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Margens silenciadas : arte colaborativa e a busca por protagonismo

Graça, Luiza Abrantes da January 2016 (has links)
Esta pesquisa de mestrado discute, através de autores enraizados nas artes visuais e também em outras arenas, como a sociologia e a antropologia, as relações interpessoais em dois trabalhos coletivos e colaborativos de arte, focando nos papéis que cada agente exerce nas produções e questionando se há a presença de suas particularidades sociais e culturais nestas práticas. Focando-se nos coletivos Sopapo de Mulheres, de Porto Alegre, e Dulcinéia Catadora, de São Paulo, ambos compostos por mulheres, a presente dissertação questiona como estas duas práticas agregam às suas agendas as peculiaridades, os devires de cada agente, e como estas negociações possibilitam trabalhos de arte pautados na colaboração e protagonismo de suas integrantes. Buscando diálogos com outros trabalhos em arte colaborativa realizados em território brasileiro, são levantados pressupostos a respeito da progressiva produção de trabalhos de teor colaborativo em zonas periféricas no país, bem como as modificações que seus locais de origem e inserção sofrem após agenciamentos que modificam partilhas comuns, rearranjando papéis e criando novas audiências. / This master research discuss, through authors from the visual arts and other areas, such as sociology and anthropology, the interpersonal relationships in two collective and collaborative works, focusing in the roles that each one practice in the productions and questioning if their social and cultural peculiarities are present in these activities. Focusing in the collective groups Sopapo de Mulheres, from Porto Alegre, and Dulcinéia Catadora, from São Paulo, both formed by women, the present master thesis question how these two groups assemble to their agendas the particularities, becomings, of each person, and how these negotiations enable art works based in the collaboration and leading role of its members. Pursuing a dialogue with other studies about collaborative art made in Brazil, assumptions are raised about the progressive production of collaborative works in the country’s suburb zones, as well as the transformations that their origin and context place suffer after agency services modify ordinary distributions, rearranging roles and creating new audiences.
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Genes de referência de Diaphorina citri para estudos de expressão gênica quantitativa e seu controle por RNAi em laranja doce / Diaphorina citri reference genes for quantitative gene expression studies and their control by RNAi in sweet orange

Meire Menezes Bassan 16 May 2017 (has links)
O HLB tem sido uma das principais doenças responsáveis pelos prejuízos econômicos enfrentados na citricultura mundial. Essa doença é associada a três espécies de bactérias de colonização restrita ao floema das plantas, as quais são transmitidas pelo psilídeo Diaphorina citri. Uma vez que na?o ha? medidas curativas para a doenc?a, o manejo baseia-se em medidas preventivas incluindo o controle do inseto vetor. O silenciamento gênico por interferência de RNA (RNAi) é uma nova ferramenta biotecnológica no controle de pragas, pois, proporciona uma ação eficiente e gene-espécie específica. Entretanto, essa tecnologia depende de análises de expressão gênica com genes de referência adequados e estáveis. Este trabalho buscou selecionar e validar a estabilidade da expressão de seis genes de referência potenciais de D. citri sob diferentes condições experimentais e avaliar a biologia deste inseto em plantas transgênicas de laranja doce expressando dsRNA do gene DcV-ATPase-A visando o seu controle. Para isso, foram avaliados: 1) a estabilidade de seis genes candidatos a referência: fator de elongação 1alfa (EF 1-α), actina (ACT), gliceradeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH), proteina ribossomal L7 (RPL7), proteina ribossomal L17 (RPL17) e alfa tubulina (TUB), através de diferentes algorítimos matemáticos: Delta Ct, NormFinder, BestKeeper e Genorm em cinco estádios de desenvolvimento (Ninfas de 1° e 2° ínstar; Ninfa de 3° ínstar; Ninfas de 4° e 5° ínstar , Adulto de 1 dia; Adulto de 10 dias) e dois hospedeiros (Citrus sinensis e Murraya paniculata). O ranquamento final dos genes foi obtido através do RefFinder e a validação dos mesmos através do gene V-ATPase-A; 2) a sobrevivência de psilídeos adultos alimentados em plantas transgênicas; a biologia da D. citri em plantas transgênicas expressando o dsRNA do gene DcV-ATPase-A; e a expressão relativa deste gene. Recomenda-se a utilização de dois genes de referência quando consideram-se diferentes hospedeiros e fases de desenvolvimento distintas. Para análise de expressão gênica, independentemente da fase de desenvolvimento do inseto, quando utiliza-se M. paniculata como hospedeiro de criação, recomenda-se a utilização dos genes GAPDH e RPL7, enquanto que para C. sinensis sugerem-se os genes GAPDH e EF 1-α. Os bioensaios demonstraram a internalização pelo inseto das moléculas de dsRNA/siRNA produzidas pelas plantas transgênicas e o potencial de redução da expressão do gene alvo pelo RNAi. Apesar da ausência de fenótipo letal em psilídeos adultos alimentados nas plantas transgênicas, alterações significativas na duração, sobrevivência e longevidade foram verificadas em D. citri quando esta desenvolveu seu ciclo biológico nas plantas que expressam dsRNA do gene DcVAPTase-A. / HLB has been one of the main diseases responsible for the economic losses faced in the citriculture worldwide. This disease is associated to three species of colonization bacteria restricted to the phloem of the plants, which are transmitted by the psyllid Diaphorina citri. Since there are no curative methos for the disease, management is based on preventive methods including vector insect control. Gene silencing by RNA interference (RNAi) has been presented as a new biotechnological tool in pest control, since it provides a efficient and especific gene-specie control. However, this technology depends on analyzes of gene expression with suitable and stable reference genes. Thus, this work aimed to select and validate the stability of the expression of six potential reference genes of D. citri under different experimental conditions and to evaluate the biology of this insect on sweet orange transgenic plants expressing dsRNA of DcV-ATPase-A gene aiming their control. In order to do this, it was evaluated: 1) the stability of six candidate reference genes: elongation factor 1 alpha (EF 1-α), actin (ACT), glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH), ribosomal protein L7 (RPL7), ribosomal protein L17 (RPL17) e alpha tubulin (TUB), through different mathematical algorithms: Delta Ct, NormFinder, BestKeeper and Genorm in five developmental stages and two hosts (Citrus sinensis and Murraya paniculata). The final rank was obtained through the RefFinder and validated by the V-ATPase-A gene; 2) the survival of adult psyllids fed on transgenic plants; the biology of D. citri in transgenic plants expressing dsRNA of the DcV-ATPase-A gene; and the relative expression of this gene. According to our results, two reference genes are recommended when different hosts and different developmental stages are considered. For gene expression analysis, regardless the insect developmental stage, when using M. paniculata as a breeding host, it is recommended to use GAPDH and RPL7 genes, whereas for C. sinensis GAPDH and EF 1-α are indicated. The bioassays demonstrated the insect\'s internalization of the dsRNA / siRNA molecules produced by the transgenic plants and the potential for reducing the target gene expression by RNAi. Despite the absence of lethal phenotype in adult psyllids fed to transgenic plants, significant changes in duration, survival and longevity were observed for D. citri when it developed its biological cycle in plants that express dsRNA of the DcVAPTase-A gene.
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O movimento de (des)silenciamento em aula de Língua Portuguesa na rede estadual

Amaral, Maria Feliciana da Silva 07 November 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T18:22:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Feliciana da Silva Amaral.pdf: 2487228 bytes, checksum: 145d487a1dbf459ffe5cbf76d5e939b9 (MD5) Previous issue date: 2013-11-07 / Secretaria da Educação do Estado de São Paulo / The objective of the research is to critically understand the existing modes of (un)silencing in a public school classroom in São Paulo. This research aims at answering the following question: How does the movement of (un)silencing occurs in a Portuguese language class with a group of students in the second and later the third high school years? In order to answer it, it was necessary to investigate which modes of managing the interaction within the participants facilitated the process of silencing and which enabled the process of unsilencing. This study takes place within the Applied Linguistic context and it is based on Social Cultural Historical Activity Theory, which reiterates the importance of language as a genetic source of human activity and consciousness, as stated by Vygotsky (1934/1999), Leontiev (1977-78) and Engeström (1999). This is a Critical Collaborative Research PCCol (MAGALHÃES, 2006), which aims at understanding, observing, transforming and contributing to the development of students and teachers in such way that all participants involved in this movement interact while searching for alternatives towards a critical, citizenship participation. This project has selected and analyzed the interactions within the participants during three Portuguese language classes recorded in audio and video. The data analysis was organized within an enunciative-discursive-linguistic perspective. The results show that the unsilencing process may be facilitated by more collaborative class managing proposals. Nevertheless, it is essential that the teacher intentionally engages and employs the necessary efforts towards the development of managing modes that involve the group in this direction / O objetivo deste trabalho é compreender de modo crítico as formas de (des)silenciamento existentes na sala de aula em uma escola estadual de São Paulo. A pergunta que direciona esta pesquisa é: como ocorre o movimento de (des)silenciamento em uma aula de LP com um mesmo grupo de ensino médio no 2º ano e, posteriormente, no 3º ano? Para respondê-la, foi preciso investigar que modos de gestão da interação entre os participantes propiciam o silenciamento e que modos propiciam o dessilenciamento. O estudo desenvolve-se no contexto da Linguística Aplicada e se insere na Teoria da Atividade Sócio-Histórico-Cultural, que reitera a importância da linguagem como fonte constituinte da atividade humana e da consciência, conforme Vygotsky (1934/1999), Leontiev (1977-78) e Engeström (1999). Trata-se de uma Pesquisa Crítica de Colaboração PCCol (MAGALHÃES, 2006), cujo foco é conhecer, observar, transformar e contribuir com alunos e professores, de forma que todos os participantes envolvidos nesse movimento se inter-relacionem, em busca de alternativas para um agir crítico e cidadão. Este projeto escolheu como corpus as interações entre os participantes durante três aulas de Língua Portuguesa, recuperadas por meio de gravações em áudio e vídeo. A análise de dados se organizou a partir da perspectiva enunciativo-discursivo-linguística. Os resultados mostram que o dessilenciamento pode ser propiciado a partir de propostas de gestão realizadas em sala de aula. No entanto, é preciso um engajamento intencional e um esforço do professor para o desenvolvimento de modos de gestão que mobilizem o grupo nessa direção
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A percepção do processo de silenciamento em ambiente escolar por alunos de instituições públicas de Alfenas - MG

FERREIRA, Reginaldo 28 February 2018 (has links)
A presente dissertação, cujo tema é “A Percepção do Processo de Silenciamento em Ambiente Escolar por alunos de Instituições Públicas de Alfenas - MG”, pretende verificar se a escola pública brasileira atua de maneira efetiva e institucionalizada para a manutenção de um processo oficioso de silenciamento dos alunos, averiguando se suas práticas são dialógicas ou monológicas. Entende-se, nesta dissertação, a democracia no seu sentido mais amplo de direito à voz, ou seja, a manutenção de uma dialogia real. O que nossa experiência como educador tem atestado, porém, é que, muitas vezes, os alunos são silenciados sob a alegação da autoridade do professor ou da manutenção da hierarquia escolar que, em seu exercício do poder com amparo institucional, apenas estabelece padrões que os alunos devem seguir, não havendo possibilidade de diálogo. É comum constatar que o aluno só está dentro de sala de aula porque tem sido obrigado a estar, uma vez que a escola não tem oferecido elementos suficientes para despertar a criatividade, a imaginação, o prazer e o desejo de partilhar os conteúdos lançados em sala de aula. O modelo educacional apresentado atualmente, tem se mostrado bastante ineficaz. Portanto, cabe investigar em que medida esse sistema impõe um molde de ensino-aprendizagem que não condiz com a proposta de educação democrática. Para isso, o foco desta pesquisa foi a percepção que os alunos de diferentes níveis da Educação Básica têm da questão do silenciamento, verificando se eles consideram que a escola se preocupa com o diálogo ou se exerce uma prática educativa monológica e estabelece uma ordenação em que somente os discursos da escola têm validade. Os resultados obtidos demonstram que, do ponto de vista dos educandos, estes são silenciados pela voz dos professores e por outros elementos constituintes do sistema escolar formal. Isso permitiu elucidar em que medida esses alunos deixam de ser agentes ativos de seu conhecimento para ser receptores passivos dos conteúdos impostos pelos educadores. / The present dissertation, whose theme is " The Perception of the Process of Silencing in School Environment by students of Public Institutions of Alfenas - MG", intends to verify if the Brazilian public school acts in an effective and institutionalized way to maintain an informal process of silencing the students, ascertaining if their practices are Dialogical or monological. It is understood, in this dissertation, democracy in its broader sense of right to voice, that is, the maintenance of a real dialogue. What our experience as an educator has attested, however, is that students are often silenced under the allegation of teacher authority or the maintenance of the school hierarchy which, in its exercise of power with institutional protection, only establishes standards that Students should follow, with no possibility of dialogue. It is common to see that the student is only in the classroom because he has been forced to be, since the school has not offered enough elements to awaken the creativity, imagination, pleasure and the desire to share the contents released in the classroom of class. The educational model presented today has been very ineffective. Therefore, it is worth investigating to what extent this system imposes a teaching-learning model that does not fit with the proposal of democratic education. For this, the focus of this research was the perception that the students of different levels of Basic Education have of the question of the silencing, verifying if they consider that the school worries about the dialogue or if it exercises a monologic educative practice and establishes a ordenation in which Only the speeches of the school are valid. The results show that, from the point of view of the students, they are silenced by the teachers' voice and by other constituent elements of the formal school system. This allowed us to elucidate the extent to which these students cease to be active agents of their knowledge to be passive recipients of the content imposed by educators.
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Quando a “navalha é afiada”, o povo não entra em cena : uma análise dos discursos proibidos no teatro de Plínio Marcos, na censura oficial e na imprensa

Leppos, Denise Aparecida de Paulo Ribeiro 30 June 2017 (has links)
Submitted by Aelson Maciera (aelsoncm@terra.com.br) on 2017-09-15T20:08:40Z No. of bitstreams: 1 TeseDAPRL.pdf: 31537113 bytes, checksum: 201a44e869a8303eae466d5a1fa34a15 (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (producaointelectual.bco@ufscar.br) on 2017-10-25T17:38:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseDAPRL.pdf: 31537113 bytes, checksum: 201a44e869a8303eae466d5a1fa34a15 (MD5) / Approved for entry into archive by Ronildo Prado (producaointelectual.bco@ufscar.br) on 2017-10-25T17:38:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseDAPRL.pdf: 31537113 bytes, checksum: 201a44e869a8303eae466d5a1fa34a15 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-25T17:44:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseDAPRL.pdf: 31537113 bytes, checksum: 201a44e869a8303eae466d5a1fa34a15 (MD5) Previous issue date: 2017-06-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Dans cette recherche, nous nous proposons d’investiguer les raisons pour lesquelles l’oeuvre du dramaturge Plínio Marcos a été censuré durant la Dictature Civil-Militaire brésilienne. Pour répondre à cette question, nous en formulons d’autres à propos des dires qui nous permettent de comprendre les motifs et les conditions des silenciements manifestés dans certains discours, comme : qui le dit ? ; comment cela est dit ? ; quand cela est dit ? ; à qui cela est dit ? ; où cela est dit ? ; pour quoi cela est dit ? ; etc. Nous travaillons avec la présupposition d’avoir directement et indirectement une incidence du contexte autoritaire dans les productions du dramaturge brésilien sous la forme de censure des oeuvres et même dans les propres relations entre les personnages de ses pièces, et encore dans sa répercussion dans la critique publiée dans la presse de cette période. A partir du postulé discursif selon lequel ce n’est pas tout le monde qui peut dire n’importe quoi dans n’importe quelle circonstance, nous avons analysé trois types de matérialité : i) ses textes dramatiques produits dans la période dictatoriale ; ii) les documents officiels émis (des avis et des rapports) par les agences répressives, à savoir : DOPS, Système National d’Information (SNI) et les procès de censure préalable présents dans l’Archive Miroel Silveira – AMS ; iii) des textes et des critiques véhiculés dans la presse écrite qui ont traité de l’oeuvre et/ou de sa censure. Fondés dans l’Analyse du Discours française, face à une approche des correspondances entre constitution, formulation et circulation, nous cherchons à décrire et à interpréter discursivement les relations entre Théâtre, Censure et Presse en observant les propriétés et régularités discursives de ceux qui étaient considérés des dires subversifs dans le milieu artistique. Il est important de souligner que nous circonscrivons notre recherche aux moments où la relation théâtre/police est ressorti. Envisageant d’achever notre objectif, nous organisons cette thèse selon les types de manifestation prédominante de la censure : ordre religieux, ordre morale et ordre politique. Ainsi, notre recherche se soutient dans la compréhension de la relation entre la production des effets de sens dans la constitution du discours artistique du théâtre brésilien contemporain, en observant les discours dans ses différentes matérialités dans un groupe de transformations historique et sociales en conditions répressives de production. / Nesta pesquisa, nos propomos a investigar as razões pelas quais a obra do dramaturgo Plínio Marcos foi censurada durante a Ditadura Civil-Militar brasileira. Para responder a essa nossa indagação, formulamos outras questões sobre os dizeres que nos permitiram compreender os motivos e as condições dos silenciamentos manifestados em certos discursos, como: quem diz?; como diz?; quando diz?; para quem diz?; onde diz?; por que diz?; etc. Trabalhamos com o pressuposto de que há direta e indiretamente uma incidência do contexto autoritário nas produções do dramaturgo brasileiro, sob a forma de censura das obras e nas próprias relações entre as personagens de suas peças, e, ainda, em sua repercussão na crítica publicada na mídia deste período. A partir do postulado discursivo segundo o qual não é qualquer um que pode dizer qualquer coisa em qualquer circunstância, analisamos neste trabalho três tipos de materialidades: i) os textos dramáticos do referido dramaturgo que foram produzidos no período ditatorial; ii) os documentos oficiais emitidos (pereceres e relatórios) pelas agências repressoras, a saber: DOPS, Sistema Nacional de Informações (SNI) e os processos de censura prévia presentes no Arquivo Miroel Silveira (AMS); iii) textos e críticas veiculados na mídia impressa que trataram da obra e/ou de sua censura. Fundamentados na Análise do Discurso de linha francesa, mediante uma abordagem das correspondências entre constituição, formulação e circulação, buscamos descrever e interpretar discursivamente as relações entre Teatro, Censura e Mídia, observando as propriedades e regularidades discursivas daqueles que eram então considerados dizeres subversivos no meio artístico. Vale ressaltar que delimitamos a nossa pesquisa aos momentos em que a relação teatro/política se sobressaiu. Com vistas a alcançar nosso objetivo, organizamos esta tese conforme os tipos de manifestação predominante da censura, quais sejam: ordem religiosa, ordem moral e ordem política. Assim, nossa pesquisa foi sustentada na compreensão da relação entre a produção dos efeitos de sentido na constituição do discurso artístico do teatro brasileiro contemporâneo, observando o discurso em suas diferentes materialidades num conjunto de transformações históricas e sociais em condições repressivas de produção. / FAPESP: 2015/23138-3
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Mulheres e aids: silêncio e silenciamento

Rezende, Daniela Savaget Barbosa January 2012 (has links)
Submitted by Erica Netto (nettoeri@icict.fiocruz.br) on 2012-11-13T16:34:03Z No. of bitstreams: 1 PPGICS DANIELA SB REZENDE.pdf: 2253824 bytes, checksum: 12028f29834fd461496ff3b415a6aedd (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-13T16:34:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PPGICS DANIELA SB REZENDE.pdf: 2253824 bytes, checksum: 12028f29834fd461496ff3b415a6aedd (MD5) / Fundação Oswaldo Cruz. Presidência. Coordenadoria de Comunicação Social. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Esta dissertação se propõe a compreender as representações e sentidos do silêncio (e silenciamento) nas experiências de adoecimento de mulheres vivendo com HIV e aids, lançando luz a ideia de que o silêncio é também uma mediação, no que ele implica em expressão de sentidos, e não mudez. Para isso, toma-se como embasamento teórico que o silêncio corresponde a um modo específico de produção de sentidos e de ação social. Nessa perspectiva, a pesquisa buscou responder: o que é incomunicado por mulheres que vivem com HIV e aids e quais os sentidos produzidos por essa incomunicação? Para tanto, foram realizadas entrevistas em profundidade e observações das reuniões do Grupo de Mulheres vivendo e convivendo com HIV/aids que acontece na ONG Grupo Pela Vidda Rio de Janeiro. Foram traçados, ainda, mapas do mercado simbólico, buscando pensar os fluxos e atores da prática discursiva dessas mulheres e a presença do silêncio nesse cenário. A hipótese que preside a metodologia adotada é que o cenário da aids em mulheres é permeado por silêncios relacionados com as implicações da estigmatização presentes no centro da vulnerabilidade social feminina ao HIV/aids. Porém, não obstante essa realidade, as mulheres buscam espaços alternativos em que possam manifestar seus dramas e se solidarizarem com pessoas em situações semelhantes. / This thesis aims to understand the representations and meaning of silence in the experiences of woman living with HIV/AIDS, illuminating the idea that silence is also a mediation, in that involves the expression of meanings. To do this, is taken as the theoretical basis that silence corresponds to a specific mode of production of meanings and social action. For this perspective, the research sought to answer: what is “incommunicado” by woman living with HIV/AIDS and what the meaning producted by this lack of communication? Thus, we conducted interviews and observations of meetings of the Grupo de Mulheres living with HIV/AIDS that happens in the Grupo Pela Vidda Rio de Janeiro. We also made the “map of symbolic market”, trying to think factors and flows of woman discursive practices and the presence of silence in this scenario. The hypothesis that presides over the methodology adopted is that the epidemic of aids in women is permeated by silences related to the implications of stigma present in the center of female social vulnerability to HIV/AIDS. However, despite this reality, women seek alternative spaces in which to express their dramas and show solidarity with people in similar situations.
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Impactos do silenciamento do RNA não codificante PCA3 em células de câncer de próstata

Goulart, Ana Emília January 2014 (has links)
Submitted by Priscila Nascimento (priscila.nascimento@bio.fiocruz.br) on 2016-04-11T17:27:57Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado em Oncologia - INCa Ana Emília Goulart.pdf: 3332973 bytes, checksum: abe7cedda85b0558a252f168374ab1f4 (MD5) / Approved for entry into archive by Priscila Nascimento (priscila.nascimento@bio.fiocruz.br) on 2016-04-11T17:28:57Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado em Oncologia - INCa Ana Emília Goulart.pdf: 3332973 bytes, checksum: abe7cedda85b0558a252f168374ab1f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-11T17:28:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação de Mestrado em Oncologia - INCa Ana Emília Goulart.pdf: 3332973 bytes, checksum: abe7cedda85b0558a252f168374ab1f4 (MD5) / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Tecnológico em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Introdução: O PCA3 é um RNA não codificante (ncRNA), expresso especificamente na próstata, estando envolvido no controle da sobrevivência de células de carcinoma de próstata (CaP), através da via de sinalização do receptor de androgênio (AR). Objetivo: Investigar se diversos genes relacionados ao câncer – incluindo os envolvidos na Transição Epitelial Mesenquimal (EMT), os que apresentam potencial stemness e os co-reguladores do AR – podem estar envolvidos no processo de resposta ao silenciamento do PCA3. Além disso, objetivamos promover o silenciamento estável do PCA3 através da construção de um vetor lentiviral carreando short hairpin RNA (shRNA) específico para este ncRNA, vislumbrando estratégias terapêuticas para o CaP. Metodologia: Empregamos small interfering RNA (siRNA) ou shRNA com expressão baseada em vetores lentivirais para diminuir a expressão de PCA3 em células LNCaP e avaliar os efeitos deste silenciamento na sobrevivência destas células. Para isto, analisamos por qRT-PCR a expressão do PCA3 e de diversos genes relacionados ao câncer. Utilizamos microscopia confocal para analisar a expressão da proteína vimentina. Empregamos citometria de fluxo para verificar o percentual de células LNCaP GFP+ e, azul de tripan para avaliar o número de células viáveis, após o silenciamento estável do PCA3. Resultados: Dentre os co-reguladores do AR, ARA 70, ARA 54, Smad3 e EBP1 apresentaram expressão aumentada nas células LNCaP interferidas com siPCA3 em relação às células LNCaP interferidas com siScrbl, enquanto Smad 4 e ciclina D1 apresentaram expressão diminuída. Dentre 84 genes relacionados ao câncer, 16 apresentaram expressão alterada em células LNCaP- siPCA3 em relação ao controle. Destes, 30% codificam moléculas de transdução de sinais e fatores de transcrição. Observou-se expressão aumentada de E-caderina, Claudina-3, Citoqueratina-18, Snail, Twist e Slug em células LNCaP -siPCA3 em relação ao controle, enquanto observou-se expressão diminuída de Claudina-4, Citoqueratina-8 e Vimentina. O padrão de marcação de vimentina foi similar em células LNCaP – siPCA3 e células LNCaP – siScrbl. Não foi detectada a expressão de genes com potencial stemness nas condições testadas. Células transduzidas com vetores lentivirais carreando shPCA3 apresentaram diminuição estável da expressão do PCA3. Foi observada redução estável de cerca de 60% de células LNCaP GFP+ transduzidas com shPCA3, além de redução no número de células viáveis. Conclusão: O silenciamento do PCA3 reduz o número de células viáveis, através de um processo que envolve moléculas de transdução de sinais e fatores de transcrição que podem orquestrar a sobrevivência das células de CaP. A diminuição no número de células viáveis após a transfecção com siPCA3 parece não ser modulada pelo programa EMT clássico, embora a reversão parcial deste programa possa estar regulando a diminuição da sobrevivência celular induzida por siPCA3. A desregulação da expressão de coreguladores do AR observada pode estar envolvida na inibição da expressão dos genes alvo do AR. Nossos dados sugerem que este ncRNA desempenha papel regulador na transcrição gênica, sendo capaz de modular a expressão de genes de diversas vias de sinalização relacionadas ao câncer. Nossos resultados sugerem ainda que a redução estável do PCA3 apresenta potencial aplicação em estratégia terapêuticas que visem modular negativamente a sobrevivência das células de CaP. / Introduction: PCA3 is a prostate specific non coding RNA (ncRNA), involved in the control of prostate cancer (PCa) cell survival, through modulating androgen receptor (AR) signaling. Objective: In order to better characterize the molecular mechanisms by which PCA3 is controlling LNCaP cell survival, we aimed to investigate whether several cancer related genes, including those involved in epithelial-mesenchymal transition (EMT), stemness potential and AR co-regulators could be involved in this process in response to PCA3 downregulation. Moreover, we aimed to promote PCA3 stable silencing through a lentiviral vector containing a PCA3 short hairpin RNA (shRNA) specific sequence. Methodology: We used small interfering RNA (siRNA) or lentivirus vectorbased shRNA to downregulate PCA3 expression and evaluate the effects of this ncRNA knockdown on LNCaP cell survival. After PCA3 downregulation, cells were analyzed by qRT-PCR to investigate PCA3 and several cancer related genes expression. Confocal microscopy was performed to analyze vimentin expression. Flow cytometry was performed to analyze the percentage of LNCaP GFP positive cells and trypan blue staining to analyse the number of viable cells after PCA3 stable silencing. Results: Among AR co-regulators genes investigated, ARA70, ARA54, Smad 3 and EBP1 were upregulated in siPCA3- transfected cells in relation to scramble sequence LNCaP transfected cells, while Smad 4 and cyclin D1 were downregulated. We found that among 84 cancer-related genes tested, 16 were differentially expressed in LNCaP siPCA3-transfected cells when compared to transfected cells with a scramble sequence. Of these, 30% are genes coding for signal transduction molecules and transcription factors. Gene expression profile of EMT-related genes revealed that E-cadherin, Claudin-3, Cytokeratin-18, Snail, Twist and Slug are upregulated in LNCaP siPCA3-transfected cells compared to control, while Claudin-4, Cytokeratin-8 and Vimentin are downregulated. Vimentin expression staining patterns were similar between LNCaP siPCA3-transfect cells and control. Expression of stemness markers were not detected in these tested conditions. LNCaP cells transduced with lentiviral vectors carrying the GFP gene and shPCA3 stably dowregulated PCA3 expression, producing a reduction of 60% of LNCaP GFP+ cells compared to shScrbl transduced or non-transduced LNCaP cells. In addition, the number of viable cells was reduced after PCA3 stable silencing. Conclusion: PCA3 downregulation by RNAi leads to a loss of viability, through a process that involves key signal transduction molecules and transcription factors that could orchestrate PCa cells survival. Our results also suggested that the decrease in the number of LNCaP viable cells, observed after siPCA3 transfection, seems to don´t be modulated by the classical EMT program, although a partial reversion of this program could regulate the reduction of cell survival induced by siPCA3. Observed deregulated expression of AR co-regulators could be involved in the inhibition of the AR target genes expression. Our data suggest that that this ncRNA perform a regulatory role in gene expression, being able to modulate gene expression of several signaling pathways related to cancer. Moreover, our results suggest that the stable downregulation of PCA3 expression shows potential as a PCa therapeutic approach by negatively modulation cell survival.
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Margens silenciadas : arte colaborativa e a busca por protagonismo

Graça, Luiza Abrantes da January 2016 (has links)
Esta pesquisa de mestrado discute, através de autores enraizados nas artes visuais e também em outras arenas, como a sociologia e a antropologia, as relações interpessoais em dois trabalhos coletivos e colaborativos de arte, focando nos papéis que cada agente exerce nas produções e questionando se há a presença de suas particularidades sociais e culturais nestas práticas. Focando-se nos coletivos Sopapo de Mulheres, de Porto Alegre, e Dulcinéia Catadora, de São Paulo, ambos compostos por mulheres, a presente dissertação questiona como estas duas práticas agregam às suas agendas as peculiaridades, os devires de cada agente, e como estas negociações possibilitam trabalhos de arte pautados na colaboração e protagonismo de suas integrantes. Buscando diálogos com outros trabalhos em arte colaborativa realizados em território brasileiro, são levantados pressupostos a respeito da progressiva produção de trabalhos de teor colaborativo em zonas periféricas no país, bem como as modificações que seus locais de origem e inserção sofrem após agenciamentos que modificam partilhas comuns, rearranjando papéis e criando novas audiências. / This master research discuss, through authors from the visual arts and other areas, such as sociology and anthropology, the interpersonal relationships in two collective and collaborative works, focusing in the roles that each one practice in the productions and questioning if their social and cultural peculiarities are present in these activities. Focusing in the collective groups Sopapo de Mulheres, from Porto Alegre, and Dulcinéia Catadora, from São Paulo, both formed by women, the present master thesis question how these two groups assemble to their agendas the particularities, becomings, of each person, and how these negotiations enable art works based in the collaboration and leading role of its members. Pursuing a dialogue with other studies about collaborative art made in Brazil, assumptions are raised about the progressive production of collaborative works in the country’s suburb zones, as well as the transformations that their origin and context place suffer after agency services modify ordinary distributions, rearranging roles and creating new audiences.
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Silenciamento do gene de uma v-ATPase da mosca branca (Bemisia tabaci) por RNAi em tomateiro (Solanum lycopersicum)

Pizetta, Carolina Senhorinho Ramalho 28 February 2018 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2018. / Submitted by Fabiana Santos (fabianacamargo@bce.unb.br) on 2018-08-17T21:16:25Z No. of bitstreams: 1 2018_CarolinaSenhorinhoRamalho.pdf: 1487059 bytes, checksum: 301d2c8ba2b5d034e440b516646d5bd7 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-08-21T17:17:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_CarolinaSenhorinhoRamalho.pdf: 1487059 bytes, checksum: 301d2c8ba2b5d034e440b516646d5bd7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-21T17:17:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_CarolinaSenhorinhoRamalho.pdf: 1487059 bytes, checksum: 301d2c8ba2b5d034e440b516646d5bd7 (MD5) Previous issue date: 2018-08-17 / O tomateiro (Solanum lycopersicum L.) apresenta importância econômica e alimentar, sendo uma das principais hortaliças produzidas no Brasil. O alto custo de produção e grandes perdas econômicas da cultura do tomateiro estão fortemente relacionados a problemas fitossanitários, dentre eles, a infestação de mosca branca Bemisia tabaci que além de causar danos como inseto sugador, atua como vetor de diferentes gêneros virais, o que torna fundamental manter populações baixas desse inseto vetor no campo. A mosca branca é responsável por causar grandes danos à agricultura, por possuir desenvolvimento rápido e ser adaptada a diversos hospedeiros. A natureza invasora da mosca branca e sua alta taxa de reprodução dificultam o controle e favorecem o desenvolvimento de resistência aos inseticidas utilizados no seu combate, evidenciando a necessidade de alternativas mais eficientes de controle. O silenciamento gênico pós-transcricional via RNA interferente (RNAi) é uma das estratégias da engenharia genética, que pode ser utilizada na busca da obtenção de plantas resistentes a pragas com maior especificidade. A estratégia de RNAi foi utilizada com o objetivo de obter plantas de tomateiro resistentes à mosca branca, pelo silenciamento do gene da v-ATPase de Bemisia tabaci, devido à expressão de siRNAs. Explantes cotiledonares de tomateiro da variedade Micro-Tom foram transformados via Agrobacterium tumefaciens EHA 105 contendo um plasmídeo, que possui um cassete de supressão para o silenciamento do gene da v-ATPase de mosca branca. Foram geradas 13 linhagens transgênicas, confirmadas por PCR pela detecção do transgene de 576 pb correspondente à região do gene da v-ATPase. A inserção do transgene no genoma em alguns eventos foi confirmada por meio da análise de Southern blot. Análise da progênie confirmou a presença do inserto na geração T1, segregando em proporção mendeliana 3:1 e 15:1. Um bioensaio realizado com folhas destacadas das plantas T0 mostrou que a mortalidade de moscas brancas pode chegar próximo a 100% em cinco dias de interação com algumas linhagens. / The tomato plant (Solanum lycopersicum L.) is economically important, being one of the main vegetables produced in Brazil. The high cost of production and huge economical losses in tomato cultivation are strongly related to phytosanitary problems, among them the whitefly Bemisia tabaci, besides causing damage as a sucking insect, acts as a vector of different viral genus, which needs keeping low populations in rural areas. The whitefly is responsible for a great damage to agriculture due its quick development and adaptation to several hosts. The invasive nature of the whitefly and its high reproduction rate hinder the control and favor the development of resistance to insecticides, which evidences the need for more efficient alternatives control. The post-transcriptional gene silencing via interfering RNA (RNAi) is one of the genetic engineering’s strategies that should be used for obtaining resistant plants to plagues with greater specificity. The RNAi mechanism was utilized to obtaining tomato resistant plants to the whitefly by silencing the v-ATPase gene from Bemisia tabaci. Cotyledonary explants from Micro-Tom variety were transformed via Agrobacterium tumefaciens EHA 105 containing a suppression cassette for the whitefly’s v-ATPase gene silencing. Thirteen transgenic lines were generated, confirmed by PCR, through the detection of a 576 pb transgene fragment corresponding to the v-ATPase gene. The transgene insertion into de genome of some events was confirmed by Southern blot analysis. Progeny analysis confirmed the presence of the transgene into the T1 progeny, segregating in Mendelian proportion 3:1 e 15:1. A preliminary bioassay performed with detached leaves from T0 plants showed a whiteflies’ mortality around 100% in some lines after five days of interaction.
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Margens silenciadas : arte colaborativa e a busca por protagonismo

Graça, Luiza Abrantes da January 2016 (has links)
Esta pesquisa de mestrado discute, através de autores enraizados nas artes visuais e também em outras arenas, como a sociologia e a antropologia, as relações interpessoais em dois trabalhos coletivos e colaborativos de arte, focando nos papéis que cada agente exerce nas produções e questionando se há a presença de suas particularidades sociais e culturais nestas práticas. Focando-se nos coletivos Sopapo de Mulheres, de Porto Alegre, e Dulcinéia Catadora, de São Paulo, ambos compostos por mulheres, a presente dissertação questiona como estas duas práticas agregam às suas agendas as peculiaridades, os devires de cada agente, e como estas negociações possibilitam trabalhos de arte pautados na colaboração e protagonismo de suas integrantes. Buscando diálogos com outros trabalhos em arte colaborativa realizados em território brasileiro, são levantados pressupostos a respeito da progressiva produção de trabalhos de teor colaborativo em zonas periféricas no país, bem como as modificações que seus locais de origem e inserção sofrem após agenciamentos que modificam partilhas comuns, rearranjando papéis e criando novas audiências. / This master research discuss, through authors from the visual arts and other areas, such as sociology and anthropology, the interpersonal relationships in two collective and collaborative works, focusing in the roles that each one practice in the productions and questioning if their social and cultural peculiarities are present in these activities. Focusing in the collective groups Sopapo de Mulheres, from Porto Alegre, and Dulcinéia Catadora, from São Paulo, both formed by women, the present master thesis question how these two groups assemble to their agendas the particularities, becomings, of each person, and how these negotiations enable art works based in the collaboration and leading role of its members. Pursuing a dialogue with other studies about collaborative art made in Brazil, assumptions are raised about the progressive production of collaborative works in the country’s suburb zones, as well as the transformations that their origin and context place suffer after agency services modify ordinary distributions, rearranging roles and creating new audiences.

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