Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 929339 bytes, checksum: fddfad690cd5f53dd8bcd64c3c0e07a5 (MD5) Previous issue date: 2012-12-20 / In vitro production of pig embryos has yet taken unsatisfactory results due to low production blastocyst, the percentage of embryos produced from oocytes matured in vitro is lower than those matured in vivo. Several factors affect the success of maturation, however, the oocyte competence is one of the most important factors. Only competent oocytes are able to undergo fertilization and have normal embryonic development. The oocyte competence can be evaluated from various parameters such as morphology of the oocyte, follicle size, stained with cresyl brilliant blue (BCB), the time of cleavage and age of the donor. In recent years these parameters have been used for studies of gene expression associated with the task. This study aimed to evaluate differences in gene expression BMP15, RYBP, MATER, ZAR1 and using the constitutive gene GAPDH as endogenous control in immature oocytes of different morphological classes which are: 1, 2, 3 and 4 to elucidate the mechanisms required for oocyte acquires competence and provide important molecular markers linked to the development capability. Oocytes total RNA was extracted and used as a template for synthesis of cDNA first tape. The results of gene expression were analyzed using a mixed model, considering the gene expression data dependent and independent variables oocyte classes. Genes BMP15, RYBP ZAR1 and showed similar expression oocyte in categories 1, 2 and 3, only 4 categories differ in their expression (P <0.05). The MATER gene was expressed similarly in all categories oocyte studied (P> 0.05). The qPCR technique, in this work, was efficient to detect these transcripts in oocytes of different categories. However, to better understand the involvement of these transcripts in the acquisition of oocyte competence are needed most studies evaluating different morphological classes of oocytes at different stages of development and implication of other genes involved in oocyte competence. / A produção in vitro de embriões suínos ainda tem tidos resultados insatisfatórios devido a baixa de produção de blastocisto, a porcentagem de embriões produzidos de ovócitos maturados in vitro é inferior àqueles maturados in vivo. Diversos fatores interferem no sucesso da maturação, entretanto, a competência ovocitária é um dos fatores mais importantes. Somente ovócitos competentes são capazes de sofrer a fecundação e ter desenvolvimento embrionário normal. A competência ovocitária pode ser avaliada a partir de vários parâmetros, tais como morfologia do ovócito, tamanho do folículo, coloração com brilliant cresyl blue (BCB), momento da clivagem e idade da doadora. Nos últimos anos esses parâmetros têm sido utilizados para os estudos da expressão dos genes associados com a competência. Este trabalho teve por objetivo avaliar diferenças na expressão dos genes BMP15, RYBP, MATER, ZAR1 e como controle endógeno o gene constitutivo GAPDH em ovócitos imaturos de diferentes classes morfológicas sendo elas: 1, 2, 3 e 4. Como finalidade elucidar os mecanismos necessários para que o ovócito adquira competência e proporcionar importantes marcadores moleculares relacionados com a capacidade de desenvolvimento. O RNA total ovócitos foi extraído e utilizado como molde para a síntese da primeira fita de cDNA. Os resultados da expressão gênica foram analisados utilizando um modelo misto, considerando os dados de expressão gênica variável dependente e as classes ovocitárias variáveis independentes. Os genes BMP15, ZAR1 e RYBP apresentaram expressão semelhante nas classes ovocitárias 1, 2 e 3, somente a categoria 4 diferiu na expressão desses genes (P<0,05). O gene MATER foi expresso de forma semelhante em todas as classes ovocitárias estudadas (P>0,05). A técnica de qPCR, no presente trabalho, foi eficiente para detecção destes transcritos em ovócitos de diferentes classes. No entanto, para melhor entendimento do envolvimento desses transcritos na aquisição da competência ovocitária são necessários mais estudos avaliando ovócitos de diferentes classes morfológicas, em diferentes fases de desenvolvimento e implicação de outros genes envolvidos com a competência ovocitária.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1590039 bytes, checksum: 13d7ea7a1ad688110149bf5448ece2d8 (MD5) Previous issue date: 2003-05-08 / This work had as objective the administration of an luteolytic agent (Cloprostenol Sodic-Ciosin) in different doses and routes, to evaluate the synchronization rates, interval of the application to the estrus, hormonal plasma concentrations of progesterone (P4) and pregnant rates of fresh embryos transferred. Still, genital organs of bovine females were collected at slaughterhouses for the study of the angioarchitecture, through veined infusions of radiographic contrasts. There were used 199 Holstein-Zebu embryo recipients with corporal score &#8805; 3,0 in a scale from 1 to 5 and live weight among 320-450 kg. A total of 103 animals presented historic of estrus previous to the treatments (between days 7-16 of the estrous cycle; estrous = day 0) and 96 animals didn't present historic of estrous, these were examined by rectal palpation for the presence of ripe CL in one of the ovaries. The animals were randomly assigned to three experimental groups. Treatment 1: 68 animals (38 with report of previous estrus) received 1 mL of Cloprostenol via intra-vulvo-submucosal (IVSM). Treatment 2: 66 animals (33 with report of previous estrus) received 1 mL of Cloprostenol via intramuscular (IM) and in Treatment 3, 65 animals (32 with report of previous estrus) received 2 mL of Cloprostenol via IM. It was considered immobility reflex as an indicative of estrous and only the animals that showed estrus up to 96 hours after the application of the Cloprostenol were used. The averages of plasma progesterone concentrations (P4) were analyzed by RIA in the moment previous to the application of the drug and 48 hours after. There was no difference in synchronization rates (P>0,05) between the three treatments (72,1%, 53,0% , 64,6%, respectively), when just the animals with report of previous estrus were appraised (76,3%, 60,6% , 68,8%, respectively) and when the animals without report of previous estrus were appraised (66,7%, 45,5% , 60,6%, respectively). The answer interval to the estrus was similar (p >0,05) among the three treatments (69,3± 15,2; 67,9± 16,7; 68,3± 16,9 hours, respectively), but they showed differences (p<0,05) when the animals with report of estrus were divided in luteal classes, in witch animals belonging to days 11-13 of estrous cycle showed larger intervals (75,3 ± 13,3 hours), in relation to days 7-10 of the estrous cycle (63,6 ± 18,3 hours) and to days 14-16 (61,1 ± 11,3 hours). Synchronization rates were similar among the three luteal classes (P>0,05). Regarding pregnant rates there were not differences (P>0,05) in the animals fertility among the three treatments, (45,5%, 50,0%, 55,0% respectively). As for the plasma P4 concentrations, the percentile fall of the progesterone values after 48 hours of the application was similar (p>0,05) in the three treatments (79%; 68% and 83%, respectively). Regarding the angioarchitecture of the genital organs it was observed through radiographic sheets that the caudal vaginal vein drains the vagina mucosal and it presents anastomoses with the vases from the cervix, body and uterine horns. The present study demonstrated that embryo recipients with and/or without report of previous estrus, when synchronized with Sodic Cloprostenol in reduced doses (50% of the conventional), as by IM or IVSM roads showed similar synchronization rates, answer intervals to the estrus, fall of the progesterone concentrations and pregnat rates. The variations in the answer intervals to the estrous are influenced by the diestrous phase in the moment of treatment and not for the route or dose of administration of an luteolytic agent. A portion of luteolytic agents administered through IVSM can be transported directly to the uterus and consequently to the ovary for a local route without passing for the systemic circulation is suggested. / Este trabalho teve como objetivo a administração de um agente luteolítico (Cloprostenol Sódico-Ciosin®) em diferentes doses e vias, para avaliar as taxas de sincronização, intervalo da aplicação ao estro, concentrações de progesterona sérica (P4) e taxas de gestação de embriões transferidos à fresco em receptoras de embrião bovino. Ainda, órgãos genitais de fêmeas bovinas foram coletados em matadouros para o estudo da angioarquitetura, por meio de infusões venosas de contrastes radiográficos. Foram utilizadas 199 receptoras mestiças Holandês-Zebu com escore corporal &#8805; 3,0 numa escala de 1 a 5 e peso vivo entre 320-450 kg. Um total de 103 animais apresentavam histórico de estro anterior aos tratamentos (entre os dias 7-16 do ciclo estral; estro= dia zero) e 96 não apresentavam histórico, apenas selecionados pela palpação transretal para a presença de CL característico em um dos ovários. Os animais foram divididos ao acaso em três grupos experimentais. No Tratamento 1: 68 animais (38 com histórico de estro anterior) receberam 1 mL de Cloprostenol na parede interna da vulva (IVSM). Tratamento 2: 66 animais (33 com histórico) receberam 1 mL de Cloprostenol via intramuscular (IM) e no Tratamento 3: 65 animais (32 com histórico) receberam 2 mL de Cloprostenol via IM. Considerou-se o reflexo de imobilidade como indicativo do estro e somente foram considerados para os estudos os animais que manifestaram estro até 96 horas após a aplicação. As médias das concentrações de Progesterona Séricas (P4) foram analisadas por RIA no momento anterior à aplicação da droga e 48 horas após. Não houve diferença na taxa de sincronização (P>0,05) entre os três tratamentos (72,1%, 53,0% e 64,6% respectivamente), quando apenas os animais com histórico foram avaliados (76,3%, 60,6% e 68,8%, respectivamente) e quando os animais sem histórico foram avaliados (66,7%, 45,5% e 60,6%, respectivamente). O intervalo de resposta ao estro foi semelhante (p>0,05) entre os três tratamentos (69,3± 15,2; 67,9± 16,7; 68,3± 16,9 horas, respectivamente), mas apresentaram diferenças (p<0,05) quando os animais com histórico foram divididos em classes luteais, nas quais os animais pertencentes aos dias 11-13 do ciclo estral apresentaram intervalos maiores (75,3 ± 13,3 horas) de resposta ao estro, em relação aos animais dos dias 7-10 do ciclo (63,6 ± 18,3 horas) e os animais dos dias 14-16 (61,1 ± 11,3 horas). Mas a taxa de sincronização foi semelhante entre as três classes luteais (P>0,05). Em relação à taxa de gestação não houve diferenças (P>0,05) nos três tratamentos (45,5%, 50,0% e 55,0% respectivamente). Quanto a P4, a queda percentual dos valores de progesterona após 48 horas da aplicação foram semelhantes (p>0,05) nos três tratamentos (79%; 68% e 83%, respectivamente). Em relação à angioarquitetura dos órgãos genitais, foi observado por meio de lâminas radiográficas, que a veia vaginal caudal drena a parede da vagina e apresenta anastomoses com os vasos provenientes da cérvix, corpo e cornos uterinos. Este presente estudo demonstrou que receptoras bovinas com e/ou sem histórico de estro anterior, quando sincronizadas com Cloprostenol Sódico em doses reduzidas (50% da convencional), tanto pelas vias IM ou IVSM apresentam taxas de sincronização, intervalos de resposta ao estro, queda das concentrações de progesterona e taxas de gestação semelhantes. As variações nos intervalos de resposta ao estro são influenciadas pela fase de diestro em que o animal se encontra no momento do tratamento e não pela rota ou dose de administração de um agente luteolítico. Sugere-se ainda que parte da dosagem de agentes luteolíticos administrados via IVSM pode ser transportada diretamente ao útero e, por conseguinte ao ovário por uma rota local sem passar pela circulação sistêmica.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:55:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 401249 bytes, checksum: f3d11e6c4ad3c09c868346f932457256 (MD5) Previous issue date: 2010-01-21 / This study aimed to evaluate the efficacy of reusing autoclaved intravaginal devices on induction of estrus, ovulation and fertility in Toggenburg goats, besides to measure the plasma progesterone (P4) profile in these animals. The study was performed during the seasonal anestrous period (n=42) and in the breeding season (n=67), at the City of Piau-MG (latitude 21°35 S and longitude 43°15 W). Goats received new intravaginal progesterone devices (CN), or devices used previously during six days (C6) or 12 days (C12) and then autoclaved. Dinoprost (5 mg) latero-vulvar was administered on the day of device insertion and eCG (200 IU) latero-vulvar was done 24 h before its removal. The devices were maintained for six days in all treatments. Ten goats from each treatment were evaluated by transrectal ultrasonography (5 MHz). Blood was collected at different moments for plasma P4 analysis. There was no statistical difference (P>0.05) among the goats of three treatments on the following reproductive parameters observed during the anestrous or breeding season, respectively (average for three treatments): mean estrous induction/synchronization rate (94.9; 76.2%), mean interval from device removal to estrus (33.1 ± 11.4; 37.4 ± 16.2 h), mean duration of estrus (28.6 ± 11.8; 31.7 ± 12.8 h), mean conception rate (61.5; 50.7%), mean ovulating female rate (95.2; 66.7%), mean number of ovulations (1.7 ± 0.7; 1.5 ± 0.6), mean interval from removal to ovulation (68.4 ± 13.0; 77.3 ± 13.8 h), interval from estrus to ovulation (36.6 ± 12.6; 36.7 ± 11.2 h), mean diameter of the dominant follicle (7.4 ± 0.6; 6.7 ± 0.5 mm), co-dominant (6.8 ± 0.6; 6.2 ± 0.1 mm) and medium (7.2 ± 0.6; 6.6 ± 0.4 mm). The small initial concentrations of P4 in alltreatments seven days before device insertion (0.12 ± 0.21) or at the time of insertion (0.23 ± 0.20) may be interpreted as a consequence of reproductive seasonality. Six hours after device insertion CN treatment showed higher (P<0.05) concentrations of P4 (7.16 ± 3.64) when compared to C6 (4.66 ± 2.13) or to C12 (4.34 ± 1.85) and these values remained greater in size up to four days after insertion. One day after device removal, plasma P4 concentration was at subluteal levels. Higher P4 concentrations (P<0.05) were detected in nulliparous when compared to lactating goats in different moments. The autoclave process did not affect the efficiency of reutilizing progesterone intravaginal device in reproductive parameters as fertility rate, induction and synchronization of estrus and ovulation in Toggenburg goats. The supraluteal concentration maintained in all treatments during the insertion device period allow inferring that the autoclave process does not influence progesterone concentration, being a viable alternative to reduce costs in a goat herd. / O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da reutilização de dispositivos intravaginais autoclavados sobre a indução do estro, ovulação e fertilidade em caprinos da raça Toggenburg, além de caracterizar o perfil de progesterona plasmática destes animais. O estudo foi realizado na estação de anestro estacional (n=42) e na estação de acasalamento natural (n=67), no município de Piau-MG (21°35 S de latitude e 43°15 W de longitude). As cabras receberam dispositivos intravaginais de progesterona novos (CN) ou que foram previamente utilizados por seis (C6) ou 12 dias (C12) e autoclavados posteriormente. Dinoprost (5 mg) foi administrado latero-vulvar no dia da colocação do dispositivo e eCG (200 UI), aplicado na mesma região, 24 h antes de sua retirada. Os dispositivos permaneceram por seis dias em todos os tratamentos. Dez cabras de cada tratamento foram avaliadas por ultrassonografia transretal (5 MHz). Foram efetuadas coletas de sangue em diferentes momentos para análise de progesterona (P4) plasmática na estação de anestro estacional. Não houve diferença (P>0,05) entre os três tratamentos nos seguintes parâmetros reprodutivos observados na estação de anestro e de acasalamento natural, respectivamente (valor médio dos três tratamentos): taxa média de indução/sincronização de estro (94,9; 76,2%), intervalo médio da retirada do dispositivo ao estro (33,1 ± 11,4; 37,4 ± 16,2 h), duração média do estro (28,6 ± 11,8; 31,7 ± 12,8 h), taxa média de concepção (61,5; 50,7%), taxa média de fêmeas ovulando (95,2; 66,7%), número médio de ovulações (1,7 ± 0,7;1,5 ± 0,6), intervalo médio da retirada do dispositivo à ovulação (68,4 ± 13,0; 77,3 ± 13,8 h), intervalo médio do início do estro à ovulação (36,6 ± 12,6; 36,7 ± 11,2 h), diâmetro médio do maior folículo (7,4 ± 0,6; 6,7 ± 0,5 mm), segundo maior (6,8 ± 0,6; 6,2 ± 0,1 mm) e médio (7,2 ± 0,6; 6,6 ± 0,4 mm). As baixas concentrações iniciais de P4 em todos os tratamentos sete dias antes da inserção dos dispositivos (0,12 ± 0,21) ou no momento da inserção (0,23 ± 0,20) podem ser interpretadas como reflexo da estacionalidade reprodutiva. Às 6 h após a inserção do dispositivo o tratamento CN apresentou maiores (P<0,05) concentrações de P4 (7,16 ± 3,64) do que C6 (4,66 ± 2,13) ou C12 (4,34 ± 1,85) e estes valores mantiveram-se superiores até quatro dias após a inserção. A partir da retirada dos dispositivos, as concentrações plasmáticas de P4 caíram bruscamente para níveis subluteais. Maiores concentrações (P<0,05) de P4 plasmáticas foram identificadas em cabras nulíparas do que em lactantes em diferentes momentos. O processo de autoclavagem não afetou a eficiência da reutilização de dispositivos intravaginais de progesterona em parâmetros reprodutivos como taxa de concepção, indução e sincronização de estro e ovulação em cabras da raça Toggenburg. Os níveis supraluteais mantidos em todos os tratamentos durante o período de permanência do dispositivo permitem inferir que o processo de autoclavagem não interfere na disponibilidade de progesterona nos dispositivos, constituindo-se em uma alternativa viável para reduzir os custos dentro de um rebanho caprino.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:37:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EzequielBN_DISSERT.pdf: 1434271 bytes, checksum: ec339b7b0edd61a2480b5454f9c82167 (MD5) Previous issue date: 2013-07-12 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The exposure to stressors produces physiological changes of the organism in order to adapt the individual to the environment. Depending on the type, intensity and duration, stress can affect some cognitive functions, particularly processes of learning and memory. Several studies have also proposed that some level of anxiety would be necessary for memory formation. In this context, memories of previously aversive experiences may determine the manner and intensity with which are expressed fear responses, which explains the great interest in analyzing both anxiety and memory in animals. In addition, males and females demonstrate different reactions in relation to stressful stimuli, showing different levels of anxiety and differences in processing of the acquisition, retention and recall of information. Based on this information, the present study aimed to verify the effect of stress on learning, memory and anxiety behavioral parameters in rats exposed at different types of stressors of long duration (seven consecutive days): restraint (4h/day), overcrowding (18h/day) and social isolation (18h/day) in the different phases of the estrous cycle. Our results showed that the stress induced by restraint and social isolation did not cause changes in the acquisition process, but impaired the recall of memory in rats. Furthermore, it is suggested a protective effect of sex hormones on retrieval of aversive memory, since female rats in proestrus or estrus phase, characterized by high estrogen concentrations, showed no aversive memory deficits. Furthermore, despite the increased plasma levels of corticosterone observed in female rats subjected to restraint stress and social isolation, anxiety levels were unaltered, compared to those various stress conditions. Animal models based on psychological and social stress have been extensively discussed in the literature. Correlate behavioral responses, physiological and psychological have contributed in increasing the understanding of stress-induced psychophysiological disorders / A exposi??o a fatores estressantes promove mudan?as fisiol?gicas adaptativas do organismo ao meio ambiente. Dependendo do tipo, da intensidade e dura??o, o estresse pode afetar algumas fun??es cognitivas, particularmente o processo de aprendizagem e de mem?ria. Alguns estudos tamb?m t?m proposto que a ansiedade, em certa medida, seria necess?ria para que ocorresse a forma??o da mem?ria. Neste contexto, mem?rias de experi?ncias aversivas anteriores podem determinar a maneira e a intensidade com que s?o expressas as respostas de medo, o que justifica o grande interesse em analisar simultaneamente ansiedade e mem?ria em animais. No mais, machos e f?meas apresentam rea??es distintas em rela??o a est?mulos estressores, mostrando diferentes n?veis de ansiedade e diferen?as no processamento da aquisi??o, reten??o e evoca??o de informa??es mnem?nicas. Frente a essas informa??es, o presente estudo teve como objetivo verificar o efeito do estresse em par?metros comportamentais de aprendizagem, mem?ria e ansiedade de ratas submetidas a diferentes tipos de estressores de longa dura??o, (sete dias consecutivos): conten??o (4h/dia), alta densidade populacional (18h/dia) e isolamento social (18h/dia), nas diferentes fases do ciclo estral. Nossos resultados mostraram que o estresse promovido pela conten??o e pelo isolamento social n?o promoveram altera??es no processo de aquisi??o, mas promoveu preju?zos na evoca??o da mem?ria de ratas. Al?m disso, sugere-se um efeito protetor dos horm?nios sexuais sobre a evoca??o da mem?ria aversiva, uma vez que ratas que estavam nas fases proestro ou estro, fase de altas concentra??es plasm?ticas de estr?genos, n?o apresentaram preju?zos na evoca??o dessa mem?ria. No mais, apesar do aumento dos n?veis plasm?ticos de corticosterona observado nas ratas submetidas ao estresse de conten??o e isolamento social, os n?veis de ansiedade permaneceram inalterados frente a essas diferentes condi??es de estresse. Modelos animais baseados em estresse psicol?gico e social t?m sido bastante abordados na literatura. Correlacionar respostas comportamentais, fisiol?gicas e psicol?gicas t?m contribu?do no aumento da compreens?o dos transtornos psicofisiol?gicos envolvidos na resposta de estresse

Foram utilizados 10 sistemas genitais femininos de mocós (Kerodon rupestris) para estabelecer parâmetros de referência relativos à osmolaridade, pH, cálcio, fósforo, uréia, creatinina, glicose e proteínas totais. Os animais foram criados em cativeiro no CEMAS(Centro de Criação de Animais Silvestres), Mossoró – RN. As fêmeas estavam da metade (30-45 dias) para o final da gestação (65-70 dias). As bolsas amnióticas e alantoideanas foram puncionadas individualmente para colheita dos líquidos fetais, que foram centrifugados e analisados posteriormente. Para o líquido amniótico, as concentrações médias em mg/dl foram: glicose = 45,87 ± 22,38; cálcio = 6,31 ± 1,24; fósforo = 1,64 ± 0,72; creatinina = 0,45 ± 0,12; uréia = 34,03 ± 5,96; proteínas totais = 31,24 ± 16,67. Para o líquido alantoideano, as concentrações médias em mg/dl foram: glicose = 59,17 ± 10,85; cálcio = 5,58 ± 0,59; fósforo = 1,27 ± 0,73; creatinina = 0,38 ± 0,38; uréia = 31,49 ± 2,28; proteínas totais = 30,70 ± 18,39. Foram observadas pequenas oscilações entre as concentrações dos parâmetros bioquímicos do fluido amniótico e alantoideano. Estas concentrações são determinadas, provavelmente, pela atividade metabólica materno-fetal. Para os estudos colpocitológicos foram utilizadas 8 fêmeas, sexualmente maduras, mantidas em cativeiro sob condições climáticas tropicais. Foram realizados esfregaços vaginais a cada 72 horas, durante 40 dias. Os animais mostraram ciclo poliestral contínuo, com duração média de 24,25 ± 3,99 dias, não havendo portanto sazonalidade. Durante o proestro houve prevalência de células superficiais anucleadas, intermediárias e parabasais. A fase de estro apresentou índices significativamente mais altos de células superficiais anucleadas e ausência de leucócitos. Alto índice de células intermediárias foi observado no metaestro, com abundância de leucócitos e vacúolos citoplasmáticos (células de Foam). O anestro mostrou índices significativamente mais altos de células parabasais quando comparados com as outras fases do ciclo. Os leucócitos apareceram em número reduzido. / The aim of the present work was to study some reproductives aspects of mocó female (Kerodon rupestris), by assesment of the following parameters: certain biochemical characteristics of fetal fluids and characterization of the estrous cycle by exfoliative colpocytology. In order to establish the levels of the following parameters: osmolarity, pH, calcium, phosphorous, total protein, urea, creatinina, glycose, presents in the amniotic and allantoic fetal fluids, 10 genital systems of mocós were sampled (gestation = 30-45 and 65-70 days). The amniotic and allantoic sacs were punctured and the fetal fluid obtained for posterior analysis. It was observed the following concentrations (mg/ml) in the amniotic fluid: glycose= 45,87 ± 22,38; calcium = 6,31 ± 1,24; phosphorus = 1,64 ± 0,72; creatinine = 0,45 ± 0,12; urea = 34,03 ± 5,96; total protein = 31,24 ± 16,67. In the allantoic fluid the concentrations were: : glycose = 59,17 ± 10,85; calcium = 5,58 ± 0,59; phosphorous = 1,27 ± 0,73; creatine = 0,38 ± 0,38; urea = 31,49 ± 2,28; total protein = 30,70 ± 18,39. Results obtained from the analisys of the composition of fetal fluids showed small oscillations between the amniotic and the allantoic fluids. Their concentrations, probably, are determined by the materno-fetal metabolic activity. Colpocytology studies were realized using 8 adult females kept in captivity, in climatologic conditions of humid tropic. Vaginal smears, prepared by means of swabs, were made each 72 hours, during 40 days. Animals showed a polyestrus continuos cycle (on an average 24,25 ± 3,99 days), so no sazonality was observed. During proestrus phase the exfoliative arrangement showed high frequency of anucleated superficial, intermediate and parabasal cells, respectively. Oestrus phase had elevated rates of superficial cells (both anucleated and nucleated) and absence of leukocytes. In the metestrus phase it was found highest indices of intermediate cells and increase of leukocytes. During the anestrus phase the predominant cells type was parabasal, and leukocytes were reduced.

Este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos de dois diluentes comerciais, Dilutris® (SEMENCON – Produtos Agropecuários Ltda., Porto Alegre, RS, Brasil) e TQC Holding Plus® (Nutricell – Nutrientes Celulares Ltda., Campinas, SP, Brasil), na qualidade do sêmen, nas taxas de concepção utilizando inseminação artificial cervical (IAC) e por laparoscopia (IAL) e na reação inflamatória uterina após a inseminação laparoscópica. Para os testes in vitro do sêmen foram coletados seis ejaculados de dois carneiros. Cada ejaculado foi dividido em cinco frações de 0,20 mL, e acrescentado a cada fração o volume de diluidor equivalente a concentração da dose inseminante: para IAC (100x106 espermatozóides) e para IAL (40x106 espermatozóides), formando quatro tratamentos T1, T2, T3 e T4, respectivamente: Dilutris®/cervical; Dilutris®/laparoscopia; Holding®/cervical; Holding®/laparoscopia. Foram avaliadas a motilidade/ vigor, testes de termo-resistência e hiposmótico de cada fração. A motilidade e o vigor não diferiram entre os tratamentos e foram semelhantes aos verificados no sêmen fresco. No teste hiposmótico, os valores verificados no T4 e T1 foram semelhantes e não diferiram dos observados no sêmen fresco. Os valores observados nos tratamentos T2 e T3 não diferiram entre si, mas foram significativamente inferiores (P<0,05) aos verificados no T4. Os resultados do teste de TTR verificados em todos os tratamentos utilizados, foram superiores ao valor mínimo de 30% preconizado pelo CBRA. O T1 apresentou valor significativamente inferior (P<0,05) ao dos demais tratamentos. Para a inseminação artificial, 208 fêmeas tiveram o estro sincronizado com esponjas vaginais contendo 60 mg de MAP por 13 dias e aplicação de 400 UI de eCG no momento da retirada. Foram inseminadas pela via cervical (IAC) ou por laparoscopia (IAL), 54 horas e 60 horas, respectivamente, após a retirada do dispositivo intra-vaginal, com sêmen diluído com Dilutris®, Holding® ou solução fisiológica (Grupo controle). Independentemente do diluente utilizado, os índices obtidos na IAL foram superiores (P<0,05) aos obtidos pela IAC. Na IAC a taxa de gestação obtida no grupo inseminado com o diluente TQC Holding Plus® (45,6%), foi semelhante à verificada no grupo controle (48,9%). Já no grupo que foi inseminado com Dilutris®, a taxa de gestação (29%) foi inferior à obtida no grupo controle (P<0,05). Com relação aos aspectos histológicos, verificou-se um infiltrado inflamatório de neutrófilos de grau discreto a acentuado nos úteros inseminados por laparoscopia com Dilutris®, de ausente a moderado nos úteros inseminados com TQC Holding Plus®, e no grupo controle não houve presença de infiltrado inflamatório de neutrófilos. Podese concluir que na avaliação in vitro, o meio de manutenção de embriões TQC Holding Plus® não causou efeitos negativos na qualidade do sêmen, enquanto que o meio diluidor Dilutris® foi menos efetivo na manutenção da qualidade do sêmen. O local de deposição do sêmen teve influência significativa no índice de fertilidade (P<0,05). Por laparoscopia as taxas de gestação foram semelhantes independentemente do diluidor utilizado. Um maior número de avaliações uterinas são necessárias para um melhor conhecimento da reação inflamatória intra-uterina em ovinos inseminados por laparoscopia. / This study aims to assess the effects of two commercial diluents, Dilutris® (SEMENCON – Produtos Agropecuários Ltda., Porto Alegre, RS, Brazil) and TQC Holding Plus® (Nutricell – Nutrientes Celulares Ltda., Campinas, SP, Brazil), on semen quality, conception rates using Cervical Artificial Insemination (CAI) and Laparoscopic Artificial Insemination (LAI), and uterine inflammatory reactions after the laparoscopic insemination. For the in vitro tests with the semen, six ejaculates of two rams were collected. Each ejaculate was divided into five fractions of 0.20 mL, and we added to each fraction the volume of extender equivalent to the concentration of the inseminant dose: for CAI (100x106 spermatozoa) and for LAI (40x106 spermatozoa), forming four treatments T1, T2, T3, and T4, respectively: Dilutris®/cervical; Dilutris®/laparoscopy; Holding®/cervical; Holding®/laparoscopy. The motility/vigor, thermo-resistance and hypoosmotic tests of each fraction was evaluated. The motility and vigor were not different between the treatments and were similar to those verified in fresh semen. In the hypoosmotic test, the values verified in T4 and T1 were similar and were not different from those observed in fresh semen. The values observed in T2 and T3 treatments have not differed between them, but were significantly lower (P<0.05) to those verified in T4. Results of the TTR test verified in all used treatments were superior to the minimum value of 30% preconized by CBRA. T1 presented a significantly lower value (P<0.05) compared to the other treatments. For artificial insemination, 208 female had their estrus synchronized with vaginal sponges containing 60 mg of MAP for 13 days and the application of 400 UI of eCG at the moment of removal. They were inseminated by cervical via (CAI) or by laparoscopy (LAI), 54 and 60 hours, respectively, after the removal of the intravaginal device, with semen diluted with Dilutris®, Holding® or physiological solution (control group). Independently of the extender used, the obtained rates in the LAI were superior (P<0.05) to those obtained with the CAI. In CAI the pregnancy rate obtained in the inseminated group with the TQC Holding Plus® diluent (45.6%) was similar to the one verified in the control group (48.9%). In the group inseminated with Dilutris®, the pregnancy rate (29%) was inferior to the obtained in the control group (P<0.05). Related to the histological aspects, we verified a discreet to accentuated degree of neutrophils inflammatory infiltrate in the uterus inseminated by laparoscopy with Dilutris®, from absent to moderate in uterus inseminated with TQC Holding Plus®, and in the control group there was not inflammatory infiltrate of neutrophils. We can conclude that in the in vitro evaluation, the embryos maintenance means TQC Holding Plus® has not caused negative effects in the quality of the semen, while the Dilutris® extender was less effective to maintain the quality of the semen. The semen deposition site has a significant impact in the fertility rate (P<0.05). By laparoscopy the pregnancy rates were similar independently of the extender used. A larger number of uterine analyses are required for a better knowledge of the intrauterine inflammatory reaction in sheep inseminated by laparoscopy.

Fundação de Apoio a Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe - FAPITEC/SE / Pain can be defined as an unpleasant emotional and sensory experience associated with actual or potential tissue injury. About 70% of the individuals affected by chronic pain are female and the gonadal hormones play a decisive role in terms of sex differences and nociceptive responses. Studies suggest that rodents can recognize pain in co-specifics and expend active behaviors toward it. The main objective of the present study was to evaluate the influence of hormonal changes related to the estrous cycle on the social contact of rats during inflammatory pain and the effect of social contact on the nociceptive responses of female rats with inflammatory pain. Wistar female rats were used at 2 to 3 months of age. The project was composed of two experimental protocols. Experiment I evaluate the behavior of resident rats during exposure to cohabitants with inflammatory pain. It was composed of the following groups and experimental animals: Resident rats (RES), Control (CTRL), Formalin social contact (FCS) and saline (SAL). The three groups were repeated in different cycles stages, and three experiments were carried out where the residents are called Resident Estrous (RES / ES), Resident Ovariectomized (RES / OV) and Resident Proestrus (RES / PRO) All rats but ES and PRO residents underwent ovariectomy surgery. Experiment II was composed of the groups: Formalin Social Contact and the Formalin Isolate, which received the administration of formalin (1%) and was submitted to a 20min isolation period. After the 20 min of contact or isolation the nociceptive responses were evaluated for 40 minutes. The parameters used to evaluate the nociceptive responses were the lick time and the number of flinches. All groups were composed of n = 8. The results showed interaction between the phase the cycle versus treatment (p = 0.0013) for contact duration. In the case of the group of OV residents, (P <0.05) and with those residents in proestrus (p <0.001). In the experiment II, no difference was observed between the FCS and FI groups in groups composed of animals that had contact with ovariectomized or estrus residents. The group composed of animals that had contact with the proestrus residents showed analgesia during thirty minutes of the formalin test between 0 and 30 minutes of observation. The results suggest that rats recognize pain component in a cohabitant and direct active behaviors towards it, however the intensity and quality of this contact may vary according to the cycle. Regarding the nociceptive responses, it was observed that the social contact evoked through direct social behaviors was not enough to elicit analgesia, however aggressive behaviors on the part of the resident elicited an analgesia that may be based on the descending system through RVM with opioid character and being induced by stress. / A dor pode ser definida como uma experiência emocional e sensorial desagradável associada a uma lesão tecidual real ou potencial. Cerca de 70% dos indivíduos que são acometidos por dores crônicas são do sexo feminino e os hormônios gonadais tem função determinante no que tange o diformismo e as respostas nociceptivas. Estudos sugerem que roedores são capazes de reconhecer o componente álgico em co-específicos e despender comportamentos ativos em direção ao mesmo. O objetivo principal do presente trabalho foi avaliar a influência das variações hormonais relativas ao ciclo estral no contato social de ratas durante a dor inflamatória e o efeito do contato social nas respostas nociceptivas de ratas com dor inflamatória induzida por formalina. Foram utilizadas 120 ratas Wistar com 2 a 3 meses de idade. O projeto foi dividido em dois protocolos experimentais. O experimento I teve como objetivo a avaliação do comportamento de ratas residentes durante a exposição a coabitantes com dor inflamatória e foi composto pelos seguintes grupos e animais experimentais: Ratas residentes que foram submetidas aos animais controle (CTRL), formalina contato social (FCS) ou salina (SAL). Essa divisão dos grupos se repetiu nas diferentes fases do ciclo, das ratas residentes que foram denominadas: Residente Estro (ES), Residente Ovariectomizada (OV) e Residente Proestro (PRO). Excetuando as residentes estro e proestro todas as outras ratas foram submetidas a cirurgia de ovariectomia. O experimento II foi composto pelos os grupos: Formalina Contato Social (FCS), e o Formalina Isolado (FI) o qual recebeu a administração da formalina (1%) na pata posterior esquerda e após foi isolada por 20 minutos. Os animais coabitantes dos grupos FCS/ES, FCS/PRO, FCS/OV e FIS tiveram suas respostas nociceptivas avaliadas por 40 minutos. Os parâmetros utilizados para avaliação das respostas nociceptivas foram o tempo de lambida e o número de sacudidas da pata traseira. Todos os grupos foram compostos por n= 8. No que se refere ao Duração do Contato observou-se interação entre fase do ciclo e o tratamento (p= 0,0013). Neste sentido as residentes castradas mostraram duração do contato maiores que as residentes estro (p< 0,05) e as residentes no proestro (p< 0,001). No experimento II não se observou diferença entre os grupos FCS e FI nos grupos compostos por animais que tiveram contato com as residentes castradas e no estro. O grupo composto por animais que haviam tido contato com as residentes proestro mostrou redução no número de sacudidas o período entre 0 e 30 minutos de observação. Os resultados sugerem que ratas são capazes de reconhecer o componente álgico em um coabitante e direcionar comportamentos ativos em pró do mesmo, entretanto a intensidade e a qualidade desse contato podem variar de acordo com o ciclo. No que tange as respostas nociceptivas observou-se que o contato social evocado através de comportamentos sociais diretos não foi suficiente para eliciar analgesia, entretanto comportamentos agressivos por parte da residente eliciaram uma analgesia de longa duração nas coabitantes que pode indicar a ativação do sistema descendente antinociceptivo endógeno através do RVM com caráter opioide e sendo induzida por estresse. / São Cristóvão, SE

O presente estudo teve como objetivo verificar o efeito do uso de gonadotrofinas exógenas na indução do estro à puberdade em marrãs, e \"flushing\" alimentar no ciclo estral que antecede a primeira inseminação artificial na vida útil reprodutiva. O experimento foi realizado na Granja Barreiro (Suinocultura Rosetto) Cerqueira César/SP. Foram utilizadas 96 fêmeas da puberdade ao 1° parto, e 68 fêmeas selecionadas das 96 com ordem de parto do primeiro ao sexto para a avaliação associativa com a vida útil reprodutiva. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em um fatorial 2x2 sendo um fator a combinação hormonal H,( 600 UI de eCG e após 72 horas, 2,5 mg de LH porcino) (H) e o estímulo do macho (M). O fator \"flushing\" alimentar correspondeu ao esquema com restrição (R) e o adotado na granja (G). Os tratamentos foram: HR - hormônio e \"flushing\"; HG - hormônio e esquema alimentar da granja; MR - macho e \"flushing\" e MG - macho e esquema alimentar da granja. As informações foram obtidas a partir do banco de dados existente na propriedade onde o experimento foi realizado. As variáveis análisadas foram: número de estros pós-indução, total de nascidos (TN), nascidos vivos (NV), natimortos (NT), mumificados (MM) e intervalo entre partos (ITP). Cinco dias após a aplicação do tratamento hormonal, 31,37% (H) das fêmeas manifestaram características de estro quando comparado ao tratamento M, onde 11,62% apresentaram estro. O tratamento H mostrou maior sincronismo nas manifestações dos estros, diferente do tratamento M que apresentou maior dispersão ao longo dos ciclos. Não houve diferença estatística nas características de primeiro parto entre os tratamentos hormônio e \"flushing\", tanto quanto nas suas interações (P>0,05). Não houve influência dos tratamentos na produtividade dos animais nas diferentes parições (P>0,05). Portanto, apesar do maior sincronismo apresentado pela combinação hormonal em comparação com o estímulo natural somente pela presença do macho, não houve diferenças quanto à produtividade associativa do primeiro parto e demais partos nas características avaliadas. / The present study objective to verify the effect of the use of exogenous gonadotropins in oestrus induction of puberty in gilts, and \"flushing\" feed the estrous cycle before the first artificial insemination in lifetime reproductive. The experiment was conducted at the Granja Barreiro (Swine Rosetto) - Cerqueira César / SP. A total of 96 females from puberty to the 1st delivery, and 68 of the 96 selected females with birth order from first to sixth for assessing association with lifetime reproductive. The experimental design was completely randomized in a 2x2 factorial being a combination hormonal factor H (600 IU eCG and after 72 hours, 2.5 mg porcine LH) (H) and the stimulation of the male (M). The factor \"flushing\" food matched the schema constraint (R) and adopted on the farm (G). The treatments were: HR - hormone and \"flushing\"; HG - hormone regimen and feed the farm; MR - male and \"flushing\" and MG - male and feed the farm scheme. The information was obtained from the existing database on the property where the experiment was conducted. The variables analyzed were: number of post-estrus induction, total born (TN) live births (NV), stillbirths (NT), mummified (MM) and calving interval (ITP). Five days after application of the treatment, 31,37% (H) of estrus females showed characteristics when compared to treatment M, where 11,62% showed estrous. The H treatment showed greater synchronization of estrus in the demonstrations, unlike the M treatment with the highest dispersion along the cycles. There was no statistical difference in the characteristics of first birth among hormone treatments and \"flushing\" as well as their interactions (P>0.05). No influence of the treatments on the productivity of animals in different parities (P>0.05). Therefore, despite the higher timing presented by combination hormonal stimulation compared with only natural for the presence of males, there were no differences in yield associative first birth and other birth characteristics evaluated.

Para a metabolização de hormônios esteroides sexuais é essencial a participação de enzimas esteroidogênicas. A enzima citocromo P450c17 é responsável pela produção de andrógenos e a enzima citocromo P450 aromatase é responsável pela produção de estrógenos, sendo que, ambas as enzimas necessitam formar um complexo com uma enzima parceira, denominada NADPH citocromo P450 redutase, para realizar a metabolização destes hormônios essenciais para a diferenciação sexual. Objetivou-se imunolocalisar as três enzimas acima citadas no tecido vaginal de fêmeas de roedores Galea spixii. Para tanto, o experimento foi desenvolvido utilizando técnicas de citologia esfoliativa vaginal para definição das fases do ciclo estral, técnicas de microscopia de Luz, Eletrônica de Varredura e testes de imunohistoquímica para detecção das enzimas: citocromo P450c17, citocromo P450 aromatase, e NADPH citocromo P450 redutase. Constatou-se no presente estudo que o ciclo estral das fêmeas de preás silvestres do semiárido apresenta ciclo estral com duração de 15,85 ± 1,4 dias, com a formação e ruptura da membrana de oclusão vaginal durante cada ciclo estral. A vagina apresenta um clitóris hipertrofiado com o óstio uretral que se abre no topo do mesmo, e ausência de um vestíbulo vaginal. O epitélio da mucosa vaginal sofre modificações proliferativas, se espessando e se adelgando de acordo com a respectiva fase do ciclo estral. As enzimas citocromo P450 aromatase e NADPH redutase estão imunolocalizadas durante todo o ciclo estral no epitélio e tecido conjuntivo da vagina de Galea spixii. Por outro lado, a enzima P450c17 está imunolocalizada no epitélio vaginal durante todas as fases do ciclo estral, porém não está presente no estro. Com estes dados pode-se sugerir que ocorre uma metabolização local de hormônios estrógenos e andrógenos no tecido vaginal o que podem estar relacionado com a proliferação celular, variação na vascularização e inervação e ruptura da membrana de oclusão vaginal. / To the metabolism of sex steroid hormones is essential the participation of esteroidogenic enzymes. The enzyme cytochrome P450c17 is responsible for androgen production; and the enzyme aromatase cytochrome P450 is responsible for estrogen production, however, both enzymes require forming a complex with an enzyme partner called NADPH cytochrome P450 reductase to perform the metabolism of these hormones, which are essential for sexual differentiation. This study aimed to immunolocalization of the three enzymes above mentioned in the vaginal tissue from female rodents Galea spixii. Therefore, the experiment was carried out using vaginal cytology techniques for definition of the estrous cycle phases, techniques for light microscopy, scanning electron and immunohistochemical tests for the detection of enzymes: cytochrome P450c17, cytochrome P450 aromatase, and NADPH cytochrome P450 reductase. It was found that the estrus cycle of Galea spixii female lasts 15.85 ± 1.4 days, with the formation and rupture of vaginal closure membrane during each oestrous cycle. The vagina has a hypertrophied clitoris with the urethral orifice that opens on top of it, and it is observed the absence of a vaginal vestibule. The vaginal mucosal epithelium undergoes proliferative changes, with thickening and thinning according to the respective estrous cycle phase. The enzymes cytochrome P450 aromatase and NADPH reductase are immunolocated throughout the oestrous cycle in the epithelium and connective tissue of the vagina from Galea spixii. On the other hand, the enzyme cytochrome P450c17 is immune located in the vaginal epithelium during all stages of the estrous cycle, except at estrous. With these data may be suggested that there is a local estrogens and androgens metabolism in vaginal tissue which may be associated with cell proliferation, vascularization and innervation variation besides the formation and rupture of the vaginal closure membrane.

Orientadores: Claudia Herrera Tambeli, Maria Cecilia F. A. Veiga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:56:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Clemente-Napimoga_JulianaTrindade_M.pdf: 904782 bytes, checksum: 55d51f81e2ba465f145751f287246951 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Este estudo avaliou as diferenças sexuais na resposta nociceptiva induzida pela administração de formalina na articulação temporomandibular (ATM) com ou sem a co-administração do U50,488 (agonista do receptor opióide capa). As fases do ciclo estral das fêmeas foram citologicamente determinadas e apenas aquelas que apresentavam-se na fase diestro ou proestro, e machos foram incluídos. A formalina induziu um comportamento nociceptivo maior nas fêmeas em diestro do que nas fêmeas em proestro ou machos. O U50,488 reduziu significativamente as respostas nociceptivas induzidas pela formalina, e esta redução foi maior nas fêmeas, especialmente nas fêmeas da fase diestro do ciclo estral. A injeção do U50,488 na ATM contralateral não afetou na magnitude do comportamento induzido pela formalina, e o pré-tratamento com o antagonista seletivo do receptor opióide capa nor-binaltorphimine (norBNI) na ATM ipsilateral reduziu os efeitos antinociceptivos do U50,488. Estes resultados demonstram a ação dos receptores opióides capa periféricos na modulação da dor inflamatória. Além disso, considerando que os níveis plasmáticos dos hormônios ovarianos são baixos durante a fase diestro, estes resultados são consistentes com a hipótese de que os hormônios sexuais femininos podem ter uma ação analgésica na redução da dor inflamatória induzida pela formalina, assim como, também ter uma ação anti-analgésica nos efeitos mediados pelos receptores opióides capa / Abstract: This study examined sex differences in nociceptive responses induced by intra-temporomandibular joint (TMJ) formalin with and without co-administration of the ?-opioid receptor agonist U50,488. The estrous phase of females was cytologically determined; only those in either proestrus or diestrus, and males, were included. Formalin elicited significantly greater nociceptive behavior in diestrus females than in either proestrus females or males. U50,488 significantly reduced formalin nociceptive responses, and this reduction was significantly greater in females, especially in the diestrus phase of the estrous cycle. U50,488 injection into the contralateral TMJ failed to affect the magnitude of formalininduced behavior, and preinjection of the selective kappa-opioid receptor antagonist nor-binaltorphimine (nor-BNI) into the ipsilateral TMJ significantly reduced the antinociceptive effect of U50,488. These findings support a role for peripheral kappa-opioid receptors in the modulation of inflammatory pain. Furthermore, since plasma levels of ovarian hormones are lowest during diestrus, these findings are consistent with the suggestion that female sex hormones may play an analgesic role in reducing formalin-induced inflammatory pain, and may also play an anti-analgesic role, at least in ?-mediated effects / Mestrado / Fisiologia Oral / Mestre em Odontologia