Orientador: Francisco Carlos Groppo, Pedro Luiz Rosalen / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T02:16:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Baglie_Sinvaldo_D.pdf: 818069 bytes, checksum: 1c0d1eb4621ca27afda369d7e188a9a7 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: As concentrações de amoxicilina (AMO)em plasma e saliva e seus efeitos na microbiota oral de voluntários sadios foram analisados, em um estudo aberto, de forma aleatória, cruzado com dois períodos. AMO875 mg (Amoxicilina-EMS- medicamento teste e Amoxil@- medicamentoreferência) foi administrada para todos os voluntários com 1 semana de intervalo entre as doses. Amostras de plasma e saliva foram colhidas em um intervalo de até 12h após a administração. As concentrações plasmáticas de AMOforam obtidas por cromatografia líquida e espectrometria de massas com ionização por electrospray (LC-ESI-MS). As concentrações de amoxicilina em saliva foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC).As contagens dos microrganismos totais, anaeróbios e estreptococos foram obtidas em diferentes condições de cultura. ASC foi calculada pelo método de extrapolação dos trapezóides. Cmaxe Tmaxforam compilados dos dados de concentração-tempo. Análise de variância foi realizada usando dados logaritmicamente transformadospara ASCo-inf, ASCO-12h, Cmax e não transformados para Tmax.As médias (:1:dp) para ASCO-12h (jJg.h.mL-1),ASCo-inf (jJg.h.mL-1),Cmax (jJg.mL-1)and Tmax(h), foram respectivamente: 55,42(:1:16,85), 55,42 (:1:16,85), 18,59 (:1:6,3), 2,04(:1:0,75) para o medicamento teste e 51,11 (:1:18,9), 51,29 (:1:19,12), 17,83 (:1:5,86),2,02 (:i:O,87)para o medicamento referência. Intervalos de confiança (90%) para a razão das médias de AMO(testejreferência) para ASCO-12he Cmaxforam: 0,961-1,149 e 0,914 - 1,142, respectivamente. Tanto para as concentrações plasmáticas quanto para as salivares não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre os dois medicamentos (Teste t pareado, p>0.05). As contagens de microrganismos provindos da saliva não mostraram diferenças estatísticas (ANOVAde medidas repetidas, p>0.05) entre as duas formulações durante cada tempo. A partir de 60 min, uma redução estatisticamente significante (ANOVAde medidas repetidas, p<0.05) foi observada para todos os microrganismos. Os dois medicamentos foram considerados bioequivalentes baseado na razão e extensão de absorção e foram eficazes na redução dos microrganismos da microbiota oral avaliados até 12 horas / Abstract: The plasmatic and salivary concentration of amoxicillin(AMO)875mg and its effects on oral microbiota in healthy volunteers were assessed in an open, randomized, two-period crossover designo A single 875 mg oral dose of AMO (Amoxicillin-EMS- test formulation and Amoxil@- reference formulation) was administered to ali volunteers observing 1-week intervaI between doses. Blood and saliva samples were collected from pre-dose to 12 h. The concentrations of AMO, in plasma and saliva, were quantified by LC-ESI-MSand LCmethod, respectively. AUC was calculated by the trapezoidal rule extrapolation method. Cmaxand Tmax were compiled from the plasmatic concentration-time data. Streptococci, anaerobe, and total microorganisms' counts were obtained in different culture conditions. The mean values (:1:SD) for AUCO-12(lh1g.h.mL-1),AUCO-í(nlf1g.h.mL-1),Cmax(l1g.mL-1) and Tmax(h), were respectively: 55.42(:1:16.85), 55.42 (:I:16.85), 18.59 (:I:6.3), 2.04{:I:0.75) concerning the test formulation and 51.11 (:I:18.9), 51.29 (:I:1,9.12), 17.83 (:I:5.86), 2.02 (:1:0.87) concerning the reference formulation. Confidence intervals (90%) of amoxicillinmeans of AUCO-12ahnd Cmaxratios (testjreference) were: 0.961 - 1.149 and 0.914 - 1.142, respectively. No statistically significant differences were observed between the two formulations (t test, p>0.05) regarding AMOplasmatic and saliva concentrations. Saliva microorganisms counts did not show statistical differences (ANOVArepeated measures, p>0.05) between the two groups during each sampling time. Starting at 60 min, a statistically significant decrease (ANOYArepeated measures, p<0.05) was also observed for all microorganisms. Both formulations were bioequivalent based on both the rate and extent of absorption, and were effective in reduce microorganisms until 12 hours / Doutorado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Doutor em Odontologia

Orientadores: Maria Beatriz Duarte Gavião, Paula Midori Castelo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-24T06:10:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lucas_BarbaradeLima_D.pdf: 5263603 bytes, checksum: 3895df2cd02cd6dc67e284528af30e3c (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Este estudo buscou identificar as possíveis relações dos padrões antropométricos nutricionais com as caracrerísticas morfológicas e funcionais do sistema mastigatório e níveis de biomarcadores salivares. Três estudos foram conduzidos, apresentados na forma de capítulos. As amostras foram compostas por sujeitos saudáveis, com idade entre 15 e 30 anos. Capítulo 1: Objetivou comparar a antropometria e a composição corporal e verificar se o padrão antropométrico nutricional estaria associado à disfunção temporomandibular (DTM). Foram avaliados 110 mulheres e 60 homens distribuídos em grupos controle, desordem muscular (MD) ou deslocamento de disco (DD), de acordo com o Research Diagnostic Criteria for Temporomandibular Disorders (RDC/TMD). As medidas antropométricas foram peso, altura e perímetros da cintura, abdomen e quadril. A composição corporal foi avaliada por meio da porcentagem de gordura corporal (BF%), e das massas adiposa, óssea, muscular e residual. A intensidade da dor (CPI) e os sintomas físicos não específicos incluíndo dor facial (NSPSP) foram considerados. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: The aim of this study was to identify possible associations of nutritional anthropometric patterns with morphologic and functional characteristics of the masticatory system as well as with salivary biomarkers. Three studies were developed and reported in three chapters. Samples consisted of health subjects aged between 15 and 30 years. Chapter 1: To compare body characteristics and composition and to verify if nutritional anthropometric patterns are associated with temoromandibular dysfunctions (TMD). 110 females and 60 males were classified into Control, Muscle disorders (MD) or Disc displacements (DD) groups according to the Research Diagnostic Criteria for Temporomandibular Disorders (RDC/TMD). Anthropometric measurements recorded were weight, height and perimeters of waist, abdomen and hip. Body composition was evaluated with values of body fat percentage (BF%) as well as with values of fat, muscle, bone and residual mass. Pain intensity (CPI) and nonspecific physical symptoms including facial pain (NSPSP) were considered. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic document. / Doutorado / Fisiologia Oral / Doutora em Odontologia

Indiana University-Purdue University Indianapolis (IUPUI) / The majority of currently marketed fluoride varnishes (FV) have not been evaluated for their effectiveness in preventing dental caries. Fundamental research on FVs and how different formulations affect adherence to teeth, fluoride release into saliva and uptake by teeth is virtually non-existent. The objective of this work was to investigate the anti-caries potential, measured as fluoride release into saliva, change in surface microhardness of early enamel caries lesions, and enamel fluoride uptake, of multiple commercially available FVs. We have found that FVs differed in their release characteristics, rehardening capability, and ability to deliver fluoride to demineralized lesions. In addition to our in vitro work, we have conducted a clinical study that aimed to compare saliva and plaque fluid fluoride concentrations following the application of three commercially available FV treatments at predetermined post application time points. We also investigated the change in fluoride concentration in saliva and plaque fluid fluoride from baseline to each post application predetermined time point. We found that FVs varied in their release of fluoride into saliva and plaque fluid but shared common trends in release characteristics. The outcomes of our in vitro and in vivo investigations demonstrate a great variation in anti-caries potential of FVs. This may be attributed to different compositions and physical properties of the tested FVs.

Carrapatos são artrópodes hematófagos de distribuição cosmopolita que têm grande importância médica e veterinária devido ao efeito deletério direto causado por se fixarem e sugarem seus hospedeiros, como também por serem importantes vetores de doenças para o homem e para os animais domésticos. Sabendo que carrapatos permanecem fixos em seus hospedeiros por longos períodos de tempo sem serem rejeitados, é possível inferir que esses ácaros possuam um arsenal de mecanismos que atuem no controle da resposta imune do hospedeiro. De fato, diversos trabalhos têm demonstrado que carrapatos são capazes de modular a resposta imune de seus hospedeiros através de componentes presentes na saliva, que são inoculados durante o repasto sangüíneo. Assim, este trabalho procurou investigar se carrapatos exercem a modulação da resposta imune do hospedeiro através do recrutamento de células T regulatórias CD4+CD25+ (Tregs), com a intenção de conter uma resposta inflamatória / imune prejudicial à sua alimentação. Para isso, células isoladas de amostras de pele e linfonodos de camundongos BALB/c infestados com carrapatos Rhipicephalus sanguineus foram analisadas quanto à expressão das moléculas de superfície CD4, CD25, CTLA-4, CD45RB, GITR e CD103 (fenótipo de células Tregs), por citometria de fluxo. Adicionalmente, as células obtidas dos linfonodos foram avaliadas quanto à expressão de mensagem para o fator de transcrição Foxp3 (característico da função regulatória), por PCR quantitativo. Paralelamente, saliva de R. sanguineus foi inoculada na orelha de animais da mesma linhagem, a fim de se comparar o infiltrado celular com o obtido na pele dos camundongos infestados com carrapatos. Os resultados mostraram que as infestações não alteraram a percentagem de células T CD4+CD25+ nem a expressão de moléculas associadas ao fenótipo de células Tregs nas células infiltradas na lesão de fixação dos carrapatos ou nos linfonodos em comparação a camundongos controles. Também não se verificou aumento da expressão do gene para Foxp3 nos linfonodos em nenhum dos grupos analisados. Por outro lado, a inoculação de saliva na orelha de camundongos induziu um aumento significativo da população de células T CD4+, porém estas também não apresentavam fenótipo regulatório, sugerindo que o mecanismo de imunomodulação exercido pelos carrapatos sobre seus hospedeiros não é mediado por essas células. Resultados adicionais mostraram que a saliva de carrapatos reduziu significativamente a percentagem de células dendríticas nas orelhas dos camundongos, sugerindo que carrapatos podem estar modulando a resposta imune de seus hospedeiros por diminuírem o repovoamento da pele com células dendríticas, as quais são essenciais na vigilância imune dos tecidos periféricos. / Ticks are bloodsucking arthropods that feed on vertebrates and are responsible for serious global economic losses both through the effects of blood sucking and as vectors of pathogens. A tick?s bloodmeal lasts for several days, during which it remains fixed to the host and avoids rejection by local inflammatory and immunological reactions. This status is achieved by the escape mechanisms ticks have evolved. In fact, many studies have demonstrated that ticks modulate the host immune response through salivary compounds inoculated during their bloodmeals. This study investigated if during bloodfeeding ticks can recruit regulatory T cells in an attempt to modulate the host immune response and to control inflammatory responses that could be harmful to tick feeding. BALB/c mice were infested with Rhipicephalus sanguineus, the skin at feeding sites and the regional lymph nodes were collected, and the cells forming the local infiltrates were analyzed by flow cytometry for simultaneous expression of CD4, CD25, CTLA-4, CD45RB, GITR and CD103 molecules. Additionally, expression of mRNA for Foxp3 was measured in the lymph node cells. Tick saliva was also inoculated into the ears of BALB/c mice in order to compare the local cellular infiltrate with that elicited by artificial infestation. Control animals were sham infested. The results show that, relative to sham-infested tissues, tick infestations did not alter the percentage of CD4+CD25+ T cells present at the site of their attachment or in draining lymph nodes. Infestations also did not increase the expression of Foxp3 in skin and lymph nodes. On the other hand, saliva inoculated into the ear induced a significant increase in the number of CD4+ T lymphocytes recruited to the site of inoculation, although these cells did not express a regulatory phenotype. These results suggest that the modulation of the host immune response by ticks does not involve CD4+CD25+ T cells. Additional results showed that tick saliva reduced the percentage of dendritic cells in the skin of infested mice. This finding indicates that ticks may modulate the host immune response by diminishing the repopulation of skin with dendritic cells, which are essential for maintaining surveillance of peripheral tissues for incoming antigens.

O uso nocivo do álcool acarreta problemas de saúde para o usuário e prejuízos na sociedade. Vários espécimes biológicos podem ser utilizados para verificar a exposição a bebidas alcoólicas. No trabalho foi investigada a utilização da saliva na determinação de etanol através das técnicas: enzimática Q.E.D. A-150 de triagem - e cromatografia em fase gasosa, após separação por aquecimento, Headspace de confirmação. O método foi padronizado, validado e aplicado em amostras de saliva provenientes de voluntários que ingeriram de maneira controlada bebida alcoólica. Em todas as amostras analisadas foi possível detectar a concentração de etanol, observando a existência de uma diferença entre os respectivos resultados das duas técnicas. Os resultados interindividuais apresentaram grande variabilidade nos mesmos tempos de coleta, apesar da ingesta equivalente de etanol. No estudo foi verificado que a saliva é uma matriz alternativa adequada para verificar a concentração de etanol em indivíduos expostos às bebidas alcoólicas. / The abuse of alcohol leads to health injury and causes damage to the society. Several biological matrices can be used to monitor exposure to alcoholic beverages. In this work, saliva was used in the determination of ethanol for both techniques: enzymatic Q.E.D. A-150 screening test -, and headspace-gas chromatography - confirmation test -. The method was developed, validated and used for the analysis of saliva samples from volunteers who ingested alcoholic beverages in a controlled schedule. Ethanol was detected and in all samples, noticing a difference between the results of both techniques. Inter-volunteers results showed high variability for the same collection times, although the amount of ethanol ingested was equivalent. These results suggest that saliva is a good option for the in field determination of ethanol in exposed individuals to alcoholic beverages.

Nos últimos anos observou-se incremento na incidência e prevalência da insuficiência renal crônica (IRC). Além da grande repercussão bucal que esta alteração sistêmica traz, é importante que esses pacientes tenham sua saúde bucal adequada e controlada, frente à possibilidade eminente do transplante renal. O objetivo deste trabalho foi caracterizar o paciente com IRC atendido no Centro de Atendimento a Pacientes Especiais da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo (CAPE-FOUSP), identificando suas manifestações bucais e sistêmicas, analisando os principais índices de saúde bucal e avaliando possíveis correlações entre os aspectos sistêmicos e locais dos pacientes estudados. O estudo foi composto por, anamnese, exame físico, realização de índices (índice de higiene bucal, CPOD, PSR), avaliação clínica do nível de fluxo salivar e exames laboratoriais (uréia pré e pós-hemodiálise, glicemia, creatinina, potássio, fósforo e cálcio séricos). No presente estudo a maior parte dos pacientes localizava-se entre a 4 e 6 décadas de vida (72,72 %), em uma proporção de 2:1 do sexo masculino para o feminino. As principais causas da IRC foram a diabetes mellitus e a glomerulonefrite, com 31,8% cada uma. As principais alterações bucais encontradas foram a gengivite (31,8%), a queilite angular (18,1%), a candidíase eritematosa (18,1%), a abrasão dental (40,9%), a erosão dental (36,3%), a cárie cervical (22,7%), e o bruxismo (4,5%). A maior parte dos pacientes apresentou índice CPOD baixo (54,54%). Em relação ao PSR a gengivite leve apresentou a maior porcentagem (36,4%). O índice de higiene bucal (IHO-S) foi adequada na maior parte dos pacientes (63,63%). Ao avaliar o nível de fluxo salivar estimulado, os valores encontrados ficaram dentro dos parâmetros de normalidade. Nos exames laboratoriais 100% dos pacientes apresentaram nível elevado de creatinina sérica e uréia pré-hemodiálise, observando-se valores ainda elevados da uréia póshemodiálise na maior parte dos pacientes (77,27%). Na maior parte dos pacientes o nível de potássio sérico também estava elevado (68,18%), enquanto os níveis de fósforo (59,09%) e cálcio (77,27%) apresentavam-se normais. Ao fazer a correlação do fluxo salivar com as variáveis tempo da doença, creatinina sérica, cálcio, uréia pré e pós hemodiálise, fósforo, potássio, pressão arterial, glicemia e a idade dos pacientes, observou-se valores de correlação significante positiva com o tempo da doença e a creatinina sérica.Na correlação do fluxo salivar com os índices de higiene oral, índice periodontal, e o índice CPOD não foram encontrados correlações estatisticamente significantes. Os níveis de fluxo salivar correlacionaram-se negativamente com o cálcio e com a idade dos pacientes. / In the last few years there has been an increase in the incidence and prevalence of chronic kidney disease. Therefore it is important that dentists have appropriate knowledge to provide quality dental care. In addition to the significant oral effect brought about by this systemic change, it is important that these patients have appropriate and controlled oral health, in light of the imminent possibility of kidney transplantation. The objective of this study is to assess the oral and systemic manifestations of patients with chronic renal failure and correlate salivary flow and co-morbidities that are present with oral manifestations. The study was made up of clinical examination, anamnesis, physical examination and implementation of indices of oral hygiene, DMFT, PSR and clinical evaluation of the level of salivary flow.In this study, the majority of patients were aged between the 4th and 6th decade of life (72.72%), with a 2:1 male to female ratio. The main causes of CRF were glomerulonephritis and diabetes mellitus (31.8%). The main oral changes were gingivitis (31.8%), angular cheilitis (18.1%), erythematous candidiasis (18.1%), tooth abrasion (40.9%), dental erosion (36.3%), cervical caries (22.7%) and bruxism (4.5%). Most patients had a low DMFT index (54.54%). As regards PSR, mild gingivitis represented the highest percentage at 36.4%. The index of oral hygiene was adequate in most patients (63,63%). When the level of stimulated salivary flow was assessed, the values found were within the parameters of normality. Laboratory tests found that 100% of patients had high serum creatinine and pre-dialysis urea, and there were high values of post-hemodialysis urea in most patients (77.27%). The level of serum potassium was also high. There were significant positive correlation values for the correlation of salivary flow with the disease´s time variables and serum creatinine. In the correlation of salivary flow rates with indices of oral hygiene, periodontal index, and DMFT, there were no statistically significant correlations. The levels of salivary flow correlated negatively with calcium and age of the patients.

Este estudo teve como objetivo analisar o efeito da contaminação por saliva humana na resistência de união (RU) da interface adesiva em dentina por microtração, nas características morfológicas da camada híbrida (CH) em microscopia confocal e no grau de conversão (GC) de 2 sistemas adesivos: Adper Single bond 2 (SB) e Single Bond® Universal (SU). Cento e oitenta dentes terceiros humanos hígidos foram divididos em 12 grupos (n=10), de acordo com o sistema adesivo utilizado, a presença de saliva e o tempo de armazenagem. Após o procedimento adesivo e aplicação da resina composta Filtek Z250, os dentes foram mantidos em água destilada em estufa a 37°C por 48 horas, 6 meses ou 12 meses antes de serem seccionados em palitos (0,8mm x 0,8mm, aproximadamente) para serem levados à máquina de ensaios universal Instron para os testes de microtração. Para à análise da interface adesiva em microscopia confocal de varredura a laser para verificação e mensuração de alterações internas na interface foram utilizados 60 dentes divididos em 6 grupos (n=10) de acordo com os tempos de 48 horas, 6 meses, e 12 meses respectivamente, empregando os sistemas adesivos (SB) e (SU). O efeito da presença de saliva também foi avaliado pelo grau de conversão dos adesivos, empregando-se espectroscopia de infravermelho transformada de Fourier empregando os sistema adesivos (SB) e (SU) com incorporação de saliva humana na sua composição (n=5) com concentrações 10%, 25% e 50% em vol. Para a comparação das variáveis: RU, (GC), espessura da CH, na presença de saliva e tempo de armazenamento foram utilizados os testes de Análise de Variância a três critérios e de comparações múltiplas de Tukey (p<0,05). Os valores de RU (MPa±dp: 48horas/6meses/1ano) foram: SB (43,53 ±6,0; 40,10±3,4; 38,59±5,4); SalSB (43,09±6,2; 39,86±6,6; 37,255,8); SU (42,98±4,3; 39,30±3,6; 40,44±5,7); Sal SU (44,39±4,2; 42,26±2,5; 38,26±5,7). Os Valores médios da CH (MPa±dp: 48horas/6meses/1ano) foram: SalSB (3,59±0,8; 3,59±1,0; 2,08±1,5). SalSU (1,26±0,5; 1,73±0,8; 1,07±0,3). Os valores de GC (MPa±dp: 10%/25%/50%vol) foram: SB (85,59±3,4; 49,68±12,8; 38,56±11,8); SU (85,52±3,3; 86,27±3,5; 57,82±11,1).Conclui-se, portanto, que a contaminação por saliva humana não interferiu na RU da interface dentina/resina composta após 48 horas, 6 meses e 12 meses. A morfologia da camada hibrida foi alterada pela presença da saliva nos períodos 6 e 12 meses,. O GC dos sistemas adesivos foi afetado pela presença de saliva após a polimerização imediata. Entretanto o fator tempo foi determinante para a deformação da interface dentina/resina para ambos os sistemas adesivos. / The objective of this study was to analyze the effect of human saliva contamination on bond strength of the dentin/adhesive interface, morphology of the hybrid layer by confocal microscopy and SEM analysis and degree of conversion of 2 adhesive systems: Adper Single bond 2 (SB) and Single Bond® Universal ( SU). One hundred and eighty healthy human third teeth were divided into 12 groups (n = 10), according to the adhesive system used, the presence of saliva and the storage time. After the adhesive procedure and placement of resin composite (Filtek Z250), the teeth were stored in distilled waterat 37 ° C for 48 hours, 6 months or 12 months before being cut into sticks (0.8mm x 0.8mm, approximately) to the microtensile strength tests. For the analysis of the adhesive interface in confocal microscopy of laser scanning for verification and measurement of internal interface changes, 60 teeth were used divided into 6 groups (n = 10) according to the storage time: 48 hours, 6 months, and 12 monthsand (SB) and (SU). The effect of the presence of saliva was also evaluated by the degree of conversion of the adhesives using Fourier transform infrared spectroscopy employing adhesive (SB) and (SU) systems incorporating human saliva in its composition (n = 5) with 10%, 25% and 50% vol. For the comparison of the variables: bond strength, degree of conversion, and hybrid layer thickness in the presence of saliva and storage time, the three criteria Variance Analysis and Tukey multiple comparisons tests (p <0.05) were used. The values of bond strength (MPa ± dp: 48hours / 6meses / year) were: SB (43.53 ± 6.0, 40.10 ± 3.4, 38.59 ± 5.4); SalSB (43.09 ± 6.2, 39.86 ± 6.6, 37.255.8); SU (42.98 ± 4.3, 39.30 ± 3.6, 40.44 ± 5.7); SU salt (44.39 ± 4.2, 42.26 ± 2.5, 38.26 ± 5.7). The mean values of hybrid layer thickness (MPa ± dp: 48hours / 6meses / year) were: SalSB (3.59 ± 0.8, 3.59 ± 1.0, 2.08 ± 1.5). SalSU (1.26 ± 0.5, 1.73 ± 0.8, 1.07 ± 0.3). The values of degree of conversion (MPa ± dp: 10% / 25% / 50% vol) were: SB (85.59 ± 3.4, 49.68 ± 12.8, 38.56 ± 11.8); (85.52 ± 3.3, 86.27 ± 3.5, 57.82 ± 11.1). It was therefore concluded that human saliva contamination did not interfere on bond strength of the dentin/adhesive interface after 48 hours, 6 months and 12 months. The morphology of the hybrid layer was altered by the presence of saliva after 6 and 12 months. The degree of conversion of adhesive systems was affected by the presence of saliva immediately after polymerization. However, the time factor was determinant for the dentine/resin interface deformation for both adhesive systems.

A doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH) é uma complicação que ocorre após o transplante alogênico de medula óssea. A doença é mediada por células T do enxerto que atacam as células e os tecidos do receptor; um processo inflamatório, que ataca vários órgãos e tecidos, sendo este processo responsável por 15% das causas de óbito após o acometimento da doença. As citocinas estão envolvidas na ativação das células T citotóxicas e células natural killer (NK), que causam as lesões nas glândulas salivares e exibem características de morte celular com infiltração de linfócitos conduzindo à apoptose. É conhecido que as unidades secretoras das glândulas salivares, após serem acometidas pela DECH, não recuperam o seu status funcional e a presença do infiltrado inflamatório pode ser um fator importante na fibrose das glândulas salivares e outros tecidos. Há evidências de uma redução significativa do fluxo salivar nos pacientes com DECH e de alterações importantes na proteômica salivar (IgA, IgG, lactoferrina) e polimorfismos que modifiquem a síntese de proteínas que devem ser consideradas para a evolução do paciente. Consequentemente os pacientes apresentam redução de fluxo salivar, com perda variável das unidades secretoras glandulares, comprometendo a qualidade de vida e os resultados do transplante. E para melhor compreensão da DECH, contribuindo para o diagnóstico precoce e na conduta destes pacientes, o presente estudo determinou o perfil proteômico dos pacientes com a doença do enxerto contra o hospedeiro crônica e comparou com o perfil de proteínas dos pacientes submetidos ao transplante de células tronco hematopoiéticas em cinco diferentes períodos, por meio da coleta de saliva, uma técnica não invasiva, e análise proteômica; além de comparar o perfil com os grupos controles (Líquen plano oral e indivíduos saudáveis). Foram incluídos neste estudo o total de 23 pacientes submetidos ao transplante de células-tronco hematopoiéticas, na Unidade de Transplante de Medula Óssea do Hospital das Clínicas da Universidade de São Paulo. As amostras foram submetidas a análises prévias em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS) e gel bidimensional (2-DE) para o conhecimento do perfil proteômico destes pacientes. As análises foram feitas por espectrometria de massa e os dados obtidos foram confrontados com banco de dados humanos. As proteínas do grupo dos pacientes com DECHc foram comparadas com o grupo controle de indivíduos saudáveis, por meio do heatmap, e ressaltamos as proteínas de maior abundância. Portanto 16 proteínas mostraram uma maior expressão, Ig gamma-1 chain C region; Isoform H14 of Myeloperoxidase; Isoform 2 of 14-3-3 protein Sigma; Fibrinogen beta chain; Alpha- 1-acidic glycoprotein 1; Isoform gamma-A of Fibrinogen gamma chain; Hemopexin; Keratin type I CK 14; Alpha-2-Macroglobulin; Thioredoxin; Complement C3; Vitamin D; Keratin type I CK16; Lactoperoxidase; Cystatin B e Neutrophil elastase. No entanto, ao comparamos estas proteínas com os diversos períodos analisados e os grupos controles, ressaltamos a importância de três proteínas para a doença do enxerto contra o hospedeiro crônica: Isoform 2 of 14-3-3 protein sigma, Hemopexin e CK14 / Graft versus host disease (GVHD) is a complication that occurred after allogeneic bone marrow transplantation. The disease is mediated by graft T cells that attack as cells and tissues of the recipient; An inflammatory process, which attacks various organs and tissues, being responsible for 15% of the causes of death after the disease. Cytokines are involved in the activation of cytotoxic T cells and natural killer (NK) cells, which cause lesions in salivary glands and exhibit cell death characteristics with lymphocyte infiltration leading to apoptosis. It is known as the secretory units of the salivary glands, after being affected by GVHD, do not recover their functional state and the presence of the inflammatory infiltrate can be an important factor in the fibrosis of the salivary glands and other tissues. There is evidence of a significant reduction in salivary flow in patients with GVHD and significant changes in salivary protein (IgA, IgG, lactoferrin) and polymorphisms that modify a protein symptom that are considered for patient evolution. Consequently, patients with salary reduction, with variable loss of glandular secretory units, compromise quality of life and transplant results. In order to better understand GVHD, contributing to the early diagnosis and in the management of these patients, the present study determined the proteomic profile of patients with graft versus chronic host disease and compared them with the protein profile of patients submitted to cell transplantation Hematopoietic stem cells in five different periods, through the collection of saliva, a noninvasive technique and proteomic analysis; In addition to a profile with the control groups (Lichen planus oral and healthy individuals). Included in this study were the 23 patients submitted to hematopoietic stem cell transplantation in the Bone Marrow Transplantation Unit of the Hospital das Clínicas of the University of São Paulo. As samples were submitted to previous analyzes on polyacrylamide gel containing sodium dodecyl sulfate (SDS) and 2-dimensional gel (2-DE) to know the proteomic profile of these patients. The analyzes were done by mass spectrometry and the data obtained were compared with human data. The proteins of the group of patients with GVHDc were compared to the control group of healthy individuals by means of the Heatmap, and we emphasized as proteins of greater abundance. Therefore, 16 proteins show a greater expression, Ig gamma-1 chain C region; Isoform H14 of Myeloperoxidase; Isoform 2 of 14-3-3 protein Sigma; Fibrinogen beta chain; Alpha-1-acidic glycoprotein 1; Isoform gamma-A of Fibrinogen gamma chain; Hemopexin; Keratin type I CK 14; Alpha-2-Macroglobulin; Thioredoxin; Complement C3; Vitamin D; Keratin type I CK16; Lactoperoxidase; Cystatin B e Neutrophil elastase. Isoform 2 of 14-3-3 protein sigma, Hemopexin and CK14. Isoform 2 of 14-3-3 protein sigma, Hemopexin and CK14. However, when comparing these proteins with the various types of analyzes and the control groups, we emphasize the relevance of three proteins for the graft versus host disease: Isoform 2 of 14-3-3 protein sigma, Hemopexin and CK14

Objetivos: Avaliar os níveis de mieloperoxidase do fluido gengival (MPO) e de peroxidase salivar (SPO) de pacientes portadores de diabetes mellitus tipo 2 com periodontite crônica generalizada (DMDP) antes e após o tratamento periodontal. Material e Métodos: Participaram do estudo 31 indivíduos com DMDP, 31 controle com DM 2 (DM), 31 com periodontite crônica generalizada sem diabetes (DP) e 31 Controles(C) saudáveis periodontalmente e sistemicamente. Foram coletados dados de parâmetros clínicos como profundidade clínica de sondagem (PCS), nível clínico de inserção (NCI), sangramento à sondagem (SS), índice de placa (IP) e amostras de sangue para hemoglobina glicada, saliva e fluido gengival (FG) de todos os pacientes antes e 30 dias após o tratamento periodontal (TP). A atividade das enzimas foi determinada pela técnica de espectrofotometria. Os dados clínicos e enzimáticos foram analisados por métodos estatísticos não-paramétricos. Resultados: No baseline, a atividade da MPO estava maior no grupo DMDP: 1893,27 comparado ao grupo DM: 1202,73 (p0,015) e ao grupo C: 6,46 (p0,001). Também se mostrou mais elevada no grupo DP: 2196,10 em relação ao grupo C: 6,46 (p0,007). O tratamento periodontal se mostrou efetivo na redução de MPO nos grupos DMDP e DP (p0,004). A atividade da SPO estava mais elevada na comparação entre os grupos DMDP: 138859,10 e grupo C: 26927,453 (p0,001) e DMDP com o grupo DP: 59115,99(p<0,02). O tratamento periodontal se mostrou eficiente para a redução dos níveis de SPO nos grupos DMDP e DP, mas apenas foi significante para o grupo DP (p<0,005). Conclusão: A SPO apresentou níveis mais elevados nos grupos DMDP comparado ao grupo DP e ao grupo C. A MPO apresentou níveis mais elevados no grupo DMDP comparados aos grupos DM e C. E o grupo DP mostrou maiores níveis de MPO em comparação ao grupo C. O tratamento periodontal foi efetivo na melhora dos parâmetros clínicos periodontais, no volume do FG nos grupos DMDP e DP que se refletiu na redução dos níveis de SPO no grupo DP e de MPO nos grupos DMDP e DP. Após o tratamento periodontal, os níveis de MPO se mostraram maiores para o grupo DMDP comparados aos níveis observados no grupo DP. / Objectives: To evaluate the levels of gingival crevicular fluid (GCF) myeloperoxidase (MPO) and salivary peroxidase (TSP) in type 2 diabetes mellitus patients with generalized chronic periodontitis (DMDP) before and after the nonsurgical periodontal treatment (PT). Material and Methods Thirty-one individuals were included in each group: DMDP, DM, chronic periodontitis (DP), control (C). Plaque index (PI), bleeding on probing (BOP), probing depth (PD) and clinical attachment level (CAL), blood, saliva and GCF of all patients were collected at baseline and 30 days after PT. The enzyme activity was determined by spectrophotometer. Clinical and enzymatic data were analyzed by non-parametric statistical methods. Results: At baseline, the MPO activity was significantly higher in the DMDP: 1893.27 compared to the DM group: 1202.73 (p ) and to C group: 6.46 (p ). Results also showed significantly higher levels in the DP group: 2196.10 compared to the C group: 6.46 (p 0.007). PT reduced MPO levels in DP and DMDP groups (p 0.004). TPS activity was significantly higher in DMDP: 138859.10 and C: 26927.453 groups (p when compared with DMDP and DP: 59115.99 groups (p<0.02). PT effectively reduced TPS levels of DMDP and DP groups, but achieved statistical significance for the PD group (p <0005). Conclusion: TPS showed higher levels for DMDP groups compared to PD and C group. MPO showed higher levels for DMDP group compared to DM and C. PD group showed higher levels of MPO compared to C group. Periodontal treatment resulted in significant improvement of clinical parameters and FG volume for both groups DP and DMDP. That was reflected in the low levels of TPS in DP group and the low levels of MPO in DP and DMDP groups. After periodontal therapy, MPO levels were higher for DMDP group compared to the levels observed in PD group.

O complexo salivar da sanguessuga H. depressa é composto pelas glândulas salivares e probóscide. Análises bidimensionais (2D) mostraram que a maioria das proteínas apresentam pI entre 3.5 à 9.5 e MM entre 10 à 105 kDa. O mapa 2D do complexo salivar apresentou 352 spots totais, sendo 249 exclusivos da saliva (corado por nitrato de prata) e 219 spots totais (corado por Coomassie Blue). As proteínas foram identificadas após sequenciamento tandem MS (proteoma) pela complementariedade às sequências traduzidas do cDNA (transcriptoma). As proteínas mais abundantes foram: antiagregante plaquetário; miohemeritrina e anidrase carbônica. Estas proteínas devem exercer um papel na digestão ou anticoagulação do sangue durante a alimentação. A zimografia também identificou uma protease gelatinolítica (45 kDa). Porém, lefaxin (inibidor de FXa) e hementerina (fibrinogenolítico e inibidor de agregação plaquetária) não foram identificados por estas técnicas biotecnológicas, o que mostra a necessidade de técnicas adicionais para a completa elucidação da constituição desta amostra. / The salivary complex from H. depressa leech is composed of salivary gland and proboscis. Two-dimensional (2D) analysis showed that majority of proteins have pI from 3.5 to 9.5 and MW from 10 to 105 kDa. The 2D gel of salivary complex showed 352 total spots, 249 of them were from saliva (silver stained) and 219 total spots (Coomassie Blue stained). Proteins were identified after tandem MS sequencing (proteome) and complementar analysis of translated sequences from cDNA (transcriptome). The most abundant proteins were: antiplatelet protein; myohemerytrin; carbonic anhydrase. These proteins may have a role in digestion or antihemostatic system during blood feeding. The zymographic assay identified a gelatinolytic protein (45 kDa). But, lefaxin (inhibitor of Fxa) and hementerin (fibrinogenolytic and antiplatelet function) were not identified by these biotechonolgical techniques, showing that additional techniques are necessary for complete knowledge about the composition of this sample.