Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T21:02:24Z : No. of bitstreams: 1 giometti_j_dr_botfmvz.pdf: 479475 bytes, checksum: 5a083a25e321335dd33e91917eeffa20 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / With the objective of to evaluate the effect of the addition of orgainc chromium in the humoral immune response against rabies, five Neloreþs bovine breed groups with 15 animals each, were supplementeds with chromium yeast being the group GC (control), GV (vaccinated and without chromium), GV+8,5 (vaccinated + 8,5 ppm of chromium), GV+17 (vaccinated + 17 ppm of chromium) and GV+34 (vaccinated +34 ppm of chromium). Serum samples of this animals were analyseds with serum neutralization test (SN) in albines mices in the days 30,60 and 90 pos -vaccination. Simultaneously, serum concentrations of the chromium were determinated for analysis with spectrophotometer of atomic absorption in graphite oven and analysis of the cortisol was achieved through of the radioimmunoassay.These results allows to conclude that the animals of the group GV+34 have persistence of the protector's antibody titulation anti rabies until 90 days pos- vaccination. This response does not dependt of the cortisol levels, since the chromium donþt show to be effective to decrease its levels.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-10-10Bitstream added on 2014-06-13T18:42:10Z : No. of bitstreams: 1 haanwinckel_mcs_dr_botfm.pdf: 802672 bytes, checksum: a4afa50479234eb44a86f031c75134e1 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente estudo teve por objetivo principal avaliar a atividade de macrófagos e produção de anticorpos frente à infecção experimental pela Leptospira pomona em camundongos selecionados geneticamente para boa (H) ou má (L) resposta imune humoral. Para avaliar a atividade macrofágica foram utilizados ensaios para determinação de produtos intermediários do oxigênio e nitrogênio. Também foram investigados a produção de fator de necrose tumoral (TNF- ), anticorpos específicos, recuperação da leptospira nos rins e fígado, lesões histológicas através da técnica de hematoxilina-eosina e determinação de antígenos leptospiricos nos tecidos através da técnica de imunoistoquímica. Os resultados mostram que a linhagem LIV-A apresentou menor recuperação do microrganismo nos compartimentos analisados. Entretanto, a linhagem HIV-A a partir do 14 dia de infecção apresentou total contenção , embora a LIV-A ainda tenha recuperado bactérias no fígado no 21 dia. A resposta imune contra o sorovar pomona nessas linhagens se caracterizou com produção elevada de anticorpos principalmente em períodos mais tardios do processo infeccioso. A produção de intermediários reativos do oxigênio e nitrogênio também auxiliou na eliminação da L. pomona nas duas linhagens, sendo a produção de H2O2 importante fator nas linhagens HIV-A e NO nas linhagens LIV-A, principalmente nos períodos mais tardios pós-inoculação, o mesmo ocorrendo em relação ao TNF- . Lesões renais mais intensas ocorreram em períodos em que houve maior numero de leptospiras isoladas em meio de cultivo. Entretanto, na linhagem LIV-A houve persistência de alterações teciduais mesmo em períodos em que não houve recuperação de leptospiras. A técnica de imunoistoquímica apresentou-se um pouco mais sensível em relação ao cultivo na detecção das leptospiras. Entretanto, ambas... / The aim of the present study was to evaluate the role of the macrophage activity and antibody production on experimental infection of Leptospira pomona in mice, selected genetically for high (H) or low (L) humoral immune response. To evaluate the macrophage activity, assays were used to determine oxygen and nitrogen intermediate reactives. Also was investigated the production of tumor necrosis factor (TNF- .), specific antibodies, recovery of leptospires in the kidneys and liver, histological lesions by hematoxilin-eosin technique and determination of leptospires antigens in tissues by immunohistochemistry. The results showed a smaller recovery of microorganism from the analyzed compartments to the LIV-A lineage. However, the HIV-A lineage showed total contention from the 14th day post-infection, although LIV-A had still bacteria in the liver at 21th day post-infection. The immune response against pomona serovar in those lineages, was characterized as high production of antibodies, mainly in later periods of infectious process. The production of oxygen and nitrogen intermediate reactives, also contributed to L. pomona elimination for two lineages, being the H2O2 production an important factor in the HIV-A lineage and NO in the LIV-A lineage, mainly at the latest post-inoculation periods, the same occurring in relation to TNF- . Intense renal lesions occurred at periods that were larger number of isolated leptospires by culture technique. Meantime, it had persistence of tissue alterations in the LIV-A lineage, even at no leptospires recovery periods. The imunohistochemistry technique showed more sensitive in relation to the cultivation technique. However, both were good techniques to agent identification on those lineages. The results suggest those lineages could represent an important model to investigation of animal pathogenesis and immune response against the varied serovares of leptospires.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-09Bitstream added on 2014-06-13T21:04:28Z : No. of bitstreams: 1 negrini_tc_dr_arafcf_parcial.pdf: 223071 bytes, checksum: c6fae0658b97152e249d91079e605557 (MD5) Bitstreams deleted on 2014-12-19T18:32:45Z: negrini_tc_dr_arafcf_parcial.pdf,Bitstream added on 2014-12-19T18:33:33Z : No. of bitstreams: 1 000703332.pdf: 3299056 bytes, checksum: 31d93c1a5e3196b17fe661cc1feec647 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A esporotricose é uma infecção causada pelo fungo dimórfico Sporothrix schenckiii, o qual contamina o hospedeiro através de locais com pequenos traumas, causando lesões cutâneas, subcutâneas que podem se disseminar para outros tecidos. Os mecanismos imunológicos envolvidos na prevenção e controle da esporotricose sugerem que a imunidade mediada por células apresenta um importante papel na proteção do hospedeiro contra S. schenckii. Os receptores Toll-like (TLR), presentes nas células do sistema imune inato, destacam-se pelo seu papel central na ligação de patógenos e iniciação da resposta imune. A ativação desses receptores por padrões moleculares associados à patógenos (PAMPs) induz a fagocitose, a liberação de citocinas e mediadores químicos que atuam no sistema imune eliminando ou favorecendo a infecção. O TLR-2 está envolvido na resposta do hospedeiro contra uma variedade de fungos. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a participação do TLR-2 na resposta imunológica induzida pelo S. schenckii. Foram utilizados camundongos C57BL/6 (WT) e C57BL/6 TLR-2 Knockout (TLR-2-/-) para que se conseguisse verificar, durante um período de 10 semanas de infecção esporotricótica, a influência do TLR-2 na produção das citocinas IL-1β, IL-12 e TNF-α por macrófagos; a estimulação dos macrófagos através da liberação de NO, a participação do TLR-2 na geração dos perfis celulares Th1, Th2 e Th17 e, por fim, a influência desse receptor na produção de IFN-γ, IL-6, IL-10, IL-4, IL-17 e TGF-β. Entre os antígenos do fungo S. schenckii utilizados como estímulo nas culturas celulares, verificou-se que o antígeno lipídico é o mais eficaz na capacidade de estimular a produção dos mediadores... / Sporotrichosis is an infection caused by the dimorphic fungus Sporothrix schenckii, which infects the host through local minor trauma, causing skin and subcutaneous lesions which can spread to other tissues. The immunological mechanisms involved in sporotrichosis prevention and control suggest that cell-mediated immunity plays an important role in protecting the host against S. schenckii. The Toll-like receptors (TLR), found on innate immune system cells, for their central role in pathogen-binding and immune response initiation. The activation of these receptors by pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) induces phagocytosis and the release of chemical mediators and cytokines which direct the immune system in favoring or eliminating the infection. TLR-2 is involved in host responses against a variety of fungi. Therefore, the aim of this study was to evaluate the involvement of TLR-2 in the immune response induced by S. schenckii. C57BL/6 mice (WT) and C57BL/6 TLR-2 knockout (TLR-2-/-) were used in order to evaluate, over a period of 10 weeks of sporotrichotic infection, the influence of TLR-2 over macrophages production of the cytokines IL-1β , IL-12 and TNF-α, their stimulation level by NO release, the involvement of TLR-2 in the generation of Th1, Th2 and Th17 cell profiles and, finally, the influence of this receptor in the production of IFN -γ, IL-6, IL-10, IL-4, IL-17 and TGF-β. Among all the S. schenckii antigens used as stimulus in cell cultures, it was found that the lipid antigen is the most effective in regard... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-08Bitstream added on 2014-06-13T20:05:18Z : No. of bitstreams: 1 moreira_prr_dr_jabo.pdf: 7658386 bytes, checksum: 88b2f8c6da6bd4b4dede297970617c96 (MD5) / Na Leishmaniose Visceral Canina (LVC) a resposta imune órgãoespecífica pode variar de acordo com o órgão afetado, favorecendo ou não a multiplicação do parasito Leishmania (L.) chagasi. O objetivo deste estudo foi analisar, por meio, da técnica de imuno-histoquímica, o fígado e o baço de cães com Leishmaniose Visceral (LV), considerando a carga parasitária, a densidade de células Natural Killer (NK), de macrófagos e de linfócitos, bem como, células em apoptose, de células expressando moléculas de MHC-II e as citocinas TGF-b e TNF- a. Estes resultados foram comparados com os diferentes estágios da doença. Utilizou-se 71 cães naturalmente infectados de área endêmica para LV, classificados nos grupos sintomático (S), assintomático (A) e oligossintomático (O). Um grupo controle foi composto por 10 cães de área não endêmica para LVC. As células positivas para os anticorpos CD56, caspase 3 clivada, MHC-II, TGF- , TNF- , MAC387, CD3 e para a carga parasitária (soro hiperimune de cão positivo para LVC) foram submetidas a testes não paramétricos para a comparação entre os grupos. O baço foi o órgão que apresentou a maior carga parasitária. A apoptose de linfócitos foi maior nos cães sintomáticos quando comparados ao grupo controle. A intensidade de inflamação foi elevada nos cães com doença avançada (grupo S), caracterizada pela formação de granulomas difusos contendo parasitos. O fígado mostrou menor carga parasitária, um perfil celular dos granulomas rico em linfócitos. A densidade de células NK foi baixa no fígado e baço, bem como a imunodetecção das citocinas TGF- e TNF- . A expressão de MHC-II foi maior no baço de cães do grupo S. Portanto, pode-se sugerir que existe um padrão de resposta diferenciado no baço e fígado, porém outra metodologia deveria ser utilizada para quantificar de forma mais precisa as citocinas TGF- e TNF- nestes órgãos / In Canine Visceral Leishmaniasis (LVC), the immune response to organ-specific can vary with the affected organ, thus favoring or hindering the multiplication of the parasiteLeishmania (L.) chagasi. . The aim of this study was to analyze by immunohistochemistry, the liver and spleen of dogs with visceral leishmaniasis (VL), considering the parasitic load, the density of Natural Killer cells (NK), macrophages and lymphocytes, as well apoptosis cells, cells expressing molecules of MHC-II and the cytokines TGF- and TNF- . These results were compared with different stages of disease. We used 71 naturally infected dogs from an endemic area for VL, classifieds in the symptomatic (S), asymptomatic (A) and oligosymptomatic (O) groups. A control group consisted of 10 dogs from nonendemic area for LVC.The positive cells for CD56 antibody, cleaved caspase 3, MHC-II, TGF- , TNF- , MAC387, CD3 and parasite load (serum hyperimmune dog seropositive for VL) were subjected to nonparametric tests for comparison between groups. The spleen was the organ with the highest parasite load. The apoptosis of lymphocytes was higher in symptomatic dogs when compared to the control group. The intensity of inflammation was higher in dogs with advanced disease (group S), characterized by the formation of granulomas containing diffuse parasites. The liver showed lowest parasite load, a profile of cell granulomas rich in lymphocytes The density of NK cells was low in the liver and spleen and few cells were positive for cytokines TGF- and TNF- . Expression of MHC-II was higher in the spleen of dogs in Group S. Therefore, one may suggest that there is a differential pattern of response in the spleen and liver, but other methods should be used to quantify more accurately the cytokines TGF- and TNF- in these organs

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-24Bitstream added on 2015-04-09T12:47:45Z : No. of bitstreams: 1 000814758.pdf: 323983 bytes, checksum: 0a6619df9715798ee57c998919b6cad0 (MD5) / A resposta imune de cães com Leishmaniose Visceral (LV) pode apresentar um perfil variado de citocinas, com predominância de citocinas pró-inflamatórias (resistência) ou antiinflamatórias (susceptibilidade), dificultando ou favorecendo a multiplicação do protozoário Leishmania infantum chagasi nos tecidos do hospedeiro. Nesses animais existe um desequilíbrio entre os perfis das respostas imunes Th1 e Th2. A avaliação da resposta imunológica destes cães com diferentes manifestações clínicas de LV é de fundamental importância para a compreensão da patogenia da doença. O objetivo geral deste estudo foi avaliar o perfil de citocinas Th1, Th2 e regulatórias, fatores de transcrição (T-bet e GATA-3) e carga parasitária em cães com LV e controle, no fígado, baço e linfonodos poplíteo e pré-escapular, para verificar possíveis diferenças na resposta imune compartimentalizada. Neste estudo foram utilizados 28 cães de área endêmica para a LV e cinco cães de área não endêmica (controle). Os cães infectados foram separados em grupos sintomático (n=16) e assintomático (n=12). A quantificação da expressão dos genes das citocinas (IFN- γ, TGF-β, IL-10, IL-4, IL-12 e MIF), da carga parasitária tecidual e dos fatores de transcrição foi feita por meio da técnica de PCR quantitativo em tempo real, em amostras de tecidos dos diferentes órgãos. O baço e os linfonodos poplíteo e pré-escapular foram os órgãos que apresentaram maior número de cópias do DNA da Leishmania infantum chagasi. Os resultados da expressão dos genes de citocinas mostraram que houve um aumento da expressão de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α, IFN-γ, MIF, IL-12), anti-inflamatórias (IL-4) e regulatórias (IL-10, TGF-β) nos grupos de cães infectados, algumas com diferenças significativas do grupo controle (P<0,05). Enquanto o fator de transcrição T-bet teve níveis mais elevados nos animais assintomáticos. Em conclusão ... / The immune response of dogs with visceral leishmaniasis (VL) may present a varied profile of cytokines, predominantly proinflammatory (resistance) or anti-inflammatory (susceptibility) cytokines, hindering or favoring the multiplication of the protozoan Leishmania infantum chagasi in the host tissues. In these animals there is an imbalance between the profiles of Th1 and Th2 immune response. The evaluation of the immune response of these dogs with different clinical manifestations of VL is crucial for understanding the pathogenesis of the disease. The aim of this study was to evaluate the profile of Th1, Th2 and regulatory cytokines, transcription factors (T-bet and GATA-3) and parasite load in dogs with VL and control, in the liver, spleen and popliteal and prescapular lymph nodes to verify possible differences in compartmentalized immune response. In this study 28 dogs from an endemic area for VL and five dogs from non-endemic area (control) were used. The infected dogs were divided into symptomatic (n = 16) and asymptomatic (n = 12) groups of dogs. The quantification of the gene expression of cytokines (IFN-γ, TGF-β, IL-10, IL-4, IL-12 and MIF) and tissue parasitic load of the transcription factors was done using the technique of quantitative PCR in real time, tissue samples from different organs. The spleen and popliteal and pre-scapular lymph nodes were the organs that showed a higher number of copies of the DNA of Leishmania infantum chagasi. The results of the expression of cytokine genes showed that there was an increased expression of pro-inflammatory (TNF-α, IFN-γ, MIF, IL-12), anti-inflammatory (IL-4) and regulatory cytokines (IL-10 , TGF-β) in groups of infected dogs, with some significant differences from the control group (P <0.05). While the transcription factor T-bet had higher levels in asymptomatic animals. In conclusion GATA-3 was less expressed in the group of infected dogs suggesting that there other mechanisms ...

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-06. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:24Z : No. of bitstreams: 1 000845411.pdf: 3451364 bytes, checksum: 80e865130ecdaad0f2b3fd5d563d2863 (MD5) / Salmonella Enteritidis (SE) é responsável pela maioria dos casos de infecções alimentares em seres humanos e, geralmente, está associada ao consumo de produtos de origem avícola. Nas aves, SE coloniza o intestino, podendo sobreviver utilizando como substrato o 1,2 propanodiol (1,2-Pd) disponível neste ambiente, cujo metabolismo é viabilizado pela ação da enzima propanodiol desidratase, codificada por genes do operon pdu. A enzima propanodiol desidratase necessita de cianocobalamina como cofator enzimático, a qual é codificada pelos genes cobS e cbiA. Neste estudo, utilizou-se uma estirpe de SE e duas mutantes, sendo uma com os genes pduC, pduD, pduE defectivos (SE ΔpduCDE) e outra com os genes pduC, pduD, pduE, cobS e cbiA (SE ΔcobSΔcbiAΔpduCDE) inativados, na tentativa de avaliar a importância do 1,2-Pd para a colonização intestinal e invasão de órgãos durante a infecção de aves por SE. No primeiro experimento, estimou-se as quantidades das estirpes em baço, fígado e conteúdo cecal de aves de postura de variedades vermelha e branca. Um segundo ensaio foi realizado para verificação da excreção fecal, por meio de suabes cloacais. Aliado a isso, caracterizou-se a resposta imunológica em aves SPF desafiadas com estirpes de SE acima descritas por meio da avaliação das populações de linfócitos T CD4+ e TCD8+ em fígado e tonsilas cecais e também pela quantificação de genes responsáveis pela expressão das citocinas IL-6, CCL4, CXCLi2 e IL-22 em tonsilas cecais e IL-6 e IL-18 em baço. Observou-se que as estirpes mutantes foram capazes de colonizar o intestino e invadir o baço e fígado da mesma forma que a estirpe selvagem, sendo que as aves de postura de variedade vermelha foram mais susceptíveis a infecção sistêmica. Tanto a estirpe selvagem como as mutantes estimularam o mesmo perfil de resposta imune nas aves SPF. Portanto, os genes pduC, pduD, pduE, cobS e cbiA não são necessários para... / Salmonella Enteritidis (SE) is responsible for majority of the cases of foodborne diseases in humans and usually is associated with the consumption of poultry origin products. In birds, SE colonizes the intestine and can survive using 1,2 propanodiol (1,2-Pd) as substrate. The metabolisation of the 1,2-Pd is possible by the action of propanodiol dehydratase enzyme, encoded by genes pdu operon. Cyanocobalamin, which is encoded by genes cobS and cbiA, is the cofactor required by propanodiol dehydratase. In this study, we used one SE wild type strain and two mutants, one with mutations in pduC, pduD and pduE genes (SE ΔpduCDE) and another with mutations of pduC, pduD, pduE, cobS and cbiA genes (ΔcobSΔcbiAΔpduCDE) in attempt to evaluate the importance of 1,2-Pd for intestinal colonization and invasion of organs during infection of birds. In the first experiment, bacterial counts for all strains were obtained from spleen, liver and cecal content of white and brown varieties of commercial egg-layers. In the second assay, faecal shedding of the strains was assessed by cloacal swabs. Additionaly, immunological responses were characterised by the assessment of T CD4+ and T CD8+ cell populations in liver and cecal tonsils from SPF (Specific Pathogen Free) chicks challenged with the three strains. Complementary transcripts of genes encoding the cytokines IL-6, CCL4, CXCLi2 and IL-22 in cecal tonsils, and IL-6 and IL-18 in liver were obtained for relative quantification by qRT-PCR. It was observed that SE mutant strains were able to colonise the intestine and invade spleen and liver in the same way as the wild type strain. Brown variety of birds was more susceptible to systemic infection than white birds. Furthermore, the immune response profiles triggered by the SE wild type and the two mutants in SPF chicks were very similar. Therefore, data for the present study suggest that pduC, pduD, pduE, cobS e cbiA genes would not be essencial to ...

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-28Bitstream added on 2014-11-10T11:57:46Z : No. of bitstreams: 1 000790604_20150317.pdf: 1010860 bytes, checksum: 3eab264b0af480b13dc6def6d9020c1b (MD5) / A estreptococose provoca grandes perdas em sistemas de criação intensiva de tilápias no Brasil e uma das soluções é a utilização de vacinas. Assim, este estudo avaliou a resposta imune celular e humoral a uma vacina contra S. agalactiae e utilizou 425 tilápias do Nilo, O. niloticus (200 ± 25 g). Primeiramente foi determinada a porcentagem relativa de sobrevivência (PRS) para avaliar qual das porções (solúvel ou insolúvel) obtidas do S. agalactiae sonicado seria mais eficiente. Para tanto foram constituídos quatro grupos (n= 20), onde o grupo 1 (G1) foi injetado com PBS; grupo 2 (G2) com PBS + adjuvante incompleto de Freund; grupo 3 (G3) imunizado com a fração solúvel + adjuvante incompleto de Freund e grupo 4 (G4) imunizado com a fração insolúvel + adjuvante incompleto de Freund. Após 21 dias da imunização os peixes foram desafiados com cepa homóloga (CL50), resultando numa PRS de 100, 50 e 16,7% para G4, G3 e G2, respectivamente. Com base nestes resultados utilizou-se a fração insolúvel para avaliar a reposta imune humoral. Neste caso foram constituídos dois grupos; Grupo 5 injetado com PBS (controle) e Grupo 6 imunizado com a fração insolúvel + adjuvante incompleto de Freund, via i.c. Foram realizadas coletas de sangue nos tempos zero, 7, 14, 21, 28, 35, 42, 60, 90 dias pós-vacinal. A avaliação da resposta imune foi feita por meio da soroaglutinação direta em microplaca. Os resultados demonstraram que o grupo vacinado apresentou titulação a partir do 21º, com resposta máxima no 60º dia pós vacinal. Para avaliar o componente celular da resposta inflamatória inespecífica provocada pela vacinação foram utilizados três grupos (n=63), sendo Grupo 7 (controle) injetados com PBS, o Grupo 8com PBS + adjuvante incompleto de Freud e Grupo 9 imunizado com a fração insolúvel + adjuvante incompleto de Freud, as injeções foram realizadas na ... / Streptococcal infection causes significant losses in intensive farmed of tilapia in Brazil and one of the solutions is the use of vaccines. Thus, this study assessed the humoral and cellular immune response to a vaccine against S. agalactiae; and to this end were used 425 Nile tilapia, O. niloticus (200 ± 25 g). Firstly, the relative percentage of survival (PRS) was determined to evaluate which portions of sonicate S. agalactiae (soluble or insoluble) would be more efficient. For this, four groups were formed (n=20), G1 – injected with PBS, G2- injected with PBS + adjuvant incomplete of Freund; G3- immunized with the soluble fraction + adjuvant incomplete of Freund; G4 - immunized with the insoluble fraction + adjuvant incomplete of Freund. 21 days after immunization, fish were challenged with homologous strains (LC50) resulting in a PRS 100, 50, and 16.7% to G4, G3, and G2, respectively. Based on these results, the insoluble fraction was used to evaluate the humoral immune response. Group 5 (G5) was injected with PBS (control) and Group 6 (G6) was immunized with the insoluble fraction + incomplete Freund's adjuvant, intracoelomic route. They were performed blood samples at 0; 7; 14; 21; 28; 35; 42; 60, and 90 days post-vaccination. The evaluation of immune response was made by direct agglutination test in microplaque. The results showed that the vaccinated group presented titration from 21th day, with maximal response at 60 days post vaccination. To assess the cellular component of the nonspecific inflammatory response elicited by vaccination, three groups were used (n = 63), G7 – injected with PBS, G8- injected with PBS + incomplete Freund's adjuvant, G9 - immunized with the insoluble fraction + incomplete Freund's adjuvant. All injections were performed in the swim bladder. Therefore, we collected exudates at 6, 24, and 48 hours post-stimulus. The exudate results showed ...

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-09-16Bitstream added on 2015-01-26T13:30:20Z : No. of bitstreams: 1 000799157_20151201.pdf: 186778 bytes, checksum: 1e61fe369d65bb79b39a5c22db15a258 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-12-01T09:08:32Z: 000799157_20151201.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-01T09:09:25Z : No. of bitstreams: 1 000799157.pdf: 1033615 bytes, checksum: fdb5ea1c46b1511dd50917b56da4bf11 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / No diabetes há controvérsias em relação ao equilíbrio entre citocinas pró-inflamatórias e anti-inflamatórias, sendo carente na literatura estudos sobre o perfil de citocinas no sangue materno e no colostro de mães diabéticas. Assim, este estudo avaliou a imunofenotipagem de leucócitos e os perfis de respostas Th1, Th2 e Th17 no sangue materno, no sangue de cordão umbilical e no colostro de mães diabéticas e verificar a modulação de citocinas sobre a atividade funcional de fagócitos. Foram avaliadas 124 gestantes, assim distribuídas: não-diabético (ND; N=45), hiperglicemia gestacional leve (HGL; N=30), diabetes mellitus gestacional (DMG; N=15) e diabetes mellitus tipo 2 (DM2; N = 34). Observou-se que as porcentagens de células CD3+CD45RA+ foram menores no sangue do cordão do grupo DM2. As células TCD4+ foram menores no sangue do cordão dos grupos com HGL e DM2. O sangue materno do grupo de DM2 apresentou diminuição das subpopulações de células CD45RA+. As subpopulações de células CD45RO+ aumentaram no colostro de mães portadoras de DM2. O maior percentual de células TCD4+ foi observado no sangue materno e colostro de mães com DM2. Com relação a concentração de citocinas, observou que as concentrações de IL2, IL4 e IFN-γ foram similares em todos os grupos estudados. A concentração de IL6 foi superior no colostro quando comparado às concentrações encontradas no sangue materno e no sangue do cordão. As maiores concentrações de IL-17 foram observadas no sangue materno do grupo DM2. Na avaliação da atividade funcional de fagócitos observou-se que as células mononucleares do colostro e do sangue materno, tratados ou não com as citocinas (IFN-γ e TGF-β) e independente dos níveis glicêmico, exibiram índices fagocíticos similares para Escherichia coli enteropatogênica (EPEC). No grupo DM2, independente da presença de citocinas os fagócitos do sangue materno apresentaram menor liberação de ... / In diabetes there is controversy regarding the balance between proinflammatory and anti-inflammatory cytokines, but there is lacking in the literature studies on the cytokine profile in maternal blood and colostrum of diabetic mothers. This study evaluated the subsets of cells and cytokine profile Th1, Th2 e Th17 of maternal blood, cord blood and colostrum of diabetic mothers and verify the modulation of cytokines on the functional activity of phagocytes. Were evaluated 124 pregnant women that were divided according to their glycemic status: non-diabetic (ND, ND=45), mild gestational hyperglycemia (HGL, N=30), gestational diabetes mellitus (GDM, N=15) and diabetes mellitus type 2 (DM2, N=34). We observed that the percentages of CD3+ CD45RA+ cells was lower in cord blood group DM2. The CD4+ cells were lower in cord blood groups with HGL and DM2. Maternal blood group DM2 exhibited reduced subset of CD45RA+ cells. Subsets of CD45RO+ cells increased in the colostrum of mothers with DM2. The higher percentage of CD4+ cells were observed in maternal blood and colostrum of mothers with DM2. The concentration of cytokines IL2, IL4 and IFN-γ were similar in all groups. The concentration of IL-6 was higher in colostrum when compared to concentrations in maternal and cord blood. Higher concentrations of IL-17 were found in the maternal blood DM2. In relation of the functional activity of phagocytes was observed that the mononuclear cells of colostrum and blood treated or not with cytokines (IFN-γ and TGF-β), independent of blood glucose levels, exhibited similar phagocytic activity for enteropathogenic Escherichia coli (EPEC). In DM2 group, irrespective of the presence of cytokines phagocytes maternal blood showed lower release of intracellular calcium. Phagocytes of the cord blood of the non-diabetic group when treated by TGF-β, showed an increase in the release of intracellular calcium. The cells of colostrum and maternal blood in the ... / FAPESP: 11/18045-5

Orientador: Iracema de Mattos Paranhos Calderon / Coorientador: Adenilda Cristina Honório França / Banca: Márcia Guimarães da Silva / Banca: Leandro Gustavo de Oliveira / Banca: Inês Aparecida Tozetti / Banca: Fábio Carmona / Resumo: No diabetes há controvérsias em relação ao equilíbrio entre citocinas pró-inflamatórias e anti-inflamatórias, sendo carente na literatura estudos sobre o perfil de citocinas no sangue materno e no colostro de mães diabéticas. Assim, este estudo avaliou a imunofenotipagem de leucócitos e os perfis de respostas Th1, Th2 e Th17 no sangue materno, no sangue de cordão umbilical e no colostro de mães diabéticas e verificar a modulação de citocinas sobre a atividade funcional de fagócitos. Foram avaliadas 124 gestantes, assim distribuídas: não-diabético (ND; N=45), hiperglicemia gestacional leve (HGL; N=30), diabetes mellitus gestacional (DMG; N=15) e diabetes mellitus tipo 2 (DM2; N = 34). Observou-se que as porcentagens de células CD3+CD45RA+ foram menores no sangue do cordão do grupo DM2. As células TCD4+ foram menores no sangue do cordão dos grupos com HGL e DM2. O sangue materno do grupo de DM2 apresentou diminuição das subpopulações de células CD45RA+. As subpopulações de células CD45RO+ aumentaram no colostro de mães portadoras de DM2. O maior percentual de células TCD4+ foi observado no sangue materno e colostro de mães com DM2. Com relação a concentração de citocinas, observou que as concentrações de IL2, IL4 e IFN-γ foram similares em todos os grupos estudados. A concentração de IL6 foi superior no colostro quando comparado às concentrações encontradas no sangue materno e no sangue do cordão. As maiores concentrações de IL-17 foram observadas no sangue materno do grupo DM2. Na avaliação da atividade funcional de fagócitos observou-se que as células mononucleares do colostro e do sangue materno, tratados ou não com as citocinas (IFN-γ e TGF-β) e independente dos níveis glicêmico, exibiram índices fagocíticos similares para Escherichia coli enteropatogênica (EPEC). No grupo DM2, independente da presença de citocinas os fagócitos do sangue materno apresentaram menor liberação de ... / Abstract: In diabetes there is controversy regarding the balance between proinflammatory and anti-inflammatory cytokines, but there is lacking in the literature studies on the cytokine profile in maternal blood and colostrum of diabetic mothers. This study evaluated the subsets of cells and cytokine profile Th1, Th2 e Th17 of maternal blood, cord blood and colostrum of diabetic mothers and verify the modulation of cytokines on the functional activity of phagocytes. Were evaluated 124 pregnant women that were divided according to their glycemic status: non-diabetic (ND, ND=45), mild gestational hyperglycemia (HGL, N=30), gestational diabetes mellitus (GDM, N=15) and diabetes mellitus type 2 (DM2, N=34). We observed that the percentages of CD3+ CD45RA+ cells was lower in cord blood group DM2. The CD4+ cells were lower in cord blood groups with HGL and DM2. Maternal blood group DM2 exhibited reduced subset of CD45RA+ cells. Subsets of CD45RO+ cells increased in the colostrum of mothers with DM2. The higher percentage of CD4+ cells were observed in maternal blood and colostrum of mothers with DM2. The concentration of cytokines IL2, IL4 and IFN-γ were similar in all groups. The concentration of IL-6 was higher in colostrum when compared to concentrations in maternal and cord blood. Higher concentrations of IL-17 were found in the maternal blood DM2. In relation of the functional activity of phagocytes was observed that the mononuclear cells of colostrum and blood treated or not with cytokines (IFN-γ and TGF-β), independent of blood glucose levels, exhibited similar phagocytic activity for enteropathogenic Escherichia coli (EPEC). In DM2 group, irrespective of the presence of cytokines phagocytes maternal blood showed lower release of intracellular calcium. Phagocytes of the cord blood of the non-diabetic group when treated by TGF-β, showed an increase in the release of intracellular calcium. The cells of colostrum and maternal blood in the ... / Doutor

Orientador: Ângela Maria Victoriano de Campos Soares / Resumo: A Criptococose é uma micose sistêmica, cuja incidência tem aumentado nas últimas décadas. É causada pelos fungos Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii que se apresentam sob a forma de levedura capsulada. Uma importante característica da infecção com as duas espécies do fungo é que enquanto o C.neoformans está associado à doença em pacientes imunossuprimidos, o C.gattii é capaz de induzir a micose em individuos imunocompetentes. O entendimento dos mecanismos envolvidos nestas diferenças tem sido um desafio para os pesquisadores da área. No que se refere à resposta imune do hospedeiro contra o Cryptococcus, está bem estabelecido que a resistência/suscetibilidade a infecção envolve a participação de diferentes subpopulações de células CD4. No entanto, os estudos sobre o papel das subpopulações TH17 e Treg são escassos. Além disso, são raros os trabalhos que de uma forma sistemática objetivaram comparar o perfil de células CD4 induzido por uma ou outra espécie do fungo. Diferencas nesse perfil poderiam explicar a indução da doença em diferentes populações. Assim, um primeiro objetivo do presente estudo foi avaliar o perfil de células CD4 efetoras induzido pelo C.neoformans e C.gatti . A abordagem experimental foi a incubação de células mononucleares do sangue periférico humano (PBMCs) in vitro com leveduras vivas de C. neoformans e C.gattii, seguida da avaliação da expressão intracitoplasmática das citocinas IFN-(TH1), IL-4 (TH2), IL-17 (TH17) e o fator de transcrição ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre