Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-05-28Bitstream added on 2014-06-13T19:56:37Z : No. of bitstreams: 1 marinho_fa_me_jabo.pdf: 741822 bytes, checksum: 9a88a67546cb93cce854e51f639eddcf (MD5) / Afecções que afligem o estroma corneal profundo, como as distrofias, o ceratocone, os abscessos e os sequestros da córnea são de relativa frequência. Visando ao seu tratamento, tais desordens podem ser manejadas empregando-se os transplantes corneais penetrantes. Buscou-se, com a pesquisa, avaliarem-se as condições da celularidade endotelial, à microscopia especular de não contato, à histologia e à microscopia eletrônica de varredura, na ceratoplastia penetrante em coelhos. Foram utilizados 18 animais, sadios, adultos, machos e fêmeas, com peso médio de 3,0 kg, da raça Nova Zelândia Branco. Seis grupos foram constituídos, contendo 3 animais cada. A microscopia especular foi empregada. As avaliações foram realizadas diariamente, até se completarem 30 dias e a cada três dias, até se completarem 60 dias das ceratoplastias. Colhidas, as córneas foram avaliadas à histologia e à microscopia eletrônica de varredura. Empregou-se análise de variância para medidas repetidas, com posterior avaliação pelo teste Tukey, considerando-se o nível mínimo de significância p ≤ 0,05. No pós-operatório, em face das alterações na superfície ocular, a realização da microscopia especular de não contato foi prejudicada. À histologia, evidenciaram-se edema acentuado e discreta organização estromal nas córneas receptora e doadora, ao início das avaliações. À microscopia eletrônica de varredura, não se evidenciou migração de células endoteliais do leito receptor para o doador / Diseases affecting the deep corneal stroma such as dystrophies, keratocone, abscesses and corneal sequestrum occur frequently. Those alterations may be managed by penetrating corneal transplants. On the present research the endothelial cellularity of rabbits submitted to penetrating keratoplasty was evaluated by non-contact specular microscopy, histology and scanning electron microscopy. Eighteen adult, healthy, males and females rabbits, weighting around 3.0 kg, breed New Zealand White were used. Animals were randomly assigned on 6 groups composed of 3 individuals each. Specular microscopy was employed. The animals were daily evaluated for 30 days, and every third day, until 60 days following the keratectomies. Following harvesting, the corneas were submitted to histology and scanning electron microscopy. Repeated measures Anova and Tukey's test were used for statistical analysis. Results were considered significant if p ≤ 0.05. Non-contact specular microscopy was not possible if alterations of the ocular surface were present during the post-operative period. Histological evaluation exhibited severe edema and mild stromal organization of the recipient and donor cornea during the initial post-operative period. The scanning electron microscopy, there was no endothelial cells migration from the recipient to the donor corneas

Orientador: Agnaldo Lopes da Silva Filho / Coorientador: Gilberto Uemura / Banca: Eduardo Batista Cândido / Banca: José Ricardo Paciência Rodrigues / Resumo: As células inflamatórias estão presentes no câncer de mama e podem promover o desenvolvimento do tumor assim como estimular imunidade anti-tumoral. A Nacetilglucosaminidase (NAG) é utilizada para detectar o acúmulo/ativação de macrófagos teciduais. A mieloperoxidase (MPO) é considerada marcador de acúmulo/ativação de neutrófilos. O Fator de Crescimento Endotelial Vascular (VEGF) é potente citocina pró-angiogênica. O objetivo deste estudo foi medir a resposta inflamatória sistêmica, medindo os níveis séricos de MPO, NAG, e VEGF em mulheres diagnosticadas com câncer de mama e associar esta resposta ao infiltrado inflamatório peritumoral e a fatores prognósticos. As amostras de soro obtidas de mulheres sem evidências de doenças (n=31) e com câncer de mama (n=68) foram analisadas por meio de ensaio enzimático para obter-se a atividade de MPO, NAG, e VEGF. Os níveis séricos de NAG e VEGF foram maiores em voluntários saudáveis (p<0,0001) e os níveis séricos de MPO foram maiores em pacientes com câncer de mama (p=0,002). Os níveis séricos de NAG apresentaram correlação positiva com os níveis séricos de MPO e VEGF (p<0,0001 e p=0,0012, respectivamente), assim como os níveis de MPO e VEGF (p=0,0018). O infiltrado inflamatório não foi associado aos níveis séricos dos marcadores inflamatórios, e níveis mais elevados de MPO foram associados à negatividade para invasão linfovascular (p=0,0175) / Abstract: Not available / Mestre

Orientador: Eros Antonio de Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T01:47:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Hernandes_DorivalBlaquer_M.pdf: 1038635 bytes, checksum: f87a9f0cf9cca81b3827e6b7fefdbb9b (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Objetivo: este estudo teve como objetivo detectar o efeito da rosuvastatina sobre os lípides plasmáticos, peroxidação lipídica, colesterol tecidual e disfunção endotelial e comparar seus efeitos com a atorvastatina em coelhos hipercolesterolêmicos. Métodos: Quarenta coelhos machos da raça Nova Zelândia foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos: Grupo Hipercolesterolêmico (GH), Grupo não Hipercolesterolêmico (GN), Grupo Atorvastatina (GA) e Grupo Rosuvastatina (GR) (N = 10). Todos os animais foram alimentados com dieta complementada com gordura de côco 10% e colesterol 0,5% por 45 dias e água a vontade. Após 15 dias amostras de sangue foram colhidas dos grupos através de punção venosa para determinação do colesterol plasmático total. A rosuvastatina era administrada por gavagem, na dose de 2,5 mg/dia/animal e a atorvastatina na dose de 10 mg/dia/animal aos Grupos GR e GA. No final do experimento, novas amostras de sangue foram coIbidas para determinação do colesterol total e isolamento de LDL. Os animais foram sacrificados por deslocamento cervical, êra realizada Toracotomia, a aorta era removido e preparado anéis de 5mm para o estudo da função endotelial, medindo colesterol tecidual, MDA na parede da aorta e LDLs. Os resultados foram comparados por métodos estatísticos não - paramétricos. Resultados: Ao analisar os resultados deste trabalho, podem ser observadas redução dos níveis de CT, 44,1 % e 66%, TG 53,16%, 23,11 %, LDL 53% e de, 40,68%, e um aumento de 17,23%, 36,98% do HDL e uma melhora na função endotelial de 33,09%, 22,37%, respectivamente, em relação a comparação GA e GR. Com o GH. Conclusão: Os resultados mostraram que rosuvastatina e atorvastatina foram equivalentes na redução das susceptibilidades de LDL de sofrer peroxidação, diminuindo o colesterol tecidual e melhorando a função endotelial / Abstract: Objective: The aim of this study was to detect the effect of the rosuvastatin on plasmatic lipids, lipidic peroxidation, tis sueI cholesterol, and endothelium disfunction and to compare its effect with the atorvastatin in hypercholesterolemic rabbits. Methods: Forty male New Zealand white rabbits were randomized in Four Groups: Group Hypercholesterolemic (GH), Group No Hypercholesterolemic (GN), Group Atorvastatin (GA) and Group Rosuvastatin (GR). (N=lO). AlI the animaIs were fed with diet supplemented with fat of coconut 10% and cholesterol 0.5% w/w per 45 days. After 15 days samples of blood were removed from the groups through venous punction for total plasmatic cholesterol determination. Then the rosuvastatin was managed by gavage, in the dose of 2,5mg and Atorvastatin in the dose of 10mg per day to each animal of Groups GR. and GA. In the end of the experiment, new samples of blood were renioved for determination of the cholesterol and isolation pf LDL. The animals were sacrificed by displacement of the cervical column. Medium Toracotomia was carried out and the aorta was removed for ring preparation for study of the endothelium function, measured of tissue cholesterol, MDA in the walI of aorta and LDLs. The results were compared by not-parametric statistical methods. Results: When analyzing the results of this work, a reduction in the CT levels can be observed, of 44,1 % and 66%, TG 53.16%, 23.11%, LDL 53% and of, 40.68%, and an increase of 17,23%, 36.98% of HDL, 33.09%, 22.37% in the endothelium function respectively for the compared GA and GR. with the GH. Conclusion: The results have sh6wn that rosuvastatin and atorvastatin were equivalent in reducing the susceptibilities of LDL to suffer peroxidation, in decreasing the tecidual cholesterol and improving the endothelium function / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Fernanda Klein Marcondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:25:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Neves_VanderJosedas_M.pdf: 681977 bytes, checksum: 464ec8f4e4c7ed9de2fae2bed0778c12 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Complicações metabólicas e vasculares podem resultar em aterosclerose, que constitui um grave problema de saúde pública, sendo responsável por cerca da metade da mortalidade relacionada a doenças cardiovasculares no mundo ocidental. Portanto, estudar os fatores de risco associados a esta patologia é fundamental para que se possa estabelecer diretrizes de tratamento e prevenção de distúrbios cardiovasculares. O estresse crônico e a ingestão de dietas hipercalóricas têm sido reconhecidos como fatores de risco para doenças cardiovasculares e para a aterosclerose, por seus efeitos potencialmente deletérios sobre o sistema cardiovascular. O objetivo deste estudo foi avaliar, em ratos, os efeitos aterogênicos do estresse crônico moderado e imprevisível (ECMI), associado ou não à ingestão de dieta hipercalórica, sobre a sensibilidade às catecolaminas em átrio direito e aorta torácica, sobre a morfologia vascular e a influência de lipídios nas alterações funcionais e morfológicas observadas. Buscando avaliar os mecanismos relacionados aos efeitos do estresse crônico, associado ou não, ao consumo de dieta hipercalórica, apresentamos nos capítulos 1 e 2, resultados de estudos in vitro. No capítulo 1, foi mostrado que o ECMI promove supersensibilidade à fenilefrina em aorta torácica isolada de ratos, aumento da espessura do endotélio e da camada média vascular, dislipidemia aterogênica, e elevado índice aterogênico, em relação ao grupo controle, sem alteração da sensibilidade atrial à noradrenalina. Tais alterações parecem estar relacionadas à diminuição da síntese de óxido nítrico endotelial e aumento das concentrações séricas de lipoproteína de baixa densidade (LDL) em ratos submetidos ao ECMI. No capítulo 2 foi mostrado que, em animais não submetidos a estresse, a dieta hipercalórica promoveu aumento da adiposidade e das concentrações séricas de LDL, sem alterações nas concentrações de colesterol total e triglicerídeos, e sem alterações funcionais ou estruturais na aorta torácica. O ECMI promoveu supersensibilidade vascular à fenilefrina, aumento da espessura do endotélio e da camada média vascular e elevação da concentração sérica de LDL em ratos tratados com dieta hipercalórica e em animais tratados com dieta controle, em relação aos respectivos grupos não submetidos a estresse. Além disso, o ECMI promoveu alterações contrárias sobre a adiposidade nos grupos tratados com dieta controle e dieta hipercalórica, diminuindo a adiposidade no primeiro grupo e elevando-a no segundo, em relação aos grupos tratados com a mesma dieta e não submetidos a estresse. Considerando que, apesar de elevadas concentrações de LDL, não houve alterações funcionais ou estruturais na aorta torácica de ratos alimentados com dieta hipercalórica, não submetidos ao ECMI, e que, embora tenha ocorrido maior elevação nas concentrações de LDL em ratos estressados tratados com dieta hipercalórica, as alterações funcionais e morfológicas observadas na aorta torácica e as concentrações de corticosterona deste grupo não diferiram em relação aos animais estressados alimentados com dieta controle. Os resultados apresentados nos capítulos 1 e 2 indicam que o estresse crônico parece potencializar os efeitos aterogênicos das LDL / Abstract: Metabolic and vascular complications can result in atherosclerosis, which constitutes a great problem of public health, associated to approximately half of the deaths related to the cardiovascular illnesses in the occidental world. Therefore to the establishment of guidelines for treatment and prevention of cardiovascular diseases, it is important to study risk factors associated to this pathology. Chronic stress and hypercaloric diet ingestion have been recognized as risk factors for cardiovascular diseases because of its potential deleterious effect on the cardiovascular system. The aim of this work was to evaluate, in rats, the atherogenic effects of chronic mild unpredictable stress (CMS) associated or not to the ingestion of hypercaloric diet on the sensitivity of right atria and thoracic aorta to catecholamines, on the vascular morphology and the influence of lipids in the possible functional and morphological vascular alterations. In order to evaluate the mechanisms related to the effects of chronic stress, associated or not to the consumption of hypercaloric diet, we present in the chapters 1 and 2, results of in vitro studies. In the chapter 1, it was shown that CMS promotes supersensitivity to phenylephrine in thoracic aorta isolated from rats, increases the endothelium and tunica media thickness, atherogenic dyslipidemia, and higher atherogenic index, in comparison with the control group, without alteration in the atrial sensitivity to noradrenaline. These alterations seem to be related to the inhibition of endothelial nitric oxide production and to the increase in the seric levels of low-density lipoprotein (LDL) in rats submitted to the CMS. In chapter 2, it was shown that in non-stressed-animals, hypercaloric diet promoted an increase in the adiposity and seric levels of LDL, without alterations in the levels of total cholesterol, triglicerides and without functional or structural changes in the thoracic aorta. The CMS promoted vascular supersensitivity to phenylephrine, increased the endothelium and tunica media thickness and increased the seric levels of LDL in rats treated with hypercaloric diet and control diet, in comparison with the groups that were not submitted to stress. Furthermore, the CMS promoted contrary alterations on the adiposity in the groups treated with control and hypercaloric diet, decreasing the adiposity in the first one and increasing it in the second group, in comparison with the respective groups treated with the same diet, but not submitted to the CMS. Considering that in spite of high levels of LDL, there were no functional or morphological changes in the thoracic aorta from rats treated with hypercaloric diet and not submitted to the CMS, and that despite the biggest rise in the LDL levels in stressed rats treated with hypercaloric diet, there was no difference between this group and stressed rats treated with control diet in the functional and morphological changes observed in the thoracic aorta as well in the corticosterone levels, the results presented in the chapter 1 and 2, indicate that chronic stress seems to increase the atherogenic effects of the LDL / Mestrado / Fisiologia Oral / Mestre em Odontologia

Orientador: Ana Paula Couto Davel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-24T14:07:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Victorio_JamairaAparecida_M.pdf: 1155350 bytes, checksum: eab5bb2760f0d9abd7c5e93ac2b95b51 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A hiperativação dos receptores ß-adrenérgicos (ß-AR) tem importante papel na patogênese de doenças cardiovasculares que cursam com hiperatividade simpática. Dentre os seus efeitos, sugere-se a indução da síntese e liberação de angiotensina II e de aldosterona sistemicamente. A hiperativação dos receptores ß-AR pode ser mimetizada pelo tratamento crônico com isoproterenol (ISO). Já foi demonstrado que o antagonismo do receptor AT1 de angiotensina II ou do receptor de mineralocorticoides (MR) previne parcialmente o remodelamento cardíaco induzido pelo ISO. Entretanto, ainda não está elucidado o envolvimento da angiotensina II e da aldosterona nos efeitos vasculares causados pela hiperativação dos receptores ß-AR. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar as vias de sinalização dos receptores AT1 e MR nas alterações vasculares causadas pelo tratamento por 7 dias com ISO em aorta de ratos, assim como os mecanismos envolvidos. Ratos Wistar (3 meses) foram tratados com ISO (0,3 mg/kg/dia, s.c.) ou veículo (CT) e co-tratados ou não com o antagonista do receptor AT1 losartan (LOS; 40 mg/kg/dia) ou com o antagonista do receptor MR espironolactona (ESP; 200 mg/kg/dia). O tratamento com ISO causou hipertrofia ventricular sem alterações hemodinâmicas, e o co-tratamento com LOS ou ESP atenuaram o remodelamento ventricular observado. Na aorta do grupo ISO observou-se um aumento da resposta máxima à fenilefrina associado à redução da biodisponibilidade de óxido nítrico (NO) e aumento de ânion superóxido, os quais foram prevenidos pelo co-tratamento com ESP, mas não com LOS. O efeito preventivo da ESP sobre a reatividade vascular da aorta dos ratos ISO foi acompanhado de aumento da expressão proteica da HSP90, a qual foi reduzida no grupo ISO. Além disso, a ESP preveniu o aumento da expressão proteica de ß-arrestina, Gai, p-Src, ERK1/2, p- ERK1/2 e gênica de osteopontina na aorta deste grupo. As concentrações plasmáticas de corticosterona ou aldosterona não foram alteradas entre os grupos avaliados. Em conjunto, os dados sugerem que o antagonismo do receptor MR com o uso de espironolactona previne o aumento da resposta contrátil à fenilefrina observada em aorta de ratos tratados com ISO, associado a: aumento da biodisponibilidade de NO e redução do estresse oxidativo; aumento da expressão de HSP90, a qual estabiliza a forma dimérica da eNOS; e prevenção do aumento da expressão proteica de ß- arrestina, Gai1,2, p-Src, ERK1/2 e p-ERK1/2 e gênica de osteopontina, vias de sinalização de estresse oxidativo e prejuízo da função endotelial / Abstract: ß-adrenergic (ß¿AR) receptors overstimulation plays an important role in the pathogenesis of cardiovascular diseases concurrent with sympathetic overactivity. It has been suggested to increase plasma levels of angiotensin II and aldosterone. In line with this, angiotensin II/AT1 receptor or mineralocoticoid (MR) receptor antagonism partially prevents the cardiac remodeling induced by ß-AR overstimulation mediated by isoproterenol (ISO) administration. However the implication of angiotensin II or aldosterone on vascular effects provoked by ß¿AR overstimulation is not yet elucidated. So, the aim of the present study was to investigate the AT1 and MR receptor signaling pathway on vascular alterations caused by 7-day ISO treatment on rat aorta, as well as the mechanisms involved. For this, male Wistar rats (3-month-old) were treated with ISO (0.3 mg/kg/day, s.c.) or vehicle (CT) and co-treated or not with AT1 antagonist losartan (LOS; 40 mg/kg/day, v.o.) or MR receptor antagonist spironolactone (ESP; 200 mg/kg/day, v.o.). The ISO treatment resulted in ventricular hypertrophy without hemodynamic alterations, and LOS or ESP co-treatment attenuated the ventricular remodeling of ISO group. ISO aorta showed an increased phenylephrine maximum response associated with a decreased nitric oxide (NO) bioavailability and an increased in superoxide anion; both effects were prevented by ESP co-treatment, but not by LOS. Beneficial effects of ESP on vascular reactivity of aorta from ISO-treated rats were accompanied by an increased HSP90 protein expression, which was reduced in ISO group. Moreover, ESP prevented the increased protein expression of ß-arrestin, Gai, p- Src, ERK1/2 and p-ERK1/2 and osteopontina gene expression in the aorta from ISO group. Plasma corticosterone and aldosterone were not changed between the groups. In conclusion, our results suggest that spironolactone, an MR receptor antagonist prevented the increased phenylephrine contractile response in aorta from ISO-treated rats, associated with increased NO bioavailability and decreased oxidative stress; increased expression of HSP90 and; prevented the increase of ß-arrestin, Gai1,2, p-Src, ERK1/2 and p-ERK1/2 and osteopontin induced by ß-adrenergic overstimulation. These results suggest that the vascular effects induced by ISO in aorta are mediated by a MR activation / Mestrado / Fisiologia / Mestra em Biologia Funcional e Molecular

CIBA VISION S.A. (Barcelona)

Realizamos estudios hemodinámicos in vivo, in vitro con anillos aórticos y estudios bioquímicos sobre 3 grupos: Ratas SD castradas, con operación simulada y castradas con tratamiento sustitutivo con 17bEstradiol. La ovariectomía indujo un incremento de la Presión Arterial y disminución del Índice Cardíaco, acompañados de una alteración de la vasodilatación arterial por disfunción endotelial. Esta alteración parece deberse a una disminución en la liberación de Óxido Nítrico (NO) y a un alteración del estado redox. La terapia de sustitución con 17bEstradiol previno los cambios hemodinámicos observados tras la ovariectomía, y restauró la función de NO y el estado redox. Tras bloqueo de la síntesis de NO, la administración directa de Estradiol incrementó las resistencias vasculares sistémicas, mediado por una potenciación endógena de la acción de la Angiotensina II. La administración precoz de 17bEstradiol tras la ovariectomía es beneficiosa para el sistema cardiovascular, pero en situaciones de disfunción endotelial es perjudicial. / We did haemodynamic studies in vivo, in vitro with aortic rings and biochemical studies on three groups: SD ovariectomized rats, sham-operated rats and ovariectomized rats with 17bEstradiol replacement therapy. Ovariectomy induced Hypertension and decreased Cardiac Index, accompanied by an alteration of arterial vasodilation secondary to an endothelial dysfunction. This disorder appears to be due to a decrease in the release of Nitric Oxide (NO) and an alteration of redox state. 17bEstradiol Replacement therapy prevented hemodynamic changes observed after ovariectomy, and restored the function of NO and redox state. After blocking the synthesis of NO, the direct administration of Estradiol increased systemic vascular resistance mediated by potentiation of the action of endogenous Angiotensin II. Early administration of 17bEstradiol after ovariectomy is beneficial to the cardiovascular system, but in situation of endothelial dysfunction is detrimental.

La acumulación leucocitaria es una característica de los primeros estadios de la lesión aterosclerótica, de infarto agudo de miocardio y de enfermedades renales de diversa etiología. Receptores para Angiotensina-II (Ang-II) han sido hallados en monocitos y Ang-II puede promover la activación y adhesión de estas células. Este proceso podría desencadenar o perpetuar el daño endotelial asociado a aterosclerosis e hipertensión. Los resultados de nuestro estudio demuestran que Ang-II, a dosis subvasoconstrictoras y fisiológicas, presenta propiedades proinflamatorias in vivo a nivel agudo; en concreto, produce acumulación leucocitaria en vénulas de la microcirculación mesentérica de la rata a través del aumento de expresión de P-selectina endotelial, efecto mediado mediante interacción con sus receptores específicos AT1 y AT2. Sin embargo, el hecho más relevante de este trabajo es que al administrar Ang-II de forma subaguda se produce adhesión leucocitaria no sólo a nivel venular sino también a nivel arteriolar, hecho que podría relacionarla directamente con el inicio de la lesión aterosclerótica. Las respuestas leucocitarias inducidas por Ang-II a nivel agudo pueden ser moduladas por antioxidantes, por compuestos capaces de aumentar los niveles de AMPc, GMPc y por estrógenos. Además, en circunstancias de disfunción endotelial producida por falta de vasodilatadores como NO o PGI2, se produce una rápida respuesta inflamatoria la cual está mediada por Ang-II ya que el tratamiento con el antagonista selectivo frente al receptor AT1 inhibió la infiltración leucocitaria y los cambios hemodinámicos debidos a la carencia de estos vasodilatadores. / Leukocyte accumulation in the vascular wall is a hallmark of the early stages of atherosclerotic lesions, myocardial infarction and several renal diseases. Ang-II receptors have been detected on human monocytes and are capable of promoting monocyte adhesion and activation in vitro. Therefore, Ang-II may be the stimulus for the subendothelial infiltration of leukocytes observed in hypertension and atherosclerosis, in both of which conditions plasma levels of this peptide are elevated. In this study, we show that subvasoconstrictor and physiologically relevant doses of Ang-II (0.1 to 1 nmol/L) elicit leukocyte-endothelial cell interactions within the rat mesenteric microvenules. This effect is both AT1 and AT2 receptor-mediated and is dependent on endotelial P-selectin expression. However, the most relevant finding of the present work is that subacute Ang-II administration induces arteriolar leukocyte adhesion, which may directly implicate Ang-II in the onset of atherosclerotic lesions. Acute leukocyte responses induced by Ang-II are modulated by antioxidants, estrogens and compounds that increase the levels of AMPc and GMPc. Eventually, when the vascular balance is disrupted by falling levels of vasodilators such as NO or PGI2, there is a rapid arterial leukocyte adhesion. This adhesion is predominantly Ang-II dependent, as pretreatment with a selective AT1-antagonist receptor inhibits leukocyte infiltration and haemodynamic changes.

Darbo tikslas: Nustatyti adenozino receptorių (AR) genų raišką (informacinės RNR lygyje) plaučių kraujagyslių endotelio ląstelėse ir žiurkės plaučiuose, jų pokyčius esant hipoksijai, įvertinti AR poveikį endotelio ląstelių proliferacijai. Darbo uždaviniai: 1) Ištirti žiurkės plaučių smulkių kraujagyslių endotelio (PSKE) ir žiurkės plaučių arterijos endotelio (PAE) AR genų raišką, veikiant hipoksijai. 2) Nustatyti AR agonistų poveikį PSKE ląstelių proliferacijai. 3) Nustatyti AR genų raiškos pokyčius žiurkės plaučiuose esant hipoksijai. 4) Nustatyti adenozino receptorių A3 (A3R) pasiskirstymą plaučių arterinės hipertenzijos (PAH) paciento plaučių mėginyje, taikant imunohistocheminį tyrimą. Darbo metodai: genų raiška nustatyta taikant kiekybinę tikro laiko polimerazės grandininę reakciją (KTL-PGR) naudojant “Taqman®” pradmenis ir zondus adenozino receptoriams. Ląstelių proliferacija įvertinta tričiu žymėto timidino (3H-timidino) įjungimu į ląstelių DNR. A3R pasiskirstymas PAH paciento plaučiuose įvertinamas, taikant imunohistocheminį tyrimą. Tyrimo rezultatai: PSKE ląstelėse rasta adenozino receptorių A2B ir A3R. Hipoksijos aplinkoje A2BR genų raiška padidėjo 2 kartus po 24 val., 5 kartus po 40 val. A3R genų raiška sumažėjo 2 kartus po 24 val., 6 kartus po 40 valandų. PAE ląstelėse rasta AR: A1, A2AR ir A2BR. Hipoksijos aplinkoje A1R genų raiška padidėjo 2,5 karto po 24 val. ir išliko padidėjusi po 40 val. A2AR genų raiška padidėjo 2 kartus po 24 val. ir išliko padidėjusi... [toliau žr. visą tekstą] / Aims: Determine adenosine receptors (AR) gene expression in rat pulmonary microvascular endothelial cells (RPMVEC), rat pulmonary artery endothelial cells (RPAEC) and rat lungs during hypoxic conditions. Evaluate effects of adenosine receptors agonist to PRMVEC proliferation. Objectives: 1) Identify AR in RPMVEC and RPAEC. 2) Evaluate AR changes in RPMVEC and RPAEC during hypoxic conditions. 3) Determine adenosine receptors expression in rat lungs exposed to chronic hypoxia. 4) Perform immunohistochemical staining of A3R on a lung section from patient with pulmonary arterial hypertension (PAH). Methods: Adenosine receptors gene expression was determined by quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) assay using “TaqMan®” primers. Cell proliferation was determined using a tritium labeled thymidine (3H-thymidine) assay. Immunohistochemistry was performed on paraffin embedded lung tissue sections. Results: RPMVEC express A2BR and A3R. During hypoxic conditions A2BR was upregulated 2-fold after 24 h. and 5-fold after 40h of hypoxic exposure. A3R was downregulated 2- fold after 24h. and 6-fold after 40h. RPAEC express A1R, A2AR and A2BR. During hypoxic conditions A1R expression was increased 2,5-fold after 24h and 40h. A2AR was upregulated 2-fold after 24h and 40h. A2BR expression was increased 2,5-fold after 24h and 40h of hypoxic exposure. The A3R agonist HEMADO treatment for 24h at the concentration of 10-7 M, increased RPMVEC proliferation 1,5-fold. AR... [to full text]

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-20Bitstream added on 2014-06-13T20:50:30Z : No. of bitstreams: 1 potje_sr_me_araca.pdf: 486426 bytes, checksum: fbbc778d219e6341b4ac4c430b070e73 (MD5) / O efeito hipotensor do TERPY é aumentado em SHR em comparação com ratos normotensos Wistar (WST), mas o seu relaxamento em anéis de aorta sem endotélio não difere entre os grupos. Trabalhamos com a hipótese de que o desacoplamento da óxido nítrico sintase (NOS) ou espécies reativas de oxigênio (EROs) podem prejudicar a biodisponibilidade de óxido nítrico (NO) liberado pelo TERPY e NPS (nitroprussiato de sódio) em seus efeitos hipotensores e vasodilatadores em SHR. Avaliamos o efeito do L-NAME (inibidor da NOS), da APOCININA (bloqueadora da NOX) e do TEMPOL (mimético da superóxido dismutase) na resposta hipotensora e na vasodilatação induzida pelos doadores de NO, TERPY e NPS, em aortas de WST e SHR. L-NAME aumentou o efeito hipotensor do TERPY em WST, mas não em SHR. Este efeito não foi alterado pelo TEMPOL, mas foi aumentado pela APOCININA em ambos os grupos. Essas drogas não alteraram o efeito hipotensor do NPS. A remoção do endotélio ou incubação com L-NAME diminuiu a potência do TERPY na aorta de SHR e aumentou na aorta de WST. TEMPOL e APOCININA aumentaram a potência do TERPY em aortas de WST e de SHR. Estes efeitos são independentes do endotélio em SHR e sensíveis ao endotélio em WST. A presença do endotélio e a incubação com TEMPOL ou APOCININA aumentou a potência do NPS em aortas de WST e SHR. Em conclusão, o efeito hipotensor do TERPY é prejudicado pela NOS em WST e pela NOX em WST e SHR. Por outro lado, o efeito hipotensor do NPS é semelhante em WST e SHR, que é independente da NOS e de EROs. Em aortas, EROs derivadas do endotélio prejudicam o relaxamento do TERPY em anéis de aorta de WST e SHR, e EROs liberadas a partir de células do músculo liso vascular (CMLV) também participam dessa resposta apenas em aortas de SHR / The hypotension of TERPY is increased in SHR compared to Wistar (WST) rats, but its relaxation in denuded aortic rings is not different. We hypothesized that NO-synthase uncoupling or reactive oxygen species (ROS) could impair the NO bioavailability released from TERPY and SNP in their hypotensive and vasorelaxant effects in SHR. We evaluated the effect of the inhibitors L-NAME (NO-synthase) and APOCYNIN (NOX), and TEMPOL (superoxide dismutase mimetic) in the hypotensive effect and aorta vasodilatation induced by NO-donors in WST and SHR. L-NAME increased TERPY's hypotensive effect in WST, but not in SHR. This effect was not altered by TEMPOL, but it was increased by APOCYNIN in both groups. These drugs did not alter the SNP's hypotensive effect. Endothelium removal, or L-NAME, decreased the potency of TERPY in SHR aorta and increased it in WST aorta. TEMPOL and APOCYNIN increased the potency of TERPY in WST and SHR aortas. These effects are endothelium independent in SHR, and endothelium dependent in WST. Endothelium, TEMPOL and APOCYNIN increased the potency of SNP in aortas of WST and SHR. In conclusion, TERPY's hypotensive effect is impaired by NOS in WST and by NOX activity in WST and SHR. Otherwise, the hypotensive effect of SNP is similar in WST and SHR, which is independent of NOS and ROS. In aortas, ROS derived from endothelium impairs the relaxation of TERPY in aortic rings of WST and SHR, but ROS from vascular smooth muscle also participates in this response in SHR aorta