Orientadores: Irena Gyongyver Heidemarie Lorand Metze, Andrew John George Simpson / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T15:08:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lopes_LuizFernando_D.pdf: 20884404 bytes, checksum: 5073c7c7a170b4c793430172ec387443 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: No presente estudo foi investigado um tipo de instabilidade específica dos linfócitos que, segundo dados de literatura, pode estar relacionado com o desenvolvimento de neoplasias "de novo" ou associadas ao aparecimento de neoplasias secundárias. Esta instabilidade estudada é definida através da freqüência de rearranjos que ocorrem entre o segmento V no receptor de células T no locus gamma (7p14-15) e do segmento J do receptor de células T no locus beta (7q 35). Desta forma, os objetivos deste estudo foram: 1) utilizando o gene lnorido Vy/JJ3como marcador, estudar a instabilidade gênica induzida pela quimioterapia antineoplásica em pacientes pediátricos portadores de leucemia linfocítica aguda ou tumores sólidos; 2) estudar o grau de reversibilidade desta instabilidade após o final da exposição aos agentes quimioterápicos e 3) demonstrar a validade da abordagem de estudo da recombinação, avaliando os produtos da "nested PCR" de DNA genômico dos pacientes em gel de poliacrilamida, posteriormente revelado pela prata (abordagem ainda não descrita na literatura para o estudo do gene em questão). Foram analisadas 210 amostras de DNA de indivíduos agrupados desta maneira: sem neoplasia- 30 indivíduos, 90 pacientes com LLA ( 15 pré Qt, 15 com QT 3-6 meses e 15 com 9 a 12 meses, 15 pacientes após término entre 6 e 12 m, 15 após 2 a 4 anos e 15 após 5 anos ou mais) e 90 pacientes com Tumor Sólido, também subagrupados da mesma forma que os pacientes com LLA. Todos os 210 pacientes foram classificados com resultado positivo ou negativo para o rearranjo, de acordo com a presença ou ausência da banda esperada após a segunda PCR Para cada indivíduo foram estudadas 6 diferentes quantidades de DNA (525ng, 350,175,35,17.4, e 8.75) e, em cada uma delas, chamamos de positivo ou negativo para o rearranjo de acordo com 'a presença ou ausência da banda visualizada no gel revelado. Foi determinada a média da freqüência do rearranjo Vy/Jp para cada grupo. O grupo de pacientes durante a quimioterapia foi comparado com a média da freqüência dos rearranjos pré e pós-quimioterapia separadamente para o grupo de LLA e TS. As médias foram comparadas utilizando-se o teste de Kruskal-Wallis. As comparações múltiplas foram feitas através do método Tukey-HSD. A média da fteqüência de rearranjos foi de 10,2/105 células para os pacientes com LLA que estavam expostos aos quimioterápicos no período de 3 a 6 meses e para o grupo em tratamento entre 9 a 12 meses foi de 13,8/105. Para o grupo controle (30 indivíduos) e para o grupo com LLA pré-tratamento os valores foram 1,3/105e 3,11105. O estudo estatístico comparando grupos -controle, LLA pré-QT e LLA durante QT - mostrou tratar-se de valores altamente significativos (p < 0,001). No grupo de pacientes com Tumor Sólido, a média da freqüência de rearranjos durante o tratamento foi de 9,2 e 9,11105 células respectivamente para 3 a 6 meses de tratamento e 9 a 12 meses. O grupo controle, sem neoplasia, foi o mesmo descrito acima e a média de rearranjo foi de 1,3/105 e para os TS pré-quimioterapia foi de 0,6/105 células. Novamente o estudo estatístico comparando grupos -controle, TS pré QT e TS durante QTmostrou tratar-se de valores altamente significativos(p < 0,002). Desta forma pode-se concluir que: 1) o método utilizando gel de poliacrilamida corado pela prata pode ser substituído pelo gel de agarose corado com brometo de etídio e hibridizado pela técnica de Southem Blot, sem prejuízo dos resultados e com a vantagem de ser mais rápido, de menor custo e da não-necessidade de utilização de material radioativo e 2) os resultados do estudo indicam que os pacientes apresentaram instabilidade gênica onde a presença do gene ln'brido Vy/Jf3pôde ser observada em freqüência mais elevada durante a fase de tratamento com quimioterapia / Abstract: The ftequency of the hybrid Vy/J[3 trans-rearrangement in peripheral blood lymphocytes (PBL) was analysed in a transversal study of pediatric patients (n=210) with acute lymphoblastic leukemia (ALL) and solid tumours (ST). DifIerent amounts of DNA were used as template for a nested PCR in order to evaluate the ftequency ofhybrid Vy/J[3 genes, using silver-stained gels. The ftequency of the rearrangement was evaluated in groups before, during and afier therapy. A great1y increased ftequency of Vy/J[3transrearrangement was found in PBL of both groups of patients during exposure to chemotherapeutic agents as compared to patients before chemotherapy. In patients that had finished treatment, the ftequency of the rearrangement feUprompt1yto the baseline levels in ST but showed a slow decrease in ALL, where increased levels could be found until 4 years afier the end oftreatment. We hypothesize that the chemotherapeutic agents are able to induce the Vy/J[3trans-rearrangement, but this is transient in most cases. It remains to be determined the exact relation between the persistence of the rearrangement and the occurrence of secondary leukemia / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-05-24T16:16:21Z No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-05-24T17:49:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-05-24T17:49:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-24T17:49:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2016-01-29 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / This study aimed to analyze the cytotoxic and antioxidant extracts obtained from 20 plant species in the Amazon. A relationship was shown between Artemia salina mortality with antioxidant activity and cytotoxicity in mouth cancer cells and antioxidant activity by chemical and biological method. Furthermore, it was found cytotoxicity of samples of breast cancer cells, fibroblasts and macrophages. The botanical material was from the Adolpho Ducke Forest Reserve, involving roots, stems and leaves. The most active extracts the high polarity and its fractionation was performed with Sephadex LH20 eluting with methanol plus 50% water in the last two fractions. The methanol extract of Inga cordatolata leaves was the most active antioxidant in tests on chemical and cellular level. Showed higher cytotoxic effect to other samples both in the crude extract, as in its fractions. In spite of the high cytotoxicity observed in mouth cancer cells, this species does not induce killing of macrophages. In small concentrations of this antioxidant extract has been shown, whereas in higher concentrations showed significant cytotoxicity. Chemical analysis by High Performance Liquid Chromatography and Liquid Chromatography Ultra Efficiency suggests the presence of quercetin and isorhamnetin 3-O-glucoside on their constituents. It was concluded that methanol extract of the leaves has Inga cordatolata, associated form, the biological properties investigated in this work. Among all samples, it presents more likely to turn out to be a source of anticancer drugs. However, it is not possible to state that these effects are maintained in vivo. Thus, it is suggested the preparation of nanocapsules to see if there would be selective drug distribution between normal and cancerous tissues, and the activity of this sample would be different in each tissue / Este trabalho objetivou analisar as atividades citotóxica e antioxidante de extratos obtidos de 20 espécies vegetais da Amazônia. Foi demonstrada a relação entre mortalidade de Artemia salina com atividade antioxidante e citotoxicidade em células de cancer de boca e atividade antioxidante por método químico e biológico. Além disso, verificou-se a citotoxicidade das amostras sobre as células de câncer de mama, fibroblastos e macrófagos. O material botânico foi proveniente da Reserva Florestal Adolpho Ducke, envolvendo raízes, caules e folhas. Os extratos mais ativos foram os de elevada polaridade e o seu fracionamento foi realizado com Sefadex LH20 utilizando como eluente o metanol, acrescido de 50% de água nas ultimas duas frações. O extrato metanol das folhas de Inga cordatolata foi a mais ativa nos ensaios antioxidantes em nível químico e celular. Revelou efeito citotóxico superior às demais amostras tanto no extrato bruto, quanto nas suas frações. Apesar da elevada citotoxicidade observada nas células de câncer de boca, esta espécie não induziu a morte de macrófagos. Em pequenas concentrações este extrato se demonstrou antioxidante, ao passo que nas concentrações maiores apresentou citotoxicidade expressiva. A análise química por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência e a Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência sugere a presença de quercetina e isorhamnetina 3-O-glucosideo nos seus constituintes. Conclui-se que o extrato metanol das folhas de Inga cordatolata detém, de forma associada, as propriedades biológicas investigadas por este trabalho. Dentre todas as amostras analisadas, ela apresenta maiores probabilidades de vir a se tornar uma fonte de medicamentos antineoplásicos. Contudo, não é possível afirmar que esses efeitos sejam mantidos in vivo. Dessa forma, sugere-se a elaboração de nanocápsulas para constatar se haveria distribuição seletiva da droga entre os tecidos normais e cancerosos, e se a atividade desta amostra seria diferenciada em cada tecido

Orientador: Márcio Ajudarte Lopes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-23T01:35:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ramos_LaraMariaAlencar_D.pdf: 993265 bytes, checksum: 9da6c3e7c0c22ceebc93d5f7eac147d1 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: A quimioterapia é um dos tratamentos utilizados para a cura do câncer, e têm como princípio o uso de drogas que alteram o metabolismo das células neoplásicas levando a morte celular. Apesar dos benefícios do tratamento quimioterápico, as drogas também afetam células normais e geram efeitos colaterais que prejudicam diretamente a qualidade de vida dos pacientes. Tais efeitos na cavidade oral podem ser classificados como agudos (mucosite, hipossalivação, candidose, herpes) ocorrem durante o tratamento, e tardios (hipossalivação) ocorrem após a conclusão do tratamento. A mucosite é o efeito colateral agudo mais importante, e causa principalmente dor e disfagia. Além da alteração na quantidade da saliva os quimioterápicos também alteram os componentes da mesma, predispondo os tecidos orais a alguns efeitos secundários. As proteínas SPLUNC (short palate, lung and nasal epithelium clone) foram identificadas em glândulas salivares, saliva, fluídos das vias aéreas e outros tecidos, com uma possível participação no sistema imune inato dessas regiões. O objetivo desse estudo foi avaliar a correlação entre a expressão das proteínas SPLUNC1 e SPLUNC2A com a presença de efeitos colaterais como mucosite e hipossalivação durante a quimioterapia, assim como a quantificação dessas proteínas antes, durante e após o tratamento. Foram realizadas três coletas de saliva total em 20 pacientes saudáveis, 20 pacientes submetidos à quimioterapia convencional e em 15 pacientes submetidos a regimes de condicionamento prévios ao transplante autólogo de células tronco hematopoiéticas e as proteínas foram avaliadas por meio de western blotting. Foi observada uma significativa mudança na qualidade da saliva durante a quimioterapia, caracterizada pelo aumento na expressão de SPLUNC1, mas não foi comprovado que essa variação esteja associada ao agravamento da mucosite e hipossalivação / Abstract: Chemotherapy is one of the treatments used to cure cancer, and have as a principle the use of drugs that alter the metabolism of neoplastic cells leading to cell death. Despite of the benefits of chemotherapy, the drugs also affect normal cells and cause side effects that directly affect the quality of life of patients. Such effects in the oral cavity can be classified as acute (mucositis, hyposalivation, candidosis, herpes) occur during the treatment, and late (hyposalivation) occur after completion of treatment. Mucositis is the most important acute side effect, and mainly causes pain and dysphagia. Besides the change in the amount of saliva, chemotherapy also alters the saliva composition, predisposing oral tissues to some collateral effects. Proteins SPLUNC (short palate, lung and nasal epithelium clone) were identified in salivary glands, saliva, fluid from the airways and other tissues, with a possible role in the innate immune system in these regions. The aim of this study was to evaluate the correlation between the expression of proteins SPLUNC1 and SPLUNC2A with the presence of side effects such as mucositis and hyposalivation during chemotherapy, as well as the quantification of these proteins before, during and after treatment. Were performed three collections of whole saliva in 20 healthy subjects, 20 patients undergoing conventional chemotherapy and 15 patients undergoing conditioning regimens prior to autologous hematopoietic stem cell transplantation and proteins were evaluated by western blotting. We observed a significant change in the quality of saliva during chemotherapy, characterized by increased expression of SPLUNC1, but it was not observed any association with worsening of hyposalivation and mucositis / Doutorado / Patologia / Doutora em Estomatopatologia

Orientador: Marcio Ajudarte Lopes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-02T03:12:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TakahamaJunior_Ademar_M.pdf: 3735129 bytes, checksum: 9943718297a8962d5713c9b04aea0223 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar as características clínicas, histopatológicas e a expressão imunohistoquímica das proteínas p53, MDM2, CDK4, PCNA e Ki67, em osteossarcomas de cabeça e pescoço, verificando possíveis fatores associados ao prognóstico. Foram selecionados 25 casos de osteossarcoma de cabeça e pescoço atendidos no Departamento de Cirurgia de Cabeça e Pescoço e Otorrinolaringologia do Hospital do Câncer A.C. Camargo de São Paulo. A média de idade dos pacientes foi de 29 anos, com discreta predominância no gênero feminino. Os locais mais acometidos foram a mandíbula (60%) e a maxila (36%). Histologicamente, 72% dos casos foram do tipo condroblástico e 28% osteoblástico. De acordo com o grau de malignidade, 52% dos casos foram classificados como de grau intermediário, 44% de alto grau, e apenas 1 caso (4%) de baixo grau. A positividade imunohistoquímica foi observada em 52% dos casos para p53, em 24% para MDM2, 84% para CDK4, 92% para PCNA e 88% para Ki67. A principal forma de tratamento foi a cirurgia, realizada em 84% dos casos, algumas vezes em associação com a quimioterapia e/ou radioterapia. Cinco pacientes (20%) apresentaram recorrência local após o tratamento e quatro (16%) desenvolveram metástase à distância. A correlação de freqüência mostrou que os principais fatores associados à situação clínica do paciente foram recorrência local e metástase à distância, onde todos os 5 pacientes com recorrência local e 3 dos 4 que desenvolveram metástase evoluíram para óbito. A sobrevida global em 5 e 10 anos foi 59% e 49%, respectivamente. Os fatores mais importantes relacionados à sobrevida foram a história de radioterapia prévia, tumores do tipo osteoblástico e presença de recorrência local / Abstract: The purpose of our study was to analyse the clinical and histopathological features and the immunohistochemical expression of p53, MDM2, CDK4, PCNA and Ki67 in head and neck osteosarcomas, verifying possible prognostic factors. Twenty-five cases of head and neck osteosarcomas attended at the Departament of Head and Neck Surgery and Otorhinolaringology of Cancer Hospital A.C. Camargo - São Paulo - Brazil, were selected. The mean age of the patients was 29 years, with a slight predominance in women. The most common sites were the mandible (60%) and the maxilla (36%). The histopathological findings showed that 72% of the tumors were condroblastic type and 28% were osteoblastic type. According to the malignancy grade, 52% of the cases were classified as intermediate grade, while 44% were high grade and just one case (4%) was low grade. The immunopositivity was 52% ofthe cases for p53, 24% for MDM2, 84% for CDK4, 92% for PCNA and 88% for Ki67. The main treatment approach was surgery, performed in 84% of the cases, sometimes in association with chemotherapy and/or radiotherapy. Five patients (20%) presented local recurrence and four (16%) developed distant metastasis. The correlation of frequency showed that the main factors associated with the patients status were the local recurrence and the distant metastasis, where alI the 5 patients who presented local recurrence and 3 out of 4 patients who developed distant metastasis died of the disease. Overall survival in 5 and 10 years was 59% and 49%, respectively. The most important prognostic factors for survival were the previous history of radiotherapy, osteoblastic-type tumors and local recurrence / Mestrado / Estomatologia / Mestre em Estomatopatologia

Orientador: Irene Lorand-Metze / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T09:37:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Delamain_MarciaTorresan_M.pdf: 3944857 bytes, checksum: 3a7a67439a8b8496098468fa900b5967 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: As Células Progenitoras Periféricas Hemopoiética(CPPH) são hábeis para restaurar a hemopoiese após tratamento quimioterápico mieloablativo. O tratamento com megaquimioterapiaacompanhadopor resgate de CPPH é uma importante abordagem terapêutica utilizada hoje em pacientes com neoplasias hematológicas como Linfoma Não-Hodgkin (LNH),Doença de Hodgkin (LH) e Mieloma Múltiplo (MM). O regime quimioterápicomais efetivo e de intensidademais adequada ainda deve ser definido e pode ser claramente demonstrado que a Célula Progenitora Hemopoiética pode ser influenciada por tratamentos prévios. Vários outros parâmetros também podem influenciar na coleta de CPPH após a quimioterapia de mobilização. A proposta do nosso estudo foi estabelecerparâmetros que possam melhor predizer o dia para iniciar a coleta de CPPH com o objetivo de coletar mais células CD34+ com um menornúmero de procedimentos de leucoaféreses. Nós analisamos,retrospectivamente,pacientes com neoplasias hematológicas tratados em nosso Serviço,que foram submetidos à mobilizaçãopara obter CPPH a fim de realizar o transplante autólogo de medula óssea. Os pacientes foram mobilizados com Ciclofosfamida (4 ou 7g/m2)e G-CSF na dose de 300/lg, sub-cutâneo, diariamente, com o propósito de coletar 5 x 106 células CD34+/Kg. Nós investigamos a influência da idade, sexo, diagnóstico,número de linhas quimioterápicasprévias, hemograma do sangue periférico no dia da mobilização, dia quando os neutrófilos < Ix I09/L e o dia do nadir (incluindo o intervalo de dias destes dois dias - delta). Foi elaboradoum modelo matemático utilizando a correlação linear multivariada com o objetivo de predizer o melhor dia da coleta. Nós analisamos 134pacientes: 36 com DH, 65 LNH, 33 MM. A mediana de idade foi de 28 , 40 e 48 anos respectivamente. O teste de Pearson mostrou uma correlação para o dia dos leucócitos > 1 x 109/L com os valores de hemoglobina no dia O,dia dos neutrófiolos < 1 xl 09/L,dia do nadir e doses de quimioterapia de mobilização utilizada. Para cada grupo de doença,um modelo foi desenvolvido: DH: dia da aférese = delta x 1.5 + 6.8 LNH: dia da aférese =delta x 0.88 +10.1 MM: dia da coleta =delta x 1.35 + 8.8. Em 54 casos foi realizada a determinação seriada do número de células CD34 + no sangue periférico no dia quando os leucócitos atingiram> 1 x1O9/L.Nestes pacientes, a correlação encontrada entre o dia da coleta e hemoglobina,dia dos neutrófilos < 1 x 109/L e o dia do nadir. foi estatisticamente significativa e possibilitou desenvolver um modelo matemáticoseparando os pacientes conforme a doença de base: DH: dia da aférese = delta x 1.5 + 9.1 LNH: dia da aférese = delta x 0.66 + 10.8 MM: dia da aférese = delta x 1.6+ 8.8 De acordo com nosso estudo, cada doença apresenta sua dinâmica de mobilização, possivelmente relacionada com o número de linhas quimioterápicas prévias ou pelo status do microambiente medular. O parâmetro mais importante encontrado e comum a todos os pacientes foi a velocidade de queda dos neutrófilos após a quimioterapia de mobilização / Abstract: Mobilized peripheral blood progenitor cells (PBPC) are able to engraft and restore hemopoiesis after myeloablative therapy. Intense chemotherapy with PBPC rescue is currently an important therapeutic approach in hematological malignancies such as non- Hodgkin's lymphoma(NHL),Hodgkin's disease (HD) and multiple myeloma (MM). The most effective regimen and the adequate intensity of mobilization chemotherapy still remains to be defined and it has been c1earlyshown that the progenitor cell yield can be influenced by intensity of previous treatments. Several other parameters may affect the harvesting of PBPC after mobilizationchemotherapy. The purpose of our study was to establish the parameters that best predict the day to start harvesting of PBPC in order to collect most CD34+ cells with few aphereses. We analysed retrospective data ofpatients with hematological malignancies treated in our Institution,who underwent mobilizationto obtain PBPC in order to perforrn autologous bone marrow transplantation. Patients were mobilized with Cyc1ophosphamide(4 or 7g1m2) and G-CSF 300Jlg,sc,dai1y,aiming to collect 5x1O6cells/Kg. We investigated the influence of age, sex, diagnosis, number of previous chemotherapy lines (nCHT), peripheral blood counts on day of mobilization, day of neutrophils < 1 xl09/L and day of nadir (inc1uding the interval between these two days) on harvesting. Multivariate linear correlation models were built in order to predict the day of best harvesting. We analysed 134 patients: 36HL, 65 NHL and 33 MM. Median age: 28,40 and 48 respectively. The Pearson's test showed a correlation for day of leucocytes > 1 xl 09/L with hemoglobin value of day O, day of neutrophils < Ix1O9/L,day ofnadir and dosis ofmobilization therapy. However, for each disease group a different model could be established: HL: day of apheresis = delta x 1.5+6.8 NHL: day of aphereis =delta x 0.88+ 10.1 MM: day of apheresis = delta x 1.35 +8.8. In 54 cases a serial deterrninationof the number of CD34 + cells in peripheral blood was performed starting on day of peripheral leucocytes > 1 xl 09/L. In these patients, a correlation was found between the day of harvesting and hemoglobin, day of neutrophils <lx1O9/L and day ofnadir. Separating the patients for disease: HL: day of apheresis =delta x 1.5 +9.1 NHL: day of apheresis = delta x 0.66 + 10.8 MM:day of apheresis=deltax 1.6+8.8. According to this study, each disease has its own pattem of mobilization dynamics, possibly related to the amount of previous chemotherapy or the status of bone marrow microenviroment. The most important parameter, cornrnonto alI patients, was the velocity of decline of the neutrophil count afier mobilization chemotherapy / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / No autorizada por el autor para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas / Diversas investigaciones han explorado la utilidad de nuevas vías para la administración de medicamentos con el fin de evitar efectos adversos e interacciones farmacológicas, aumentando la adherencia al tratamiento por parte del paciente y con ello, la obtención de mejores resultados terapéuticos. Un ejemplo de esto es el desarrollo de formas farmacéuticas mucoadhesivas, las cuales han llamado la atención de la industria farmacéutica en los últimos años, encontrándose actualmente en el mercado una serie de medicamentos para el tratamiento de diversas patologías, entre ellas, la enfermedad periodontal. El objetivo de este trabajo fue desarrollar y evaluar de manera preliminar un film mucoadhesivo bicapa para el tratamiento de la enfermedad periodontal que permita, mediante su adhesión por un tiempo prolongado en la cavidad bucal y la liberación controlada del agente antibiótico metronidazol en ella, superar las desventajas de los medicamentos existentes para el tratamiento localizado de esta patología. Se desarrolló una capa mucoadhesiva en base al excipiente hidroxipropilmetilcelulosa (Methocel®), como polímero mucoadhesivo y glicerina, como agente plastificante. Por otro lado, se desarrolló una capa responsable de la liberación controlada del fármaco, en base a una dispersión acuosa del co-polímero etil-acrilato y metil-metacrilato (Eudragit® NE 30D) y metronidazol. Se obtuvieron películas mucoadhesivas con buenas características organolépticas, pH, hidratación y humedad adecuadas para ser empleadas en la cavidad bucal y, mediante estudios de propiedades mecánicas, se determinó que es necesaria la inclusión de al menos un 10% de glicerina en la formulación para mejorar su elongación y rigidez de manera significativa. En el caso de la capa controladora de la liberación del fármaco, no se logró obtener una distribución homogénea de sus componentes, siendo necesario explorar el desarrollo de nuevas formulaciones y metodologías que permitan lograr este propósito. se realizaron estudios exploratorios de los perfiles de disolución de las distintas formulaciones que permitieron confirmar que a mayor cantidad de Eudragit® más lenta es la cesión del fármaco hacia el medio de disolución / Several researches have explored the usefulness of new ways for drug administration, avoiding adverse effects and pharmacological interactions in order to increase patient’s treatment adherence and finally, achieve better therapeutic outcomes. One example of this is the development of mucoadhesive dosage forms for drug administration, which have attracted attention of pharmaceutical industry in the last years. Currently, they can be found in the pharmaceutical market for the treatment of many illnesses, including periodontal diseases. The objective of this research was develop and evaluate in a preliminary manner a bilayer mucoadhesive film for the treatment of periodontal disease. Through its adhesion to the buccal cavity for a prolonged time and controlled release of metronidazole, an antibiotic agent, it could overcome disadvantages of marketed dosage forms for the local treatment of this pathology. To prepare the mucoadhesive layer, hydroxypropylmethylcellulose (HPMC) as mucoadhesive polymer and glycerol as plasticizer were employed. On the other hand, an aqueous dispersion of a copolymer based on ethyl acrylate and methyl methacrylate (Eudragit® NE 30 D) and metronidazole were used to develop the layer in charge of the drug release. Mucoadhesive films with appropriate organoleptic, pH, hydration, and humidity characteristics were obtained, which enable the use of this product on the buccal cavity. Mechanical properties studies determined that a 10% of glycerol significantly improves the elongation and stiffness of the films. A homogeneous distribution of the layer in charge of the controlled drug release was not achieved. Thus, new methods and formulations should be realized to accomplish this objective. Nonetheless, preliminary dissolution studies of the different formulations were performed and they allowed to confirm that higher amounts of Eudragit® produced a slower drug release toward the dissolution medium

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / En la práctica clínica se han observado grandes variaciones interindividuales, tanto en la respuesta como en la toxicidad asociadas con las terapias anticancerígenas. El presente trabajo tiene por objetivo estudiar la asociación entre polimorfismos genéticos en enzimas de biotransformación y la toxicidad del esquema cisplatino-etopósido-bleomicina (PEB) en pacientes con cáncer testicular y evaluar la influencia del polimorfismo genético en GSTM1 en la farmacocinética de cisplatino. Para el cumplimiento de los objetivos se realizó la genotipificación de los polimorfismos CYP3A4*1B, GSTM1 nulo, GSTT1nulo y BLMH (A1450G) realizadas mediante PCR-RFLP a partir del ADN genómico total obtenido de sangre periférica de sesenta y tres (63) pacientes con cáncer testicular. Adicionalmente, a ocho (8) pacientes reclutados se les realizó un estudio farmacocinético en donde recibieron una infusión intravenosa por 2 horas de cisplatino (100 mg/m2). Los niveles plasmáticos de cisplatino fueron medidos por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Los resultados muestran que los pacientes con el genotipo GSTM1 presente experimentan más leucopenia grado 3-4 (OR=0,2058; 95% IC 0,0405-1,0459, p=0,041chi2, p=0,052 Fisher). Linfocitopenia severa fue más frecuente en pacientes con el genotipo GSTT1 nulo (OR=29, 95% IC 1,29-650,0, p=0,002chi2, p=0,095 Fisher). Los pacientes con el genotipo BLMH A/G experimentaron más toxicidad hematológica grado 3-4 (OR=7,67, 95% IC 2,14-27,35-, p=0,001chi2, p=0,002 Fisher) y leucopenia grado 3-4 (OR=29, 95% IC 1,2938-650,015, p=0,002chi2, p=0,095 Fisher). Los datos farmacocinéticos se ajustaron a un modelo de dos compartimentos, el promedio poblacional estimado para el aclaramiento (CL) fue de 9,97 L/hr y el volumen de distribución en el compartimento central (V1) fue 6,48 L. Ninguna covariable mejoró la variabilidad intersujeto asociada con los parámetros farmacocinéticos. No se observó ninguna asociación significativa entre la farmacocinética y GSTM1. En conclusión, los polimorfismos GSTM1 nulo, GSTT1 nulo y BMLH (A1450G) están relacionados con la toxicidad luego del esquema de quimioterapia en pacientes con cáncer testicular. En el estudio farmacocinético preliminar de cisplatino, ningún parámetro se ve influenciado por el genotipo GSTM1 / In the clinical practice were observed large interindividual variations both the response and the toxicity in the anticancer therapy. The present work aimed to study the association among the genetics polymorphisms in the biotransformation enzymes and toxicity in cisplatin-etoposide-bleomycin (PEB) chemotherapy in testicular cancer patients and to evaluate the influence of genetic polymorphism in GSTM1 on the pharmacokinetics of cisplatin. Genotyping of CYP3A4*1B, GSTM1 null, GSTT1 null and BLMH (A1450G) polymorphisms was performed by PCR – RFLP of genomic DNA obtained from the peripheral blood of sixty three (63) testicular cancer patients. Additionally, the eight (8) patients recruited to the pharmacokinetics study received a 2 hours intravenous infusion of cisplatin (100 mg/m2). Plasma levels of cisplatin were measured by high-performance liquid chromatography (HPLC). Results showed that the patients GSTM1 present genotype experienced more grade 3-4 leucopenia (OR=0,2058; 95% CI 0,0405-1,0459, p=0,041chi2, p=0,052 fisher). Severe linfocitopenia was more frequent in patients GSTT1 null genotype (OR=29, 95% CI 1,2938-650,015, p=0,002chi2, p=0,095 fisher). Patients BLMH A/G genotype experienced more grade 3-4 hematological toxicity (OR=7,67, 95% CI 2,14-27,35-, p=0,001chi2, p=0,002 fisher) and grade 3-4 leucopenia (OR=29, 95% CI 1,2938-650,015, p=0,002chi2, p=0,095 fisher). Dates pharmacokinetics were adjusted to a linear two-compartment model, the mean population estimates for clearence (CL) were 9,97 L/hr and central distribution volume (V1) were 6,48 L. No covariate improved the intersubject variability associated with pharmacokinetics parameters. No association among pharmacokinetics parameters and GSTM1 genotype were significant. In conclusion, GSTM1 null, GSTT1 null and BLMH A1450G polymorphisms were related with toxicity from chemotherapy testicular cancer. In the pharmacokinetics preliminary study of cisplatin, no parameters were influenced for GSTM1 genotype. Key words: Pharmacogenetics, polymorphisms, testicular cancer

Orientador: Ricardo Zollner / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-19T15:16:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cunha_LudmilaSiqueiraMedinada_D.pdf: 2573991 bytes, checksum: bbc4fec53735053895cf6758ff5de1dc (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: A primeira parte do estudo restringiu-se ao estabelecimento do modelo BRO "in vivo". Para isto, empregamos a linhagem de células BRO e sua sublinhagem transfectada BRO mdr1.1, utilizando a técnica de xeno-enxertos em camundongos atímicos. Estes animais foram observados por sucessivas passagens e avaliados quanto à resposta apresentada aos agentes citotóxicos vincristina e doxorubicina, sempre comparados com testes "in vitro" das mesmas células. Estas linhagens celulares também foram avaliadas "in vitro" e "ex-vivo" quanto à expressão da 170-Pgp e aos fatores de resistência empregando-se as técnicas de imunoperoxidase e citotoxicidade com MTT. A análise final destas informações permite afirmar que o modelo BRO pode ser utilizado no estudo da resistência a múltiplas drogas até a segunda passagem, o que corresponde ao período de tempo de 6 semanas como xeno-enxertos. A droga vincristina foi escolhida para os estudos "in vivo" devido ao elevado nível de resistência apresentado pelas células BRO mdr 1.1. A segunda parte do trabalho concentrou-se na avaliação do modelo no estudo de novos agentes reversores, bepridil e cremofor. Numa primeira fase verificou-se a efetividade da reversão destes agentes e sua citotoxicidade "in vitro". Foi possível estabelecer as doses ideais para a obtenção do efeito de reversão da MDR. As concentrações não citotóxicas de cremofor mostraram uma reversão da resistência marcadamente menor que as obtida com bepridil. Estes dados indicaram a realização de testes de reversão "in vivo" apenas com bepridil. A farmacocinética desta droga para camundongos foi estabelecida através de HPLC e cintilação líquida. Um esquema combinando vincristina e bepridil, utilizados na MTD, foi estabelecido e testado em camundongos atímicos portando tumores BRO mdr 1.1 sem um resultado efetivo de regressão tumoral, provavelmente devido aos baixos níveis plasmáticos do reversor alcançados, somados aos altos fatores de resistência presentes na segunda passagem. A terceira parte do estudo consistiu na avaliação da radioimunoterapia como outra metodologia para se atingir as células portadoras do fenótipo MDR neste modelo. Para tanto, as linhagens celulares foram testadas quanto à sua radiosensibilidade em ensaio clonogênico e em teste de citotoxicidade com SRB. Os resultados foram similares, não se detectando diferenças significativas entre as radiosensibilidades de linhagens resistentes e sensíveis. A partir destes dados realizou-se a biodistribuição do anticorpo monoclonal MRK16 após a marcação deste com o radioisótopo 131I, não havendo captação preferencial do monoclonal pelos tumores resistentes, como também não detectamos resposta tumoral a radioimunoterapia. O baixo número de epitopos de 170-Pgp encontrados na superfície das células BRO mdr1.1 pelas técnicas de citometria de fluxo e imunocompetição de Scatchard justifica a falha desta abordagem terapêutica. O modelo "in vivo" focalizado nesta pesquisa não poderá ser empregado na avaliação das modalidades terapêuticas que utilizem anticorpos monoclonais (isolados ou como imunoconjugados) de ultrapassar o fenômeno da resistência a múltiplas drogas, mas permanece útil na determinação do potencial de reversão e no estudo da toxicidade das drogas selecionadas pelos modelos "in vitro" como agentes reversores da MDR, criando condições mais seguras para o emprego clínico. O modelo desenvolvido abre, também, uma nova opção no estudo comparativo entre tumores intrinsecamente resistentes e os que apresentam resistência a múltiplas drogas adquiridas, por se tratar de um tumor desenvolvido a partir de células transfectadas com o gene MDR1. Numa perspectiva otimista destes estudos antevemos uma solução definitiva para estes tumores até hoje sem possibilidade de tratamento eficaz com quimioterapia / Abstract: Multidrug resistance has been one of the most active research areas during last decade because its growing clinical importance. Expression of the MDR1 (170-Pglycoprotein) gene is an active effux pump that decreases the intracellular accumulation of some of the major anticancer drugs such as anthracyclines, vinca alkaloids, and epipodophyllotoxins. Our study stablished an "in vivo" model using BRO cell line and its transfected subline BROmdr1.1. The MDR phenotype was detected until the second passage as xenografts or 6 weeks in cell culture by citotoxity MTT test with vincristine and doxorubicin but also by imunostainning using 3 monoclonal antibodies (C219, JSBI and MRK16). We have studied antitumor activity of vincristine and doxorubicin in nude mice bearing the second passage of BRO and BROmdr1.1. It was possible to define resistant factors for each drug. New reversal agents, cremophor and bepridil, were tested "in vitro". Bepridil presented higher reversal effect and was select to "in vivo" studies, but the doses nedded to achieved complete reversal "in vitro" could not be reached "in vivo". BROmdr1.1 xenografts were treated with monoclonal antibodies labelled with isotopes. The absence of response probably was because it was not possible to concentrate de isotope in the resistant tumors due the small number of epitopes that this cell line presented at Scatchard test. This model can be used to study new reversal agents for MDR phenotype "in vivo", Its toxicity, pharmacokinetics and reversal activity, before going further on human trials / Doutorado / Doutor em Medicina Interna

El presente es un estudio transversal, descriptivo y retrospectivo realizado en el Centro Médico Naval “Santiago Távara”, ubicado en Av. Venezuela s/n Bellavista-Callao, con el objetivo de determinar y comparar el costo-efectividad de Estatinas (Atorvastatina 20mg y Pravastatina 20 mg) frente a Gemfibrozilo 600 mg en el tratamiento de hiperlipidemia durante el período de enero 2002 a julio 2005. Se revisaron las historias clínicas de 64 pacientes hiperlipidémicos, con edades entre los 40 y 64 años de ambos sexos que acuden a los consultorios externos de Cardiología, Endocrinología, Geriatría y Medicina Interna y a quienes se les prescribió algunos de los fármacos en estudio (54 Estatinas y 10 Gemfibrozilo). Además se aplicó una encuesta a los pacientes para conocer problemas de cumplimiento de terapia. El 60% de los pacientes con indicación de Gemfibrozilo, presentan Hipertrigliceridemia asociada con alteraciones del metabolismo de glucosa, y los factores de riesgo HDL-c bajo y sobrepeso u obesidad están presentes en un 90%. Según el análisis costo-efectividad (reducción del nivel sérico de LDL-c), las Estatinas resultaron con una relación costo-efectiva de 13,76 Nuevos soles por porcentaje de reducción; y el Gemfibrozilo, no resultó efectivo no pudiéndose establecer la relación costo- efectividad. Cuando la efectividad se mide por reducción de nivel de triglicéridos, el Gemfibrozilo presentó una relación costo-efectiva de 1,74 Nuevos soles por porcentaje de reducción y las Estatinas no fueron efectivas, no pudiéndose establecer la relación costo-efectividad. Cuando la efectividad se mide por logro de objetivos terapéuticos según el Tercer Panel para Adultos (ATP III) del National Cholesterol Education Program (NCEP 2001), el Gemfibrozilo presenta una relación costo-efectiva menor (361,2 Nuevos soles por paciente), debido a su menor costo. / -- This is a transversal, retrospective, descriptive study, carried out in the Centro Médico Naval “Santiago Távara” located at Avenida Venezuela s/n, Bellavista Callao, with the purpose of determining and comparing cost-effectiveness of Statins (Atorvastatin 20 mg and Pravastatin 20 mg) against Gemfibrozil 600 mg in hyperlipidemia treatment over a period from January 2002 to July 2005. 64 patient’s clinical record revision, who suffered with dyslipidemia of both genders, who were aged from 40 to 64 years old, attending in external medical service of Cardiology, Endocrinology, Geriatrics and Internal Medicine, was carried out. In order to know patient’s problem of therapy compliance , several inquiries were carried out. In patients with Gemfibrozil prescription, 60% have hypertriglyceridemia associated with alteration of glucose metabolism. Low HDL-c and Obesity or overweight factors risk were found in 90% patients at this group. According to cost-effectiveness analyses (for LDL-c level serumal reduction.), Statins showed a cost-effectiveness ratio of 13,76 Nuevos soles for reduction percentage and Gemfibrozil were not effective , it was not able to establish its cost – effectiveness ratio. When effectiveness is measured for level reduction of triglycerides, the Gemfibrozil showed a cost–effectiveness ratio of 1,74 Nuevos soles for reduction percentage and Statins were not effective , it was not able to establish its cost – effectiveness ratio. When effectiveness is measured for therapeutic objective achievement according to Adults Third Panel ( ATP III ) of the National Cholesterol Education Program ( NCEP 2001 ), Gemfibrozil shows a minor cost – effectiveness ratio ( 361,2 Nuevos soles for patient ), due to its low cost. / Tesis

INTRODUCCIÓN: En el Perú, el cáncer de mama ocupa el 3er lugar con un 10,3% según localización topográfica, a nivel nacional y en ambos sexos, con mayor predominio en el sexo femenino. Conocer las modificaciones en la participación de los roles de las mujeres con cáncer de mama en tratamiento con quimioterapia, permitiría evidenciar que el impacto del cáncer no es solo de tipo biológico y/o anatómico que deviene de la enfermedad, sino también afecta las dimensiones del hacer ocupacional del ser humano. OBJETIVOS: Determinar los roles ocupacionales en mujeres con cáncer de mama en tratamiento con quimioterapia. DISEÑO: Se realizó estudio observacional, de tipo transversal descriptivo, prospectivo. LUGAR: Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas y población peruana en general. PARTICIPANTES: 25 mujeres con cáncer de mama en tratamiento con quimioterapia y 25 mujeres sin cáncer de mama. INTERVENCIÓN: se entrevistó a 50 mujeres con y sin cáncer de mama para conocer si los roles ocupacionales tenían variación en los grupos de estudio, se obtuvo los resultados mediante la aplicación del instrumento “Listado de Roles” además de una entrevista sociodemográfica. El análisis estadístico fue realizado mediante análisis descriptivo de las variables sociodemográficas y análisis de frecuencias en las variables de modificaciones de roles, así como la relación entre ambos grupos de estudio. PRINCIPALES MEDIDAS DE RESULTADOS: Activo o no activo en el pasado; perdida, ganancia, continuidad o ausencia en el presente y participación o no participación en el futuro de roles ocupacionales. RESULTADOS: se observó que las mujeres con cáncer de mama en tratamiento con quimioterapia presentaron mayor pérdida en 4 de 10 roles y ganancia en 1 de 10 roles a diferencia de los roles ocupacionales en las mujeres sin cáncer de mama en el tiempo presente. CONCLUSIONES: Se encontró que la continuidad de los roles ocupacionales en mujeres con cáncer de mama fue menor en frecuencia que las mujeres sin cáncer de mama en el periodo de tiempo presente. Por lo cual se evidencia que el impacto del cáncer también afecta las dimensiones del hacer ocupacional restringiendo la participación ocupacional activa en los roles. PALABRAS CLAVE: Oncología, Roles ocupacionales, Terapia Ocupacional / --- INTRODUCTION: In Peru, breast cancer is third placed with 10,3% compared to others types of cancer according to topographical location, and both sex and age in the country. To know the modifications in the participation of roles in women with breast cancer under chemotherapy treatment, we would show that the cancer impact is not only biologic and/or anatomic type that comes from illness but also affects the dimensions of the occupational participation of human being. OBJECTIVES: To determine the occupational roles in women with breast cancer under chemotherapy treatment. METHOD: An observational, cross sectional and prospective study implemented. PLACE: The National Institute of Neoplastic Diseases and general Peruvian population. PARTICIPANTS: 25 women with breast cancer under chemotherapy treatment and 25 women without breast cancer. INTERVENTION: 25 women with and without breast cancer were interviewed to know if their occupational roles varies among the study groups. Results were obtained through the application of the instrument “List of roles” and sociodemographic survey. The statistical analysis was carried out by descriptive analysis of the sociodemographic variables and analysis of frequencies in the variables of roles modifications, as well as the relationship between the two study groups. MAIN OUTCOME MEASURES: Active or not active in the past; loss, gain, continuity or absence in the present and participation or not participation in the future of occupational roles. RESULTS: We observed that women with breast cancer under chemotherapy treatment have higher lost in 4 out of 10 roles and gain in 1 out of 10 roles unlike occupational roles in women without breast cancer at the present time. CONCLUSIONS: It was found that the continuity of occupational roles in women with breast cancer was lower in frequency than women without breast cancer in present time; therefore, it is evidenced that cancer impact also affects the dimensions of the occupational participation restricting the active occupational participation in the roles. KEYWORDS: Oncology, Occupational Roles, Occupational Therapy. / --- INTRODUÇÃO: No Peru, o câncer de mama ocupa o terceiro lugar com 10,3% no país. Conhecer as modificações na participação dos papéis ocupacionais das mulheres com câncer de mama em tratamento com quimioterapia, permitirá evidenciar que o impacto do câncer não é só de tipo biológico ou anatômico a causa da doença, mas também pode afetar as dimensões do fazer ocupacional do ser humano. OBJETIVOS: Determinar os papéis ocupacionais em mulheres com câncer de mama em tratamento com quimioterapia. MÉTODO: Foi feito estudo observacional, de tipo transversal, descritivo e prospectivo. LUGAR: Instituto Nacional de Doenças Neoplásicas e a população peruana em geral. CASUÍSTICA: 25 mulheres com câncer de mama em tratamento com quimioterapia e 25 mulheres sem câncer de mama. INTERVENÇÕES: Entrevistou-se 50 mulheres com e sem câncer de mama para conhecer se os papéis ocupacionais influenciam nas mudanças nos grupos de estudo, obteve-se os resultados com a aplicação do instrumento “Lista de Identificação dos Papéis Ocupacionais” e a entrevista sócio demográfica. A análise foi realizada com análise descritiva de variáveis sócio demográficas e análise de frequências nas variáveis de modificações de papéis, assim como a relação de ambos grupos de estudo. PRINCIPAIS MEDIDAS DE RESULTADO: Activo ou não activo no passado; perdas, ganância, continuidade e ausência no presente e participação ou não participação no futuro nos papéis ocupacionais. RESULTADOS: Observou-se que as mulheres com câncer de mama em tratamento com quimioterapia tiveram mais perdas em 4 dos 10 papéis ocupacionais e ganância em 1 dos 10 papéis ocupacionais, e na diferença dos papéis das mulheres sem câncer de mama no tempo presente. CONCLUSÕES: Encontrou-se que a continuidade dos papéis ocupacionais em mulheres com câncer de mama foi menor que as mulheres sem câncer de mama no presente, como consequência se evidenciou que o impacto do câncer também afeta as dimensões do fazer ocupacional restringindo a participação ativa ocupacional nos papéis ocupacionais. Descritores: Oncologia, papéis Ocupacional, Terapia Ocupacional. / Tesis