Orientador: Maria Angela de Almeida Meireles / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-10T22:47:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_DanielleCottadeMelloNunesda_D.pdf: 3730764 bytes, checksum: e92936b597dcfe4aa9d9a2a86ce46790 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O presente estudo teve como objetivo avaliar o rendimento global de extração, a atividade biológica e os perfis de composição de extratos de lavanda brasileira (Aloysia gratissima), quebra pedra (Phylanthus amarus) e ginseng brasileiro (Pfaffia paniculata), obtidos por extração supercrítica (SFE), hidrodestilação e por extração com solvente a baixa pressão (LPSE) utilizando metanol, etanol e hexano. A lavanda brasileira apresentou o rendimento global de extração (X0) variando entre 2,0 ± 0,1% e 4,0 ± 0,2% (b.u), sendo que o maior rendimento de extrato foi obtido na condição de operação de 50 °C e 300 bar (4,0 ± 0,2%). O rendimento do óleo volátil de lavanda brasileira obtido por hidrodestilação foi de 1,2 ± 0,1%. Os rendimentos dos extratos obtidos por extração a baixa pressão foram: 9,4 ± 0,1% (metanol), 3,3 ± 0,2% (etanol) e 0,8 ± 0,2 %(hexano). Os compostos majoritários presentes no óleo volátil e no extrato SFE de lavanda brasileira foram pinocanfona (13,5 - 16,3%), ß-pineno (10,5 - 12%) e pinocarvil acetato (7,3 - 8,3%), guaiol (6,6 - 8,7%) e bulnesol (3,7 - 4,1%). No óleo volátil a concentração referente a 40% de redução do radical DPPH (Sc40 (óleo 1) (1,8 ± 0,1) × 103 mg/L)) e no extrato SFE a concentração referente a 50% de redução do radical DPPH (Sc50 (SFE) (1,3 ± 0,3) × 103 mg/L) de lavanda brasileira demostraram fraco potencial antioxidante pelo método DPPH (1,1-difenil-2-pirilhidrazina). Já pelo método ORAC o óleo volátil (203 ± 15 micromoles de Trolox/ góleo (µM TE/góleo)) e o extrato SFE (225±18 micromoles de Trolox/ gSFE (µM TE/gSFE)) apresentaram poder antioxidante comprável a rutina o composto de referência. Pelo método da reação acoplada do ß-caroteno/ácido linolênico, a atividade antioxidante (AA) dos extratos de lavanda brasileira variou de acordo com o solvente utilizado (metanol, etanol e hexano) e de acordo com a condição SFE empregada. A atividade antioxidante dos extratos de lavanda brasileira obtidos com solventes orgânicos variou de -5 a 62%; o extrato obtido a 50 °C e 300 bar por SFE apresentou AA, variando entre 119 e 188%; os demais extratos não apresentaram AA pelo método do ß-caroteno/ácido linolênico. A quebra pedra apresentou X0 variando de 0,80± 0,01 % a 3,60 ± 0,04% (b.u) de acordo com as condições de extração (pressão e temperatura), sendo que o maior rendimento de extração foi obtido na condição de operação de 50 °C e 250 bar (3,60 ± 0,04%). Os rendimentos dos extratos obtidos por extração a baixa pressão foram: 10,20 ± 0,04% (metanol), 3,40 ± 0,04% (etanol) e 1,90 ± 0,04% (hexano). Por meio da cromatografia em camada delgada foram confirmadas as presenças de óleo volátil, pigmentos, flavonóides e triterpenos nos extratos SFE e nos extratos LSPE de quebra pedra. Pelo método DPPH de atividade antioxidante o extrato SFE de quebra pedra apresentou fraca AA comparado à atividade dos compostos de referência (butilhidroxitolueno e rutina). De maneira geral, os extratos SFE de quebra pedra apresentaram AA superior à do antioxidante controle ß-caroteno pelo método da reação acoplada do ß-caroteno/ácido linolênico. A atividade antioxidante dos extratos de quebra pedra obtidos com solventes orgânicos variou de 17 a 217%; o extrato SFE obtido a 40 °C e 200 bar apresentou AA em torno de 100% em uma, duas e três horas de reação; os demais extratos SFE (40 °C e 250 bar e 40 °C e 300 bar) apresentaram AA variando de 21 a 66%; os extratos de quebra pedra podem ser considerados antioxidantes naturais com boa estabilidade e efeito prolongado. O ginseng brasileiro apresentou X0 variando de 0,50 ± 0,02% a 1,40 ± 0,07% (b.s) de acordo com as condições de extração (pressão e temperatura), sendo que o maior rendimento de extração foi obtido na condição de operação de 30 °C e 250 bar (1,40 ± 0,07%). Os rendimentos dos extratos obtidos por extração a baixa pressão foram: 8,2 ± 0,8% (metanol), 2,2 ± 0,7% (etanol) e 0,6 ± 0,1% (hexano). Por meio das duas técnicas analíticas utilizadas para os extratos de ginseng brasileiro pode-se verificar a presença desde compostos de baixa massa molecular até compostos com estruturas complexas de alta massa molecular (saponinas, ácidos, triterpenos, esteróis) nos extratos SFE. Os compostos majoritários identificados nos extratos SFE de ginseng brasileiro foram ácido hexadecanóico (0,5 - 27,1%), ß-sitosterol e/ou estigmasterol (1,1 - 20,1%), fitol (6,0 - 30,8%) e hexatriacontane (0,7 - 30,6%). Os compostos majoritários da fração retida na coluna de adsorção, instalada na saída da corrente de solvente foram o para-dietilbenzeno (25,7 - 59,3 %) e o meta-dietilbenzeno (3,4 - 27,1 %). Pelo método DPPH de atividade antioxidante o extrato SFE de ginseng brasileiro apresentou AA 25 vezes menos eficaz que a AA desempenhada pela rutina antioxidante natural. Pelo método da reação acoplada do ß-caroteno/ácido linolênico a AA foi observada para o extrato metanólico, variando de 94 a 117%. Os extratos SFE que apresentaram maior potencial antioxidante foram obtidos a 50 °C e 200 bar e 50 °C e 300 bar, a porcentagem de inibição da oxidação destes extratos variou entre 143 e 246% e manteve-se estável com o tempo de reação. O óleo volátil de lavanda brasileira e os extratos SFE de lavanda brasileira, quebra pedra e ginseng brasileiro, não apresentaram efeito inibitório (atividade antiinflamatória) sobre a lipoxigenase de soja nas concentrações estudadas (4-10 g/L) / Abstract: This present work has as an objective evaluate the global yield of the extraction, biological activity, and the composition profiles of the Brazilian lavender (Aloysia gratissima), quebra pedra (Phylanthus amarus) and Brazilian ginseng (Pfaffia paniculata) extracts, obtained by supercritical extraction (SFE), hydrodistillation and by low pressure solvent extraction (LPSE) using methanol, ethanol e hexane. The brazilian lavender showed a global extraction yield (X0) varying between 2,0 ± 0,1% and 4,0 ± 0,2% (b.u), and the higher extract yield was obtained on 50 °C and 300 bar (4,0 ± 0,2%) of operational conditions. The global yield of the brazilian lavender volatile oil obtained by hydrodistillation was 1,2 ± 0,1%. The global extracts yield obtained by low pressure extraction were: 9,4 ± 0,1% (methanol), 3,3 ± 0,2% (ethanol) and 0,8 ± 0,2 %(hexane). The mainly components present in the volatile oil and in the SFE brazilian lavender extract were pinocamphone (13,5 - 16,3%), ß-pinene (10,5 - 12%) and pinocarvyl acetate (7,3 - 8,3%), guaiol (6,6 - 8,7%) e bulnesol (3,7 - 4,1%). In the volatile oil the relating concentration to 40% of the radical reduction DPPH (Sc40 (oil) (1,8 ± 0,1) × 103 mg/L)) and in the SFE extract the concentration relating to 50% of the radical reduction (Sc50 (SFE) (1,3 ± 0,3) × 103 mg/L) of brazilian lavender demonstrate a weak antioxidant potential by the DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) method. Although by the ORAC method the volatile oil (203 ± 15 µM TE/ goil (µM TE/goil)) and the SFE extract (225±18 µM TE/ gSFE) showed an antioxidant power similar to the rutin the reference component. By the coupled reaction of the ß-carotene/ linolenic acid method, the antioxidant activity (AA) of the brazilian lavender extracts varied according to the utilized solvent (methanol, ethanol and hexane) and according to the SFE condition employed. The brazilian lavender extracts antioxidant activity obtained with organic solvents varied from -5 to 62%; the obtained extract on 50 °C and 300 bar by SFE presented AA, varying between 119 and 188%; the others extracts did not present an AA by the ß-carotene /linolenic acid method. The quebra pedra presented X0 varying between 0,80± 0,01 % to 3,60 ± 0,04% (b.u) according to the extraction conditions (pressure and temperature), the higher extraction yield was obtained on 50 °C and 250 bar (3,60 ± 0,04%) of operational conditions. The global extracts yield obtained by low pressure extraction were: 10, 20 ± 0,04% (methanol), 3,40 ± 0,04% (ethanol) e 1,90 ± 0,04% (hexane). By the thin layer cromatography were confirmed the presence of the volatile oils, pigments, flavonoids and triterpenes in the quebra pedra SFE and LSPE extracts. By the DPPH antioxidant activity method the quebra pedra SFE extract showed a weak AA related to the reference components (t-butyl hydroxyl toluene e rutin). Generally, the quebra perdra SFE extracts presents an AA superior to the ß-carotene control antioxidant by the ß-carotene/linolenic acid coupled reaction method. The quebra pedra extracts antioxidant activity obtained with organic solvent varied from 17 to 217%; the SFE extract obtained on 40 °C and 200 bar presented an AA around 100% in one, two and three reaction hours; the others SFE extracts (40 °C and 250 bar and 40 °C e 300 bar) presented an AA varying from 21 to 66%; the quebra pedra extracts can be considered natural antioxidants with good stability and prolonged effect. The Brazilian ginseng presented X0 varying from 0,50 ± 0,02% to 1,40 ± 0,07% (b.s) according to the extraction conditions (pressure and temperature), the higher extraction yield was obtained on the 30 °C and 250 bar (1,40 ± 0,07%) operation condition. The global extracts yield obtained by low pressure extraction were: 8,2 ± 0,8% (methanol), 2,2 ± 0,7% (ethanol) e 0,6 ± 0,1% (hexane). Trough two analytical techniques utilized for the Brazilian ginseng extracts it can verifies the presence from low molecular mass components until complex structures with high molecular mass. (saponins, acids, triterpenes, sterols) in the SFE extracts. The mainly components identified in the SFE brazilian ginseng extracts were hexadecane acid - 27,1%), ß-sitosterol e/ou stigmasterol (1,1 - 20,1%), phytol (6,0 - 30,8%) e hexatriacontane (0,7 - 30,6%). The mainly retained fraction on the adsorption column, installed on the solvent outlet were (25,7 - 59,3 %) for the p-dietilbenzene and (3,4 - 27,1 %) for the m-dietilbenzene. By the DPPH antioxidant activity method the SFE Brazilian ginseng extract presented an AA 25 times less efficient than the AA performed by the natural antioxidant rutin. By the ß-carotene/ linolenic acid coupled reaction the AA was observed for the metanolic extract, varying form 94 to 117%. The SFE extracts that presented higher antioxidant potential were obtained on 50 °C and 200 bar and 500 °C and 300 bar, the inhibition percentage of these extracts oxidation varied between 143 and 246% and keeps it stable with the reaction time. The brazilian lavender volatile oil and the brazilian lavender, quebra pedra and brazilian ginseng SFE extracts did not present an inhibited effect (anti-inflammatory activity) on the soybean lipoxigenase on the studied concentrations / Doutorado / Doutor em Engenharia de Alimentos

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Moringa oleifera Lam. à uma Ãrvore conhecida pelo seu valor medicinal, uma vez que extratos de todas as partes desta planta mostraram propriedades farmacolÃgicas reconhecidas pelo uso popular e corroboradas pela comunidade cientÃfica. Dentre as atividades farmacolÃgicas, destacam-se Ãquelas relacionadas a processos inflamatÃrios. Este trabalho teve como objetivo o isolamento e caracterizaÃÃo de uma proteÃna ligante à quitina de sementes de Moringa oleifera e avaliaÃÃo de suas atividades antinociceptiva e anti-inflamatÃria. As proteÃnas foram extraÃdas da farinha delipidada de sementes e o extrato total foi fracionado em albuminas e globulinas. A fraÃÃo albumÃnica foi submetida à cromatografia de afinidade em matriz de quitina. A fraÃÃo ligante à quitina eluÃda com N-acetil-D-glucosamina 0,1 M foi submetida à cromatografia de troca iÃnica acoplada a um sistema de FPLC, rendendo cinco picos protÃicos. O material eluÃdo com tampÃo acetato de sÃdio 0,5 M, pH 5,2, contendo NaCl 0,6 M, denominado Mo-CBP4 (Mo â Moringa oleifera; âCBP â âchitin binding proteinâ), teve um rendimento final de 0,54% e foi escolhido para dar continuidade ao trabalho. Mo-CBP4 apresentou-se como duas bandas protÃicas de massas moleculares aparentes de 27,5 e 16,5 kDa, em condiÃÃes nÃo-redutoras, e de 9,8 kDa em condiÃÃes redutoras. Eletroforese bidimensional desta proteÃna revelou a presenÃa de dois spots (18,7 e 13,4 kDa), com mesmo ponto isoelÃtrico (pI de 10,55). Trata-se de uma glicoproteÃna com 2,85% de carboidratos, nÃo apresentando atividade hemaglutinante. Mo-CBP4 mostrou-se tÃo eficiente quanto o sulfato de alumÃnio e potÃssio na capacidade de coagular material em suspensÃo na Ãgua. A proteÃna em questÃo foi resistente à proteÃlise no teste de digestibilidade in vitro utilizando pepsina, tripsina e quimotripsina. Para avaliar os efeitos antinociceptivo e anti-inflamatÃrio de Mo-CBP4, foi utilizado o modelo de contorÃÃes abdominais induzidas pela injeÃÃo de Ãcido acÃtico 0,8% (via i.p.) em camundongos. A proteÃna, nas doses de 1,0, 3,5 e 10 mg/kg, foi capaz de prevenir as contorÃÃes de maneira dose dependente, chegando a 98,9% de inibiÃÃo na dose de 10 mg/kg. Mo-CBP4 tambÃm apresentou atividade antinociceptiva por via oral (10 mg/kg), atingindo uma inibiÃÃo de 52,9% quando administrada 60 minutos antes da injeÃÃo de Ãcido acÃtico. Mo-CBP4 inibiu o aumento da permeabilidade vascular (89,1%) e a migraÃÃo leucocitÃria (60,9%) na dose de 10 mg/kg via i.p. A propriedade antinociceptiva parece ser independente do sÃtio de interaÃÃo ao carboidrato N-acetil-D-glucosamina, enquanto que a atividade anti-inflamatÃria mostrou um decrÃscimo quando a regiÃo de ligaÃÃo ao carboidrato foi bloqueada. Os resultados apresentados suportam cientificamente o uso popular da M. oleifera e mostram que uma proteÃna ligante à quitina, Mo-CBP4, està associada aos efeitos antinociceptivo e anti-inflamatÃrio das sementes / Moringa oleifera Lam. is a perennial multipurpose tree with a strong scientific evidence of its curative power and used in folk medicine to cure several inflammatory processes. This work aimed to isolate and characterize a chitin-binding protein from Moringa oleifera seeds, and evaluate its antinociceptive and anti-inflammatory effects. Chitin-binding proteins were obtained after application of albumin fraction from crude extract of M. oleifera seeds into a chitin column and the adsorbed fraction was applied in a Resource-S matrix attached to FPLC system. The fraction eluted with 50 mM sodium acetate buffer, pH 5.2, containing 0.6 M NaCl, named Mo-CBP4 was used for the experiment. Mo-CBP4 showed a single band on SDS-PAGE (molecular mass 9.8 kDa) in presence of reducing agent, however in the absence of 2-mercaptoethanol two bands corresponding to 27.5 and 16.5 kDa were observed. Bidimensional electrophoresis of this protein revealed the presence of two spots (18.7 and 13.4 kDa), with the same isoeletric point value corresponding to 10.55. Mo-CBP4 is a glycoprotein containing 2.85% neutral sugar, which failed to agglutinate untreated or trypsin-treated erythrocytes from rabbit or human origin. This protein showed coagulant activity, similar to aluminum and potassium sulfate, the coagulant most widely used in water treatment. Mo-CBP4 was subjected to in vitro digestion with pepsin, trypsin, or chymotrypsin and appeared to be markedly resistant to digestion. Acetic acid-induced abdominal constrictions, increase in vascular permeability and leukocyte migration tests were used for the antinociceptive and anti-inflammatory activities assessment. Mo-CBP4 (1.0, 3.5 and 10 mg/kg) into mice potently and significantly reduced the occurrence of abdominal writhing in a dose dependent manner by 18.9, 44.6% and 98.9%, respectively. In addition, the oral administration of the protein (10 mg/kg) resulted in 18% and 52.9% reductions in abdominal writhing when given 30 and 60 min prior to acetic acid administration, respectively. Mo-CBP4 also caused a significant and dose-dependent inhibition of peritoneal capillary permeability induced by acid acetic and significantly inhibited leukocyte accumulation in the peritoneal cavity. The effect antinociceptive appeared to be independent on the carbohydrate recognition site. However the anti-inflammatory activity was partially reversed when Mo-CBP4 was pre-incubated with specific carbohydrate ligand, showing that this effect is dependent on the carbohydrate recognition site

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Methods: in this study, male Swiss mice were given doses of BPL (75, 100 and 125 mg / kg) and vehicle formulation administered orally (gavage) for 6 days, while doses of 5-FU (200 mg / kg ) were administered (intraperitoneal) from the 4th to 6th day (except in the groups treated with vehicle and formulation of BPL). On day 7, the mice were euthanized and the portion instestinal of each animal was extracted to perform the histomorformetria; expression analysis of Bax, Bcl2 p53 and Ki67 by immunohistochemistry analysis of the inflammatory process through the activity of the enzyme myeloperoxidase (MPO), and evaluation lipid peroxidation by determination of levels malondialdehyde (MDA). It is importantly to note that only the dose of BPL 100 mg/kg which showed better results in the analysis weight and histomorphometric , was chosen to make the immunohistochemistry, MDA and MPO assays.Results:The doses of BPL 75, 100 and 125 mg / kg showed reduce damage triggered by 5-FU in the intestinal mucositis. However the dose of 100 mg / kg was presented the best results in terms of reduction in body mass, as well as morphometric and histological changes induced by 5-FU. Furthermore it was found that treatment with only 3 doses of BPL (75, 100 and 125 mg / kg) caused no toxicological change. It was also found that the expression rate between Bax and Bcl2 were lower in the 100 mg / kg of BPL. Moreover, the dose of 100 mg / kg of BPL showed proliferative effect with increased expression of Ki67 and reduction of inflammatory infiltrate and lipid peroxidation intestinal tissue Conclusion: The results demonstrated that BPL reduced overall damage by 5-FU in intestinal mucositis induced in mice. / A mucosite intestinal (MI) é um efeito colateral causada pela quimioterapia anti-câncer. Dentre os medicamentos utilizados na terapia antineoplásica, o 5 fluorouracil (5-FU) se destaca por causar uma incidência de mucosite intestinal de 80% nos pacientes tratados. Apesar de muitos estudos sobre a mucosite intestinal induzida por quimioterapia terem sido realizados, ainda não existem métodos eficazes para o seu tratamento, havendo apenas medidas paliativas. Nesse contexto, o uso de plantas medicinais como a Bidens Pilosa L (Asteraceae) (BPL) se torna uma alternativa promissora em virtude da sua atividade anti-inflamatória e imunomoduladora. Objetivo: Investigar a ação da BPL na mucosite intestinal induzida por 5-FU em camundongos. Métodos: Neste estudo, camundongos machos Swiss receberam as doses da formulação de BPL (75, 100 ou 125 mg/kg) ou veículo da formulação de BPL que foram administradas por via oral (gavagem) durante 6 dias, enquanto que as doses de 5-FU (200 mg/kg) foram administradas do 4º ao 6º dia, (exceto nos grupos tratados apenas com formulação de BPL e veículo).No 7º dia, os camundongos foram eutanasiados e a porção intestinal de cada animal foi extraída para realização da histomorformetria; análise da expressão de Bax, Bcl2 p53 e Ki67 por imunohistoquímica; análise do processo inflamatório através da atividade da enzima mieloperoxidase (MPO); e avaliação da peroxidação lipídica pela determinação dos níves de malondialdeído (MDA). É importante destacar que apenas a dose de BPL de 100 mg/kg foi a que apresentou melhores resultados na análise ponderal de peso e histomorfométrica, foi escolhida para fazer os ensaio de imunohistoquímica, MDA e MPO. Resultados: As doses de BPL de 75, 100 e 125 mg/kg mostraram reduzir o dano desencadeado pelo 5-FU na mucosite intestinal. Entretanto a dose de 100 mg/kg foi a que apresentou melhores resultados quanto a redução de massa corporal, assim como as alterações morfométricas e histológicas provocadas pelo 5-FU. Além disso foi verificado que o tratamento apenas com as 3 doses de BPL (75, 100 e 125 mg/kg) não provocou alterações toxicológicas. Também foi constatado que a taxa de expressão entre Bax e Bcl2 foi menor na dose de 100 mg/kg. Ademais, a dose de 100 mg/kg de BPL apresentou efeito proliferativo com aumento da expressão de Ki67, e redução de infiltrado inflamatório e peroxidação lipídica do tecido intestinal. Conclusão: Os resultados demonstraram que a BPL reduziu de modo geral os danos provocados pelo 5-FU na mucosite intestinal induzida em camundongos.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os terpenos Ãcido centipÃdico e lactona do Ãcido hawtiwaico (LAH), isolados dos capÃtulos florais de Egletes viscosa Less, popularmente conhecida como macela ou macela da terra, foram avaliados em modelos de dermatite de contato irritativa induzida pelo 13-acetato-12-o-tetradecanoil-forbol (TPA) e de dermatite de contato alÃrgica induzida por oxazolona (OXA) em camundongos. O Ãcido centipÃdico e a LAH, por via tÃpica (0,125; 0,25 e 0,5mg/orelha), reduziram significativamente o edema de orelha induzido por TPA (2,5Âg/orelha) em 45,5; 55,5; 61,1% e 33,3; 42,2 e 63,3%, respectivamente. Quando administrados por via oral, (12,5; 25 e 50mg/kg), reduziram o edema em 46,6; 59,3; 67,9% e 58,7; 59,7; 71%, respectivamente quando comparado ao controle veÃculo. A dexametasona na dose tÃpica de 0,05mg/orelha e na dose oral de 1mg/kg reduziu o edema de orelha em 90 e 73,1%, respectivamente. O Ãcido centipÃdico e a LAH, na dose de 0,5mg/orelha, via tÃpica reduziu de a atividade da mieloperoxidase (MPO) em 90,1 e 94,6%, respectivamente, enquanto a dexametasona (0,05mg/orelha) reduziu em 96,2% a atividade da MPO quando comparado ao controle veÃculo. Os terpenos na dose tÃpica de 0,5mg/orelha foram capazes de reduzir os nÃveis teciduais de TNF-α, o mesmo sendo observado com a dexametasona. A aÃÃo antiinflamatÃria dos terpenos no modelo da dermatite pelo TPA foram confirmados pelos achados histolÃgicos. O modelo de dermatite de contato induzida por oxazolona (OXA, 1%/orelha), provocou uma hiperplasia epidÃrmica onde o INF-γ teve papel crucial. Os terpenos Ãcido centipÃdico (0,25 e 0,5) e a LAH (0,5mg/orelha), por via tÃpica, diminuÃram, a hiperplasia epidÃrmica induzida por oxazolona (1%/orelha)em todos os perÃodos de observaÃÃo (4Â - 19Â dia). O Ãcido centipÃdico e a LAH na dose de 0,5mg/orelha diminuÃram significativamente os nÃveis teciduais de INF-γ (92,2 e 99,4%, respectivamente) quando comparados ao controle veÃculo. Quando administrado por via oral, o Ãcido centipÃdico (12,5; 25 e 50mg/kg) reduziu de forma significativa a hiperplasia epidÃrmica do 7Â ao 19Â dia de observaÃÃo. A dexamentasona na dose tÃpica (0,05/mg) e na dose oral (1mg/kg) reduziu a hiperplasia epidÃrmica em 100 e 75%, respectivamente. Os resultados encontrados, comprovados pelo estudo histolÃgico, demonstram o efeito antiinflamatÃrio desses terpenos em modelo de dermatite de contato alÃrgica crÃnica onde a hiperplasia epidÃrmica e o aumento nos nÃveis teciduais de INF-γ sÃo caracterÃsticas importantes, como no caso da psorÃase / The terpens centipedic acid (CA) and lactone of hawtriwaic acid (LAH) isolated from the flowers chapters of Egletes viscosa Less, popularly known as macela or macela da terra, were evaluated on 13-acetate-12-o-tetradecanoil-forbol (TPA) induced irritative contact dermatitis model and on oxazolone induced allergic contact dermatitis in mice. The centipedic acid and LAH on the following dosage of 0,125; 0,25 and 0,5 mg/ear using the skin surface as a via reduced in a significative way the ear oedema induced by application of TPA (2,5 μg/ear). The values of reduction are the following respectively: 45,5; 55,1; 61,1% and 33,3; 42,2 and 63,3%. When the oral administration was used the doses of 12,5; 25 and 50 mg/kg had showed a significative oedema reduction of 46,6; 59,3; 67,9% and 58,7; 59,7; 71%, respectively. Dexametasone through skin surface administration on dosage of 0,05 mg/ear and oral dosage of 1mg/kg have reduced in a significative way the ear oedema in 90 and 73,1%, respectively. The centipedic acid and LAH using the dosage of 0,05 mg/ear through the skin surface had reduced the mieloperoxydase activity in 90,1 and 94,6%, respectively, while dexametasone (0,05 mg/ear) had reduced in 96,2% when compared to the group treated only with the vehicle. The terpens on the topic dosage of 0,05 mg/ear were capable to reduce the tecidual levels of TNF-α as well as dexametasone. The antiinflamatory action of the terpens on TPA induced dermatitis model was confirmed through histological analysis of the tissue. The oxazolone induced contact dermatitis model (OXA 1%/ear) had promoted an epidermic hyperplasia in which INF-γ have a central role. The products under evaluation centipedic acid (0,25 and 0,5 mg/ear) and LAH (0,5 mg/ear) through skin surface reduced in a significative way the epidermic hyperplasia Throughout the observation period (4Â- 19Â day). Centipedic acid and LAH on the following dosage 0,5/mg reduced in a significative way the tecidual levels of INF-γ (92,2 and 99,4%, respectively) after 19 days of treatment. When using oral administration the centipedic acid (12,5; 25 e 50 mg/kg) reduced the epidermic hyperplasia from seventh through tenth ninth day. Dexametasone through skin surface administration on dosage of 0,05 mg/ear and oral dosage of 1mg/kg have reduced the epidermic hyperplasia in 100 and 75%, respectively The data that were found plus the histological analysis have showed the antiinflammatory effect, mainly through topic administration, of these terpens on allergic contact dermatitis models in which epidermic hyperplasia and increased tecidual levels of INF-γ are important features, such as psoriasis

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2017-10-27T16:23:31Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Joniel Mendes de Araújo - 2017.pdf: 3123838 bytes, checksum: 85b81eeeeeddff88dbab91146cde5709 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-10-30T10:54:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Joniel Mendes de Araújo - 2017.pdf: 3123838 bytes, checksum: 85b81eeeeeddff88dbab91146cde5709 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-30T10:54:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Joniel Mendes de Araújo - 2017.pdf: 3123838 bytes, checksum: 85b81eeeeeddff88dbab91146cde5709 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-09-28 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Crohn's disease (CD) and ulcerative colitis (RCU) are the major and most prevalent inflammatory bowel diseases (IBD). The lack of effective treatment makes the search for new drugs to treat IBD extremely important. Bixin, a carotenoid present in the species Bixa orellana L., appears as a possible candidate for presenting several biological activities among them antibacterial, antioxidant and anti-inflammatory. The objective of this study was to evaluate the intestinal anti-inflammatory effect of Bixin in experimental TNBS-induced colitis in rats. For the experimental protocol Wistar rats (n = 10) were divided into 7 groups: Saline group (without colitis), TNBS group (with colitis) and groups treated with Bixina gavage at doses of 1, 3, 6, 9 and 12mg / kg. Colitis was induced according to the procedure described by Morris et al. (1989). Euthanasia was performed by CO2 overdose followed by removal of the colon for macroscopic and histological analysis. The results demonstrated that the presence of adhesions and diarrhea was decreased in the groups treated with Bixina. The macroscopic analysis of the colon evidenced the presence of severe damage to the colonic mucosa, with edema, deep ulcerations and hemorrhage in the TNBS group. The Bixina-treated group (12 mg/kg) significantly attenuated the areas of ulcerative lesion and macroscopic score when compared to the TNBS group. Animals receiving Bixin (12 mg/kg) also had a decreased mass / length ratio of the colon compared to the TNBS group. The histological characteristics of the colon of the TNBS group showed severe signs of inflammation, necrosis and edema. However, the Bixin group (12 mg/kg) showed better cell organization and less intestinal epithelial damage when compared to the TNBS group. The results suggest a protective effect of the carotenoid Bixin against experimental colitis induced by TNBS. However, new studies must be performed to verify the mechanisms involved in this activity. / A Doença de Crohn (DC) e a Retocolite Ulcerativa (RCU) são as principais e mais predominantes doenças inflamatórias intestinais (DII). A inexistência de um tratamento eficaz, faz extremamente importante a busca por novos fármacos para tratar as DII. A Bixina, um carotenoide presente na espécie Bixa orellana L., aparece, como um possível candidato por apresentar diversas atividades biológicas dentre elas antibacteriana, antioxidante e anti-inflamatória. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito anti-inflamatório intestinal da Bixina na colite experimental induzida por TNBS em ratos. Para a realização do protocolo experimental utilizou-se fêmeas de ratos Wistar (n = 10) divididas em 7 grupos: grupo Salina (sem colite), grupo TNBS (com colite) e grupos tratados por gavagem com Bixina nas doses de 1, 3, 6, 9 e 12mg/Kg. A colite foi induzida de acordo com o procedimento descrito por Morris et al. (1989). E a eutanásia foi realizada por overdose de CO2, seguida da remoção do cólon para realização das análises macroscópicas e histológicas. Os resultados demonstraram que a presença de adesões e diarreia, foi diminuída nos grupos tratados com Bixina. A análise macroscópica do cólon evidenciou a presença de danos graves na mucosa cólica, com edema, ulcerações profundas e hemorragia no grupo TNBS. O grupo tratado com Bixina (12 mg/kg) atenuou significativamente as áreas de lesão ulcerativa e o escore macroscópico quando comparado ao grupo TNBS. Os Animais que receberam Bixina (12 mg/kg) apresentaram também uma relação massa/comprimento do cólon diminuída em comparação com o grupo TNBS. As características histológicas do cólon de ratos do grupo TNBS apresentaram sinais severos de inflamação, necrose e edema. Contudo, o grupo Bixina (12 mg/Kg), apresentou uma melhor organização celular e menos danos do epitélio intestinal quando comparado ao grupo TNBS. Os resultados sugerem um efeito protetor do carotenoide Bixina contra a colite experimental induzida pelo TNBS. Contudo, novos estudos devem ser realizados para verificar os mecanismos envolvidos nessa atividade.

nÃo hà / Este estudo avaliou o potencial antiinflamatÃrio do triterpeno &#945;, &#946;-amirina sobre a periodontite nas fases aguda e crÃnica, em ratos. A periodontite foi induzida pela colocaÃÃo de ligadura ao redor do 2 molar superior esquerdo. Ratos (n=8) foram prÃ-tratados com &#945;, &#946;-amirina (5 e 10 mg/kg,v.o). Falso-operados e controles positivos (lumiracoxibe, 20 mg/kg,v.o.e dexametasona, 1 mg/kg, i.p.) foram incluÃdos. Na fase aguda, os nÃveis do fator de necrose tumoral (TNF)-alfa no plasma foram medidos e o tecido gengival foi analisado para mieloperoxidase (MPO) e substÃncias tiobarbitÃricas Ãcido-reativas (TBARS). Tanto &#945;, &#946;-amirina, como dexametasona, diminuiu os nÃveis de TNF-alfa, MPO e TBARS. Jà na fase crÃnica, apÃs a induÃÃo da doenÃa, os animais foram acompanhados e tratados durante 11 dias, avaliando-se, em seguida, o efeito das drogas na variaÃÃo de massa corpÃrea e no Ãndice de perda Ãssea, alÃm de estudo histopatolÃgico do tecido Ãsseo e da gengiva. Na avaliaÃÃo da variaÃÃo da massa corpÃrea, observou-se que, com &#945;, &#946;-amirina e com lumiracoxibe ocorreu aumento no ganho de peso na massa corpÃrea, ao passo que, com a dexametasona, ocorreu diminuiÃÃo, quando comparados com o grupo normal (p<0,05). Em relaÃÃo ao Ãndice de perda Ãssea, observou-se que &#945;, &#946;-amirina 5 mg/kg nÃo preveniu a perda Ãssea, nÃo causando, no entanto, aumento, o que ocorreu na concentraÃÃo de 10 mg/kg e nos controles positivos, lumiracoxibe e dexametasona, quando comparados ao grupo falso-operado (p<0,01). Estes resultados permitem concluir que &#945;, &#946;-amirina modulou a inflamaÃÃo periodontal na fase aguda e demonstrou atividade antiinflamatÃria na periodontite nas fases aguda e crÃnica, mas nÃo mostrou capacidade para prevenir a perda Ãssea. Paralelamente a este estudo, investigou-se, tambÃm, o efeito da &#945;, &#946;-amirina em modelo de nocicepÃÃo orofacial induzida em ratos por formalina e capsaicina. Os animais foram prÃ-tratados com &#945;, &#946;-amirina (10, 30 e 100 mg/kg, i.p.) ou veÃculo (Tween 80, 3%), recebendo, em seguida, injeÃÃo de formalina (1,5 %,20 &#956;l) ou capsaicina (20 Âl, 1,5 &#956;g) na parte central da vibrissa direita. ApÃs a anÃlise dos dados, concluiu-se que a &#945;, &#946;-amirina exerceu atividade antinociceptiva no modelo de nocicepÃÃo orofacial induzida por capsaicina e formalina. / This study evaluated the triterpene pentaclycle &#945;- Ã-amyrin anti-inflammatory potential on the stages of periodontitis, acute and chronic, in rats. The periodontitis was induced through ligature placement around the second left upper molar. Rats (n=8) were treated with &#945;, &#946;-amyrin (5 and 10 mg/kg, v.o). Sham-operated and positive-controls (lumiracoxibe 20 mg/kg, v.o. and dexametasone, 1 mg/kg, i.p.) were included. The TNF-alfa levels in the plasma were evaluated and gingival tissues analyzed for myeloperoxidase (MPO) and thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS). Both &#945;, &#946;-amyrin and dexametasone decreased the levels of TNF-alfa, MPO and TBARS. In chronic stage, the animals were observed and treated for a period of 11 days, in which the rats received the same drugs and were evaluated regarding their body mass variation and bone loss index, besides, were submitted to histopathological study of bone and gingival tissues. In the evaluation of the body mass variation, &#945;, &#946;-Amyrin and lumiracoxibe caused an increase in the weight gain, while a decrease occurred in rats treated with dexametasone when compared with the normal group (p<0.05). In relation to bone loss index, it was observed that &#945;, &#946;-Amyrin 5 mg/kg did not prevent bone loss, whereas a concentration of 10 mg/kg displayed an increase in bone loss; this increase also was perceived in the positive controls, lumiracoxibe and dexametasone, in relation to the sham-operated rats group (p<0.01). In conclusion, &#945;, &#946;-amyrin modulates acute phase periodontal inflammation and presents anti-inflammatory activity in both acute and chronic phases, but do not have the capacity to prevent bone loss. In parallel to this study, we also investigated the &#945;, &#946;-amyrin effect in model of orofacial pain induced in rats by formalin and capsaicin. The animals were pre-treated with &#945;, &#946;-amyrin (10, 30, and 100 mg/kg, i.p.), or vehicle (Tween 80, 3%), and than received either formalin (20 &#956;l, 1.5%) or capsaicin (20 Âl, 1.5 &#956;g) injection into the vibrissa central right side. After data analysis, it was concluded that &#945;, &#946;-amyrin exerts antinociception effect in experimental model of orofacial pain induced by capsaicin and formalin.

As frutas são fontes importantes de substâncias nutricionais e apresentam em sua constituição compostos com características funcionais, podendo ser apontadas como boas fontes de antioxidantes naturais. O abacate é uma fruta tropical com características nutricionais e organolépticas atrativas, destacando-se a quantidade de lipídeos com alto teor de ácidos graxos insaturados que trazem benefícios à saúde. Além disso, os resíduos de origem agroindustrial como cascas e sementes obtidos durante o processamento contêm compostos bioativos. Entretanto, ainda não existem estudos sobre a capacidade de desativação de espécies reativas de oxigênio, atividade anti-inflamatória e avaliação da composição fenólica em tempo real por HPLC-DAD-UV do fruto e dos resíduos do processamento de abacate, conforme a literatura científica. Por ser uma fonte de ácidos graxos poli-insaturados, há possibilidade de uma grande variedade de antioxidantes presentes no fruto, dentre os quais compostos fenólicos, para proteção e integridade do óleo contra oxidação. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar, isolar e identificar substâncias com atividade antioxidante da polpa, casca e semente de abacates das cultivares Hass e Fuerte; avaliar a capacidade de desativação de espécies reativas de oxigênio e a atividade anti-inflamatória. O conteúdo de compostos fenólicos totais foi avaliado pelo método de Folin-Ciocalteu, o potencial antioxidante foi avaliado pelos métodos do sequestro do radical livre DPPH e ABTS, redução do ferro, auto-oxidação do sistema ?-caroteno/ácido linoléico, estabilidade oxidativa em Rancimat e capacidade de desativação de espécies reativas de oxigênio pelos métodos ORAC, ânion superóxido e ácido hipocloroso. No geral, cascas e sementes de ambas as cultivares apresentaram maior atividade antioxidante em relação à polpa dos frutos. Os compostos de maior atividade antioxidante dos resíduos do abacate foram quantificados pelas técnicas HPLC-DAD-UV e LC-MS/MS e confirmados por RMN. Nas cascas de ambas as cultivares foram encontrados o ácido trans-5-O-cafeoil-D-quínico, procianidina B2 e epicatequina, enquanto que nas sementes foram o ácido trans-5-O-cafeoil-D-quínico, procianidina B1, catequina e epicatequina. Os resíduos das duas cultivares apresentaram elevada capacidade de sequestro do radical superóxido e ácido hipocloroso. Os compostos fenólicos mais frequentemente encontrados nas amostras pela técnica de GC/MS foram o ácido trans-5-O-cafeoil-D-quínico e epicatequina. A casca da cultivar Fuerte suprimiu significativamente a produção de TNF-? e NO, envolvidos no processo inflamatório, e pode estar relacionado ao alto teor de compostos fenólicos e atividade antioxidante encontrados nesta espécie. Portanto, resíduos da cadeia de processamento de abacate podem ser considerados fontes de compostos bioativos de grande potencial funcional / Fruits are important sources of nutritional substances and are rich in compounds with functional features that can be identified as good sources of natural antioxidants. The avocado is a tropical fruit with attractive nutritional and organoleptic characteristics, especially the amount of lipids with high content of unsaturated fatty acids that provide health benefits. Furthermore, agroindustrial residues such as peels and seeds obtained during processing contain bioactive compounds. However there are no studies about evaluate the capacity for scavenging reactive oxygen species, the anti-inflammatory activity and the phenolic composition of fruits and residues from avocado according to the scientific literature. A source of polyunsaturated fatty acids, the fruit must contain a variety of antioxidants, phenolic compounds among which, for protection and integrity against oil oxidation. The goal of the present study was to characterize, isolate and identify substances with antioxidant activity of the pulp, peel and seed of Hass and Fuerte avocados cultivars; evaluate the capacity for scavenging reactive oxygen species, the anti-inflammatory activity. The total phenolics content was measured by the Folin-Ciocalteu method. The methods for evaluating the antioxidant activity used were the DPPH free radical and ABTS, ?-carotene bleaching, reduction of Fe3+, oxidative stability in Rancimat, evaluate the capacity for scavenging reactive oxygen species by ORAC, superoxide anion and hypochlorous acid. Peels and seeds of both cultivars showed higher antioxidant activity than the pulp of the fruit. Compounds present in peels and seeds from both cultivars were quantified through LC-DAD-UV and LC-MS/MS and confirmed through RMN. The compounds exhibiting the greatest antioxidant activity were trans-5-O-caffeoyl-D- quinic acid, procyanidin B2 and epicatechin in the peels and trans-5-O-caffeoyl-D-quinic acid, procyanidin B1, catechin and epicatechin in the seeds. Residues from both cultivars exhibited high superoxide radical and hypochlorous acid-scavenging capacity. Phenolic compounds found most frequently in the samples by GC/MS technique were trans-5-O-caffeoyl-D-quinic acid and epicatechin. Peel from the cultivar Fuerte significantly suppressed the production of TNF-? and NO, which are involved in inflammatory processes, and this suppression may be related to the high phenolic content and antioxidant activity observed. Residues of avocado processing can therefore be considered sources of bioactive compounds with high functional potential

Os neutrófilos são células fagocíticas do sistema imunológico mobilizadas principalmente no combate a infecções. Estas células são capazes de matar os micro-organismos através da desgranulação, que leva à liberação de moléculas antimicrobianas, e da produção de espécies reativas de oxigênio. Embora o recrutamento de neutrófilos seja essencial para a proteção do organismo, sua ativação excessiva resulta na intensa liberação de moléculas citotóxicas no meio extracelular, o que pode desencadear o desenvolvimento e/ou agravar o quadro clínico de doenças autoimunes e inflamatórias, como a artrite reumatoide. Uma possível abordagem terapêutica para o tratamento destas doenças é a modulação das funções efetoras dos neutrófilos. Estudos prévios mostraram que o extrato etanólico das folhas de Baccharis dracunculifolia (EEBd) possui grande potencial terapêutico, uma vez que apresenta expressiva atividade antioxidante frente ao metabolismo oxidativo dos neutrófilos. Para dar continuidade à investigação da atividade anti-inflamatória e/ou imunomoduladora deste extrato, o presente trabalho avaliou, na primeira etapa, o seu efeito modulatório sobre importantes funções efetoras de neutrófilos que medeiam o reconhecimento a e eliminação de patógenos - fagocitose, desgranulação e atividade microbicida - e sobre a atividade de enzimas lisossomais. Verificou-se que o EEBd, dependendo da concentração, inibe o metabolismo oxidativo dos neutrófilos sem alterar a capacidade de defesa das células. Na segunda etapa, foi avaliada a atividade antioxidante de sete compostos isolados do EEBd - ácido cafeico, ácido cumárico, ácido ferúlico, ácido cinâmico, aromadendrina-4?-metil éter, isosacuranetina e hispidulina - frente ao metabolismo oxidativo dos neutrófilos, a fim de propor possíveis marcadores químicos para as atividades biológicas do extrato. Os resultados apontaram o ácido cafeico como um potencial marcador químico da atividade biológica em questão. Na terceira etapa, com o intuito de aumentar a biodisponibilidade e favorecer o uso terapêutico dos produtos naturais estudados, o EEBd e o ácido cafeico foram incorporados em lipossomas, e constatou-se que a incorporação não alterou suas atividades antioxidantes frente aos neutrófilos, quando comparado às respectivas amostras na forma livre. Por fim, foi avaliado o efeito terapêutico do EEBd e do ácido cafeico, ambos na forma livre e incorporada em lipossomas, em um modelo animal de artrite. Verificou-se que as amostras na forma livre melhoraram expressivamente os parâmetros inflamatórios nas articulações, promovendo redução do edema e da migração de células totais e de neutrófilos, e discreta diminuição da concentração das citocinas inflamatórias TNF-?, IL-6 e IL-1?. Além disso, a incorporação do EEBd e do ácido cafeico em lipossomas pode auxiliar na redução das suas concentrações necessárias para a obtenção dos efeitos terapêuticos desejados. Assim, pode-se concluir que o EEBd tem grande potencial para se tornar um agente terapêutico adjuvante no tratamento de doenças inflamatórias mediadas por neutrófilos, sendo o ácido cafeico um possível marcador químico para a atividade anti-inflamatória do extrato. / Neutrophils are phagocytic immune cells mobilized primarily to fight against infections. These cells are capable to kill microorganisms through degranulation, which leads to the release of antimicrobial molecules, and production of reactive oxygen species. Although neutrophil recruitment is essential for host protection, excessive activation of these cells culminates in intense discharge of cytotoxic molecules to the extracellular milieu, which can elicit the development of and/or aggravate the clinical condition in autoimmune and inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis. Modulation of the effector functions of neutrophils is a possible therapeutic approach to treat these diseases. Previous studies have shown that the ethanolic extract of Baccharis dracunculifolia leaves (EEBd) has a great therapeutic potential due to its significant antioxidant effect towards the oxidative metabolism of neutrophils. To continue investigating the anti-inflammatory and/or immunomodulatory action of such extract, the first part of the present work examined its modulator effect on three important effector functions of human neutrophils that mediate recognition and clearance of pathogens - phagocytosis, degranulation, and microbial killing - and on the activity of lysosomal enzymes. EEBd inhibited the oxidative metabolism of neutrophils without affecting their defense ability, depending on the extract concentration used. To propose possible chemical markers for the biological effects of the extract, the second part of this study evaluated the antioxidant activity of seven compounds isolated from EEBd - caffeic acid, coumaric acid, ferulic acid, cinnamic acid, aromadendrin-4\'-methyl ether, isosakuranetin, and hispidulin - towards the oxidative metabolism of neutrophils. The results pointed to caffeic acid as a potential chemical marker for this biological activity. The third part of this investigation aimed to improve the bioavailability and favor the therapeutic use of the natural products studied. EEBd and caffeic acid were incorporated into liposomal carrier systems. The incorporation of both samples into liposomes did not alter their antioxidant activity towards neutrophils, as compared with their respective free forms. Finally, this study examined the therapeutic effect of EEBd and caffeic acid, both in the free form and incorporated into liposomes, in an animal model of arthritis. The free samples markedly improved the joint inflammatory parameters: they reduced edema and migration of total cells and neutrophils, and slightly lowered the levels of the inflammatory cytokines tumor necrosis factor ? and interleukin 6 and 1? (TNF-?, IL-6, and IL-1?, respectively). In addition, incorporation of EEBd and caffeic acid into liposomes can help to reduce their concentrations required to achieve the desired therapeutic effect. Based on the set of results obtained in this study, we conclude that EEBd has a great potential to become a therapeutic adjuvant in the treatment of neutrophil-mediated inflammatory diseases, and that caffeic acid is a possible chemical marker of the anti-inflammatory activity of the extract.

A nanotecnologia é um fenômeno que se aplica a praticamente todos os setores da ciência, sendo que na área cosmética o elevado investimento neste campo tem reforçado a idéia de que produtos nanotecnológicos proporcionam vantagens reais aos consumidores. A crescente exigência do consumidor e os avanços no conhecimento sobre obtenção e estabilidade dos sistemas dispersos viabilizam o desenvolvimento de veículos diferenciados como, por exemplo, nanoemulsões, que além da inerente estabilidade, apresentam aspecto sensorial agradável, alta capacidade de espalhabilidade e hidratação, além de poderem facilitar a penetração de ativos. Existem dois métodos de obtenção de nanoemulsões: os que empregam baixa ou alta energia de emulsificação. O uso de óleos vegetais em produtos cosméticos tem sido intensamente valorizado, baseando-se no conceito de que são seguros e biocompatíveis. O óleo de maracujá é extensamente empregado em formulações cosméticas e o óleo essencial de lavanda é citado na literatura pelo efeito cicatrizante e antiinflamatório, dentre outros. Esta pesquisa teve como objetivo desenvolver nanoemulsões à base de óleo de maracujá e óleo essencial de lavanda nas concentrações de 1,0, 2,0 e 5,0%, a partir de método a frio de baixa energia de emulsificação, bem como avaliar a influência da adição de outros componentes e dos parâmetros relacionados ao método de obtenção na estabilidade e tamanho de glóbulos das nanoemulsões e posteriormente avaliar a atividade antiinflamatória tópica da emulsão contendo 5,0% do óleo essencial em camundongos sem pêlo. Os resultados demonstraram que a adição do óleo essencial de lavanda no sistema provocou redução no tamanho de glóbulos e aumento da estabilidade física e que o método de emulsificação a frio foi eficaz na formação de nanoemulsões estáveis. O valor de EHL, o par de tensoativos, a proporção entre as fases aquosa/ oleosa e tensoativa, bem como a adição de silicones e eletrólitos e a velocidade de agitação influenciam sobremaneira as características e a estabilidade das dispersões obtidas. No estudo de estabilidade acelerada, observou-se a alteração significativa dos valores de pH e condutividade elétrica, o que possivelmente é decorrente da hidrólise de compostos presentes no óleo essencial. Os valores de potencial zeta e tamanho de glóbulos não demonstraram alteração relevante em 30 dias de estabilidade acelerada. Na avaliação in vivo, a nanoemulsão adicionada de 5,0% do óleo essencial de lavanda apresentou resultados significativos quando comparado aos demais grupos, o que sugere boa perspectiva na utilização tópica do óleo essencial de lavanda, sendo este merecedor de estudos complementares para a elucidação dos mecanismos antiinflamatórios envolvidos, dos componentes fito-químicos responsáveis por esta ação e da concentração a ser utilizada. / Nanotechnology is a phenomenon that applies to mainly all sectors of science and in the cosmetics area the high investment in this field has strengthened the idea that nanotechnology products offer real advantages to consumers. The growing demand of consumers and the advances in knowledge about production and stability of dispersed systems enable the development of differentiated vehicles such as nanoemulsions, which besides the inherent stability, have pleasant sensory aspect, high spread ability and hydration power, in addition they can facilitate the penetration of actives. There are two methods of obtaining nanoemulsions: those that employ low or high energy of emulsification. The use of vegetable oils in cosmetics has been intensely valued, based on the concept that is safe and biocompatible. Passion fruit oil is widely used in cosmetic formulations and lavender essential oil is reported in the literature for healing and anti-inflammatory effects, among others. The aim of this study was to develop nanoemulsion based in passion fruit oil and lavender essential oil in the concentrations of 1.0, 2.0 and 5.0%, from low-energy method of emulsification, not employing heating, and evaluate the influence of the addition of other materials and parameters related to the production method in the system stability and droplets size of nanoemulsions and then evaluate the anti-inflammatory activity of topical nanoemulsion containing 5.0% of lavender essential oil in hairless mice. The results demonstrated that the addition of lavender essential oil in the system caused reduction in the droplets size and increasing in the physical stability and that the method of emulsification used was effective in the formation of stable nanoemulsions. The HLB value, the pair of surfactants, the ratio between aqueous/oily and surfactant phase, the addition of silicones and electrolytes and speed of agitation particularly affect the characteristics and stability of the obtained dispersions. In the accelerated stability tests, there was a significant change in the pH and electrical conductivity values, which is possibly resulting from the hydrolysis of compounds present in the essential oil. The values of zeta potential and droplets size showed no relevant change in 30 days of accelerated stability. In the in vivo evaluation, the nanoemulsion added of 5.0% of the lavender essential oil showed significant results when compared to the other groups, which suggests good perspective on topical use of this oil, which is worthy of further studies to the elucidation of the anti-inflammatory mechanisms involved, the phyto-chemical components responsible for this action and the concentration of use.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-17T13:26:30Z No. of bitstreams: 1 lucasapolinariochibli.pdf: 4452333 bytes, checksum: 37e0f0b3c3682a67c7f4efa2b05bd2bd (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-17T13:28:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lucasapolinariochibli.pdf: 4452333 bytes, checksum: 37e0f0b3c3682a67c7f4efa2b05bd2bd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-17T13:29:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lucasapolinariochibli.pdf: 4452333 bytes, checksum: 37e0f0b3c3682a67c7f4efa2b05bd2bd (MD5) Previous issue date: 2013-07-25 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken (Crassulaceae), conhecida como “folha-da-fortuna”, tem sido largamente utilizada na medicina tradicional, principalmente para o tratamento de inflamações, infecções, feridas, ulcerações e gastrite. O objetivo do presente estudo foi identificar e quantificar constituintes bioativos, bem como avaliar as atividades antioxidante, antibacteriana e anti-inflamatória tópica das folhas de B. pinnatum. O material vegetal seco e pulverizado foi submetido à maceração com etanol seguida de obtenção, por partição, das frações hexânica, diclorometânica, em acetato de etila e butanólica. Constituintes do extrato etanólico e das frações foram identificados por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de ultravioleta e cromatografia com fase gasosa acoplada à espectrometria de massas. Os teores de fenóis e flavonoides totais foram determinados por espectrofotometria e a atividade antioxidante avaliada pelos ensaios com radical DPPH, de poder de redução, sistema de cooxidação β-caroteno/ácido linoleico e bioautografia. A atividade antibacteriana foi investigada pelos métodos de difusão e microdiluição. A atividade anti-inflamatória tópica foi avaliada usando modelos de edema de orelha induzidos por óleo de cróton, ácido araquidônico, fenol, capsaicina, etil-fenil-propiolato e por análise histológica. Os resultados foram demonstrados como média ± erro padrão. Análise de variância seguida do teste de Tukey ou Student-Newman-Keuls foi usada para medir o grau de significância para p < 0,05. Quercetina, rutina, canferol, apigenina 7-O-β-D-glicosídeo e luteolina 7-O-β-D-glicosídeo foram identificados por CLAE-UV, enquanto -amirina por CG-EM. Os teores de fenóis totais variaram de 3,45 a 25,34 g/100 g, enquanto os flavonoides foram de 0,66 a 23,31 g/100 g. Utilizando o método do DPPH, os valores de CE50 variaram entre 9,44 ± 0,01 a 57,29 ± 0,11 μg/mL e o método do poder de redução produziu CE50 de 234,22 ± 0,61 e 1235,17 ± 1,39. Os valores de inibição da peroxidação lipídica foram entre 39,4 e 58,3% e o método de biautografia detectou substâncias com atividade antioxidante. O extrato etanólico e as frações inibiram o crescimento das bactérias testadas, produzindo atividades bactericida e bacteriostática. Concentrações de 0,5 e 1,0 mg/orelha do extrato etanólico reduziram o edema de orelha induzido pelo óleo de cróton em 54,85 e 57,11%, enquanto o edema de orelha induzido pelo ácido araquidônico foi de 41,67, 53,82 e 67,01% nas concentrações de 0,1, 0,5 e 1,0 mg/orelha, respectivamente. O edema induzido pelo fenol foi inibido em 79,73, 33,14 e 33,71% nas concentrações de 0,1, 0,5 e 1,0 mg/orelha, respectivamente. Após tratamento, 0,1 (43,22%), 0,5 (72,53%) e 1,0 mg/orelha (35,16%) do extrato etanólico reduziu o edema de orelha induzido por capsaicina. O edema induzido pelo etil-fenil-propriolato, nas concentrações de 0,1 (75,00%), 0,5 (69,77%) e 1,0 mg/orelha (43,60%) foi inibido. Os resultados do teste crônico de edema de orelha e a análise histológica confirmaram o efeito do extrato etanólico na inibição do processo inflamatório induzido pelo óleo de cróton. Os resultados indicaram que B. pinnatum possui efeitos antioxidante, antibacteriano e anti-inflamatório tópico, justificando o uso popular e destacando a espécie como potencial alvo para a descoberta de novos agentes terapêuticos. / Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken (Crassulaceae), known as "folha-da-fortuna" (leaves-of-fortune), has been widely used in traditional medicine, mainly for the treatment of inflammation, infection, wound, ulcer and gastritis. The aim of the present study was to identify and quantify bioactive constituents, as well as evaluating the antioxidant, antibacterial and topical anti-inflammatory activities of B. pinnatum leaves. Dried and pulverized plant material was subjected to maceration with ethanol followed by partition to obtain the hexanic, dichloromethanic, in ethyl acetate and butanolic fractions. Constituents of the ethanol extract and fractions were identified by high performance liquid chromatography coupled to ultraviolet detector and gas chromatography coupled to mass spectrometry. The total phenols and flavonoids contents were determined by spectrophotometry and the antioxidant activity was evaluated using DPPH, reducing power, β-carotene/linoleic acid co-oxidation system and bioautography assays. The antibacterial activity was investigated by diffusion and microdilution methods. The topical anti-inflammatory activity was evaluated through ear oedema models induced by croton oil, arachidonic acid, phenol, capsaicin, ethyl phenyl propiolate and histological analysis. The results were demonstrated as mean ± standard error. Analysis of variance followed by Tukey or Student-Newman-Keuls test was used to measure the degree of significance of p < 0.05. Quercetin, rutin, kaempferol, apigenin 7-O-β-D-glucoside and luteolin 7-O-β-D-glucoside were identified by HPLC-UV DAD, while -amyrin by GC-MS. The total phenolic content ranged from 3.45 to 25.34 g/100 g, while flavonoids were 0.66 to 23.31 g/100 g. Using the DPPH assay, the values of EC50 ranged from 9.44 ± 0.01 to 57.29 ± 0.11 g/mL and the reducing power assay produced EC50 of 234,22 ± 0,61 and ± 1235.17 ± 1.39. The values of inhibition of lipid peroxidation were between 39,4 and 58,3% and the bioautography assay detected substances with antioxidant activity. The ethanol extract and fractions inhibited the growing of bacteria tested producing bactericidal and bacteriostatic activities. Concentrations of 0.5 and 1.0 mg/ear of the ethanol extract reduced the ear oedema induced by croton oil in 54.85 and 57.11%, while the ear oedema induced by arachidonic acid was inhibited by 41.67, 53.82 and 67.01% at concentrations of 0.1, 0.5 and 1.0 mg/ear, respectively. The phenol-induced oedema was inhibited by 79.73, 33.14 and 33.71% in 0.1, 0.5 and 1.0 mg/ear, respectively. After treatment, 0.1 (43.22%), 0.5 (72.53%) and 1.0 mg/ear (35.16%) of the ethanol extract reduced the ear oedema induced by capsaicin. The phenyl-ethyl propriolato-induced oedema at concentrations of 0.1 (75.00%) 0.5 (69.77%) and 1.0 mg/ear (43.60%) was inhibited. Results from chronic ear oedema test and histological analysis confirmed the effect of the ethanol extract on inhibition of oedema induced by croton oil. The results indicated that B. pinnatum possesses antioxidant, antibacterial and topical anti-inflammatory effects justifying the popular use and highlighting the species as a potential target for the discovery of new therapeutic agents.