Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T20:55:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 294458.pdf: 989754 bytes, checksum: 15287b1549e9da76821454d09488a9e8 (MD5) / A agmatina é uma substância endógena que possui características de um neuromodulador. Devido à abundância de agmatina no sistema nervoso central, particularmente no hipocampo, alguns estudos recentes têm investigado o papel desta poliamina sobre processos de aprendizagem e memória. O principal objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da administração exógena de agmatina (10, 50 e 100 mg kg, i.p.) nos prejuízos da memória espacial de curto e longo prazo decorrentes do envelhecimento ou de um pré-tratamento com escopolamina (1 mg/kg, i.p.) em ratos avaliados nos testes do labirinto aquático e esquiva inibitória do tipo step-down. Ratos Wistar machos envelhecidos (15 meses de idade) apresentaram prejuízos locomotor e cognitivo decorrentes da idade nos testes comportamentais realizados. A escopolamina, através do bloqueio de receptores muscarínicos para acetilcolina, induziu prejuízo cognitivo no grupo de animais adultos jovens (3 meses de idade). De maneira importante, o tratamento agudo com agmatina (50 ou 100 mg/kg, i.p.) foi capaz de reverter os prejuízos da memória de curto e longo prazo relacionados ao envelhecimento em ratos avaliados no teste da esquiva inibitória do tipo step-down. No entanto, o tratamento agudo com estas mesmas doses de agmatina reduziu o desempenho motor dos animais na caixa de atividade. Além disso, agmatina não foi capaz de reverter os deficits de aprendizado e memória induzidos pela escopolamina em ratos adultos jovens. Em conjunto, os resultados do presente estudo demonstram que o tratamento agudo com agmatina é capaz de reverter os prejuízos nas memórias de curto e longo prazo associados ao envelhecimento em roedores e que esta resposta parece ser independente do sistema colinérgico.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T21:21:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 293182.pdf: 1281906 bytes, checksum: 14b56e718ce2558c2e40f5fc05078798 (MD5) / Estudos recentes da literatura têm sugerido que um episódio de infarto miocárdico agudo pode deflagrar a atividade de linfócitos reativos aos próprios tecidos cardíacos. Nesse contexto, é possível que uma autorreatividade imune-inflamatória pós-infarto tenha conseqüências prejudiciais ao reparo tecidual e função cardíaca. No presente trabalho foi investigado se um reforço na tolerância imunológica aos componentes cardíacos, promovido através da exposição destes componentes pela via oral, poderia modificar o curso do reparo tecidual cardíaco pós-infarto. Para tal, lesões miocárdicas tipo-infarto foram deflagradas por meio da administração de altas doses de isoproterenol (140 µmol/kg, i.p.), e o reparo tecidual foi observado morfologicamente por um período de até 60 dias. A funcionalidade cardíaca foi analisada através da técnica de órgão isolado e perfundido, e a atividade de células obtidas a partir dos linfonodos drenantes foi avaliada in vitro. A tolerância imunológica aos componentes cardíacos foi promovida pela administração oral de extrato cardíaco (20 mg de proteínas, 7 dias antes da administração de isoproterenol). Observou-se que após 14 dias da indução das lesões miocárdicas, linfócitos coletados a partir dos linfonodos mediastinais foram ativados in vitro com proteínas cardíacas, respondendo com proliferação celular. Em contraste, linfócitos obtidos dos linfonodos de animais não infartados ou de animais que receberam administração oral dos antígenos cardíacos previamente ao infarto não apresentaram resposta proliferativa decorrente do estímulo com antígenos cardíacos. Como consequência, animais tornados tolerantes ao tecido cardíaco seguiram um reparo tecidual pós-infarto com menor infiltrado leucocitário, menor deposição de colágeno e menor prejuízo motor. Os dados obtidos no presente trabalho sugerem que uma atividade autoimune patogênica toma parte nos fenômenos de reparo tecidual pós-infarto favorecendo eventos pró-fibróticos exacerbados e se correlacionando com maior prejuízo motor do coração. Ademais, esses eventos imunológicos direcionados ao próprio coração podem ser modificados por meio da ingestão prévia de componentes cardíacos propiciando um melhor reparo das lesões miocárdicas. / Following a myocardial infarction, lymphocytes infiltrate myocardial lesions. They may react with heart components and it has been suggested that that this may be disadvantageous to heart healing. In the present work we investigated whether ingestion of a crude rat heart extract tipping the balance in favor of oral tolerance, would modify the course of post-infarction myocardial repair. Infarction-like myocardial lesions were induced in Wistar rats by injection of high doses of isoproterenol. The healing process was accompanied morphologically and functionally for 60 days. Cardiac function was evaluated using isolated and perfused heart (Langendorff) preparation. At day 14 after isoproterenol, lymphocytes collected from mediastinal lymph nodesrates proliferated when exposed in vitro to myocardial extracts. In contrast, lymphocytes from rats receiving heart extract by gavage 7 days before isoproterenol, did not proliferate. Furthermore, gavaged rats presented a milder inflammatory infiltrate, less collagen deposition and improved cardiac performance when compared to animals that ingested saline before myocardial infarction. The present findings suggest that pathogenic autoimmune activity during cardiac infarction favors fibro-proliferative responses and loss of function. When this course of events is modified by interfering with natural tolerance to heart proteins, the healing process proceeds with less inflammation and fibrosis and better organ function.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Nutrição / Made available in DSpace on 2012-10-22T22:41:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 232937.pdf: 515516 bytes, checksum: 4e55d1bb2f65ff8e5018d523246cf319 (MD5) / O desequilíbrio das concentrações de lipídeos no sangue tem sido relacionado com processos ateroscleróticos, sendo ainda postulado que a ingestão de óleo de peixe pode interferir na referida alteração. O objetivo do presente trabalho foi investigar os efeitos da suplementação com ácido graxo w-3, nas doses de 0,5 e 1,0g/kg/dia, nos lipídeos sangüíneos de ratos machos Wistar, submetidos ou não ao teste do nado. No protocolo de 0,5g/kg/dia, quando os valores finais de cada grupo experimental foram comparados aos iniciais em relação às concentrações de colesterol total, foi observada redução significativa proporcionalmente maior nos suplementados, com destaque ao grupo w-3+nado, apesar de o controle+nado também ter apresentado diminuição. No ensaio de 1,0g/kg/dia, todos os grupos apresentaram diminuição, que foi maior, no w-3+nado e, a seguir, no w-3. Quanto aos triglicerídeos, foram encontradas reduções em todos os grupos experimentais do protocolo de 0,5g/kg/diano último dia, enquanto que, no de 1,0g/kg/dia, a diminuição foi significativa nos grupos w-3 e w-3+nado. Quanto ao HDL-colesterol, no protocolo de 0,5g/kg/dia, foi encontrado aumento nos animais que não foram suplementados, enquanto que em todos os grupos de 1,0g/kg/dia houve uma diminuição do HDL-colesterol. Estudos adicionais com outras doses também são necessários para a compreensão da relação entre a ingestão de óleo de peixe e as concentrações de lipídeos sangüíneos. The inbalance in blood lipid concentrations has been related to atherosclerotic processes with it also being postulated that the intake of fish oil might interfere in such an alteration. The objective of the present study was to investigate the effects of fatty acid w-3 supplementation, at doses of 0.5 and 1.0g/kg/day, on blood lipids of Wistar male rats subjected or not to a swim test. In the 0.5g/kg/day protocol, when final values of each experimental group where compared to initial ones, regarding total holesterol concentrations, a proportionally larger significant reduction was observed in the supplemented animals, mainly in the w-3+swim group, although control+swim also presented a decrease. In the 1.0g/kg/day experiment, all groups presented a decrease, which was larger, respectively, in w-3+swim, followed by w-3. As for triglycerides, decreases were found in all experimental groups of the 0.5g/kg/day protocol, on the last day, whereas in the 1.0g/kg/day protocol, the decrease was significant in groups w-3 and w-3+swim. As for the HDL-cholesterol, in the 0.5g/kg/day protocol, an increase was found in animals that were not supplemented, whereas in all 1.0g/kg/day groups there was a decrease of HDL-cholesterol. Further studies, including other doses, are necessary to understand the relationship between fish oil intake and blood lipid concentrations.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-graduação em Neurociências / Made available in DSpace on 2012-10-23T22:22:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 249957.pdf: 305651 bytes, checksum: 44670f55984b0c3df4c99c7e64d2cf58 (MD5) / As linhagens de ratos Floripa H e Floripa L, selecionadas bidirecionalmente para extremos de locomoção no centro do teste do campo aberto (CA), um comportamento relacionado à emocionalidade, foram propostas como um modelo animal para estudar a genética da ansiedade. As duas influência de dois locus para traços quantitativos (QTLs). Ambos QTLs foram previamente identificados em uma geração F2 resultante do acasalamento de ratos LEW e SHR afetando a ativividade locomotora no centro do CA, o mesmo fenótipo foi utilizado como parâmetro de seleção nas linhagens Foripa. Os dois QTLs, um no cromossomo 4 e outro no 7, respectivamente, foram denominados de open field inner locomotion QTL 1 (Ofil1) e open field inner locomotion QTL 2 (Ofil2). O presente estudo teve como objetivo verificar se os QTLs (Quantitative Trait Locus) Ofil1 e Ofil2, sabidamente associados a comportamentos emocionais em ratos derivados das linhagens isogênicas LEW e SHR, estariam da mesma forma contribuindo para este fenótipo comportamental nas linhagens Floripa, selecionadas a partir de uma resultante de um intercruzamento entre linhagens parentais ainda não investigadas do ponto de vista genotípico. Com este objetivo, foram utilizados quatro marcadores moleculares do tipo microssatelite, dois flanqueando o pico de Ofil1 (D4RAT59 e D4MGH27) e dois flanquando o pico de Ofil2 (D7MGH11 e D7RAT35), que se mostraram polimórficos para o modelo animal em estudo. Para verificar se o genótipo destas duas regiões estaria influenciando o fenótipo selecionado, ratos de cinco gerações foram genotipados para os quatro marcadores utilizados. Mudanças nas freqüências alélicas e genotípicas ao longo do processo de seleção foram avaliadas para verificar se a seleção imposta ao fenótipo foi acompanhada por divergências genotípicas entre as linhagens. Foram observadas alterações nas freqüências genotípicas em todos marcadores moleculares para ambos os QTLs, porém somente os genótipos para os marcadores no locus Ofil1, pareceram estar significativamente correlacionados com a variação no fenótipo selecionado. Este resultado sugere que nesta região do genoma deve existir um ou mais genes contribuindo para a variação interindividual na locomoção na área aversiva do teste do CA. As alterações nas freqüências genotípicas observadas para os marcadores do QTL Ofil2, por aparentemente não apresentarem correlação com o fenótipo, parecem ser resultado de deriva genética aleatória, talvez com pequena contribuição. Portanto, através deste trabalho, corrobora-se a influência do locus Ofil1,em diferentes linhagens de ratos, para um comportamento relacionado à emocionalidade, porém o efeito de Ofil2 não pode ainda ser descartado. The strains of rats named Floripa H and L, bidirectionaly selected to extremes of locomotion in the centre of the test of open field (OF), an emotionality-related behavior, were proposed as an animal model to study the genetics of anxiety. The two strains were developed in order to investigate the influence of two quantitative trait locus (QTLs) Both QTLs were previously identified in a generation F2, resulting from the mating of rats and LEW SHR, affecting the locomotor activity in OF test, the same phenotype was used as a parameter for selection in Floripa strains. The two QTLs, one on chromosome 4 and another at 7, respectively, were called open field inner locomotion QTL 1 (Ofil1) and open field inner locomotion QTL 2 (Ofil2). This study aimed to ascertain whether the QTLs (Quantitative Trait Locus) Ofil1 and Ofil2, known associated with emotional behavior in rats isogenic lines derived from LEW and SHR, would be the same way contributing to this behavioral phenotype among strains Floripa, selected from of a generation of animals resulting from an intercruzamento between parental strains have not yet investigated the point of view genotipic. Two loci for central locomotion in the open field test (OF) were identified in the F2 generation resulting from the intercross of LEW and SHR rats. A locus on chromosome 4 and another on chromossome 7, respectively, were named Ofil1 and Ofil2. The present study aimed to verify whether the QTLs (Quantitative Trait Locus) Ofil1 and Ofil2, known to be associated with emotional behaviors in rats derived from the strains LEW and SHR, would contribute to the same behavioral phenotype in Floripa H and L rats, selected from another population of animals. With this objective, we used four molecular microssatelite markers, two flanking the peak of Ofil1 (D4RAT59 and D4MGH27) and two flanking the peak of Ofil2 (D7MGH11 and D7RAT35), which were polymorphic for the animal population under study. To verify whether the genotype of these two regions would influence the selected phenotype, five generations of rats were genotyped for the four markers used. Changes in genotypic and allelic frequencies throughout the process of selection were evaluated to determine if the selection on the phenotype was accompanied by genotypic differences between the strains. There were changes in genotypic frequencies in all molecular markers for both QTLs, but only the markers on locus Ofil1, seemed to be significantly correlated with the changes in the phenotype. This result suggests that this region of the genome may contain one or more genes contributing to the interindividual variation in locomotion in the aversive area test of the OF. The changes in genotypic frequencies observed for the QTL Ofil2 markers, had apparently no correlation with the phenotype, as it appeared to be the result of random genetic drift, perhaps with little effect of selection. therefore, through this work, we confirm the influence of the locus Ofil1, in different strains of rats, on an emotionality-related behavior, but the effect of Ofil2 is not totally discarded.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-24T02:19:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 250543.pdf: 2446379 bytes, checksum: 59873c412bb4809551a68f17adbea7a1 (MD5) / Recentemente, estudos têm demonstrado a capacidade do sistema endocanabinóide (eCB) em modular estados emocionais e a extinção de memórias aversivas em animais. Em um estudo pioneiro foi demonstrada a liberação de eCB no cérebro de camundongos durante a extinção do condicionamento aversivo (CA), destacando a influência que manipulações farmacológicas do sistema eCB poderiam exercer sobre as memórias aversivas. Sendo assim, o aumento da transmissão eCB, por inibição da sua recaptação e/ou metabolismo, parece ser uma alternativa farmacológica bastante interessante. Além do mais, acredita-se que o canabidiol (CBD), um fitocanabinóide não-psicotomimético, possa agir inibindo a recaptação e degradação de anandamida, aumentando seus níveis endógenos em áreas específicas do cérebro. Portanto, o objetivo deste trabalho foi comparar os efeitos da administração intracerebroventricular (i.c.v.) de AM 404, um inibidor da recaptação de anandamida, e CBD, na extinção do CA. Ratos Wistar machos adultos foram condicionados e 24 h após o condicionamento foram injetados i.c.v. com AM404 (0,2; 1,0; 2,0 g/ l) ou CBD (0,2; 1,0; 2,0 g/ l) e submetidos a três sessões de extinção. Cada sessão constituiu de uma exposição de 9 min à gaiola de condicionamento (total de 3 exposições com intervalo de 24 h). Um teste adicional de 3 min, na ausência de drogas, foi realizado 24 h após a última sessão de extinção no intuito de verificar a persistência de um possível efeito das drogas sobre a extinção do CA. A administração i.c.v. de AM404 (1,0 µg/µl) e CBD (2,0 µg/µl) facilitou a extinção do CA contextual, sendo que estes efeitos prevaleceram mesmo nos testes sem droga realizados após a última sessão de extinção. Estes efeitos foram revertidos pela administração prévia do antagonista dos receptores CB1, SR141716A (0.2 mg/kg, i.p.), mas não pelo antagonista dos receptores VR1, capsazepina (CPZ) (5,0 µg/µl, i.c.v.), sugerindo então o envolvimento dos receptores canabinóides CB1 nos efeitos facilitatórios destas drogas sobre a extinção do CA contextual. Efeitos do tipo ansiolítico não parecem ter contribuído de forma direta para os efeitos facilitatórios do AM404 e do CBD sobre a extinção do CA contextual, visto a ausência de efeitos nos animais "naïve" expostos ao LCE, porém, podem ter contribuído de uma forma indireta, como sugerida pelos efeitos anti-ansiogênicos destas drogas observados no teste do LCE potencializado pelo medo. Visto que o CBD e AM404 podem estar interferindo com a recaptação de eCB, este trabalho sugere que o aumento dos níveis de endocanabinóides por inibidores da recaptação pode constituir uma estratégia original para o tratamento de transtornos emocionais relacionados à recordação de eventos traumáticos.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-22 / As espermatogônias tronco são células responsáveis pela produção contínua dos gametas masculinos, os espermatozóides. Essas células se diferenciam a partir dos gonócitos, porém, pouco se sabe sobre sua biologia e sobre os processos pelos quais elas se diferenciam. Embora sejam células de grande importância, não há informações precisas sobre a dinâmica de formação dessas células a partir dos gonócitos nem sobre o número total e a distribuição das espermatogônias indiferenciadas nos testículos, o que dificulta a interpretação de estudos nessa área. A proposta deste trabalho foi analisar a proliferação, morte e distribuição dos gonócitos e pré-espermatogônias nos testículos de ratos no desenvolvimento embrionário e pós-natal, em períodos críticos do desenvolvimento testicular. Foram utilizados ratos com idades de 19dpc, 1, 3, 5, 8, 11 e 15dpp, cujos testículos foram analisados quanto à distribuição, proliferação e apoptose dos gonócitos e pré-espermatogônias durante o desenvolvimento testicular. A análise morfológica dos testículos, o método de TUNEL, a imunomarcação das proteínas p53 e caspase-3 clivada foram empregados para investigação de apoptose, enquanto a densidade numérica (Nv), quantificação de gonócitos, densidade de comprimento cordonal (Lv), comprimento cordonal total (L), volume total dos cordões seminíferos e estimativa do número total de gonócitos foram utilizados para investigação da distribuição dessas células. A citometria de fluxo foi empregada para avaliar a proliferação dos gonócitos através do uso do kit Guava Cell Cycle. Para identificar as espermatogônias indiferenciadas nas idades de 11 e 15dpc foi utilizada a imunomarcação da proteína OCT4. Durante a análise morfológica testicular observou-se que ocorre redução do número de gonócitos por seção testicular nos primeiros cinco dias após o nascimento e que as primeiras espermatogônias são observadas aos 8dpp. Foi observado aumento da Lv nos animais de 1dpp em relação aos de 19dpc. Dos 3 aos 11dpp, houve aumento progressivo da Lv, que voltou a diminuir aos 15dpp. Houve crescimento muito acentuado dos cordões seminíferos entre 19dpc e 1dpp. Após o nascimento, o crescimento continuou até os 15dpp, mas foi menos intenso. Já a Nv de gonócitos foi inversamente proporcional ao crescimento testicular, enquanto o número estimado de gonócitos foi cerca de quatro vezes maior aos 1dpp em relação aos de 19dpc. Isto explica os dados obtidos a partir da análise morfológica na qual a frequência de gonócitos por seção testicular diminuiu nos cinco primeiros dias após o nascimento. Após o nascimento, o número de gonócitos permaneceu estável até os 5dpp, sugerindo que não há morte ou proliferação dessas células nessas idades. Não foram detectados gonócitos em apoptose nas idades estudadas, embora corpos apoptóticos tenham sido observados. Esses corpos apoptóticos eram muito raros dos 19dpc aos 5dpp e começaram a se tornar mais frequentes aos 8dpp, atingindo sua frequência máxima aos 15dpp. Também aos 15dpp, células positivas para TUNEL e caspase 3 clivada foram observadas, mas essas células não puderam ser identificadas devido ao fato de sua morfologia já estar consideravelmente alterada. Contudo, todos os gonócitos de 19dpc até 8dpp foram positivos ao emprego da caspase-3 clivada, embora apresentassem morfologia normal. Isto indica que a caspase-3 clivada pode ter outra função, que não seja apoptótica, no desenvolvimento dos gonócitos. A análise ao citômetro de fluxo nas idades de 19dpc a 5dpp mostrou que mais da metade dos gonócitos encontravam-se em fase G0/G1 do ciclo celular, indicando que muitas estão em quiescência nestas idades. Não houve marcação da proteína OCT4 nas espermatogônias, o que impossibilitou a quantificação dessas células nas idades de 8, 11 e 15dpp. Os dados do presente estudo sugerem que a diminuição da frequência de gonócitos por seção testicular nos primeiros dias após o nascimento não é consequência de apoptose dessas células, como tem sido sugerido na literatura, mas sim de sua redistribuição ao longo dos cordões seminíferos. Como não há indícios de que estas células estejam proliferando nessas idades, menos gonócitos são observados por seção testicular. Concluiu-se ainda que a proteína OCT4 não está presente nos testículos de rato nas idades pós-natais, diferentemente do observado em camundongo. Estudos estão sendo realizados para verificar quando os gonócitos retomam a proliferação, quando a população definitiva de espermatogônias tronco é formada e quais seriam os marcadores ideais para estudos das espermatogônias indiferenciadas no rato. / Spermatogonial stem cells (SSC) are responsible for the constant production of the male gamete. These cells differentiate from the gonocytes, but little is known about its biology and about the mechanisms of their differentiation. Despite the importance of these cells, the information about the dynamic of formation of these cells from the gonocytes or about the total number and distribution of the undifferentiated spermatogonia is not precise, causing problems to the interpretation of the studies in this area. The goal of this study was to analyze the proliferation, death and distribution of the gonocytes and pre-spermatogonia in the rat testis in embryonic and postnatal life. Rat testes were collected at 19dpc and at 1, 3, 5, 8, 11 and 15dpp for the analysis of the distribution, proliferation and apoptosis of the gonocytes and pre-spermatogonia during key periods of testicular development. To investigate gonocyte apoptosis, four methods were used: morphological analysis, TUNEL method and immunostaining of p53 and cleaved caspase 3. The number of gonocytes was investigated using the numerical density (Nv) and an estimative of the total number of these cells was obtained. These data were associated with the seminiferous cord length density (Lv), the total cordonal length (L) the total volume of the seminiferous cords and the total estimated number of gonocytes were used to investigate the distribution of these cells. Guava flow citometry was used to evaluate the proliferation of the gonocytes. To identify the undifferentiated spermatogonia at 11 and 15dpp, OCT4 labeling was used. During testicular morphological analysis it was observed a reduction of the number of the gonocytes per testicular section during the first five days after birth and the first spermatogonial cells were seen at 8dpp. The Lv increased in the 1dpp rats in relation to 19dpc rats. From 3 to 11dpp, Lv increased progressively and subsequently decreased at 15dpp. There was very accentuated growth of the seminiferous cords (L) between 19dpc and 1dpp. The growth progressed until 15dpp, although it was less intense. The gonocyte Nv was inversely proportional to the seminiferous cord growth, while the total estimated number of gonocytes was about four times higher at 1dpp in relation to the 19dpc embryos. This explains the data obtained from morphological analysis, in which the frequency of gonocytes per testicular section decreased in the first days after birth. The number of gonocytes remained stable from 1 to 5dpp, suggesting that the gonocytes do not die or proliferate in this period. Apoptotic gonocytes were not detected in all ages, although apoptotic bodies were observed. These apoptotic bodies were rare between 19dpc and 5dpp, and at 8dpp they became more frequent, and reached the highest frequency at 15dpp. Also at 15dpp, TUNEL positive-cells and cleaved caspase3-positive cells were observed, although these cells could not be indentified due to the fact that their morphology was already changed. Nevertheless, all gonocytes between 19dpc and 8dpp were positive to cleaved caspase-3, although they presented normal morphology. This suggests that cleaved caspase-3 could have other function that not apoptotic in gonocytes development. The flow citometry analysis between 19dpc and 5dpp showed that more than half of the gonocytes was at G0/G1 phase of the cell cycle, proving that lots of them are quiescent in these ages. There were no OCT4-positive spermatogonia, what impaired the quantification of these cells at 8, 11 and 15dpp. The data of this study suggest that the decrease in the frequency of gonocytes per testicular section in the first days after birth is not due to apoptosis, as has been suggested in the literature, but rather to their redistribution throughout the seminiferous cords. Since there is no evidence that these cells are proliferating in these ages, less gonocytes are seen per testicular section. It has also been concluded that OCT4 protein is not present in rat testis in postnatal ages, differing from what is observed in the mouse testis. Further studies are been performed to verify when gonocytes resume its proliferation, when the final SSC population is established and which markers could be useful to study undifferentiated spermatogonia in the rat. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-26 / A privacao de sono (PS) e um modelo bem estabelecido para verificar os efeitos prejudiciais da vigilia prolongada e para o estudo das funcoes do sono. Durante este tipo de manipulacao, algumas alteracoes fisiologicas sao observadas, sendo notoria a reducao da capacidade em manter o padrao termorregulatorio, marcada por uma elevacao da temperatura corporea logo nas primeiras 24 horas de PS, que se mantem por pelo menos 96 horas de protocolo de PS. Sabe-se tambem que a PS induz aumento na producao de citocinas, como a Interleucina-1 (IL-1), um pirogeno classico, que medeia o comportamento doentio observado em animais submetidos ao desafio imunologico com lipopolissacarideo (LPS). Ratos submetidos a PS e ratos submetidos a administracao de LPS, apresentam aumento de citocinas e aumento de temperatura. A fim de investigar a participacao da IL-1 no aumento de temperatura induzido pela PS e comparar a magnitude e natureza dessa hipertermia com aquela produzida por LPS, administramos 2 ƒÊg/Kg de anticorpo anti-1 via intraperitoneal (i.p.) em ratos PS pelo metodo das plataformas multiplas modificado ao longo de 96 horas e em ratos tratados com 100 ƒÊg/Kg de LPS (i.p.). O presente estudo fornece evidencias de que a IL-1 nao desempenha papel primordial na hipertermia induzida pela privacao de sono, ao contrario da febre induzida por LPS, que tem participacao notavel da IL-1. Tal fato sugere o envolvimento de outros mecanismos e mediadores, bem como a sinergia entre estes na hipertermia induzida pela PS. Tambem identificamos que o aumento de temperatura e verificado dentro da 2a hora de PS, enquanto que o aumento de temperatura induzida por LPS e observado 4 horas apos sua administracao, sugerindo diferenca na ativacao temporal ou mesmo a existencia de mecanismos distintos para o disparo de ambos. Sabe-se que existe um alto custo metabolico associado ao aumento da temperatura corporea e sua manutencao, por isso aventa-se que a elevacao de temperatura verificada na PS nao seja apenas um efeito do estresse, mas um fenômeno determinado por outros fatores, ainda desconhecidos e que precisam ser melhor investigados. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-12-05T19:54:22Z No. of bitstreams: 1 Rhyna Carla da Cunha Costa Avaliação in vitro... 2008.pdf: 63652316 bytes, checksum: b5b47c90094bcc1316f3f0c6a163aa92 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-05T19:54:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rhyna Carla da Cunha Costa Avaliação in vitro... 2008.pdf: 63652316 bytes, checksum: b5b47c90094bcc1316f3f0c6a163aa92 (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Na primeira parte desse estudo, foi avaliada in vitro a influência de 2 diferentes graus de N-acetilação (DA) de matrizes tridimensionais (3D) de quitosana sobre a viabilidade, adesão, distribuição e proliferação de células mesenquimais extraídas da medula óssea de ratos (rBMSC's), assim como, a influência do soro autólogo de rato (RS), sobre os mesmos aspectos, como fonte de proteínas e fatores de crescimento. Para tanto, 10 animais foram utilizados para extração do RS e das rBMSC's. As células foram semeadas e induzidas a osteodiferenciação sobre matrizes 3D de quitosana, com FBS (Soro Fetal Bovino) e sem adição do RS. Na segunda parte dessa análise, foi analisado in vivo o comportamento biológico de matrizes 3D de quitosana para a regeneração óssea, com DA's de 4 e 15%, quando implantadas em defeitos com morfologia e dimensões criticas, criados em calvária de rato. Utilizou-se 80 animais, distribuídos em 4 grupos, com 5 animais cada, avaliados nos pontos biológicos de 7, 15, 45 e 120 dias. Os grupos foram divididos em: Gl Controle - Sem implantação de biomaterial; Gil - Implantação de matriz de quitosana 4%; GUI - Implantação de matriz de quitosana 15%; GIV - Implantação de matriz de colágeno tipo I. Os espécimes foram fixados e incluidos em blocos de resina e cortados em micrótomo de alto impacto, para tecidos não descalcificados e corados em H/E, Picrosírius Red e Tricrómio de Masson Goldner para avaliação histológica em microscopía de Luz. Também, foram confeccionados blocos em parafina para análise imunohistoquímica da formação vascular utilizando-se PECAM-1. Os resultados in vitro demonstraram que as rBMSC's apresentaram-se viáveis quando cultivadas nos 2 tipos de soro. Mais ainda, as rBMSC's aderiram e proliferaram sobre as matrizes de quitosana, em especial sobre a de 4%. Em adição, os achados sugeriram que o RS apresenta as proteínas e fatores necessários para o crescimento das rBMSC's. Quando analisado o comportamento biológico das matrizes 3D in vivo, concluiu-se que, muito embora, as matrizes tenham sido consideradas biocompatíveis, e que tenham tido a sua região central permeada por vasos sangüíneos, não foi encontrada formação óssea de novo nos sítios de implantação. / In the first part of this study, an in vitro evaluation was made of the influence of 2 different grades of N-acetylation (DA) of tridimensional matrixes (3D) of chitosan on the viability, adhesion, distribution and proliferation of mesenchyme cells extracted from the bone marrow of rats (rBMSC's), as well as the influence of autologous rate serum (RS), on the same aspects, as a source of proteins and growth factors. For this purpose, 10 animals were used for the extraction of RS and rBMSC's. The cells were seeded and induced to osteodifferentiate on 3D chitosan matrixes, with FBS (Fetal Bovine Serum) and with the addition of RS. In the second part of this analysis, the biologic behavior of the 3D chitosan matrixes was analyzed in vivo for bone regeneration, with DA's of 4 and 15%, when implanted in defects with critical morphology and dimensions, created in rat calvarlas. Eighty animals distributed into 4 groups with 5 animals in each were used, and evaluated at the biological time points of 7, 15, 45 and 120 days. The groups were divided as follows: Gl Control - Without biomaterial implantation; Gil - Implantation of chitosan matrix at 4%; Gill - Implantation of chitosan matrix at 15%; GIV - Implantation of collagen type I matrix. The specimens were fixed and embedded in blocks of resin, and cut in a high impact microtome for non decalcified tissues, and stained with H/E, Picrosirius Red and Goldner’s Masson Trichrome for histomorphometric evaluation under light microscopy. Paraffin blocks were also made for immunohistochemical analysis of the vascular formation, using PECAM-1. The results in vitro demonstrated that the rBMSC's presented as viable when cultivated in the 2 types of serum. Furthermore, the rBMSC's adhered and proliferated on the chitosan matrixes, especially on the one with 4%. In addition, the findings suggest that RS presents the proteins and growth factors necessary for the growth of the rBMSC's. When the biologic behavior of the 3D matrixes were analyzed in vivo, it was concluded that although the matrixes had been considered biocompatible, and also had their central regions permeated by blood vessels, no de novo bone formation was found at the implantation sites.

Foram conduzidos dois estudos, um com o objetivo de caracterizar e agrupar cultivares de trigo e de aveia produzidas na região Sul do País, de acordo com a sua composição química, e outro visando estabelecer relações entre as variações nos teores e proporções de fibra insolúvel e solúvel para um mesmo teor de fibra total, com respostas biológicas de não ruminantes. No primeiro, amostras de treze cultivares de trigo e nove de aveia, obtidas em dois anos de cultivo, foram caracterizadas quanto a composição química e características macrométricas, e agrupadas quanto as medidas de importância nutricional. No segundo, realizou-se dois experimentos, um com frangos de corte em crescimento alimentados com ração basal composta por milho ou obtidas mediante a substituição do milho por grãos de trigo CEP 24 ou BR 32; e outro com ratos Wistar em crescimento alimentados com ração purificada ou obtidas mediante substituição total da celulose e parcial da caseína e amido de milho por grãos descascados de aveia UFRGS 15 ou UFRGS 18. O ano de cultivo influenciou os teores de amido, proteína bruta e fibra solúvel para trigo; e de amido, para aveia. As variações entre cultivares de trigo e aveia nas medidas amido, proteína bruta, fibra total, solúvel e insolúvel permitiram classificá-las em grupos com distintas possibilidades de utilização na nutrição. A elevação dos teores de fibra insolúvel aumentou o teor de umidade da digesta, diminuiu o ganho de peso das aves e, provavelmente, a digestão e absorção de nutrientes nos ratos, sem causar alterações no desaparecimento da matéria seca, no teor de umidade das excretas/fezes e no tempo de recuperação de 50% do indicador (T50). O aumento de fibra solúvel não influiu sobre o teor de umidade das excretas/fezes e sobre o T50, mas diminuiu o desaparecimento da matéria seca, sem causar efeitos negativos sobre o ganho de peso das aves. As proporções e interações entre as frações insolúvel e solúvel da fibra talvez possam explicar a ausência de alterações sobre o T50 para as espécies animais. As diferentes fontes de fibra causaram efeitos distintos sobre algumas medidas de resposta biológica. / Two studies were conducted, the first to estimate and ciassify wheat and oat cultivars based on chemical composition, and the second to estabiish the relationship among the leveis and proportions of insoluble and soluble fiber and the biological response of nonruminants. Chemical composition, hectolitric weight and 1,000 kernel weight of thirteen wheat cultivars and nine oat cultivars were evaluated for two years, and classified based on some indicators of the nutritional grain quality. The experiments with animais were conducted by using broiler chickens fed a com control diet or with two other diets that were formulated substituting ali com by grain wheat cultivars CEP 24 or BR 32; and by using rats Wistar fed a purified control diet or with two others diets that were formulated substituting ali cellulose and part of corn starch and casein by dehulled grain oat cultivars UFRGS 15 and UFRGS 18. Significant differences for wheat starch, crude protein and soluble fiber; and oat starch were observed between the years. The variation on the starch, crude protein, total fiber, insoluble fiber and soluble fiber showed the possibie use of wheat cultivars and oat cultivars in specific strategies for nutrition. The augment of the insoluble fiber resulted in the increase of the digesta moisture, decrease of the weight gain for broiler chickens, and probabie decrease of the nutrients digestion and absorption by rats, with no influence on the dry matter disappearance, the excreta/fecal moisture and the time of the 50% appearance of the marker in excreta/feces (T50). The increase of soluble fiber resulted in the decrease of the dry matter disappearance, with no influence on the weight gain for broiler chickens, the digesta moisture and excreta/fecal moisture, and the T50. The variation in the proportions and the interactions of insoluble and soluble fiber may expiain the non alterations in the mean retention time in the animais. The different source of fiber resulted in the different biological response.

Submitted by Barroso Patrícia (barroso.p2010@gmail.com) on 2014-07-25T13:46:36Z No. of bitstreams: 1 PDF Final.pdf: 2729478 bytes, checksum: a1e7c7e0b6e4c299aa53aaaf607b6cf0 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-25T13:46:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF Final.pdf: 2729478 bytes, checksum: a1e7c7e0b6e4c299aa53aaaf607b6cf0 (MD5) / FAPESB / Em decorrência de perdas ósseas extensas, os procedimentos de enxertia são amplamente utilizados. Como alternativa a estas técnicas, a bioengenharia tecidual busca desenvolver um biomaterial ideal, que atue como substituto ósseo e induza a um processo de regeneração. Os biomateriais são classificados em diversas classes, composições e formatos. A aplicabilidade destes depende de suas propriedades biológicas, físico-químicas e mecânicas. Dentre os biomateriais cerâmicos, dois são considerados muito promissores, por se ligarem quimicamente ao tecido ósseo, sem formar tecido de interposição: o ²-fosfato tricálcico (²-TCP), amplamente utilizado nas técnicas regenerativas, devido à sua semelhança com componentes inorgânicos do tecido ósseo, por não apresentar risco de transmissão de doenças, ser biodegradável e participar do equilíbrio cálcio e fósforo do organismo; e o Biovidro fosfatado (BV), que possui excelente bioatividade, o que estimula a neoformação tecidual e a regeneração óssea. Ademais, adaptam-se facilmente ao sítio de implantação. Objetivos: Este trabalho avaliou a biocompatibilidade e biofuncionalidade de novos biomateriais para a regeneração óssea. Metodologia: Para realização dos testes in vivo, foram utilizados 15 rattus norvegicus da linhagem Wistar, albinos, machos, adultos, no qual foi confeccionado defeito crítico, com diâmetro médio de 8,5mm, na região da calvária. Estes animais foram distribuídos aleatoriamente para composição de 3 grupos: GTP (implantação de grânulos de ²-TCP); GTP-BV (implantação de grânulos de ²-TCP associado à biovidro) e CON (sem implantação de biomaterial, preenchimento apenas com coágulo sanguíneo). Ao final de 15 dias pós-operatório, os animais foram eutanasiados, a calvária foi removida, processada e analisada histologicamente por microscopia óptica. Resultados: Os biomateriais desencadearam uma discreta reação inflamatória crônica granulomatosa. Nos grupos experimentais (GTP e GTP-BV), houve um reparo tecidual em extensão e espessura e a neoformação óssea foi incipiente e relacionada a um reparo reacional nas regiões de borda óssea, e por condução, entre as partículas do biomaterial. O estroma formado na área de preenchimento do defeito consistiu em um tecido conjuntivo frouxo. No grupo CON, a neoformação óssea foi restrita as regiões de bordas ósseas e o defeito foi preenchido por um delgado tecido conjuntivo fibroso. Conclusão: Para as condições deste estudo, os biomateriais foram biocompatíveis, os grânulos atuaram como arcabouços tridimensionais e apresentaram potencial osteocondutor, sem diferenças entre os si, pois a adição do biovidro não aumentou a bioatividade do ²-TCP.