Dissertação (mestrado profissional) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação Multidisciplinar em Saúde, Florianópolis, 2014 / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:38:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014

Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-06-16T11:42:06Z No. of bitstreams: 1 2008_tese_mnhissa.pdf: 1984616 bytes, checksum: 9d11e4e139c0874c9d3dccf2106744e9 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-06-16T11:55:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_tese_mnhissa.pdf: 1984616 bytes, checksum: 9d11e4e139c0874c9d3dccf2106744e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-16T11:55:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_tese_mnhissa.pdf: 1984616 bytes, checksum: 9d11e4e139c0874c9d3dccf2106744e9 (MD5) Previous issue date: 2008 / Recent studies have pointed out the negative effects of persistent hyperglycemia in cardiac surgery patients. Tight glucose control below 110 mg/dL with insulin has been shown to exert anti-inflammatory effects in critically ill patients. Glutamine, a conditionally essential amino acid during stress, has been shown to promote glucose utilization and to increase insulin sensitivity in trauma patients. The present study aimed to access the effects of nutraceutical doses of L-alanyl-glutamine preoperatively in a prospective, randomized, controlled, double-blind study. Twenty-two elective patients (63 ± 8 years) with coronary artery disease scheduled for coronary artery bypass grafting were randomly assigned to receive either saline 1000 ml (Group Saline, n=11) or L-alanyl-glutamine 20% (250ml) in saline to final volume 1000 ml (Group L-alanyl-glutamine, n=11). The infusions were started 3 h prior to the operative procedure and lasted 3 hours. Blood samples were collected 3h before [Basal (T-0)], just before the beginning of the surgical procedure [Preoperative (T-1)], at the onset and at the end of the extra-corporeal perfusion (T-2), and at the end of the surgical procedure (Intraoperative). Additional samples were colleted 12 and 24 h later (Postoperative). The following variables were analysed: Insulin, peptide C, creatine phosphokinase (CPK), lactate deshydrogenase (LDH), high sensibility protein C (PCR), IL-1, IL-6, 1L-10, TNF-α, metabolites (lactate, pyruvate, acetoacetate, 3-hidroxibutyrate), reactive substances to thiobarbituric acid (TBARS), reduced glutathione (GSH) and total antioxidant state (TAS). Glucose level were analysed throught capillary blood sample obtained by digital puncture in the periods T-0, T-1, every hour during surgery (T-2) and every two hours after surgery (T-3). Despite the exogenous insulin infusion rate to be constant in both groups during the operation, insulinemia was kept at similar concentrations at all periods studied in patients who received the dipeptide. On the other hand, control patients increased their insulinemia during the intra (T-2) and post-operative period (T-3) as compared to basal values (T-0) (31.9+/-28.8 Versus 6.56+/-5.4, p=0.013). Glucose increasing plasma concentrations were significantly decreased in L-alanyl-glutamine treated patients during the intraoperative period as compared to control patients (129.9+/-15.2 versus 158.6+/-18.6, p= 0.003). No significant difference were observed between the two groups on plasma concentration of others variables studied. In conclusion, the infusion of nutraceutical doses of L-alanyl-glutamine prior to operative period in patients submitted to coronary artery bypass grafting with extracorporeal perfusion, reduce the glicemic surge compared to control patients, without increasing insulin plasma concentrations as compared to their basal values This prospective study highlights the potential use of preoperative L-alanyl-glutamine administration in heart surgery patients to attain glucose control and to improve insulin sensitivity / Estudos recentes tem apontado um efeito deletério da hiperglicemia persistente em pacientes submetidos a cirurgia cardíaca. O controle glicemico estrito abaixo de 110 mg/dl com insulina tem demonstrado exercer um efeito antiinflamatório em pacientes críticos,melhorando o prognostico da doença. A glutamina, um aminoácido condicionalmente essencial durante o estresse, promove a utilizacao de glicose e aumenta a sensibilidade a insulina em pacientes criticos. Objetivou-se, no presente trabalho, estudar os efeitos de doses nutracêuticas de L-alanil-glutamina (L-Ala-Gln) administrada no período pré-operatório, associada ao uso intra e pós-operatório da infusão de insulina. Vinte e dois pacientes adultos (idade media: 63,4 anos), candidatos a cirurgia de revascularizacao do miocárdio com circulação extracorporea (CEC), foram randomizados em 2 grupos: Grupo salina (GS) e Grupo L-Ala-Gln (GG). Receberam por via endovenosa uma infusão de 1.000 ml de solução salina (GS) ou 250ml de uma solução de L-Ala-Gln a 20% diluída em 750 ml de soro fisiológico, nas 3 horas que precederam a intervenção cirúrgica. A insulina foi administrada ininterruptamente, durante a realizacao do procedimento cirúrgico, a ambos os grupos. Amostras de sangue foram coletadas antes e apos a infusão da solução salina ou da L-Ala-Gln [tempo basal (T-0) e pre-operatorio (T-1) respectivamente]; antes e apos a circulação extracorporea (CEC) e no final do período operatório (T-2); e 12 e 24 horas no período pós-operatório (T3). Foram analisadas as seguintes variáveis: Insulina, peptídeo C, creatinofosfoquinase (CPK), lactato desidrogenase (LDH), Proteína C reativa ultra-sensível (PCR), IL-1, IL-6, IL-10, TN-, metabolitos (lactato, piruvato, acetoacetato e 3-hidroxibutirato), substancias reativas ao acido tiobarbiturico (TBARS), glutationa reduzida (GSH) e estado antioxidante total (TAS). Através da punção digital, amostras de sangue capilar foram coletadas, para analise da glicemia, nos periodos T-0, T-1, a cada hora durante a cirurgia (T-2) e a cada 2 horas apos a cirurgia (T-3). Apesar da administração exógena de insulina durante a cirurgia ter sido constante em ambos os grupos, nos pacientes do grupo GG, a insulinemia permaneceu em concentração semelhante em todos os períodos, enquanto que no grupo GS elevou-se em T-2 e T-3 comparado ao valor basal (T-1) (31.9+/-28.8 Versus 6.56+/5.4, p=0.013). O aumento da concentração plasmática de glucose foi significativamente menor nos pacientes tratados com L-Ala-Gln no período intra quando comparado ao grupo controle (129.9+/-15.2 versus 158.6+/-18.6, p= 0.003). Não se observaram alterações significantes nas concentrações sericas das demais variáveis estudadas entre os dois grupos. Conclui-se que a administração pré-operatório de doses nutraceuticas de L-Ala-Gln em pacientes submetidos a cirurgia cardíaca com revascularizacao do miocárdio com CEC induz uma menor elevação da glicemia concomitante a menor elevação da insulinemia, o que ressalta o uso potencial da administracao pré-operatório desse dipeptideo para atingir um melhor controle glicemico e melhorar a sensibilidade a insulina.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017 / Made available in DSpace on 2017-09-19T04:12:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 347030.pdf: 1212932 bytes, checksum: 1f5fa1573ad4c49a276298209c94b384 (MD5) Previous issue date: 2017 / A obesidade é uma doença crônica e endócrino-metabólica caracterizada pelo acúmulo excessivo de triacilgliceróis no tecido adiposo, capaz de ser revertida ou amenizada através de intervenção cirúrgica. Epidemiologicamente têm sido descritas associações entre o excesso de peso, resistência à insulina e processo inflamatório crônico. Além disso, nas últimas décadas o sistema complemento foi associado a doenças metabólicas e cardiovasculares e intimamente relacionado com a obesidade e resistência à insulina. Sendo assim, a melhora do estado metabólico e a remissão da inflamação em pacientes obesos submetidos à cirurgia bariátrica foram avaliadas, bem como a associação dos fatores 3 e 4 (C3 e C4) do sistema complemento com a sensibilidade à insulina e a perda de peso após a cirurgia bariátrica. Para isso, a presença de comorbidades e as concentrações séricas de leptina, adiponectina, resistina e grelina foram avaliados em pacientes obesos mórbidos antes, 1, 3 e 6 meses após a cirurgia bariátrica. Também foram medidas as concentrações de IL-1ß, IL-6, TNF-a, proteína amiloide sérica A (SAA), proteína quimiotática de monócitos 1 (MCP-1), C3, C4, glicose, insulina, colesterol total, triacilglicerol, LDL- colesterol, HDL-colesterol e foi realizado o cálculo do modelo de avaliação da homeostase da resistência à insulina (HOMA-IR) durante o seguimento da cirurgia, bem como em comparação com um grupo de indivíduos não-obesos. Como resultado, observou-se uma redução significativa de peso acompanhada de melhora do perfil lipídico, da sensibilidade à insulina e das comorbidades. Ainda, houve diminuição de leptina e aumento de adiponectina no período pós-cirúrgico. IL-1ß, IL-6, TNF-a, MCP-1 e SAA não mostraram diferença no acompanhamento da cirurgia, porém SAA correlacionou-se com o IMC e apresentou-se muito mais alto no grupo de pacientes obesos. Além disso, C3 e C4 foram significativamente maiores em indivíduos obesos quando comparados aos indivíduos não-obesos e C3 e C4 foram positivamente correlacionados com HOMA-IR e as concentrações de C3 foram significativamente diminuídas após a cirurgia. Com base nesses resultados, a cirurgia bariátrica mostrou melhorar o estado metabólico melhorando as comorbidades associadas à obesidade e os biomarcadores de adiposidade leptina e adiponectina, mas não os demais hormônios e citocinas inflamatórias e C3 e C4 foram fortemente associados à sensibilidade à insulina.<br> / Abstract: Obesity is a chronic and endocrine-metabolic disease characterized by triacylglycerol accumulation in the adipose tissue, which can be reversed or improved through surgical intervention. Epidemiologically, associations between overweight, insulin resistance and chronic inflammatory process have been described. Furthermore, in the last decades the complement system was associated with metabolic and cardiovascular diseases and related to obesity and insulin resistance. Thus, metabolic status improvement and inflammation remission in obese patients undergoing bariatric surgery were evaluated, as well as the association of complement system factors 3 and 4 (C3 and C4) with insulin sensitivity and weight loss after bariatric surgery. For this, comorbidities and leptin, adiponectin, resistin and ghrelin serum concentrations were evaluated in morbidly obese patients before, 1, 3 and 6 months after bariatric surgery. IL-1ß, IL-6, TNF-a, serum amyloid A protein (SAA), monocyte chemotactic protein 1 (MCP-1), C3, C4, glucose, insulin, total cholesterol, triacylglycerol, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol concentrations and the calculation of the homeostasis model of insulin resistance (HOMA-IR) were performed during the surgery follow-up, as well in a group of non-obese individuals. As a result, significant weight loss followed by improvement in lipid profile, insulin sensitivity and comorbidities were observed. Still, there was a decrease in leptin and an increase in adiponectin in the postoperative period. IL-1ß, IL-6, TNF-a, MCP-1 and SAA showed no difference after surgery, but SAA correlated with BMI and was much higher in obese patients. In addition, both C3 and C4 were significantly higher in obese individuals when compared to lean individuals and positively correlated with HOMA-IR. C3 concentrations were significantly decreased after surgery. Based on these results, bariatric surgery has been shown to improve metabolic status by improving obesity-associated comorbidities and adiposity biomarkers leptin and adiponectin but not the other hormones and inflammatory cytokines and C3 and C4 were strongly associated with insulin sensitivity.

A metformina (Met) é descrita como um sensibilizador da insulina, levando a redução na resistência e uma significativa diminuição de seus níveis no jejum. Embora o alvo molecular da Met ainda não esteja totalmente descrito, acredita-se que este fármaco age inibindo o complexo I da cadeia respiratória mitocondrial, resultado em um aumento da razão celular de AMP/ATP. Alguns estudos vêm demonstrando que a Met é capaz de atravessar a barreira hematoencefálica, sendo capaz de modular o sistema nervoso central (SNC). Entretanto os efeitos desse fármaco no SNC ainda são pouco estudados. A Met no cérebro desempenha funções, como: regulação do apetite, fosforilação da AMPK, modulação da expressão de neuropeptídeos, inibição do complexo I da cadeia respiratória. Em nosso trabalho administramos intracerebroventricularmente (i.c.v) Met nas doses de 50 e 100ug durante sete dias em camundongos, e observamos uma brusca diminuição no peso, consumo alimentar, temperatura e sobrevivência, bem como na quantidade das gorduras epididimais e mesentéricas. A Met i.c.v foi capaz de aumentar a sensibilidade periférica à glicose e à insulina, aumentou a produção basal de H2O2 em preparações mitocondriais de hipocampo e hipotálamo. Em culturas neuronais observamos uma diminuição da viabilidade mitocondrial após o tratamento com Met e um aumento na produção de espécies reativas de oxigênio (ROS). Em resumo nossos dados apontam um efeito neurotóxico da Met quando utilizada em altas doses diretamente no SNC, resultando em hipotermia, hipoglicemia, alteração da função mitocondrial com um impacto deletério na sobrevivência de camundongos. / Metformin is an insulin-sensitizer, leading to decrease in insulin resistance and in fasting insulin levels. The precise molecular target of metformin (Met) is unknown; however, some reports showed the inhibition of complex I on mitochondrial electron transport chain as a possible target, resulting in an increase of the cellular AMP / ATP. Some studies have shown that Met is able of crossing the blood brain barrier, modulating central nervous system (CNS) function. However the toxicity of this drug in the CNS has been less explored. In brain Met is proposed to regulate appetite, phosphorylation of AMPK, expression of neuropeptides and inhibits of complex I of the mitochondrial respiratory chain. In our work Met were injected intracerebroventricular (i.c.v) at doses 50 and 100ug in mice for seven days. We observed a decrease in body weight, food intake, visceral and epididymal fat content, corporal temperature and survival rate. Metformin was also able to increase peripheral sensitivity to insulin and glucose. The basal production of H2O2 in mitochondrial preparations hippocampus and hypothalamus was increased by metformin. Similarly, in neuronal cultures there was decreased mitochondrial viability after treatment with metformin and increased production of reactive oxygen species (ROS). In summary, our data indicate that high doses of metformin directly have neurotoxic effects to the CNS, expressed by hypothermia, hypoglycemia, disrupting mitochondrial function and decreasing survival rate.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:36:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_7449_Dissertação Final - Vanessa da Silva Constancio - PDF.pdf: 102422 bytes, checksum: a90a62f1b77e2e217cca1fd49799d70a (MD5) Previous issue date: 2015-02-24 / O excesso de gordura corporal induz a um quadro inflamatório associado à endotoxemia metabólica e aumento da resistência à insulina, bem como altera o perfil lipídico que resulta em prejuízos a função hepática e renal. Estudos sugerem que a ingestão de alimentos antioxidantes, como os polifenóis, proporcionam efeitos benéficos sobre os metabolismos glicídico e lipídico. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito da casca de jabuticaba (Myrciaria cauliflora), da polpa do açaí juçara (Euterpe edulis Martius) e do jambolão (Syzygium cumini) sobre o perfil lipídico, a glicemia e a endotoxemia em camundongos Swiss submetidos à dieta de cafeteria. Inicialmente, os frutos foram liofilizados e submetidos à avaliação da composição centesimal. O ensaio biológico contou com 50 camundongos machos adultos da raça Swiss distribuídos em 5 grupos (n=10/grupo), a saber: grupo tratado com dieta comercial padrão (controle negativo), grupo tratado com dieta de cafeteria (controle positivo) e grupos teste que receberam por 14 semanas a dieta de cafeteria suplementada com 2% de casca de jabuticaba, ou polpa do jambolão ou polpa do açaí juçara liofilizados. Na 13ª e 14ª semana foram determinadas a tolerância à insulina e à glicose dos animais. Ao final do período experimental, avaliaram-se o ganho de peso, os parâmetros bioquímicos sanguíneos, histopatológicos e endotoxemia. Os parâmetros bioquímicos avaliados foram: colesterol total (CT) e as frações HDL-c, LDL-c, triacilgliceróis (TAG), bem como proteína C reativa (PCR), aspartato aminotransferase (AST) e alanina aminotransferase (ALT). Na histopatologia foram avaliados os efeitos da dieta hipercalórica sobre a área dos adipócitos, esteatose hepática e função renal a partir do número e área dos glomérulos. A endotoxemia foi avaliada pela concentração de lipopolissacarídeos (LPS) no soro dos animais. Aplicou-se o teste t para comparação dos resultados entre os grupos controle e ANOVA, complementada com teste de Tukey (&#945;=5%), para comparação dos grupos suplementados com os frutos e o controle positivo. A suplementação com 2% de jambolão à dieta de cafeteria resultou em redução significativa (p<0,05) do conteúdo de CT, LDL-c, TAG, da razão CT/HDL, bem como diminuição da área dos adipócitos dos animais tratados com os frutos. A suplementação com açaí juçara também foi capaz de reduzir o conteúdo de CT, TAG e a área dos adipócitos, além de elevar a tolerância à glicose. Por outro lado, a jabuticaba não foi eficaz na melhoria dos parâmetros relacionados ao metabolismo lipídico, ao metabolismo da glicose e dos aspectos histopatológicos. A suplementação com 2% dos frutos liofilizados não promoveu efeitos positivos na redução do ganho de peso, resistência à insulina e endotoxemia provocada pela ingestão da dieta de cafeteria. Além disso, os frutos também não foram eficientes na preservação da histologia renal e infiltração lipídica no fígado. Conclui-se que a inclusão do jambolão e do açaí juçara na dieta pode apresentar efeitos positivos sobre danos causados por dietas hiperlipídicas, especialmente no que se refere à dislipidemia, à tolerância à glicose e à hipertrofia dos adipócitos.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-10-29T16:02:24Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_EfeitoTemporalDieta.pdf: 10989301 bytes, checksum: a6872bd3a68ec838770ada66460c8050 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-11-18T15:31:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_EfeitoTemporalDieta.pdf: 10989301 bytes, checksum: a6872bd3a68ec838770ada66460c8050 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-18T15:31:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_EfeitoTemporalDieta.pdf: 10989301 bytes, checksum: a6872bd3a68ec838770ada66460c8050 (MD5) Previous issue date: 2014 / O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito temporal de uma dieta rica em carboidratos simples (PTD), após o desmame, sobre o metabolismo do tecido adiposo retroperitoneal (TAR) de ratos jovens. Por questões didáticas, dividimos esta tese em 3 capítulos: 1) efeito da PTD sobre a atividade transcricional de genes adipogênicos em três períodos de tempo (4, 8 e 12 semanas), a fim de se fornecer as informações sobre as networks envolvidas na resposta do TAR ao excesso de carboidrato simples; 2) efeito do exercício de endurance (durante 4 e 8 semanas) em ratos recém desmamados (RD) alimentados com a PTD sobre os níveis de leptina e suas ações periféricas no TAR; e o 3) efeito temporal da PTD sobre a expressão de microRNAs no mesmo tecido. No Capítulo I, ratos Wistar RD foram alimentados com uma dieta padrão (STD) ou PTD (68% de carboidratos) durante 4, 8 ou 12 semanas e o TAR foi removido para análises histopatológicas e PCR array (adipogênese). A PTD induziu hipertrofia e hiperplasia dos adipócitos no TAR após 12 semanas de ingestão. Além disso, a PTD alterou VLDLc e tracilglicerois séricos, bem como parâmetros glicometabólicos. O agrupamento hierárquico demonstrou mudanças induzidas pela PTD no padrão de expressão do grupo de genes testados. Análises de vias metabólicas, as quais utilizaram o algoritmo para análise de enriquecimento da plataforma MetaCore da Thompson Reuters, associaram o cluster dos genes diferencialmente expressos com vias canônicas relacionadas à regulação da diferenciação e proliferação de adipócitos (p-valor< 10-7). Portanto, nossos resultados sugerem que ratos RD alimentados com PTD aumentam o tamanho e o número de adipócitos devido à up regulation de sinais pró-adipogênicos (sinalização do PPAR) e à down regulation de sinais anti-adipogênicos (sinalização Wnt) em adultos jovens. No Capítulo II, ratos RD alimentados com as dietas STD ou PTD foram submetidos ao treinamento físico em esteira durante 4 ou 8 semanas. Os principais resultados obtidos sugerem que a PTD induz um aumento na expressão da leptina no TAR, enquanto o treinamento de endurance reduz o tamanho dos adipócitos via lipólise mediada pela leptina após 8 semanas. Em ratos treinados alimentados com a PTD, ocorre o desenvolvimento do depósito de gordura e a up regulation do mRNA e da leptina circulante. No Capítulo III, ratos RD alimentados com as dieta STD ou PTD durante 4, 8 ou 12 semanas tiveram o TAR removido para análise da expressão de miRNAs, cuja escolha foi baseada nos prováveis alvos dos mesmos, os quais apresentaram alteração na expressão após análise do agrupamento hierárquico (Capítulo I): três miRNAs anti-adipogênicos (rno-miR-let-7, rno-miR-27a-3p e rno-miR-200c-3p) e três miRNAs associados às condições metabólicas (rno-miR-125a-5p, rno-miR-125a-3p e rno-miR-126a-3p). Em conjunto, estes dados nos permitem concluir que a PTD regula a expressão de miRNAs no TAR, induzindo um aumento na expressão do miRNA rno-miR-200c-3p e reduzindo a expressão do miRNA rno-miR-27a-3p. Embora estes resultados estejam em fase de finalização, este é o primeiro estudo que considera a expressão de miRNAs desencadeada pela interação entre dieta pós-desmame e tempo, o que pode ser crucial para compreender o impacto que a composição da dieta possui sobre a decisão da célula adiposa de aumentar o volume ou em número. _________________________________________________________________________ / ABSTRACT: In this study, we assessed the time-course effect of a high-sugar diet (HSD), after weaning, on retroperitoneal white adipose tissue (rWAT) metabolism of young rats. To didactic purposes, we have divided this thesis in three chapters: 1) the effect of a HSD on the transcriptional activity of adipogenic genes in a time-course study (4-week, 8-week and 12 week periods), to provide insight regarding the genetic networks involved in the rWAT response to dietary sugar; 2) the effect of endurance training (4-week and 8-week periods) in weaned rats fed with a HSD on leptin levels and its actions on rWAT; and 3) the time-course effect of a HSD on microRNAs expression on rWAT. In Chapter I, weaned male Wistar rats were fed a standard (STD) or HSD (68% carbohydrates) for 4-week, 8-week or 12-weeks, and rWAT was removed for histopathology and PCR array (adipogenesis) analyses. The HSD induced adipocyte hypertrophy and hyperplasia in rWAT after 12 weeks of ingestion. Additionally, the HSD altered serum VLDLc, triacylglycerol, and glucometabolic parameters. Hierarchical clustering revealed HSD-induced changes in the expression patterns of the tested gene set. Pathway analysis, which used the enrichment analysis algorithm of the Thompson Reuters MetaCore platform, associated a cluster of differentially expressed genes with canonical pathways related to regulating adipocyte differentiation and proliferation (P-value < 10-7). Thus, HSD feeding post-weaning increased both the adipocyte size and number by simultaneously up-regulating pro-adipogenic signals (the PPAR pathway) and down-regulating anti-adipogenic signals (Wnt pathway) in young adults. In Chapter II, weaned rats fed with STD or HSD diets were subjected to running training for 4- and 8-week periods. Our results suggest that an HSD induces an increase in leptin expression in rWAT, while reducing adipocytes via leptin-mediated lipolysis after an 8-week period. In exercised rats fed an HSD, TAG synthesis and storage overlaps with lipolysis, promoting fat store development and Lep mRNA and plasma protein up regulation in adult rats. In Chapter III, rWAT of post-weaning rats fed with STD or HSD diets for 4-week, 8-week or 12-week periods was removed to access the miRNAs levels. We chose miRNAs whose possible targets were altered in the PCR array: three anti-adipogenics miRNAs (rno-miR-let-7, rno-miR-27a-3p, and rno-miR-200c-3p), and three miRNAs related to metabolic conditions (rno-miR-125a-5p, rno-miR-125a-5p and rno-miR-126a-3p). Together, these data suggest that HSD regulates the miRNAs expression on rWAT, increasing the miRNA rno-miR-200c-3p levels and down regulating the miRNA rno-miR-27a -3p levels. Although our results require further investigation, this is the first study that relates the relationship between high-sugar diet and period of feeding after weaning, which may be essential to understand the diet composition impact on fat cell fate: increase the volume or number.

Dissertação (mestrado profissional) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Cuidados Intensivos e Paliativos, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2016-04-19T04:19:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 337770.pdf: 3275446 bytes, checksum: 82c1d1e82a1bd255ab0e1a4e80c930da (MD5) Previous issue date: 2015 / Introdução: A diminuição dos níveis da proteína 3 de ligação ao fator de crescimento do tipo insulina (IGFBP-3) tem sido relatada em pacientes com cirrose e parece se correlacionar com o grau da disfunção hepática. Entretanto, os dados sobre o seu significado prognóstico ainda são escassos. Objetivo: Investigar o significado prognóstico dos níveis de IGFBP-3 em pacientes com cirrose. Métodos: Estudo prospectivo, que incluiu duas coortes: pacientes com cirrose estável (n = 138), avaliados entre 2012 a 2014 e pacientes hospitalizados por descompensação aguda (n = 189) avaliados entre 2011 a 2013. Os níveis de IGFBP-3 foram medidos por imunoquimioluminescência. Resultados: Os níveis de IGFBP-3 foram menores em pacientes hospitalizados, em comparação aos pacientes ambulatoriais (0,94 mcg/mL vs. 1,69 mcg/mL, P < 0,001) e aumentaram após transplante hepático (3,81 mcg/mL vs. 1,33 mcg/mL, P = 0,008). Durante o acompanhamento da coorte estável, 17 pacientes morreram e 11 receberam transplante hepático. A análise bivariada mostrou que a evolução para morte ou transplante foi associada com níveis mais baixos de IGFBP-3 (1,44 mcg/mL vs. 1,74 mcg/mL, P = 0,027). A probabilidade de sobrevida livre de transplante de Kaplan-Meier foi de 88,6% nos pacientes com IGFBP-3 = 1,67 mcg/mL e 72,1% para aqueles com IGFBP-3 < 1,67 mcg/mL (P = 0,015). Nos pacientes hospitalizados, a mortalidade em 30 dias foi de 24,3% e, na regressão logística, foi associada de forma independente à creatinina, relação normalizada internacional (RNI), relação saturação de oxigênio/fração inspirada de oxigênio (SpO2/FiO2) e níveis de IGFBP-3. A probabilidade de sobrevida livre de transplante em 90 dias foi de 80,4% naqueles com IGFBP-3 = 0,86 mcg/mL e 56,1% nos pacientes com IGFBP-3 < 0,86 mcg/mL (P < 0,001). Conclusões: Níveis reduzidos de IGFBP-3 estão associados à pior evolução em pacientes com cirrose. Este marcador pode representar uma ferramenta promissora para avaliação prognóstica na prática clínica.<br> / Abstract : Background: Decreased IGFBP-3 levels have been reported in patients with cirrhosis and seem to correlate with the intensity of hepatic dysfunction. However, data about its prognostic significance is still lacking. Aim: We sought to investigate the prognostic significance of IGFBP-3 in patients with cirrhosis. Methods: Prospective study that included two cohorts: outpatients with stable cirrhosis (n = 138), evaluated between 2012 and 2014 and patients hospitalized for acute decompensation (n = 189), evaluated between 2011 and 2013. IGFBP-3 levels were measured by immunochemiluminescence. Results: IGFBP-3 levels were lower in hospitalized patients as compared to outpatients (0.94 mcg/mL vs. 1.69 mcg/mL, P < 0.001) and increased after liver transplantation (3.81 mcg/mL vs. 1.33 mcg/mL, P = 0.008). During the follow-up of the stable cohort, 17 patients died and 11 received liver transplantation. Bivariate analysis showed that death or transplant was associated with lower IGFBP-3 levels (1.44 mcg/mL vs. 1.74 mcg/mL, P = 0.027). The Kaplan-Meier transplant-free survival probability was 88.6% in patients with IGFBP-3 = 1.67 mcg/mL and 72.1% for those with IGFBP-3 < 1.67 mcg/mL (P = 0.015). In the hospitalized cohort, 30-day mortality was 24.3% and was independently associated with creatinine, INR, SpO2/FiO2 ratio and IGFBP-3 levels in the logistic regression. The 90-day transplant-free survival probability was 80.4% in patients with IGFBP-3 = 0.86 mcg/mL and 56.1% for those with IGFBP3 < 0.86 mcg/mL (P < 0.001). Conclusions: Lower IGFBP-3 levels were associated with worse outcomes in patients with cirrhosis, and might represent a promising prognostic tool that can be incorporated in clinical practice.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Desportos. Programa de Pós-Graduação em Educação Física. / Made available in DSpace on 2012-10-26T11:16:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 304554.pdf: 1277522 bytes, checksum: e80ccbd187550c2f31eedf6ab39297ff (MD5) / O aumento nas prevalências de excesso de peso entre adolescentes, principalmente devido aos altos índices de inatividade física e por hábitos alimentares inadequados tem sido foco de grande preocupação na saúde pública. Por outro lado, o aumento do peso corporal está associado a diversas doenças crônico-degenerativas, dentre elas o Diabetes mellitus tipo 2 e a resistência à insulina. Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi comparar a prevalência de resistência à insulina entre adolescentes com peso normal e com excesso de peso. A amostra foi composta por 96 adolescentes (35,4% rapazes) com idade entre 14 e 19 anos (16,6±0,98) sendo que 50% apresentavam excesso de peso. A massa corporal, estatura e a circunferência da cintura (CC) foram mensuradas. Para categorizar os indivíduos de acordo com o IMC e CC foram utilizados os pontos de corte propostos por Conde&Monteiro (2006) e Fernández et al. (2004), respectivamente. A coleta de sangue foi realizada após jejum de 10 a 12 horas, e o índice HOMA-IR foi calculado através dos valores de insulina e glicemia de jejum. Para identificar a resistência à insulina (RI) foi utilizado o ponto de corte de HOMA-IR proposto por Lee et al. (2006). A normalidade dos dados foi avaliada pelo teste de Kolmogorov-Smirnov e foi empregado o teste Mann-Whitney. Para investigar a diferença entre as freqüências foi utilizado o teste Qui-quadrado. A fim de investigar a relação do índice HOMA-IR com IMC e CC, e entre CC e IMC, os dados foram transformados por meio do log 10, e foi realizada a correlação ajustada para sexo, idade e estágio maturacional. Para todas as análises foi adotado um nível de significância de p<0,05. Foi encontrada uma prevalência de 2,1% de RI, sem diferença significativa entre os sexos, categorias de peso ou de CC. No entanto, as moças, assim como os adolescentes com excesso de peso, tenderam a ter valores mais altos do índice HOMAIR. As prevalências de RI do presente estudo são mais baixas daquelas encontradas na literatura Não foram encontrados valores de glicemia que indicassem RI na amostra. Foram observada correlações significativas (p<0,001), porém fracas, entre os indicadores de gordura corporal e os valores de HOMA-RI (IMC r=0,36 e para CC r=0,38). Contudo, apesar das baixas frequências de RI e dos valores de glicemia de jejum estarem dentro da normalidade, sugere-se que os adolescentes com glicemia acima de 90 assim como os com valores de HOMA-IR superiores a 2,28 realizem exames clínicos mais detalhados já que a literatura mostra que para adolescentes esses valores já representam um risco aumentado de adquirir DM2 na vida adulta. / The increase in overweight prevalence among adolescents, mostly due to the physical inactivity and inadequate dietary habits, is a great concern in public health. On the other hand, the increase in body weight is associated with several chronic degenerative diseases, such as type 2 Diabetes mellitus and insulin resistance. Therefore, the aim of the present study was to compare insulin resistance among adolescents with normal weight and overweight. The sample was composed by 96 adolescents (35.4 % male), aged 14-19 years (16.6±0.98), among which 50% were overweight. Body mass, height and waist circumference (WC) were measured. To categorize subjects according to the body mass index (BMI) and WC, the cut-off points proposed by Conde & Monteiro (2006) and Fernandéz et al (2004) were used, respectively. Blood samples were taken after 10-12 hours fasting, and the HOMA-IR index was calculated by using both plasma insulin and glucose values. The cut-off point proposed to Lee et al. (2206) was used to identify insulin resistance (RI). Non-parametric data were analyzed using Mann-Whitney test. Chi-square test was used to evaluate differences among frequency. To investigate the relationship between HOMA-IR index with IMC and WC, and between WC and IMC, a correlation was performed adjusting for sex, age and sexual maturation. Significance level was set at p<0.05 for all analyses. Prevalence of 2.1% of RI was found, with no significant differences among sex, weight groups and CC groups. However, overweight adolescents and females tended to show higher values of HOMA-IR index. The results of the present study showed lower prevalence of RI when compared to others on literature. In addition, no cases of insulin resistance using fasting glycemic values among subjects. Significant but weak correlation coefficients (p<0.001) were showed among body fat and HOMA-IR values (r=0.36 for BMI; r=0.38 for WC). Although low prevalence of IR among adolescents, as well as among overweight subjects, identification of individuals in risk is needed since they are more prone to develop DM type in adult life.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:53:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340546.pdf: 2685651 bytes, checksum: b739bdab07963ec5496ca06a57141988 (MD5) Previous issue date: 2016 / O presente trabalho teve como objetivo caracterizar o efeito de extratos e frações das plantas Salacia impressifolia e Croton heterodoxus, bem como um novo triterpeno derivativo, o fern-9(11)-ene-2a,3ß-diol, na homeostase da glicose usando modelos experimentais in vivo e in vitro. Plantas e triterpenos foram avaliados quanto às atividades anti-hiperglicêmica e/ou hipoglicemiante na curva de tolerância à glicose, em modelo experimental de hiperglicemia induzida por sobrecarga de glicose (4g/kg), assim como efeito na secreção de insulina, na atividade das enzimas a-glicosidases in vivo e na propriedade anti-glicação in vitro. Além disso, foi estudado a translocação de vesículas contendo insulina no pâncreas e o mecanismo de ação do triterpeno derivativo na captação de glicose e influxo de cálcio em ilhotas pancreáticas e intestino (cólon), e também a secreção in vivo do peptídeo semelhante ao glucagon 1 e a atividade da enzima dipeptidilpeptidase IV in vitro. Para experimentos in vivo, foram utilizados ratos machos Wistar com 50-55 dias de idade. Para determinação da glicemia e concentração do peptídeo semelhante ao glucagon 1, amostras de sangue foram coletadas nos tempos zero, 15, 30, 60 e 180 min na curva de tolerância à glicose; para insulina sérica, nos tempos zero, 15, 30 e 60. A captação de glicose e influxo de cálcio foram estudados depois da incubação das ilhotas pancreáticas e cólon intestinal com triterpeno derivativo, na presença ou não de diferentes inibidores/ativadores e de 14C-glicose ou de cálcio (45Ca2+). A translocação de vesículas foi avaliada por microscopia eletrônica de transmissão. O extrato bruto, fração clorofórmio e resíduo insolúvel da Salacia impressifolia mostraram potencial atividade anti-hiperglicêmica em ratos hiperglicêmicos, reduziram a atividade da maltase e sacarase e demonstraram efeito anti-glicação. O extrato bruto da Croton heterodoxus e derivativo demonstraram potencial atividade anti-hiperglicêmica. Os resultados mostram que o triterpeno derivativo reduziu a glicose sanguínea em comparação com o triterpeno isolado; e reduziu a atividade da maltase. Além disso, o triterpeno derivativo estimulou a translocação das vesículas de insulina no pâncreas e aumentou a captação de glicose e o influxo de cálcio em ilhotas pancreáticas isoladas e cólon intestinal. Adicionalmente, o triterpeno derivativo estimulou a secreção de insulina e do peptídeo semelhante ao glucagon 1. Neste sentido, estas descobertas destacam a Salacia impressifolia e o triterpeno derivativo como um potencial candidato para utilização em terapias para a diabetes melito.<br> / Abstract: The aim of this study was to characterize the effect of extracts and fractions of Salacia impressifolia and Croton heterodoxus, as well as the triterpene derivative, in glucose homeostasis using in vivo and in vitro experimental models. The anti-hyperglycemic activity in the glucose tolerance curve, the inhibition of the enzymes a-glucosidases and the anti-glycation property were investigated. In addition, it was also studied the mechanism of action of triterpene derivative in glucose and calcium uptake in pancreatic islet and intestinal colon, and also the in vivo glucagon-like peptide-1 secretion and in vitro dipeptidyl peptidase-IV activity. Vesicles translocation was available by transmission electronic microscopy. For the in vivo experiments, Wistar male rats at 50-55 day-old were used. To glycaemia and serum glucagon-like peptide-1 determination blood samples were collected at zero, 15, 30, 60 and 180 min at the glucose tolerance curve; to insulin, 0, 15, 30 and 60 min. The activity of intestinal disaccharidases was also evaluated in vivo. The involvement of dipeptidyl peptidase-IV and the anti-glycation property were evaluated in vitro. The glucose and calcium uptake was studied after incubation of the pancreatic islet and intestinal colon with triterpene and of 14C-glucose or calcium (45Ca2+) in the presence or not of different inhibitors. The pancreatic islets were isolated and incubated with 45Ca2+ and triterpene in the presence or absence of various inhibitors or activators. The crude extracts, chloroform and insoluble residue of Salacia impressifolia showed potential anti-hyperglycemic activity in hyperglycemic rats, reduced the activity of maltase and sucrose and prevented glycation. The crude extracts of Croton heterodoxus and triterpene derivative demonstrated potential anti-hyperglycemic activity. The results show that the triterpene derivative powered the serum glucose lowering compared with triterpene isolated; and reduced the activity of maltase. Also, triterpene stimulated insulin vesicles translocation in pancreas; and glucose and calcium uptake in isolated pancreatic islet and colon. Additionally, triterpene derivative stimulated glucagon-like peptide-1 and insulin secretion in vivo. In this sense, these findings highlight Salacia impressifolia and triterpene derivative as a potential candidate for use in therapies for diabetes.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008Bitstream added on 2014-06-13T19:02:28Z : No. of bitstreams: 1 akinaga_j_me_botib.pdf: 529365 bytes, checksum: e932ddc358273cb927a381731ab60959 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os α1-ARs são membros da superfamília de receptores acoplados à proteína G (GPCR), podendo ser divididos em três diferentes subtipos (α1A-, α1B- e α1D-ARs), sendo todos semelhantemente ativados pela noradrenalina e adrenalina. Os agonistas seletivos de α1-ARs podem ser classificados em duas classes químicas, as feniletilaminas e as imidazolinas e são utilizados, por exemplo, para tratamento de hipotensão e também como descongestionantes nasais. O presente estudo investigou a capacidade dos agonistas de α1-ARs induzirem taquifilaxia nas contrações do ducto deferente de rato e internalização de α1A-ARs conjugados com proteína fluorescente verde (GFP) expressos em células HEK293. Os resultados mostram que dentre todos os agonistas testados da classe das feniletilaminas (noradrenalina, metoxamina e fenilefrina) e imidazolinas (A61603, nafazolina e oximetazolina) apenas a oximetazolina foi capaz de induzir taquifilaxia em curvas concentração-resposta consecutivas próprias e também em curvas concentraçãoresposta de noradrenalina feitas em preparações de ducto deferente de rato. A taquifilaxia induzida pela oximetazolina é dependente da ativação de α1A-ARs, uma vez que a incubação concomitante da oximetazolina com o antagonista seletivo de α1-ARs, o prazosin, inibiu a taquifilaxia. Estudos feitos com microscopia confocal utilizando α1A-ARs conjugados com GFP mostram que a oximetazolina é capaz de induzir um aumento da fluorescência intracelular já nos primeiros 5 minutos de incubação enquanto que a noradrenalina não é capaz de induzir aumento do mesmo parâmetro mesmo após 30 minutos de incubação. Esse aumento da fluorescência intracelular é um indicativo do processo de internalização dos α1A-ARs conjugados com GFP induzido pela oximetazolina mas não pela noradrenalina e pode estar relacionado com a taquifilaxia observada nos experimentos... / The α1-ARs are G-protein coupled receptors (GPCR) composed by three subtypes (α1A-, α1B- e α1D-ARs), similarly activated by epinephrine an norepinephrine. The selective agonists of α1-ARs can be classified into two different chemical classes, the phenylethylamines and imidazolines, which are used for treatment of hypertension and as nasal decongestants. The present study investigated the ability of some α1-ARs agonists to induce tachyphylaxis in the contractions of rat vas deferens and internalization of the α1A-ARs tagget with green fluorescent protein (GFP) expressed in HEK293 cells. It was observed in the rat vas deferens that, among all agonists tested (the phenylethylamines norepinephrine, metoxamine, phenylephrine and imidazolines A61603, naphazoline and oxymetazoline), only oxymetazoline can induce tachyphylaxis in consecutive concentration-response curves and also in concentration-response curves to norepinephrine. The tachyphylaxis induced by oxymetazoline is dependent on α1-ARs activation, since it was inhibited in presence of prazosin, a α1-ARs selective antagonist. Confocal microscopy studies of HEK 293 cells expressing α1A-ARs tagget with GFP show that oxymetazoline can induce prompt and time-dependent increase in intracellular fluorescence already after 5 minutes of incubation, whereas norepinheprine was unable to increase intracellular fluorescence even after 30 minutes of incubation. This increase in intracellular fluorescence indicates that oxymetazoline, but not norepinephrine, induces internalization of the α1A-ARs tagget with the GFP. The internalization of α1A-ARs tagget with the GFP induced by oxymetazoline may be related to the tachyphylaxis observed in funtional experiments. However, other studies are necessary to understand the mechanisms of tachyphylaxis and internalization induced by oxymetazoline in the present study.