Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Biologicas / Made available in DSpace on 2012-10-17T03:48:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T00:13:50Z : No. of bitstreams: 1 110608.pdf: 8018350 bytes, checksum: 455204b214a169cf92e27b8373773d7f (MD5) / No presente trabalho estudaram-se as condições para o estabelecimento, multiplicação e maturação de linhagens celulares embriogenéticas in vitro, a conversão dos ES e a produção de sementes sintéticas, a partir de embriões zigóticos (EZ) de Feijoa sellowiana Berg. Testaram-se também as formulações salinas LPm, MS e WPM, fontes e níveis de aminoácidos e pulsos de 2,4-D. Avaliações histoquímicas e histológicas foram feitas para caracterizar os processos morfogenéticos in vitro. A maior percentagem de indução e o maior número de ES ocorreram nos acessos 101 e 50-4. A formulação salina LPm, adicionada de 2,4-D e Gln, resultou em valores elevados de indução embriogenética. A adição de Asn, Gln ou Arg ao meio LPm resultou em valores elevados de indução e produção de ES. Pulsos de duas semanas com 2,4-D proporcionaram valores comparativos de indução e produção de ES, àqueles obtidos com pulsos de 4 e 8 semanas. Sementes em maturação fisiológica e armazenadas a 4° C por 12 meses, mantiveram alto potencial de indução e produção de ES. Linhagens celulares embriogenéticas foram estabelecidas, multiplicadas e mantidas com alto potencial embriogenético. A dinâmica de crescimento das suspensões celulares revelou um incremento de 21,7 vezes, após 50 dias em meio de cultura LPm contendo 2,4-D e 2iP e quando repicadas para o meio basal geleificado foram induzidas à maturação. A conversão de ES em plântulas foram obtidas em meio basal LPm contendo BAP e/ou GA3. A conversão das sementes sintéticas em plantulas ocorreu em tratamentos contendo KNO3. Estudos histoquímicos e histológicos demonstraram a evolução dos processos morfogênicos in vitro.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais. / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:34:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2015-03-18T19:59:10Z : No. of bitstreams: 1 222389.pdf: 14571128 bytes, checksum: 7a6673422409697a3a8993d87a614d27 (MD5) / A embriogênese somática é uma técnica biotecnológica amplamente utilizada para propagação massal e conservação de diversas espécies de coníferas como é o caso da Araucaria angustifolia. Além disso, esta técnica se configura como um modelo referência para estudos da biologia do desenvolvimento in vitro. A principal limitação da embriogênese somática em coníferas encontra-se associada a dificuldades durante a fase de maturação. No presente trabalho foram estudados aspectos da regulação fisiológica e bioquímica da embriogênese zigótica e somática de A. angustifolia, visando o estabelecimento de um protocolo in vitro para esta espécie. Foram estabelecidas as condições in vitro para a indução, multiplicação e obtenção de embriões somáticos cotiledonares, assim como determinados a variação de componentes do metabolismo endógeno destas culturas em diferentes fases da embriogênese zigótica e somática. Embriões zigóticos pré-cotiledonares inoculados em meio de cultura BM suplementados com 2,4- D (5 µM), BAP e Kin (2 µM cada), e maltose ou sacarose (3%) resultaram em uma taxa de indução de 66,7%. A indução, multiplicação e a morfologia das culturas embriogênicas foram significativamente influenciadas pela fonte de carbono. As culturas embriogênicas suplementadas com maltose apresentaram morfologia bipolar e também os maiores conteúdos de proteínas amido e ABA. O conteúdo de AIA durante a multiplicação foi incrementado pela presença de 2,4-D e sacarose no meio de cultura. Culturas embriogênicas mantidas em suspensões celulares em que o meio de cultura foi suplementado com sacarose e 2,4-D (5 µM), BAP e Kin (2 µM cada) apresentaram um volume celular sedimentado de 50 mL após 42 dias de cultivo. A multiplicação das culturas embriogênicas em meio de cultura líquido foi observada tanto para suplementação com maltose ou sacarose. O conteúdo endógeno de poliaminas durante a multiplicação em meio líquido ou sólido foi correlacionado à multiplicação das culturas embriogênicas e os maiores valores foram observados em meio de cultura suplementados com sacarose e 2,4- D (5 µM), BAP e Kin (2 µM cada). Embriões somáticos globulares e cotiledonares foram obtidos em meio de cultura BM suplementado com PEG (7%), maltose (9%) e ABA (150 µM) e isto foi associado a mudanças endógenas no conteúdo de AIA, ABA e proteínas. Contudo estes valores foram inferiores aqueles observados no embrião zigótico, o qual apresentou um acúmulo de proteínas e amido durante os estágios embriogênicos tardios. A suplementação exógena de poliaminas durante a multiplicação influenciou o metabolismo endógeno e a multiplicação das culturas embriogênicas. A Put foi relacionada à multiplicação das culturas embriogênicas, a Spd e a Spm promoveram o acúmulo de matéria seca e de substâncias de reserva. Foi possível identificar como alguns componentes do meio de cultura afetaram a morfogênese e o metabolismo endógeno das culturas embriogênicas de A. angustifolia. Os resultados aqui obtidos dão suporte a alternativas que permitirão o estabelecimento de um protocolo para embriogênese somática nesta espécie.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2013-07-15T23:00:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 212760.pdf: 3793665 bytes, checksum: 1d3548c82c1c667fb06eb82add689737 (MD5) / O tratamento in vivo em camundongos com ligantes do receptor periférico benzodiazepínico (PBR) exerceram efeito inibitório na resposta inflamatória em dois modelos de inflamação aguda. No primeiro modelo o efeito antiinflamatório em de pré-tratamento com os ligantes PBR, PK11195 1-(2-chlorophenyl)-N-methyl-N(1-methylpropyl)-3-isoquinoline carboxamide e Ro5-4864 7-chloro-5-(4-Chlorophenyl)-1,3-dihydro-1-methyl-2-H-1,4-benzodiazepin-2, mostraram que a formação do edema em resposta a carragenina (300 mg/pata) foi inibida por PK11195 e Ro5-4864, em diferentes intervalos de tempo. O estudo do tempo resposta mostrou que a melhor resposta com ambos ligantes foi ótima em animais injetados no tempo de 24h, por esta razão este tempo de pré-tratamento foi escolhido para estudo da dose resposta. A formação do edema de pata em resposta a carragenina (300 mg/pata) foi reduzida por PK11195 e Ro5-4864 em diferentes doses (0,00001-10mg/kg, i.p.) produzindo uma inibição dose dependente na formação do edema de pata em camundongos induzida pela carragenina. PK11195 e Ro5-4864 (0.1 mg/kg, i.p.) quando administrado 24 h antes da indução do edema, inibiram de forma significativa o edema de pata de camundongos induzido por vários mediadores inflamatórios. No segundo modelo o pré-tratamento com os ligantes (0.1 mg/kg, i.p.), 24 h antes da indução da pleurisia induzida pela carragenina, mostrou uma significante inibição no recrutamento das células totais e diferenciais, principalmente a custas de neutrófilos, inibindo também a liberação de Interleucina-13 (IL-13) e Interleucina-6 (IL-6) no líquido pleural

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciência Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais / Made available in DSpace on 2012-10-19T14:33:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O presente trabalho objetivou-se a elucidação dos aspectos relacionados com a morfogênese in vitro da F. sellowiana dos acessos 291x458 e 101, com ênfase ao estabelecimento de um sistema modelo para a embriogênese somática de espécies arbóreas e para a aplicação em programas de domesticação e melhoramento genético nesta espécie. Estudaram-se os efeitos do Glu e sua amina, assim como diferentes níveis de mioinositol na indução da embriogênese somática. Na otimização da conversão dos embriões somáticos testou-se os efeitos dos fitorreguladores, osmorreguladores e do carvão ativado. Na utilização da técnica de semente sintética testou-se a composição de um endosperma artificial, visando melhorar a conversão dos embriões somáticos em plântulas completas. Para determinar a dinâmica de crescimento das culturas embriogenéticas foram utilizados embriões somáticos no estagio torpedo provenientes de duas fonte de carbono (maltose e sacarose). Análises de proteínas, açúcares solúveis totais e amido foram efetuadas nas culturas embriogenéticas e nos diferentes estágios de desenvolvimento, assim como se estudaram aspectos histológicos e estruturais mediante a utilização da historesina. O processo de indução e expressão da embriogênese somática de alta freqüência na F. sellowiana foi dependente da fonte de nitrogênio. Por outro lado, os fitorreguladores BAP e AG3 promoveram a conversão a plântulas, e conjuntamente com os osmorreguladores PEG e manitol, aumentaram a taxa de conversão dos embriões somáticos à plântula. A utilização da técnica de reconstituição de endosperma artificial melhorou a conversão a plântulas. O BAP e o sorbitol, adicionados ao endosperma artificial, melhoraram a taxa de conversão. O modelo indireto na embriogênese somática em F. sellowiana, formou embriões somáticos a partir de uma célula embriogênica originada a partir de calos ou nódulos meristemáticos. Estas células embriogênicas revelaram característica especificas, especialmente no que tange às substâncias de reserva, como proteínas, amido e substâncias polifenóis. Em alguns casos, grupos de células foram capazes de originar uma protoderme circundante, onde cada célula revelou competência embriogenética. A maltose, como fonte de carbono na indução de embriões somáticos, promoveu o crescimento de culturas embriogênicas secundárias. Os níveis de proteínas totais na indução diminuíram ao longo do período em cultura, enquanto que os níveis de açúcares solúveis totais e de amido aumentaram durante o período em cultivo, afetando o desenvolvimento dos embriões somáticos. Por outro lado, os níveis de proteínas totais aumentaram de acordo com a evolução de desenvolvimento dos embriões somáticos. Já, os níveis de açúcares solúveis totais e amido foram altos nos estádios coração e cotiledonar e baixos nos estádios torpedo e pré-cotiledonar.

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-13. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:25:41Z : No. of bitstreams: 1 000843384.pdf: 1075142 bytes, checksum: 3864048a87b4192c9d6e8898ff5af4cc (MD5) / A baixada maranhense é um importante ecossistema da Amazônia brasileira, e representa uma significante fronteira agropecuária, com produção tipicamente a pasto, caracteriza-se por elevada riqueza de espécies com potencial forrageiro, com destaque para o capim-açú (Paspalum plicatulum Mich). Entretanto, devido à falta de informação para o adequado manejo nutricional do capim-açú e a sua morfogênese o mesmo tem sido substituído por pastagens de espécies exóticas, como é o caso do capim-canarana (Echinocloa pyramidalis). Objetivou-se avaliar o desempenho do capim-açu e do capim canarana através de suas características agronômicas e morfogênicas submetidos a adubação nitrogenada (N) e potássica (K). As características agronômicas (área foliar, material morto, perfilhos vivos, perfilhos mortos, produção de colmo, produção de folhas, produção de forragem) e morfogênicas e estruturais (taxa de aparecimento de folhas (TApF), taxa de alogamento de colmo (TALC), taxa de alogamento de folha (TALF), filocrono (FILO), tempo de senescência da folha (TSF), comprimento final da folha (CFF)). O experimento foi conduzido em casa de vegetação, sendo que o solo e as mudas foram coletados na Região da Baixada Maranhense, sendo o solo caracterizado como Plintossolo Argilúvico. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com arranjo fatorial 2 x 5 x 2 (2 espécies, 5 doses de N e 2 doses de K) perfazendo 20 tratamentos e quatro repetições, totalizando 80 unidades experimentais. Os tratamentos corresponderam a doses de nitrogênio: 0, 50, 100, 150 e 200 mg/dm3 e dois níveis de adubação potássica: 10 e 30 mg/dm3. A produção de matéria seca do capim-açú apresenta menor resposta à adubação nitrogenada que o capim-canarana. O capim-açu apresenta maior produção de folhas que o capim-canarana, nas menores doses de N. O perfilhamento respondeu positivamente aos tratamentos com nitrogênio, sendo... / The Maranhão downloaded is an important ecosystem of the Brazilian Amazon, and represents a significant agricultural frontier, with production typically the pasture, is characterized by high richness of species with forage potential, especially the grass açu (Paspalum plicatulum Mich). However, due to lack of information for proper nutritional management of açú grass and its morphogenesis it has been replaced by pastures of exotic species, such as the grass canarana (Echinochloa pyramidalis). This study aimed to evaluate the performance of grass açu and canarana grass through their agronomic characteristics and morphogenetic subjected to nitrogen (N) and potassium (K) fertilization. The agronomic characteristics (leaf area, dead material, live tillers, dead tillers, thatched production, leaf production, fodder production) and morphogenetic and structural leaf appearance rate (LAR), thatched stretching rate (TALC) rate sheet stretching (TALF), phyllochron (FILO), leaf senescence time (TSF), final leaf length (LOA). The experiment was conducted in a greenhouse, with soil and seedlings were collected in the region of Maranhão Lowlands, and the soil characterized as Plinthosol Argilúvico. The experimental design was completely randomized with factorial arrangement 2 x 5 x 2 (2 species, five doses of N and K two doses) totaling 20 treatments and four repetitions, totaling 80 experimental units. The treatments were the nitrogen rates: 0, 50, 100, 150 and 200 mg/dm3 and two levels of potassium fertilization: 10 and 30 mg/dm3. The dry matter production of grass Sugar has a lower response to nitrogen fertilization that the grass canarana. The grass açú is more production leaves the grass canarana, in smaller doses of N. The tillering responded positively to treatment with nitrogen, and the grass caiman species with higher production of tillers. The morphogenesis TApF, TALC are not influenced by N rates or by combinations of doses ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:29:32Z : No. of bitstreams: 1 brandt_jz_me_botib.pdf: 1613115 bytes, checksum: 288debdd54eae1f42b00457d3bf95f1e (MD5) / Sabe-se que fatores ambientais e de estilo de vida, tais como a dieta, são capazes de induzir significativas mudanças na concentração e no metabolismo dos hormônios esteroides, o que pode contribuir para o desenvolvimento de doenças prostáticas. O Bisfenol A (BPA) é um componente dos produtos a base de resinas epóxi e plásticos policarbonato e tem sido investigado por sua provável atividade carcinogênica para a mama e próstata. O objetivo geral desse trabalho foi investigar se a exposição gestacional ao BPA suplementado ou não com Indol-3-Carbinol (I3C), um composto natural com propriedades quimioprotetoras, interfere no padrão de desenvolvimento da próstata, bem como na suscetibilidade ao desenvolvimento de lesões prostáticas. Fêmeas prenhes da linhagem Sprague-Dawley foram divididas em 5 grupos experimentais: G1: Controle (ração basal); G2: BPA25 (25μg/Kg); G3: BPA25 (25μg/Kg) + I3C; G4: BPA250 (250μg/Kg); G5: BPA250 (250μg/Kg) + I3C. Machos selecionados de diferentes ninhadas (2/ninhada) foram eutanasiados no DPN21 para avaliação imediata sobre a morfogênese prostática e no DPN180 para avaliação dos efeitos tardios.No DPN21 e DPN180 os animais foram eutanasiados por decapitação, o sangue foi coletado para análises hormonais e os hemilobos ventrais direitos separados para rotina histológica, análise estereológica e imuno-histoquímica, e os esquerdos congelados em nitrogênio líquido para o Western Blot. O lobo dorsolateral foi coletado no DPN180 para avaliação histopatológica. O peso do lobo ventral da próstata reduziu no grupo G5 em relação a G4, enquanto no DPN180 não houve diferença nesse parâmetro. Com relação à estereologia no DPN21 evidenciou-se aumento do compartimento epitelial e diminuição do compartimento luminal nos grupos G3 e G5. Quanto ao índice de proliferação celular no DPN21 observou-se aumento nos grupos... / Environmental factors and life style, such as diet, are able to induce significant changes in the concentration and metabolism of steroid hormones and can contribute with prostatic diseases development. Bisphenol A (BPA) is an organic compound used to make epoxy resins and polycarbonate plastics and has been investigated for its probable carcinogenic activity for breast and prostate. The aim of this study was to investigate if gestational exposure to BPA, supplemented or not with Indole-3-Carbinol (I3C), a natural compound with chemoprotective properties, can modify the prostate development pattern as well as the susceptibility to develop lesions in prostate. Sprague-Dawley pregnant females were divided into five experimental groups: G1: Control (basal chow); G2: BPA25 (25μg/Kg) G3: BPA25 (25μg/Kg) + I3C; G4: BPA250 (250μg/Kg); G5: BPA250 (250μg/Kg) + I3C. Selected males from different litters (2/litter) were euthanized in PND21, to study the early effects on prostate morphogenesis and in PND180 to evaluate the late effects. At PND21 and PND180 the animals were euthanized by decapitation, blood was collected to hormone assays and right ventral lobule was used for histopathological evaluation, stereological analysis, immunohistochemistry and TUNEL assay, and the left ventral lobule was frozen and stored in the -80oC freezer for Western Blot analysis. Dorsolateral lobe was collected for histopathologic evaluation at PND180 animals. Prostatic ventral lobe weight at PND21 decreased in the G5 group compared to G4, while at PND180 there was no significant difference in this parameter. At PND21 there was increase in epithelial compartment and decrease in the luminal compartment in G3 and G5 compared to G1. Epithelial cells proliferation index at PND21 was significant higher in G2 and G3 than G1, and apoptosis index in I3C groups (G3 e G5) was higher in relation... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-24. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:04Z : No. of bitstreams: 1 000868481_20170724.pdf: 537727 bytes, checksum: 3587034ef434c4dc766480a184b87de0 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-07-24T11:34:11Z: 000868481_20170724.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-07-24T11:35:15Z : No. of bitstreams: 1 000868481.pdf: 1768402 bytes, checksum: f07378e2171ada5ea90dafd13bd75e47 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os ftalatos são ésteres utilizados na fabricação de plásticos transparentes empregados na indústria e são amplamente encontrados como substâncias contaminantes no meio ambiente, sendo o tipo mais encontrado, o Di-n-Butil-Ftalato (DBP). Diversos estudos têm mostrado efeitos antiandrogênicos do DBP em ratos expostos durante a vida fetal, refletindo em alterações morfofuncionais sobre órgãos reprodutivos. A morfogênese da próstata é um processo dependente de andrógeno resultante das interações entre mesênquima e epitélio, modulada por fatores de crescimento e algumas moléculas de sinalização. Dentre elas, estão as BMPs que controlam o desenvolvimento de vários tecidos e sofrem influência hormonal. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da exposição gestacional e lactacional ao DBP em duas doses (100 e 500mg/kg), sobre a morfogênese inicial e intermediária da próstata de ratos. Assim, fêmeas prenhes da linhagem Wistar foram divididas em 3 grupos experimentais (n=10): CN (controle negativo); DBP100 (DBP; 100 mg/kg) e DBP500 (DBP; 500 mg/kg). Os animais tratados foram expostos ao DBP do 15º dia de gestação (DG15) até o 21º dia pósnatal (DPN21) por gavagem, enquanto os animais CN receberam óleo de milho (veículo). Os animais da geração F1 foram eutanasiados por decapitação nos DPN1 e DPN21, e procedeuse a coleta do sangue para a análise sérica de testosterona. A parte pélvica da uretra (DPN1) e a próstata ventral (DPN21) foram submetidas às análises histológica e imuno-histoquímica para a detecção de AR (receptor de andrógeno), antígeno P63 e α-actina; enquanto que os níveis das proteínas: AR, BMP-4 e PCNA foram avaliados por Western Blot. No DPN1, houve redução na distância anogenital e nos níveis de testosterona nos animais tratados com DPB, e a reconstrução 3D mostrou redução nos números e comprimentos dos brotos no grupo DBP500. A imunomarcação para AR e α-actina foi... / Phthalate esters such as Di-n-butyl phthalate (DBP) are used in the manufacture of transparent plastics and they are widely found as contaminants in the environment. Previous studies have shown anti-androgens effects of DBP in rats exposed during fetal life, which presented morphological changes on the reproductive organs. Morphogenesis of the prostate is an androgen-dependent process that depends on interactions between mesenchymal and epithelial cells and it is modulated by growth factors and signaling molecules. Among these molecules, BMPs are important morphogenetic proteins, which are influenced by hormonal levels. These proteins have been implicated in the regulation of prostatic branching morphogenesis. The aim of this study was to evaluate the effects of gestational and lactational exposure to DBP in two doses (100 and 500 mg/kg b.w.) on the initial and intermediate morphogenesis in prostate of rats. Thus, pregnant female rats were divided into 3 groups (n = 10): CN (negative control); DBP100 (BPD; 100 mg/kg) and DBP500 (BPD; 500 mg/kg). Treated animals were exposed from 15th gestation day (GD15) to 21st postnatal day (PND21) by gavage, while the CN animals received corn oil (vehicle). F1 male rats were sacrificed by decapitation in PND1 and PND21 to proceed the blood collect to analysis the testosterone serum levels. The prostatic urethra (DPN1) and the ventral prostate (DPN21) were subjected to histological and immunohistochemical detection for AR (androgen receptor), p63 antigen and α-actin; whereas protein levels: AR, BMP-4 and PCNA were assessed by Western Blot assay. In DPN1, anogenital distance and testosterone levels decreased in animals treated with DBP, and on three-dimensional reconstruction of the prostate, the number of prostatic buds was lower in DBP500 than CN. Immunostaining for AR and α-actin were reduced in the mesenchyme in differentiation, and protein expression of AR and BMP-4 were lower, especially in...

Orientador: Maria de Fatima Domingos Aleixo Pereira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T07:11:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_JulietaAndreaSilvade_D.pdf: 6676452 bytes, checksum: 31a4706b9dac251302340bac67cc7a6f (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Plantas de Kohleria sp pertencem à família Gesneriaceae e estão distribuídas desde o sul do México ao Peru e leste do Suriname. O seu centro de diversidade são as montanhas d, Colômbia. Algumas espécies de Kohleria possuem órgão subterrâneo, que está associado à sua sobrevivência em estação de seca. O objetivo deste estudo foi o de caracterizar o órgão subterrâneo de Kohleria sp em relação à sua anatomia e ao seu processo de brotação. Tentou-se ainda identificar alguns aspectos do controle ambiental e hormonal da brotação destes órgõas subterrâneos. O órgão subterrâneo de Kohleria sp possui natureza caulinar, cujos tecidos do caule apresentam esclerênquima, que lhe conferem rigidez. O caule está envolto por folhas modificadas, que protegem suas gemas. As folhas modificadas possuem epiderme com abundância de tricomas, são vascularizadas e ainda apresentam grande quantidade de reserva, principalmente de amido. O órgão subterrâneo também possui substâncias fenólicas que podem estar associadas à sua defesa contra microorganismos da terra. A formação do rizoma nas plantas de Kohleria sp foi indiferente ao fotoperíodo. No entanto, as plantas que ficaram em condição de dia curto tiveram promoção do crescimento da altura e área foliar em relação àquelas que ficaram em dia longo. Devido à abundância de gemas, o rizoma de Kohleria sp possui alto grau de regeneração o que é realizado através da sua brotação. Secções do rizoma brotaram tanto na luz quanto no escuro. Por outro lado, o fator temperatura teve influência destacada na brotação das secções. Quando as secções estavam nas temperaturas mais altas o processo foi mais rápido e aquelas nas mais baixas brotaram lentamente. Secções do rizoma foram capazes de brotar em substrato com disponibilidade reduzida de água ou em sua ausência e ainda desenvolveram plenamente suas brotações nestas condições. Entretanto, quando estavam em excesso de água as secções apodreceram, mostrando-se intolerantes ao teor alto de umidade. Nas secções do rizoma, utilizadas neste estudo, em geral, apenas uma gema brotou as demais permaneciam dormentes. Esta resposta mostrou que o rizoma de Kohleria sp possui forte relação de dominância apical. No entanto, quando foram tratadas com 6-benziladenina ou etrel tiveram número maior de brotação por secção. As gemas das secções do rizoma de Kohleria sp apresentaram alto grau de plasticidade, já que poderiam se desenvolver em brotação do padrão rizoma ou o tipo parte aérea. O desenvolvimento de um dos tipos de brotação foi influenciada pelos fatores do ambiente e substâncias reguladoras de crescimento. Brotações do padrão parte aérea se desenvolveram em secções que ficaram em substrato com disponibilidade alta de água e em temperatura de 30°C. As brotações do padrão rizoma ocorreram nas secções que ficaram com disponibilidade reduzida de água ou em sua ausência, tanto em 2°C quanto em 3°C. Brotações do padrão rizoma também se desenvolveram em secções que ficaram em substratos com soluções de PEG, que geraram os potenciais de -3, -6 e -12 MPa. Isto demostrou que a ocorrência de brotações do padrão rizoma nas secções do rizoma, em substrato com disponibilidade reduzida de água, poderia estar associada à condição de potencial hídrico baixo. As secções do rizoma de Kohleria sp foram bastante resistentes à redução de água, mostrando que possuem mecanismos internos que facilitam a sua sobrevivência nestas condições. Verificou-se que etileno estava envolvido com o controle do desenvolvimento de brotações do padrão rizoma quando as secções do rizoma ficaram com disponibilidade reduzida de água no substrato. Isto foi obtido indiretamente através do tratamento das secções com ETREL, AgNO3 e A VG, e diretamente pela dosagem de etileno liberado por estas quando estavam em disponibilidade reduzida de água no substrato. Foi verificado também o envolvimento de ABA com o controle do desenvolvimento de brotações do padrão rizoma. Esta evidência foi obtida indiretamente pelo tratamento das secções com ABA e diretamente pela identificação de atividade inibidora através do bioensaio da germinação de sementes de alface. E finalmente pela análise de trações ácidas de extratos das secções do rizoma por espectrometria de massas. Dos resultados obtidos, deste estudo, de que as brotações do padrão rizoma se desenvolveram em secções do rizoma com disponibilidade reduzida de água no substrato, e que etileno e ABA participam do controle do desenvolvimento deste tipo de brotação / Abstract: Plants of Kohleria sp belong to the Gesneriaceae family and distributed trom southem Mexico to Peru and east of Suriname. The center of diversity is in the Colombian highlands. Some species of Kohleria produce subterranean organs which allow the plants to survive under unfavorable dry seasons. The objective of this study was to characterize the subterranean organ of Kohleria sp about its anatomy and sprouting. The identification of some aspects of hormonal and environrnental control of sprouting of these subterranean organs was studied. The anatomy of the subterranean organ of Kohleria sp evidence that it is a typical stem, whose tissue shows sclerenchyma. The stem is enclosed by modified leaves which protect their buds. The modified leaves have trichomes, are vascularized and present great amount of starch. The phenolic substances were present in the subterranean organ and they can have a role of protection against soil microorganisms. Rhizome initiation in the plants of Kohleria sp was not dependent of photoperiod. Nevertheless, under short days stem elongation and leaf area were promoted. The rhizome of Kohleria sp shows a very high degree of regeneration because it presents abundance of buds. This regeneration is expressed by the sprouting of buds. The sprouting of rhizome sections was not atfected by the presence of light, but it was atfected by temperature. High temperatures promoted the sprouting of rhizome sections. In a substract with reduction of water content the rhizome sections sprouted resulting in the development of a new organismo However, in a substract with excess of water the rhizome sections did not survive, showing to be intolerant to highly moistened substracts. Generally, only a bud sprouted by each rhizome section. The others remainned dormant. This shows that the rhizome of Kohleria sp presents a strong apical dominance. Nevertheless, when 6-benzyladenin or ETHREL were applied to the rhizome sections most of the buds sprouted in the same section. The buds of rhizome sections of Kohleria sp presented high degree of plasticity, they could develop a rhizome pattem or an aerial part parttem. The environrnental factors and rowth regulators can influence the occurrence of one of these pattems. In the presence of substract with high water leveI and temperature of 30° C the rhizome sections developed an aerial part pattem. But in the presence of reduced water leveI, under the temperatures of 20 or 3 aoe the rhizome sections developed a rhizome pattern. The bud of the rhizome sections developed a rhizome pattern when they were in the presence ofPEG soIutions (-3, -6, -12MPa). This suggests that the occurrence of the rhizome pattern when the substract was with reduced water leveI could be related to the Iow water potentiaI. The rhizome sections presented very high resistance to drought. Because of this characteristic it is possible to presume the existence of internal mechanisms which allow its survival under very dry conditions. Ethylene was verified to be envolved in the controI of the development of the rhizome pattern when the rhizome sections were in substract with reduced water leveI. This was indirectly obtained by ETHREL, AgNO3 and A VG treatments and directly by the determination of ethylene concentration in the rhizome sections when they were in substract with reduced water level. ABA was also verified to be envolved with the control of development of the rhizome pattern. This evidence was obtained indirectly by the ABA application to the rhizome sections. Also, ABA was detected by the lettuce seeds bioassay in extracts of rhizome sections hept under reduced water conditions. ABA was aIso detected in those extracts by combined gas chromatography-mass spectrometry. The obtained results present evidence that the occurrence of the rhizome pattern, which is developed when the substract presents low water content, is controled by ethylene and ABA / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Hernandes Faustino de Carvalho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-15T10:03:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cardoso_AlexandreBruni_D.pdf: 5087353 bytes, checksum: c88d322680c216b0a0f0c99aef894042 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Importante glândula acessória do trato reprodutor de mamíferos, a próstata é um órgão alvo de várias doenças benignas e malignas, que ocorrem principalmente com o envelhecimento. Tanto o desenvolvimento prostático pós-natal como a regressão da glândula após a ablação hormonal são caracterizados por intensa modificação no comportamento das células e remodelação da matriz extracelular (MEC). As metaloproteinases de matriz (MMP) constituem uma família de enzimas que degradam principalmente componentes de MEC. Portanto, pareceu-nos plausível que as MMPs tenham papel crucial na remodelação tecidual que ocorre em decorrência dos eventos morfogenéticos da próstata ventral (PV) e na progressiva regressão prostática pós-castração. Assim, o objetivo desse trabalho foi investigar o papel da MMP-2 no desenvolvimento prostático pós-natal em roedores e das MMP-2, -7 e - 9 na regressão da PV de ratos pós-castração. Para isso, foram empregadas técnicas moleculares, bioquímicas e análises morfológicas. A aplicação do siRNA específico para MMP-2 comprometeu o crescimento, a ramificação, a formação de lúmen e a proliferação de células epiteliais da PV de ratos in vitro, além de provocar um acúmulo de fibras colagênicas no compartimento estromal. A PV do camundongo MMP-2-/- adultos apresentou peso relativo reduzido e um menor volume epitelial, que resultaram de menor proliferação epitelial, menor ramificação ductal e maior estabilização da matriz colagênica durante a primeira semana de desenvolvimento pós-natal. Na regressão da próstata ventral de ratos após a castração encontraram-se múltiplas ondas de morte celular e uma relação direta entre a expressão e atividade das MMP-2, -7 e -9 e o pico de apoptose que ocorre 11 dias após a castração. Conclui-se através dos resultados apresentados neste trabalho, que tanto o desenvolvimento prostático pós-natal, como a regressão prostática pós-castração são dependentes da expressão e atividade das MMPs. / Abstract: The prostate is an important gland of the reproductive tract of mammals, which is a target of several benign and malign diseases affecting the elder. Both postnatal prostate development and prostate regression after androgenic ablation are characterized by intense modification in cell behavior and remodeling of extracellular matrix (ECM). MMPs constitute a family of endopeptidases which are able to cleave preferentially ECM components. Thus, it seems reasonable that these enzymes play a crucial role in tissue remodeling that happens during the ventral prostate (VP) morphogenesis and in the prostate regression after castration. In this study, we aimed to define the involvment of MMP-2 in the postnatal prostate development of rodent and the involvement of MMP-2, -7 and -9 rat ventral prostate regression after castration. For this aim, we have used molecular, biochemical and morphological approaches. siRNA specific for MMP-2 compromised the rat VP growth, branching, lumen formation and epithelial cell proliferation, besides leading an accumulation of collagen fibers in the stroma. MMP-2-/- VP showed a reduced relative weight and epithelial volume, besides displaying a decreased epithelial proliferation and branching and a stabilization of collagen matrix at the end of the first postnatal week. In the prostate regression after castration, we found multiple waves of cell death and a direct association between activity and expression of MMP-2, -7 and -9 and an apoptotic peak that occurs at the 11th Day after castration. In conclusion, the results presented here showed that both postnatal prostate development and prostate regression after castration are dependent on the expression and activity of MMPs. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Pablo Agustin Vargas / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T12:35:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_DanielBerrettaMoreira_M.pdf: 2353528 bytes, checksum: c4fc62eb44bbd4f300dbdb9d7dc74cd6 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: INTRODUÇÃO: As proteínas da família PLUNC ("palate, lung and nasalepithelium clone"), as quais são expressas no trato aéreo superior e na cavidade bucal humana, podem ser responsáveis por mediar a resposta imune inata e interagir com a superfície bacteriana. Entretanto, sabe-se muito pouco sobre a expressão destas proteínas nas glândulas salivares durante o período embrionário humano. OBJETIVO: O objetivo do presente estudo foi analisar a expressão imunoistoquímica de SPLUNC1, SPLUNC2 e LPLUNC1 em glândulas salivares maiores e menores, língua e palato de fetos humanos. MATERIAIS e MÉTODOS: A amostra do presente estudo foi composta por 26 fetos humanos com idade variando entre 12 e 25 semanas de vida intra-uterina. As glândulas parótidas (n=7), submandibulares (n=13) e sublinguais (n=5) e as glândulas salivares menores [lábio (n=18), palato (n=9) e língua (n=6)] foram classificadas de acordo com os estágios de morfodiferenciação. A marcação imunoistoquímica citoplasmática das glândulas salivares, epitélio respiratório palatino e epitélio lingual, foi avaliada como positiva ou negativa. RESULTADOS: Dentre os 26 fetos avaliados, 13 (50%) apresentaram positividade para SPLUNC1 nos plugues de mucina dos ductos estriados e no citoplasma dos ácinos mucosos. Os dois casos positivos para LPLUNC1 apresentaram expressão citoplasmática na porção apical das células do ducto estriado primitivo. Nenhum dos casos apresentou marcação positiva para os anticorpos SPLUNC2A e SPLUNC2B. Os estágios de morfodiferenciação avançados (estágio canalicular e broto terminal) prevaleceram entre os fetos que apresentaram positividade para SPLUNC1. Tecidos que estavam adjacentes as glândulas salivares avaliadas, como células do epitélio respiratório associado à região do palato (n=6) e curiosamente, do epitélio escamoso de superfície da língua associado às glândulas salivares menores da região lingual (n=3), também apresentaram marcação positiva para SPLUNC1. Os resultados do presente estudo sugerem que a expressão de SPLUNC2 em glândulas salivares inicia na vida pós-natal. A expressão da proteína LPLUNC1 nas células ductais durante a vida intra-uterina precisa ser melhor estudada, visto que apenas dois casos foram positivos para esta proteína. CONCLUSÕES: A proteína SPLUNC1 inicia sua expressão durante a vida intra-uterina, nas glândulas salivares em estágio de morfodiferenciação avançado (estágio canalicular e broto terminal). Estudos com métodos mais sensíveis devem ser realizados para avaliar e quantificar a expressão de SPLUNC1 e LPLUNC1 em glândulas salivares maiores e menores de fetos humanos, visando entender melhor a função destas proteínas na vida intra-uterina. / Abstract: OBJECTIVES: The expression of PLUNC proteins in human fetal tissue has not been previously studied. The aim of this study, therefore, was to determine expression in major and minor salivary glands, tongue and palate throughout fetal development and thus gain further insight into the function of these proteins. MATERIALS AND METHODS: 26 human fetuses (12 to 25 intra-uterine weeks) were collected retrospectively. Parotid (n=7), submandibular (n=13), sublingual (n=5) and minor salivary glands [lips (n=18)], palate (n=9) and tongue (n=6)] were classified according to their morphodifferentiation stage. Immunohistochemical analysis of three PLUNC proteins (SPLUNC1, SPLUNC2 and LPLUNC1) was performed and immunoreactivity was assessed as positive or negative. RESULTS: Mucin plugs in striated ducts and mucous cells of submandibular (n=4, 30.77%), sublingual (n=4, 80%) and minor salivary glands (n=9, 27.27%) were positive for SPLUNC1. The apical portion of primitive striated duct cells of submandibular and sublingual salivary glands was positive for LPLUNC1 (n=2). SPLUNC1 was detected in late morphodiferentiation stages (canalicular stage and terminal bud stage) of salivary glands. Tissues adjacent to the minor salivary glands, such as respiratory epithelial cells located in the palate (n=6) and squamous epithelial cells of the tongue surface (n=3), were also positive for SPLUNC1. All cases (n=26) were negative for SPLUNC2. CONCLUSIONS: Our results suggest that SPLUNC2, the major PLUNC protein in adult salivary glands, is either expressed very late in fetal development or only in adult tissues. Only 2 cases of LPLUNC1 protein in fetal duct cells were positive; further studies are needed to confirm expression. Salivary glands expressed SPLUNC 1 only in late morphodifferentiation stages (canalicular and terminal bud stages). Further studies using other sensitive methods, such as in situ hybridization, should be performed to assess and quantify the expression of SPLUNC 1 and LPLUNC1 in major and minor salivary glands, tongue and palate in order to better understand their function in intra-uterine life. / Mestrado / Estomatologia / Mestre em Estomatopatologia