Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Bioquímica / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:33:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013Bitstream added on 2014-09-24T20:21:05Z : No. of bitstreams: 1 317556.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Na atualidade as doenças cardiovasculares representam a principal causa de mortes no mundo, sendo esta situação reflexo do estilo de vida populacional. A aterosclerose, uma das principais causa das doenças cardiovasculares, inter-relaciona diversos fatores de risco que convergem em um ponto: a produção anormal de espécies reativas de oxigênio (EROs). O aumento de EROs, e a subsequente queda na biodisponibilidade de óxido nítrico (oNO) têm sido proposto como o mecanismo patogênico da disfunção endotelial. Superóxido (O2o-) produzido principalmente pela mitocôndria endotelial reage rapidamente com oNO produzindo peroxinitrito, uma espécie reativa de nitrogênio (ERNs) que causa alterações profundas na mitocôndria, superprodução de EROs, conduzindo a disfunção endotelial e morte celular. Estes fenômenos têm sido implicados no início e na progressão do processo aterosclerótico. Este estudo teve por objetivo principal a determinação do efeito de um fluxo de peroxinitrito promovido por 1,3-morfolinosidnonimina (SIN-1), sobre a função mitocondrial e endotelial de células endoteliais de aorta bovina (BAEC). Além disso, investigamos se o disseleneto de difenila (PhSe)2, um simples composto orgânico de selênio, poderia ser utilizado como uma estratégia farmacológica para proteção contra os danos causados pelo peroxinitrito, tendo em vista as importantes propriedades antioxidantes descritas para este composto. Nossos resultados experimentais mostraram que a exposição à SIN-1 (250 ?M) causou um profundo comprometimento no consumo de oxigênio, na geração de energia e na capacidade de reserva mitocondrial nas BAEC. A disfunção mitocondrial resultou em produção adicional de peroxinitrito, amplificando o fenômeno e levando a disfunção endotelial. Além disso, observamos um extensivo declínio no potencial de membrana mitocondrial ( m), induzido pelo peroxinitrito, e este evento foi associado à morte celular apoptótica. Por outro lado, o pré-tratamento das BAEC com (PhSe)2, foi capaz de prevenir os danos celulares mediados pelo peroxinitrito possivelmente por promover um aumento na expressão de duas diferentes isoformas da enzima peroxirredoxina (Prx). O aumento na expressão da Prx em conjunto com a melhora no sistema antioxidante vinculado à glutationa (GSH), já demonstrado anteriormente por nosso grupo, contribui para a melhoria do sistema antioxidante nas células endoteliais, tornando-as mais resistentes ao dano oxidativo.<br> / Abstract : Nowadays cardiovascular diseases are the leading cause of death worldwide, and this situation reflects the lifestyle of the population. Atherosclerosis, one of the main causes of cardiovascular disease, interrelates several risk factors that converge on one point: the abnormal production of reactive oxygen species (EROs). The increase in EROs and the subsequent decrease in the bioavailability of nitric oxide (oNO) have been proposed as the pathogenic mechanism of endothelial dysfunction. Superoxide (O2o-) mainly produced by endothelial mitochondria rapidly reacts with oNO producing peroxynitrite, a reactive nitrogen species (ERNs) which causes profound changes in the mitochondria, overproduction of EROs, leading to endothelial dysfunction and cell death. These phenomena have been implicated in the onset and progression of the atherosclerotic process. This study was designed to determine the effect of a flow of peroxynitrite promoted by 1,3-morpholinylsydnonimine (SIN-1), in mitochondrial and endothelial function of bovine aortic endothelial cells (BAEC). Furthermore, we investigated whether diphenyl diselenide (PhSe)2 , a simple organic selenium compound, could be used as a pharmacological strategy for protection against peroxynitrite-mediated damage, taking into account the significant antioxidant properties described for this compound. Experimental results showed that overnight exposure to SIN-1 (250 µM) caused a profound impairment on oxygen consumption, energy generation and reserve capacity in mitochondria of BAEC. Mitochondrial dysfunction resulted in an additional intracellular production of peroxynitrite, amplifying the phenomenon and leading to endothelial dysfunction. Moreover, we observed an extensive decline in mitochondrial membrane potential (??m), induced by peroxinytrite, and this event was associated with apoptotic-type cell death. In another hand, pretreatment of BAEC with (PhSe)2, was capable to prevent peroxynitrite-mediated cell damage possibly by promoting an increase in the expression of two different isoforms of peroxiredoxin (Prx) enzyme. The increase in the expression of Prx together with the amelioration of the glutathione (GSH) antioxidant system, previously demonstrated by our group, contributes to the improvement of the antioxidant system in endothelial cells, making them more resistant to oxidative damage.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-03Bitstream added on 2014-06-13T19:12:09Z : No. of bitstreams: 1 pereira_pc_me_botib.pdf: 334437 bytes, checksum: 083fb6222d7db9f03ec3da4fe09e2bf2 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A obesidade, assim como o estresse, constituem-se em fatores de risco para a mortalidade e morbidade cardiovasculares. Embora haja relatos sobre alterações de reatividade vascular em indivíduos obesos e expostos ao estresse, isoladamente, torna-se imprescindível, para a avaliação de risco cardiovascular, o conhecimento da resposta vascular adaptativa ao estresse em condição de obesidade estabelecida. Assim, o objetivo foi avaliar os efeitos da obesidade induzida por dieta sobre a resposta vascular adaptativa ao estresse agudo de imobilização em ratos adultos. Para tanto, foram utilizados ratos machos Wistar, separados em 4 grupos: controle e estresse que receberam dieta padrão; e obeso e obeso/estresse que receberam dieta hipercalórica durante 15 semanas. A obesidade foi determinada pelo índice de adiposidade: [(gorduras epididimal+retroperitoneal+visceral)/peso corpóreo final]x100. O peso corpóreo foi avaliado semanalmente. O consumo das dietas foi calculado diariamente para a determinação da ingestão alimentar, ingestão calórica e eficiência alimentar. A pressão arterial sistólica foi aferida durante o protocolo de obesidade. Foi realizado também o teste de tolerância à insulina e à glicose. Após o período de 15 semanas os animais do grupo estresse e obeso/estresse foram submetidos ao estresse agudo de imobilização por 2 horas. Imediatamente após o término da sessão de estresse, os animais foram decapitados e a aorta torácica, as gorduras epididimal, retroperitoneal e visceral foram retiradas. Curvas à noradrenalina, na presença ou ausência de prazosin ou L-NAME, curvas ao KCl e curvas ao cálcio foram obtidas em anéis de aorta torácica, com (+E) e sem endotélio (-E). Avaliou-se a reatividade vascular: resposta máxima (RM) e concentração eficaz de 50% (EC50). O índice de adiposidade, a ingestão calórica, a eficiência alimentar... / Obesity, as well as stress, constitute a risk factors for cardiovascular morbidity and mortality. Although there are reports on vascular reactivity alterations in obese subjects and those exposed to stress, isolated, it becomes essential for the cardiovascular risk assessment, the knowledge of the circulatory adaptation to acute stress and its mechanisms in subjects with established obesity. Thus, the objective was to evaluate the effects of diet-induced obesity on vascular adaptive response to acute immobilization stress in adult rats. In this way, male Wistar rats were separated into 4 groups: control and stressed that received standard diet, and obese and obese/stress that received high calorie diet during 15 weeks. Obesity was determined by the adiposity index: [(epididymal fat + retroperitoneal fat + visceral fat) / final body weight] x100. Body weight was measured weekly. The consumption of diets was calculated daily to determine food intake, energy intake and feed efficiency. Systolic blood pressure was measured during the protocol of obesity. The glicemic profile was investigated by the glucose tolerance test and the insulin resistence test. After 15 weeks the animals in group stress and obese/stress were subjected to acute immobilization stress for 2 hours. The animals were decapitated and the thoracic aorta, epididymal fat, retroperitoneal fat and visceral fat were removed. Curves to noradrenaline, in the absence or presence of prazosin or L-NAME, KCl and calcium were obtained in rings of thoracic aorta with (+E) and without endothelium (-E). We evaluated the vascular reactivity: maximum response (MR) and effective concentration 50% (EC50). The index of adiposity, calorie intake, feed efficiency and weight of epididymal fat, retroperitoneal and visceral fat were higher in rats consuming the high calorie diet. Obesity did not determine changes in blood pressure and glucose... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Sandra Cordellini / Banca: Agnaldo Bruno Chies / Banca: Denise Rangel da Silva Sartori / Resumo: A obesidade, assim como o estresse, constituem-se em fatores de risco para a mortalidade e morbidade cardiovasculares. Embora haja relatos sobre alterações de reatividade vascular em indivíduos obesos e expostos ao estresse, isoladamente, torna-se imprescindível, para a avaliação de risco cardiovascular, o conhecimento da resposta vascular adaptativa ao estresse em condição de obesidade estabelecida. Assim, o objetivo foi avaliar os efeitos da obesidade induzida por dieta sobre a resposta vascular adaptativa ao estresse agudo de imobilização em ratos adultos. Para tanto, foram utilizados ratos machos Wistar, separados em 4 grupos: controle e estresse que receberam dieta padrão; e obeso e obeso/estresse que receberam dieta hipercalórica durante 15 semanas. A obesidade foi determinada pelo índice de adiposidade: [(gorduras epididimal+retroperitoneal+visceral)/peso corpóreo final]x100. O peso corpóreo foi avaliado semanalmente. O consumo das dietas foi calculado diariamente para a determinação da ingestão alimentar, ingestão calórica e eficiência alimentar. A pressão arterial sistólica foi aferida durante o protocolo de obesidade. Foi realizado também o teste de tolerância à insulina e à glicose. Após o período de 15 semanas os animais do grupo estresse e obeso/estresse foram submetidos ao estresse agudo de imobilização por 2 horas. Imediatamente após o término da sessão de estresse, os animais foram decapitados e a aorta torácica, as gorduras epididimal, retroperitoneal e visceral foram retiradas. Curvas à noradrenalina, na presença ou ausência de prazosin ou L-NAME, curvas ao KCl e curvas ao cálcio foram obtidas em anéis de aorta torácica, com (+E) e sem endotélio (-E). Avaliou-se a reatividade vascular: resposta máxima (RM) e concentração eficaz de 50% (EC50). O índice de adiposidade, a ingestão calórica, a eficiência alimentar... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Obesity, as well as stress, constitute a risk factors for cardiovascular morbidity and mortality. Although there are reports on vascular reactivity alterations in obese subjects and those exposed to stress, isolated, it becomes essential for the cardiovascular risk assessment, the knowledge of the circulatory adaptation to acute stress and its mechanisms in subjects with established obesity. Thus, the objective was to evaluate the effects of diet-induced obesity on vascular adaptive response to acute immobilization stress in adult rats. In this way, male Wistar rats were separated into 4 groups: control and stressed that received standard diet, and obese and obese/stress that received high calorie diet during 15 weeks. Obesity was determined by the adiposity index: [(epididymal fat + retroperitoneal fat + visceral fat) / final body weight] x100. Body weight was measured weekly. The consumption of diets was calculated daily to determine food intake, energy intake and feed efficiency. Systolic blood pressure was measured during the protocol of obesity. The glicemic profile was investigated by the glucose tolerance test and the insulin resistence test. After 15 weeks the animals in group stress and obese/stress were subjected to acute immobilization stress for 2 hours. The animals were decapitated and the thoracic aorta, epididymal fat, retroperitoneal fat and visceral fat were removed. Curves to noradrenaline, in the absence or presence of prazosin or L-NAME, KCl and calcium were obtained in rings of thoracic aorta with (+E) and without endothelium (-E). We evaluated the vascular reactivity: maximum response (MR) and effective concentration 50% (EC50). The index of adiposity, calorie intake, feed efficiency and weight of epididymal fat, retroperitoneal and visceral fat were higher in rats consuming the high calorie diet. Obesity did not determine changes in blood pressure and glucose... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Heitor Moreno Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T00:33:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Girioli_SamiraUbaid_D.pdf: 2811337 bytes, checksum: bc9374b0216cba3ee57f1b107392c0e0 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Segundo o VII JNC e V Diretrizes Brasileiras de Hipertensão Arterial, a hipertensão arterial resistente (HAR) é definida como sendo a elevação persistente dos níveis pressóricos (= 140/90 mmHg) a despeito de tratamento farmacológico tríplice, pleno, incluindo diuréticos, em pacientes com boa adesão e sem causas secundárias de hipertensão arterial ou pseudo-hipertensão. O excesso ou escape de aldosterona pode ocorrer após tratamento crônico com IECA, BRA ou diuréticos tiazídicos, comumente utilizados nestes pacientes ou por hiperaldosteronismo primário não diagnosticado. A espironolactona tem sido apontada como fármaco indispensável no tratamento de HAR por melhorar os níveis pressóricos, mas pouco se sabe sobre a pressão arterial (PA), função endotelial e remodelamento cardiovascular avaliados simultaneamente após sua utilização. O objetivo deste estudo foi avaliar a pressão arterial, a função endotelial, o remodelamento cardiovascular e a função diastólica em hipertensos refratários antes e após a utilização de antagonista de aldosterona, espironolactona, em associação ao tratamento anti-hipertensivo otimizado e individualizado em centro de referência em HAR por 6 meses. Após triagem e adesão rigorosa, 71 pacientes encaminhados ao nosso serviço como hipertensos resistentes foram seqüencialmente incluídos no estudo, após avaliação e caracterização como hipertensos resistentes (HAR, n=39) ou hipertensos controlados (HAC, n=32). O grupo controle foi constituído por pacientes normotensos (CONT, n=37). Anti-hipertensivos eram fornecidos integralmente. Ecocardiograma, Teste de vasodilatação mediada pelo fluxo (VMF), espessura íntima-média de carótidas (IMT), dosagens bioquímicas de concentrações de renina e aldosterona plasmáticas, sódio e potássio séricos e urinários foram realizados na fase inicial (pré-espiro), seguida por associação de espironolactona 25mg/dia ao tratamento anti-hipertensivo por 6 meses (apenas para os grupos HAR e HAC) . Subsequentemente, estes parâmetros foram reavaliados (fase pós-espiro). Após 6 meses de espironolactona, os grupos HAR e HAC apresentaram redução da PA (p<0,001 para PAS e PAD). O grupo HAR apresentou melhora da função endotelial dependente (p<0,001) e independente do endotélio (p=0,007). Os grupos HAR e HAC apresentaram melhora da hipertrofia ventricular esquerda p<0,001) e melhora da função diastólica (índice Kappa HAR: 0,219 e índice Kappa HAC: 0,392) em 7,69% e 15,62%, respectivamente. Os grupos HAR e HAC apresentaram elevação da aldosterona plasmática (p<0,05). A otimização do tratamento da HAR com a associação de espironolactona em pequenas doses, reduz PA, melhora função endotelial, melhora hipertrofia ventricular esquerda e função diastólica a despeito da presença de excesso ou "escape" de aldosterona. / Abstract: According to JOINT VII and V Brazilian Guidelines of Hypertension, resistant hypertension (RH) is defined, as a persistent elevation of blood pressure (= 140/90 mmHg) despite the use of a triple drug regimen at maximal doses including a diuretic, in patients with good compliance and without secondary causes of hypertension or pseudo-hypertension. Aldosterone excess or "escape" can occur after chronic treatment with ACEI, ARB or thiazide-type diuretics, commonly used by these patients or in undiagnosed primary aldosteronism. Spironolactone is thought to be an essential drug in RH treatment because it improves blood pressure, but there are few available data about blood pressure, endothelial function and cardiovascular remodeling evaluated simultaneously with its use. The aim of this study was to assess blood pressure, endothelial function, cardiovascular remodeling and diastolic function in resistant hypertensive patients before and after the use of an aldosterone antagonist, spironolactone, for a six-month period in association with individualized and optimized antihypertensive treatment in a RH reference clinic. After confirming compliance to treatment, 71 hypertensive patients attending our service were included in the study as resistant hypertensive (RH, n = 39) or controlled hypertensive (CH, n = 32) patients. The control group was formed of normotensive patients (CONT, n = 37). All antihypertensive drugs were supplied. Echocardiography, flow-mediated vasodilation, carotid intima-media wall thickness, plasma renin and aldosterone concentrations, plasma and urinary sodium and potassium concentrations were measured at baseline (pre-spironolactone phase), followed by an association of 25 mg/d spironolactone with existing antihypertensive drugs for 6 months (only to RH and CH groups). Subsequently these parameters were reassessed (post-spironolactone phase). After 6 months of spironolactone, the RH and CH groups presented with a reduction in blood pressure (p<0.001 for both systolic and diastolic blood pressures). The RH group had improved endothelial function, both endothelium-dependent (p<0.001) and independent (p = 0.007). RH and CH groups presented with improved left ventricular hypertrophy (p<0.001) and diastolic function (Kappa index RH: 0.219 and Kappa index CH: 0.392) in 7.69% and 15.62%, respectively. There were increases in aldosterone concentrations for RH and CH groups (p< 0.05). Optimized RH treatment with low doses of spironolactone reduces blood pressure and improves endothelial function, left ventricular hypertrophy and diastolic function despite of aldosterone excess or "escape". / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientador: Heitor Moreno Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:55:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sousa_MarcioGoncalvesde_M.pdf: 1096117 bytes, checksum: bb6fc76b8c771aaf100c7ca6a5e14a91 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Fumar é o mais importante fator de risco modificável para aterosclerose. O tabagismo está fortemente ligado a disfunção endotelial. Tem sido sugerido que a disfunção endotelial possa ser conseqüência do aumento da degradação do óxido nítrico secundária a formação de radicais livres derivados do oxigênio. O cigarro contém uma grande quantidade destes radicais livres e hipóteses têm sido levantadas sobre seus efeitos adversos resultantes do dano oxidativo a substâncias biológicas, dentre estas, o óxido nítrico. A vitamina C é o mais potente antioxidante solúvel em água no plasma humano, sendo capaz de retirar uma grande variedade de espécies reativas de nitrogênio e oxigênio, incluindo radicais superóxido. Alguns estudos têm demonstrado melhora da resposta dependente do endotélio no leito arterial de tabagistas com infusão aguda de vitamina C. Há uma significante heterogeneidade da função endotelial dentro da circulação. Desde que veias não são susceptíveis à aterosclerose, no presente estudo, investigamos o efeito da infusão aguda de vitamina C no leito venoso através da técnica da veia dorsal da mão (TVDM) e no leito arterial através da dilatação mediada pelo fluxo (FMD), permitindo, assim, a comparação de ambos os territórios endoteliais. Estudamos 6 não fumantes sadios e 7 fumantes moderados sadios através da técnica da complacência da veia dorsal da mão e vasodilatação mediada pelo fluxo. Curvas doses-resposta à bradicinina (BK) e nitroprussiato de sódio (NPS) foram construídas para testar o relaxamento dependente e não-dependente do endotélio venoso antes e após a infusão aguda de vitamina C. Pressão arterial, freqüência cardíaca, resistência vascular sistêmica e débito cardíaco foram medidos batimento a batimento durante todo o estudo através do portapres, um método contínuo de aferição de pressão arterial digital não-invasivo. Os tabagistas moderados apresentaram uma resposta vascular dependente do endotélio reduzida em ambos os leitos vasculares quando comparados a indivíduos não tabagistas (venoso Emax = 71,2 ? 17,3% vs 95,7 ? 21,2% e arterial 8,5 ± 3,7% vs 16,2 ± 2,7%; p<0,05). A administração aguda de vitamina C restaurou similarmente a responsividade vascular dependente do endotélio no leito venoso (Emax = 71,2 ? 17,3% e 88,3 ? 7,0%; respectivamente antes e após sua administração; p<0,05) e arterial (8,5 ? 3,7% e 17,7 ? 7,7%; respectivamente antes e após sua administração; p<0,05) em tabagistas moderados. A responsividade não-dependente do endotélio foi inalterada entre os grupos estudados / Abstract: Background: Chronic smoking is associated with endothelial dysfunction. Vitamin c, an antioxidant, improves the endothelium-mediated vasodilatation in arteries in smokers. There is significant heterogeneity of endothelial function within the circulation. Since veins are generally not susceptible to atherosclerosis, this model allows comparable assessment of changes in endothelial function between both territories. Methods and Results: We studied 06 healthy non-smokers and 07 healthy moderate smokers with the dorsal hand vein compliance technique and the flow mediated dilation. Dose response curves to bradykinin (BK) and sodium nitroprusside (SNP) were constructed to test the endothelium-dependent and non-dependent relaxation before and after acute infusion of vitamin C (25mg/min). Smokers had an impaired vasodilatation to bradykinin compared to non-smokers (Emax = 95,7 ? 21,2% vs 71,2 ? 17,3%; respectively, p<0,05). Vitamin C administration in dorsal hand vein significantly increased the vasodilatation to bradykinin in smokers (Emax = 71,2 ? 17,3% vs 88,3 ? 7,0%; p<0,05) but not in non-smokers (Emax = 95,7 ? 21,2% vs 82,7 ? 4,1%; non significant). Similarly, the arterial response in smokers had an impaired endothelium-dependent dilatation compared to non-smokers (16,2 ± 2,7% vs 8,5 ± 3,7%; respectively, p<0,05) and vitamin C restored this response in smokers (8,5 ± 3,7% vs 17,7 ± 7,7%; p<0,05) but not in non-smokers (16,2 ± 2,7% vs 14,4 ± 4,1%; non significant). The endothelium non-dependent dilatation did not differ in the studied groups. Conclusions: Smokers had similar impaired endothelium-dependent vasodilatation responsiveness in both vascular beds. Vitamin c restores the impaired endothelium-dependent responsiveness in smokers / Mestrado / Mestre em Clinica Medica

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Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-01Bitstream added on 2014-08-13T18:00:38Z : No. of bitstreams: 1 000756932.pdf: 2220257 bytes, checksum: 71686b549cbb892ac84fae4fd5db5bf3 (MD5) / As células inflamatórias estão presentes no câncer de mama e podem promover o desenvolvimento do tumor assim como estimular imunidade anti-tumoral. A Nacetilglucosaminidase (NAG) é utilizada para detectar o acúmulo/ativação de macrófagos teciduais. A mieloperoxidase (MPO) é considerada marcador de acúmulo/ativação de neutrófilos. O Fator de Crescimento Endotelial Vascular (VEGF) é potente citocina pró-angiogênica. O objetivo deste estudo foi medir a resposta inflamatória sistêmica, medindo os níveis séricos de MPO, NAG, e VEGF em mulheres diagnosticadas com câncer de mama e associar esta resposta ao infiltrado inflamatório peritumoral e a fatores prognósticos. As amostras de soro obtidas de mulheres sem evidências de doenças (n=31) e com câncer de mama (n=68) foram analisadas por meio de ensaio enzimático para obter-se a atividade de MPO, NAG, e VEGF. Os níveis séricos de NAG e VEGF foram maiores em voluntários saudáveis (p<0,0001) e os níveis séricos de MPO foram maiores em pacientes com câncer de mama (p=0,002). Os níveis séricos de NAG apresentaram correlação positiva com os níveis séricos de MPO e VEGF (p<0,0001 e p=0,0012, respectivamente), assim como os níveis de MPO e VEGF (p=0,0018). O infiltrado inflamatório não foi associado aos níveis séricos dos marcadores inflamatórios, e níveis mais elevados de MPO foram associados à negatividade para invasão linfovascular (p=0,0175)

Resumo: Objetivos: Desenvolver um modelo animal de neovascularização retiniana através de uma ou duas injeções do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) 165 na cavidade vítrea de coelhos. Avaliar esse modelo com angiografia fluorescente (AF), tomografia de coerência óptica (OCT) e análise histopatológica. Materais e métodos: Doze coelhos foram divididos em três grupos. Grupo I (n=3) recebeu injeção intra-vítrea de 0.1 mL de solução salina balanceada (grupo controle). Grupo II (n=6) recebeu 10 ?g de VEGF no dia 0; grupo III foi aplicado 10 ?g de VEGF no dia 0 e 7. O acompanhamento (dia 0,3,7,14,21,28) incluiu fotografia colorida do fundo de olho, AF, OCT e exame histopatológico. Os olhos foram removidos e corados com hematoxilina e eosina (HE). Resultados: Os animais do grupo I (controle) não apresentaram alterações no globo ocular durante os 28 dias de acompanhamento. Por outro lado os olhos do grupo II (uma injeção de VEGF) demonstraram após 72 horas da aplicação dilatação e tortuosidade dos capliares retinianos, já a neovascularização foi detectada no dia 7 e regrediu na segunda semana. No grupo III (duas injeções de VEGF) o vazamento dos capilares retinianos e a neovascularização se acentuaram até o dia 14 e ao final do acompanhamento tanto a histologia como o OCT evidenciaram o descolamento de retina tracional. O estudo histopatológico demonstrou um aumento no tamanho do calibre dos vasos tanto do grupo II e III ao se comparar com o controle. Conclusão: Os resultados demonstram um modelo animal eficiente e confiável de neovascularização de retina pela AF, OCT e histopatologia. Uma injeção de angiogênico desenvolve a neovascularização de retina que regride após sete dias, já duas aplicações desenvolvem uma neovascularização mais intensa, que após quatro semanas evolui para o descolamento de retina.

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:40Z : No. of bitstreams: 1 000835480.pdf: 1335733 bytes, checksum: 2cd18cf85420b81fe402a40c37a0f05d (MD5) / A catarata situa-se entre as afecções oculares mais frequentes em cães. A facoemulsificação é o método que melhor se adéqua à terapia e o preferido entre os oftalmologistas. A celularidade do endotélio é condição a ser considerada para o sucesso da cirurgia, uma vez que lesões endoteliais podem induzir descompensação corneal permanente. Avaliou-se o papel antioxidante do ácido ascórbico intracameral sobre o endotélio corneal e sobre o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) expresso no humor aquoso, em cães submetidos à facoemulsificação. Utilizaram-se 40 olhos de 20 pacientes, machos ou fêmeas, com 7 a 12 anos, portando catarata senil bilateral. Conceberam-se dois grupos (n=20). Grupo 1 (G1), recebeu solução salina balanceada (BSS); Grupo 2 (G2), recebeu 0,001M de ácido ascórbico estéril diluído em BSS. O endotélio corneal foi avaliado à microscopia especular de não contato, antes e em diferentes momentos após a facoemulsificação. Avaliaram-se a densidade (células/mm2) e a área (mm2) celular, a espessura corneal (mm), a hexagonalidade e o coeficiente de variação do tamanho celular. O humor aquoso foi avaliado quanto à expressão do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α). Valores de p iguais ou inferiores a 0,05 foram considerados significativos. Com relação à densidade de células endoteliais, ambos os grupos apresentaram perdas, porém essas foram menores no G2. Relativamente à espessura corneal, não houve diferença. A hexagonalidade diminuiu significativamente no pós-operatório imediato no G1. Ainda no G1, o coeficiente de variação do tamanho celular aumentou significativamente. Não se encontrou reação marcada do TNF-α em ambos os grupos. De consoante com os resultados obtidos, admiti-se que o ácido ascórbico contribuiu para se minimizarem perdas celulares, relativamente ao endotélio corneal na facoemulsificação / Cataract is among the most common eye diseases in dogs. Phacoemulsification is the method that best fits to therapy and a favorite among veterinary ophthalmologists. The cellularity of the corneal endothelium is considered to be a condition for the success of the surgery, since a permanent endothelial injury can induce corneal decompensation. The goal of this study was to evaluate the antioxidant effects of ascorbic acid on the corneal endothelium, as well as the expression of the tumor necrosis factor alpha (TNF-α) in the aqueous humor was evaluated of dogs submitted to phacoemulsification. It was used 40 eyes of 20 dogs, male or female, with 7 to 12 years, and bilateral senile cataracts. The dogs were separated into two groups (n = 20), differing only in the composition of the solution used to irrigate the eyes in the phacoemulsification. Group 1 (G1) received balanced salt solution (BSS) and Group 2 (G2) received sterile BSS containing 0.001 M ascorbic acid. The corneal endothelium was evaluated by non-contact specular microscopy before and at different times after phacoemulsification, in terms of cell density (cells/mm2), cell area (mm2), corneal thickness (mm), hexagonality, and coefficient of variation in cell size. The expression of TNF-α in the aqueous humor was measured by competitive enzyme immunoassay. P values equal to or less than 0.05 were considered significant. Regarding the density of endothelial cells, both groups showed losses, but these were lower in G2. There were no significant differences in corneal thickness (P>0.05). The hexagonality significantly reduced in the immediate postoperative of G1. Also in G1, the coefficient of variation in cell size increased. TNF-α expression was not observed in the aqueous humor in G1 and G2. According to the results, it can be assumed that ascorbic acid was able to minimize losses in endothelial cellularity arising from phacoemulsification

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-24. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:49:01Z : No. of bitstreams: 1 000844477_20160224.pdf: 230302 bytes, checksum: 66f05aab1bad2d7e1dd02e685bcc8542 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-24T11:27:49Z: 000844477_20160224.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-24T11:28:33Z : No. of bitstreams: 1 000844477.pdf: 979544 bytes, checksum: 67169369b6a27e3882f5b7e12cfb9e6f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: A proteína anexina A1 (ANXA1) está envolvida principalmente na regulação dos processos inflamatórios, proliferativos, crescimento e diferenciação celular. Embora esses efeitos tenham sido explorados em diversas investigações, são raros os estudos na angiogênese. A terapia angiogênica consiste no controle do crescimento vascular, e a descoberta da ação da proteína ANXA1 nesse processo resultaria no desenvolvimento de novos procedimentos terapêuticos. Objetivo: em função da importância do entendimento da ação reguladora da ANXA1 na formação de novos vasos, o objetivo das nossas investigações foi avaliar, in vivo e in vitro, o mecanismo de ação dessa proteína sobre a angiogênese, na vigência do fator de crescimento do endotélio vascular - subtipo A (VEGF-A). Métodos: Nas investigações in vivo avaliamos os efeitos da ANXA1 sobre a cinética de formação de novos vasos da rede microcirculatória da região dorsal da pele de camundongos BALB/c selvagens (WT) e destituídos do gene para ANXA1 (AnxA1-/-). Na linhagem de células endoteliais de veias umbilicais humanas (HUVEC) investigamos o efeito da ANXA1 na viabilidade celular, proliferação, migração, formação de tubos, aderência e expressão de moléculas de adesão. Resultados: Os animais WT tratados com o peptídeo ANXA12-26 (1 mg/kg) ou VEGF e, os AnxA1-/- tratados com VEGF (10 ng/10 μL) apresentam aumento da neovascularização na pele. Nas células HUVEC, a análise da viabilidade não mostra diferenças significantes com ANXA12-26 nas concentrações de 1, 10 e 30 μM. Enquanto, a proliferação celular aumenta com o VEGF e/ou tratamento com ANXA12-26 (1 μM). No entanto, a migração celular aumenta após o tratamento com ANXA12-26 (10 μM) e, associado ao VEGF, nas concentrações de 10 e 30 μM. A tubulogênese aumenta após indução com VEGF e não altera após tratamento com ANXA12-26 (1, 10 ou 3... / Introduction: The annexin A1 protein (ANXA1) is mainly involved in the regulation of inflammation, proliferative, growth and cell differentiation. Although these effects have been studied in several investigations, are scarce the studies in angiogenesis. The angiogenic therapy consists in the vascular growth control, and the discovery of ANXA1 protein action in this process result in the development of new therapeutic procedures. Aim: According to the importance of understanding the ANXA1 regulatory action in the new vessels formation, the objective of our research was to evaluate in vivo and in vitro, the action mechanism of this protein on angiogenesis, in the presence of the growth factor vascular endothelial - subtype A (VEGF-A). Methods: In vivo investigations have evaluated the ANXA1 effects on the kinetics of formation of new vessels of microcirculatory network of dorsal skin of BALB/c wild (WT) and ANXA1 depleted (AnxA1-/-) mice. In endothelial cells from human umbilical vein lineage (HUVEC) investigated the effect of ANXA1 on cell viability, proliferation, migration, tube formation, cell adhesion and molecules adhesion expression. Results: The WT animals treated with peptide ANXA12-26 (1 mg/kg) and VEGF and the AnxA1-/- animals treated with VEGF (10 ng/10 μL) show an increase of neovascularization in the skin. In HUVEC cells, the viability analysis does not show significant differences with ANXA12-26 at concentrations of 1, 10 and 30 μM. While, the cell proliferation increases with VEGF and/or ANXA12-26 treatments (1 μM). However, cell migration increases after ANXA12-26 treatment (10 μM) and, associated with VEGF, in concentrations of 10 and 30 μM. The tubulogenesis increases after induction with VEGF and does not change after ANXA12-26 treatment (1, 10 or 30 μM). In contrast, VEGF associated with ANXA12-26 (10 μM) enhance the formation of tubular structures. The ANXA12-26 peptide increases the expression of β3 integrin... / FAPESP: 2013]07487-2