (PUC) de Campinas entre janeiro de 1994 e julho de 1998 constou de duas partes: a primeira, sobre a soroprevalência do VHC entre parturientes, os fatores de risco envolvidos e o potencial de infectividade entre as mulheres com anti-VHC-EIA positivo, e a segunda, sobre a transmissão vertical do VHC. Na investigação da prevalência dessa infecção, participaram 6.995 mulheres que tiveram o sangue coletado na sala de parto e que responderam a uma entrevista padrão, realizada durante a internação, objetivando a pesquisa de antecedentes epidemiológicos relativos a microorganismos veiculados pelas vias sangüínea e (ou) sexual. Utilizaram-se análises de associação e modelos de regressão múltipla na relação da positividade do RIBA e da presença do RNA-VHC com as variáveis epidemiológicas. A prevalência anti-VHC pelo EIA-3 foi de 1,5% (104/6.995) e de 0,8% após o RIBA-3. Nessa população, obteve-se também a positividade do anti-HIV-EIA de 1,0% e de 0,9% segundo o "Western blot"; a positividade do HBsAg de 0,5% e do anti-HBc de 6,8%; 0,9% de positividade anú-T.pallidum (VDRL e FTA-ABS). Com o teste RT-PCR, pesquisou-se o RNA-VHC em 75 mulheres reativas ao anti- VHC-EIA, e 35 (46,7%) amostras foram positivas. Das 47 amostras com RIBA reagente, 20 (42,6%) apresentaram níveis alterados de ALT, com RNA-VHC em 90% delas, e nas 12 amostras indeterminadas, 2 (16,7%) tinham níveis alterados de ALT, com RNA presente em 50%. No modelo de regressão logística múltipla, as cinco variáveis preditoras da positividade do RIBA, marcador de infecção prévia pelo VHC, foram: uso de bebida alcoólica, transfusão de sangue, pertencer a raça negra, antecedente de DST e anti-HBc positivo. Não foi possível compor esse modelo com a variável uso de drogas injetáveis e VDRL positivo. Repetiu-se a análise multivariada, após controlar as variáveis relativas à transmissão parenteral do VHC, para explorar o potencial da via sexual na transmissão do VHC. Antecedente de DST, presença do anti-HBc, ter ou ter tido parceiro sexual com história de hepatite ou parceiro heterossexual promíscuo foram determinantes da positividade do RIBA. Procurou-se associar os resultados do teste RT-PCR às características do RIBA, aos níveis de ALT, à co-infecção pelo HIV ou VHB e às variáveis epidemiológicas estudadas. Na análise multivariada, as variáveis que estimaram a presença do RNA-VHC foram as interações das bandas cl00-3 - c33c e c22-3 - c33c. Na segunda parte deste estudo, referente à transmissão vertical do VHC, participaram 61 mulheres com anti-VHC-EIA positivo e os respectivos filhos, de 72 partos acompanhados seqüencialmente. Entre o 2° e o 18° mês de vida, coletou-se, no mínimo, uma amostra de sangue. Dessas 72 crianças, 45 tinham mães com RIBA positivo, 13 indeterminado e 14 negativo, sendo 42 delas filhas de mulheres com viremia (39 com RIBA positivo e 03 indeterminado). Dentre os 42 lactentes, incluindo 09 filhos de mães co-infectadas pelo HIV, um apresentou repetidamente o RNA-VHC aos quatro meses de idade, evoluindo com alterações nos níveis de ALT entre o 7º e 11° mês de vida. A positividade da sorologia anti-VHC (EIA e RIBA) desta criança manteve-se até o 18° mês de vida, atendendo ao critério diagnóstico proposto para infecção vertical pelo VHC. A taxa de transmissão foi de 2,4% (01 em 42) e de 3% ao se excluírem as crianças de mulheres co-infectadas pelo HIV (01 em 33). Este estudo demonstrou que a prevalência anti-VHC-EIA entre as mulheres grávidas é superior à dos doadores de sangue do mesmo hospital; que a exposição sexual pode ser um importante fator na disseminação do VHC; e que a transmissão vertical do VHC ocorre, porém, com freqüência baixa / Abstract: This study performed at the University Hospital of the Pontifícia Universidade Católica de Campinas (PUC-Campinas) between January of 1994 and July of 1998 was divided into two parts: the first was about the HCV prevalence among parturients, the risk factors involved in it and the infectivity potential among anti HCV-EIA positive women; the second one was about vertical transmission of the HCV. A total of 6995 women have participated in the HCV prevalence study. The women answered a standard questionnaire during their stay in the hospital and had their blood collected in the obstetric center. These two procedures were performed in order to study the epidemiological history related to pathogens of sexual or blood-borne transmission. Analyses of association and models of multiple regression were utilized in association of the RIBA and HCV RNA positivity with the epidemiological variables. The anti-HCV seroprevalence by EIA-3 was 1.5% (104/6995) and after RIBA-3 was 0.8%. It was obtained in this population anti-HIV-EIA seropositivity of 1.0% and 0.9% according to the Western blot; HBsAg positivity of 0.5% and anti-HBc of 6.8%; and 0.9% of the anti T.pallidum positivity (VDRL and FTA-abs). The HCV RNA was studied, utilizing RT-PCR, in 75 anti-HCV-EIA reactive women, resulting in 35 (46,7%) positive samples. Of the 47 RIBA-reactive samples, 20 (42,6%) showed abnormal alanine aminotransferase (ALT) levels with HCV RNA in 90% of them and, of the 12 eterminate samples, 2 (16,7%) had abnormal ALT levels with HCV RNA in 50% of them. In the model of multiple logistic regression, five independent predictors of RIBA positivity, the marker of previous HCV infection, were: alcohol use, blood transfusion, race (blacks), a history of STD and anti-HBc positivity. It was not possible to build this model with the variables - injectable drug use and positive VDRL . The model of multiple logistic regression was repeated, after controlling for parenteral exposure, in order to explore the potential of the sexual via in HCV transmission. A history of STD, anti-HBc positivity and having or having had promiscuous heterosexual partner or sex partner with a history of hepatitis were determinants of RIBA positivity. The results of RT-PCR test were tested in the association with the characteristics of RIBA results, with ALT levels, with HIV or VHB coinfection, and with the epidemiological variables studied. In the multivariate analysis, RNA HCV was estimated by interactions of the C100 - C33c and of the C22-3 - C33c bands. A total of 61 anti-HCV-EIA-positive women and their respective children, of 72 sequentially assisted deliveries, participated in the second part of this study, which was about HCV vertical transmission. Between the 2nd and the 18th month of age, at least oneblood sample was collected from mother-child. Forty-five out of these children had RIBA-positive mothers; 13 had indeterminate RIBA; and 14 had negative RIBA. Forty-two of them were children of women with viremia: 39 had RIBA-positive mothers and 3 indeterminate. Among the 42 infants there were 09 whose mothers were HIV coinfected. From this total of 42, one presented the RNA-HCV repeatedly at the fourth month of age and he also showed abnormal ALT levels between 7° and 11° month of age. Anti-HCV (EIA and RIB A) positivity of this child was kept until the 18th month of live, according to the proposed diagnostic criteria of vertical transmission. The transmission rate was 2.4% (1 in 42) and 3%, being excluded the children of the HIV-coinfected women (1 in 33). This study has demonstrated that anti-HCV-EIA prevalence was higher in pregnant women than in blood donors of the same hospital; that sexual exposure may be an important factor to the spreading of HCV; and that vertical HCV transmission occurs, but with a low frequency / Doutorado / Clinica Medica / Mestre em Ciências Médicas