Submitted by Lara Oliveira (lara@ufersa.edu.br) on 2017-09-05T20:46:32Z No. of bitstreams: 1 JoséAGG_DISSERT.pdf: 4865012 bytes, checksum: 25c1fa8e7f411a71d0cb3693541464f6 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-09-06T15:20:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JoséAGG_DISSERT.pdf: 4865012 bytes, checksum: 25c1fa8e7f411a71d0cb3693541464f6 (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-09-06T15:21:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 JoséAGG_DISSERT.pdf: 4865012 bytes, checksum: 25c1fa8e7f411a71d0cb3693541464f6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-06T15:21:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoséAGG_DISSERT.pdf: 4865012 bytes, checksum: 25c1fa8e7f411a71d0cb3693541464f6 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / he exploitaition of Caatinga by extractive practices, as well as the formation of production systems based on monoculture, hurt the principles of sustainability and endangers the available resources, whether characterized by plants with wood or forage potential. Seed storage is a practice that contributes to the preservation of the genetic material in the fields and assists producers in the formation of pastures for animal feed. Species like Libidibia ferrea (Mart. Ex Tul.) L. P. Queiroz, the Merremia aegyptia (L.) Urban and Bauhinia cheilantha (Bong.) Steud., are examples of native plants from Caatinga, which have forage potential, are widely consumed by animals and, therefore, deserve attention with respect to the proper storage conditions of their seeds, aiming the use in the composition of pastures. The morphological and anatomical study of seeds also demonstrates considerable importance, so that, from this knowledge you can get information on germination, storage, viability and sowing methods, and enables practical applications in ecological studies in the management and conservation of flora and terrestrial fauna. Thus, this study aimed to evaluate the germination behavior, for nine months, of the three aforementioned species, packed in waterproof container (PET bottle), and stored in a cold chamber and laboratory environment, also to describe the seed morphological and anatomical reporting possible differences in the development of these with regard to storage environments. The seeds coats of L. ferrea and M. aegyptia presented pattern of similar structures, with exotesta consists of a rigid palisade layer, lucid line and mucilaginous layer, mesotesta formed by single layer of osteoesclereídes and endotesta formed by layers of parenchyma and sclerenchyma cells. In L. ferrea were observed glandular trichomes from the epidermal cells of the embryo toward the eophyll leaf primordia. B. cheilantha seed is albuminous, with foliaceous cotyledons, the coat is formed by two cells stratum and presents V-shaped hilo in the apical region. The different storage environments not provided morphoanatomical differences for L. ferrea and B. cheilantha seeds, but in M. aegyptia seeds, the cold chamber storage stimulated greater vascularization in the cotyledon. The seeds of L. ferrea showed better germination percentage when stored in a cold chamber (64, 64 and 48% at three, six and nine months, respectively). The seeds of M. aegyptia, stored in a cold chamber, showed fluctuation in germination (97, 86 and 99% at three, six and nine months, respectively). The germination of B. cheilantha decreased during the experimental period (93, 77 and 22% at 3, 6 and 9 months, respectively). In all species the germination speed index (GSI), showed better results at three months of storage / A exploração do bioma Caatinga por meio de práticas extrativistas, bem como a formação de sistemas de produção baseados no monocultivo, ferem os princípios de sustentabilidade e coloca em risco os recursos disponíveis, caracterizados, sobretudo, por plantas com potencial madeireiro ou forrageiro. O armazenamento de sementes é uma prática que contribui para a preservação do material genético existente nos campos e auxilia os produtores na formação das pastagens destinadas à alimentação animal. Espécies como a Libidibia ferrea (Mart. ex Tul.) L.P. Queiroz, a Merremia aegyptia (L.) Urban e a Bauhinia cheilantha (Bong.) Steud., são exemplos de plantas nativas da Caatinga que apresentam potencial forrageiro, sendo amplamente consumidas pelos animais e, portanto, merecem atenção quanto às condições adequadas de armazenamento de suas sementes para uso na composição de pastagens. O estudo morfo-anatômico de sementes também demonstra considerável importância, de modo que, a partir deste conhecimento é possível obter informações sobre germinação, armazenamento, viabilidade e métodos de semeadura, além de permitir aplicações práticas em estudos ecológicos, no manejo e conservação da flora e fauna terrestre. Diante disso, este trabalho teve como objetivo, avaliar o comportamento germinativo das três espécies supracitadas, por nove meses, acondicionadas em recipiente impermeável (garrafa PET), e armazenadas em câmara fria e ambiente de laboratório, bem como descrever as sementes morfoanatomicamente relatando possíveis diferenças no desenvolvimento destas com relação aos ambientes de armazenamento. Os tegumentos das sementes de L. ferrea e M. aegyptia apresentaram padrão de estruturas similares, com exotesta constituída por uma camada paliçádica rígida, linha lúcida e camada mucilaginosa, mesotesta formada por camada única de osteoesclereídes e endotesta formada por camadas de células parenquimáticas e esclerenquimáticas. Em L. ferrea foram observados tricomas glandulares a partir das células epidérmicas do embrião até aos primórdios foliares do eófilo. A semente de B. cheilantha é albuminosa, com cotilédones foliáceos, o tegumento é formado por dois estratos celulares e o hilo apresenta forma de “V” na região apical. Os diferentes ambientes de armazenamento não proporcionaram diferenças morfoanatômicas para as sementes de L. ferrea e B. cheilantha, mas para as sementes de M. aegyptia, o armazenamento em câmara-fria estimulou uma maior vascularização no cotilédone. As sementes de L. ferrea apresentaram melhor percentual de germinação quando armazenadas em câmara fria (64, 64 e 48% aos três, seis e nove meses, respectivamente). As sementes de M. aegyptia, armazenadas em câmara fria, apresentaram oscilação na germinabilidade (97, 86 e 99% aos três, seis e nove meses, respectivamente). Já para B. cheilantha, a germinação decresceu ao longo do período experimental (93, 77 e 22% aos três, seis e nove meses, respectivamente). Nas três espécies, o índice de velocidade de germinação (IVG), apresentou melhores resultados aos três meses de armazenamento / 2017-09-05

SILVA, Helton Colares da. Purificação e caracterização parcial de uma lectina pró-inflamatória de sementes de Bauhinia bauhinioides MART. 76 f. : Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências, Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica. Fortaleza-CE, 2010. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-05-23T12:09:43Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_hcsilva.pdf: 28291568 bytes, checksum: fac7f934eb20708cddd436062f250c54 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-05T18:38:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_hcsilva.pdf: 28291568 bytes, checksum: fac7f934eb20708cddd436062f250c54 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-05T18:38:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_hcsilva.pdf: 28291568 bytes, checksum: fac7f934eb20708cddd436062f250c54 (MD5) Previous issue date: 2010 / A new galactose-specific lectin, named BBL, was purified from seeds of the Caesalpinoideae plant, Bauhinia bauhinioides, by precipitation with solid ammonium sulfate followed by two steps of ion exchange chromatography, and its pro-inflammatory activity was evaluated. The lectin haemagglutinated rabbit and humans erythrocytes (native and treated with proteolytic enzymes), which occurred independent on presence of divalent cations, was stable at 60 °C for 60 min, had an optimum pH between pH 8.0 and 9.0 and was inhibited after incubation with D-galactose and its derivatives, especially α-methyl-D-galactopyranoside. The pure protein was found to have a molecular mass of 31 kDa by SDS–PAGE and 28,305 Da by electrospray ionization mass spectrometry. The s.c. injection of BBL induced dose-dependent paw edema at all doses tested, an effect that occurred via carbohydrate site interaction and that was significantly reduced by L-NAME, indicating the important participation of nitric oxide in the late phase of the edema induced by BBL. These findings indicate that this lectin can be used as a tool to better understand the mechanisms involved in inflammatory responses. / As sementes de Bauhinia bauhinioides Mart, uma espécie pertencente à Família Leguminosae, Subfamília Caesalpinoideae, Tribo Cercideae, possuem uma lectina Galactose/Lactose específica, que aglutina eritrócitos de coelho e humanos nativos ou tratados com enzimas proteolíticas. A lectina de sementes de B. bauhinioides foi purificada por precipitação com sulfato de amônio seguida por cromatografias de trocas iônica em DEAE-Sephacel e em HiTrap SP, essa última acoplada a HPLC. Esse procedimento resultou na lectina purificada, nomeada BBL. O processo de purificação da BBL foi monitorado por SDS-PAGE e observou-se que a lectina purificada é caracterizada por um perfil eletroforético composto por uma banda única, com massa molecular aparente de aproximadamente 31 kDa, tanto na presença quanto na ausência de um agente redutor. A análise por espectrometria de massas indicou que BBL possui massa molecular de 28310 Da e, por cromatografia de exclusão molecular, observou-se que a lectina, na sua forma nativa, parece assumir uma estrutura tetramérica. A lectina de sementes de B. bauhinioides não é uma glicoproteína e demonstra elevada estabilidade, sendo capaz de manter sua atividade hemaglutinante em uma ampla faixa de pH, após exposição a temperaturas de até 60º C por 1 hora e após diálise contra EDTA. BBL foi testada quanto a atividade pró-inflamatória utilizando o modelo de edema de pata em ratos, tendo sido observada uma indução significativa de edema nos animais tratados com BBL na dose de 1,0 mg/kg sendo esta atividade pró-inflamatória inibida pela incubação prévia da lectina com 0,1 M de D-galactose. Foi avaliado também o efeito pró-inflamatório da BBL em presença de bloqueadores farmacológicos de dois importantes mediadores inflamatórios e observou-se que o L-NAME, um inibidor não-seletivo da enzima Óxido Nítrico Sintase, inibiu significativamente o edema causado pela lectina, sugerindo que a atividade pró-inflamatória causada por BBL envolve a participação do oxido nítrico. Esses resultados reforçam a idéia da utilização de lectinas vegetais como ferramentas biotecnológicas em estudos sobre os mecanismos implicados na resposta inflamatória.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The fruit fly, Drosophila melanogaster, has been considered a suitable model organism for investigation of developmental/metabolic dysfunctions and therapeutic strategies. In this work Drosophila melanogaster larvae were used to evaluate the role of the plants Syzygium cumini and Bauhinia forficata on the effects triggered by consumption of high-sucrose diets (HSD) as oxidative stress markers and phenotypic responses associated to insulin signaling. The experiments were performed with first instar larvae (L1), collected 24 hr after egg deposition. The larvae were fed on high-sucrose diets (15 and 30%) supplied or not with 5mg/mL of S. cumini and B. forficata aqueous extracts. Newly-eclosed flies from larvae (1-3 day-old) were used to assess biochemical parameters. During the larval stage, 15% HSD and 30% HSD intake delayed the time to pupation and reduced the number of white pupa. The flies hatched from larvae treated with 30% sucrose also had a significant decrease in body weight compared with the flies from control group. The consumption of both diets increased the hemolymph glucose+treahalose levels and hemolymph/whole body homogenate triglycerides in adult flies. H202 levels were also increased in the homogenate of flies hatched from larvae grown on both diets when compared to control; however only 30% sucrose diet induced loss of mitochondrial viability. The intake of this diet also caused a decrease in the activity of superoxide dismutase, glutathione S-transferase, acetylcholinesterase and δ-D-aminolevulinate dehydratase enzymes as well as an increase in catalase activity in adult flies. Supplementation with S. cumini and B. forficata extracts reversed most of metabolic and developmental disorders caused by high sucrose diets. However, S. cumini extract was more efficient than B forficata in reducing hyperglycemia promoted by ingestion of both high sucrose diets and antioxidant status changes caused by 30% HSD. Overall, the obtained results highlight D. melanogaster as an effective model organism to investigate conditions that alter metabolic homeostasis and mainly point out the plant S. cumini as promising agent for studies related with metabolic disorders linked to excessive sugar. / A mosca da fruta, Drosophila melanogaster, tem sido considerada um organismo modelo adequado para a investigação de disfunções metabólicas/desenvolvimentais e estratégias terapêuticas. Neste trabalho foram utilizadas larvas de Drosophila melanogaster para avaliar o papel das plantas Syzygium cumini e Bauhinia forficata sobre os efeitos provocados pelo consumo de dietas ricas em sacarose como marcadores de estresse oxidativo e respostas fenotípicas associadas à sinalização da insulina. Os experimentos foram realizados com larvas do primeiro estágio (L1), coletadas 24 horas após a deposição dos ovos. As larvas foram tratadas com dietas ricas em sacarose (15 e 30%) suplementadas ou não com 5mg/mL dos extratos aquosos de S. cumini e B. forficata. As moscas recém-eclodidas das larvas (1-3 dias de idade) foram utilizadas para avaliar os parâmetros bioquímicos. Durante o estágio larval, o consumo das dietas ricas em sacarose 15 e 30% atrasou o tempo para pupação e reduziu o número de pupas brancas. As moscas nascidas de larvas tratadas com sacarose 30% também tiveram uma diminuição significativa do peso corporal quando comparado com as moscas do grupo controle. O consumo de ambas as dietas elevou os níveis de glicose+trealose na hemolinfa e de triglicerídeos na hemolinfa e em homogenato do corpo total nas moscas adultas. Os níveis de H202 foram aumentados no homogenato das moscas nascidas de larvas que cresceram em ambas as dietas quando comparados ao controle; no entanto somente a dieta com sacarose 30% induziu perda da viabilidade mitocondrial. A ingestão desta dieta também causou uma diminuição na atividade das enzimas superóxido dismutase, glutationa S-transferase, acetilcolinesterase e δ-aminolevulinato desidratase, bem como um aumento na atividade da catalase em moscas adultas. A suplementação com os extratos de S. cumini e B. forficata reverteu a maioria das disfunções metabólicas e desenvolvimentais provocadas pelas dietas ricas em sacarose. No entanto, o extrato de S. cumini foi mais eficiente que a B forficata em reduzir a hiperglicemia promovida pela ingestão de ambas as dietas e as alterações no status antioxidante causadas pela dieta rica em sacarose 30%. No geral, os resultados obtidos destacam a D. melanogaster como um organismo modelo efetivo para investigar condições que alteram a homeostase metabólica e apontam principalmente a planta S. cumini como agente promissor para estudos relacionados com desordens metabólicas ligadas ao excesso de açúcar.

Depression is a psychiatric disorder that affects 2-15% of the world population. It is a heterogeneous neuropathology, it includes psychological, behavioral and physiological symptoms. Despite having several treatments for depression, they are not as effective and have many undesirable side effects. Therefore, it is necessary the development of new therapeutic strategies to improve current treatments. Therefore, open up doors to the use of plant medicines, which has already been used for thousands of years by various populations for different diseases. The Bauhinia variegata, popularly known as "pata-de-vaca", has beneficial health effects, such as anti-inflammatory activity, antidiabetic, antidiarrheal. In the present study, we investigated the antidepressant-like effect of the crude hydroethanolic extract of leaves of Bauhinia variegata in two predictive tests of antidepressant property, the tail suspension test (TST) and the forced swimming test (FST) in mice. Furthermore, the involvement of monoaminergic system in its antidepressant-like effect was investigated and the effect of extract on monoamine oxidase A (MAO-A) activity was also evaluated. The acute treatment with the extract of Bauhinia variegate (300 mg/kg, p.o.) significantly reduced the immobility time in the TST. Moreover, the repeated administration (once a day for 7 days) of the extract by p.o. route also produced an antidepressant-like effect in the TST (100 and 300 mg/kg) and FST (300 mg/kg).The pretreatment of mice with ketanserin (5 mg/kg, i.p. a preferential 5-HT2A receptor antagonist), prazosin (1 mg/kg, i.p. an α1-adrenoceptor antagonist), yohimbine (1 mg/kg, i.p. an α2-adrenoceptor antagonist), propranolol (2 mg/kg, i.p. a β-adrenoceptor antagonist), SCH23390 (0.05 mg/kg, i.p. a dopamine D1 receptor antagonist) or sulpiride (50 mg/kg, i.p. a dopamine D2 receptor antagonist) was able to reverse the anti-immobility effect of the extract (300 mg/kg, p.o) in TST. The combination of subeffective dose of fluoxetine (5 mg/kg, p.o.), imipramine (5 mg/kg, v.o.) or bupropion (5 mg/kg, v.o.) with a subffective dose of the extract (100 mg/kg) produced a synergistic antidepressant-like effect in the TST. The extract did not cause motor alteration in the open-field test at effective doses in both TST and FST. We also showed that the extract inhibited the MAO-A activity of mice brain in vitro. These results suggest that the extract from Bauhinia variegata present an antidepressanloke potential, which may be dependent on the monoaminergic system and its MAO-A inhibitory properties. / A depressão é um transtorno psiquiátrico que atinge 2-15% da população mundial. É uma neuropatologia heterogênea, pois inclui sintomas psicológicos, comportamentais e fisiológicos. Apesar de possuir diversos tratamentos para depressão, eles ainda não são tão efetivos e possuem muitos efeitos colaterais indesejáveis. Por isso, faz-se necessário o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas a fim de aperfeiçoar os tratamentos atuais. Diante disso, abrem-se possibilidades para o uso de plantas medicinas, uma vez que estas vem sendo utilizadas há milhares de anos por muitas populações para tratar diversas enfermidades. A Bauhinia variegata, conhecida popularmente como pata-de-vaca , possui efeitos benéficos à saúde, como: atividade anti-inflamatória, antidiabética, antidiarréica, entre outras. No presente estudo, foi investigado o efeito tipo-antidepressivo do extrato hidroetanólico bruto de folhas de Bauhinia variegata em dois testes preditivos de propriedade antidepressiva, o teste de suspensão pela cauda (TSC) e do teste do nado forçado (TNF) em camundongos machos adultos. Além disso, foi investigado o envolvimento do sistema monoaminérgico no efeito do extrato e sua atividade sobre a monoamina-oxidase A (MAO-A). O extrato bruto hidroetanólico foi administrado por via oral (vo) por gavagem. O tratamento agudo com o extrato de Bauhinia variegata (300 mg/kg) reduziu o tempo de imobilidade no TST. Além disso, a administração repetida (uma vez por dia durante 7 dias) do extrato também produziu um efeito tipo-antidepressivo no TSC (100 e 300 mg/kg) e TNF (300 mg/kg). O pré-tratamento de camundongos com cetanserina (5 mg/kg, ip, antagonista do receptor serotoninérgico 5-HT2A), prazosina (1 mg/kg, ip, antagonista α1-adrenérgico), ioimbina (1 mg/kg, ip, antagonista α2-adrenérgico), propranolol (2 mg/kg, ip, antagonista β-adrenérgico), SCH23390 (0,05 mg/kg, ip, antagonista do receptor dopaminérgico D1) ou sulpirida (50 mg/kg, ip, antagonista do receptor dopaminérgico D2) reverteu o efeito anti-imobilidade do extrato (300 mg/kg) no TSC. A combinação de doses sub-efetivas dos antidepressivos clássicos, fluoxetina (5 mg/kg, vo), imipramina (5 mg/kg vo) ou bupropiona (5 mg/kg, vo) com uma dose sub-efetiva do extrato (100 mg/kg) produziu um efeito antidepressivo sinérgico no TSC. O extrato não causou alteração locomotora no teste de campo aberto em doses eficazes, tanto no TSC como no TNF. Além disso, o extrato inibiu a atividade da MAO-A em preparações de mitocôndria encefálicas in vitro. Estes resultados sugerem que o extrato hidroetanólico bruto de folhas de Bauhinia variegata apresenta um potencial efeito tipo-antidepressivo, que pode ser dependente do sistema monoaminérgico.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-06-15T13:50:16Z No. of bitstreams: 1 Clebio Pereira Ferreira.pdf: 1931767 bytes, checksum: eae3e83101335bad220e13fbbb39e105 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-15T13:50:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Clebio Pereira Ferreira.pdf: 1931767 bytes, checksum: eae3e83101335bad220e13fbbb39e105 (MD5) Previous issue date: 2008-06-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Diabetes melittus is a endocrinous syndrome that reaches more than 6 % of the world-wide population and around 800 plants are used in the treatment of diabetes. In general, the medicinal plants are commerce without proceedings that guarantee the conservation. This study characterizes the anatomy and phytochemistry of the vegetative organs of three medicinal species used in the treatment of diabetes. Identifies and evaluate the quality of samples used in the treatment of diabetes commerced in the biggest public market of Pernambuco. The characterization of the species allowed the identification of cells and useful metabolites like markers, besides making possible the identification of the commerced samples. The results alert for the methods of conservation and the quality of the medicinal plants commerced in public markets. Samples of leaves commerced as “pata-de-vaca ” and of stem barks commerced as "quixabeira" presented rate of rejectionsuperior to 50 %, whereas all the samples of stem bark commerced as "mororó" were approved. The anatomical and phytochemical results, as well as the tests of purity, are important for the quality control of medicinal plants, since they guarantee the standardizationof these species and can be used like characters diagnosis to the identification. / Diabetes melittus é uma síndrome endócrina que atinge mais de 6% da população mundial e cerca de 800 espécies vegetais são utilizadas no tratamento do diabetes. Em geral, as plantas medicinais são comercializadas sem procedimentos que garantam sua conservação. Este estudo caracteriza a anatomia e fitoquímica dos órgãos vegetativos de três espécies medicinais usadas no tratamento do diabetes. Identifica e avalia a qualidade de amostras utilizadas no tratamento do diabetes comercializadas no maior mercado público de Pernambuco. A caracterização das espécies permitiu a identificação de células e metabólitos úteis como marcadores, além de possibilitar a identificação das amostras comercializadas. Os resultados alertam para o modo de conservação e a qualidade das plantas medicinais comercializadas em mercados públicos. Amostras de folhas comercializadas como “pata-de-vaca” e de cascas de caule comercializadas como “quixabeira” apresentaram índice de rejeição superior a 50%, enquanto que todas as amostras de casca de caule comercializadas como “mororó” foram aprovadas. Os resultados da anatomia e fitoquímica, assim como os testes de pureza, são importantes para o controle de qualidade de plantas medicinais, pois garantem a padronização destas espécies e podem ser usados como caracteres diagnóstico na sua identificação.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_natalia_camacho.pdf: 752258 bytes, checksum: 4db6bde27e4ad1a1adedd5d44779d4aa (MD5) Previous issue date: 2007-06-01 / Lectins are proteins or glicoproteins of non-immune origin with binding specificities for carbohidrates, that interact with glicocomponents present in plant and animal cells, bacteria and viruses. This property makes lectins remarkable markers used in histochemical and biochemical studies, and for characterization and differentiation of cells. Leguminous plants are the major source of lectins, proteins that possess important biological activities, like insecticidal and antiproliferative against cancer cell lines. Thus, the aim of this work was to develop a heterologous expression system for a recombinant lectin from Bauhinia forficata, a leguminous plant popularly known as pata-de-vaca , in E. coli, to study its characteristics and biological activities. The lectin gene bfl was amplified by PCR from genomic DNA, and cloned to expression vectors pQE30 e pET32a(+). Recombinant BFL was expressed in E. coli in insoluble form by using the vector pET32a(+)/bfl. The lectin was purified by Ni +2 -Sepharose affinity chromatography, with a yield of 40 mg.L -1 . The sequence and carbohidrate specificity of rBFL is similar to other related lectins. The rBFL lectin presents in monomer and dimer forms, with aparent molecular mass of 44 and 94 kDa, respectively, shows biological activity in hemagglutination assay in the presence of divalent metal cations (Ca +2 and Mn +2 ) and antiproliferative effect on human cancer cell lines MCF-7 (breast cancer), HT-29 (colon cancer) and HL-60 (leukemia) according as the concentration used. The rBFL lectin showed dose-dependent inhibition in HT-29 cells, stimulatory effect on proliferation of MCF-7 cells in higher concentrations, and no induction of cell death was observed in any cancer cell line. The results obtained in this work, about rBFL lectin, never before isolated or produced in heterologous system, motivates the performance of new characterization assays to elucidate possible applications. / Lectinas são proteínas ou glicoproteínas de origem não imune com propriedade de ligação especifíca a carboidratos, capazes de interagir com glicocomponentes presentes em células de plantas, animais, bactérias e vírus. Essa propriedade faz das lectinas notáveis marcadores utilizados em estudos histoquímicos, bioquímicos e na caracterização e diferenciação de células. Plantas leguminosas constituem-se na maior fonte de lectinas, que possuem atividades biológicas importantes, como atividade inseticida e antiproliferativa sobre células tumorais. Diante disto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema de expressão heteróloga para uma lectina de Bauhinia forficata (rBFL), popularmente conhecida como pata-de-vaca , em E. coli, com o intuito de elucidar suas características e atividades biológicas. O gene bfl da lectina foi amplificado por PCR a partir do DNA genômico, e clonado nos vetores de expressão pQE30 e pET32a(+). A lectina rBFL foi expressa em larga escala pelo vetor pET32a(+)/bfl em E. coli, na forma insolúvel. A purificação foi realizada por cromatografia de afinidade em coluna de Ni +2 -Sepharose, com rendimento de 40 mg.L -1 . A seqüência da lectina rBFL e sua especificidade por carboidrato é similar a de lectinas relacionadas. A lectina rBFL apresenta-se na forma de monômeros e dímeros, com massa molecular aparente de 44 e 94 kDa, respectivamente, possui atividade biológica em ensaio de hemaglutinação na presença de cátions divalentes (Ca +2 and Mn +2 ) e demonstra efeito antiproliferativo sobre as linhagens tumorais humanas MCF-7 (câncer de mama), HT-29 (câncer de cólon) e HL-60 (leucêmica), dependendo da concentração utilizada. A rBFL demonstrou efeito inibitório dose-dependente sobre HT-29, e efeito estimulatório sobre a proliferação da linhagem MCF-7 em altas concentrações, não induzindo morte celular em nenhuma das linhagens. Os resultados obtidos neste trabalho acerca da rBFL, nunca antes isolada ou produzida em sistema heterólogo, motivam a realização de novos ensaios de caracterização visando possíveis aplicações.

Thesis (Ph. D.)--Oregon State University, . / Printout. Includes bibliographical references. Also available on the World Wide Web.

Orientador: Iracema de Mattos Paranhos Calceron / Resumo: Justificativa: A despeito da ação, comprovada ou não, é comum a constatação de que gestantes diabéticas fazem uso de plantas popularmente conhecidas como antidiabéticas. Uma das mais citadas é a Bauhinia forficata (Pata-de-vaca). O risco está em não se conhecer seus efeitos e possíveis repercussões maternofetais. Nesse aspecto, justifica-se o interesse em verificar se o extrato aquoso de folhas de B. forficata, administrado a ratas prenhes, não-diabéticas e diabéticas, interfere na glicemia materna, na performance reprodutiva e, em especial, na freqüência de malformações fetais. Objetivo Geral: Avaliar os efeitos do extrato aquoso de folhas de Bauhinia forficata (Pata-de-vaca) sobre o metabolismo materno, a performance reprodutiva, o desenvolvimento fetal e a teratogênese na prenhez de ratas diabéticas e nãodiabéticas. Objetivos Específicos: -Comparar os níveis glicêmicos e o ganho de peso em ratas prenhes, diabéticas e não-diabéticas, tratadas ou não com o extrato aquoso de folhas de Bauhinia forficata. - Comparar as taxas de prenhez a termo e de perda pré e pós-implantação em ratas prenhes, diabéticas e não-diabéticas, tratadas ou não com o extrato aquoso de folhas de Bauhinia forficata. -Comparar o peso médio dos recém-nascidos e das placentas, o índice placentário e o percentual de recém-nascidos pequenos (PIP), adequados (AIP) e grandes (GIP) para a idade de prenhez em ninhadas de ratas prenhes, diabéticas e não-diabéticas, tratadas ou não com o extrato... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Justificative: It is well known that diabetic pregnant women often use plants that are popularly used as hypoglycemic, regardless its action is not established yet. In this set, Bauhinia forficate ("Pata-de-vaca") is one of the most mentioned. The risk using this plant lies in the fact that maternal and fetal effects, as well as its side effects, are not known. Thus, it is plausible to access whether the aqueous extract of B. forficata, administered to diabetic and non-diabetic pregnant rats, can interfere in maternal glycemia, especially in reproductive performance and fetal malformations. General goal: To investigate the effects of aqueous extract of leaves of Bauhinia forficata ("Pata-de-vaca") on maternal metabolism, reproductive performance, fetal development and teratogenicity in pregnant diabetic and non-diabetic female rats. Specific goals: • To compare glycemia levels and body weight gain in diabetic and nondiabetic pregnant female rats, treated or not with aqueous extract of... (Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Bauhinia forficata, Leguminosae, é conhecida popularmente como pata-devaca e seus principais constituintes químicos são flavonóides. Ë comumente usada como antidiabética, mas existem relatos a respeito de suas atividades antioxidante e antiedematogênica. A fim de avaliar-se o comportamento de seus constituintes químicos frente a variações de temperatura e umidade, realizou-se estudo de estabilidade acelerada (50 ºC ± 2 oC e 90% ± 5% U.R.), onde a substância química majoritária (SQM) serviu como marcador para os devidos cálculos e, portanto, o seu isolamento prévio tornou-se imprescindível. Um método devidamente validado por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) foi utilizado para as análises e através das mesmas pode-se predizer uma reação de segunda ordem e, por conseguinte, um tempo de vida útil de 2,63 dias e um tempo de meia-vida de 23,65 dias. Avaliou-se, ainda, as atividades antioxidante (DPPH), antiedematogênica (edema em pata de ratos induzido pela carragenina) e anticolinesterásica (autobiografia). Para a atividade antioxidante, dos extratos testados, o butanólico foi o que demonstrou maior ação (54,73 µl/ml) sendo, no entanto, inferior ao padrão Ginkgo biloba (42,51 µl/ml). Na avaliação da atividade antiedematogênica, o extrato aquoso testado demonstrou um máximo de inibição de 76,5%. Ao testar-se a atividade anticolinesterásica de produtos isolados obtidos a partir de B. forficata, nenhuma ação significativa foi observada exigindo estudos complementares.

CARVALHO, Jarbas Lima de. Estudo químico e biológico de Bauhinia pulchella Benth. 2014. 146 f. Dissertação (Mestrado em química)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2014. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-10-11T14:50:02Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_jlcarvalho.pdf: 7177346 bytes, checksum: ac2dbd41102c794d8982223a01d9189a (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-10-11T18:26:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_jlcarvalho.pdf: 7177346 bytes, checksum: ac2dbd41102c794d8982223a01d9189a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T18:26:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_jlcarvalho.pdf: 7177346 bytes, checksum: ac2dbd41102c794d8982223a01d9189a (MD5) Previous issue date: 2014 / This present work reports the chemical and biological analysis of the stem and leaves from Bauhinia pulchella. In this study, the ethanol extract from stems was obtained by maceration, subjected to chromatographic fractionation, leading to isolation of three flavonoids: (+)-3’,4’-dihydroxyphenyl-chroman-7-ol (BP-2), (-)-fisetinidol (BP-3) and (+)-epicatechin (BP-4); a mixture of triterpenes taraxerone and β-amyrenone (BP-1); a mixture of steroids sitosterol and stigmasterol (BP-5); and a bibenzyl named 2-hydroxy-3’,5’-dimethoxybibenzyl (BP-6). It is notewhorthy to mention that BP-1 and BP-4 substances are unprecedented in the genus, while BP-2 is unpublished. Chemical structures of secondary metabolites obtained were elucidated by 1H and 13C NMR; IR and MS associated with comparison of data described in the literature. Chemical composition of the essential oil from leaves of B. pulchella, obtained by hydrodistillation, was determined and quantified by gas chromatography-mass spectroscopy (GC/MS) and gas chromatography-flame ionization detector (GC/FID), which identified 95,68% of all constituents. α-pinene (23.89%); caryophyllene oxide (22.43%) and β-pinene (12.19%) were the major components. The essential oil was tested against Aedes aegypti larvae and showed LC50 value of 105.93 ± 1.48 μg/mL. The cytotoxic activity of essential oil was evaluated on human tumor cell lines (HL-60; MCF-7; NCI-H292 and HEP-2) was evaluated, showing IC50 values with confidence intervals of 9.941 (8.238 to 12.00), 53.05 (41.39 to 67.99), 48.98 (44.22 to 54.25) and 50.42 (42.47 to 59.87) μg/mL, respectively and the cell line HL-60 the most sensitive among the cells tested. This is the first report of the chemical study of Bauhinia pulchella, as well the investigation of larvicidal activity and cytotoxicity of the essential oil from its leaves. / O presente trabalho relata o estudo químico e biológico do caule e das folhas de Bauhinia pulchella. Nesse estudo, o extrato etanólico do caule, obtido por maceração, foi submetido a fracionamento cromatográfico levando ao isolamento de três flavonoides (+)-3’-4’diidroxifenil-cromano-7-ol (BP-2), (-)-fisetinidol (BP-3) e (+)-epicatequina (BP-4); da mistura de triterpenos taraxerona e β-amirenona (BP-1); da mistura de esteroides sitosterol e estigmasterol (BP-5) e de um bibenzil denominado 2-hidróxi-3’-5’-dimetoxibibenzila (BP-6). Cabe ressaltar que as substâncias BP-1 e BP-4 são inéditas no gênero, enquanto BP-2 é inédita na literatura. As estruturas dos metabólitos secundários isolados foram elucidadas por RMN 1H e 13C; IV e EM, juntamente com a comparação com os dados descritos na literatura. A composição química do óleo essencial das folhas de B. pulchella, obtido por hidrodestilação, foi determinada e quantificada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM) e detector de ionização por chama (CG-DIC), sendo, portanto, identificados 95,68% dos seus constituintes: α-pineno (23,89%), óxido de cariofileno (22,43%) e β-pineno (12,19%) foram os constituintes majoritários. O óleo essencial teve sua atividade larvicida sobre Aedes aegypti avaliada, sendo obtido um valor de CL50 igual a 105,93 ± 1,48 μg/mL. O poder citotóxico do óleo essencial foi avaliado sobre as linhagens tumorais humanas HL-60, MCF-7, NCI-H292 e HEP-2, sendo obtidos valores de CI50 e intervalos de confiança iguais a 9,941 (8,238 a 12,00); 53,05 (41,39 a 67,99); 48,98 (44,22 a 54,25) e 50,42 (42,47 a 59,87) μg/mL, respectivamente, sendo a linhagem celular HL-60 a mais sensível dentre as células testadas. Este é o primeiro relato do estudo químico de Bauhinia pulchella, bem como da investigação da atividade larvicida e citotóxica do óleo essencial de suas folhas.