La ateroesclerosis es un proceso patológico crónico poli-etiológico, se caracteriza por la acumulación de lípidos LDL-col en las células musculares lisas y en los macrófagos provocando engrosamiento y perdida de elasticidad de las paredes vasculares. El objetivo fue determinar si existe efecto sinérgico entre el Captopril y la Atorvastatina sobre la ateroesclerosis inducida en ratas. Se trabajó con 07 grupos de 8 ratas Holtzman; 1: control negativo, 2: Hipercolesterolemia inducida (HI), 3: HI más Captopril, 4: HI más Atorvastatina y 5, 6 y 7 HI más diferentes dosis de Atorvastatina y Captopril; se midió mensualmente indicadores como evolución del peso corporal (g), y para la determinación del efecto antiateroesclerotico se tuvo en cuenta los niveles de perfil lipídico (mg/dl), marcadores de estrés oxidativo – malondialdehido (105 M-1 cm-1) y evaluación anatomopatológica del hígado riñón, cerebro y coronaria del corazón. Este modelo experimental elevó el peso corporal de las ratas en 43.31% y se presentó los valores más altos de perfil lipídico en el grupo 2; el grupo 5 que recibió Atorvastatina 2 mg/Kg y Captopril 5 mg/Kg en el tercer mes de tratamiento, se observó una disminución significativa de los valores de perfil lipídico especialmente en la concentración de LDL-col (43.44mg/dl) y disminución de los valores de malondialdehido (0.07215 x 105 M-1 cm-1), respecto a los demás grupos. Se concluye que el captopril y la atorvastatina administrados conjuntamente, tienen efecto sinérgico en el tratamiento de la Ateroesclerosis inducida en ratas. Palabras Clave: Ateroesclerosis, Captopril, Atorvastatina, Sinergismo. / Atheroesclerosis is a chronic disease process poly-bacterial, is characterized by accumulation of lipids in LDL-col smooth muscle cells and macrophages, causing thickening and loss of elasticity of vessel walls. The Objective was to determine whether there is synergy between the Captopril and Atorvastatin on atheroesclerosis induced in rats. We work with 07 groups of 8 rats Holtzman; 1: negative control, 2: Induced hypercholesterolemia (HI), 3: HI more Captopril, 4: HI more Atorvastatin and 5.6 and 7 HI more different doses of Atorvastatin and Captopril, was measured as the monthly indicators Weight (g), and for determining the effect antiatherosclerotico was evaluated Lipid profile values (mg / dl), markers of oxidative stress - malondialdehyde (105 M-1 cm-1) and pathologic evaluation of liver, kidney, brain and heart coronary artery. This experimental model increased the body weight of rats at 43.31% is presenting the highest values of lipid profile in group 2, an improvement declining values of LDL-col (43.44mg/dl) and declining values of malondialdehyde (0.07215 x 105 M-1 cm-1) in Group 5 which received Atorvastatin 2 mg / kg and Captopril 5 mg / kg in the third month of treatment, compared to other groups. Conclusion was the captopril and atorvastatin administered jointly, have synergistic effect of empowerment in the treatment of Atherosclerosis induced in rats. Key words: Atheroesclerosis, Captopril, Atorvastatin, Synergy.

La capacidad de pegado de ácido palmítico por proteínas citosólicas fue medido a partir de raspado diferencial de mucosa intestinal bovina, obteniendo tres zonas de la vellocidad intestinal determinadas por la actividad de la fosfatasa alcalina en cada una de las mismas. Los resultados obtenidos indicaron que la actividad de pegado de ácido palmítico depende de la posición que las células ocupan a lo largo del eje cripta-ápice de la vellosidad. Las proteínas citosólicas de alto y bajo peso molecular con afinidad por ácido palmítico en el ápice de la vellosidad pegaron 1,24 + - 0,41 y 1,54 + - 0,16 pmoles de palmitato/ug de proteína respectivamente. La actividad de pegado decreció de 0,50 + - 0,25 1,10 + - 0,23 pmoles de palmitato/ug de proteína para las proteínas citosólicas en zona de cripta de la vellosidad. Utilizando diversas técnicas: filtración en geles, cromatografía de intercambio iónico, remosión de ácido palmítico de membranas microsomales, precipitación con sulfato de amonio, ensayo de pegado de ácdisos grasos (Lipidex 1000), se demostró tanato en hígado como en intestino la presencia de proteínas citosólicas de bajo peso molecular (14-15 KDa) con afinidad por ácidos grasos de cadena larga. Este trabajo demostró que la fracción de proteínas citosólicas de bajo peso molecular (Proteína Transportadora de Acidos Grasos-PTAG) jugaría un rol importante en la utilización y transporte de ácidos grasos.

El antígeno B (EgAgB) es una lipoproteína presente en la larva del parásito cestodo Echinococcus granulosus, agente causante de la zoonosis conocida como hidatidosis, enfermedad endémica en nuestra región. Esta proteína pertenece a una familia de proteínas exclusivas de cestodos que unen ligandos hidrofóbicos, conocidas como HLBPs. A nivel proteico, el EgAgB está formado por subunidades de ~8 kDa codificadas por genes polimórficos pertenecientes a 5 subfamilias distintas (EgAgB8/1 a EgAgB8/5); mientras que su componente lipídico está formado por una amplia variedad de lípidos, incluyendo lípidos neutros y polares. El hecho de que muchos de estos lípidos no pueden ser sintetizados de novo por el parásito hace suponer que el EgAgB podría estar involucrado en la adquisición de estos compuestos desde el hospedador, como ha sido propuesto para otras HLBPs. Esto implicaría que el EgAgB interactué con componentes del hospedador para adquirir estos ligandos. En este sentido, existe evidencia de que el EgAgB es capaz de interactuar con células del sistema inmune, modulando su respuesta, lo que a su vez favorecería el establecimiento y permanencia del parásito. Sin embargo, para poder comprender los mecanismos asociados a esta modulación a nivel molecular y determinar si la proteína es capaz de transportar e intercambiar los lípidos, es imprescindible avanzar en el conocimiento estructural y funcional de esta partícula compleja. Con este fin, durante el desarrollo de este trabajo se purificaron las subunidades recombinantes EgAgB8/1, EgAgB8/2 y EgAgB8/3, logrando obtenerlas de forma libre de lípidos. Se logró determinar que estas subunidades son capaces de interaccionar consigo mismas aún en ausencia de lípidos, formando oligómeros de entre 40 y 60 kDa, distintos a los que se han reportado previamente en la literatura en presencia de los ligandos. Por otro lado, se analizó la capacidad de distintos ligandos lipídicos de unirse a estas subunidades y se pudieron determinar constantes de disociación en el orden submicromolar empleando antroiloxi-derivados de ácidos grasos. Más aún, se evaluó la capacidad de las subunidades EgAgB8/2 y EgAgB8/3 de transferir estos derivados hacia membranas fosfolipídicas modelo. Utilizando distintos tipos de vesículas se pudo establecer que ambas subunidades son potencialmente capaces de transferir los ácidos grasos. En el caso de las subunidad EgAgB8/2, la transferencia ocurriría por un mecanismo que involucra un contacto directo con la membrana, mientras que en el caso de EgAgB8/3 la cinética de la transferencia estaría determinada por la disociación del complejo proteína-ligando. Asimismo, para ambas proteínas se pudo determinar que las interacciones electroestáticas tienen importancia en el mecanismo, dado que la transferencia se ve favorecida en el caso de vesículas con mayor carga neta negativa, como ocurre en el caso de vesículas ricas en cardiolipina. Por otro lado, con el fin de evaluar la capacidad de las subunidades libres de lípidos de interactuar con células del sistema inmune, particularmente con monocitos y macrófagos, se encontró que las subunidades EgAgB8/1 y EgAgB8/3 libres de lípidos son reconocidas por estas células, mientras que la subunidad EgAgB8/2 no presenta unión a los monocitos y es pobremente reconocida por los macrófagos. Asimismo, se pudo determinar que la fosfatidilcolina que estaría expuesta en la partícula nativa de EgAgB participaría en la unión, posiblemente modificando la forma en que se exponen las subunidades de EgAgB para que sean reconocidas por las células. En conjunto, los resultados obtenidos en este trabajo sugieren que la partícula de EgAgB puede ser reconocida por células del sistema inmune a través de algunas de sus subunidades y el hecho de que en proximidad de una membrana fosfolipídica algunas subunidades pueden ser capaces de transferir sus ligandos, apoya la idea de que EgAgB pueda intercambiar lípidos interaccionando con células del hospedador.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000399420-Texto+Completo-0.pdf: 258833 bytes, checksum: ad9e16bce9610626b1cf62039ff20710 (MD5) Previous issue date: 2007 / Background and aims – Patients with the atherogenic LDL phenotype B often have increased triglyceride and reduced HDL-cholesterol (HDL-C) levels. An index using both TG and HDL-C could be a better predictor of lipoprotein subclass profile than TG alone. The present study aimed to evaluate the TG/HDL-C ratio as a predictor of phenotype A or B and its relation with lipoprotein subclasses profile in a population with a wide range of cardiovascular risk. Methods – LDL phenotype and lipoprotein subclasses profile analysis was performed by nuclear magnetic resonance spectroscopy in 113 patients under different levels of cardiovascular risk. Results – The participants were allocated in three groups, according to levels of the TG/HDL-C ratio: less or equal 3. 5 (TG/HDL 3. 5; n=56), greater then 3. 5 e less then 5. 0 (3. 5<TG/HDL<5. 0; n=30) and greater then 5. 0 (TG/HDL 5. 0; n=27). There were more patients with coronary heart disease (63%) and LDL phenotype B (78%) in the group TG/HDL 5,0 (p=0,02 e <0,001 respectively). The differences in the lipoprotein subclass profile persisted after adjustments for differences (by ANCOVA), with more atherogenic patterns occurring progressively with increases of TG/HDL-C ratio. The highest concentration of large and medium VLDL particles and small LDL particles were present in the TG/HDL 5. 0 group, concomitant with the lowest concentration of large LDL and HDL subclasses; otherwise, the TG/HDL 3. 0 group showed the lowest concentration of large and medium VLDL and small LDL particles together with the highest concentration of large LDL and HDL subclasses (p<0. 001 all comparisons). The TG/HDL 5. 0 group showed the highest mean VLDL diameter and the lowest mean LDL and HDL diameter, while the TG/HDL 3. 5 group presented the lowest VLDL mean diameter and the highest LDL and HDL mean diameter (p<0. 001 for all comparisons). The odds ratio for presenting LDL phenotype B using the TG/HDL 3. 5 as reference, was 11 (CI 95%: 3 to 37) in the 3,5<TG/HDL<5,0 group and 49 (CI 95%: 11 to 211) in the TG/HDL 5. 0 group. The correlation of TG with LDL particle size disappeared whereas the correlation of TG/HDL-C ratio remained present when both where evaluated conjointly in a model of multiple linear regression (r=0,128 com p=0. 18 e r=-0. 532 com p<0. 001 respectively). Conclusion – The TG/HDL-C ratio is an excellent independent predictor of lipoprotein subclass profile and LDL phenotype in patients of a wide range of cardiovascular risk, with potential utility for use in daily clinical practice. / Introdução - Pacientes com predominância de partículas pequenas e densas de LDL (altamente aterogênicas) são classificados como portadores de fenótipo B e freqüentemente possuem níveis plasmáticos de triglicerídeos (TG) elevados e níveis de HDL-colesterol (HDL-C) reduzidos. Um índice que envolvesse níveis séricos de TG e HDL-C talvez pudesse ser um melhor preditor do perfil de subclasses de lipoproteínas que os TG isoladamente. Objetivos - Avaliar o valor da relação TG / HDL-C como preditor da presença de fenótipo A ou B e sua relação com a distribuição de subclasses das lipoproteínas em uma população com amplo espectro de risco cardiovascular. População e Métodos – Análise do fenótipo de LDL e do perfil de subclasses de lipoproteínas foi realizada por espectroscopia por ressonância magnética em 113 pacientes sob diferentes níveis de risco cardiovascular. Resultados - Os 113 participantes foram alocados em três grupos, conforme faixas da razão TG / HDL-C: abaixo de 3,5 (TG/HDL<3,5; n=56), entre 3,5 e abaixo de 5,0 (3,5<TG/HDL<5,0; n=30) e acima de 5,0 (TG/HDL>5,0; n=27). Houve mais pacientes com doença arterial coronariana (63%) e com fenótipo B (78%) no grupo TG/HDL>5,0 (p=0,02 e <0,001 respectivamente). Diferenças de perfis de subclasses de lipoproteínas persistiram entre os grupos após ajustes para diferenças basais (por ANCOVA), com padrões progressivamente mais aterogênicos observados nas faixas crescentes da razão TG/HDL-C. As maiores concentrações de VLDL grandes e médias e de LDL pequenas estavam presentes no grupo TG/HDL>5,0, concomitantemente com as menores concentrações de LDL e HDL grandes, enquanto, de forma oposta, o grupo TG/HDL<3,0 apresentava as menores concentrações de VLDL grandes e médias e de LDL pequenas ao lado das maiores concentrações de LDL e HDL grandes (p<0,001 para todas comparações).O maior tamanho médio de VLDL e menor tamanho médio de LDL e HDL estava presente no grupo TG/HDL>5,0, e também, de forma oposta o menor tamanho médio das VLDL e maior tamanho das LDL e HDL estava presente no grupo TG/HDL<3,5 (p<0,001 para todas comparações). A razão de chances de possuir um fenótipo B utilizando o grupo TG/HDL<3,5 como referência foi de 11 (IC 95%: 3 a 37) no grupo 3,5<TG/HDL<5,0 e de 49 (IC 95%: 11 a 211) no grupo TG/HDL>5,0. A correlação dos TG com o tamanho das partículas de LDL desapareceu enquanto a da razão TG/HDL-C se manteve quando ambos foram avaliados conjuntamente em um modelo de regressão linear múltipla (r=0,128 com p=0,18 e r=-0,532 com p<0,001 respectivamente). Conclusão – A razão TG/HDL-C é um excelente preditor independente do perfil de subclasses de lipoproteínas e do fenótipo de LDL em pacientes com diferentes níveis de risco cardiovascular, com potencial utilidade na prática clínica diária.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / La enfermedad por almacenamiento de ésteres de colesterol (CESD, Cholesteryl ester storage disease) es una enfermedad metabólica rara causada por la deficiencia de la actividad de la enzima lipasa ácida lisosomal, ocasionando la acumulación de ésteres de colesterol, particularmente en el hígado. Su presentación es bastante variable y su diagnóstico es un reto, cuando no es tratada a tiempo puede llevar a cirrosis, insuficiencia hepática y muerte. Además, existe un número de anomalías observadas en los pacientes con CESD que se sobreponen a diagnósticos más comunes, siendo probable que esté siendo subdiagnosticada. La mayoría de pacientes relatados hasta el momento, 60%, son portadores de la mutación E8SJM en el gen LIPA. El objetivo de la investigación fue detectar la variante patogénica E8SJM en los explantes de hígado de los pacientes sometidos a trasplante en el Hospital de Clínicas (HCPA) con diagnóstico clínico de esteatohepatitis no alcohólica y cirrosis criptogénica. De esta manera comprobaríamos si la CESD está siendo sub-diagnosticada y categorizada como otra enfermedad hepática entre los pacientes sometidos a trasplante. Se realizó el estudio con muestras parafinadas de explantes de hígado. De manera paralela también fue detectada en un banco de controles de amplificación, así como en pacientes con sospecha de CESD con ingreso al Servicio de Genética Médica del HCPA para análisis molecular del gen LIPA. La mutación E8SJM fue detectada por PCR en tiempo real utilizando una sonda personalizada, previa estandarización de todos los métodos. La mutación fue detectada en una paciente que ingresó vía redes de apoyo al diagnóstico de errores innatos del metabolismo con sospecha de DLAL. Este resultado fue confirmado por secuenciación por el método de Sanger y el genotipo fue establecido por secuenciación de nueva generación utilizando la plataforma Ion Torrent Personal Genome Machine®. / Tesis

La ateroesclerosis es un proceso patológico crónico poli-etiológico, se caracteriza por la acumulación de lípidos LDL-col en las células musculares lisas y en los macrófagos provocando engrosamiento y perdida de elasticidad de las paredes vasculares. El objetivo fue determinar si existe efecto sinérgico entre el Captopril y la Atorvastatina sobre la ateroesclerosis inducida en ratas. Se trabajó con 07 grupos de 8 ratas Holtzman; 1: control negativo, 2: Hipercolesterolemia inducida (HI), 3: HI más Captopril, 4: HI más Atorvastatina y 5, 6 y 7 HI más diferentes dosis de Atorvastatina y Captopril; se midió mensualmente indicadores como evolución del peso corporal (g), y para la determinación del efecto antiateroesclerotico se tuvo en cuenta los niveles de perfil lipídico (mg/dl), marcadores de estrés oxidativo – malondialdehido (105 M-1 cm-1) y evaluación anatomopatológica del hígado riñón, cerebro y coronaria del corazón. Este modelo experimental elevó el peso corporal de las ratas en 43.31% y se presentó los valores más altos de perfil lipídico en el grupo 2; el grupo 5 que recibió Atorvastatina 2 mg/Kg y Captopril 5 mg/Kg en el tercer mes de tratamiento, se observó una disminución significativa de los valores de perfil lipídico especialmente en la concentración de LDL-col (43.44mg/dl) y disminución de los valores de malondialdehido (0.07215 x 105 M-1 cm-1), respecto a los demás grupos. Se concluye que el captopril y la atorvastatina administrados conjuntamente, tienen efecto sinérgico en el tratamiento de la Ateroesclerosis inducida en ratas. Palabras Clave: Ateroesclerosis, Captopril, Atorvastatina, Sinergismo. / Atheroesclerosis is a chronic disease process poly-bacterial, is characterized by accumulation of lipids in LDL-col smooth muscle cells and macrophages, causing thickening and loss of elasticity of vessel walls. The Objective was to determine whether there is synergy between the Captopril and Atorvastatin on atheroesclerosis induced in rats. We work with 07 groups of 8 rats Holtzman; 1: negative control, 2: Induced hypercholesterolemia (HI), 3: HI more Captopril, 4: HI more Atorvastatin and 5.6 and 7 HI more different doses of Atorvastatin and Captopril, was measured as the monthly indicators Weight (g), and for determining the effect antiatherosclerotico was evaluated Lipid profile values (mg / dl), markers of oxidative stress - malondialdehyde (105 M-1 cm-1) and pathologic evaluation of liver, kidney, brain and heart coronary artery. This experimental model increased the body weight of rats at 43.31% is presenting the highest values of lipid profile in group 2, an improvement declining values of LDL-col (43.44mg/dl) and declining values of malondialdehyde (0.07215 x 105 M-1 cm-1) in Group 5 which received Atorvastatin 2 mg / kg and Captopril 5 mg / kg in the third month of treatment, compared to other groups. Conclusion was the captopril and atorvastatin administered jointly, have synergistic effect of empowerment in the treatment of Atherosclerosis induced in rats. Key words: Atheroesclerosis, Captopril, Atorvastatin, Synergy. / Tesis

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-11T17:20:49Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 270176 bytes, checksum: 751bb9840959d3df65411d3f6815a943 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T17:20:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 270176 bytes, checksum: 751bb9840959d3df65411d3f6815a943 (MD5) Previous issue date: 2003-08-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os lipídios da dieta estão envolvidos na etiologia, bem como na prevenção das doenças cardiovasculares e podem desempenhar papel importante na saciedade e na gênese da obesidade. O presente trabalho visou avaliar os efeitos do consumo dos óleos de amendoim, açafrão e oliva no perfil lipídico, composição corporal, metabolismo energético e ingestão alimentar em indivíduos eutróficos, normolipidêmicos. Foram selecionados 32 indivíduos, aleatoriamente divididos, sendo que um grupo controle, totalizando 4 mulheres e 4 homens em cada grupo, com idade de 18 a 50 anos. Foi oferecido um milk shake no desjejum dos voluntários, veiculando uma quantidade equivalente a 30% do metabolismo basal na forma de óleo, por um período de oito semanas, exceto para o grupo controle, que não recebeu o shake. Foram realizadas avaliações dos valores de colesterol total e frações, triacilgliceróis, composição corporal, taxa de metabolismo basal, termogênese induzida pela dieta e ingestão alimentar dos indivíduos nas semanas basal, 4a e 8a. Não foi observada diferença significante no perfil lipídico e na saciedade, no entanto, o grupo que recebeu óleo de açafrão apresentou valores de lipídios plasmáticos mais reduzidos. A ingestão de todos os óleos levou ao aumento do ganho de peso, sendo que o consumo do óleo de oliva proporcionou maior circunferência do quadril. Conclui-se que a adição dos óleos na dieta levou ao aumento da deposição de gordura corporal, sem provocar alterações no perfil lipídico e ingestão dietética, ao contrário do relatado na literatura, em relação ao consumo de ácidos graxos monoinsaturados (veiculados no óleo de amendoim e de oliva). O uso dos óleos em substituição a outros nutrientes energéticos da dieta, o maior número de voluntários e um período de intervenção maior devem ser investigados em estudos futuros. / Dietary lipids are involved on the etiology as well as on the prevention of cardiovascular diseases and may play an important role on satiety and on the genesis of obesity. The present study aimed to evaluate the effects of peanut, safflower and olive oil on the lipid profile, body composition and satiety of eutrophic, normolipidemic subjects. Thirty-two subjets of 18 to 50 years old were recruited and randomly divided in four groups, made of 4 men and 4 women each. One group received no treatment and the others received a milk shake in their breakfast, containing the amount of one of the oils to cover 30% of their basal metabolism, for 8 weeks. The levels of total blood cholesterol and fractions, triacylglycerols, body weight, body composition, basal metabolism rate, dietary induced thermogenesis, satiety and food intake were evaluated at basal, 4th and 8th weeks. No significant difference was observed on lipid profile and satiety, however, the safflower oil group showed lower levels of blood lipids. Oil intake, irrespective to its composition, lead to an increase on body weight gain and olive oil consumption increased hip circumference. In conclusion, the addition of the oils to the diet, in contrast to reports in the literature related to monounsaturated fatty acids (present in peanut and olive oils), increased body fat deposition, and had no effect on blood lipid profile and satiety. The oil substitution to other energetic nutrients of the diet, a larger number of volunteers and a longer period of intervention shall be investigated in future studies.

Made available in DSpace on 2014-05-06T02:02:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000457551-Texto+Completo-0.pdf: 12875247 bytes, checksum: 7692e146a26179178ba4309a48e59226 (MD5) Previous issue date: 2014 / Pre-eclampsia is one of the leading cause of maternal mortality worldwide. Although some etiological factors such as poor placentation, endothelial dysfunction, excessive maternal inflammation, poor angiogenesis, and placental hypoxia have been proposed, the etiology of pre-eclampsia has not been fully understood. An immune maladaptation theory suggests that pre-eclampsia might be envolved in an inappropriate regulation of normally Th2-deviated maternal immune response, leading to a shift toward harmful Th1 immunity, delivering a large amount of cytokines and growth factor molecues throw maternal circulation. The presence of these mediators seems to play a role in the pathophysiology of pre-eclampsia, resulting in the clinical signs of the disease: hypertension and proteinúria. Thus, this study pretended to analize different pathways during gestation in order to try to elucidate a biomarcar for the disease. We hypothesize that moleculas related to inflammatory system would be up-regulated in maternal plasma and placenta from women with pre-eclampisa and down regulated in fetal plasma. The study was performed at Hospital São Lucas of PUCRS, Brazil, where we made “Mediating molecules and pre-eclampsia”, and at St Thomas‟ Hospital, London, UK, where “Lipoproteins and pre-eclampsia” and “Caveola proteins and pre-eclampsia” projects were developed. At HSL/PUCRS, maternal/fetal plasma and placenta samples were collected from 117 pre-eclampsia and normal pregnant women in third trimester pregnancy, after informed written consent. The cytokines (Endocan-1, PlGF, IL-6, TNFα, MCP-1, NGF, LIGHT, Leptina) were measured by multiplex detecting assay. In London, a study with 51 pregnant women was conducted analising placenta expression of the following molecules: lipoproteins pathway (LRP-1, LDL-R, SRB1, ABCA1, MTTP and PDIA2) and protein caveolae complex (Caveolin-1-3, cavins 1-4, eNOS and iNOS) which were performed by PCR-RT e immunohistochemistry. Briefly we found high levels of Endocan-1 and TNFα in pre-eclamptic maternal plasma, low levels of IL-6 in fetal plasma in cytokines assay. Also a correlation between LRP-1 gene and small for gestational age infants in lipoproteins receptor assay was found. Finally, a reduction expression of Caveolin-1 found in pre-eclampstic placenta seems to result in a compensatory chronic activation of eNOS to attenuate vasoconstriction seen in pre-eclampsia. In conclusion, our results showed new data in relation to pre-eclampsia, which might be helpful for the understanding of its pathofisiology. / A pré-eclâmpsia é uma das principais causas de mortalidade materna no mundo. Embora alguns fatores etiológicos, tais como má placentação, disfunção endotelial, inflamação materna exacerbada, angiogênese deficiente e hipoxia placentária têm sido propostos, a etiologia da pré-eclâmpsia ainda não foi completamente compreendida. A teoria da má adaptação imune sugere que a pré-eclâmpsia pode estar envolvida com um desbalanço Th1/Th2 prejudicial à gestação, com liberação de citocinas e fatores de crescimento na circulação materna. A presença desses mediadores parece desempenhar um papel na fisiopatologia da pré-eclâmpsia, resultando nos sinais clínicos da doença: a hipertensão e a proteinúria. Assim, este estudo pretendeu analisar diferentes vias metabólicas durante a gestação, a fim de tentar elucidar um biomarcar para a doença. Nossa hipótese é a de que moléculas relacionadas ao sistema inflamatório estariam aumentadas no plasma materno e na placenta de mulheres com pré-eclampsia e diminuídas no plasma fetal. O estudo foi realizado no Hospital São Lucas da PUCRS, Brasil, onde fizemos a coleta das amostras para o projeto “Moléculas mediadoras e a pré-eclâmpsia”, e no St Thomas’ Hospital, em Londres, Reino Unido, onde os projetos “Lipoproteínas e a pré-eclampsia” e “Proteínas das cavéolas e a pré-eclâmpsia” foram desenvolvidos. No HSL/PUCRS, amostras de plasma materno-fetal e placenta foram coletadas de 117 gestantes com e sem pré-eclâmpsia no terceiro trimestre da gestação. As moléculas (Endocan-1, PIGF, IL-6, TNFα, MCP-1, NGF, LIGHT e Leptina) foram dosadas por ensaio de detecção multiplex. Em Londres, um estudo com 51 gestantes foi realizado analisando expressão placentária das seguintes moléculas: receptores e mediadores de lipoproteínas (LRP-1, LDL-R, SRB1, ABCA1, MTTP e PDIA2) e proteínas do complexo das cavéolas (Caviolina-1-3, Cavins 1-4, eNOS e iNOS ), que foram analisadas por PCR-TR e imuno-histoquímica. Resumidamente, encontramos altos níveis de Endocan-1 e TNFα no plasma materno, baixos níveis de IL-6 no plasma fetal de pacientes com pré-eclampsia, no ensaio de citocinas. Ainda, foi encontrada uma correlação entre o gene LRP-1 e recém-nascidos pequenos para a idade gestacional, no grupo com pré-eclâmpsia, no ensaio de receptor de lipoproteínas. E, por fim, uma redução da expressão de Caveolina-1 na placenta pré-eclâmptica foi observada e parece ter resultado numa ativação compensatória crônica da eNOS para tentar atenuar a vasoconstrição observada na pré-eclampsia. Concluindo, nossos resultados mostraram novos dados em relação à pré-eclâmpsia, que podem ser úteis para o entendimento de sua fisiopatologia.

O desenvolvimento de resistência a múltiplas drogas na terapêutica do câncer é um importante obstáculo para o tratamento efetivo. Os mecanismos de resistência a múltiplas drogas ocasionam a redução intracelular de agentes quimioterápicos e, por conseqüência, estão envolvidos no fracasso no tratamento do câncer. Os principais genes envolvidos neste fenômeno são: o gene MDR1(multiple drug resisctance), que codifica uma glicoproteína de alto peso molecular, a P-gp; o gene MRP1, que codifica uma glicoproteína de 190 Kda, denominada proteína associada à resistência a múltiplas drogas; e o gene da LRP (proteína relacionada à resistência de pulmão). Alguns estudos sugerem que o colesterol pode estar envolvido diretamente com o fenômeno de resistência a múltiplas drogas, e que os lipídeos podem influenciar várias e complexas funções no MDR, por afetarem o transporte de drogas através da membrana plasmática. Além disso, células tumorais tem maior necessidade de colesterol devido a uma taxa de multiplicação mais elevada que as células normais. Neste estudo analisou-se a expressão dos genes MDR1, MRP1 e LRP em células de sarcoma uterino resistentes à doxorrubicina, e a influência de lipoproteínas. Houve aumento da expressão dos genes MDR1, MRP1 e LRP nas células tratadas com a LDL, sendo mais expressivo o gene MDR1. A HDL diminuiu a expressão dos genes MRP1 e LRP. No entanto, o gene MDR1 teve sua expressão diminuída somente em concentrações maiores. As células cultivadas em meio sem soro fetal apresentaram um elevado aumento na expressão destes genes. Em conclusão, as lipoproteínas podem modular a expressão dos genes MDR1, MRP1 e LRP e, assim, atuar na resistência a múltiplas drogas. / The development of multidrug resistance in anticancer therapy is an obstacle in the efficiency of the treatment. The multidrug resistance mechanism causes reduction of intracellular chemotherapeutical drugs. Therefore, it leads to treatment failure. There are three main multidrug resistance genes: MDR1, which codifies the P-gp (a high weight glycoprotein); MRP1, which codifies a 190 Kda glycoprotein; and, the LRP (lung resistance related protein) gene. Several reports suggest that cholesterol may be directly involved with the multidrug resistance phenomenon and that lipids may affect many complex functions in this regard, as the activity of the drug transport across the plasmatic membrane. Moreover, tumor cells have great cholesterol necessity due to the high cell multiplication rate. Here we described the MDR, MRP, LRP gene expression of a doxorubicin-resistant uterine sarcoma cell line under the influence of lipoproteins. LDL increased the expression of all genes, mainly MDR1. Treatment with HDL led to reduction of MRP and LRP expression. However, the MDR gene expression decreased only by higher concentrations of HDL. Cells grown in serumdeprived medium led to an increased expression of all the studied genes. Therefore, lipoproteins may modulate the MDR, MRP, LRP gene expression and, consequently, the cell resistance to drugs.

O exercício físico regular contribui para prevenção e redução da aterosclerose, em grande parte, por melhorar o perfil lipídico e o transporte reverso de colesterol (TRC). O TRC é um sistema antiaterogênico que promove a remoção do excesso de colesterol de macrófagos pelas apo A-I e HDL e seu transporte ao fígado, com eliminação de colesterol na bile e fezes. Em camundongos selvagens e transgênicos para proteína de transferência de colesterol esterificado (CETP-tg), o treinamento físico aumentou a transferência de colesterol radioativo de macrófagos para o plasma, fígado e fezes e o conteúdo dos receptores B-E e SR-BI no fígado. Em leucócitos, hepatócitos e enterócitos, o exercício físico aumentou a expressão do receptor de HDL, ABCA-1. Entretanto, não é claro se o exercício físico modula o fluxo de lípides em macrófagos, o que seria determinante para a primeira etapa do TRC. Assim sendo, avaliou-se, em camundongos selvagens e CETP-tg, o efeito do treinamento físico aeróbio sobre: 1) a expressão de genes envolvidos no fluxo de lípides, modulação da resposta inflamatória, vasodilatadora e antioxidante: Pparg (PPAR?), Nr1h3 (LXRalfa), Nr1h2 (LXRbeta), Abca1 (ABCA-1), Abcg1 (ABCG-1), Scarb1 (SR-BI), Cd36 (CD-36), Olr1 (LOX-1), Ccl2 (MCP-1), Tnf (TNFalfa), Il6 (IL-6), Il10 (IL10), Nos3 (eNOS) e Cat (Catalase) na parede arterial e em macrófagos peritoneais; 2) o efluxo de 14C-colesterol de macrófagos peritoneais para HDL2 e apo A-I e 3) a captação de 3H-colesteril oleoil éter-LDL (3H-COE-LDL) acetilada por macrófagos peritoneais. Camundongos machos com 12 semanas de idade, recebendo dieta padrão e água ad libitum, foram aleatoriamente divididos em grupo sedentário e treinado. O treinamento físico foi realizado em esteira, 15m/min, 30 min/dia, 5 vezes/semana, durante 6 semanas. Arco aórtico e macrófagos da cavidade peritoneal foram isolados dos animais sedentários e treinados, imediatamente (0 h) e após 48 h da última sessão de exercício. A expressão de genes foi avaliada por RT-PCR e o efluxo de colesterol, por meio da sobrecarga de macrófagos peritoneais com LDL acetilada e 14C-colesterol, seguindo-se incubação com apo A-I ou HDL2. A captação de LDL foi determinada pela incubação de macrófagos com 3H-COE-LDL acetilada. Não foram observadas alterações sistemáticas na expressão de genes envolvidos no fluxo de lípides em macrófagos e na aorta comparando-se animais sedentários e treinados, selvagens ou CETP-tg. De modo semelhante, não houve diferença no efluxo de colesterol celular e na captação de LDL. Em conclusão, não foram evidenciadas alterações em macrófagos peritoneais e na parede arterial frente ao treinamento físico aeróbio que possam contribuir para o TRC em modelo experimental de camundongos não dislipidêmicos, sem intervenção farmacológica ou alimentar. Sendo assim, o efeito do treinamento físico na melhora do transporte reverso de colesterol, observado em estudos anteriores, deve ser consequente à sua ação sistêmica sobre mediadores deste transporte e expressão de receptores no fígado e intestino / Regular physical exercise prevents and reduces atherosclerosis mainly by improving lipid profile and reverse cholesterol transport (RCT). RCT is an antiatherogenic system that promotes excess cholesterol removal from macrophages by apo A-I and HDL and its transport to the liver. Then, cholesterol can be secreted into bile and excreted in feces. In wild type and cholesteryl ester transfer protein transgenic (CETP-tg) mice exercise training increased the transfer of 14C-cholesterol from macrophages to plasma, liver and feces and elevated SR-BI and B-E receptor content in the liver. In leucocytes, hepatocytes and enterocytes, physical exercise increased mRNA of HDL receptor, ABCA-1. Nonetheless, it is not clear if exercise can modulate lipid flux in macrophages that can be important for the first phase of the RCT. It was analyzed in wild type and CETP-tg mice the effect of aerobic exercise training in: 1) the expression of genes involved in lipid flux, inflammation, oxidation and vasodilation: Pparg (PPAR?), Nr1h3 (LXRalfa), Nr1h2 (LXRbeta), Abca1 (ABCA-1), Abcg1 (ABCG-1), Scarb1 (SR-BI), Cd36 (CD-36), Olr1 (LOX-1), Ccl2 (MCP-1), Tnf (TNFalfa), Il6 (IL-6), Il10 (IL10), Nos3 (eNOS) and Cat (Catalase) in arterial wall and peritoneal macrophages; 2) the apo A-I and HDL2-mediated cholesterol efflux from macrophages and 3) the uptake of 3H-cholesteryl oleoyl ether- acetylated LDL (3H-COE-LDL) by macrophages. Twelve week old male mice fed a chow diet and water ad libitum were randomly assigned to sedentary and trained groups. Exercise training was performed in a treadmill (15m/min, 30 min/day, 5 times/week, during 6 weeks). Aortic arch and peritoneal macrophages were isolated from sedentary and trained animals immediately (time 0) and 48 h after the last exercise session. Gene expression was analyzed by RT-PCR and cholesterol efflux mediated by apo A-I or HDL2 after macrophage overloading with acetylated LDL and 14C-cholesterol. LDL uptake by macrophages was determined by incubation with 3H-COE-acetylated LDL. There were no systematic changes in the expression of macrophages and aortic genes comparing sedentary and trained wild type or CETP-tg mice. Similarly, there were no changes in cholesterol efflux and LDL uptake by macrophages. In conclusion, it was not found alteration in gene expression and cholesterol flux in macrophages and arterial wall that can contribute to the RCT in experimental model of non-dyslipidemic mice without pharmacological or dietary interventions. Therefore, the benefits of aerobic training in improving RCT, observed in previews studies, should be consequent to its systemic action on mediators of this transport and on the expression of hepatic and intestinal receptors