Submitted by Maria Beatriz Vieira (mbeatriz.vieira@gmail.com) on 2017-05-02T13:55:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_diego_severo_fraga.pdf: 1548587 bytes, checksum: c109de985c27f806698e98816b90240d (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-02T17:57:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_diego_severo_fraga.pdf: 1548587 bytes, checksum: c109de985c27f806698e98816b90240d (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-02T17:58:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_diego_severo_fraga.pdf: 1548587 bytes, checksum: c109de985c27f806698e98816b90240d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-02T17:59:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_diego_severo_fraga.pdf: 1548587 bytes, checksum: c109de985c27f806698e98816b90240d (MD5) Previous issue date: 2016-03-22 / Sem bolsa / A rotação da cultura da soja ao arroz irrigado e sucessão com azevém pode ser considerado opção para manejo de plantas daninhas em área de terras baixas, principalmente o arroz-vermelho. Além disso, o surgimento de novas tecnologias de soja resistente a herbicidas do grupo das imidazolinonas como a Cultivance® pode auxiliar o produtor de sementes no controle de plantas daninhas quando associadas a sistemas de manejo como “plante-aplique” e “aplique-plante”. Dessa forma, os objetivos da pesquisa foram avaliar a fitotoxicidade, os componentes da produtividade e a qualidade fisiológica das sementes de cultivares de soja contendo as tecnologias Cultivance®, tolerância a sulfonilureias e Roundup Ready®, frente ao resíduo de doses crescentes da mistura dos herbicidas imazapyr e imazapic, aplicado no manejo da cultura do arroz irrigado; avaliar a permanência do resíduo do herbicida no solo em virtude do acúmulo de massa da matéria seca da parte aérea de plantas de azevém, semeadas em sucessão com a cultura da soja; quantificar a atividade da enzima ALS em cultivares de soja resistentes ou suscetíveis ao herbicida imazapic; avaliar as alterações nos metabólitos secundários de plantas de soja contendo essas tecnologias, submetidas a mistura dos herbicidas imazapyr e imazapic nos sistemas de manejo “plante-aplique e “aplique-plante”. Para isso, foram realizados experimentos em campo, casa-de-vegetação e laboratório da Universidade Federal de Pelotas, Embrapa Clima Temperado e Embrapa Trigo, utilizando diferentes cultivares de soja submetidas ao herbicida imazapyr+imazapic. Os resultados demonstraram que a cultivar de soja contendo a tecnologia Cultivance® é resistente a mistura dos herbicidas imazapyr e imazapic aplicado no manejo do arroz irrigado, porém, as demais cultivares são suscetíveis. O resíduo do herbicida afeta a produtividade e a qualidade fisiológica da semente das cultivares estudadas. A massa da matéria seca da parte aérea do azevém, é reduzida na presença do resíduo do herbicida. O KM (concentração de piruvato) da enzima ALS das cultivares de soja são semelhantes, contudo o Vmáx (velocidade máxima da reação) da cultivar resistente é menor, comparado às demais, supondo-se que a resistência da cultivar contendo a tecnologia Cultivance® pode ser decorrente da insensibilidade da enzima ALS ao herbicida imazapic. As cultivares suscetíveis apresentam, em geral, maior teor de clorofila e sofrem maior ação das espécies reativas de oxigênio, comparadas a resistente. A elevação da dose da mistura dos herbicidas imazapyr e imazapic aumenta a ação do sistema antioxidante enzimático, por meio das enzimas superóxido dismutase, catalase e ascorbato peroxidase, independente do sistema de manejo. / Soybean crop rotation with irrigated rice and sucession with ryegrass may be considered an option to weed management in flooded area, mainly for red rice. Besides that new technologies appearance of soybean herbicide resistant of imidazolinone group such as Cultivance® may help seed farmers in the weed control when associated to management systems such as “plant-apply” and “apply-plant”. Thus the reseach objectives were evaluate phytotoxicity, yield components and physiological quality of soybean seeds’ cultivars containing Cultivance®, sulfonylurea tolerant and Roundup Ready® technologies, as affected by carryover of increasing doses of mixture of herbicides imazapyr and imazapic spraying in management of irrigated rice crop; evaluate herbicide carryover in soil due ryegrass shoot dry matter, seeded in sucession with soybean crop; quantify ALS enzyme activity in soybean cultivars resistants or susceptibles to imazapic herbicide; evaluate the changes on secondary metabolism of soybean plants containing these technologies, submmited to mixture of herbicides imazapyr and imazapic in “plant-apply” and “apply-plant” management systems. Therefore experiments were performed on field, greenhouse and laboratories in the Federal University of Pelotas, Embrapa Temperate Climate and Embrapa Wheat, using differents soybean cultivars submmited to imazapyr+imazapic herbicide. The results showed that soybean cultivar containing Cultivance® technology is resistant to mixture of herbicides imazapyr and imazapic sprayed in management of irrigated rice, but the others cultivars are susceptibles. The herbicide carryover affect the crop yield and physiological quality of seed of the studied cultivars. Ryegrass shoot dry matter is affected by herbicide carryover. ALS enzyme KM (pyruvate concentration) of soybean cultivars are similar, however the Vmáx (maximum reaction speed) of resistant cultivar is minor, compared with the other cultivars, supposing that the resistance of the cultivar containing Cultivance® technology may be due insensibility ALS enzyme to imazapic herbicide. The susceptibles cultivars show, in general, more chlorophyll and suffer more action of reactives oxygen species, compared to resistant. The increasing dose of mixture of herbicides imazapyr and imazapic enhance the action of enzymatic antioxidant system, by means of superoxide dismutase, catalase and ascorbate peroxidase enzymes, independent of management system.

Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2017-02-20T18:17:14Z No. of bitstreams: 1 Maria Jaislanny Lacerda e Medeiros.pdf: 909590 bytes, checksum: 0e95c9fcfcaf2b83dfef908431276982 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-20T18:17:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Jaislanny Lacerda e Medeiros.pdf: 909590 bytes, checksum: 0e95c9fcfcaf2b83dfef908431276982 (MD5) Previous issue date: 2010-02-05 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Sugarcane is one of the main agricultural products in the economic and social scenario Brazilian and maintenance, as well as increased production and productivity is linked to genetic improvement with selection of new genotypes that have the characteristics of agronomic interest. The techniques of tissue culture can be used in studies of selection or evaluation of the tolerance of plants contributing to clarify the changes from the conditions of stress. The productivity of sugarcane is influenced by several environmental factors such as salinity that limits production due to osmotic effects and ion toxicity by absorption of Na+ and Cl-. Salt stress increase the concentration of reactive oxygen species (ROS), may promote oxidative stress and cause injury to lipids, proteins, carbohydrates and DNA. To minimize the damage caused by the accumulation of ROS, plants possess the antioxidant defense system involving substances of nature enzyme (catalase-CAT, peroxidase-POD, ascorbate peroxidase-APX and polyphenoloxidase, PPO) and not enzyme as the proline. The objectives of this study were to evaluate the effects of exogenous proline in cultivation in vitro of sugarcane submitted to salt stress and analyze the biochemical changes that occur in these conditions. Plants were micropropagated genotypes RB931011 and RB872552. Plants were grown, for 20 days, in the absence or presence of 20 mM proline with or without 100 mM NaCl, totaling five treatments. We used a completely randomized design with 2x5 factorial (genotype x treatment). Leaf samples were collected proceeding to analysis of endogenous levels of proline and total soluble proteins, percentage of electrolyte leakage, concentration of Na+ and K+ and activity of enzymes CAT, POD, APX and PPO. The data were analyzed using ANOVA and means compared by Tukey test at 5% probability. In the saline treatments, both genotypes showed an increase in electrolyte leakage, caused possibly, by lipid peroxidation. Plants grown under salt stress showed a reduced content of total soluble protein and in parallel maintenance or increase in the endogenous proline content. The salt also promoted the increase in the concentration of Na+ and decreased K+ generating thus a high ratio Na+/K+. The activity of CAT, POD, APX and PPO, responsible for the elimination of ROS, increased with increasing salinity in both genotypes. The RB931011 genotype had a greater acclimation compared to genotype RB872552 due to the largest increase in endogenous proline content and increased activity of antioxidant enzymes resulting in minor membrane damage. / A cana-de-açúcar é um dos principais produtos agrícola no cenário econômico e social brasileiro e sua manutenção, bem como o aumento de produção e produtividade está ligado ao melhoramento genético com seleção de novos genótipos que apresentem características de interesse agronômico. As técnicas de cultura de tecidos podem ser utilizadas em estudos de seleção ou avaliação da tolerância de plantas contribuindo no esclarecimento das alterações provenientes das condições de estresse. A produtividade da cana-de-açúcar sofre influência de diversos fatores ambientais como a salinidade que limita a produção devido aos efeitos osmóticos e de toxidade iônica pela absorção de Na+ e Cl-. O estresse salino aumenta a concentração de espécies reativas de oxigênio (ROS), podendo promover estresse oxidativo e provocar injúrias aos lipídeos, proteínas, carboidratos e DNA. Para minimizar os danos causados pelo acúmulo de ROS, as plantas possuem o sistema antioxidativo de defesa que envolve substâncias de natureza enzimática (catalase-CAT, peroxidase-POD, ascorbato peroxidase-APX e polifenoloxidase-PPO) e não enzimática como a prolina. Os objetivos desse estudo foram avaliar a ação de prolina exógena no cultivo in vitro de genótipos de cana-de-açúcar submetidos ao estresse salino e analisar as alterações bioquímicas que ocorrem nessas condições. Foram utilizadas plantas micropropagadas dos genótipos RB931011 e RB872552. As plantas foram cultivadas, durante 20 dias, na ausência ou presença de 20 mM de prolina associada ou não a 100 mM de NaCl, totalizando cinco tratamentos. Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado com fatorial 2x5 (genótipo x tratamento). Amostras de folhas foram coletadas procedendo-se análises dos teores de prolina endógena e proteínas solúveis totais, porcentagem de extravasamento de eletrólitos, concentração dos íons Na+ e K+ e atividade das enzimas CAT, POD, APX e PPO. Os dados foram submetidos à análise de variância ANOVA, e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Nos tratamentos salinos, ambos os genótipos apresentaram aumento no extravasamento de eletrólitos, causado, possivelmente, pela peroxidação lipídica. As plantas cultivadas sob estresse salino apresentaram redução no teor de proteínas solúveis totais e paralelamente ocorreu uma manutenção ou acréscimo no teor de prolina endógena. O sal também promoveu o aumento na concentração de Na+ e diminuição de K+ gerando, consequentemente, uma elevada relação Na+/K+. A atividade das enzimas CAT, POD, APX e PPO, responsáveis pela eliminação de ROS, aumentaram em função da salinidade em ambos os genótipos. O genótipo RB931011 apresentou uma maior aclimatação ao estresse salino quando comparado ao genótipo RB872552 devido ao maior aumento do teor de prolina endógena e maior atividade das enzimas antioxidantes o que resultou em um menor dano de membrana.

Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2017-02-20T18:31:01Z No. of bitstreams: 1 Marina Medeiros de Araujo Silva.pdf: 1111837 bytes, checksum: fa89f364f5e0242c84916270c538f88a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-20T18:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marina Medeiros de Araujo Silva.pdf: 1111837 bytes, checksum: fa89f364f5e0242c84916270c538f88a (MD5) Previous issue date: 2010-02-09 / The somatic embryogenesis is a technique of in vitro culture applied in clonal propagation of plants and regeneration of genetically transformed cells, in addition to supporting basic studies related to morphological, molecular and biochemical events that happen during the embryogenic process. The initial stages of this morphogenic pathway are characterized by the induction of genes related to stress, which leads to the hypothesis that somatic embryogenesis is an extreme response to stress in plant cells cultivated in vitro. In this work, were induced embryogenic pathways direct and indirect in the RB 872552 variety of sugarcane and analyzed the activity of enzymes from antioxidant system in order to assess the correlation between somatic embryogenesis and regulation of oxidative stress. For the direct pathway (ESD), were applied four treatments (TS, TD, TG e TA) based on protocols previously described for sugarcane. These protocols differed as to the composition of the medium and incubation condition (dark or light period of 16 hours) in a completely randomized design with 10 replications per treatment. For the indirect pathway (ESI), were used by eight different treatments combinations of four concentrations of 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid) and two Fe-EDTA, in a factorial 4x2 and 20 replicates per treatment. Were calculated the indices of embryo formation (IFE) and callus (IFC) and evaluated the activity of catalase, peroxidase and polyphenoloxidase. Somatic embryos were visualized only in the treatment of ESD plus 2,4-D and BAP (6-benzylaminopurine), and treatment of ESI with 8 mg.L-1 2,4-D. The conversion of somatic embryos into plants was performed in culture medium without added phytoregulators. The activity of antioxidant enzymes was obtained by reading of a spectrophotometer, from the extract obtained from embryogenic and non-embryogenic tissues treatment of ESD. The polyphenoloxidase and catalase activity increased in non-embryogenic tissue, whereas peroxidase was less active in these tissues when compared to embryogenic. It was found that the induction of somatic embryogenesis in the variety studied is related to oxidative stress and that these antioxidant enzymes may become important as biochemical markers of this process. / A embriogênese somática é uma técnica de cultivo in vitro aplicada na propagação clonal de plantas e na regeneração de células transformadas geneticamente, além de auxiliar estudos básicos relacionados aos eventos morfológicos, moleculares e bioquímicos que ocorrem durante o processo embriogênico. As fases iniciais dessa via morfogênica são caracterizadas pela indução de genes relacionados ao estresse, o que leva à hipótese de que a embriogênese somática é uma resposta extrema ao estresse de células de plantas cultivadas in vitro. Neste trabalho, foram induzidas as vias embriogênicas direta e indireta na variedade RB 872552 de cana-de-açúcar e analisada a atividade de enzimas do sistema antioxidante, a fim de avaliar a correlação entre a embriogênese somática e a regulação do estresse oxidativo. Para a via direta (ESD), foram aplicados quatro tratamentos (TS, TD, TG e TA) baseados em protocolos já descritos para cana-de-açúcar. Esses protocolos diferiam quanto à composição do meio e condição de incubação (escuro ou fotoperíodo de 16 horas), em delineamento inteiramente casualizado, com 10 repetições por tratamento. Para a via indireta (ESI), foram utilizados oito tratamentos diferenciados pelas combinações de quatro concentrações de 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) e duas de Fe-EDTA, em esquema fatorial 4x2 e 20 repetições por tratamento. Foram calculados os índices de formação de embriões (IFE) e de calo (IFC) e avaliada a atividade da catalase, peroxidase e polifenoloxidase. Embriões somáticos foram visualizados apenas nos tratamentos de ESD acrescidos de 2,4-D e BAP (6-benzilaminopurina), e no tratamento de ESI com 8 mg.L-1 de 2,4-D. A conversão de embriões somáticos em plantas foi realizada em meio de cultura sem adição de fitoreguladores. A atividade das enzimas antioxidantes foi obtida através de leitura feita em espectrofotômetro, a partir do extrato obtido de tecidos embriogênicos e não embriogênicos dos tratamentos de ESD. A atividade da polifenoloxidase e da catalase aumentou em tecidos não embriogênicos, enquanto que a peroxidase foi menos ativa nesses tecidos quando comparada aos embriogênicos. Evidenciou-se que a indução da embriogênese somática na variedade estudada está relacionada ao estresse oxidativo e que estas enzimas antioxidantes podem exercer papel relevante como marcadores bioquímicos deste processo.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O oxigênio é importante não só por sua participação no metabolismo energético, mas também por sua conversão em derivados parcialmente reduzidos, as espécies reativas de oxigênio (ERO). ERO participam de funções importantes em diversas vias do metabolismo, entretanto, em concentrações desequilibradamente elevadas deflagram a peroxidação lipídica, processo deletério que forma aldeídos tóxicos, como o 4-hidroxi-2-nonenal (4-HNE). A manutenção de concentrações não deletérias das ERO é realizada por moléculas componentes do sistema antioxidante. Peixes podem ser expostos a grandes variações das concentrações de oxigênio, o que provoca ciclos oxidantes. A maioria dos estudos usa fígado e rim para avaliar estresse oxidante por meio de ensaios das atividades antioxidantes, o que requer o sacrifício dos animais. Contudo, o sangue sofre efeitos das ERO e avaliações no sangue podem permitir o estudo de antioxidantes no mesmo animal, sem a necessidade de sacrifício. Em consequência, foram nossos objetivos estabelecer uma técnica de cateterismo branquial em peixes, a padronização dos ensaios e a avaliação em sangue de componentes do sistema antioxidante de duas espécies de teleósteos em diferentes tensões de oxigênio. Pacus e tilápias foram avaliados em 6,0 mg de O2.L-1 e em hipoxia a 0,5 mg de O2.L-1 por 42 horas . Para os ensaios de hiperoxia os animais foram avaliados em 6,0 mg de O2.L-1, depois de 6 horas em 9,5 mg de O2.L-1 e depois de 30 horas de recuperação a 6,0 mg de O2.L-1. A utilização de materiais para o cateterismo de humanos permitiu a implantação de um acesso branquial. Infelizmente, houve formação de trombo após 24 horas. Mesmo assim, a observação de fluxo sanguíneo no interior da cânula e a sobrevida dos animais testados, confirmam a viabilidade da técnica. Verificamos em sangue uma maior atividade da enzima glutationa S-transferase (GST) sobre o 4-HNE em relação ao 1-cloro-2-dinitrobenzeno (CDNB). Isto reflete a importância de avaliações de atividade de enzimas, como a GST, sobre substratos endógenos. As respostas enzimáticas de tilápias mostraram-se mais sensíveis que as dos pacus quando comparadas em diferentes tensões de oxigênio. / Oxygen is important not only for their role in energy metabolism, but also for its conversion into partially reduced derivatives, the reactive oxygen species (ROS). ROS participate in important roles in several metabolic pathways, however, at concentrations lopsidedly high they trigger lipid peroxidation process to form deleterious toxic aldehydes such as 4-hydroxy-2-nonenal (4-HNE). Maintenance of non deleterious concentrations of ROS molecules is performed by components of the antioxidant system. Fish may be exposed to large variations in the concentrations of oxygen, which causes oxidative cycles. Most studies use liver and kidney to assess oxidative stress through antioxidant activities assay, which requires the sacrifice of animals. However, the blood undergoes effects of ROS and evaluations in blood may allow the study of antioxidants in the same animal, without the need of sacrifice. Consequently, our objectives were to establish a catheterization technique in fish gill, standardization of testing and evaluation of components of blood antioxidant system of two species of teleost in various oxygen tensions. Pacus and tilapias were evaluated at 6.0 mg O2.L-1 hypoxia and 0.5 mg O2.L-1 for 42 hours. For assays of hyperoxia animals were evaluated at 6.0 mg O2.L-1, after 6 hours at 9.5 mg O2.L-1 and after 30 hours recovery at 6.0 mg O2.L-1. The use of materials of human catheterization allowed the implantation of a gill access. Unfortunately, there was thrombus formation after 24 hours. Nevertheless, the observation of blood flow within the cannula and survival of the animals tested, confirm the viability of the technique. We found blood in a higher activity of glutathione S-transferase (GST) on the 4-HNE compared to 1-chloro-2-dinitrobenzene (CDNB). This reflects the importance of assessing the activity of enzymes, such as GST with endogenous substrates. The enzymatic responses of tilapia were more sensitive than those of pacus when compared to different oxygen tensions.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adeline Neiverth.pdf: 1649092 bytes, checksum: d7d182e371115519785a39ebe6e95aee (MD5) Previous issue date: 2011-07-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Wheat is the most important staple food of the world. The increase in grains productivity and protein content is correlated to increase inorganic nitrogen absorption. Usually, urea is the most convenient source of N2, but, it causes the increase in crops costs beyond injuries to the environment. The BNF realized by diazotrophics bacteria is an alternative to supplement or replace the nitrogen fertilizers and promote plant growth. The objective of this study was to evaluate the performance of Brazilian wheat genotypes for PCV( plant promoter growth) and BNF by association between diazotrophic bacteria (H. seropedicae SmR1) and wheat cultivars under in vitro and greenhouse conditions. In in vitro experiment, eight wheat plantlets of 8 genotypes were tested in tubes with liquid culture medium and these were co-cultured for 7 days with 107 cells.mL-1. As control plantlets without inoculum under the same conditions were used. The experimental design was completely randomized in a 2 x 8 factorial with 3 repetitions. We analyzed the fresh mass of roots, fresh and dry weight of shoots, total nitrogen (TN) content of NH4 +, microbial counting (CFU), glutamine synthetase activity (GS), the morphology of the roots by microscopy and molecular analysis of epiphytic and endophytic bacteria recovered after co-cultivation. In the greenhouse, it was planted five wheat genotypes. The seeds were placed in pots with 4.5 kg of soil under four treatments: 1 - Control 2 - Addition of N as urea (142 kg ha-1 of N) 3 - Addition of inoculum containing H. seropedicae (106 cells.mL-1) (Hs) and 4 - Addition of inoculum containing urea + H. seropedicae (N + Hs). The experimental design was completely randomized in a factorial 5 x 4 with 5 repetitions. The fresh mass of roots, fresh and dry weight of shoots, NT, NH4 + content and GS activity were evaluated. As agronomic parameters were evaluated the whole plant mass at the end of the phenological cycle, yield per plant and weight of 100 seeds.As results in vitro, it was observed the presence of epiphytic bacteria on the roots of all genotypes and the presence of endophytic bacteria in genotypes CD 105, CD 108, CD 111, CD 117, CD 120. There was a sharp increase of root hairs in the genotypes CD 105, CD 117, CD 119 and CD120. The cultivars CD 105 and CD 120 by the presence of endophytic bacteria showed an increase of root hairs, probably it may be the most promising for a response of BNF. The levels of NH4 +, NT and GS in the roots were not decisive for in vitro plant growth promotion. The results obtained in the greenhouse showed significant interactions among parameters, although there were were not crucial for the definition of a specific genotype which answers to the interaction. However, there was a contribution to be further studied, where the CD 120 cultivar showed evidence of association with response to the bacterium and possible occurrence of the BNF. There was no negative effect of inoculation to plants. Additional studies are needed to get answers about the interactions of these genotypes with diazotrophic bacteria related to BNF and plant growth promotion / Os fertilizantes nitrogenados são fontes convenientes de nitrogênio para a cultura de trigo, porém geram altos custos e podem ser poluentes. A fixação biológica de nitrogênio (FBN) é uma fonte alternativa de nitrogênio por meio das bactérias diazotráficas. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o desempenho de genótipos de trigo brasileiros para a FBN e promoção do crescimento vegetal (PCV) associados com a bactéria diazotrófica H. seropedicae SmR1, sob condições in vitro e em casa de vegetação. Nas condições in vitro, colocou-se plântulas de 8 genótipos de trigo em tubos de ensaio com meio de cultura líquido, co-cultivadas durante 7 dias com 107células de bactéria.mL-1. O mesmo número de plântulas foi mantido nas mesmas condições, porém sem inóculo. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, num esquema fatorial 8 x 2 com 3 repetições. Analisou-se a massa fresca de raízes, massa fresca e seca de parte aérea, o nitrogênio total (NT), conteúdo de amônio (NH4+), contagem microbiana (UFC), Glutamina sintetase (GS), a morfologia das raízes por microscopia e análise molecular das bactérias endofíticas e epifíticas recuperadas após co-cultivo. Em casa de vegetação, foram avaliados 5 genótipos de trigo, onde o delineamento experimental foi inteiramente casualizado num esquema fatorial 5 x 4 com 5 repetições, onde: 1 Testemunha; 2 Adição de N na forma de ureia, 142 kg ha-1 de N; 3 Adição de inóculo contendo H. seropedicae, 106 celulas por semente (Hs) e 4 Adição de ureia + inóculo (N+Hs). Avaliaram-se a massa fresca de raízes, massa fresca e seca de parte aérea, o NT, conteúdo de NH4+ e a atividade da GS. Como parâmetros agronômicos avaliaram-se a massa da planta inteira no final do ciclo fenológico, produção por planta e massa de 100 grãos. Como resultados, observou-se in vitro a presença de bactérias epifíticas nas raízes de todos os genótipos e presença de bactérias endofíticas não foi verificada nos genótipos CD 104, CD 119 e CD 150. Verificou-se um aumento acentuado de pêlos radiculares nos genótipos CD 105, CD 117, CD 119 e CD120. As cultivares CD 105 e CD 120 pela presença da bactéria endofiticamente associado com o aumento de pêlos radiculares, podem ser as mais promissoras para uma resposta da FBN. As plântulas inoculadas apresentaram senescência precoce. Os níveis de NH4+, GS e NT nas raízes não foram determinantes para a promoção do crescimento vegetal. Os resultados obtidos em casa de vegetação demonstram que, apesar de ter havido interações significativas, os parâmetros não foram determinantes para a definição de um genótipo que apresentasse uma resposta conclusiva a respeito da interação benéfica entre genótipo COODETEC e H. seropedicae. No entanto, observou-se uma contribuição a ser mais bem estudada, onde a cultivar CD 120 mostrou indícios de resposta à associação com a bactéria e possível ocorrência da FBN. Não foi observado nenhum efeito negativo da inoculação às plantas. Estudos complementares são necessários para obter respostas quanto às interações destes genótipos com estas bactérias diazotróficas, no processo de colonização, da FBN e da PCV

Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2018-05-07T11:51:08Z No. of bitstreams: 1 LARISSA RIBAS RIBEIRO.pdf: 853387 bytes, checksum: b07d078ec1ece03014fcfd9275152a65 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T11:51:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LARISSA RIBAS RIBEIRO.pdf: 853387 bytes, checksum: b07d078ec1ece03014fcfd9275152a65 (MD5) Previous issue date: 2017-11-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES# / #2075167498588264571# / #600 / Introduction: Chronic kidney disease (CKD) is characterized by progressive decrease in glomerular filtration rate (GFR), eventually reaching the end-stage renal disease (ESRD) requiring renal replacement therapy (RRT). The decrease in GFR is associated with a gradual and linear increase in cardiovascular mortality. Dysfunction of the autonomic nervous system (ANS) with sympathetic overactivity has been well documented in patients with CKD, especially in people with ESRD. The renal ischemia causes both the excessive activation of the renin-angiotensin-aldosterone system (RAAS) by increasing renin release, as sympathetic ANS, through the afferent sympathetic nerves. The overactivated RAAS and sympathetic SNA feedback each other, which contributes to cardiovascular disease (CVD) in CKD. Despite the clear involvement of these systems in the pathogenesis of CVD in CKD, randomized clinical trials using drugs that block the RAAS or sympathetic SNA have not shown significant effects in the frequency of cardiovascular events in this population. A possible explanation for these negative findings is the genetic heterogeneity, such as the polymorphism in the gene for angiotensin converting enzyme (ACE). Objectives: To investigate the correlation between polymorphisms in the ACE gene and heart rate variability (HRV), a noninvasive tool used to assess ANS activity, in patients with CKD on hemodialysis treatment. Hypotheses: The D allele of the ACE gene, associated with increased activity of the RAAS, would be associated with increased sympathetic activity, which is reflected in lower HRV. If confirmed, the finding could point the subgroup of patients that may get additional benefit of drugs that act on the sympathetic and RAAS systems. Methodology: quantitative and cross-sectional study. The sample will consist of at least 129 adult patients with CKD on hemodialysis treatment (HD) for more than 90 days. It wil be obtained sociodemographic data, previous medical history and medications used. HRV analysis will be conducted through Micromed® ECG machine with registration pulse interval variance, root mean square of squared differences between consecutive intervals (RMSSD) and the percentage of intervals greater than 50 milliseconds (pNN50), a low frequency band (LF) and high frequency (HF), at a time of normovolemia after a midweek HD session. Analysis of hydration status will be made through multi-Frequency bioimpedance device. Polymorphism of the ACE gene will be assessed by polymerase chain reaction method in peripheral blood sample. Data analysis will be performed by ANOVA with comparison of the LF / HF ratio, a component of HRV analysis, between polymorphisms II, ID and DD of the ACE gene. Multivariate analysis with linear regression will be applied using as dependent variables the HRV parameters, and as independent variables the polymorphisms of ACE gene and all variables known to influence HRV, for adjustment purposes. The data will be analyzed using the statistical package STATA 14.0. / Introdução: A doença renal crônica (DRC) caracteriza-se pela redução progressiva da taxa de filtração glomerular (TFG), eventualmente alcançando o estágio de doença renal crônica terminal (DRCT) com necessidade de terapia renal substitutiva (TRS). A diminuição da TFG está associada a um aumento progressivo e linear na mortalidade cardiovascular. A disfunção do sistema nervoso autônomo (SNA) com hiperatividade simpática tem sido bem documentada em pacientes portadores de DRC, especialmente na população com DRCT. A isquemia renal provoca tanto a ativação exagerada do sistema renina-angiotensina-aldosterona (SRAA), através do aumento da liberação de renina, quanto do SNA simpático, por meio dos nervos simpáticos aferentes. O SRAA e o SNA simpático, ambos hiperativados, se retroalimentam mutuamente, o que contribui para a doença cardiovascular (DCV) na DRC. Apesar da clara participação destes sistemas na gênese da DCV da DRC, ensaios clínicos randomizados utilizando drogas que bloqueiam o SRAA ou SNA simpático não têm mostrado efeitos significativos na redução de eventos nessa população. Uma possível explicação para esses resultados negativos seria a heterogeneidade genética, como por exemplo, o polimorfismo no gene da enzima conversora da angiotensina (ECA). Objetivos: Investigar a associação entre polimorfismos no gene da ECA e a variabilidade da frequência cardíaca (VFC), uma ferramenta não invasiva utilizada na avaliação da atividade do SNA, em pacientes portadores de DRC em tratamento por hemodiálise. Metodologia: Estudo quasi experimental do tipo antes e depois. A amostra foi composta por 114 pacientes adultos portadores de DRC em tratamento por hemodiálise (HD) há mais de 90 dias. Foram obtidos dados sociodemográficos, história clínica pregressa e medicamentos em uso. A análise da VFC foi realizada através de aparelho de eletrocardiograma Micromed® com registro do desvio padrão de todos os intervalos normais (SDNN), raiz quadrada da média dos quadrados das diferenças entre intervalos consecutivos (RMSSD), banda de baixa frequência (LF) e de alta frequência (HF), em momento de normovolemia, após uma sessão de HD do meio da semana. A análise do estado de hidratação foi realizada através de aparelho de bioimpedância multi-frequencial. O polimorfismo do gene da ECA foi avaliado por método de reação em cadeia da polimerase em amostra de DNA de sangue periférico. A análise dos dados foi realizada por ANOVA, com comparação da razão LF/HF, componente da análise da VFC, entre os polimorfismos II, ID e DD do gene da ECA. Análise multivariada com regressão linear foi aplicada utilizando como variáveis dependentes os parâmetros da VFC e como variáveis independentes foram incluídos os polimorfismos do gene da ECA juntamente com variáveis que sabidamente influenciam a VFC, para efeito de ajuste. Os dados foram analisados através do pacote estatístico STATA 15.0.

Peptídeos bioativos são de grande interesse tanto para a indústria farmacêutica como para a de alimentos e são obtidos a partir da hidrólise enzimática de várias fontes protéicas, como as do leite, glúten de milho, soja, e músculos de suínos, aves e peixes. Estes peptídeos podem desempenhar atividades benéficas para a saúde, entre elas, a regulação ou inibição de enzimas, com destaque à inibição da enzima conversora da angiotensina I (ECA). Esta enzima é responsável pela clivagem de dois importantes substratos envolvidos na regulação da pressão arterial, a angiotensina I e a bradicinina. Neste trabalho foi estudada a atividade inibitória da ECA em hidrolisados dos peixes tilápia tailandesa (Oreochromis niloticus - linhagem tailandesa) e corvina (Micropogonias furnien) . Os \"minced\" destes peixes foram hidrolisados com pepsina e proteases de Streptomyces griséus por 5 horas em condições ideais de pH e temperatura. A atividade inibitória foi avaliada pela medida da atividade residual da enzima sobre substrato sintético fluorescente. Os hidrolisados com um grau de hidrólise de cerca de 34% apresentaram atividade inibitória semelhante, com valor de IC50 = 0,040 e 0,036 mg proteína/mL, respectivamente para a tilápia e a corvina. Observou-se aumento da atividade inibitória com o progresso da hidrólise, sendo que este aumento também está relacionado com a especificidade das enzimas proteolíticas. Em outro experimento observou-se que os peptídeos presentes no hidrolisado de tilápia inibiram indistintamente os domínios C e N terminais da ECA, não demonstrando especificidade. A atividade inibitória dos hidrolisados foi mantida após submetê-los à ação de enzimas proteolíticas gastrointestinais, indicando a sua provável estabilidade \"in vivo\". Da mesma forma, o minced de tilápia quando incubado sucessivamente com pepsina/tripsina/quimotripsina produziu peptídeos ativos (IC50 = O,025mg proteína/mL). Apesar do reduzido grau de hidrólise obtido neste ensaio (17%), os peptídeos liberados apresentaram atividade inibitória elevada, confirmando que a atividade não está relacionada apenas com o grau de hidrólise, mas também com a sequência de aminoácidos, liberados em função da especificidade das enzimas. Concluiu-se que o consumo destes peixes, ou seus respectivos hidrolisados poderá eventualmente, auxiliar na prevenção e no tratamento não medicamentoso da hipertensão, embora estudos \"in vivo\" sejam necessários para comprovar as suas funções biológicas. / Bioactive peptides have been highly valued by pharmaceutical industries and by food industries as well. These peptides can be released by the enzymatic hydrolysis of various protein sources such as milk, com gluten, soybean, muscles of pigs, chicken and fish and have been recognized to exhibit important health benefits. Among these, the regulation or inhibition of enzymes, like the inhibition of the angiotensin I-converting enzyme (ACE) have been focused. This enzyme is responsible for the cleavage of two important substrates, angiotensin I and bradykinin, both of them involved with the regulation of blood pressure. In this study the inhibitory activity of hydrolysates from tilapia tailandesa (Oreochromis niloficus - linhagem tailandesa) and corvina (Micropogonias furnien) was evaluated. The hydrolysates of the minced fishes were produced in a 5-hour lasting controlled process under optimal conditions of pH and temperature by the sequential action of pepsin and enzymes from Streptomyces griseus. Inhibitory activity was evaluated by measuring the residual activity of the enzyme on a synthetic fluorescent peptidic substrate. The extent of hydrolysis was about 34% and the hydrolysates of tilapia and corvine showed similar inhibitory activity (IC50 of 0.040 and 0.036 mg protein/mL), respectively. An íncrease of activity proportional to the degree of hydrolysis was observed, as well as a relationship with the specificity of the enzymes used. In another experiment it was observed that the bioactive peptides present in the hydrolysate of tilapia did not show specificity for the C- and N-terminal catalytic domains of the angiotensin I-converting enzyme. The inhibitory activity of the hydrolysates was still active afier a further hydrolysis by gastrointestinal enzymes, which seems to indicate an eventual activity in vivo. In a similar way, when the minced tilapia was consecutively incubated with pepsine, trypsin, chymotrypsin active peptides were produced with an activity of IC50 = 0.025 mg protein/mL. Despite the low extend of hydrolysis of about 17%, a high inhibitory activity was observed confirming that activity is not only related to the degree of hydrolysis but also to the sequence of aminoacids and therefore, to the specificity of the enzymes as well. It was concluded that the intake of fish or fish hydrolysates has the potential to help control or to prevent hypertension by a non-drug food-based treatment.

En este trabajo se evaluó la utilidad de una serie de marcadores: triglicéridos, ácido úrico, forma soluble de la tirosín kinasa 1 (sFlt-1), factor de crecimiento placentario (PlGF), múltiplo de la mediana de la proteína plasmática A asociada al embarazo (MoM PAPP-A), antígeno sérico CA125 (CA125), enzima convertidora de angiotensina (ECA) y el estudio ecográfico Doppler, como posibles predictores de preeclampsia en el primer y segundo trimestre de gestación. Se incluyeron un total de 68 gestantes con “riesgo a priori” de desarrollar preeclampsia (diabetes mellitus tipo I, enfermedad renal preexistente, hipertensión crónica sin proteinuria, etc) y un grupo control. De esas 68 gestantes, 8 desarrollaron preeclampsia. La combinación de marcadores más eficiente fue utilizando el PlGF del primer trimestre con un punto de corte ≤37,6 pg/ml, un índice de resistencia ≥0,7 y la ECA≥ 40,4 U/L del segundo trimestre, pudiendo predecir el 87,5% de las gestantes que desarrollarían preeclampsia. / This study evaluated the usefulness of several biomarkers: triglycerides, uric acid, soluble fms-like tyrosine kinase-1 (sFlt-1), placental growth factor (PlGF), multiple of the median of pregnancy associated plasma protein-A (PAPP-A MoM), serum antigen CA125 (CA125), angiotensin converting enzyme (ACE) and the Doppler ultrasound as predictors of preeclampsia in the first and second trimester of pregnancy. We included a total of 68 pregnant women with "a priori risk" of develop preeclampsia (type I diabetes mellitus, preexisting renal disease, chronic hypertension without proteinuria, etc) and a control group. Of those 68 pregnant women, 8 developed preeclampsia. The most efficient combination of the studied biomarkers was the use of PlGF in the first-trimester with a cut-off ≤37.6 pg/ml, a resistance index ≥0.7 and ACE ≥40,4 U/L in the second trimester which can predict 87,5% of pregnant women who develop preeclampsia.

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No entanto, ainda n?o se sabe se estes eventos est?o envolvidos na patog?nese das LPCG e LCCG. O objetivo deste trabalho foi avaliar a express?o de FASN e o grau de angiog?nese entre LPCG e LCCG, al?m de verificar a correla??o entre essas vari?veis. Assim, 13 casos de LCCG e 14 casos de LPCG foram selecionados para an?lise da express?o imunoistoqu?mica de FASN, CD34, CD105 e D2-40. A express?o de FASN foi avaliada nos componentes celulares da les?o, seguida da mensura??o da densidade microvascular (DMV) e ?rea microvascular (AMV) para cada uma das amostras selecionadas. Os dados coletados foram submetidos ? an?lise descritiva e sequencialmente aos testes de Mann Whitney, teste t para amostras independentes e testes de correla??o de Pearson e Spearman. Os resultados do nosso estudo indicam que: (1) n?o h? diferen?as na imunoexpress?o de FASN entre os grupos de les?es (CM ? 8% FASN+ / CGM ? 38% FASN+); (2) LPCG possuem maior DMV em CD34; n?o houve diferen?as na DMV em CD105 e D2-40 entre as les?es. A AMV em LPCG foi maior que em LCCG para CD34, CD105 e D2-40; (3) em LPCG houve correla??o positiva entre (CM ? FASN+ com DMV/CD105); (4) nas LCCG houve correla??o positiva entre (CM ? FASN+ com DMV/CD105), (CM ? FASN+ com AMV/CD105 e CD34), (CGM ? FASN+ com AMV/CD105). A partir dos resultados obtidos concluiu-se que os n?veis similares da express?o imunoistoqu?mica de FASN indicam processos constitutivos da manuten??o tissular de ambas as les?es. No entanto, as diferen?as na vasculariza??o, entre os grupos de les?es, parecem ser influenciadas por CM positivas para FASN. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Odontologia, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2012. / ABSTRACT There is still a lot of discussion about the pathophysiology of Peripheral Giant Cell Lesion (PGCL) and Central Giant Cell Lesion (CGCL). These lesions show distinct clinical features, although they have similar histological characteristics. Thus, immunohistochemical studies in PGCL and CGCL are being done to improve understanding these diseases. It has been reported that high level of FASN and angiogenesis are linked with tumors development. However, remains unknown whether these events are involved in the pathogenesis of LPCG and LCCG. The aim of this research was to study FASN expression and angiogenesis degree between PGCL and CGCL, in addition, verify the correlation between this variables. Thus, 13 cases of CGCL and 14 cases of PGCL were selected and examined by immunoexpression of FASN, CD34, CD105 and D2-40. The immunoexpression of FASN was assessed in components cells of lesions, followed by measurement of Microvassel Density (MVD) and Microvassel Area (MVA) for each selected sample. Data collected was submitted to descriptive analysis and followed by Mann Whitney test, ?t? test to independent samples and Person?s and Spearman?s correlation. The results of this study indicate that: (1) there are no differences in FASN immunoexpression between group lesions (MC ? 8% FASN+ / MGC ? 38% FASN+); (2) PGCL have greater MVD in CD34 than CGCL; there are no MDV differences in CD105 and D2-40 between lesions. PGCL have greater MVA in CD34, CD105 and D2-40 than CGCL; (3) in PCGL there was a positive correlation between (MC ? FASN+ and MVD/CD105); (4) in CGCL there was a positive correlation between (MC ? FASN+ and MVD/CD105), (MC ? FASN+ and MVA/CD105 and CD34), (MGC ? FASN+ and MVA/CD105). With base on these results it is concluded that similar expression of FANS levels indicate constituent process of tissue maintenance in both lesions. On the other hand, differences on angiogenesis between lesions seem be influenced by FASN+ mononuclear cells.

Estudamos a relação entre fenótipos do diabetes e obesidade com o genótipo da ECA, em humanos e camundongos. Analisamos fenótipos relacionados com obesidade em 1600 indivíduos da população de Vitória (genotipados para o polimorfismo I/D da ECA) e em camundongos com 1 a 3 cópias do gene da ECA, submetidos ou não à dieta rica em gordura ou diabetes. Camundongos com 3 cópias e alimentados com dieta rica em gordura apresentaram menor peso, gordura periepididimal e insulinemia. Já no grupo diabético os camundongos com 3 cópias apresentaram maior mortalidade. A relação fenótipo e genótipo encontrada nos camundongos repetiu-se no estudo populacional. Estes resultados dão suporte à idéia de que o gene da ECA é um importante fator determinante nos fenótipos relacionados a doenças complexas como a síndrome X. / We studied the relationship between obesity and diabetes phenotypes with ACE genotypes using a human population (1600 individuals where ACE I/D polymorphism was determined) and engineered ACE mice models (nondiabetic or diabetic under high fat diet or control diet). Body weight, periepididymal adipose tissue weight and insulin levels were lower in 3 copies under high fat diet. Diabetic 3 copies mice had higher mortality. Presence of D allele was significantly associated with decreased body fat percentage in individuals who were at increases risk of being hyperinsulinemic. Taken together these results provide evidence for a direct role of ACE in obesity phenotypes, which may be important to unravel the complexities of metabolic syndrome.