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Development of a process of rabies virus production using BHK-21 cell line adapted to suspension in serum free media for vaccine productionSanson, Raquel Koehler January 2013 (has links)
Orientador : Prof. Dr. Carlos Ricardo Soccol / Coorientadora : Profa. Dra. Vanete Thomaz Soccol / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia. Defesa: Curitiba, 29/10/2012 / Inclui referências : f.53-55 / Área de concentração: Saúde humana e animal / Resumo: Soro animal é usado em cultivo celular por causa de seus fatores nutricionais, porém, seu uso é um risco potencial à saúde, devido a possível presença de agentes adventícios, tais como vírus e príons, e também é um dos principais responsáveis por reações alérgicas em cães. Células BHK-21 adaptadas à suspensão crescendo em meio de cultura padrão com 3% de soro fetal bovino foram submetidas à adaptação em meio de cultura livre de soro. Os meios de cultura livre de soro usados neste estudo foram VP-SFM, Ex-Cell 302 e Cellvento BHK-200. As células foram adaptadas ao VP por trocada direta do meio de cultura, ao Ex-Cell por troca direta e gradual do meio. Adaptação a Cellvento só foi possível usando células previamente adaptada a VP-SFM. As células adaptadas ao meio de cultura Ex Cell 302 apresentaram melhores resultados de crescimento. Todas as células adaptadas são capazes de produzir vírus da raiva. Porém, células adaptadas em VP-SFM apresentaram a melhor produtividade viral. Entretanto, produção de vírus utilizando Cellvento BHK-200 apresenta o melhor potencial econômico.
Palavras chaves: vacina antirrábica veterinária, meio de cultura livre de soro, BHK-21, adaptação celular. / Abstract: Animal serum is used in cell culture because of its nutritional factors, however, their use not only is a potential risky for health, due to possible presence of adventitious agents, such as virus and príons, but also is the major responsible of allergic reactions in dogs. BHK-21 cells adapted to suspension growing in standard culture media with 3% of fetal bovine serum were submitted to adaptation to serum free culture media. Serum free culture media used in this study were VP-SFM, EX-CELL 302 and Cellvento BHK-200. Cells were adapted to VP by direct media change, to Ex Cell by direct and gradual media change. Adaptation to Cellvento was only possible by using cells priory adapted to VP-SFM. Cells adapted to Ex Cell culture media presented best growth results. All adapted cells have ability to produce rabies virus. Although, cells adapted to VP-SFM presented best virus productivity. However, virus production using Cellvento BHK-200 presents best economic potential. Keywords: veterinary rabies vaccine, serum free media, BHK-21, cell adaptation.
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Vacinas em forma inativada e atenuada contra vírus influenza induzem diferente resposta celular imune e perfil de expressão gênica em criançasCao, Raquel Giacomelli January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / INTRODUCTION: Studies have shown that LAIV is more effective than TIV for prevention of influenza infection in young children, but the underlying mechanisms associated with protection are still not well defined. OBJECTIVES: To assess differences in cellular immunity and gene expression profiles in children after immunization with LAIV or TIV. METHODS: Peripheral blood of previously healthy children was collected pre and postvaccination and analyzed for B cells measurement and antibodies production. Microarray analyses were applied to assess the gene expression profiles. RESULTS: LAIV vaccinees showed number of naïve, memory and transitional B cells increased on day 1 compared to baseline (p<0. 05). TIV vaccinees showed the number of plasmablasts increased on day 7 post-vaccination (p≤0. 01). In addition, the titers for the three strains of the vaccine (H1N1, H3N2 and B) were significantly elevated on the TIV group when compared with the LAIV group. Regarding the transcriptional profiles presented, both vaccines induced interferon signaling, but in different time points, TIV 1 day postvaccination and LAIV 7 days post-vaccination, the last only in children younger than 5 years old. CONCLUSIONS: These results indicate that LAIV and TIV induced different immune responses in peripheral blood of vaccinated children and that both vaccines induce interferon signaling post-vaccination. / INTRODUÇÃO: Estudos têm demonstrado que a vacina contra os vírus influenza LAIV é mais eficiente que a formulação TIV para a prevenção de infecção em crianças, porém os mecanismos envolvidos ainda não estão bem definidos. OBJETIVOS: Acessar as diferenças na imunidade celular humoral e de expressão de perfis gênicos em crianças imunizadas com LAIV ou TIV.MÉTODOS: Sangue periférico de crianças previamente hígidas foi coletado pré e pósvacinação e analisado para mensuração de células B e para titulação de anticorpos. Análise pela técnica de microarranjos foi empregada para avaliação dos perfis de expressão gênica. RESULTADOS: Vacinação com LAIV induziu aumento do número absoluto de células B naïve, de memória e transicionais no após 30 dias comparado aos valores medidos antes da vacinação (p<0. 05). Vacinação com TIV, no entanto, induziu aumento de plasmoblastos no dia 7 pós-vacinação (p<0. 01). Os títulos de anticorpos para os três antígenos da vacina (H1N1, H3N2 e B) encontraram-se significativamente elevados no grupo vacinado com TIV quando comparado ao grupo que recebeu LAIV. Ambos os grupos vacinados induziram sinalização de genes relacionados ao interferon, porém em diferentes momentos: TIV induziu-os 1 dia pós-vacinação, enquanto LAIV 7 dias pós-vacinação, especialmente em crianças com menos de cinco anos de idade. CONCLUSÕES: Esses resultados sugerem que as vacinas LAIV e TIV induzem resposta celular imune diferente em crianças e que ambas induzem sinalização de interferon pós-vacinação.
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Modificação e caracterização moleculares do sistema minitransposon In5 para integração de genes heterologos em linhagens vacinais cya crp asd de Salmonella typhimuriumBrocchi, Marcelo, 1967- 22 July 2018 (has links)
Orientador: Wanderley Dias da Silveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T07:55:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1997 / Doutorado / Genetica de Microorganismos / Doutor em Genetica
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Efeito da alta pressão hidrostatica sobre o pneumovirus aviario : queda da infectividade e manutenção da imunogenicidadeCamargo, Lourdes Maria Araujo Quaresma de 02 August 2018 (has links)
Orientador : Clarice Weis Arns / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T11:17:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2002 / Doutorado
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Avaliação da imunidade protetora de uma cepa atenuada de Eimeria acervulina, em galinhas (Gallus gallus), apos desafios com as cepas parentais homologa e duas heterologasDias, Lucio Andre Viana 22 September 2003 (has links)
Orientador: Urara Kawazoe / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:41:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2003 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo a avaliação da imunidade protetora produzida pela imunização de galinhas (Gallus gallus) com a cepa atenuada Cu de Eimeria acervulina, desafiadas com sua cepa homóloga e duas heterólogas parentais. Foram utilizadas aves SPF (Specific Pathogen Free) da linhagem White Leghorn, com idade de sete dias. Cada ave recebeu uma dose de lxl03 oocistos da cepa atenuada "Cu" de Eimeria acervulina, no 7º dia e outra dose reforço no 14º dia de vida. As aves foram desafiadas com 2xl05 oocistos das cepas parentais "Cu", "PeFa" e "I" de E. acervulina, com 21 dias de idade. Os parâmetros adotados para a avaliação foram ganho de peso médio por ave, escore de lesão da mucosa intestinal e produção de oocistos por ave. A imunização proporcionou uma elevada proteção (acima de 85%) às aves desafiadas com as cepas parentais "Cu" e "PeFa", com relação ao ganho de peso médio por ave e produção de oocistos. Contudo, a imunidade mostrou-se menos elevada (75%) após o desafio com a cepa parental "I". Foi obtida total proteção contra o desenvolvimento de lesões intestinais em todos os experimentos de imunização. Os resultados apresentados sugerem a presença de variação antigênica em E. acervulina "I", em relação às duas outras cepas utilizadas. A cepa atenuada "Cu" de Eimeria acer:vulina apresenta um elevado potencial para utilização como vacina, no Brasil / Abstract: Evaluation of protective immunity produced by immunization of chickens (Gallus gallus) with the attenuated tine "Cu" of Eimeria acervulina after challenge with its homologous and two heterologous strains "PePa" e "I" was performed. Seven day old White Leghorn SPP (Specific Pathogen Pree) chickens were used for experiments. Each bird received a dose of lxl03 attenuated "Cu" tine oocysts of Eimeria acervulina on the 7th day and another dose in the 14th day of age. The birds were chalIenged with 2xl05 oocysts of "Cu", "PePa " and " I " parent strains of E. acervulina on the 21st day - old. The criteria used to evaluate protective immunity were: weight gain, lesion score of duodenum and upper small intestine and oocysts production per bird. The immunization with precocious tine of E. acervulina showed a high protection of chickens after challenge with parent strains "Cu" (96%) and "PePa" (over 86%) for weight gain and oocysts production. The immunity was lower (75%) when birds were challenged with the "I" parent strain. Total protection against intestinal lesions was obtained in all the immunization experiments. The present results suggest the presence of antigenic variation in E. acervulina between the strains used in the experiments. The attenuated "Cu" tine of Eimeria acervulina seems suitable for its use as tive vaccine in Brazil / Mestrado / Mestre em Parasitologia
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Estudo prospectivo de gestantes inadvertidamente vacinadas contra febre amarela na região de Campinas em fevereiro e março de 2000Suzano, Carlos Eduardo Saraiva 03 August 2018 (has links)
Orientador: Eliana Amaral / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:24:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2003 / Resumo: No período de cinco de fevereiro a três de março de 2000 foi realizada Campanha de Vacinação em massa contra Febre Amarela na DIR XII-Campinas, decorrente da identificação de focos urbanos dos hospedeiros naturais do vírus da febre amarela e da ocorrência de poucos casos clínicos na região. Foram vacinadas 2.070.000 pessoas, atingindo-se uma cobertura vacinal de 67%. Este é um estudo descritivo com a finalidade de avaliar possíveis efeitos da vacina sobre a gestação e o produto conceptual nas gestantes que tomaram inadvertidamente a vacina contra a febre amarela. As gestantes vacinadas, identificadas pelos municípios, foram orientadas a realizar acompanhamento no Pré-Natal Especializado do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas, devendo-se colher sorologia materna, no mínimo, seis semanas após a vacinação. Todas as crianças deveriam realizar acompanhamento sorológico no momento do parto e aos três, seis e 12 meses de vida. Um subgrupo de 86 pares mãe-criança de Campinas foi selecionado para uma avaliação mais aprofundada de possível infecção congênita através de estudo histopatológico das placentas, ecografia de fontanela, exame acústico e PCR dos tecidos placentários para a detecção do vírus da febre amarela, acompanhamento neuropediátrico até um ano de vida, para diagnóstico clínico de possíveis condições que pudessem ser associadas com a infecção congênita do vírus vacinal e exame morfológico para a detecção de defeitos congênitos. No total, 480 mulheres procuraram o Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher durante a gestação. A soropositidade para a febre amarela (IgG) foi de 95,2% dos casos, sendo a idade gestacional média na data da vacinação de 5,7 semanas (IC 95% - 5,2 a 6,2 semanas). As maiores taxas de vacinação inadvertida concentraram-se na porção Leste da DIR XII. Alguma reação adversa à vacinação foi observada em 19,6% das gestantes, com idade gestacional média na vacina semelhante ao grupo sem reação adversa. Nenhum recém-nascido teve IgM para febre amarela detectada ao nascimento e a freqüência das alterações congênitas, perinatais e histopatológicas encontradas não foram diferentes das referidas na literatura científica. Não houve detecção de infecção congênita pelo PCR de tecidos placentários. Houve 7% de soropositividade (IgG) dos lactentes aos 12 meses de vida e um caso positivo após 24 meses. Os resultados deste estudo mostram que a soropositividade é muito elevada em mulheres vacinadas precocemente na gravidez e parece não haver comprometimento da gestação e do produto conceptual / Abstract: Between February 5 and March 3, 2000 a Yellow Fever Mass Vaccination campaign was conducted at DIR XII-Campinas, following the identification of urban foci of natural hosts of the yellow fever virus and the occurrence of a few clinical cases in the region. Two million and seventy thousand people were vaccinated, achieving a vaccination coverage of 67%. This descriptive study is aimed at evaluating possible effects on pregnancy and infants born to women who had inadvertently received the yellow fever vaccine during pregnancy. Vaccinated pregnant women, identified according to municipality were referred to the Specialized Prenatal Outpatient facility at CAISM/UNICAMP for follow-up. Maternal serum sample was collected at least six weeks following vaccination. All infants were serologically monitored at delivery and at three, six and 12 months of age. A subgroup of 86 mother-infant pairs from Campinas was selected to investigate the possibility of a congenital infection. Placental histopathologic study, fontanelle ultrasound, auditory examination and PCR of placental tissue were carried out to detect the yellow fever virus. Neuropediatric follow-up was done until one year of age to diagnose clinical conditions possibly associated with congenital infection by the vaccine virus; and morphologic examination was performed to detect congenital defects. In toto, 489 women sought the CAISM service during pregnancy. Serum sample was positive for yellow fever (IgG) in 95.2% of cases and the mean gestational age at the date of vaccination was 5.7 weeks (95% CI-5.2 to 6.2 weeks). The highest inadvertent vaccination rates were concentrated in the eastern part of DIR-XII. Some adverse reaction to vaccination was observed in 19.6% of pregnant women, whose mean gestational age at the time of vaccination was similar to the group with no adverse reaction. No newborn showed IgM detection of yellow fever at birth and the rate of congenital, perinatal and histopathologic changes found were no different from those reported in the scientific literature. Congenital infection was not detected in placental tissue by PCR. There was a 7% seropositivity (IgG) in infants at 12 months of age and one positive case after 24 months. The results of this study show that there is a very high percentage of seropositivity in women vaccinated during early pregnancy. Furthermore, harmful effects on the pregnancy and infant do not seem to occur / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia
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Resposta imune a uma vacina proteica antimeningococica B: estudo da influencia de intervalos de tempo entre as imunizacoesGorla, Maria Cecilia Outeiro. January 2003 (has links) (PDF)
Mestre -- Sao Paulo (Estado). Secretaria da Saude. Coordenacao dos Institutos de Pesquisa. Programa de Pos-Graduacao em Ciencias, Sao Paulo, 2003.
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Terapia gênica contra o melanoma murino B16F10-Nex2 utilizando a quimera IL-13Ralfa2-Fc e interleucina 12 em associação com o composto 7A ciclopaladado / Gene therapy against murine melanoma B16F10-Nex2 using IL-13Ralfa2-Fc chimera and interleukin 12 in association with a cyclopalladated drugBarbosa, Flavia Hebeler [UNIFESP] January 2008 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / É freqüente em determinadas doenças, e inclusive no câncer, uma resposta imune que
leva a formação de interleucinas imunossupressoras cujo efeito principal é a paralisação de
macrófagos e inversão do perfil em geral protetor (Th-1) para outro não protetor ou
predominantemente Th-2. A resposta imune polarizada tipo 2 tem sido associada à progressão
tumoral e metástase. A interleucina 13 atualmente é considerada um mediador de resposta
imune tipo 2, pois apresenta inúmeras atividades imunoregulatórias em muitas doenças,
incluindo no câncer. Do ponto de vista celular, o papel protetor ou supressor das células NKT
restritas a CD1d na imunidade tumoral tem sido bastante explorado. Enquanto IL-12 pode
ativar células NKT tipo I produtoras de IFN-γ, as células NKT tipo 2 têm sido descritas como
principal fonte de IL-13 e esse mecanismo foi o responsável pela inibição da imunovigilância
em alguns modelos tumorais. Uma das cadeias do receptor, IL-13Rα2, possui alta afinidade
pela IL-13 e pode atuar como um inibidor dominante negativo ou “receptor decoy”,
suprimindo a ação da IL-13 e assim contribuindo para a manutenção da imunovigilância
tumoral. No presente trabalho, construímos uma quimera IL-13Rα2-Fc no vetor de expressão
eucariótica VR1012 e confirmamos a identidade da proteína recombinante por
immunoblotting. Através do ensaio de ELISA quimioluminescente, observamos que a
atividade biológica da quimera produzida, ou seja, a sua alta afinidade pela IL-13, estava
preservada. Esta vacina de DNA foi então testada no modelo singênico de melanoma murino
B16F10-Nex2, isoladamente ou em associações com um plasmídeo contendo o gene da IL-12.
Um protocolo de bioquimioterapia foi então construido com o composto ciclopaladado 7A.
Experimentos in vivo mostraram um efeito protetor mediado pela alta produção de IFN-γ e
“down-regulation” de interleucinas antiinflamatórias. A bioquimioterapia in vivo com ambos
os plasmídeos em associação com a droga 7A foi o melhor protocolo terapêutico o qual levou a
uma redução significativa na evolução tumoral, protegendo 30% dos animais, que
permaneceram livres de tumor. Demonstramos que a primeira administração do plasmídeo
expressando IL-12, seguida de contínuas doses do plasmídeo expressando IL-13Rα2-Fc
juntamente com a droga 7A resultou em uma atividade anti-tumoral mediada pela alta
produção de citocinas pró-inflamatórias e inibição ou controle de mecanismos
imunossupressores, principalmente recrutamento de células T NK1.1+
produzindo IL-10 e IL-13. / Interleukin 13 has emerged as a central mediator of a Th 2-dominant immune response and it
has immunoregulatory activities in many diseases, including cancer. The protective or
suppressive role of CD1d-restricted NKT cells in tumor immunity has been well documented.
Whereas IL-12 can activate type I IFN-γ−producing NKT cells, type II NKT cells have been
reported to produce IL-13 and this mechanism was responsible for immunosurveillance
suppression in some tumor models. The high affinity chain of the receptor, IL-13Rα2, may act
as a dominant negative inhibitor or “decoy receptor” suppressing the action of interleukin 13
then helping the maintenance of tumor immunosurveillance. Here, we constructed an IL-
13Rα2-Fc chimera in an expression vector VR1012 and confirmed the identity of our
recombinant protein by immunoblotting analysis and its bioactivity (binding to IL-13) in an
ELISA chemiluminescent assay. Such DNA vaccine was tested against syngeneic B16F10-
NEX2 murine melanoma. Experiments in vivo were carried out and the results showed a
protective effect mediated by high production of IFN-γ and down-regulation of the antiinflammatory
interleukins. Biochemotherapy in vivo with plasmid containing the gene for IL-
13Rα2-Fc in association with plasmid that encodes the gene for IL-12 combined with
treatment with the 7A cyclopalladated compound led to a significant reduction of tumor
evolution and complete protection of 30% of mice that remained tumor free. We conclude that
IL-12 gene therapy, followed by continuous doses of IL-13Rα2-Fc gene associated with 7A
chemotherapy resulted in anti-tumor activity owing to the high production of pro-inflammatory
cytokines and down regulation of immune suppression mechanisms, specifically involving the
recruitment of NK1.1+ T cells producing IL-10 and IL-13. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Avaliação Retrospectiva do ensaio de potência da Vacina Oral contra a Poliomielite utilizada no Brasil no período de 2008 a 2009 / Retrospective evaluation of the potency assay of oral polio vaccine used inSantos, Jarbas Emílio dos January 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Uma pesquisa foi realizada para testar a aplicação de ferramentas de garantia da qualidade em ensaios de potência da vacina oral contra poliomielite (OPV) e testar novas abordagens para validação de métodos analíticos, levando em conta a maior variabilidade de ensaios biológicos, com a finalidade de traçar o perfil deste ensaio. Foram adotadas duas abordagens para a validação do ensaio: a abordagem Clássica da "International Conference on Harmonization" aplicada aos ensaios biológicos de acordo com as recomendações descritas pela comissão da "Societé Française des Sciences et Techniques Pharmaceutiques" (SFSTP) e a abordagem do Conceito do Erro Total seguindo as recomendações da para esta abordagem também da SFSTP. As principais características avaliadas no estudo de validação, por se tratar de um ensaio quantitativo, foram a Exatidão e a Precisão. O Cpk, um índice gerencial de capacidade de processos, foi calculado para avaliar a capacidade do ensaio de potência e a adequação à regra 4-6-20 foi avaliada. Para cada componente viral da OPV, gráficos de controle da diferença entre os resultados dos dois laboratórios foram utilizados para detectar tendências não aleatórias nos resultados e a média das variâncias entre os resultados obtidos em cada laboratório, por amostra, foram utilizada para calcular o coeficiente de variação geométrico % geral em uma abordagem prática para determinar a reprodutibilidade do ensaio. O ensaio foi considerado Exato e Preciso nas duas abordagens de validação. / Uma pesquisa foi realizada para testar a aplicação de ferramentas de garantia da qualidade em ensaios de potência da vacina oral contra poliomielite (OPV) e testar novas abordagens para validação de métodos analíticos, levando em conta a maior variabilidade de ensaios biológicos, com a finalidade de traçar o perfil deste ensaio. Foram adotadas duas abordagens para a validação do ensaio: a abordagem Clássica da "International Conference on Harmonization" aplicada aos ensaios biológicos de acordo com as recomendações descritas pela comissão da "Societé Française des Sciences et Techniques Pharmaceutiques" (SFSTP) e a abordagem do Conceito do Erro Total seguindo as recomendações da para esta abordagem também da SFSTP. As principais características avaliadas no estudo de validação, por se tratar de um ensaio quantitativo, foram a Exatidão e a Precisão. O Cpk, um índice gerencial de capacidade de processos, foi calculado para avaliar a capacidade do ensaio de potência e a adequação à regra 4-6-20 foi avaliada. Para cada componente viral da OPV, gráficos de controle da diferença entre os resultados dos dois laboratórios foram utilizados para detectar tendências não aleatórias nos resultados e a média das variâncias entre os resultados obtidos em cada laboratório, por amostra, foram utilizada para calcular o coeficiente de variação geométrico % geral em uma abordagem prática para determinar a reprodutibilidade do ensaio. O ensaio foi considerado Exato e Preciso nas duas abordagens de validação.
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Estudos biológicos e imunológicos de novas plataformas de expressão de proteínas pelo vírus da febre amarela vacinal 17DLima, Noemia Santana January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A vacina contra febre amarela, constituída pelo vírus febre amarela (FA) vivo atenuado da cepa 17D, é uma das mais seguras e eficazes vacinas desenvolvidas até hoje. Seu correlato de proteção é a indução de anticorpos neutralizantes, que é acompanhada de intensa resposta imune celular, com ativação de um perfil balanceado de células TH1 e TH2, devido à ampla estimulação da resposta imune inata. Estas boas características tornam atraente o uso do vírus FA 17D como vetor para o desenvolvimento de novas vacinas contra outras doenças. O nosso laboratório utiliza uma estratégia única para expressão de proteínas heterólogas ao vírus FA 17D, através da inserção de cassetes de expressão na região intergênica E/NS1. Neste trabalho, determinamos a importância de alguns motivos funcionais introduzidos nas extremidades da GFP recombinante expressa por este vetor, que causaram impacto sobre a sua expressão, através do correto enovelamento proteico e transporte para a via secretora. Além disto, apresentamos diferentes plataformas, através de modificações no vetor previamente desenvolvido, que exibiram diferenças quanto à estabilidade genética do inserto, menor interferência com a replicação viral, menor indução de morte celular e capacidade de secreção da proteína recombinante. Adicionalmente, expressamos proteínas de envelope de SIV através de alguns dos novos vetores FA 17D desenvolvidos, que foram capazes de estimular anticorpos específicos em camundongos, demonstrando o potencial do vírus FA 17D como vetor para o desenvolvimento de vacina recombinante contra AIDS baseada na indução de resposta imune humoral / The yellow fever vaccine, composed of the live attenuated Yellow fever (YF) virus strain 17D, is one of the safest and most effective vaccines ever developed. Its correlate of protection is the induction of neutralizing antibodies, which is accompanied by intense cellular immune response with activation of a balanced profile of TH1 and TH2 cells due to the broad stimulation of the innate immune response. These characteristics make this virus attractive to be used as a vector for development of new vaccines against other diseases. Our laboratory uses a unique strategy for expression of heterologous proteins in the YF 17D virus by insertion of expression cassettes in the intergenic region E/NS1. Here, we determine the importance of some functional motifs introduced at the ends of the recombinant GFP expressed by this vector, which were able to improve its expression through the proper protein folding and its transport to the secretory pathway. Moreover, we present different platforms, which show differences in genetic stability of the insert, less interference with viral replication, less induction of cell death and enhanced capacity of secretion of the recombinant protein. Additionally, we express SIV envelope proteins by some of the new vectors developed that were able to elicit specific antibodies in mice, demonstrating the potential of the YF 17D virus as a vector for the development of recombinant vaccine against AIDS based on the induction of humoral immune response / 2100-Fev-02
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