O armazenamento de saliva para avaliação da microbiota bucal muitas vezes é necessário, principalmente em estudos epidemiológicos. O objetivo desse estudo foi avaliar a viabilidade e a variabilidade da microbiota bucal, de amostras de saliva armazenadas em temperaturas de -20ºC e em nitrogênio liquido (N2L), após 3 e 10 meses. Uma alíquota de cada amostra de saliva estimulada, usando goma de mascar sem açúcar, foi processada em até 45 minutos após a sua coleta. As amostras foram armazenadas seguindo três métodos diferentes: no primeiro método, as amostras de saliva foram preparadas com glicerol 10% (G) e mantidas a -20ºC durante 8 horas e então armazenadas em botijão com N2L; no segundo foi utilizado o mesmo protocolo, porém, sem glicerol; no terceiro método as alíquotas foram preparadas com glicerol 10% e mantidas a -20ºC. Após semeadura das amostras e incubação o número de unidades formadoras de colônias (UFC) foi determinado e uma média de 30 colônias de cada amostra foi identificada por meio de provas bioquímicas. Não houve diferença significativa na contagem de UFC/mL das amostras processadas imediatamente após a coleta (2,1 x 107 UFC/mL) e após 3 meses de armazenamento em N2L (G) (4,5 x 106 UFC/mL), N2L (1,6 x 106 UFC/mL), e -20ºC (2,2 x 106 UFC/mL). Porém, após 10 meses de preservação em N2L (G) (4,5 x 105 UFC/mL), e N2L (2,3 x 105 UFC/mL), observou-se uma redução (p=0.0183) do número de UFC/mL em comparação com a avaliação inicial. Não houve diferença significativa no número de UFC nas amostras armazenadas com e sem crioprotetor. A determinação da variabilidade da microbiota bucal mostrou que as bactérias presentes nas amostras frescas dos gêneros Streptococcus, Staphylococcus e Bacillus mantiveram-se nos diferentes tempos de avaliação, mesmo que em diferentes concentrações. Baseado nos resultados obtidos pode-se sugerir que preservação de saliva a -20ºC e a -196ºC, são métodos de armazenamento eficazes, para avaliação da microbiota bucal, por um período de 3 e 10 meses. / Saliva storage for oral microbiota evaluation often is required, especially in epidemiologic studies. The aim of the present study was to assess the effects of different storage methods upon viability and the variability of the oral microbiota in saliva samples. One aliquot of each saliva sample was processed until 45 minutes after collection. Saliva was stimulated using chewing gum sugar free. The samples were storage following three different methods: in the first method, aliquots of saliva were mixed with glycerol 10% (G) and maintained at -20ºC for 8 hours and then stored in N2L; the second followed the same protocol without glycerol; and in the third method aliquots were prepared with glycerol 10% and maintained at -20ºC. From each sample the number as the colony-forming units (CFU/mL) was determined and 30 colonies were chosen and cells were identified by biochemical assays. There was not statistically significant difference on the number of CFU/mL of samples processed immediately after de collection and after 3 months as storage. However, after 10 months of storage in N2L, there was a decrease in the number of CFU/mL (p=0.0183) in comparison with the initial evaluation, and the number of CFU/mL in the samples stored with and without glycerol did not showed statistically significant difference. Although in different percentages of cell number, the oral microbiota variability evaluation showed that Streptococcus, Staphylococcus and Bacillus were maintained in the different times of evaluation. Based on our results, it is possible to suggest that the preservation of saliva in -20ºC and -196ºC are efficient storage methods for oral microbiota evaluation for a period of 3 and 10 months.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-12-13T15:36:52Z No. of bitstreams: 1 2017_LíviaPimenteldeSant’AnaDourado.pdf: 15871216 bytes, checksum: 0273482c49bc7a39fe247577a7fa6a8a (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-02-15T18:16:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_LíviaPimenteldeSant’AnaDourado.pdf: 15871216 bytes, checksum: 0273482c49bc7a39fe247577a7fa6a8a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-15T18:16:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_LíviaPimenteldeSant’AnaDourado.pdf: 15871216 bytes, checksum: 0273482c49bc7a39fe247577a7fa6a8a (MD5) Previous issue date: 2018-02-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq). / A obesidade é uma doença reconhecida pela Organização Mundial da Saúde (OMS) desde 1997. Devido a vários fatores (genéticos, ambientais, dietéticos), esta doença atualmente é uma grande parte da população mundial e está associada a várias outras patogenicidades. Vários estudos mostraram que quantidades maiores de gordura corporal estão associadas a riscos aumentados de vários tipos de câncer. A inflamação está relacionada à obesidade e ao câncer. Os mediadores pró-inflamatórios causam efeitos locais e sistêmicos. O inflamassoma NLRP3, um importante complexo proteico para o processo inflamatório, é responsável pela maturação das citocinas pró-inflamatórias IL-1β e IL-18. A ausência de componentes da inflamação já foi relacionada a um aumento de peso aumentado. Outro fator intimamente relacionado com obesidade, inflamação e, consequentemente, câncer é a microbiota. A filogenia e os metabólitos da microbiota intestinal podem desempenhar um papel benéfico e protetor ou nocivo, sendo relacionados ao desenvolvimento de doenças no hospedeiro. Ainda, existem dois tipos de adipócitos presentes no corpo – branco (WAT), amplamente distribuído e mais conhecido por seu papel no armazenamento de gordura, e marrom (BAT), localizados em depósitos específicos e com papel termogênico – têm papéis distintos na modulação do metabolismo e da resposta imune. O presente estudo avaliou o papel do inflamassoma NLRP3 no perfil inflamatório, metabolismo lipídico e na modulação da microbiota intestinal de animais obesos. Também foi avaliado se a abundância de WAT e BAT é modificada com a depleção dos componentes do inflamassoma e a ativação de macrófagos induzida por esses tecidos e o papel do inflamassoma nessa ativação. Para a primeira parte, camundongos selvagens e deficientes para caspase 1/11 e NLRP3 do inflamassoma foram alimentados com dieta convencional e rica em lipídeos (45% de calorias advindas de lipídeos) por 90 dias, a resposta inflamatória, o metabolismo de lipídeos e a filogenia da microbiota intestinal foram analisados. Nossos dados sugerem que animais nocautes para caspase1/11 apresentaram maior suscetibilidade à obesidade, com consequentes alterações dos marcadores de metabolismo lipídico e inflamatórios (esteatose hepática, biogênese de corpúsculos lipídicos, secreção de IL-12 e CD1d em células do lavado peritoneal), mudanças metabolômicas no perfil lipídico global do fígado e alteração na abundância filogenética da microbiota intestinal, apresentando filos envolvidos com ganho de peso e esteatose hepática; indicando uma modulação imunológica e no metabolismo lipídico. Na segunda parte, WAT e BAT foram retirados de animais selvagens e depletados para componentes de inflamassoma, mantidos em meio de cultura e o sobrenadante foi usado para estimular macrófagos de medula óssea (BMDM). Os animais nocautes apresentaram uma distribuição distinta desses tecidos e o uso do sobrenadante WAT e BAT depletados para proteínas do inflamassoma NLRP3 sugere que este complexo desempenha um papel importante na ativação de macrófagos regulada pelo tecido adiposo. Tomados em conjunto, nossos resultados sugerem que a ausência de caspase 1/11 modulam a abundância de WAT e BAT, que possuem papéis diferenciados na ativação de células imunes e, ainda, que a obesidade induzida pela dieta rica em gordura e a ausência de caspase 1/11 podem regular o metabolismo lipídico, a resposta inflamatória e a composição da microbiota intestinal. / Obesity is a disease recognized by the World Health Organization (WHO) since 1997. Due to several factors (genetic, environmental, dietary), this disease is currently a large part of the world population and is associated with several other pathogenicities. Several studies have shown that higher amounts of body fat are associated with increased risks of various types of cancer. Inflammation is related to obesity and cancer. Pro-inflammatory mediators cause local and systemic effects. The inflammasome NLRP3, an important protein complex for the inflammatory process, is responsible for the maturation of the proinflammatory cytokines IL- 1βand IL-18. The absence of components of the inflammasome has already been related to an increased weight gain. Another factor closely related to obesity, inflammation and, consequently, cancer is the microbiota. The phylogeny and metabolites of the gut microbiota may play a beneficial and protective or deleterious role, being related to the development of diseases in the host. Furthermore, there are two types of adipocytes present in the body - white (WAT), widely distributed and better known for their role in fat storage, and brown (BAT), located in specific deposits and with thermogenic paper - have distinct roles in modulating metabolism and immune response. The present study evaluated the role of NLRP3 inflammation in the inflammatory profile, lipid metabolism and modulation of the intestinal microbiota of obese animals. It was also evaluated whether the abundance of WAT and BAT is modified by the depletion of the components of the inflammasome and the activation of macrophages induced by these tissues and the role of the inflammasome in this activation. For the first part, wild-type and caspase-deficient mice 1/11 and NLRP3 of the inflammasome were fed with a conventional diet and rich in lipids (45% of calories from lipids) for 90 days, the inflammatory response, lipid metabolism and phylogeny of the intestinal microbiota were analyzed. Our data suggest that animal knockouts for caspase 1/11 were more susceptible to obesity, with consequent changes in the markers of lipid and inflammatory metabolism (hepatic steatosis, biogenesis of lipid bodies, IL-12 and CD1d secretion in peritoneal lavage cells), changes metabolomics in the global lipid profile of the liver and alteration in the phylogenetic abundance of the intestinal microbiota, presenting phyla involved with weight gain and hepatic steatosis; indicating immunological modulation and lipid metabolism. In the second part, WAT and BAT were taken from wild animals and depleted for inflammasome components, kept in culture medium and the supernatant was used to stimulate bone marrow derived macrophages (BMDM). The knockout animals showed a distinct distribution of these tissues and the use of the supernatant WAT and BAT depleted for proteins of the NLRP3 inflammasome suggests that this complex plays an important role in the activation of macrophages regulated by adipose tissue. Taken together, our results suggest that the absence of caspase 1/11 modulate the abundance of WAT and BAT, which have differentiated roles in the activation of immune cells and also that obesity induced by the high fat diet and the absence of caspase 1/11 can regulate lipid metabolism, inflammatory response and intestinal microbiota composition.

Made available in DSpace on 2018-07-27T18:26:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-18. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-27T18:30:21Z : No. of bitstreams: 1 000866910.pdf: 1935220 bytes, checksum: e56b37e9050493f55dcf68e77d76d9ee (MD5) / A microbiota intestinal das aves exerce papel fundamental no desenvolvimento de seu potencial produtivo por garantir o bom funcionamento do trato gastroentérico e do sistema imunológico a ele intimamente ligado. Por isso diversos aditivos já foram utilizados para favorecer o desenvolvimento de uma microbiota saudável, entretanto, ainda não temos informações sobre o perfil desejável para ela. Sendo assim, nos propusemos a utilizar a Eletroforese em Gel com Gradiente de Temperatura (TGGE), para avaliar a microbiota do ceco de aves alimentadas com dietas acrescidas de halquinol, ácido caprílico e Lactobacillus, e posteriormente desafiadas com Salmonella Enteritidis (SE). Aos 10, 20, 30 e 42 dias de vida foram quantificadas as imunoglobulinas IgA, IgM, IgY e interleucinas 17 e 8, avaliada a colonização cecal de SE (UFC/mL), observação histopatológica de tonsila cecal, e esses resulatados relacionados com a microbiota cecal avaliada pelo método TGGE. O tratamento com ácido caprílico foi igualmente eficaz ao halquinol na diminuição da colonização por SE, seguidos do grupo tratado com Lactobacillus. As concentrações de Il-8 e IgM demonstraram relação com a maturação e desenvolvimento imune local e sistêmico das aves, porém, não identificamos relação com o aumento da complexidade da microbiota, entre os diferentes trtamentos e nos grupos desafiados. No presente estudo também nao foi possível reproduzir a técnica de TGGE / The intestinal microbiota of birds plays a fundamental role in the development of their production potential to ensure the proper functioning of a gastrointestinal tract and immune system closely linked to it. So many additives have been used to encourage the growth of a healthy microbiota, however, we still have no information about the desired profile for her. So we set out to use the Gel Electrophoresis with Temperature Gradient (TGGE) to assess the cecal microbiota of birds fed diets plus halquinol, caprylic acid and Lactobacillus, and subsequently challenged with Salmonella Enteritidis (SE). At 10, 20, 30 and 42 days old were quantified immunoglobulins IgA, IgM, IgY and interleukins 17:08 assessed cecal colonization IF (CFU / ml), cecal tonsil histopathological observation, and those related to resulatados cecal microbiota evaluated by TGGE method. The treatment with caprylic acid was equally effective in reducing the halquinol colonization by IF, followed by the group treated with Lactobacillus. IL-8 and IgM concentrations shown maturation and compared with the local and systemic immune development of the poultry, however, we do not identify relationship with the increased complexity of the microbiota between different trtamentos and challenged groups. In this study it was also not possible to reproduce the TGGE

Orientador: Iveraldo dos Santos Dutra / Coorientador: Elerson Gaetti-Jardim Junior / Banca: Vera Cláudia Magalhães Curci / Banca: Rita de Cássia Campebell Machado Botteon / Banca: Samir Issa Samara / Banca: Luís Antônio Mathias / Resumo: A periodontite e o desgaste dentário excessivo são duas das síndromes mais importantes que afetam o periodonto e os dentes de pequenos ruminantes. Frequentemente relatadas em rebanhos em diversas regiões do mundo, são enfermidades multifatoriais e estão envolvidas com diminuição da produtividade de rebanhos, decorrente das dificuldades de preensão, mastigação e ruminação. O presente estudo, em forma de capítulos, teve como objetivos relatar a ocorrência de periodontite, biofilme dentário supragengival e desgaste excessivo da coroa dental em 150 cabras em lactação de rebanho estabulado. Adicionalmente, foi avaliada pela reação em cadeia da polimerase (PCR) a microbiota subgengival de sítios periodontais sadios e com bolsa periodontal frente a 23 iniciadores de espécies de bactérias com potencial patogênico no homem e em outras espécies animais. A ocorrência de lesão periodontal, avaliada pela recessão gengival, foi observada em 70,66% (106) das 150 cabras, das quais 28% (42/150) apresentaram lesões em dentes incisivos e 62% (93/150) em dentes mastigatórios. Todos os animais avaliados apresentaram algum escore de biofilme supragengival, representando um fator de risco para o desenvolvimento de periodontites. O desgaste excessivo da coroa dental foi observado em 40% (60/150) dos animais em graus variados, nos dentes incisivos e mastigatórios conjuntamente; 37,3% (56/150) somente em dentes mastigatórios e 18,6% (28/150) apenas em dentes incisivos. Na avaliação da microbiota da bo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Periodontitis and excessive dental wear are considered two of the most important syndromes that affect the periodontium and the teeth of small ruminants. Often reported in herds in different regions of the world, they are multifactorial diseases and are involved with decreased herd productivity due to difficulties in gripping, chewing and rumination. The present study, in the form of chapters, had as objective to report the occurrence of periodontitis, supragingival dental biofilm and excessive wear of the dental crown in 150 lactating goats. In addition, the subgingival microbiota of healthy sites and periodontal pockets were evaluated by the polymerase chain reaction (PCR) using 23 primers of bacterial species with pathogenic potential in man and other animal species. The occurrence of periodontal lesion, evaluated by gingival recession, was observed in 70.66% (106) of the 150 goats, which 28% (42/150) presented lesions in incisor teeth and 62% (93/150) in masticatory teeth. All animals evaluated had a supragingival biofilm score, representing a risk factor for the development of periodontitis. The excessive wear of the dental crown was observed in 40% (60/150) of the animals in varying degrees, in the incisors and masticatory teeth together; 37.3% (56/150) only in masticatory teeth and 18.6% (28/150) only in incisors. In the evaluation of the microbiota of periodontal pockets (n = 22) and gingival sulcus (n = 22) of goats, the occurrence of periodontitis can be connected to Tannerella forsythia, Porphyromonas gingivalis, Fusobacterium nucleatum, Campylobacter rectus, Eikenella corrodens, Fusobacterium necrophorum, Prevotella buccae, Treponema denticola, Prevotella intermedia, Porphyromonas melaninogenica, Treponema maltophilum, Prevotella loescheii, Dialister pneumosintes and Aggregatibacter actinomycetemcomitans. The two sanit... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-06-21Bitstream added on 2014-06-13T19:14:39Z : No. of bitstreams: 1 pereira_dfa_me_sjc.pdf: 933077 bytes, checksum: 1cf55e305807271fd95bf2e3e95495ba (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A espondilite anquilosante (EA) é uma doença inflamatória crônica de etiologia desconhecida, caracterizada pelo acometimento predominante do esqueleto axial. A terapia convencional inclui o uso de antiinflamatórios não hormonais e drogas anti-reumáticas modificadoras da evolução da doença (DMARDs). O uso de agentes imunobiológicos, como o anti-TNF, tem sido considerada uma excelente opção terapêutica em casos mais graves e refratários, porém estudos prévios demonstraram maior risco de infecções após o tratamento. Reservatórios bucais de microrganismos oportunistas podem causar infecções sistêmicas, uma vez que a cavidade bucal representa uma porta de entrada para patógenos, especialmente em pacientes imunocomprometidos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a presença e a sensibilidade aos antimicrobianos de Candida spp., Staphylococcus spp., Enterobacteriaceae e Pseudomonas spp. na cavidade bucal de pacientes com EA em uso de anti-TNF comparando-os com indivíduos controle. Foram incluídos no estudo: grupo anti-TNF (35 indivíduos, diagnosticados portadores de EA com idade entre 17 a 63 anos e sob terapia anti-TNF); grupo Convencional (35 pacientes portadores de EA, com idade entre 21 e 74 anos sob tratamento convencional não imunobiológico; e respectivos grupos controle composto por indivíduos saudáveis pareados na idade, gênero e condições bucais aos grupos com EA. Foram realizados exame clínico, anamnese, bem como coleta de enxágüe bucal de cada indivíduo a qual foi semeada em meios de cultura específicos para cada microrganismo e posterior obtenção do número de unidades formadoras de colônia por militros (UFC/mL). Os isolados foram identificados pelo Sistema API, bem como fora realizados testes de sensibilidade aos antifúngicos dos isolados de leveduras, e, antibióticos dos isolados bacterianos... / The Ankylosing Spondylitis (AS) is a chronic inflammatory disease of unknown etiology, particularly characterized by a compromise of the axial skeleton. The conventional therapy includes the use of non-hormonal anti-inflammatory and Disease-modifying antirheumatic drugs (DMARDs). The use of immunobiological agents, such as anti-TNF, has been considered an excellent therapeutical option in more serious and refractory cases. However, previous studies demonstrated an increased risk of infections after the treatment is completed. Oral reservoirs of opportunist microorganisms can cause systemic infections, once that the oral cavity represents a door of entrance for pathogens, especially in immunocompromised patients. The aim of the present study was to evaluate the presence and antimicrobial susceptibility of Candida spp., Staphylococcus spp., Enterobacteriaceae and Pseudomonas spp. in the oral cavity of patients with AS treated with anti-TNF in comparison to healthy individuals. The following groups were included in the study: anti-TNF group (35 AS patients, aged between 17 and 63 years and under anti-TNF therapy); Conventional group (35 AS patients aged between 21 and 74 years under non-immunobiological conventional treatment); and respective Control groups (composed by healthy individuals paired in age, gender and oral conditions with AS groups). After clinical examination and anamnesis, oral rinses of each individual was collected. The rinses were plated in specific culture media for each microorganism. The number of colony-forming units per milliters (CFU/mL) was obtained. Isolates were identified by API system. Next, sensitivity tests to antifungicals agents were done for yeasts isolates and antibiotics for bacterial isolates. For Staphylococcus spp., the CFU counts for the anti-TNF group and Conventional group was statistically higher than the respective control groups... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-18Bitstream added on 2014-06-13T18:56:09Z : No. of bitstreams: 1 arcuri_sl_me_rcla.pdf: 711094 bytes, checksum: 605d316cc6f7e6937000144332997367 (MD5) / As formigas cortadeiras (Hymenoptera: Formicidae: tribo Attini) mantêm um mutualismo com o fungo Leucoagaricus gongylophorus, utilizado como alimento por esses insetos. Nos jardins de fungo, as formigas abrigam o fungo mutualista, pupas, larvas, além de uma microbiota composta por bactérias, leveduras e outros fungos. Uma grande quantidade de machos (bitus) e fêmeas aladas (içás) é produzida anualmente em ninhos adultos de formigas do gênero Atta. Esses indivíduos deixam os ninhos para acasalarem durante o voo nupcial (revoada), onde provavelmente ocorre a transferência de micro-organismos entre os indivíduos. Neste trabalho, foi avaliado a diversidade de leveduras no integumento de 200 bitus provenientes de dois ninhos de Atta sexdens rubropilosa, nas revoadas de 2010 e 2011. Foram isoladas também leveduras do solo dos túneis e do solo adjacente aos ninhos na tentativa de descobrir a origem das leveduras no integumento dos bitus. Buscando entender o papel das leveduras nos ninhos, foi estudada a capacidade de degradação de polímeros vegetais presentes no jardim de fungo e no consumo de açúcares gerados da quebra desses substratos. Um total de 242 estirpes distribuídas em 29 espécies foi recuperado do integumento dos insetos. Bitus do ninho #1 (Rio Claro, SP) apresentaram maior riqueza e diversidade de espécies de leveduras do que bitus do ninho #2 (Botucatu, SP). Embora a riqueza e diversidade tenham variado entre as diferentes amostragens, a estrutura da comunidade foi semelhante, a qual não foi correlacionada com o local de coleta ou o ano em que ocorreram as revoadas. O isolamento de leveduras do solo dos túneis e do solo próximo aos ninhos revelou poucas espécies em comum com aquelas encontradas no integumento dos bitus; o que sugere que a maioria das leveduras presentes nos bitus... / Leafcutter ants (Hymenoptera: Formicidae: tribe Attini) maintain an obligate mutualism with Leucoagaricus gongylophorus, a basidiomycetous fungus cultivated for food. Attine fungus gardens harbor the mutualistic fungus, pupae, larvae and several additional microorganisms such as bacteria, yeasts and filamentous fungi. Annually, several alates are produced in Atta nests and leave their nests for the matting flight, when the transmition of microorganisms probably occur between them. Here, we evaluated the yeast diversity found on the integument of 200 males of Atta sexdens rubropilosa sampled from two different nests in the mating flights of 2010 and 2011. Yeasts were also isolated from the soil of tunnels and soil adjacent to nests in order to study if yeasts found on males were originated from this environment. In an attempt to understand the role of yeasts in the fungus garden, we study the degratation of plants polymers and the assimilation of sugars generated after hydrolysis of these substrates. A total of 242 strains distributed in 29 species were recovered on the integument of these insects. Males from nest #1 (Rio Claro, SP) showed the highest yeast species richness and diversity in comparison to males from nest #2 (Botucatu, SP). Although species richness and diversity varied between samples, the community structure was similar between nests. Thus, the community structure was not correlated with collection sites or the year when the mating flights occurred. Yeast isolation from soil samples suggested that few species were shared between this type of sample and the yeasts found on the integument of males; this result shows that most yeast species on the integument of males were derived from the fungus garden. Cryptococcus haglerorum and Trichosporon chiarellii isolated from males of nest #1 (in 2011) indicate a putative... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-04-16Bitstream added on 2014-06-13T19:35:50Z : No. of bitstreams: 1 souza_me_me_botfm.pdf: 389941 bytes, checksum: 22df6f35de73f9795005298ac7945965 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A microbiota intestinal normal embora bastante estável pode se alterar em condições patológicas, modificações na composição da dieta, presença de distúrbios gastrointestinais e/ou ingestão de drogas. A associação de infecção com a utilização de medicamentos dificulta a interpretação da participação desses fatores na microbiota intestinal. O objetivo do presente estudo foi avaliar a microbiota intestinal de indivíduos que sofreram acidente ocupacional com materiais biológicos e receberam anti-retrovirais. Foram estudados 23 indivíduos adultos com idade entre 18-45 anos, sendo 13 doadores de sangue, grupo controle (GC) e 10 que sofreram acidente ocupacional com material biológico e realizaram profilaxia anti-retroviral. Foram avaliados a microbiota intestinal, medidas antropométricas, exames laboratoriais (hemograma, função renal, hepática, lipidograma, glicemia, proteínas totais e frações) pré, após a medicação e 30 dias após o término da medicação. A zidovudina mais a lamivudina foi utilizada em 70% dos indivíduos associado ao nelfinavir, 20% ao efavirenz e 10% ao ritonavir. Náuseas, vômitos e diarréia estiveram presentes em 80% no segundo momento do estudo. Sobrepeso em 70%, desnutrição e eutrofia em 10%, dos indivíduos sem alteração durante o estudo. As enzimas AST, ALT, Gama-GT e triglicérides, LOL-colesterol se elevaram no segundo momento e se normalizaram 30 dias após término da medicação. Foi observada redução significativa dos três gêneros de bactérias anaeróbias avaliadas Lacfobacillus , Bifidobacferium e Bacleróides em relação ao grupo controle nos três momentos. O uso de anti-retrovirais provocou impacto significativo na microbiota intestinal dos indivíduos normais em uso de anti-retrovirais, não sendo recuperada 30 dias após o término da medicação. / Pathological conditions, changes in diet composition, presence of gastrointestinal disorders and/or ingestion of drugs may alter the normal intestinal microbiota, regardless of its sufficient steadiness. The association of infection with the use of medicine makes the interpretation of the participation of these factors in intestinal microbiota difficult. The objective of the present study was to evaluate the intestinal microbiota from individuais injured by biological materiais in occupational accident, submitied to antiretroviral prophylaxis. 23 adult individuais with ages between 18-45 years old were studied, being 13 blood donors (control group - CG) and 10 individuais injured by biological materiais in occupational accident, submitled to antiretroviral prophylaxis. Intestinal microbiota, anthropometric measures and biochemical examinations (blood count, renal and hepatic functions, glucose and lipids blood levels, total proteins and fractions) were evaluated before, right after and 30 days after the end of medication. Zidovudine plus lamivudine were used in 70% of the individuais associated to nelfinavir, 20% to efavirenz and 10% to ritonavir. Nausea, vomiting and cliarrhea were present in 80% of the individuais at the second part of the study. Overweight was noticed in 70% and malnutrition anel eutrophia were noticed in 10% of the individuais without alterations during the study. AST, ALT, Gamma-GT and triglycerides and LDL-cholesterol enzymes were increased at the second part and normalized 30 days after the end of medication. Significant reduction of the three genera of anaerobic bacteria - Lactobacil/us, Bifidobacterium and Bacteroides - evaluated was observed in reiation to the controi group at the three moments. The use of antiretrovirals caused significant impact in the intestinal microbiota of the normal individuais, without recovery 30 days after the end of medication.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-06Bitstream added on 2014-06-13T18:50:06Z : No. of bitstreams: 1 mantovani_jd_me_rcla.pdf: 608682 bytes, checksum: a54bf7e58ae584d42606324be70cd136 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A associação entre formigas cortadeiras da tribo Attini e micro-organismos é reconhecidamente vasta. No presente trabalho verificou-se a presença de variados táxons de fungos relacionados às operárias da formiga cortadeira Atta laevigata. Operárias foram coletadas do interior do ninho e na trilha de forrageio,nas cidades de Rio Claro e Bauru, e parte dessas formigas passaram por um procedimento de limpeza para retirada de micro-organismos externos ao corpo e a outra parte não foi submetida à lavagem.Dos dois grupos o DNA foi extraído e amplificado para a região rRNA ITS de fungos. Essa região foi sequenciada e utilizada na identificação de unidades taxonômicas moleculares operacionais (MOTUs). Cinquenta táxons moleculares foram identificados, sendo vinte contaminantes eventuais, facilmente removíveis pela limpeza, e 30 simbiontes internos ou mais fortemente aderidos ao corpo das operárias. Dentre esses 30 táxons, quatro (Cladosporium cladosporioides, Epicocum sp., Hypocrea virens e Nigrospora sp.) foram identificados nas duas localidades geográficas e em grande quantidade, sendo candidatos a simbiontes mais estáveis e funcionais das formigas. Entre os demais táxons prospectados houve grande frequência de Trichosporon chiarelli e Coriolopsis rigida. Esse trabalho demonstroua ampla capacidade das formigas adquirirem e transportarem uma variada microbiota e consiste num passo inicial para elucidar o papel dos fungos associados ao corpo de A. laevigata / There is a deep and widely known association among Attini ants and microorganisms. In this paper it was investigated the presence of various taxa of fungi related to the Attini leaf-cutter antAtta laevigata. Leafcutter ants were collected from inside the nests and foraging trails in two different localities (Rio Claro and Bauru), and they were washed in order to remove external microorganisms from their bodies. Leafcutters which have not been washed also were used. Ant DNA was extracted and purifiedand the fungal rRNA ITS region was amplified. PCR products were cloned and sequenced in order to identify fungal species based on the operationalmolecular taxonomic unit (MOTU) criteria. As a result, 50 fungal species were recognized; 20 of them were identified as casual contaminants and as 30 were found as symbionts more tightly adhered to ant body. Four out of these 30 symbionts (Cladosporium cladosporioids, Epicocum sp., Hypocrea virens and Nigrospora sp.) were identified in the two geographic localities and in large quantity. Thus, these are candidates to a more stable and functional symbionts of the ants. There were large quantity of the Trichosporon chiarelli and Coriolopsis rigida among the prospected ants. This paper shows the enhanced capacity of the ants to acquiring and transporting a varied of fungi and it is in an initial point to elucidate the role of fungi associated to the body ofA. laevigata / FAPESP: 11/04053-6

Orientador : Prof. Dr. Newton Sergio de Carvalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Tocoginecologia. Defesa : Curitiba, 21/10/2016 / Inclui referências : f. 40-43 / Resumo: A alteração do microbioma vaginal está associado a risco maior de infecção pelo HIV, sendo que este, afeta principalmente mulheres jovens em sua fase reprodutiva e a coinfecção com outras doenças do trato genital é bastante comum pois, a infecção ocorre principalmente pelo contato heterossexual desprotegido. O curso da infecção do HIV pode ser alterado pelas coinfecções e estas também sofrem alterações podendo ser agravadas pelo HIV. Este estudo teve por objetivo Avaliar dados epidemiológicos, aspectos do meio ambiente vaginal, fatores de risco e prevalência de agentes das infecções cérvico-vaginais em mulheres infectadas pelo vírus da imunodeficiência humana comparativamente a um grupo controle e avaliar a prevalência de candida vaginal em função do estado imunológico no grupo com HIV. Estudo transversal, investigou 97 mulheres HIV positivo entre 18 a 49 anos não grávidas, atendidas no ambulatório de infecções ginecológicas do Hospital de Clinicas- UFPr e as pacientes internadas no Hospital Oswaldo Cruz, de Curitiba- Paraná, dentro do período de janeiro de 2015 a janeiro de 2016. Conclui-se que as mulheres HIV positivo são jovens na maioria, no auge de sua vida sexual e reprodutiva com menor número de anos de estudo. O tabagismo teve predomínio neste grupo, assim como a drogadição, sendo o crack a droga mais usada. Houve alteração do meio ambiente vaginal nas mulheres HIV positivas, demonstrado pelo pH que se apresentou igual ou maior a 5. Não houve aumento da prevalência de Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis e vaginose bacteriana. Foi identificado aumento da prevalência de candida vulvovaginal e entre aquelas com CD4<200/mm3 mostrou maior propensão em apresentar o fungo, onde também com a carga viral mais alta, se observou aumento significativo de candida. Os fungos mais prevalentes foram a C. albicans e C. parapsilosis. Palavras-chaves: microbioma vaginal. Infecções cérvico-vaginais. HIV. Estado Imunológico. / Abstract: Changes in the vaginal microbiome is associated with increased risk of HIV infection, and this affects mainly young women in their reproductive phase and co-infection with other diseases of the genital tract is quite common, as infection occurs primarily by unprotected heterosexual contact. The HIV infection course can be changed by coinfections as coinfections are modified and aggravated by HIV. This study aimed to evaluate epidemiological data, aspects of the environment vaginal environment, risk factors and prevalence of agents of cervicovaginal infections in women infected with the human immunodeficiency virus compared to a control group and assess the prevalence of vaginal candida yeast due to the immune status in the group with HIV. A cross sectional study investigated ninety-seven HIV-infected non-pregnant women between 18 and 49 years old assisted at the Hospital de Clinicas- UFPr's gynecologic infections ambulatory and hospitalized patients at the Hospital Oswaldo Cruz, Curitiba, Paraná, in the period between January 2015 and January 2016. In order to compare the clinical and epidemiological data, vaginal environment and prevalence of cervicalvaginal infections; a control group was enrolled, consisted by women between ages 18-49 originating from general gynecology ambulatories who were examined to conduct Pap-smears procedures, which were HIV-uninfected and participating in another study where the same data was collected. It is concluded that HIV-positive women are mostly young, at the peak of their sexual and reproductive life with fewer years of study. It was concluded that smokers were predominant within these HIVinfected women, as well as drug addiction, in which crack being the most used drug. There were changes in the vaginal environment of HIV-infected women, demonstrated by the pH that presented equal to or greater than 5. There was no increased prevalence of Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, trichomonas and bacterial vaginosis in HIV-infected women. It was identified increased prevalence of vulvovaginal candidiasis (VVC) and among those with CD4 &lt;200 / mm3 was shown greater propensity of presenting the fungus. Also with a higher viral load, it was observed a significant increase of VVC. The prevailing fungi found were C. albicans and C. parapsilosis. Key words: Vaginal environment. Cervicovaginal infections. HIV. Immunological Status.

Orientador: Áulus Cavalieri Carciofi / Banca: Áureo Evangelista Santana / Banca: Ricardo Souza Vasconcellos / Banca: Lilian Rose Marques de Sá / Banca: Márcio Antonio Brunetto / Resumo: As possíveis diferenças que acometem cães de diferentes idades ainda são pouco estudadas e descritas para esta espécie. O presente estudo avaliou e comparou a composição da microbiota nas fezes e seus produtos de fermentação, aspectos histológicos da mucosa intestinal e a imunidade de cães filhotes, adultos e velhos. Para tal, 30 cães beagle foram divididos igualmente em três grupos: o grupo filhotes (GF), composto por filhotes do desmame aos 10 meses de idade; o grupo adultos (GA), composto por cães adultos entre cinco e seis anos e o grupo velhos (GV), composto por cães velhos entre 10 e 13 anos. Os animais receberam a mesma dieta e nenhum outro tipo de intervenção por 30 dias e após este período amostras de fezes frescas foram colhidas para a mensuração de: pH, determinação da concentração de lactato, ácidos graxos de cadeia curta e ramificada, amônia, indol, fenol, aminas, imunoglobulina A e composição da microbiota. Também foi adquirida amostra de sangue periférico para quantificação das populações linfocitárias CD4+CD5+, CD5+, CD8+CD5+, e CD21+ por citometria de fluxo, sendo esta analisada em cinco idades (45, 66, 87, 105 e 300 dias) do GF e a média destas avaliações comparada com GA e GV. Após esta análise, foi realizado teste de hipersensibilidade cutânea tardia e ao final destes, os animais foram anestesiados e submetidos a procedimento endoscópico para coleta de fragmentos do estômago e intestinos delgado e grosso para análise histológica dos mesmos. Considerou-se como significativos valores de P≤0,05 e como tendência valores de P<0,1. Observou-se que o GF apresentou maior número de Bifidobacterium spp. e Cluster IV. GV apresentou indicativo de menor atividade sacarolítica bacteriana observada pela menor concentração de acetato, propionato, butirato e ácidos graxos voláteis totais o que... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Possible differences that may occur in dogs of different ages have been little studied and described in this specie. The aim of this study was to evaluate and compare the composition of microbiota and some fermentation products in the feces, histological aspects of intestinal mucosa and immunity of puppies, adults and senior dogs. To perform this, 30 beagle dogs were divided into three groups: Puppy group (GF), composed of puppies from weaning to 10 months old, Adult group (GA), composed of adult dogs between five and six years and Old group (GV), composed of old dogs between 10 and 13 years. Animals received the same diet and no other intervention for 30 days, and after this period, fresh fecal samples were collected for measurement of pH, determining the concentration of lactate, short and branched chain fatty acids, ammonia, indol, phenols, amines, immunoglobulin A and composition of the microbiota. It was also acquired a peripheral blood sample for quantification of lymphocyte populations CD4+CD5+, CD5+, CD8+CD5+, and CD21+ by flow cytometry, which was analyzed in five ages of GF (45, 66, 87, 105 and 300 days) and the average of these evaluations compared with GA and GV. After this analysis was performed the delayed type hypersensitivity test and by the end of this, animals were anesthetized and submitted to an endoscopic procedure for collecting fragments of stomach and small and large intestines for histological analysis. P values ≤0.05 was considered significant and P values <0.1 as a trend. GF showed greater number of Bifidobacterium spp. and Cluster IV. GV presented an indication of reduced bacterial saccharolytic activity observed by the lower concentration of acetate, propionate, butyrate, and total volatile fatty acids which resulted in higher pH in the feces of this group. GF showed... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor