Firstly, the effect of pectin on acid milk gels in concentrated, quiescent systems was investigated by passive microrheology using two complementary techniques: diffusive wave spectroscopy (DWS) and multiple particle tracking (MPT). DWS, by allowing probing the mechanical properties of the network at high frequency, gave information on its microstructure. The addition of high methoxyl pectins was shown to change the network structure which has been explained by bridging of the casein micelles by the polymer as the system was undergoing acidification. On the other hand, the presence of low methoxyl pectin in the acid milk gel was shown to have no effect on the microstructure of the network at low concentration of polymer (0.1%w/w) which has been attributed to the sensitivity of this low DM pectin to calcium: LM pectin are trapped by calcium and not able to interact with casein micelles anymore. Multiple particle tracking was used to probe the effect of pectin on the heterogeneity of the system by following the distribution of the displacements of added micro beads at a given time lag during the gelation using the Van Hove distribution. Furthermore, the surface chemistry of the probes was modified in an attempt to control their location in the system. Finally, the mean square displacements of the casein micelles obtained by DWS and, of k-casein coated particles obtained by MPT were shown to give good agreement for the same acid milk system. Having established that the interaction between casein micelles and low methoxyl pectin is prevented by the pectin sensitivity to calcium, the effect of the pectin fine structure was investigated on the interaction between k-casein and pectin by surface plasmon resonance (SPR). The amount of pectin binding on a k-casein coated gold surface was shown to be strongly dependant on the pectin fine structure. It was concluded that small negative patches on the pectin backbone, likely to comprise of around two consecutive unmethylesterified galacturonic acid, are the most effective for pectin binding to k-casein. The effect of the direct interaction between pectin and k- casein on ‘calcium-free casein micelle mimics’ in pectin solution was then investigated using coated latex beads. A pectin structure with a limited number of negative patches on its backbone was also shown to limit the potential for destabilization via bridging.

Diss. (sammanfattning) Uppsala : Sveriges lantbruksuniversitet, 2008. / Härtill 5 uppsatser.

To evaluate the effect of supplement type on nutritional value of diets based on a low-quality forage, ten Polwarth × Texel lambs (mean LW of 21 ± 3 kg), housed in metabolic cages, fed ad libitum with a grass hay (Cynodon sp.) cut with 90 days of regrowth age, were used in a double 5 x 5 Latin Square experiment. Supplements tested were urea (U), cassava meal (CM), cassava meal plus urea (CMU) or cassava meal plus sodium caseinate (CMCA). A control (H) treatment (no supplement) was also included. Hay and fiber intake, as well as fiber digestibility, rumen microbial protein synthesis and nitrogen (N) retention were the lowest (P<0.05) by lambs supplemented only with cassava meal. Total organic matter (OM), as well as digestible energy intake, rumen microbial protein synthesis and N retention were improved (P<0.05) only by animals supplemented with cassava meal plus either, caseinate or urea. Lambs non-supplemented or supplemented only with cassava meal had very lower (P<0.05) ruminal ammonia concentrations. Sugars concentration was the highest (P<0.05) in lambs supplemented only with cassava meal. Casein treatments elicited the highest (P<0.05) ruminal concentrations of amino acids and peptides. Hay utilization by lambs was not improved by any supplement tested and was markedly depressed as cassava meal was the sole supplement. This effect, however, was not due a decreasing in ruminal pH, given that the mean ruminal pH values were always near 7.0. Increased nutrients supply for lambs fed a low-quality grass hay was dependent on both, energetic and nitrogenous substrates availability. However, none of tested supplements improved the forage use by animals indicating that its utilization is not limited due a lack of substrates for rumen microorganisms. It is probably that others factors, such as those associated with physical, chemical and anatomical characteristics of forage, but not a lack of N, have limited bacterial access and forage degradation into the rumen. Moreover, it is also possible that supplements have affected the particles passage rate through the gastrointestinal tract of lambs. These effects, however, need are considered in further studies / Para avaliar o efeito do tipo de suplemento sobre o valor alimentar de dietas a base de um feno de baixa qualidade, foram utilizados dez cordeiros Corriedale × Texel (PV médio de 21 ± 3 kg), mantidos em gaiolas de metabolismo, em um delineamento experimental duplo Quadrado Latino 5 x 5. Foi utilizado um feno de Tifton 85 (Cynodon dactylon x C. nlemfuensis) com 90 dias de rebrota e os suplementos testados foram uréia (U), farinha de mandioca (FM), farinha de mandioca mais uréia (FMU) ou farinha de mandioca mais caseinato de sódio (FMC). Também foi incluído um tratamento controle (F) (sem suplemento). O consumo da fibra e do feno, assim como a digestibilidade da fibra, a síntese de proteína microbiana e a retenção de nitrogênio (N) foram menores (P<0.05) pelos cordeiros suplementados apenas com farinha de mandioca. O consumo de matéria orgânica total (MO), assim como de energia digestível, a síntese de proteína microbiana e a retenção de N foram melhorados (P<0.05) somente pelos animais suplementados com farinha de mandioca mais uréia ou caseinato. Os cordeiros não suplementados ou suplementados apenas com farinha de mandioca apresentaram as menores (P<0.05) concentrações de amônia ruminal. A concentração ruminal de açúcares foi mais alta (P<0.05) nos cordeiros suplementados somente com farinha de mandioca. O tratamento com caseína proporcionou as mais altas (P<0.05) concentrações ruminais de aminoácidos e peptídeos. A utilização do feno pelos cordeiros não foi melhorada por nenhum dos suplementos testados e foi marcadamente prejudicada quando a farinha de mandioca foi o único suplemento. Este efeito, entretanto, provavelmente não foi devido ao decréscimo no pH ruminal, pois os valores estiveram sempre próximos a 7,0. O aumento da oferta de nutrientes aos animais consumindo um feno de baixa qualidade foi dependente da suplementação concomitante de substratos energéticos e nitrogenados, mas nenhum dos suplementos testados melhorou o uso da forragem, indicando que sua utilização não é limitada pela disponibilidade de substratos às bactérias ruminais. É possível que os fatores limitantes ao aproveitamento da forragem estejam associados às características físicas, químicas e anatômicas da planta, que limitaram o acesso das bactérias aos substratos ou, de outra forma, é possível que os suplementos tenham afetado a taxa de passagem da digesta pelo trato digestivo dos animais. Estudos em que estes aspectos sejam conjuntamente avaliados, contudo, necessitam ainda serem conduzidos

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA13MA125.pdf: 1115012 bytes, checksum: 736f2a82baac7129fc498949399b0b87 (MD5) Previous issue date: 2013-11-28 / The milk is rich in proteins, lipids, water and carbohydrates, making it an excellent environment for bacterial contamination from different origins and for its proliferation. Bacterial multiplication depends on its capacity of adaptation to the environment and time available. In dairy farms, milk can be storage under cold in bulk tanks models of two and four milking capacity, with a chilling capacity of 50% and 25% respectively of its total volume, in each milking process. The use of cold storage in milk production reduced the occurrence of acid milk, however, increased the proliferation of psychrotrophic microorganisms. These microorganisms presents proteolytic capacity over casein without modifing the milk acidity. This proteolytic capacity could be responsible for unstable non-acid milk (UNAM). The purpose of this study was to evaluate the effect of the cold storage length of time and temperature of raw milk in bulk tanks of two and four milking models on psychrotrophic bacterial count (PBC), casein stability in alcohol test and occurrence of UNAM. The study was conducted in 19 dairy farms in two rehearsal and each farm had a direct expansion bulk milk tank of two or four milking models. Dairy farms with an interval of four milking between milk transportation to the processing industry were selected, thus the milk had a 36 hours of cold storage in the dairy farm. Samples were collected before and after each milking for bacterial total count (BTC), physical-chemical analysis and PBC. Samples of 12 from a total of 19 dairy farms were collected for casein quantification. The length of time of cold storage did not affect the BTC and PBC (P > 0,05). The bulk tank model only affected the PBC (P < 0,05), presenting a lower mean tank s model of two milking when compared with models of four milking (3,61±0,104 and 4,00±0,120 CFU/mL(log10)). The PBC did not affected the casein fractions, however the length of time of cold storage affected the &#1179; and &#946; casein fraction concentrations. The reductions in these casein fractions did not affect the casein stability in the alcohol test. The length of time of cold storage affected the casein stability (P < 0,05) in the alcohol test without affecting the UNAM occurrence. Bulk tanks, when used properly in concern of raw milk volume to be chilled, allow the BTC and PBC rates to remain stable. The length of time of cold storage does not affect BTC and PBC but affects the casein concentration and casein stability in the alcohol test without affecting the UNAM occurrence / O leite é um meio nutritivo facilmente colonizado por bactérias de diferentes origens, com taxa de proliferação condicionada à capacidade do micro-organismo adaptar-se ao ambiente e do tempo disponível. Na propriedade rural o leite pode ser armazenado por até 48 horas em tanques de expansão direta modelo de duas ou quatro ordenhas, os quais diferem na capacidade de resfriamento a cada ordenha, respectivamente, esses equipamentos são capazes de resfriarem 50% e 25% de seu volume a cada ordenha. A conservação do leite sob resfriamento pode não ser suficiente para o controle de micro-organismos psicrotróficos, os quais apresentam atividade proteolítica sobre a caseína sem alterar a acidez do leite, podendo ser um fator desencadeador do leite instável não ácido (LINA). O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do tempo e temperatura de estocagem do leite cru em tanques de expansão direta modelos de duas e quatro ordenhas sobre a contagem bacteriana total (CBT) e contagem de bactérias psicrotróficas (CBP), assim como, determinar o efeito do tempo e da CBP sobre a estabilidade da caseína ao teste do álcool e a ocorrência de LINA. O experimento foi conduzido em 19 propriedades leiteiras localizadas nas regiões Serrana e Meio-oeste Catarinense, as quais possuíam equipamentos de refrigeração do leite por expansão direta modelo duas ou quatro ordenhas com taxa de ocupação de no mínimo 60%. Nas propriedades rurais foram avaliadas informações referentes ao intervalo de 36 horas entre a captação de leite a granel para a indústria de laticínios, as quais incluíam monitoramento temperatura leite, temperatura ambiente e umidade relativa do ar, aplicação de questionários aos responsáveis pela ordenha e coletas de amostras de leite antes e após a cada ordenha para análise de CBT, CBP, composição e teste físico-químicos (pH, acidez titulável e concentração alcoólica), sendo que em 12 das propriedades as frações de caseína foram quantificadas em duplicata. O tempo de estocagem do leite cru não afetou a CBT e CBP (P > 0,05). O modelo de tanque de expansão afetou somente a CBP (P < 0,05), com média inferior para amostras de leite de tanques de duas ordenhas em relação a quatro ordenhas (3,61±0,104 e 4,00±0,120 UFC/mL(log10)). A CBP não afetou as frações das caseínas e caseína total, entretanto, o tempo de estocagem do leite cru reduziu (P < 0,05) a concentração das frações &#1179; e &#946; da caseína e caseína total. A redução das frações de caseína não demonstrou efeito sobre a estabilidade do leite ao teste do álcool. O tempo de estocagem reduziu a (P < 0,05) a estabilidade do leite ao teste do álcool, entretanto não cursou com o aumentou a ocorrência de LINA. Conclui-se que tanques de resfriamento por expansão, utilizados dentro de suas especificações quanto ao volume de leite a ser resfriado, permitem a manutenção da CBT e CBP . O tempo de estocagem não afeta a CBT e CBP, entretanto reduz a concentração de caseína e a estabilidade do leite ao teste do álcool, sem alterar a ocorrência de LINA

Orientador: Valdemiro Carlos Sgarbieri / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-16T14:32:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ziegler_FabianeLaFlor_D.pdf: 4176640 bytes, checksum: fccef651838684499cf4cf698073b39e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O objetivo geral da presente pesquisa foi avaliar o efeito de um concentrado de proteínas do soro do leite bovino (WPC) enriquecido com o fator de crescimento e transformação beta (TGF-?) e lactoferrina, em pacientes pediátricos com Leucemia Mieloide Aguda - LMA (Capítulo 2); desenvolver um modelo de mucosite gastrointestinal induzida por quimioterápicos, em ratos Wistar, para posterior avaliação da eficácia das proteínas lácteas na proteção da mucosa (Capítulo 3); avaliar os efeitos pelo WPC e por uma caseína comercial, in vivo e in vitro sobre células leucêmicas humanas transplantadas em camundongos imunodeficientes (NOD/SCID) e em cultura de células (Capítulo 4). Para todos os estudos foi utilizado WPC enriquecido com TGF-??e lactoferrina doado pela empresa Hilmar Cheese Company (Cal, USA). No capítulo 2 realizou-se estudo de intervenção nutricional, prospectivo, duplo cego com placebo controlado, onde foram avaliados 21 pacientes, entre 0 a 19 anos, virgens de terapia, admitidos no Centro Infantil Boldrini, Campinas - SP. Foram avaliados quanto à adequação da ingestão alimentar, estado nutricional (EN), dosagem de glutationa (GSH) eritrocitária, hemograma, produção de citocinas no plasma e em cultura de células, imunoglobulina A salivar e evolução da mucosite. Foram comparados os resultados bioquímicos dos pacientes com um grupo controle de indivíduos saudáveis da mesma faixa etária. Utilizou-se o software SPSS para as análises estatísticas (p<0,05). O protocolo de pesquisa foi aprovado pela Comissão Nacional de Ética em Pesquisa (CONEP) com registro 14097. Tomados em conjunto os resultados indicaram que o WPC apresentou efeito positivo sobre o EN dos pacientes, porém não influenciou na composição corporal. A distribuição % dos macronutrientes estava adequada em todos os tempos para os grupos WPC e maltodextrina (placebo), mas o % de adequação dos micronutrientes não atendia às recomendações em sua maioria. As análises bioquímicas não evidenciaram superioridade do WPC em relação ao placebo. Não houve diferença significativa entre os grupos sobre a avaliação clínica da mucosite oral. Na comparação dos pacientes com LMA e indivíduos saudáveis (controle) pode-se constatar níveis estatisticamente superiores do controle nos parâmetros bioquímicos de albumina, pré-albumina, eritrócitos, hematócrito, hemoglobina, plaquetas, produção de fator de necrose tumoral alfa (TNF-?), interleucina 6 (IL-6), interleucina 10 (IL-10) e interferon gama (IFN-?) quando estimuladas pela vacina BCG liofilizada e produção de IL-6 quando estimulada por fitohemaglutinina (PHA). No entanto, para a concentração de GSH eritrocitária e produção espontânea das citocinas TNF-??e IFN-??verificou-se que os pacientes com LMA apresentaram níveis estatisticamente superiores em relação ao controle saudável. No capítulo 3 foi elaborado um protocolo de indução de mucosite em ratos Wistar testando-se os quimioterápicos 5-Fluoruracila (5-FU) e sulfato de vincristina (SV), em administrações de diferentes concentrações e número de doses. Através desse experimento concluiu-se que o SV não foi um bom agente indutor de mucosite, ao contrário do 5-FU. A partir desses resultados foram realizados experimentos com 5-FU visando ajuste das condições dos experimentos inclusive do número, periodicidade e concentração das doses do quimioterápico. O melhor modelo de indução de mucosite gastrointestinal foi obtido através da administração de 3 doses de 5-FU com intervalo de 3 dias entre cada dose, nas concentrações entre 50 e 70 mg/Kg/dose. Os índices bioquímicos não foram influenciados pelo efeito da peletização da dieta e, de modo geral não houve diferença significativa entre os grupos tratados com WPC e com caseína. Independente da natureza da proteína (WPC ou caseína) observou-se maior proteção contra o 5-FU quando os animais receberam as dietas previamente à administração do quimioterápico. Ao contrário do esperado, o estímulo imunológico com hemáceas de carneiro não promoveu aumento nos níveis de GSH nos eritrócitos. As proteínas do soro do leite protegeram a mucosa, em termos de promover menor intensidade de mucosite, nos períodos mais críticos (72h após a 2ª e a 3ª dose de 5-FU) nas regiões de maior prevalência, duodeno e jejuno, quando se comparou com os resultados obtidos para os grupos tratados com caseína. Para os experimentos in vivo, do capítulo 4, utilizaram-se células de leucemia linfóide aguda (LLA) pediátrica humana, isoladas de pacientes do Centro Infantil Boldrini, as quais foram inoculadas em camundongos NOD/SCID. Nesses experimentos, utilizou-se dieta AIN-93G com WPC ou caseína e dieta comercial e o quimioterápico SV. Avaliou- se: peso corporal, consumo de dieta, razão entre peso dos órgãos (rim, baço e fígado) e peso corporal, evolução da leucemia, tempo de sobrevida, hemograma e níveis de glutationa em eritrócitos do sangue periférico. Nos experimentos in vitro foram usadas 6 linhagens celulares: K562 (Leucemia Mieloide Crônica), Nalm-6 (Leucemia Linfóide Aguda do tipo B), Jurkat (Leucemia Linfóide Aguda do tipo T), CEM (Leucemia Linfóide Aguda do tipo T), RAMOS (Linfoma Burkitt) e HL-60 (Leucemia Mieloide Aguda). Foram testadas a citotoxicidade (IC50) do WPC, a viabilidade celular e os níveis de glutationa total nas células leucêmicas estudadas em 4 tempos (0, 24, 48 e 72h) e 4 condições diferenciadas (células; células + WPC; células + WPC + ARAC-C; células + ARA-C). Todos os resultados, tanto do capítulo 3 como do 4, foram analisados através do software ¿Statística: Basic Statistics and Tables¿. Não houve diferença entre o WPC e a caseína em relação aos parâmetros avaliados nos experimentos in vivo, exceto na análise de Doença Residual Mínima (DRM), na qual a caseína se mostrou mais efetiva que o WPC. Constatou-se superioridade do WPC sobre os resultados de peso corporal, razão dos rins e baço pelo peso e evolução da leucemia em relação aos animais tratados com dieta comercial. Não foi possível verificar um efeito sinergístico entre o WPC e o quimioterápico sulfato de vincristina. No que se refere aos experimentos in vitro, o WPC apresentou IC50 para Nalm-6 de 6,72 mg/mL e para a linhagem CEM de 11,84 mg/mL. Verificou-se que as linhagens K562, Nalm-6 e HL-60 apresentaram perfis semelhantes em relação à viabilidade celular. No entanto, em relação à produção de glutationa total, cada linhagem comportou-se de maneira diferenciada, sendo que a maior produção em todas as condições e tempos estudados, foi para a linhagem HL-60 seguida pela K562 / Abstract: The objective of this research was to evaluate the effect of a bovine milk whey protein concentrate (WPC), enriched with transforming growth factor beta (TGF-ß) and lactoferrin in pediatric patients with Acute Myeloide Leukemia (AML) (Chapter 2); in a chemotherapic-induced gastrointestinal mucositis model in Wistar rats (Chapter 3); evaluate in human leukemic cells in culture or transplanted into immune-deficient mouse NOD/SCID (Chapter 4). WPC enriched with TGF-ß and lactoferrin was donated by Hilmar Cheese Company (Cal, USA). Chapter 2 describes a randomized, double-blind, placebo controlled, prospective clinical trial of nutritional intervention with participation of 21 therapy-naïve patients with AML aged 0-19 years from Centro Infantil Boldrini, Campinas, SP. Food intake, nutritional status, red blood cell glutathione (GSH) concentration, haemogram, cytokine concentration in plasma and cell cultures, salivary immunoglobulin A (IgA) and evolution of mucositis were studied. Health individuals at the same age range were used as a control group. The statistical analysis was done using SPSS software (p < 0.05). The research protocol was approved by the National Committee of Ethics in Research (CONEP), resgistered by the number 14097. WPC showed a positive effect in the nutritional status of the patients, but it did not influence their body composition. Percentual distribution of macronutrients was adequate in all times of analyses for both WPC and maltodextrin (placebo) groups, but the percentage of adequacy of the majority of micronutrients did not reach recommendation. Other laboratorial analyses and evolution of mucositis did not show any difference between WPC and placebo groups. Comparison of AML patients with a group of healthy control showed higher concentrations of albumin, prealbumin, haematocrit, hemoglobin, platelets, Bacillus Calmette-Guérin (BCG) vaccine-stimulated tumor necrosis factor alpha (TNF-a), interleukin 6 (IL-6), interleukin 10 (IL-10) and interferon gamma (IFN-?) and phytohemaglutinin (PHA)- stimulated IL-6 in controls. On the other hand, patients with AML had higher red blood cell glutathione concentration and spontaneous TNF-a and IFN-??production in comparison to controls. Chapter 3 describes the experiments envolved in the development of a chemotherapic-induced model of mucosites, in Wistar rats, in which 5-Fluoruracila (5-FU) and Vincristine Sulfate (VS) were used, in various concentrations and number of doses. Through this experiment it was concluded that the VS was not a good promoter of mucositis in rats, unlike 5-FU. From these results, experiments were performed with 5-FU considering conditions of the experiments including the number, frequency and concentration of the doses of chemotherapic. The best model was obtained by the administration of 3 doses of 5-FU, each with a 3-days interval and concentrations in the range of 50 to 70 mg/Kg/dose. Haematological parameters and erythrocyte glutathione (GSH) were not influenced by pelletization of the diet and no difference was found between WPC and casein groups. Independent of the protein type (casein or WPC) the effect of 5-Fluoruracila was less deleterious when the diets were offered prior to the chemotherapic treatment. Contrary to expected, sheep red blood cells did not stimulate higher production of erythrocyte GSH by the WPC. WPC decreased mucosites intensity better than casein protecting the mucosa during the most critical periods (72h after 2nd and 3rd doses of 5-FU) in the intestinal regions of major prevalence of mucositis (duodenum and jejunum). More studies are required to support the WPC benefit in the protection and recovery of the mucosa GIT in experimental animal models, and possibly in humans. In chapter 4, cells originated from patients with Acute Lymphoid Leukemia (ALL) from Centro Infantil Boldrini were inoculated in NOD/SCID mice. The animals were fed with commercial diet or AIN-93G diet with WPC or casein as the only protein source and used the chemotherapic vincristine sulfate. Body weight, diet ingestion, ratio between organs (kidney, spleen and liver) and body weight, leukemia evolution, survival time, haemogram and glutathione levels were evaluated. The cell lineages K562 (Chronic Myeloid Leukemia), Nalm-6 (B cell, ALL), Jurkat (T cell, ALL), CEM (T cell, ALL), RAMOS (Burkitt¿s Lymphoma) and HL-60 (AML) were used for the in vitro assays, in which WPC cytotoxicity (IC50), cell viability and glutathione levels were accessed in four different times (0, 24, 48 and 72h) and conditions (cells; cells + WPC; cells + WPC + ARA-C; cells + ARA-C). Data were submitted to statistic analysis by using the: Basic Statistics and Tables software. There was no differences between WPC and casein in relation to the parameters evaluated in vivo, with the exception of the analysis of Minimal Residual Disease (MRD), in which casein seemed to be more effective than WPC. Results on body weight, ratio between organs and body weight and evalution of leukemia were better for the WPC group when compared with animals fed commercial diet. No synergistic effect between the WPC and vincristine sulfate could be observed. In the in vitro experiments, WPC IC50 was 6,72 mg/mL for Nalm-6 and 11,84 mg/mL for CEM cells. K562, Nalm-6 and HL-60 cell lineages showed similar viability profiles. However, each lineage produced different total glutathione concentration in the culture medium, with a higher production achieved by HL-60 cells, followed by K562 cells / Doutorado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Doutor em Alimentos e Nutrição

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de níveis crescentes de uréia na dieta de vacas em lactação sobre a produtividade, características físico-químicas e de composição do leite, bem como composição da proteína do leite. Foram utilizadas nove vacas Holandesas em lactação, em delineamento experimental tipo quadrado latino 3X3, com 3 tratamentos, 3 períodos e 3 quadrados. O experimento teve duração total de 63 dias divididos em 3 períodos de 21 dias. Os tratamentos foram: tratamento A (controle) com dieta formulada para suprir 100% das exigências do NRC (2001) em termos de PB, proteína degradável no rúmen (PDR), proteína não degradável no rúmen (PNDR), utilizando farelo de soja como principal fonte protéica e cana-de-açúcar como volumoso; tratamento B, dieta com a inclusão de 0,75% de uréia, em substituição parcial ao farelo de soja, e tratamento C, dieta com inclusão de 1,5% de uréia, em substituição parcial ao farelo de soja. Todas as dietas foram isoenergéticas (1,53 Mcal/kg de energia líquida de lactação) e isoprotéicas (16% de proteína bruta). Não foram observadas diferenças entre os tratamentos, quando os resultados foram analisados por regressão polinomial simples, quanto a: consumo de matéria seca, produção de leite, produção de leite corrigida para 3,5%, produção de proteína, produção de gordura, produção de lactose e produção de sólidos totais e Log CCS. Também não houve influência dos tratamentos sobre pH, crioscopia, densidade e prova de resistência ao álcool. No entanto, a acidez, sofreu efeito linear decrescente (p = 0,017) em função dos níveis de uréia na dieta. Quanto à composição do leite, os teores de proteína, gordura, lactose, uréia, extrato seco total e extrato seco desengordurado não foram influenciados pelos tratamentos. A composição da proteína também não foi alterada pela inclusão de até 1,5% de uréia na dieta, não sendo observada diferença entre os tratamentos para a proteína bruta, proteína verdadeira, caseína, proteína do soro, nitrogênio não caseinoso, nitrogênio não protéico, uréia, bem como as relações proteína verdadeira: proteína bruta e caseína: proteína verdadeira. Estes resultados sugerem que o uso de até 1,5% de uréia na matéria seca da dieta não altera a capacidade de produção, as características físico-químicas e de composição do leite, bem como a composição da proteína do leite. / The aim of this study was to evaluate the effects of three different dietary levels of urea on milk yield and composition, and milk protein composition. Nine lactating Holstein cows were used in a 3X3 latin square arrangement, with 3 treatments, 3 periods of 21 days each and 3 squares. The treatments were: A) NRC-based (NRC, 2001) diet to provide 100% of crude protein (CP), as well as, rumen undegradable protein (RUP) and rumen degradable protein (RDP) requirements, by using soybean meal and sugar cane; B) 0,75% urea inclusion; partially substituting soya meal from diet C) 1,5% urea inclusion, partially substituting soya meal from diet. Energy and protein levels of treatment diets comply with NRC (2001), and were isoenergetic and isoproteic. No statistical differences were observed among treatments, when results were analyzed by simple polynomial regression in relation to dry-matter intake, milk yield, 3,5% FCM, protein and fat yield, and somatic cell count (Log SCC). Cryoscopy, pH, milk density and alcohol stability, fat, lactose, urea, total solids and solids with no fat were not influenced by treatments. The protein composition, crude protein, true protein, casein, whey protein, non-casein nitrogen, milk urea nitrogen, as well as, true protein:crude protein and casein:true protein ratios were not influenced by the substitution of soybean meal by urea in ration. Results indicate that the use of urea up to 1,5% in DM does not alter milk yield and its composition.

Os peptídeos INKKI e YPVQPFTE foram isolados a partir da hidrólise da b-caseína bovina e correspondem às seqüências 26-30 e 114-121 respectivamente. A atividade proliferativa foi avaliada em culturas primárias de linfócitos T. A atividade antitumoral in vitro foi realizada em culturas de B16F10. Foi utilizado grupo com 40 camundongos da linhagem C57BL/6J para avaliar a atividade antitumoral. Nossos resultados mostraram que o peptídeo INKKI apresentou resposta proliferativa semelhante ao mitógeno comercial PHA. O peptídeo YPVEPFTE mostrou ter ação proliferativa maior do que a apresentada pelo mitógeno comercial PHA. O peptídeo INKKI mostrou ação quimiotáxica. O tratamento in vitro mostrou que somente o pentapeptídeo INKKI induz seletiva atividade citotóxica para as células de melanoma. Os animais portadores de tumores dorsais apresentaram significativa inibição da capacidade de crescimento e a metastatização. Conclui-se que os peptídeos apresentam ação significativa tanto nos experimentos in vitro como in vivo sugerindo um possível papel fisiológico. / Peptides INKKI and YPVQPFTE were isolated from the bovine b-casein after hydrolysis corresponding to the 23-30 and 114-121 sequence, respectively. Evaluation of the proliferative activity in primary cultures of lymphocytes. The activity antitumor in vitro was accomplished culture of was studied. Groups with 40 C57BL/6J lines mice had been used to evaluate the antitumoral activity. Our results showed that peptide presented similar proliferative response to the PHA commercial mitogen. The peptide YPVEPFTE showed to have proliferative action larger than presented by the commercial mitogen. The peptide INKKI showed in the chemotactic action. The treatment in vitro had shows that the peptide INKKI induces selective citotoxicity. The bearing animals of dorsal tumors had presented significant inhibition of the capacity of growth and the spread of methastasis. Thus, the peptides casein present significant action in in vitro and in vivo experiments, suggesting a possible physiologic role.

A caseína e os ácidos graxos livres (AGL) são importantes componentes do leite relacionados às suas características industriais e sensoriais. Alguns fatores são responsáveis por alterações em suas concentrações, dentre eles, pode-se destacar as condições de armazenamento, além da agitação e, principalmente, a contagem de células somáticas (CCS). Para estudar tais alterações, avaliou-se através do presente estudo o efeito da temperatura de armazenamento (- 20oC e 7oC) e da idade das amostras (3, 6, 9 e 12 dias), assim como da CCS (CCS1: 400 mil, CCS2:400-750 mil e CCS3: 750 mil células somáticas/mL de leite). O efeito das condições de armazenamento sobre a caseína e os AGL foi avaliado no primeiro estudo. O efeito da CCS sobre a caseína e os AGL, por outro lado, foi avaliado no segundo estudo. No primeiro estudo, observou-se aumento nos teores de AGL ao longo do tempo, ou seja, acompanhando o aumento do período de armazenamento, com médias superiores em amostras resfriadas (7oC), em relação às congeladas (-20oC). Desta forma, sugere-se que análises laboratoriais devem ser realizadas em até três dias para este componente, devido ao seu aumento progressivo em amostras resfriadas. Para a caseína, entretanto, não foi identificada interação entre os fatores idade e temperatura. As médias deste componente não diferiram considerando-se as condições de armazenamento avaliadas, indicando que as análises para este componente podem ser realizadas até doze dias após a coleta, independente da temperatura de armazenamento. No segundo estudo, identificou-se interação entre classes de CCS e época de coleta, para caseína. A partir dos resultados de AGL, pode-se concluir que o leite encontra-se com altas concentrações deste componente, quando coletado na propriedade rural, sendo também observada influência da CCS sobre as concentrações de caseína e AGL no leite cru. Os AGL apresentaram incrementos significativos comparando-se amostras coletadas em diferentes locais, no trajeto da fazenda à indústria. Por outro lado, comparando-se os mesmos locais: tanque, rota e silo, as médias de caseína não diferiram. Observou-se correlação entre as variáveis CCS e caseína e CCS e AGL. / The casein and the free fatty acids (FFA) are important milk components related to its industrial and sensory characteristics. Some factors are responsible for changes in their concentration among them can highlight the storage conditions, as well as agitation and, especially, the somatic cell count (SCC). To study such changes, we assessed through the present study the effect of storage temperature (-20oC and 7oC) and the age of samples (3, 6, 9 e 12 days), as well as the CCS (CCS1: 400 mil; CCS2: 400-750 mil; CCS3: 750 mil somatic cells/mL of milk). The effect of CCS storage conditions on casein and FFA was evaluated in the first study. The effect of CCS on casein and FFA moreover, was evaluated in the second study. In the first study, it was observed increased levels the AGL over time, ie, accompanying the increase of the storage period, with means higher in refrigerated samples (7oC), in relation to frozen samples (- 20oC). Thus, it is suggested that laboratory examinations shall be performed up to three days to this component, due to their progressive increase in refrigerated samples. For casein, however, was not identified interaction between the factors age and temperature. The mean of this component did not differ considering the storage conditions, indicating that the analyzes for this component can be made until twelve days after collection, regardless of storage temperature. In the second study, we identified interactions between CCS classes and seasons, for casein. From the FFA results, we can conclude that milk meets with high concentrations of this component, when collected in the rural property, being also observed influence of CCS on concentrations of casein and FFA in raw milk. The FFA showed significant increases compared to samples collected at different locations on the path from farm to industry. On the other hand, comparing the same locations, tank, route and silo, the casein average did not differ. Correlation was observed between the variables casein and CCS and FFA and CCS.

Objetivo: Comparación in vitro de la resistencia adhesiva de la resina en el esmalte dental con tratamientos de superficie en dientes previamente tratados con H2O2 al 35% evaluado de inmediato y a los 3 días. Materiales y métodos: El diseño del estudio es tipo experimental in vitro. La unidad de análisis fue un diente bovino tratado con peróxido de hidrógeno al 35% restaurado con resina compuesta, con la aplicación de un agente remineralizante y antioxidante. La muestra estuvo constituida por 98 especímenes divididos en 7 grupos (n=14): Grupo 1: Control inmediato. Grupo 2: Control a los 3 días. Grupo 3: Control 7 días. Grupo 4: Caseína Inmediato. Grupo 5: Caseína 3 días. Grupo 6: Vitamina E inmediato. Grupo 7: Vitamina 3 días. Se evaluó la resistencia adhesiva por medio de la prueba al cizallamiento con el uso de la máquina universal Instron MTS (Alliance RT30, USA) a una carga de 1 Kg/N- velocidad de 1 mm/min. Resultados: Al comparar los grupos a los 3 días, se obtuvieron resultados más altos siendo estos valores: Control 13.40 ± 2.76 Mpa, Caseína 14.32 ± 3.81 Mpa y Vitamina E 14.66 ± 4.71 Mpa.  Se observaron diferencias significativas (p=0.004) al comparar con los grupos inmediatos y de control. Conclusiones: La Vitamina E aplicado a los 3 días mejora la resistencia adhesiva al cizallamiento en comparación al grupo control y caseína en el mismo intervalo de tiempo. / Aim: To compare the shear bond strength of dental enamel with surface treatment on teeth previously treated with 35% hydrogen peroxide evaluated immediately and after 3 days. Materials and methods: This in vitro study follows an experimental design. The unit of analysis was a bovine tooth exposed to 35% hydrogen peroxide, restored with composite resin and with a remineralizing agent and antioxidant applied. The study consisted of 98 specimens divided into 7 groups (n=14): Group 1: Immediate Control, Group 2: Control at 3 days, Group 3: Control at 7 days. Group 4: Immediate Casein. Group 5: Casein at 3 days. Group 6: Immediate Vitamin E. Group 7: Vitamin E at 3 days. The shear bond strength of the specimens was tested using a universal testing machine (Instron MTS -Alliance RT30, USA) at a load of 1 Kg/N- 1 mm/min speed. Results: After omparing the groups at 3 days, higher bond strength values were obtained as follows: Control group 13.40 ± 2.76 Mpa, Casein group 14.32 ±3.81 Mpa and Vitamin E group 14.66 ±4.71 Mpa. Significant differences were observed between the immediate and control groups (p=0.004). Conclusions: Vitamin E applied at 3 days improves shear bond strength compared to the control group and the Casein group at the same point in time. / Tesis

Objetivo: Comparar in vitro la microdureza superficial del esmalte de dientes de bovino al ser expuestos a tres suplementos a base de caseína, creatina y leucina. Materiales y Métodos: Estudio de tipo experimental in vitro. Se evaluó la microdureza superficial inicial y final de 30 especímenes de esmalte bovino al ser expuestos a tres suplementos a base caseína, creatina y leucina. Se midió la microdureza superficial con un microdurómetro (Hv1000 LG - Corea del Sur) en los especímenes bovinos antes y después de la exposición. Dichos especímenes fueron almacenados a temperatura ambiente entre cada exposición. El análisis bivariado fue evaluado mediante la prueba de Wilcoxon para comparar la microdureza inicial y final de cada grupo y se utilizó la prueba de Kruskal Wallis para comparar la diferencia de microdureza en los diferentes tiempos y entre los suplementos. Además, se realizó la prueba de Dunn para verificar si existían similitudes entre los grupos analizados. El nivel de significancia se estableció como p<0.05. Resultados: El porcentaje de pérdida de la microdureza superficial con cada suplemento fue: caseína 2.63%, creatina 4.69% y leucina con 27.95% observándose diferencias estadísticamente significativas (p= 0.005) solo entre los grupos de creatina y leucina. Además, se encontraron diferencias estadísticamente significativas al comparar la diferencia de microdureza superficial inicial y final de los especímenes al ser expuestos a los tres suplementos. Conclusiones: En el presente estudio se observó que, la microdureza del esmalte bovino se ve reducida al ser expuesto a suplementos a base de caseína, leucina y creatina. Asimismo, se hallaron diferencias estadísticamente significativas en las pruebas realizadas las cuales concluyeron que la mayor pérdida en la microdureza superficial fueron en los especímenes expuestos al suplemento a base de leucina. / Objective: Compare in vitro the superficial microhardness of bovine tooth enamel when exposed to three supplements based on casein, creatine, and leucine. Materials and Methods: Experimental in vitro study. The initial and final surface microhardness of 30 bovine enamel specimens was evaluated when exposed to three supplements based on casein, creatine, and leucine. Surface microhardness was measured with a micro durometer (Hv1000 LG - South Korea) in the bovine specimens before and after challenge. Bivariate analysis was evaluated using the Wilcoxon test to compare the initial and final microhardness of each group and the Kruskal Wallis test was used to compare the difference in microhardness at different times and between the protein supplements. In addition, Dunn's test was performed to verify if there were similarities between the groups analyzed. The significance level was established as p <0.05. Results: The percentage of loss of surface microhardness with each supplement was: casein 2.63%, creatine 4.69% and leucine with 27.95%, observing statistically significant differences (p = 0.005) only between the creatine and leucine groups. In addition, statistically significant differences were found when comparing the initial and final surface microhardness difference of the specimens when exposed to the three supplements. Conclusions: In the present study it was observed that the microhardness of bovine enamel is reduced when exposed to supplements based on casein, leucine, and creatine. Likewise, statistically significant differences were found in the tests carried out which concluded that the greatest loss in surface microhardness was in the specimens exposed to the leucine-based supplement. / Tesis