Em resposta a diversos estressores, o hipotálamo de anfíbios secreta o hormônio liberador de corticotropina (CRH), o qual estimula a hipófise a liberar o hormônio adrenocorticoctrópico (ACTH) na corrente sanguínea. O ACTH, por sua vez, atua na glândula inter-renal estimulando a liberação de glicocorticoides, sendo a corticosterona o principal glicocorticoide em anfíbios. Embora a modulação exercida pelos glicocorticoides de diversas respostas fisiológicas de estresse seja fundamental para a manutenção da homeostase em curto prazo, a ativação muito frequente e/ou prolongada do eixo hipotálamo-hipófise-interrenais (HHI) pode inibir processos importantes em longo prazo, tais como a reprodução e a imunocompetência e afetar a síntese de melatonina atuando diretamente sobre a pineal. O objetivo do presente estudo foi avaliar possíveis alterações nos níveis plasmáticos de corticosterona, testosterona, níveis oculares de melatonina, hematócrito e aspectos imunitários (contagem total de leucócitos e capacidade antimicrobiana plasmática - contra Escherichia coli) de machos da perereca Hypsiboas faber em resposta à injeção de ACTH, bem como o curso temporal destas respostas. Amostras de sangue e plasma foram obtidas a partir de 30 machos capturados em campo, dentro de 3 minutos da captura. Os animais foram trazidos para o laboratório e, após dois meses, divididos em seis grupos para serem amostrados em três horários distintos 1 h, 3h e 6h após o tratamento. Para cada horário um grupo controle e um grupo experimental foram adicionados, recebendo uma injeção de 105 μL de solução salina ou de solução de ACTH (0,446 μg de ACTH/g de massa corpórea (grupo experimental)). O tratamento com ACTH aumentou significativamente os níveis plasmáticos de corticosterona e diminuiu os níveis plasmáticos de testosterona bem como os níveis oculares de melatonina após 1 hora. Após 6 h da injeção de ACTH, houve um aumento da porcentagem do hematócrito e dos níveis de melatonina ocular. O tratamento com ACTH não afetou os aspectos imunitários estudados dentro do intervalo amostrado. Os resultados confirmam o papel da ativação do eixo HHI na inibição da secreção de testosterona e na modulação da secreção de melatonina, embora os possíveis efeitos imunomodulatórios possam se dar em intervalos temporais mais tardios / In response for several stressors, the amphibian hypothalamus release the corticotrophin release hormone (CRH), which stimulates pituitary to release the adenocorticotropic hormone (ACTH) in the bloodstream. The ACTH, in your turn, acts in inter renal glands stimulating the glicocorticoids releasing, being the corticosterone the main glicocorticoid in anphibians. While the modulation exercised by the glicocorticoids of diverses physiological responses of the stress is fundamental for de maintainance of homeostasis in short period, the frequent and/or prolongued activation of the hypothamlamus pituitary interenal axis (HHI) could inhibit important process in long periods, as the reproduction and immunocompetence and affect melatonin synthesis acting directly in pineal gland. The objective of the present study was evaluate possible alterations in plasmatic corticosterone levels, testosterone, eyes melatonin levels, hematocrit and immunity aspects (Total count leucocytes and antimicrobian plasmatic capacity - against Escherichia coli) from males of the treefrog Hypsiboas faber in response to ACTH injection, as well, the temporal course of these responses. Blood and plasma samples were obtained from the 30 males captured in the field, whitin 3 minutes from the capture. The animals were transferred to the laboratory and, after two months, divided in six groups to be sampled in three different times 1 h, 3 h and 6 h after treatment. For each time one control group and one experimental group were added, receiving one injection of 105 μL of saline or ACTH solution (0,446 μg de ACTH/g of body mass (experimental group)). The ACTH treatment increase significantly the plasmatic corticosterone levels and decrease the plasmatic testosterone levels, as well, the eye melatonin levels after one hour. After six hours of the ACTH injection, occurred the increase of the hematocrit percentage and the eye melatonin levels. The ACTH treatment did not affect the immunity aspects studied in the sampling interval. The results confirm the role of the activation on the axis HHI in the inhibition of the testosterone secretion and in the modulation of melatonin secretion, althougth the possible immunomodutatory effects could happen in temporal intervals later

Durante 60 dias foram utilizados seis garanhões de raças variadas, com peso médio inicial de 472,67±90,48 kg, alimentados duas vezes ao dia com dietas compostas por feno de Tifton (Cynodon dactylon) e concentrado comercial, suplementadas com 300 mL de óleo vegetal (óleo de arroz ou óleo de soja), além de sal mineralizado e água ad libitum. Foi avaliado o efeito da suplementação com óleo de arroz semi-refinado com alto teor de gama-orizanol sobre a aceitabilidade da dieta, ganho de peso, escore corporal, lipídeos plasmáticos, digestibilidade aparente dos nutrientes da dieta (Matéria Seca MS, Matéria Orgânica MO, Proteína Bruta PB, Fibra em Detergente Neutro FDN e Fibra em Detergente Ácido FDA), além da qualidade espermática e testosterona plasmática. Para tal observação, foram colhidas amostras sangüíneas com 0, 15, 30, 45 e 60 dias após o início do tratamento para mensuração das concentrações plasmáticas de testosterona, triglicérides, colesterol total e suas frações, tais como lipoproteína de densidade muito baixa (VLDL-C), lipoproteína de densidade baixa (LDL-C) e lipoproteína de densidade alta (HDL-C). Para avaliação da digestibilidade aparente dos nutrientes da dieta, os animais passaram por três dias de colheita total de fezes. Para avaliação da qualidade espermática, os garanhões passaram por colheita seminal com 0, 15, 30, 45 e 60 dias do tratamento. O delineamento experimental foi inteiramente casualisado com medidas repetidas no tempo e as médias foram comparadas considerando-se o nível de 5% de significância. Os valores médios obtidos para a digestibilidade aparente da MS, MO, EE, FDN e FDA foram respectivamente 64,34; 68,03; 71,95; 83,37; 62,15 e 55,05% para o tratamento com óleo de soja, e 58,97; 62,61; 66,96; 81,94; 54,85 e 45,87% para o tratamento com óleo de arroz. Não houve diferença (p < 0,05) em relação à digestibilidade aparente dos nutrientes da dieta para os tratamentos propostos. Os valores médios para testosterona, colesterol total, HDL-C, LDL-C, VLDL-C e triglicérides foram respectivamente 75,93 ng/dL; 92,73; 61,47; 26,99 e 4,28 mg/dL para o tratamento com óleo de soja; e de 62,13 ng/dL; 110,20; 66,73; 38,44 e 5,02 mg/dL para o tratamento com óleo de arroz. Em relação à qualidade espermática, também não se observou (p < 0,05), e os valores médios para volume, motilidade, vigor, concentração, defeitos maiores, defeitos menores e defeitos totais, foram respectivamente, de 71,87 mL; 69 %; 2,63; 123 x 106 espermatozóides/mL; 17,73%; 4,60% e 22,33 % para o tratamento com óleo de soja, e de 78,67 mL; 70,67%; 2,93; 115,67 x 106 espermatozóides/mL; 17,96%; 6,03% e 22,63% para o tratamento com óleo de arroz. Podemos concluir que a suplementação da dieta com óleo de arroz semi-refinado, com alto teor de gama-orizanol, proporciona melhora do ganho de peso e do escore corporal, não afeta a qualidade espermática ou a concentração plasmática de testosterona, VLDL-C, HDL-C e triglicérides, porém, eleva as concentrações plasmáticas de colesterol total e de LDL-C. / Using up six stallions of various breeds during 60 days, with initial average weight of 472,67 ¬± 90,48 kg, fed twice a day with a diet consisting of Tifton hay (Cynodon dactylon) and commercial concentrate, supplemented with 300 mL. of a vegetable oil (rice bran or soybean), moreover mineralized salt and ad libitum water. The experiment evaluated the effect of the supplementation of diet with rice bran oil, with high level of gamma-oryzanol, about acceptability of the diets, weight gain, body score, levels of plasmatic lipids, apparent digestibility of nutrients of the diets (dry matter - DM, organic matter - OM, crude protein - CP, ether extract - EE, neutral detergent fiber - NDF and acid detergent fiber ADF), and spermatic quality and plasmatic testosterone. Blood samples were also held with 0, 15, 30, 45 and 60 days after starting treatment, for analysis of the values of testosterone, triglycerides, total cholesterol and its fractions (HDL-C, LDL-C and VLDL-C). To evaluation of the apparent digestibility of the nutrients of the diet, the animals had passed for three days of total fecal collection. To evaluation of the sperm quality, the sires had passed for seminal collection with 0, 15, 30, 45 and 60 days of the treatment. It was used completely randomized design for repeated measures design with repeated measures over time and the means were compared under 5 % significance level. The gotten average values for the apparent digestibility of the DM, OM, CP, EE, NDF and ADF were respectively 64,34; 68,03; 71,95; 83,37; 62,15 and 55.05 % for the treatment with soybean oil, and 58,97; 62,61; 66,96; 81,94; 54,85 and 45.87 % for the treatment with rice bran oil. There was no statistical difference (p < 0,05) from the apparent digestibility of nutrients of the diet. The average values for testosterone, total cholesterol, HDL-C, LDL-C, VLDL-C and triglycerides had been respectively 75,93 ng/dL; 92,73; 61,47; 26,99 and 4,28 mg/dL for the treatment with soy oil; and of 62,13 ng/dL; 110,20; 66,73; 38,44 and 5,02 mg/dL for the treatment with rice bran oil. In relation to the spermatic quality, also did not have difference (p < 0,05), and the average values for volume, motility, vigor, concentration, defects, lesser defects and total defects, had been respectively, of 71,87 mL; 69%; 2,63; 123 x 106 sptz/mL; 17.73%; 4.60% and 22.33% for the treatment with soybean oil, and 78,67 mL; 70.67%; 2,93; 115,67 x 106sptz/mL; 17.96%; 6.03% and 22,63% for the treatment with rice bran oil. The supplementation of diet with semi-refined rice bran oil, with high level of gamma-oryzanol, provided better weight gain and improves the body score, do not affect the sperm quality or plasmatic levels of testosterone, VLDL-C, HDL-C and triglycerides, however, it increase plasmatic levels of total cholesterol and LDL-C.

Pouco se conhece acerca dos aspectos fisiológicos da reprodução de ranfastídeos, sendo estas informações importantes para sua conservação e criação em cativeiro. Métodos não-invasivos permitem análises a longo prazo e em espécies pequenas, além de facilitar estudos em vida livre e minimizar o estresse causado aos animais. Este trabalho teve por intuito a dosagem de metabólitos de testosterona (machos e fêmeas), progesterona e estradiol (somente fêmeas) nas excretas de 3 casais de tucano-toco (Ramphastos toco) e 3 casais de tucano-de-bico-verde (Ramphastos dicolorus), dentro e fora da estação reprodutiva. Dados de observações comportamentais mostraram que os animais foram mais ativos durante a estação reprodutiva, porém comportamentos sociais e proximidade entre o casal se mostraram raros nas duas fases durante as seções de observação. Concentrações de metabólitos de progesterona foram obtidos para as duas espécies na Fase Reprodutiva, mas não foram detectados nos ensaios para a Fase Não-reprodutiva. Metabólitos de testosterona puderam ser dosados em ambas as espécies, nas duas fases, tanto em machos quanto em fêmeas; sendo que os resultados mostraram para a maioria dos indivíduos concentrações maiores na Fase Reprodutiva. Aumentos acima de variações basais de metabólitos de testosterona foram associados à ocorrência de posturas, que ocorreram durante a Fase Reprodutiva numa das fêmeas de R. toco. Não foram obtidos resultados de metabólitos de estradiol em nenhuma das duas espécies, possivelmente pela falha do anticorpo utilizado em reconhecer os metabólitos. No entanto, este trabalho mostrou que a técnica utilizada foi eficaz para dosagem de metabólitos de testosterona e progesterona nas excretas destas espécies, evidenciando variações sazonais nas concentrações hormonais e indicando uma relação entre a concentração de metabólitos de testosterona e as posturas. / Little is known about reproductive physiology in Ranfastidae and this knowledge is needed for the development of conservation programs and for successful captive breeding. Non-invasive methods allow long-term analysis in small animals, facilitate studies with free-living animals and minimize the handling stress. The purpose of this work was to measure the testosterone (males and females), progesterone and oestrogen (females) metabolites concentrations in the droppings of Toco-toucan (Ramphastos toco) and Red-billed-toucan (Ramphastos dicolorus), inside and outside the reproductive season. Three captive couples of each species were studied. Collected behavioural data showed that the animals were more active during reproductive season, but social behaviours and the couple proximity were rare in the two phases during the observation sessions. Progesterone metabolites concentrations could be obtained in the Reproductive Phase for both species, but weren`t detected in the Nonreproductive Phase. Testosterone metabolites could be measured for both species in the two phases, in males and females; and the results showed higher concentrations in most of individuals in the Reproductive Phase. Concentrations of testosterone metabolites above basal levels were associated to egg laying, which occurred during Reproductive Phase in one of the R. toco females. Results of oestrogen metabolites concentrations could not be obtained in both species, probably because the fail of the antibody in detecting these metabolites. However, this work showed that the utilized technique was efficient to measure testosterone and progesterone metabolites in those species droppings, evidencing seasonal variations in hormonal concentrations and indicating a relationship between testosterone concentrations and oviposition.

Orientador: Claudia Herrera Tambeli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-09-19T14:06:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fischer_Luana_D.pdf: 1122094 bytes, checksum: 8b6c9b3ab833b6c7931a0c3408f48170 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a influência dos hormônios sexuais na nocicepção da articulação temporomandibular (ATM) de ratos e os possíveis mecanismos envolvidos. A injeção de formalina na ATM em uma concentração (0,5%) que não induziu nocicepção em machos intactos, induziu em machos gonadectomizados e em fêmeas intactas, o que sugere que os níveis fisiológicos de testosterona diminuem o risco de machos desenvolverem nocicepção da ATM. A resposta nociceptiva induzida pela injeção de uma alta concentração de formalina (1,5%) na ATM de machos é significativamente menor que àquela induzida na ATM de fêmeas em diestro, fase do ciclo estral com baixos níveis de estrógeno, mas semelhante àquela induzida na ATM de fêmeas em proestro, faze do ciclo estral com altos níveis de estrógeno. Esse resultado sugere que a nocicepção da ATM, em fêmeas, é exacerbada durante a fase do ciclo estral em que os níveis de estrógeno estão baixos. A administração sistêmica de estrógeno ou progesterona em fêmeas gonadectomizadas e de testosterona em machos gonadectomizados reduz a resposta nociceptiva induzida pela injeção de formalina na ATM. A influência do sexo e dos hormônios ovarianos na nocicepção induzida pela injeção de formalina ou de glutamato na ATM foi exatamente a mesma, o que demonstra que o efeito antinociceptivo dos hormônios ovarianos na ATM não é estritamente relacionado a nocicepção induzida pela formalina. A semelhança entre estudos clínicos e os resultados obtidos utilizando estes dois agentes nociceptivos sugere que o modelo comportamental de nocicepção da ATM pode ser útil e confiável para estudar os mecanismos envolvidos no efeito antinociceptivo dos hormônios sexuais na ATM de ratos. A administração de drogas no líquido cefalorraquidiano da região de complexo sensorial trigeminal também é útil para o estudo desses mecanismos, mas o procedimento cirúrgico realizado para a implantação do cateter usado para a injeção pode afetar a expressão dos comportamentos relacionados a nocicepção orofacial. Portanto, a técnica que permite a injeção direta de drogas nessa região, sem a necessidade de procedimentos cirúrgicos contribui para o estudo dos mecanismos envolvidos no efeito antinociceptivo dos hormônios sexuais na ATM de ratos. A administração, por meio dessa técnica, do antagonista de receptores opióides naloxona no espaço subaracnóide da região do complexo sensorial trigeminal bloqueou o efeito antinociceptivo induzido pelos níveis fisiológicos de estrógeno em fêmeas em proestro e pela administração sistêmica de estrógeno ou progesterona em fêmeas gonadectomizadas e de testosterona em machos o gonadectomizados. No entanto, a co-administração de naloxona e formalina na ATM bloqueou o efeito antinociceptivo da progesterona e da testosterona, mas não do estrógeno. Esses dados sugerem que mecanismos opióides centrais medeiam o efeito antinociceptivo do estrógeno, da progesterona e da testosterona, enquanto mecanismos opióides periféricos também medeiam o efeito antinociceptivo da progesterona e da testosterona. A administração local de estrógeno, conjugado ou não com a albumina plasmática, na ATM de fêmeas reduziu significativamente a nocicepção induzida pela formalina. Como o estrógeno conjugado com a albumina tem ação restrita a receptores de membrana, esse dado sugere que o estrógeno reduz a nocicepção através de uma ação periférica não genômica. O efeito antinociceptivo do estrógeno foi bloqueado pelo antagonista de receptores estrogênicos ICI 182 780 e pelos inibidores da óxido nítrico sintase, L-NNA, e da guanilato ciclase, ODQ, mas não pelo antagonista de receptores opióides, naloxona. Esse dado sugere que o efeito antinociceptivo periférico do estrógeno é mediado pela ativação da via do óxido nítrico/GMP cíclico. Juntos, os resultados desse estudo demonstram que os níveis fisiológicos de testosterona diminuem o risco de ratos desenvolverem nocicepção da ATM e os de estrógeno diminuem a nocicepção da ATM em ratas. Além disso, a nocicepção da ATM também é diminuída pela administração sistêmica de estrógeno ou progesterona em ratas e de testosterona em ratos. O efeito antinociceptivo dos hormônios sexuais é mediado por mecanismos opióides centrais, enquanto mecanismos opióides periféricos medeiam o efeito da progesterona e da testosterona, mas não do estrógeno. De fato, a administração de estrógeno na ATM reduz a nocicepção através de um mecanismo periférico não genômico, mediado pela ativação da via do óxido nítrico-GMPc, mas não pela ativação do sistema opióide periférico / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of sex hormones on temporomandibular joint (TMJ) nociception in rats and the possible mechanisms underlying their effect. The TMJ injection of 0.5% formalin induced nociception in intact females and gonadectomized males, but not in intact males, suggesting that the physiological level of testosterone protect males by decreasing their probability to develop TMJ pain. A higher dose of formalin (1.5%) induced a nociceptive behavior response significantly higher in female rats during diestrus phase of the estrous cycle than in those during proestrus phase and male rats. Since estradiol serum level was higher in proestrus than in diestrus females, this finding suggests that during low estradiol level of the estrous cycle the TMJ nociception is increased in female rats. Systemic administration of estradiol or progesterone in gonadectomized females and of testosterone in gonadectomized males significantly decreased 1.5% formalin-induced TMJ nociception. The role of sex and ovarian hormones in formalin and glutamate-induced TMJ nociception was virtually the same, showing that the antinociceptive effect of ovarian hormones was not exclusively related to the nociception induced by formalin. The similarity between clinical studies and the present results, obtained by using two different nociceptive agents, suggests that the TMJ behavior model may be useful and reliable to study the mechanisms underling the antinociceptive effect of sex hormones in the TMJ. Drug delivery to the medullary cerebrospinal fluid is also useful to study these mechanisms, however, the surgical procedure for implantation of the catheter used for drug delivery may affect the expression of the nociceptive behaviors related to orofacial nociception. Therefore, the technique for direct drug delivery to the medullary cerebrospinal fluid, without catheter implantation, will contribute for the study of the mechanisms underling the antinociceptive effect of sex hormones in the TMJ. The administration, though this technique, of the opioid receptor antagonist naloxone in the medullary region blocked the antinociceptive effect of estradiol, progesterone and testosterone. However, the co-administration of naloxone with formalin into the TMJ blocked the antinociceptive effect of progesterone and testosterone, but not of estradiol. These findings suggest that central opioid mechanisms mediate the antinociceptive effect of estradiol, progesterone and testosterone, while peripheral opioid mechanisms also mediated the antinociceptive effect of progesterone and testosterone. The local administration of estradiol, conjugated or not with the bovine serum albumin, significantly decreased formalin-induced TMJ nociception in female rats. Given that estradiol conjugated with bovine serum albumin is a membrane impermeable compound, these findings suggest that estradiol decreases TMJ nociception by a peripheral nongenomic mechanism. The antinociceptive effect of estradiol was blocked by an estrogen receptor antagonist and by a nitric oxide synthase and a guanilato cyclase inhibitors, but not by a opioid receptor antagonist. These findings suggest that estradiol decreases TMJ nociception in female rats through a peripheral activation of NO-cGMP signaling pathway. Taken together, the findings of this study suggest that the high physiological level of testosterone decreases the risk of male rats develop TMJ pain and that of estradiol decreases TMJ nociception in female rats. Furthermore, TMJ nociception was also decreased by systemic administration of estradiol or progesterone in female and of testosterone in male rats. The antinociceptive effect of sex hormones is mediated by central opioid mechanisms, while peripheral opioid mechanisms mediate the antinociceptive effect of progesterone and testosterone, but not of estradiol. In fact, the administration of estradiol in the TMJ decreases nociception by a peripheral non-genomic mechanism mediated by activation of the nitric oxide-cGMP signaling pathway, but not by opioid receptors / Doutorado / Fisiologia Oral / Doutor em Odontologia

Orientador: Eliete Luciano / Banca: José Rodrigo Pauli / Banca: Maria Alice Rostom de Mello / Resumo: Os objetivos do presente estudo foram investigar as adaptações endócrinometabólicas em ratos submetidos ao exercício físico de natação associado com a administração de testosterona durante 8 semanas. Ratos jovens Wistar foram divididos em 4 grupos: controle sedentário (CS), controle treinado (CT), testosterona sedentário (TS), testosterona treinado (TT). O protocolo de natação consistiu de 1 hora/dia, 5 dias/semanas, durante 8 semanas, suportando durante a natação uma sobrecarga de 5% do seu peso corporal. A testosterona foi administrada 3 dias/semana, na concentração de 5 mg/kg de peso corporal do animal, por via subcutânea, também por 8 semanas. Ao final da sétima semana de experimento, os ratos foram submetidos aos testes de tolerância à glicose (GTT) e teste de tolerância à insulina (ITT). Após 10 semanas os animais foram sacrificados na condição de repouso. Amostras de sangue foram coletadas para a determinação do hematócrito, glicose, insulina, proteínas totais, colesterol total e triglicérides. Os testículos, a próstata e vesícula seminal, os tecidos adiposos foram analisados em balança analítica. O tecido muscular e hepático foram usados para determinação do glicogênio e da razão proteína/DNA. As adrenais foram pesadas e usadas para determinar o conteúdo de colesterol e ácido ascórbico. A análise estatística foi feita por ANOVA e aplicação do teste de post-hoc de Newman-Keuls, onde adequado, com nível de significância pré-fixado em 5%. Os resultados indicam que os ratos treinados tiveram maior tolerância à glicose comparados com os animais sedentários durante o GTT. Nossos dados mostram que a administração crônica da testosterona mais o treinamento físico foi associada ao aumento da sensibilidade à insulina.O grupo treinado administrado com testosterona mostrou uma maior taxa de desaparecimento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aims of this study were to investigate the endocrine-metabolic adaptations in rats submitted to chronic swimming exercise associate to administration of testosterone during 8 weeks. Young Wistar rats were divided into four groups: sedentary control (CS), trained control (CT), sedentary testosterone (TS), trained testosterone (TT). Training protocol consisted of swimming 1h/day, 5 days/week, during 8 weeks, supporting a load of 5% body weight. Testosterone was administered 3 times a week, in concentration of 5 mg/kg body weight, during 8 weeks. After 7 weeks rats were submitted to glucose (GTT) and insulin (ITT) tolerance tests. After 8 weeks rats were sacrificed in rest. Blood samples were collected to determine hematocrit, glucose, insulin, total protein, total cholesterol and triglyceride. Hepatic and muscular tissues were used to determine glycogen and protein/DNA ratio. Adrenals were weighed and used to determine cholesterol and ascorbic acid contents. The results were analyzed by ANOVA and Newman- Keuls post-hoc test where appropriate and the significance level was 5%. The results indicate that trained rats showed higher glucose tolerance compared to sedentary animals during GTT. Our data showed that chronic exposure to testosterone plus physical training was associated with increase insulin sensitivity. The animals trained and administered with testosterone, showed higher glucose disappearance rates when compared to other groups. Testosterone administration promoted decrease in testicular mass and increase in prostate and seminal vesicle. Training promoted increase in muscle when compared to the sedentary groups, taking us to presuppose that training stimulated glycogen syntheses. The training protocol, testosterone administration or combination of two treatments, resulted in decrease of epididimal and perirrenal adipose tissues weight... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Em resposta a diversos estressores, o hipotálamo de anfíbios secreta o hormônio liberador de corticotropina (CRH), o qual estimula a hipófise a liberar o hormônio adrenocorticoctrópico (ACTH) na corrente sanguínea. O ACTH, por sua vez, atua na glândula inter-renal estimulando a liberação de glicocorticoides, sendo a corticosterona o principal glicocorticoide em anfíbios. Embora a modulação exercida pelos glicocorticoides de diversas respostas fisiológicas de estresse seja fundamental para a manutenção da homeostase em curto prazo, a ativação muito frequente e/ou prolongada do eixo hipotálamo-hipófise-interrenais (HHI) pode inibir processos importantes em longo prazo, tais como a reprodução e a imunocompetência e afetar a síntese de melatonina atuando diretamente sobre a pineal. O objetivo do presente estudo foi avaliar possíveis alterações nos níveis plasmáticos de corticosterona, testosterona, níveis oculares de melatonina, hematócrito e aspectos imunitários (contagem total de leucócitos e capacidade antimicrobiana plasmática - contra Escherichia coli) de machos da perereca Hypsiboas faber em resposta à injeção de ACTH, bem como o curso temporal destas respostas. Amostras de sangue e plasma foram obtidas a partir de 30 machos capturados em campo, dentro de 3 minutos da captura. Os animais foram trazidos para o laboratório e, após dois meses, divididos em seis grupos para serem amostrados em três horários distintos 1 h, 3h e 6h após o tratamento. Para cada horário um grupo controle e um grupo experimental foram adicionados, recebendo uma injeção de 105 &mu;L de solução salina ou de solução de ACTH (0,446 &mu;g de ACTH/g de massa corpórea (grupo experimental)). O tratamento com ACTH aumentou significativamente os níveis plasmáticos de corticosterona e diminuiu os níveis plasmáticos de testosterona bem como os níveis oculares de melatonina após 1 hora. Após 6 h da injeção de ACTH, houve um aumento da porcentagem do hematócrito e dos níveis de melatonina ocular. O tratamento com ACTH não afetou os aspectos imunitários estudados dentro do intervalo amostrado. Os resultados confirmam o papel da ativação do eixo HHI na inibição da secreção de testosterona e na modulação da secreção de melatonina, embora os possíveis efeitos imunomodulatórios possam se dar em intervalos temporais mais tardios / In response for several stressors, the amphibian hypothalamus release the corticotrophin release hormone (CRH), which stimulates pituitary to release the adenocorticotropic hormone (ACTH) in the bloodstream. The ACTH, in your turn, acts in inter renal glands stimulating the glicocorticoids releasing, being the corticosterone the main glicocorticoid in anphibians. While the modulation exercised by the glicocorticoids of diverses physiological responses of the stress is fundamental for de maintainance of homeostasis in short period, the frequent and/or prolongued activation of the hypothamlamus pituitary interenal axis (HHI) could inhibit important process in long periods, as the reproduction and immunocompetence and affect melatonin synthesis acting directly in pineal gland. The objective of the present study was evaluate possible alterations in plasmatic corticosterone levels, testosterone, eyes melatonin levels, hematocrit and immunity aspects (Total count leucocytes and antimicrobian plasmatic capacity - against Escherichia coli) from males of the treefrog Hypsiboas faber in response to ACTH injection, as well, the temporal course of these responses. Blood and plasma samples were obtained from the 30 males captured in the field, whitin 3 minutes from the capture. The animals were transferred to the laboratory and, after two months, divided in six groups to be sampled in three different times 1 h, 3 h and 6 h after treatment. For each time one control group and one experimental group were added, receiving one injection of 105 &mu;L of saline or ACTH solution (0,446 &mu;g de ACTH/g of body mass (experimental group)). The ACTH treatment increase significantly the plasmatic corticosterone levels and decrease the plasmatic testosterone levels, as well, the eye melatonin levels after one hour. After six hours of the ACTH injection, occurred the increase of the hematocrit percentage and the eye melatonin levels. The ACTH treatment did not affect the immunity aspects studied in the sampling interval. The results confirm the role of the activation on the axis HHI in the inhibition of the testosterone secretion and in the modulation of melatonin secretion, althougth the possible immunomodutatory effects could happen in temporal intervals later

Utilizaram-se 27 ratos Wistar, machos com 98 dias de idade, originados do Biotério da FMVZ-USP, com o objetivo de avaliar os possíveis efeitos do diabetes mellitus, sobre a função reprodutiva relacionada ao macho.Os animais foram divididos em três grupos, grupo A (GA) constituído de 10 animais sadios, grupo B (GB) constituído de oito ratos Wistar, com diabetes mellitus induzida quimicamente através da administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg) e grupo C (GC) constituído por nove animais com diabetes mellitus induzida quimicamente pela administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg), associada a insulinoterapia (3UI/rato por dia). Após quatro dias da administração da droga (GB e GC), os animais pertencentes ao grupo C (GC) receberam insulinoterapia (três IU/rato/dia) durante 42 dias. No final do experimento (46 dias após a administração da estreptozotocina), os animais foram sacrificados e foram observados os seguintes resultados; O diabetes mellitus leva ao aumento da glicemia, diminuição do peso corpóreo, diminuição do peso e tamanho testicular, diminuição das concentrações séricas de testosterona e FSH. Porém através da avaliação dos níveis séricos de inibina B, foi constatado que o diabetes não promove nem redução, nem aumento das concentrações séricas desse hormônio. Conclui-se também que a reposição exógena de insulina foi capaz de impedir a diminuição do peso corporal, redução do peso testicular, diminuição dos níveis de testosterona e FSH, porém apesar da insulinoterapia ter impedido a diminuição do peso corpóreo, não foi capaz de proporcionar o mesmo desenvolvimento corporal observado nos animais controle. / The objective of the present experiment was to evaluate the possible effect of diabetes mellitus, on the reproductive function in male rats. Towards this end, 27 male Wistar rats (98 days old), housed at the FMVZ-USP animal holding facility, were randomly assigned into three groups: Group A (GA) consisting of 10 healthy animals; Group B(GB) consisting of eight Wistar rats, with diabetes mellitus chemically induced through the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg); and C group (GC) constituted by nine animals with diabetes mellitus chemically induced by the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg), associate to an insulin treatment (3IU/rat per day for 42 days) that begun 4 days after the streptozotocin administration. Animals were euthanized 46 days after the administration of the estreptozotocin and the following results were obtained: diabetes mellitus led to an increase of the glicemia, reduction of the corporeal weight, decreased testicular wheight, serum concentrations of testosterone and FSH. No effect of diabeted were found for the serum levels of inhibin B. Results suggested that the exogen replacement of insulin was capable of hindering the reduction on corporal weight, reduction of testicular weight and reduction of the testosterone levels and FSH. On the other hand despite the fact that insulin treatament was capable of avoiding the reduction on bofy weight, it was not capable to provide similar body development observed in the normal animals.

Utilizaram-se 27 ratos Wistar, machos com 98 dias de idade, originados do Biotério da FMVZ-USP, com o objetivo de avaliar os possíveis efeitos do diabetes mellitus, sobre a função reprodutiva relacionada ao macho.Os animais foram divididos em três grupos, grupo A (GA) constituído de 10 animais sadios, grupo B (GB) constituído de oito ratos Wistar, com diabetes mellitus induzida quimicamente através da administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg) e grupo C (GC) constituído por nove animais com diabetes mellitus induzida quimicamente pela administração intraperitonial de estreptozotocina (65mg/Kg), associada a insulinoterapia (3UI/rato por dia). Após quatro dias da administração da droga (GB e GC), os animais pertencentes ao grupo C (GC) receberam insulinoterapia (três IU/rato/dia) durante 42 dias. No final do experimento (46 dias após a administração da estreptozotocina), os animais foram sacrificados e foram observados os seguintes resultados; O diabetes mellitus leva ao aumento da glicemia, diminuição do peso corpóreo, diminuição do peso e tamanho testicular, diminuição das concentrações séricas de testosterona e FSH. Porém através da avaliação dos níveis séricos de inibina B, foi constatado que o diabetes não promove nem redução, nem aumento das concentrações séricas desse hormônio. Conclui-se também que a reposição exógena de insulina foi capaz de impedir a diminuição do peso corporal, redução do peso testicular, diminuição dos níveis de testosterona e FSH, porém apesar da insulinoterapia ter impedido a diminuição do peso corpóreo, não foi capaz de proporcionar o mesmo desenvolvimento corporal observado nos animais controle. / The objective of the present experiment was to evaluate the possible effect of diabetes mellitus, on the reproductive function in male rats. Towards this end, 27 male Wistar rats (98 days old), housed at the FMVZ-USP animal holding facility, were randomly assigned into three groups: Group A (GA) consisting of 10 healthy animals; Group B(GB) consisting of eight Wistar rats, with diabetes mellitus chemically induced through the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg); and C group (GC) constituted by nine animals with diabetes mellitus chemically induced by the intraperitoneal administration of estreptozotocin (65mg/Kg), associate to an insulin treatment (3IU/rat per day for 42 days) that begun 4 days after the streptozotocin administration. Animals were euthanized 46 days after the administration of the estreptozotocin and the following results were obtained: diabetes mellitus led to an increase of the glicemia, reduction of the corporeal weight, decreased testicular wheight, serum concentrations of testosterone and FSH. No effect of diabeted were found for the serum levels of inhibin B. Results suggested that the exogen replacement of insulin was capable of hindering the reduction on corporal weight, reduction of testicular weight and reduction of the testosterone levels and FSH. On the other hand despite the fact that insulin treatament was capable of avoiding the reduction on bofy weight, it was not capable to provide similar body development observed in the normal animals.

INTRODUCCIÓ I OBJECTIUS.L'eficàcia de la castració es mesura analitzant els nivells de testosterona, malgrat que no existeix cap evidència clínica en relació amb el nivell de castració òptim. L'objectiu principal d'aquest treball ha estat definir el nivell de testosterona sèrica amb impacte clínic en pacients amb càncer de pròstata sotmesos a supressió androgènica (ADT). Objectius secundaris han estat analitzar si el tractament amb bicalutamida és causa d'elevacions inesperades de testosterona sèrica i el seu possible efecte beneficiós sobre la SLAIP en pacients que experimenten elevacions puntuals per sobre de 50 ng/dL.MATERIAL I MÈTODES.Es varen determinar els nivells sèrics de testosterona tres cops amb un interval de sis mesos, durant el seguiment de 73 pacients amb càncer de pròstata no metastàtic sotmesos a ADT amb agonistes 3M depot de la LHRH, 28 dels quals va rebre també bicalutamida. Amb un amb seguiment mig 51 mesos (12-240), varem objectivar 28 casos de progressió androgen independent (AIP).l'AIP es va definir com tres elevacions consecutives de PSA per sobre del PSA nadir, i la supervivència lliure de progressió androgen-independent (SLAIP) es va definir a partir de la primera de tres elevacions consecutives de PSA després del PSA nadir. Els nivells de testosterona sèrica es van determinat mitjançant un assaig quimioluminiscent (DPC, Inc) en un sistema automatitzat Inmulite 2000 amb un límit inferior de sensibilitat de 15 ng/dL, Les mostres sèriques es van obtenir entre les setmanes vuit i dotze després de l'administració de l'agonista LHRH trimestral i entre les 8:00 i les 10:00 hores del matí.RESULTATS.La testosterona sèrica fou sempre inferior a 20 ng/dL en 32 pacients (43.6%). Varem detectar elevacions puntuals entre 20 i 50 ng/dL en 23 pacients (31.5%) i per sobre de 50 ng/dL en 18 pacients (24.7%). El nivell més baix de testosterona sèrica amb impacte clínic sobre la SLAIP fou el de 32 ng/dL. La supervivència mitja lliure de progressió androgen independent en els pacients amb elevacions superiors a 32 ng/dL fou de 88 mesos (95% CI 55-121), mentre que fou de 137 mesos (95% CI 104-170) en aquells que presentaven valors de testosterona sèrica inferiors a 32 ng/dL, p<0.03. El tractament amb bicalutamida no es va relacionar amb la presència d'elevacions inesperades de testosterona. No obstant, en aquells pacients amb elevacions de testosterona per sobre de 32 ng/dL, aquells tractats amb bloqueig androgènic màxim (BAM) presentaven una major SLAIP, p<0.02, que aquells tractats sense bicalutamida. Contràriament, en aquells pacients sense elevacions inesperades de testosterona, els pacients tractats amb BAM mostraven una SLAIP similar a la d'aquells que no eren tractats amb bicalutamida, p>0.05.CONCLUSIONS.El nivell de castració amb impacte clínic en pacients amb càncer de pròstata sotmesos a supressió androgènica ha estat de 32 ng/dL. Les elevacions inesperades de testosterona per sobre d'aquest nivell prediuen una menor SLAIP. L'associació de bicalutamida no es relacionava amb la presència d'elevacions inesperades de testosterona, no obstant aquells pacients amb elevacions inesperades de testosterona es podrien beneficiar potencialment del BAM. / INTRODUCTION AND OBJECTIVES:The efficacy of castration is measured by the assessment of serum testosterone however no clinical evidence exists regarding the optimal castration level. The primary objective of this study was to determine the serum testosterone castrate level with clinical relevance in prostate cancer (PCa) patients subjected to androgen deprivation therapy (ADT). Secondary objectives were to analyze the relationship between bicalutamide associate treatment to LHRH agonist and breakthrough elevations of serum testosterone and the possible benefit of maximal androgen blockade (MAB) in those patients.METHODS: Serum testosterone was determined three times, at six months intervals, during the follow up of 73 non metastatic PCa patients under medical castration, 28 of whom also received bicalutamide. During a mean follow up of 51 months (12-240), 28 (38.4%) events of androgen independent progression (AIP) were recorded. AIP was defined as three consecutive elevations of PSA after the nadir and the time to AIP was measured from the begin of ADT to the first elevation after the nadir PSA. Serum testosterone was measured by a chemiluminiscent assay (DPC Inc.) using the Immulite 2500 automated device with a lower sensitivity of 15 ng/dL. Blood samples were obtained between week eight and twelve after the three months depot LHRH agonist injection and between 8:00 to 10:00 am.RESULTS:Serum testosterone was under 20 ng/dL in 32 patients (43.6%). Breakthrough elevations between 20 and 50 ng/dL were observed in 23 (31.5%) and over 50 ng/dL in 18 (24.7%). The lowest testosterone level with significant impact on the survival free of AIP was 32 ng/dL. The mean survival free of AIP in patients with breakthrough elevations over 32 nd/dL was 88 months (95% CI 55-121) while it was 137 months (95% CI 104-170) in those without this event, p < 0.03. Bicalutamide treatment was not related with breakthrough elevations of serum testosterone. However in the subset of patients with breakthrough elevations of serum testosterone over 32 ng/dL, those patients treated with MAB experienced longer survival free of AIP, p < 0.02, than those treated without bicalutamide. Contrarily, in patients without breakthrough elevations of serum testosterone patients treated with MAB had similar survival free of AIP than those treated without bicalutamide, p > 0.05. CONCLUSIONS:In the present study the serum testosterone castrate level with clinical relevance in Pca patients subjected to medical castration,was 32 ng/dL. Breakthrough elevations over this threshold predicted a lower survival free of AIP. Associate Bicalutamide was not related with breakthrough elevations of serum testosterone however those patients with breakthrough elevations of serum testosterone could potentialy benefit of a MAB.

O mecanismo não clássico de testosterona induz resposta celular rápida ao nível de membrana, enquanto que a ação clássica se dá pela ligação da testosterona ao seu receptor androgênico intracelular (iAR) que regula a expressão gênica. A Epitestosterona, o 17α-epímero da testosterona, tem sido descrito como um anti-andrógeno, inibindo o efeito da testosterona ou diidrotestosterona sobre o sobre o iAR. No entanto, a epitestosterona apresenta um efeito não clássico similar ao da da testosterona, despolarizando o potencial de membrana das células de Sertoli e induzindo a captação rápida de Ca2+ nos testículos. O objetivo deste estudo foi analizar o efeito do tratamento com epitestosterona e testosterona em animais castrados quimicamente com a utilização de um antagonista do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), o cetrorelix. Ratos imaturos, a partir do 7º dia de idade receberam durante 7 dias o tratamento pela via intraperitoneal de acordo com os seguintes grupos: Controle (apenas o veículo hidroxipropil-beta-ciclodextrina, castrados (Cetrorelix (500 μg/kg/dia)), castrados com reposição de testosterona (2,5mg/kg/dia) (Cetrorelix+testosterona), castrados com reposição de epitestosterona (2,5mg/kg/dia) (cetrorelix+epitestosterona) e epitestosterona. Foram observados os efeitos dos tratamentos em parâmetros de desenvolvimento sexual de ratos imaturos como: peso corporal, peso testicular e medida da distância anogenital (DAG). Também foram feitos registros eletrofisiológicos da ação no potencial de membrana da testosterona nos túbulos seminíferos de testículos de ratos de todos os tratamentos. Para a avaliação a imunorreatividade ao iAR foi utilizado o anticorpo primário anti-iAR do tipo policlonal na concentração 1:250. Para o controle-negativo da técnica cortes de todas os tratamentos incubados com PBS-T. Para expressão foi utilizado o anticorpo primário anti-iAR do tipo policlonal na concentração de 1:1000 realizada pela técnica de Western Blot. A castração química com cetrorelix resultou na redução no peso dos testículos e da DAG. O tratamento com epitestosterona e testosterona restaurou tanto o peso testicular como a DAG. O efeito despolarizante em resposta à aplicação tópica da testosterona foi observado no grupo controle e no grupo de cetrorelix. Além disso, o grupo castrado com cetrorelix com reposição de epitestosterona impediu o efeito rápido da testosterona na despolarização da membrana celular. No grupo com reposição de testosterona, a resposta eletrofisiológica da testosterona na membrana também foi alterada. O tratamento com epitestosterona nos ratos castrados com cetrorelix produziu diminuição da expressão do iAR. Foi observada redução da imunorreatividade do iAR nos animais tratados com epitestosterona. Pode-se concluir que a epitestosterona participa do desenvolvimento genital em ratos imaturos, ou seja, produziu recuperação de AGD de forma semelhante à testosterona. Este resultado sugere que ambos os hormônios atuam pela mesma via de desenvolvimento deste parâmetro, provavelmente através de um mecanismo não-clássico. Além disso, o tratamento com o antagonista de GnRH e reposição de epitestosterona suprimiu a resposta não clássica da testosterona, mudando o padrão de via de sinalização da testosterona nas células de Sertoli. / The non-classical mechanism of testosterone induces a rapid cellular response at the membrane level, while the classical action is through the binding to the intracellular androgenic receptor (iAR) and the regulation of gene expression. Epitestosterone, the 17α-epimer of testosterone, has been described as an anti-androgen, inhibiting the testosterone or dihyidrotestosterone effect on the iAR. However, epitestosterone presents a non-classical effect similar to testosterone, depolarizing the membrane potential of Sertoli cells and inducing rapid Ca2+ uptake in testes. The aim of this study was to observe the effect of the treatment with epitestosterone and testosterone in rats chemically castrated with a gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonist cetrorelix. From pnd 7 to pnd 14, the rats were given daily intraperitoneal injections with (i) hormones solvent, (2-hydroxypropyl β-cyclodextrin) as the control group (CTRL); (ii) 500 μg/kg/day of the GnRH antagonist cetrorelix as the cetrorelix group (CET); (iii) 500 μg/kg/day of cetrorelix + 2.5 mg/kg/day of testosterone as the cetrorelix plus testosterone group (CET+T); (iv) 500 μg/kg/day of cetrorelix + 2.5 mg/kg/day of epitestosterone as the cetrorelix plus epitestosterone group (CET+EpiT); and (v) 2.5 mg/kg of epitestosterone alone as the epitestosterone group (EpiT). The effect of different treatments were verified on the body and testicular weight and the anogenital distance (AGD). The potential and the membrane resistance of Sertoli cells were recorded by electrophysiological technique intracellular record. The electrophysiological effect of testosterone on membrane of Sertoli cells were evaluated in seminiferous tubules in testes from rats of the all experimental groups. For evaluating the immunoreactivity to the iAR we used the anti-iAR primary polyclonal antibody type in concentration 1: 250. For the negative control technique cuts all treatments incubated with PBS-T. For iAR expression we used the anti-iAR type polyclonal primary antibody at a concentration of 1: 1000 performed by the Western Blot technique. The chemical castration induced a reduction in testicular weight and AGD. The treatment with both epitestosterone and testosterone restored the AGD and the testicular weight. The depolarizing effect in response to topical testosterone application was observed in the control group and in the GnRH antagonist cetrorelix group. Moreover, in the GnRH antagonist cetrorelix replaced with the epitestosterone group, testosterone was not capable of changing the membrane potential. In the group replaced with testosterone, the membrane response to testosterone was smaller also. The treatment with epitestosterone in castrated rats also reduced the expression of the iAR in testes. The immunoreaction of iAR was reduced in the animals treated with epitestosterone. In conclusion, the effect of epitestosterone on genital development in immature rats, namely recovering of AGD, was similar to testosterone. This result suggest that both hormones act through the same pathway on this development parameter, probably by a non-classical mechanism. Additionally, the treatment with the GnRH antagonist plus epitestosterone suppressed the non-classical testosterone response, changing the pattern of testosterone signaling pathway through a membrane mechanism in Sertoli cells.