Orientador: Helena Zerlotti Wolf Grotto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T22:39:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_LaudiceiaRodriguesde_M.pdf: 1702960 bytes, checksum: 3ba7c0babaf3b3aaba833310422371ed (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O papel da inflamação na fisiopatologia da anemia falciforme tem sido alvo de recentes investigações. O processo obstrutivo que ocorre na microcirculação, causado pelo acúmulo de células falcizadas, leva à lesão do endotélio, com migração e adesão de leucócitos, liberação de radicais oxigênio, liberação e ativação de citocinas inflamatórias. É reconhecida a participação de diversas citocinas na eritropoiese, estimulando ou inibindo a produção de células eritróides pela medula óssea, em especial na anemia que acompanha as doenças inflamatórias/infecciosas crônicas. É reconhecida a ação inibitória do interferon gama (IFN-?) sobre as células progenitoras da medula óssea, além de sua participação nos distúrbios do metabolismo do ferro (Fe), presentes na anemia de doença crônica. A Neopterina (NP) é um marcador associado à imunidade celular produzido pelos monócitos/macrófagos quando estimulados pelo IFN-?. Os dados sobre a participação do IFN-? no processo inflamatório que acompanha a Doença Falciforme são contraditórios e se restringem à Anemia Falciforme (Hb SS). O objetivo deste trabalho foi estudar a participação da Interleucina-3 (IL-3), do IFN -? e da NP em pacientes com Hb SS e hemoglobinopatia SC (Hb SC) na fase estável da doença, a fim de verificar a possível ação dessas citocinas e da NP sobre o metabolismo do Fe e da hematopoiese. Nossos resultados mostraram que as concentrações de IL-3 foram mais altas nos grupos SS e SC em relação ao controle, enquanto as determinações de IFN-? não mostraram diferenças entre os grupos. Pacientes SS com hemoglobina Fetal (Hb F) > 8,5% mostraram valores de IL-3 significativamente mais elevados do que aqueles com Hb F < 8,5% (p= 0,0338). Não foi observada correlação entre os parâmetros inflamatórios e do metabolismo do Fe. Uma correlação direta foi observada somente nos pacientes SS entre os níveis de IL-3 e hemoglobina (Hb) (r= 0,4633, p= 0,0457), IL-3 e Hb F (r= 0,6011, p= 0,0065). Os níveis de NP foram significativamente mais elevados nos pacientes SS e SC do que nos controles, mas não houve diferença entre os 2 grupos de pacientes. Não houve correlação entre NP e os parâmetros relacionados ao metabolismo de Fe. Esses dados sugerem que a IL-3 tem ação estimulante sobre a produção de Hb F e que pacientes com Hb SS, mesmo na fase estável da doença apresentam um certo grau de ativação do sistema monócito/macrófago, representado pelos altos níveis de NP, o que provavelmente contribui para a condição inflamatória crônica desses pacientes / Abstract: Sickle cell disease (SCD) has been recognized as a chronic inflammatory condition. Cytokines are released in response to stress or pathological situations and have influence on hematopoiesis. The aim of this study was to evaluate Interleukin-3 (IL-3), Interferon-? (IFN-?) and neopterin (NP) levels in steady state patients with sickle cell anemia (SS) (n= 38) and SC hemoglobinopathy (n= 17), in order to verify the possible action of those cytokines and NP on iron metabolism and hematopoiesis. Serum IL-3 concentration was higher in SS and SC groups than in controls, whereas IFN-? determinations were not different among groups. SS patients presenting HbF= 8.5% showed IL-3 levels significantly higher than those with HbF< 8.5% (p= 0.0167). No correlation was observed among inflammatory and iron metabolism parameters. It was observed a significant correlation between IL-3 and Hb levels (r= 0.4201, p= 0.0086) and a negative correlation between IL-3 and reticulocyte counting (r= - 0.4019, p= 0.0124) only in SS group. NP levels were significantly higher in SS group than in control (p< 0.0001), but not different between SSxSC and SCxControl. No correlation was observed between NP and iron metabolism parameters. In conclusion, it was confirmed that IL-3 stimulates hematopoiesis and that SS patients, even in steady-state, presenting macrophage/monocyte activation, represented by high levels of NP, that probably contributes to chronic inflammatory condition / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-03-23T19:39:33Z No. of bitstreams: 2 Tese - Eulange de Sousa - 2014.pdf: 1842524 bytes, checksum: a5108c2cc373e40dfb2dc3c72797efc9 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-03-24T11:23:13Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Eulange de Sousa - 2014.pdf: 1842524 bytes, checksum: a5108c2cc373e40dfb2dc3c72797efc9 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-24T11:23:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Eulange de Sousa - 2014.pdf: 1842524 bytes, checksum: a5108c2cc373e40dfb2dc3c72797efc9 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Sickle cell anemia is an inherited disease considered a public health problem in Brazil. In Brazil, it is estimated that there are more than 2 million people affected by some form of this anemia, with 3.500 new cases occurring every year. This dissertation aims to understand the meanings present in the relations established between children and adolescents with sickle cell anemia and professionals within the health services. The methodological choice of this study was the Social Strategic Qualitative Research and it took place at a Teaching Hospital. Data were collected through semi-structured interviews with 3 children, 5 adolescents and 9 health professionals. Data were analyzed through the content analysis technique. From the interviews with children and adolescents, the following categories emerged: the disease, the professionals, and the treatment in other services. From the interviews with health professionals, the following categories emerged: child, adolescent, mother-family, professionals from other services, the disease, and what to do. The research conducted indicated that it is necessary to engage children and adolescents in decisions related to their health-disease process. It also indicated that, in order to achieve it, the health professionals training have to include elements that enable professionals to consider children and adolescents as protagonists in their healthdisease process. In addition, it demonstrated the occurrence of institutional violence in the health treatment that patients with sickle cell anemia receive, as they have their autonomy, their subjectivity and their speech prevented and annulled. / A Anemia falciforme é uma doença hereditária considerada um problema de saúde pública no Brasil. Estima-se que existem, no Brasil, mais de 2 milhões de pessoas afetadas por alguma forma desta anemia, com uma ocorrência de 3.500 novos caso por ano. Este trabalho tem por objetivo compreender os significados presentes nas relações estabelecidas entre as crianças e adolescentes portadores de anemia falciforme e os profissionais no âmbito dos serviços de saúde. Esta pesquisa foi realizada tendo como opção metodológica a Pesquisa Social Estratégica de abordagem qualitativa, e como local de estudo optou-se por um hospital de ensino. Os dados foram obtidos por meio de entrevistas semiestruturadas com três crianças, cinco adolescentes e nove profissionais de saúde. Os dados foram analisados pela técnica de análise de conteúdo. A partir das entrevistas com as crianças e adolescentes, emergiram as seguintes categorias: doença, os profissionais e o atendimento em outros serviços. Das entrevistas com os profissionais, emergiram as categorias: criança, adolescente, mãe–família, profissionais de outros serviços, a doença e o que fazer. O estudo realizado indicou que é necessário envolver as crianças e adolescentes nas decisões relativas a seu processo saúde-doença e que a formação de profissionais de saúde deve incluir elementos que os instrumentalizem no sentido de considerar crianças e adolescentes como protagonistas em seu processo saúde-doença. Indicou também a ocorrência de violência institucional no atendimento que os portadores de anemia falciforme recebem, pois têm sua autonomia, sua subjetividade e sua fala impedidas e anuladas.

A anemia falciforme (AF) é uma doença monogênica de elevada mortalidade e morbidade, que afeta milhões de pessoas em todo o mundo. Não há tratamento definitivo que seja amplo, eficaz e seguro para a AF, de forma que os tratamentos paliativos são os mais utilizados. O tratamento definitivo disponível é transplante alogênico de células-tronco hematopoiéticas, porém com várias complicações envolvidas. O estabelecimento de um modelo in vitro permite uma melhor compreensão de como a doença ocorre, além de permitir o desenvolvimento de novos testes e tratamentos mais eficazes contra a doença. Neste contexto, a tecnologia das células-tronco pluripotentes induzidas (iPSC), que surgiu em 2006, é uma ferramenta poderosa na pesquisa básica, na pesquisa da diferenciação de tecidos e no modelamento de doenças, e uma promessa para futuras aplicações clínicas, na descoberta e triagem de novas drogas mais eficazes e seguras, além da possibilidade de utilização na medicina regenerativa, na produção de células paciente-específicas para terapia celular. Este trabalho teve como objetivo obter um modelo de estudo e tratamento da AF utilizando iPSC. Para isso, vetores epissomais foram utilizados para a reprogramação de células mononucleares de sangue periférico para obter iPSC livres de integração. Estas células foram coletadas de pacientes tratados com o medicamento hidroxiureia e sem tratamento, para avaliação do impacto da droga na reprogramação. As linhagens de iPSC PBscd geradas foram caracterizadas quanto ao potencial pluripotente e de diferenciação. Todas as linhagens geradas se mostraram pluripotentes com potencial de auto renovação e potencial de formar células e tecidos dos 3 folhetos germinativos. O rastreamento dos vetores utilizados na reprogramação mostrou que as células estão livres após cerca de 10 passagens em média, e que eles não se integram espontaneamente nas células. As linhagens de iPSC foram diferenciadas em progenitores hematopoiéticos através da agregação forçada associada à indução com citocinas específicas e um cultivo em suspensão. Dessa forma, nós obtivemos um protocolo dinâmico e eficiente de produção de células CD34+CD45+ com poucos dias de indução. Foram realizados experimentos iniciais de padronização da metodologia de CRISPR, para que essa metodologia possa ser utilizada no futuro para a correção da mutação da AF no gene da ?- globin. Além disso, a reação padronizada para o rastreamento da mutação no gene da ?-globin poderá ser usado em experimentos futuros de edição gênica para avaliar a correção da mutação. Em resumo, oferecemos uma ferramenta valiosa para uma melhor compreensão de como a AF ocorre, além de tornar possível o desenvolvimento de drogas e tratamentos mais eficazes e de fornecer um melhor entendimento dos tratamentos amplamente utilizados, como a hidroxiurea / Sickle cell anemia (SCA) is a monogenic disease of high mortality and morbidity, that affects millions of people worldwide. There is no definitive treatment that is broad, effective and safe for SCA, so the palliative treatments are the most used. The definitive treatment available is the allogeneic transplantation of hematopoietic stem cells, but with several complications involved. The establishment of an in vitro model allows better understanding of how the disease occurs, besides allowing the development of more effective new tests and treatments against the disease. In this context, the induced pluripotent stem cell (iPSC) technology, that emerged in 2006, is a powerful tool for basic research, tissue differentiation research and disease modeling, and a promise for future clinical applications, to find and screen new, more effective and safe drugs, besides the possibility of use in regenerative medicine, in the production of patient-specific cells for cell therapy. This work aimed to obtain a model for study and treatment of SCA using iPSC. For this, episomal vectors were used for reprogramming peripheral blood mononuclear cells to obtain integration-free iPSC. This cells were collected from patients treated with hydroxyurea and without treatment, for evaluation of the impact of the drug in reprogramming. The generated iPSC PBscd lines were characterized for pluripotent and differentiation potential. All the generated lines were shown to be pluripotent with potential for self-renewal and to form cells and tissues of the 3 germ layers. Screening of the vectors used for reprogramming showed that they are absent after about 10 passages, and that they do not integrate spontaneously into the cells. The iPSC lines were differentiated into hematopoietic progenitors through forced aggregation associated with induction with specific cytokines and culture in cell suspension. Thus, we obtained a dynamic and efficient protocol of CD34+CD45+ cells production with a few days of induction. Initial standardization experiments of CRISPR methodology was performed, so that this methodology can be used in the future to correct the ?-globin chain mutation of SCA. Also, the standardized reaction for the screening of ?-globin chain mutation can be used in future gene-editing experiments to evaluate the mutation correction. In summary, we offer a valuable tool for a better understanding of how SCA occurs, in addition to make possible the development of more effective drugs and treatments and providing better understanding of widely used treatments, such hydroxyrea

Orientador: Sonia Marta Moriguchi / Resumo: Introdução: A doença falciforme (DF) é a doença monogênica herdada mais comum no mundo. Acometimentos cardiopulmonares de caráter progressivo associados à vaso oclusão e fenômenos embólicos assim como, as exacerbações de sintomas respiratórios são causas recorrentes de internações nessa população. A cintilografia de perfusão é método de imagem sensível e consagrado para avaliação hipoperfusão pulmonar, notadamente em processos embólicos. A semi-quantiticação da porcentagem de obstrução vascular de perfusão (POVF) apresenta relação segura com a angiografia. Objetivo: 1) Verificar a correlação entre os sintomas clínicos (Classes funcionais) versus Porcentagem de defeitos perfusionais (POVF%) em portadores de DF e 2) Verificar a associação entre POVF% e espirometria, avaliada pela porcentagem da capacidade vital forçada do predito (CVF%). Casuística e Metodologia Trata-se de estudo transversal observacional descritivo de 22 portadores de Doença Falciforme (DF), com coleta retrospectiva de dados clínicos e de espirometria, no período de 2017-2019 e semi-quantificação da cintilografia de perfusão pulmonar (POVF%), CF de I a IV e CVF% Análise estatística descritiva e inferenciais (Coeficiente de correlação – CC), com nível de significância com p<0,05. Resultados: Foram observados cinco subtipos de DF: SS (n=13), BSB0 (n=04), SS+alfatalassemia (n=02), SS+ fetal elevada (n=02) e SC (n=1). A cintilografia de perfusão pulmonar foi sensível identificando defeitos perfusionais em 91% da ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: INTRODUCITON: Sickle cell disease (SCD) is the most common inherited monogenic disease in the world. Cardiopulmonary complications of a progressive character, associated with vessel occlusion and embolic phenomena, such as, exacerbations of respiratory symptoms are recurrent causes of hospitalization in this population. Perfusion scintigraphy is a sensitive and conspicuous imaging method for evaluating pulmonary hypoperfusion, especially in embolic processes. The semi-quantification of the percentage of vascular perfusion obstruction (POVF) presents a safe relationship with angiography. Objective: 1) To verify the correlation between clinical symptoms (functional classes- FC) versus percentage of perfusion defects (POVF%) in patients with CSD and 2) to verify the association between POVF% and spirometry, evaluated by the percentage of forced vital capacity predicted VCF%). MATERIALS AND METHODOLOGY This was a descriptive, observational cross-sectional study of 22 patients with SCD, with retrospective collection of clinical data and spirometry data for the period 2017-2019 and semi-quantification of pulmonary perfusion scintigraphy (POVF%) , FC from I to IV and VCF% Descriptive and inferential statistical analysis (Coefficient of correlation - CC), with level of significance with p <0.05. Results: Five subtypes of SCD: SS (n = 13), BSB0 (n = 04), SS + alphatassemia (n = 02), high fetal SS + (n = 02) and SC (n = 1) were observed. Pulmonary perfusion scintigraphy was sensitive b... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A imagem por ressonância magnética (IRM) tem se tornado uma poderosa ferramenta clínica na avaliação da anatomia cerebral. Recentemente, várias técnicas têm tornado possível a caracterização da função cerebral através da estimativa de alguns parâmetros metabólicos. Uma dessas técnicas é a perfusão cerebral, que descreve a passagem de sangue através da rede vascular cerebral, e permite estimar, não invasivamente, algumas características das funções hemodinâmicas tais como Volume de Sangue Cerebral (CBV), Fluxo de Sangue Cerebral (CBF) e Tempo de Trânsito Médio (MTT). Neste trabalho foi desenvolvido um programa computacional, baseado na plataforma Matlab, que analisa as imagens e cria mapas de perfusão. Primeiro foi comparado o desempenho do método de ajuste de curvas convencional Levenberg-Marquardt (LM) versus o Método que utiliza o Algoritmo Genético (AG). Os resultados mostraram que os AGS são muito mais estáveis, com relação aos seus parâmetros de controle, do que o método usual LM e, portanto, fornece evidencias da eficácia do AG em relação ao método convencional. Como um segundo e principal objetivo nós aplicamos o método para construir e examinar os mapas de perfusão em pacientes com anemia falciforme (sickle cell disease -SCD), particularmente em relação a complicações neurológicas e anormalidades vistas como uma técnica de imagem complementar. Além disso, os mapas de perfusão agregam informação a respeito de aspectos funcionais do sistema vascular, que é complementar a informação anatômica. Os nossos resultados com mostraram que esses mapas são uma ferramenta importante para auxiliar na avaliação clínica dos pacientes com anemia falciforme, como também podem ser aplicados para avaliar áreas em risco tão bem quanto ajudar no tratamento clínico de tais pacientes. / Magnetic Resonance Imaging (MRI) has become a powerful clinical tool for evaluation of brain anatomy. Several recently techniques have made possible the characterization of brain function via assessment of metabolic parameters. One of these techniques is the cerebral perfusion, which describes passage of blood through the brain\'s vascular network, and al- lows estimating, non-invasively, some characteristics of hemodynamic functions such as Cerebral Blood Volume (CBV), cerebral blood flow (CBF) and mean transit time (MTT). In this work a computational program was development, based on Matlab platform, which analyze perfusion images and create perfusion maps. First, the performance of conven- tional Levenberg-Marquardt Method (LM) versus a Genetic Algorithms (GAs) was com- pared. The results showed that the GAs are more stable than usual LM method with rela- tion to their control parameters and therefore provides evidence the effectiveness of the GAs with relation to a conventional method. As a second and principal objective we ap- plied the method to construct and examine perfusion maps of patients with sickle cell dis- ease (SCD), particularly in relation to the neurological complications and to abnormalities seen with complementary imaging techniques. Moreover, perfusion maps aggregate infor- mation about functional aspects of the vascular system, which is complementary to ana- tomical information. Our results show that these maps are an important tool to support clinical evaluation of sickle cell disease patients, as it may be applied to evaluate brain areas at risk as well as a help in the clinical treatment of such patients.

Segundo estimativas da Organização Mundial de Saúde (OMS) no Brasil nascem 3.500 crianças com anemia falciforme a cada ano e 20% delas não conseguem atingir os cinco anos de idade devido às complicações diretas causadas pela doença. A anemia falciforme é uma doença do grupo das hemoglobinopatias extremamente comum e é causada por uma alteração molecular no cromossoma 11, quando ocorre a substituição do ácido glutâmico pelo aminoácido valina, na posição 6 da cadeia da &beta;- globina. No Brasil acredita-se que a anemia falciforme seja a doença hereditária que mais prevalece, sendo assim, ela é considerada um problema de saúde pública. Alguns estudos apontaram a existência de uma prevalência de aproximadamente 4 a 5% em recém-nascidos portadores da doença e sua maior incidência ocorre no norte e nordeste, regiões brasileiras mais pobres e com maior miscigenação das populações. É urgente a necessidade do desenvolvimento de um diagnóstico viável e acessível a tais áreas, pois existe o reconhecimento pela própria OMS de tal prioridade e que levou o Brasil a criar uma Portaria em 2005 e um Decreto em 2008 que instituem atenção integral aos portadores da doença falciforme. Portanto, foi desenvolvido neste trabalho um método de triagem para a detecção de anemia falciforme, que usou uma tecnologia atual conhecida como point-of-care. Para isso foi utilizado uma gota de sangue em meio tamponado com detergente comercial Limpol® para lisar as hemácias e o hidrossulfito de sódio para reduzir a hemoglobina S e esta foi detectada em papel de cromatografia. O método foi desenvolvido com eficácia, pois foi proposta a substituição da saponina (reagente caro) por detergente comercial Limpol® e do hidrossulfito de sódio (reagente caro) por tiossulfato de sódio, tornando o custo do kit desenvolvido muito baixo. Portanto, sob quaisquer condições adversas e em qualquer região que necessite da triagem diagnóstica populacional, principalmente nas comunidades carentes e de difícil acesso, será possível levar uma solução simples a campo para a execução de um diagnóstico rápido e sem aumento do ônus para o sistema de saúde público brasileiro, consolidando os direitos adquiridos dos indivíduos, mas que não abrangem àqueles que mais necessitam. / According to estimates from the World Health Organization (WHO), every year are born around 3.500 children with sickle cell anemia (SCA) in Brazil and 20% of them wont reach five years old because of complications directly related to the disease. The SCA is a disease of the hemoglobinopathies group extremely common and is caused by a molecular alteration in the chromosome 11, when occurs the replacement from the acid glutamic acid by amino acid valine in the chain of position 6 of the &beta;- globin. In Brazil is believed that the SCA is the hereditary disease that prevails more being considered as a public health problem. Some studies have indicated that exist prevalence in approximately 4-5% of this disease in newborns and the greatest incidence there is mainly in north and northeast, regions with bigger miscegenation from population. Is urgent the necessity in to develop viable accessible diagnostic for those areas whereas it was recognized as a priority by the WHO leading Brazil to create an Ordinance in 2005 and a Decree in 2008 establishing total care to the people with sickle cell disease. Therefore, was developed in this work a screening method to detect the sickle cell anemia, which used a technology known as point-of-care. Was created an alternative method to substitute one international kit which has high cost for the adequation according with of economic Public Health conditions from Brazil. For this a drop of blood in buffered medium with liquid detergent Limpol®, to lyse RBC and the (tiossulfato de sódio) to reduce the RBC S which was detected in simple celulose paper. The method was developed with efficiency, on this account the substitution of saponina (expensive reagent) by liquid detergent Limpol® and (hidrossulfitob de sodio) (expensive reagent) by (tiossulfato de sódio) was successful making the cost of developed kit cheaper. Therefore in any population with adverse conditions or region where there are needs, mainly in poor communities with difficult acces, will be possible to lead a simple solution at field to execution by a quickly diagnostic without increasing of charges to health public brazilian system, consolidating acquired rights to individuals that not are reached by those needs yet.

Nos últimos anos, o desenvolvimento de novas plataformas biossensoras trouxe importantes avanços à área médica, incluindo maior rapidez na detecção de biomarcadores, menor custo de análise e portabilidade. Essa tese traz a descrição do desenvolvimento de três tipos de biossensores que visam à auxiliar o diagnóstico de diferentes doenças. No primeiro capítulo, detalha-se a construção de um dispositivo microfluídico baseado em papel para a quantificação simultânea de dois biomarcadores da doença de Alzheimer: Fetuína B e Clusterina. O dispositivo foi capaz de quantificar as proteínas estudadas de maneira precisa e de baixo custo através do uso de técnicas eletroquímicas e colorimétricas, apresentando limites de detecção na ordem de p-nmol/L. O segundo capítulo trata do desenvolvimento de um imunossensor eletroquímico para a quantificação de melatonina. O dispositivo foi capaz de detectar a biomolécula em amostras biológicas rapidamente e com boa especificidade, diferenciando a melatonina de componentes com alta semelhança estrutural. Por fim, o terceiro capítulo descreve um genossensor eletroquímico para diagnóstico e determinação do traço da doença genética mais comum no Brasil, a anemia falciforme. O sensor foi capaz de diferenciar sequências normais de mutadas de maneira simples e rápida, sendo adequado para o diagnóstico e a determinação de seu traço. Esperamos que os dispositivos aqui apresentados levem à diagnósticos mais acessíveis fornecendo assim melhores condições de saúde à população. / The development of new biosensor platforms has brought important advances to the medical field, including faster detection of biomarkers, lower cost of analysis and portability. This thesis provides a description of the development of three biosensors that aim to assist the diagnosis of three different diseases. The first chapter describes the construction of a paper-based microfluidic device for the simultaneous quantification of two Alzheimer\'s disease biomarkers: Fetuin B and Clusterin. The device was able to quantify the studied proteins in a precise and low cost manner through the use of electrochemical and colorimetric techniques, presenting limits of detection in the order of p-nmol/L. The second chapter details the the development of an electrochemical immunosensor for the quantification of melatonin. The device was able to detect the biomolecule in biological samples quickly and with good specificity, differentiating melatonin from components with high structural similarity. Finally, the third chapter describes an electrochemical genosensor for diagnosis and determination of the trait of the most common genetic disease in Brazil, sickle cell anemia. The sensor was able to differentiate normal and mutated sequences in a simple and fast manner, being suitable for the diseases diagnosis and the determination of its trait. Therefore, we expect the devices presented here to lead to more accessible diagnoses, providing better health conditions for the population.

Os sistemas de informação em saúde permitem melhorias no processo de gestão e assistência ao paciente. A fundação HEMOBA é responsável pela assistência médica e transfusional de grande parcela da população baiana, pelo SUS, em seu ambulatório transfusional e de atendimento à pacientes com doenças hematológicas benignas. A doença falciforme (DF) é uma das doenças hereditárias mais prevalentes no mundo, sendo a Bahia o estado brasileiro onde é encontrada sua maior prevalência. A transfusão sanguínea é uma das bases para o seu tratamento. Não existe sistema informatizado no atendimento desses pacientes nem banco de dados sobre essa população na instituição. OBJETIVO: Desenvolver um Software para seguimento transfusional em hemoterapia, com ênfase no acompanhamento de pacientes falciformes, possibilitando descrever e analisar aspectos transfusionais dessa população e dos doadores. MATERIAIS E MÉTODOS: Foi desenvolvido um Software, denominado BDTrans, utilizando a metodologia de Ciclo de Vida de Desenvolvimento de Sistemas, que possibilitou um estudo analítico, transversal, com abordagem qualitativa e quantitativa, dos dados extraídos do sistema. Foram acompanhadas crianças falciformes, de 0 a 18 anos, em regime transfusional, atendidas no ambulatório da Fundação HEMOBA. RESULTADOS: Foram incluídos 108 pacientes, destes 58% apresentavam DTC alterado e 38% apresentavam passado de AVC. As crianças residentes em Salvador correspondiam a 34%. A maioria das transfusões foi iniciada na faixa etária entre 2-8 anos (61%) e 9-12 anos (24,7%). 28% dos pacientes iniciou o regime transfusional em 2011, seguido dos anos de 2012 com 16%. A prevalência de aloimunização eritrocitária foi de 26%, sendo os principais aloanticorpos contra antígenos do sistema Rh e Kell. CONCLUSÃO: A utilização do Software possibilitou tornar os dados mais acessíveis para análise clínica e epidemiológica, auxiliando na gestão e assistência à saúde. O sistema poderá ser utilizado como base para o desenvolvimento de um programa de fidelização de doadores fenotipados em um futuro próximo. / Softwares built for data collection from Health Centers are important tools for patient care and for public health decisions. The HEMOBA foundation is responsible for health assistance of a great proportion of the population from the State of Bahia, including medical care and transfusional assistance to patients with benign hematological disorders. Sickle cell disease is one of the most prevalent hereditary disorders in the world, and the State of Bahia has the highest prevalence of the S mutation in Brazil. Blood transfusion is one of the treatment modalities for sickle cell patients, and there is no software for data collection of the clinical and transfusional program. OBJECTIVE: to develop a software to help follow up the transfusional program of the HEMOBA foundation, including the sickle cell patients, collecting transfusional data and blood donor information. MATERIALS AND METHODS: we developed a software called \"BDTrans\", using the methodology of the \"Cicle of Life System Development\", that allowed an analytical, transversal study with both qualitative and quantitative approach of the data extracted from the program. Sickle cell children from 0 to 18 years who were on transfusion at The HEMOBA foundation were the subject of our study. RESULTS: 108 sickle cell patients were included, 58% had brain vasculopathy and 38% had a history of stroke. 34% of the children lived in Salvador. The age range of the children when the transfusion program started was between 2-8 years (61%) and 9-12 years (24.7%). 28% of the patients started the transfusional program in 2011, and 16% started in 2012. The prevalence of red cell alloimmunization was 26%, most of the antibodies were against Rh and Kell blood groups. CONCLUSION: The utilization of the BDTrans Software promoted the collection of clinical and transfusional data from sickle cell patients, possibilitating the evaluation of their transfusional program, and providing important information to the public health system. The software can also be used to develop a fidelization program of phenotyped blood donors in the near future.

A imagem por ressonância magnética (IRM) tem se tornado uma poderosa ferramenta clínica na avaliação da anatomia cerebral. Recentemente, várias técnicas têm tornado possível a caracterização da função cerebral através da estimativa de alguns parâmetros metabólicos. Uma dessas técnicas é a perfusão cerebral, que descreve a passagem de sangue através da rede vascular cerebral, e permite estimar, não invasivamente, algumas características das funções hemodinâmicas tais como Volume de Sangue Cerebral (CBV), Fluxo de Sangue Cerebral (CBF) e Tempo de Trânsito Médio (MTT). Neste trabalho foi desenvolvido um programa computacional, baseado na plataforma Matlab, que analisa as imagens e cria mapas de perfusão. Primeiro foi comparado o desempenho do método de ajuste de curvas convencional Levenberg-Marquardt (LM) versus o Método que utiliza o Algoritmo Genético (AG). Os resultados mostraram que os AGS são muito mais estáveis, com relação aos seus parâmetros de controle, do que o método usual LM e, portanto, fornece evidencias da eficácia do AG em relação ao método convencional. Como um segundo e principal objetivo nós aplicamos o método para construir e examinar os mapas de perfusão em pacientes com anemia falciforme (sickle cell disease -SCD), particularmente em relação a complicações neurológicas e anormalidades vistas como uma técnica de imagem complementar. Além disso, os mapas de perfusão agregam informação a respeito de aspectos funcionais do sistema vascular, que é complementar a informação anatômica. Os nossos resultados com mostraram que esses mapas são uma ferramenta importante para auxiliar na avaliação clínica dos pacientes com anemia falciforme, como também podem ser aplicados para avaliar áreas em risco tão bem quanto ajudar no tratamento clínico de tais pacientes. / Magnetic Resonance Imaging (MRI) has become a powerful clinical tool for evaluation of brain anatomy. Several recently techniques have made possible the characterization of brain function via assessment of metabolic parameters. One of these techniques is the cerebral perfusion, which describes passage of blood through the brain\'s vascular network, and al- lows estimating, non-invasively, some characteristics of hemodynamic functions such as Cerebral Blood Volume (CBV), cerebral blood flow (CBF) and mean transit time (MTT). In this work a computational program was development, based on Matlab platform, which analyze perfusion images and create perfusion maps. First, the performance of conven- tional Levenberg-Marquardt Method (LM) versus a Genetic Algorithms (GAs) was com- pared. The results showed that the GAs are more stable than usual LM method with rela- tion to their control parameters and therefore provides evidence the effectiveness of the GAs with relation to a conventional method. As a second and principal objective we ap- plied the method to construct and examine perfusion maps of patients with sickle cell dis- ease (SCD), particularly in relation to the neurological complications and to abnormalities seen with complementary imaging techniques. Moreover, perfusion maps aggregate infor- mation about functional aspects of the vascular system, which is complementary to ana- tomical information. Our results show that these maps are an important tool to support clinical evaluation of sickle cell disease patients, as it may be applied to evaluate brain areas at risk as well as a help in the clinical treatment of such patients.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:54:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KAMILA TUANY LACERDA LEAO LIMA.pdf: 1396347 bytes, checksum: 0bf91e315a669ce216d535a33a1e06e9 (MD5) Previous issue date: 2015-11-27 / Sickle cell disease (SCD) is a suite of different genotypes characterized by the presence of hemoglobin S, recognized as a chronic disease. Complications of SCD entail major negative impact on the quality of life of its carriers. Objective: This study had as main objective evaluate the quality of life of sickle cell disease carriers of the micro-region of Guanambi Bahia, attended by the Sickle Cell Program. Methods: A quantitative, descriptive, spatial and analytical study was carried out in the microregion of Guanambi, Bahia, in the period between February to May 2015. The survey included 20 patients with SCD and 40 individuals without SCD. The data were collected by a structured interview with information to assess the socio-demographic and economic characteristics. The quality of life related to health was assessed by the SF- 36 and WHOQOL-BREF instruments. The statistical analysis of data were performed by the Program Bioestat 5.0. The significance level was 0.05. Results: The average age of patients with SCD was 32.7 (± 18.8) years old and those without SCD 29.3 (± 15.7) years old. The two groups had a median income of 788 reals. The results revealed that SCD patients are in dark and brown skin majority and that the level of education is lower when compared with participants without SCD. According to the SF- 36 questionnaire, the evaluation has shown that the limitation of functional capacity in patients with SCD is larger, with higher physical limitations. The emotional aspect and mental health suffer major negative impact on quality of life of patients with SCD. The physical aspects become more committed when correlated with older age. The evaluation of the domains of WHOQOL-BREF questionnaire among participants with SCD and without SCD, showed differences only in the physical domains and overall quality of life. When correlated the domains of SF-36 questionnaire with the domains of WHOQOL-BREF questionnaire, did not show significant associations between the domains of the two instruments. Conclusion: Participants with SCD suffer large negative impact on quality of life, pointing out the importance of analyzing the quality of life by showing that it interferes and is also influenced by the patient s health. / Introdução: Doença Falciforme (DF) é um conjunto de genótipos diferentes caracterizado pela presença de hemoglobina S, reconhecida como doença crônica. As complicações da DF acarretam grande impacto negativo na qualidade de vida dos seus portadores. Objetivo: Esse estudo teve como principal objetivo avaliar a qualidade de vida de portadores de doença falciforme da microrregião de Guanambi Bahia, atendidos pelo Programa de Anemia Falciforme. Métodos: Estudo quantitativo, descritivo, espacial e analítico, realizado na microrregião de Guanambi, Bahia, no período de fevereiro a maio de 2015. Participaram da pesquisa 20 portadores de DF e 40 indivíduos sem DF. Os dados foram coletados por meio de uma entrevista estruturada com informações para avaliação das características sociodemográficas e econômicas. A qualidade de vida relacionada à saúde foi avaliada pelos instrumentos SF-36 e WHOQOL-BREF. A análise estatística dos dados foram realizadas pelo programa Bioestat 5.0. O nível de significância foi 0,05. Resultados: A média de idade dos portadores de DF foi de 32,7 (±18,8) anos e aquelas sem DF 29,3 (±15,7) anos. Os dois grupos estudados apresentaram a renda mediana de 788 reais. Os resultados revelaram que o portadores de DF são em maioria negros e pardos e que o nível de escolaridade é menor ao se comparar com os participantes sem DF. Segundo o questionário SF-36, a avaliação mostrou que, a limitação por capacidade funcional nos portadores de DF é maior, com maiores limitações físicas. O aspecto emocional e a saúde mental sofrem grande impacto negativo na qualidade de vida dos portadores de DF. Os aspectos físicos ficam mais comprometidos quando correlacionado com a idade mais avançada. A avaliação dos domínios do questionário WHOQOL-BREF, entre os participantes com DF e sem DF, foram diferentes apenas nos domínios físico e qualidade de vida total. Quando correlacionado os domínios do questionário SF-36 com os domínios do questionário WHOQOL-BREF, não evidenciou associações significativas entre os dominios dos dois instrumentos. Conclusão: Os participantes com DF sofrem grande impacto negativo na qualidade de vida, apontando a importância da análise da qualidade de vida, ao mostrar que ela interfere e também é influenciada pela saúde do paciente.