Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-08. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:16Z : No. of bitstreams: 1 000830398_20160310.pdf: 112220 bytes, checksum: eec50147cf047427bc8ea95f93fd39b0 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-11T14:06:55Z: 000830398_20160310.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-11T14:07:36Z : No. of bitstreams: 1 000830398.pdf: 1275187 bytes, checksum: 8547f733167cd9ca10a7f85e869a3850 (MD5) / A cartilagem articular é um tecido que possui capacidade limitada de reparo após uma lesão aguda, e a eficácia dos tratamentos atuais geralmente resulta em alívio dos sintomas, e não em regeneração do tecido lesado. Incidindo sobre esta problemática, o objetivo do presente trabalho, foi avaliar o efeito da terapia com células-tronco mesenquimais (CTM) autólogas na regeneração da cartilagem articular de joelhos de coelhos submetidos a osteoartrite experimental. Foram utilizados 24 coelhos da raça Nova Zelândia Branca, os quais foram divididos aleatoriamente em quatro grupos: GC (grupo controle); GPRP (grupo plasma rico em plaquetas); GCTM (grupo células-tronco mesenquimais autólogas indiferenciadas); GCTMdif (grupo células-tronco mesenquimais autólogas diferenciadas em condrócitos. Todos os animais foram induzidos a osteoartrite por meio da aplicação de solução de colagenase, e após quatro semanas receberam os tratamentos propostos para cada grupo. Após sessenta dias da terapia, os animais foram eutanasiados e as superfícies articulares foram submetidas a avaliações macroscópicas e histomorfológicas. Paralelamente foram realizadas diferenciações adipogênicas, condrogênicas e osteogênicas das CTM, caracterizações das mesmas por meio de análise citométrica, e avaliações de danos citogenéticos pelo Teste do Cometa. Os resultados dos exames macroscópicos e histomorfológicos revelaram um melhor tecido de reparação nos grupos tratados com CTM. As análises citométricas apresentaram resultados de imunomarcações positivos para CTM, e as diferenciações revelaram que as CTM foram capazes de se diferenciar em adipócitos, condrócitos e osteoblastos. Por meio do Teste do Cometa, foi possível notar que os danos citogenéticos aumentaram após a segunda passagem das CTM. Conclui-se que há efeitos benéficos da associação de CTM derivadas do tecido adiposo e plasma rico em plaquetas na regeneração ... / The articular cartilage is a tissue that has limited capacity for repair after an acute injury, and the efficacy of current treatments usually results in relief of symptoms, and not in regeneration of damaged tissue. Focusing on this issue, the aim of this work was to evaluate the effect of therapy with autologous mesenchymal stem cells (MSC) in the regeneration of rabbits articular cartilage submitted to experimental knee osteoarthritis. Twenty four adult New Zealand White rabbits were randomly divided into four groups: GC (control group); GPRP (platelet rich plasma group); GCTM (undifferentiated autologous mesenchymal stem cells group); GCTMdif (chondrocyte differentiated autologous mesenchymal stem cells group). All animals were osteoarthritis-induced by application of collagenase solution, and four weeks after induction, they received the specific treatments to each group. After sixty days of therapy, the animals were sacrificed and articular surfaces were submitted to macroscopic and histomorphological evaluations. At the same time were performed adipogenic, chondrogenic and osteogenic differentiation of MSC, characterizations through cytometric analysis, and evaluation of cytogenetic damage by the Comet Assay. The macroscopic and histomorphological examinations revealed a better repair tissue in the groups treated with MSC. Cytometric analyzes showed positive results for MSC immunostaining, and differentiation showed that MSC were able to differentiate into adipocytes, chondrocytes and osteoblasts. Through the Comet Assay, it was noticeable that the cytogenetic damage increased after the second passage of the MSC. It was concluded that there are beneficial effects of the combination of MSC derived from adipose tissue and platelet-rich plasma in the regeneration of articular cartilage in knees of rabbits undergoing experimental osteoarthritis, and there is no difference when MSC are used undifferentiated or differentiated into ...

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-17. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:49Z : No. of bitstreams: 1 000836696.pdf: 2245540 bytes, checksum: 495fc221f47be948d5c924e8f591e746 (MD5) / O estudo de células tronco em cães corrobora com o progresso das terapias celulares, tanto veterinárias quanto humanas, uma vez que a espécie canina é um modelo de estudo para desenvolvimento de doenças humanas hereditárias e, também, adquiridas. As CT multipotentes derivadas de tecido são geralmente as mais utilizadas, sobretudo pela facilidade de obtenção por meio do próprio animal (autólogas) e por não envolverem questões éticas, as quais limitam o uso das células tronco embrionárias. Estudos recentes e promissores demonstraram a existência de CT no ovário, com grande capacidade de proliferação e possível capacidade pluripotente. Com base nessas evidências, este projeto propôs a obtenção de células tronco isoladas a partir do tecido ovariano de cães adultos, utilizando o tecido adiposo como controle. Para tanto, foram delineados três experimentos: o experimento I possuía o objetivo de verificar as características de crescimento e morfológicas. Então, foi realizado o isolamento de células provenientes do tecido ovariano e adiposo, após digestão em colagenase, Após 3h do inicio do cultivo, foi realizada a primeira troca de meio para seleção de células aderentes ao plástico. Após 72h de cultivo primário, o tecido adiposo possuía mais células por grama de tecido em relação ao ovariano (1937 ± 592,6 vs 1771 ± 262,1), ambas as células derivadas apresentaram morfologia fibroblástica. Em relação às análises de crescimento, o tempo de duplicação da população foi similar em ambos os tipos celulares. Tanto as células do tecido adiposo, como as do ovariano foram capazes de formar colônias, entretanto as do tecido adiposo mostraram uma maior capacidade de formar colônias que as células do tecido ovariano (37,08 ± 2,10 vs. 27,08 ± 1,45, p<0,05). O experimento II possuía o objetivo de realizar a caracterização molecular das células obtidas no experimento I. Tanto as células do... / Research with canine stem cells contributes to the progress of veterinary and human cellular therapies, because the dog is often the best animal model for many hereditary and acquired human diseases. While embryonic SC have unlimited differentiation potential (i.e. pluripotent), adult-derived multipotent SC are often preferred for ease of recovery from the patient itself (i.e. autologous) and for avoiding ethical constraints of destroying embryos to obtain pluripotent SC. Recent promising studies have shown the existence SC in ovarian tissue, that have greater proliferative and differentiation potential than SC in other adult tissues. Based on this evidence, the aim of this project was to obtain stem cells isolated from ovarian tissue of adult dogs. In experiment I, we evaluated morphological and kinetic properties of collagenase-digested ovarian and adipose derived SC. Adipose derived cells yielded more cells per tissue after 72h in culture (1937 ± 592.6 vs 1771 ± 262.1), both cells had the same fibroblastic morphology. The growth curve showed that adipose derived cells started the exponential growth before the ovarian derived cells, however when the both were multiplying, the population doubling time was the same. All the derived cells types were able to form colonies, however, adipose derived cells formed more colonies than ovarian derived cells (37.08 ± 2.10 vs. 27.08 ± 1.45). Experiment II aimed at characterizing at the molecular level the SC obtained in experiment I. We evaluated the expression of mesenchymal and pluripotent markers through immunofluorescence (flow cytometry and confocal microscopy) and PCR. Both cells from expressed CD90, CD44, CD194 and CD 105 by PCR, were positive for CD44, CD90 (only the adipose tissue) and negative for CD45 and CD34 by immunocytochemistry analysis. By flow cytometry, 37.08%+-11.35% of the population of cells derived from ovarian tissue was positive for CD90, while 62.05%+-8.40% of ...

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-16. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:12Z : No. of bitstreams: 1 000845917.pdf: 361869 bytes, checksum: 05c7e4fd0d5c7cd067d242d6200d2346 (MD5) / Matrizes de quitosana e colágeno podem oferecer nicho biológico para o crescimento de células-tronco derivadas do tecido adiposo (ADSC). O objetivo deste trabalho foi caracterizar as propriedades físicoquímicas das matrizes e sua biocompatibilidade com ADSC, bem como suas interações e influências diretas das matrizes sobre o comportamento da ADSC. A metodologia incluiu o tratamento enzimático de tecido adiposo obtido por lipoaspiração com colagenase IV, imunofenotipagem, cinética de crescimento das células, estudos de biocompatibilidade das matrizes analisadas pela atividade de fosfatase alcalina (AP), determinação de óxido nítrico (NO) por macrófagos e imagens das matrizes por microscopia óptica e eletrônica de varredura. A concentração de reticulação de genipina e glutaraldeído foi avaliada por ensaios de ninidrina, testes de solubilidade e de degradação das matrizes. Os melhores resultados foram obtidos com genipina a 0,5 %. Após nove expansões a viabilidade foi de 99 % e o tempo de duplicação da população de células diminuiu de sete para dois dias. Os resultados mostraram que as matrizes são biocompatíveis, exibem propriedades físicas e químicas necessárias para as células e são fortes estimuladoras de proteínas de sinalização (fosfatase alcalina) e de outras moléculas (NO), que são importantes no processo de regeneração tecidual. Portanto, as matrizes podem proporcionar um nicho biológico para adesão, proliferação e controle das atividades das ADSC / Scaffolds of chitosan and collagen can offer a biological niche for the growth of adipose derived stem cells (ADSC). The objective of this work was to characterize the physico-chemical properties of the scaffolds and the ADSC, as well as their interactions to direct influences of the scaffolds on the behavior of ADSC. The methodology included an enzymatic treatment of fat obtained by liposuction by collagenase IV, ASDC immunophenotyping, cell growth kinetics, biocompatibility studies of the scaffolds analyzed by the activity of alkaline phosphatase (AP), nitric oxide (NO) determination, and images of both optical and scanning electron microscopy of the matrices. The extent of the crosslinking of genipin and glutaraldehyde was evaluated by ninhydrin assays, solubility tests and degradation of the matrices. The best results were obtained with 0.5 % genipin. After nine expansions viability was 99 % and the population doubling time decreased from seven to two days.The results showed that the matrices are biocompatible, exhibit physical and chemical properties needed to house cells in vivo and are strong stimulators of signaling proteins (alkaline phosphatase) and other molecules (NO) which are important in tissue regeneration. Therefore, the matrices provide a biological niche for ADSC adhesion, proliferation and cells activities

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-22Bitstream added on 2015-01-26T13:30:38Z : No. of bitstreams: 1 000796066_20150822.pdf: 331773 bytes, checksum: c3d3a40ccdc8ca3f478c8e54e6ad3c04 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-08-24T10:46:39Z: 000796066_20150822.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-24T10:47:10Z : No. of bitstreams: 1 000796066.pdf: 3282900 bytes, checksum: 4a610ab1c53d2f0a02139571b6ff6631 (MD5) / A obesidade é caracterizada pelo excesso de gordura presente no tecido adiposo e em outros órgãos e está intimamente ligada à RI e outros componentes da Síndrome Metabólica. O excesso de gordura nos hepatócitos atua como um órgão endócrino que libera citocinas inflamatórias e aumenta o recrutamento de linfócitos (células de defesa). Quando a tolerância imunológica é reduzida por esse processo, podemos observar o desenvolvimento de doenças autoimunes. Segundo dados recentes, os lipídios estão especificamente envolvidos na degradação da tolerância hepática, porém mais estudos são necessários para compreender a interação entre a gordura, o sistema imunológico e a esteatose. Nosso objetivo foi estudar a inflamação e a autoimunidade na doença hepática gordurosa não alcoolica (DHGNA) e verificar se a presença do estado inflamatório poderia representar fator contributivo para a presença de marcadores de Hepatite Autoimune (HAI). Tratou-se de um estudo observacional, prospectivo, transversal e descritivo. Foram incluídos 53 sujeitos e realizadas avaliações médicas e nutricionais, exames bioquímicos e biópsia hepática. Separamos a população em dois grupos para análise: CMAI (com marcadores de HAI) e SMAI (sem marcadores de HAI). Encontramos em 58,5% dos sujeitos pelo menos um tipo de autoanticorpo sugestivo de HAI. Não ocorreram diferenças estatisticamente significantes entre os grupos nas variáveis estudadas. Ao aplicarmos o escore da International Group Autoimmune Hepatitis (IGAIH), encontramos um caso com diagnóstico definitivo de HAI. Observamos que a gordura corporal, circunferência abdominal e circunferência do pescoço, quando acima dos valores de normalidade, podem estar relacionadas com a progressão da DHGNA e com algumas características típicas da HAI. Estes resultados corroboram a importância de incentivar a mudança dos hábitos alimentares e a prática de ... / Obesity is characterized by excess fat within adipose tissue and other organs and it is closely linked to insulin resistance and other components of Metabolical Syndrome. Excessive fat in hepatocytes acts as an endocrine organ that releases inflammatory cytokines and increases the recruitment of lymphocytes (immune cells). When the immunological tolerance is reduced by this kind of stimulus, we can observe the development of autoimmune diseases. According to recent data, the lipids are specifically involved in the degradation of liver tolerance, but more studies are required to understand the interaction between fat, the immune system and steatosis. Our objective was to study the presence of inflammation and autoimmunity in non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) and verify whether the inflammation could represent a contributing factor to the markers of Autoimmune Hepatitis (AIH). This was an observational cross-sectional descriptive and prospective study. Fifty three individuals were included and submeted to medical and nutritional evaluation, biochemical tests and liver biopsy. The population was splitted in two groups for analysis: with AIH markers and without AIH markers. We found that 58.5% of the individuals had at least one type of antiautobody. There were no statistically significant differences between groups in the variables studied. By applying the International Group Autoimmune Hepatitis score (IGAIH), we found one case with a definitive diagnosis of AIH. We observed that body fat, waist and neck circumferences, while above the normal range, may be related to the progression of NAFLD and some typical features of AIH. These results corroborate the importance of encouraging change in eating habits and physical exercise for the control of chronic diseases, including the AIH. To avoid possible errors in diagnosis of AIH, we suggest the inclusion of anthropometric variables in the criteria for diagnosis of AIH, punctuating ...

Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-19Bitstream added on 2015-03-03T12:07:29Z : No. of bitstreams: 1 000814384.pdf: 584271 bytes, checksum: 08b9cf374fcc3e9a587d6985f3225f46 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente estudo teve o objetivo de avaliar os efeitos do fornecimento de cloridrato de zilpaterol na deposição de tecidos muscular e adiposo de bovinos Nelore não castrados e castrados, por meio de ultrassom, avaliação da área das fibras do músculo Semitendinosus e avaliação da composição física e química das carcaças pelo método HH. Foram utilizados 72 bovinos machos da raça Nelore, sendo 36 bovinos castrados e 36 não castrados, com peso vivo médio inicial de 347,5 ± 46,5 kg. O experimento foi delineado em blocos casualizados conforme o peso vivo incial, em arranjo fatorial 2 x 2 sendo os fatores a inclusão de cloridrato de zilpaterol à ração e a condição sexual avaliada. Cada tratamento foi composto por 6 repetições (3 animais/baia), sendo estas consideradas as unidades experimentais para este estudo. Os bovinos foram alimentados duas vezes ao dia e a inclusão de 7,5 mg/Kg/MS de cloridrato de zilpaterol à ração se deu nos últimos 23 dias de confinamento, respeitando o período de carência da substância, de três dias. O fornecimento de cloridrato de zilpaterol proporcionou aos bovinos tratados maior área média das fibras do músculo Semitendinosus, maior proporção estimada de músculos e menor proporção estimada de gordura na carcaça, maior teor de extrato etéreo no corte das costelas e maior área de olho de lombo entre a 12 e 13ª costelas, para as duas condições sexuais avaliadas. Foram encontradas também diferenças entre bovinos castrados e não castrados, tendo os bovinos não castrados apresentado maior área média de fibra muscular, maior quantidade estimada de músculos e menor quantidade estimada de ... / This study aimed to evaluate the effects of feeding zilpaterol hydrochloride on deposition of muscle and adipose tissues of Nellore steers and bulls by ultrasonography means, evaluation of fiber area of the Semitendinosus muscle and evaluation of physical and chemistry composition carcasses by the HH method. 72 male Nellore animals were used, 36 steers and 36 bulls, with average body weight of 347,5 ± 46,5 kg. The experiment was in a randomized block design according to the inicial weight, in a 2 x 2 factorial design with the factors: inclusion of zilpaterol hydrochloride in diet and the sexual condition. Each treatment consisted of 6 replicates (3 animals/pen), which were considered the experimental units for this study. The animals were fed twice a day, and the inclusion of 7.5 mg/kg/DM zilpaterol hydrochloride in ration occurred in the last 23 days of the experiment, respecting the waiting period of the product. Supply zilpaterol hydrochloride provided higher average fiber area of the Semitendinosus muscle, higher estimated proportion of muscle and lower estimated proportion of carcass fat, higher content of ether extract in the ribs, greater LM area between 12 and 13th ribs, for both sexual condition evaluated. Differences were also found between steers and bulls, the bulls presented higher mean muscle fiber area, higher estimated proportion of muscles and lower estimated proportion of fat in carcass. There was an interaction between sexual condition and supply of zilpaterol hydrochloride for the gain in LM area and gain in thickness of subcutaneous fat during delivery of the product. Feeding zilpaterol hydrochloride to Nellore cattle on carcass provided greater muscularity and less fat deposition. / FAPESP: 2013/17496-9

A obesidade é uma doença multifatorial fortemente associada com a síndrome metabólica e com as doenças hepáticas. A distribuição da gordura corporal é um fator relevante, e especificamente o tecido adiposo visceral parece ser o elo entre o aumento de peso, a síndrome metabólica e o acúmulo de gordura hepática. Os adipócitos estão envolvidos na regulação do balanço energético e podem ser modulados por hormônios, citocinas e nutrientes, entre eles o resveratrol. São dois os objetivos principais deste trabalho: (1) identificar os níveis basais de expressão do mRNA de SIRT1, adiponectina, FOXO1, PPARg e PPARb/d em diferentes tecidos adiposos (retroperitoneal, subcutâneo e visceral) de indivíduos obesos grau III com diferentes níveis de esteatose hepática; e (2) identificar a ação do resveratrol sobre a expressão do mRNA dos genes citados em adipócitos isolados do tecido adiposo visceral de indivíduos obesos grau III. Os tecidos adiposos foram obtidos durante cirurgia bariátrica. O RNA total foi extraído usando o reagente TRIzol e o mRNA foi quantificado por PCR em tempo real. Para a análise da expressão basal dos genes, dividimos os pacientes em dois grupos: aqueles com esteatose simples ou moderada e aqueles com esteatose severa associada ou não à fibrose e inflamação. Comparando os dois grupos estudados, os pacientes com esteatose severa apresentaram uma menor expressão do mRNA de SIRT1 (p=0,006), apenas no tecido adiposo visceral. Os níveis de adiponectina, FOXO1, PPARg1-3 e PPARb/d não diferiram estatisticamente entre os dois grupos de pacientes nos três depósitos de gordura corporal. O valor de HOMA-IR foi diferente estatisticamente entre os grupos estudados, sendo maior no grupo de pacientes com diagnóstico de esteatose severa associada ou não a fibrose e necroinflamação (p=0,006). Neste mesmo grupo de pacientes, a expressão de SIRT1 e o valor de HOMA-IR correlacionaram-se positivamente no tecido adiposo visceral (r=0,607; p=0,048). Quanto à modulação por resveratrol, houve aumento significativo nos níveis do mRNA de SIRT1 (p=0,021), adiponectina (p=0,025) e FOXO1 (p=0,001) nos adipócitos isolados do tecido adiposo visceral de obesos grau III. A expressão do mRNA de PPARg1-3 foi modulada negativamente (p=0,003) nas células estudadas. Considerando a expressão do PPARb/d, não houve modulação por resveratrol na concentração, tempo e modelo celular estudados. Analisando a literatura, verificamos que valores diminuídos de SIRT1 já foram associados à progressão da esteatose, em modelos experimentais. Neste trabalho, observamos menor transcrição de SIRT1 no tecido adiposo visceral de obesos com esteatose severa, o que poderia prejudicar a biogênese mitocondrial e a oxidação de ácidos graxos, contribuindo com o aumento de ácidos graxos livres na circulação portal, favorecendo o acúmulo hepático de lipídeos nestes pacientes. Desta forma, sugerimos que o aumento da expressão de SIRT1 no tecido adiposo visceral pode ter efeito protetor contra a evolução da esteatose em obesos grau III. Também constatamos que resveratrol ativa a expressão do mRNA de SIRT1, adiponectina e FOXO1 e diminui a expressão de PPARg1-3. Os resultados indicam que resveratrol pode modular o metabolismo dos adipócitos de obesos grau III, possivelmente favorecendo o metabolismo das células estudadas. / Obesity is a complex disease, strongly associated with metabolic syndrome and hepatic disease. The distribution of body fat is important, and specifically visceral adipose tissue seems to be the link between weight gain, metabolic syndrome and hepatic fat accumulation. Adipocytes are involved in the regulation of energy balance and can be modulated by hormones, cytokines and nutrients as resveratrol. The objectives of this study were: (1) to determine the expression pattern of SIRT1, adiponectin, FOXO1, PPARg1-3 and PPARb/d mRNA in different adipose tissues (retroperitoneal, subcutaneous and visceral) of morbidly obese with different levels of hepatic steatosis; and (2) analyze whether resveratrol could modulate the mRNA expression of the cited genes in isolated visceral adipocytes of morbidly obese. The adipose tissue was obtained by bariatric surgery. Total RNAs were extracted using TRIzol reagent and genes reverse transcripts were determined by quantitative polymerase chain reaction. For analysis of basal genes expression, we divided patients in two groups: those with slight or moderate steatosis and other comprising individuals with severe steatosis associated or not with necroinflammation and fibrosis. When comparing the two groups of patients, we found that the amount of SIRT1 mRNA in the visceral adipose tissue of morbidly obese with severe steatosis was decreased (p=0.006). The levels of adiponectin, FOXO1, PPARg1-3 and PPARb/d did not differ statistically between the two groups of patients in the fat depots studied. We found that HOMA-IR value was significantly higher in severe steatosis patients group (p=0.006). Our results also show that the mRNA expression of SIRT1 and HOMA-IR was positively correlated in the visceral adipose tissue of patients with severe steatosis (r=0.654; p=0.048). Regarding the modulation by resveratrol, there was significant increase in SIRT1 (p=0.021), adiponectina (p=0.025) and FOXO1 (p=0.001) mRNA in isolated visceral adipocytes. The mRNA expression of PPARg1-3 was negatively modulated by resveratrol (p=0.003). Considering PPARb/d, there was not a significantly modulation by resveratrol, in the studied model. Reduced quantities of SIRT1 mRNA have been described in severe steatosis using experimental models. We found lower transcription of SIRT1 expression in the visceral adipose tissue of obese patients with severe steatosis, which may impair mitochondrial biogenesis and fatty acids oxidation, contributing to the increase of free fatty acids in portal circulation, impairing liver function. Thus, we suggest that the increased SIRT1 mRNA expression may have a protective role on steatosis in visceral adipose tissue of morbidly obese individuals. Also, we observed that resveratrol activated the expression of SIRT1, FOXO1 and adiponectin and decreases PPARg1-3, which indicate that resveratrol can control adipocytes metabolism, possibly favoring the metabolism of studied cells.

As células tronco mesenquimais de tecido adiposo (MSCs-TA) são células progenitoras que residem entre adipócitos e contribuem para o turnover do tecido adiposo. Gangliosídios são glicoensfigolipídios localizados na membrana das células, envolvidos na regulação do crescimento celular, interação de superfície, sinalização transmembrana e diferenciação celular. O gangliosídio neural GD2 foi relatado como um marcador de superfície de células tronco mesenquimais de medula óssea e cordão umbilical, mas existem poucos dados sobre a expressão do GD2 em MSCs-TA indiferenciadas e nas diferenciadas para adipócito ou osteoblasto. Nosso principal objetivo foi estudar a expressão de gangliosídios nas MSCs-TA, em especial o GD2, durante a diferenciação adipogênica e osteogênica. Para isso, as MSCs-TA foram isoladas de lipoaspirado humano, cultivadas e induzidas para diferenciação adipogênica e osteogênica. As análises foram feitas por HPTLC, microscopia confocal, citometria de fluxo e PCR em tempo real. Por HPTLC, as MSCs-TA indiferenciadas e MSCs-TA diferenciadas para adipócitos e osteoblasto mostraram aumento do perfil de gangliosídios complexos. A microscopia confocal evidenciou os gangliosídios GM3, GM1 e GD2 na superfície das células e, por citometria de fluxo, identificamos uma subpopulação de células GD2 positivas nas MSCs-TA e MSCs-TA diferenciadas para adipócito ou osteoblasto. Entretanto, o percentual de células GD2 positivas decresceu com a diferenciação. A expressão do mRNA da GD2 sintase aumentou na diferenciação adipogênica e diminui na diferenciação osteogênica. O GD2 é um substrato para a biosíntese de gangliosídios complexos e o aumento da expressão da GD2 sintase pode estar relacionado com o aumento de gangliosídios complexos que ocorre durante a diferenciação adipogênica. / Mesenchymal Stem Cells from Adipose Tissue (MSCs-TA) are progenitor cells that reside between adipocytes, and contribute to the turnover of adipose tissue. Gangliosides are glycosphingolipids localized in cell membrane, involved in cell growth regulation, surface interaction, transmembrane signaling and differentiation. The neural ganglioside GD2 has been reported as surface marker for MSCs from bone marrow and umbilical cord, but sparse data exist about the expression of GD2 in MSCs-TA and during the differentiation to adipocytes and osteoblast. Our aim was to study the expression of glangliosides, in special of GD2 in MSCs-TA and during the adipogenic and osteogenic differentiation. Thus MSCs-TA were isolated from lipoaspirate, cultured and induced to adipogenic and osteogenic differentiation. Then, we examined the gangliosides expression by HPTLC, confocal microscopy, flow citometry and real-time PCR. By HPTLC, the MSCs-TA and MSCs-TA differentiated into adipocytes and osteoblast demonstrate an increased complex gangliosides profile. The confocal microscopy showed the presence of GM3, GM1, and GD2 on the cell surface. By the flow cytometry, we identified a GD2 positive subpopulation in MSCs-TA and in MSCs-TA differentiated to adipocytes and osteoblast. However, the percentage of GD2 positive cells decreased with the differentiation. The expression of GD2 synthase mRNA increased during the adipogenic differentiation and decreased in osteogenic differentiation. GD2 is a substrate for the complex gangliosides biosynthesis, and the increase in GD2 synthase expression could be related with the increase in complex gangliosides that occurs during the adipogenic differentiation.

Foram pesquisados resíduos organoclorados em três tecidos humanos: sangue, leite materno e tecido adiposo. Sangue foi colhido de 122 indivíduos, leite materno de 19 lactantes e tecido adiposo de 23 pacientes submetidos a diversas cirurgias. Para cada tecido foram compostos dois grupos: um urbano e outro residente em áreas de intensa atividade agrícola. Os resíduos organoclorados pesquisados foram: α - HCH; γ-HCH; Aldrin; Dieldrin; Endrin; Heptacloro; Heptacloro epóxido; HCB; Mirex; o,p´DDD; o,p´DDT; Oxiclordane; p,p´Metoxicloro; p,p´DDD; p,p´DDE; p,p´DDT e Transnonacloro. Todos os doadores responderam a questionário com quesitos sobre idade, sexo, peso, atividade, local de residência, contato ou não com pesticidas. Foi testada, através de análise estatística, a relação entre presença/ausência de organoclorados nos diferentes tecidos e os dados levantados no questionário. Todas as amostras urbanas foram negativas para os organoclorados analisados. As amostras obtidas nas áreas de atividade agrícola foram positivas, com níveis crescentes de contaminação na seqüência sangue, leite materno, tecido adiposo. Os resultados das análises do presente trabalho foram comparados com resultados préexistentes no Rio Grande do Sul. Entre a pesquisa atual e as pesquisas anteriores usadas para comparação, verificou-se diminuição da incidência de organoclorados em todos os tecidos pesquisados. O OC p,p´DDE foi o único organoclorado encontrado em todos os tecidos e em todas as pesquisas, tanto atuais como anteriores usadas para comparação.

ABSTRACT Introduction: Obesity has become a growing public health concern around the world and has been more and more identified in early stages of life. It is interlinked with inflammatory responses such on it’s genesis as on it’s maintenance, which on long term can lead to many cardio-metabolic comorbidities, diabetes and others, all of them improving a lower quality of life.Objective: to compare inflammatory, metabolic, adiposity characteristics and insulin resistance markers between eutrophic and obese schoolers of 8 years old. Method: clinic-laboratory study involving 8 years’ old children, with exploratory lining to compare the average of many parameters (waist circumference, tricipital fold, fasting glucose, fasting insulin, Homa – IR index, total cholesterol and HDL-c, triglycerides, IL-6, IL-1b, IL-10, FNT-a and adiponectin. Among the children weighted and measured at schools in Palhoça-SC, there were 34 selected to compose the eutrophic’s and obese’s groups based on calculed BMI. There were collected and processed blood samples from these children to get the dosages. The data were analyzed using Graf Pad prism’s software 6.0. The Student T Test (results as mean ± SDP) and Wilcox & Mann-Witney (results as median ±interquartile range) were used. Results: BMI, WC, TCF, RCP-hs and fasting insulin were significant higher in obesity group. IL-6, IL-10, IL-1b, FNT-a,HDL, TG, Homa-ir index and fasting glucose didn’t show differences. Conclusion: Our group of obese children aged 8 years shows disturbances in anthropometric characteristics, fasting insulin and CRP-hs levels that indicate a low grade inflammatory process and consequent cardio-vascular risk in the future. / Submitted by Milcia Almeida Zaidan (milcia.zaidan@unisul.br) on 2018-07-04T17:54:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) comparação de marcadores inflamatórios,.pdf: 2854772 bytes, checksum: 8b087da3279211299bdc8d6cc89963d7 (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Correa da Cruz (caroline.cruz@unisul.br) on 2018-07-04T18:31:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) comparação de marcadores inflamatórios,.pdf: 2854772 bytes, checksum: 8b087da3279211299bdc8d6cc89963d7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-04T18:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) comparação de marcadores inflamatórios,.pdf: 2854772 bytes, checksum: 8b087da3279211299bdc8d6cc89963d7 (MD5) Previous issue date: 2018 / Introdução: A obesidade tornou-se um crescente problema de saúde pública mundial e cada vez mais está sendo identificada em fases precoces da vida. Estárelacionada com características inflamatórias tanto em sua gênese quanto em sua manutenção,o que a longo prazo pode originar várias comorbidades, como a síndrome metabólica, diabetes tipo 2 e alterações cardiocirculatórias entre outras, todas associadas à piora da qualidade de vida. Identificar quando estas alterações se iniciam e como se apresentam pode ajudar na prevenção e no manejo da doença. Objetivo: comparar marcadores inflamatórios, metabólicos, de características de adiposidade e de resistência à insulina entre escolares de 8 anos de idade eutróficos e obesos. Método: estudo clínico-laboratorial envolvendo crianças de 8 anos, com delineamento exploratório para comparação da média de diferentes parâmetros (circunferência abdominal, prega tricipital, glicemia de jejum, insulinemia de jejum, índice Homa-ir, colesterol total e HDL-c, triglicerídeos, IL-6, IL-1b, IL-10, FNT-a). Entre crianças examinadas nas escolas de Palhoça, foram selecionadas por conveniência 34 para compor os grupos de eutróficos (P<85) e obesos (P>97), baseado no IMC calculado. Coletou-se sangue destas crianças e procedeu-se às dosagens. Os dados foram analisados utilizando-se software Graf Pad Prism, versão 6.0. Foi usado teste t de student (resultados como média ± EPM) e Wilcoxon e Mann-Witney (resultados em mediana – intervalo interquartil). O intervalo de confiança foi definido em 0,95 (95%).Resultados: IMC, CA e PTC, insulina de jejum e PCR-us foram significativamente aumentados no grupo dos obesos. IL-6, IL-10, IL-1b, FNT-a,HDL, TG, índice Homa-ir e glicemia de jejum não mostraram alterações significativas entre os grupos. Conclusão: as crianças obesas de 8 anos do nosso estudo já apresentam alterações antropométricas, de insulina e de PCR-us que denotam um processo inflamatório de baixo grau e alterações iniciais relativas a risco cardiovascular futuro.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-16Bitstream added on 2014-06-13T19:35:45Z : No. of bitstreams: 1 rodrigues_e_me_botfmvz.pdf: 164174 bytes, checksum: 6f150d388d6d03c51572ae0d22cf79f5 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste trabalho foi avaliar o crescimento de femeas bovinas de diferentes grupos geneticos no sistema intensivo de producao de carne superprecoce, analisando caracteristicas de desempenho como peso vivo (PV), ganho de peso medio diario (GPMD) e crescimento dos tecido muscular e adiposo atraves de avaliacao da area de olho de lombo (AOL) e espessura de gordura subcutanea (EGS) do musculo Longissimus dorsi e espessura de gordura subcutanea da garupa (EGG) do musculo Biceps femoris com imagens coletadas por ultra-som em tempo real nos animais vivos no inicio e fim do experimento. Foram utilizadas 42 femeas de 4 grupos geneticos sendo: 12 . Canchim x . Nelore (. CN), 12 . Canchim x . Nelore (. CN), 10 Simbrasil . Simental X . Nelore ( SIMB) e 10 Three-cross . Simental x . Nelore x . Angus (TC) desmamadas aos 210 dias de idade e peso vivo medio de 247,4 }16,5kg provenientes de creep-feeding durante a fase de cria, e confinadas por aproximadamente 132 }14 dias. Os animais foram abatidos, sendo o criterio de abate peso final de 350kg/PV e 5mm de gordura subcutanea. Os animais do grupo Three-cross apresentaram area de olho de lombo final e final ajustada para 100kg/PV inferiores aos demais grupos, porem apresentaram pesos finais superiores aos demais grupos com um tempo intermediario de confinamento e este grupo tambem apresentou os melhores ganhos de peso medio diario (GPMD) 1,07kg/dia (P<0,05). Nao houve diferenca significativa para area de olho de lombo inicial, espessura de gordura subcutanea (EGS) e para espessura de gordura subcutanea da garupa (EGG). Ajustando-se os valores de (EGG) e (AOL) para o menor numero de dias de confinamento onde os animais Three-cross e Simbrasil foram superiores (P<0,05) para (EGG F 114), e Simbrasil superior (P<0,05) para (AOL F 114). / The objective of this study was to evaluate the growth of young heifers of different genetic groups in an intensive meat production system. It was used 42 animals of 4 different genetics groups: 12 . Canchim x . Nellore (. CN), 12 . Canchim x . Nellore (. CN), 10 Simbrasil . Simental X . Nellore (SIMB) and 10 Three way cross . Simmental x . Nellore x . Angus (TC). The animals received creep feeding supplementation and were weaned at 210 days of age with 247,4 }16,48kg. It was analyzed the characteristics of body weight (BWG), average daily gain (ADG), muscular and fat tissues growth. Real time ultrasound evaluation was used to measure ribeye area (RBA, Longissimus dorsi muscle), back fat thickness and P8 (Top rump, Biceps femoris) fat thickness. The feeding period was 132 (}14) days in feedlot system while daily gain was measured every 28 days. The animals were slaughtered with the final weight of 350 kg and 5mm of back fat thickness. The Three way cross heifers had smaller final and adjusted at 100 kg/PV ribeye area compared with the others groups. This group also had a greater final body weight, better average daily gain (GPMD), 1,07 kg/day (P<0,05) and an intermediate days of feeding. There was no significant differences for initial ribeye area (AOL), back fat thickness (EGS) and P8 (EGG), but when the values were adjusted for days of feeding, greater values (P<0,05) (EGG F 114) and (P<0,05) (AOL F 114), respectively.