Orientador: Ana Sílvia Alves Meira Tavares Moura / Banca: Heraldo César Gonçalves / Banca: Mônica Corrêa Ledur / Resumo: O objetivo deste trabalho foi identificar locos controladores de características quantitativas (QTLs) nos cromossomos 11 e 13 de galinhas (Gallus gallus) para características de desempenho e carcaça. A partir do cruzamento entre uma linhagem de corte e uma de postura, foi gerada a população experimental F2 na Embrapa Suínos e Aves. Foram avaliadas as seguintes informações fenotípicas: peso ao nascer, peso aos 35, 41 e 42 dias, ganho de peso, consumo de ração, eficiência e conversão alimentar dos 35 aos 41 dias e valores de hematócrito. As carcaças foram evisceradas e avaliados: o comprimento do intestino, peso dos pulmões, do fígado, do coração e da moela. Foram obtidos após quatro horas de resfriamento: peso da carcaça, gordura abdominal, peso de partes: peito, coxas, dorso, asas, cabeça e pés. Quatro e cinco marcadores microssatélites dos cromossomos 11 e 13, respectivamente, foram genotipados num total aproximado de 330 animais F2 em quatro famílias de irmãos-completos. Os mapas de ligação para ambos os cromossomos foram construídos e a análise de mapeamento de QTLs baseada no modelo genético de F2 foi realizada. No cromossomo 11 foram mapeados dois QTLs sugestivos: para peso de pés e de moela, ambos posicionados no intervalo entre ADL0123 e ADL0210. No cromossomo 13 foi mapeado um QTL sugestivo para peso de coração posicionado no intervalo entre MCW0110 e MCW0104. / Abstract: The objective of this study was to identify quantitative trait loci (QTLs) for performance and carcass traits in chicken (Gallus gallus) chromosomes 11 and 13. From the crossbreeding of a broiler and a layer line, an F2 experimental population was generated at the Embrapa Suínos e Aves. The following phenotypic data were recorded: body weights at birth, 35, 41 and 42 d; weight gain, feed consumption and feed conversion from 35 to 41 d; weights of carcass, carcass parts, organs and abdominal fat, hematocrit and length of intestine. Four and five microsatellite markers from chromosomes 11 and 13, respectively, were genotyped in approximately 330 F2 chickens from four full-sib families. The linkage maps for both chromosomes were constructed and the QTL mapping analyses were carried out based on an F2 genetic model. Two suggestive QTLs were mapped to chromosome 11: for feet and gizzard weights, both located in the interval between ADL0123 and ADL0210. On chromosome 13 one suggestive QTL for heart weight was detected in the interval between MCW0110 and MCW0104. / Mestre

Orientador: ‰Ângelo Berchieri JŠnior / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Banca: Nilce Maria Soares / Resumo: A presença de Salmonella spp. foi analisada em lotes galinhas para postura comercial de ovos de mesa por meio da pesquisa bacteriológica em amostras de mecônio colhidas das caixas de transporte de aves para reposição, de um dia de vida, e em fezes frescas cecais e ovos de oito lotes de aves poedeiras comerciais adultas, em período de produção, quatro vacinados e quatro não vacinados com bacterina oleosa contra SE. A colheita das amostras e a rotina bacteriológica seguiram as recomendações de ZANCAN et al., (2000) e de WRAY & DAVIES (1994). Obteve-se o isolamento de Salmonella spp. em 50% dos lotes de aves para reposição avaliados e nas fezes de 25% dos oito lotes de aves adultas. Não houve isolamento do agente nas amostras de ovos examinados. Foram isolados os sorovares: Salmonella enterica subsp. enterica 4,12:r:-; Salmonella Mbandaka; Salmonella enterica subsp. enterica 6,7:z10:-; Salmonella Enteritidis e Salmonella Havana, que foram associados a surtos de enfermidades transmitidas por alimentos para seres humanos, principalmente pelo consumo de produtos de origem avícola como carne de aves, ovos e seus derivados. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que há falhas nos programas de monitoria e biossegurança das granjas matrizes e incubatórios; indica que as galinhas estão infectadas, que há presença do patógeno no ambiente de criação de galinhas para postura comercial de ovos e, sugere que medidas de higiene e biossegurança associadas à vacinação contra SE, pode ter contribuído para a ausência do sorovar em lotes vacinados. / Abstract: The presence of Salmonella spp. was analyzed in flocks of laying hens by means of bacteriological samples taken from meconium in transport box of newly hatched chicks, at the moment they were received in the farms, in feces samples and eggs of eight flocks of adult laying hens, in the production period, that four flocks were vaccinated with oil-emulsion bacterin against SE and four unvaccinated. The sampling and routine bacteriological analysis followed the recommendations of ZANCAN et al., (2000) and WRAY & DAVIES (1994). Salmonella spp. was isolated from 50% of the replacement poultry flocks evaluated, and 25% of the feces samples from eight flocks of adult laying hens. There was no isolation of the agent in samples of eggs assessed. Isolated serovars were: Salmonella enterica subsp. enterica 4,12:r:-; Salmonella Mbandaka; Salmonella enterica subsp. enterica 6,7:z10:-; Salmonella Enteritidis and Salmonella Havana whom have been associated with outbreaks of food-borne diseases to humans, especially by the consumption of products of poultry and poultry meat, eggs and egg products. The result of this study shows that there are flaws in monitoring and biossecurity programs in breeder farms and hatcheries. It demonstrated that there is infection and presence of the pathogen into the environment of commercial laying hens, and suggests that measures of hygiene and biossecurity associated with vaccination against SE, may have contributed to the absence of Salmonella Enteritidis in vaccinated flocks. / Mestre

Orientador: Angelo Berchieri Júnior / Coorientador: Rafael Antônio Casarin Penha Filho / Banca: Oliveiro Caetano de Freitas Neto / Banca: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Nilce Maria Soares / Banca: Ricardo de Albuquerque / Resumo: Salmonella constitui-se em um gênero de bactérias amplamente distribuídas na natureza que podem infectar seres humanos, aves, peixes, répteis e mamíferos, e causam doenças em animais e seres humanos. Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG) é o agente etiológico do tifo aviário (TA). Este biovar é hospedeiro-específico de aves e se diferencia de outros sorovares por ser imóvel, causando uma doença septicêmica aguda, com alta taxa de morbidade e mortalidade, que afeta animais adultos, mas é muito patogênico para aves de qualquer idade e também um motivo de preocupação para a avicultura industrial, causando mortalidade que pode chegar a 80%. Programas de monitoramento baseado em testes sorológicos e bacteriológicos para controlar a disseminação desta bactéria e medidas de biossegurança são importantes, para o controle do tifo aviário. A vacinação é uma importante medida que pode ser aplicada como parte de um programa de biossegurança. Neste trabalho, as aves para postura comercial dos grupos A, B e C foram vacinadas com duas doses da estirpe atenuada de Salmonella Gallinarum cobS-cbiA- (SGcobS-cbiA-) e desafiadas na 16ª semana de vida com uma estirpe patogênica de SG (SG287/91). As aves dos grupos E e F foram vacinadas com três doses da estirpe SGcobS-cbiA- e desafiadas na 20ª semana de vida com a estirpe patogênica SG287/91. A mortalidade das aves vacinadas e de aves não-vacinadas foi observada após o desafio. Notou-se redução significativa nas taxas de mortalidade em todos os grupos de aves vacinadas com duas ou três doses da vacina viva, em relação às aves não vacinadas. Foi demonstrado uma forte proteção vacinal contra o tifo aviário em um modelo experimental que pode ser aplicado em aves comerciais à campo, complementando estudos prévios com a estirpe vacinal SGcobS-cbiA- / Abstract: Salmonella is a genus of bacteria widely distributed in nature that can infect poultry, humans, fishes, reptiles and mammals in general and often causes diseases in animals and humans. Fowl typhoid (FT) is the etiologic agent of Salmonella enterica serovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG). This non-motile biovar is host-specific and highly adapted to infect birds, causing an acute septicemic disease with high morbidity and mortality, which is very pathogenic to birds of any age, including adult birds and also a cause of concern for the poultry industry, causing mortality that can reach 80%. Monitoring program based on serological and bacteriological tests to prevent infection or to control the spread of the agent and biosecurity measures are important for the control of fowl typhoid. Vaccination is an important measure, which can be used as part of a global biosecurity. In the present work, commercial brown layer-hens in groups A, B, C and D were vaccinated twice with strain Salmonella Gallinarum ΔcobSΔcbiA (SGcobS-cbiA-) and challenged at 16th week of life with a pathogenic strain of SG (SG297/91). Layers in groups E, F and G were vaccinated with three doses of SGcobS-cbiA- and challenged at 20th week of life with a pathogenic strain SG287/91. The mortality rate was observed after challenge in all groups. It was observed the significant reduction of the mortality rate in all groups of vaccinated layer-hens with two and three doses of SGcobS-cbiA-, complementing previous studies / Doutor

Orientador: Ruben Pablo Schocken Iturrino / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Banca: Alessandra Aparecida Medeiros / Resumo: Campylobacter sp é o patógeno mais envolvido em casos de infecção alimentar no mundo. Uma das principais fontes identificadas é a carne de frango, seja por má preparação antes do consumo ou contaminação cruzada durante sua manipulação. Atualmente, o mercado tem buscado produtos com alto valor agregado e algumas empresas tem utilizado o método de maturação, que consiste em manter o músculo da ave em baixa temperatura ambiente por determinado período de tempo até que enzimas naturais confiram à carne maior suculência e maciez. O objetivo deste estudo foi identificar se Campylobacter sp é um perigo biológico a ser considerado na Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle na produção de peito de frango maturado. Para isso, seis lotes de aves de integrados diferentes foram testados para a presença de Campylobacter coli, Campylobacter lari e Campylobacter jejuni antes do abate (n= 1500), pelo método PCR-RT Multiplex, utilizando um kit comercial. Em seguida, amostras dos respectivos lotes foram retiradas na Evisceração, antes e após o Ponto Crítico de Controle para contaminação fecal visível (n=30 cada etapa) e analisadas pelo método qPCR-RT Multiplex, para as três espécies, além de contagem total de coliformes e E. coli, utilizando Placa Petrifilm 3M®. Os mesmos parâmetros foram analisados antes e após o Pré-resfriamento, antes e após a Maturação e após o Congelamento, além de dois pontos da superfície de equipamentos em contato com produto (n = 30 por etapa e n=06, cada equipamento). Dos três sorotipos pesquisados, apenas Campylobacter jejuni e Campylobacter coli foram recuperados a partir das amostras. Apenas um dos seis lotes foi positivo para Campylobacter jejuni antes do abate, entretanto, ao menos um dos dois sorotipos identificados foi recuperado a partir de amostras coletadas dos demais lotes em uma das etapas do ... / Abstract: Campylobacter sp is the pathogen involved in most cases of foodborne diseases in the world. A major source is chicken meat due to poor preparation or cross-contamination during its handling. Nowadays, customers seek for chicken products with higher added value and some slaughterhouses have used aging procedures , which consists of keeping meat under low temperature for a certain period of time, untill natural enzymes confer more tenderness to it. The aim of this study was to identify whether Campylobacter sp is a biological hazard to be considered in the hazard analysis of aged chicken breast production. To do that, six flocks from different farms were tested for the presence of Campylobacter coli, Campylobacter jejuni and Campylobacter lari before slaughter (n=1500) using a commercial kit for Multiplex RT-PCR assay. Consecutively, samples from those flocks were taken at the evisceration before and after the Critical Control Point for visible ingesta contamination; before and after chilling; before and after aging (24 h) and after freezing, besides surface swabs of two equipments in contact with products. For each step thirty samples were gathered (n = 240) and six swabs per equipment (n = 12) to be analyzed by the Multiplex qRT-PCR method for the three Campylobacter serovars, including total coliforms and E. coli counts by Petrifilm plates. From the three serovars tested, Campylobacter jejuni and Campylobacter coli were recovered from the samples, but not Campylobacter lari. Although only one of the six flocks was pre-slaughter positive for Campylobacter jejuni, positive samples were recovered from all the other flocks, at least for one of the serovars tested in one of the steps. E.coli and total coliforms counts decreased significantly throughout process. The number of positive samples for one of the two species ... / Mestre

Orientador:Silvia Helena Venturoli Perri / Co-orientador:Manoel Garcia Neto / Banca:Antonio Carlos de Laurentiz / Banca:Elisa Helena Giglio Ponsano / Resumo:Em países de clima tropical, o calor é um dos principais limitantes à produção de frangos de corte, sendo ainda responsável por induzir uma elevada mortalidade, especialmente na fase de terminação. O equilíbrio eletrolítico (EE) e o condicionamento térmico precoce (CTP) são duas técnicas que visam aliviar os efeitos negativos do estresse pelo calor. Assim, esse estudo teve como propósito avaliar as possíveis interações e os efeitos do equilíbrio eletrolítico na dieta e da aplicação do condicionamento térmico precoce sobre o consumo de ração (kg), peso vivo (kg), conversão alimentar (kg), mortalidade (%), índice de conversão bioeconômico energética (Mcal/kg), umidade de fezes (%), peso de carcaça (kg), gordura cavitária (g) e coloração de peito (L*a*b*) em frangos de cortes em condições de estresse térmico crônico. Para tanto, o balanço eletrolítico (BE = K+Na-Cl) foi ajustado em 300 mEq/kg e a relação eletrolítica (RE = [(K+Cl)/Na]) em 3:1 pelo programa PPFR não linear. Foram alojados 640 pintos machos de um dia de idade, distribuídos em arranjo fatorial 2x2 (com e sem CTP e com e sem o EE), num delineamento inteiramente casualizado, em 32 boxes (8 repetições por tratamento). O condicionamento térmico foi realizado no quinto dia de idade das aves, por 24 horas a 36 °C, e somente na metade do lote (320 aves). Após este período, todas as aves foram transferidas para boxes (20 aves/box), tendo como cama resíduos de acerola. O estresse térmico crônico (6 horas a 32°C) foi aplicado em todas as aves do 35º ao 39º dias de idade, sendo monitorado eletronicamente a temperatura e a umidade do galpão, em relação ao microclima da região/altura das aves. Os resultados indicaram que: a) não houve interação entre as duas técnicas, EE e CTP; b) dietas com EE resultaram no encarecer da ração além de aumentarem a umidade das fezes, porém...(resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract:In tropical climates, the heat is the major factor limiting the production of broiler chickens, and is responsible for inducing a high mortality, especially in the finishing phase. The electrolyte balance (EB) and early thermal conditioning (ETC) are two techniques to alleviate the negative effects of heat stress. Thus, this study aimed to evaluate the possible interactions and the effects of dietary electrolyte balance and application of early thermal conditioning of the feed intake (kg), body weight (kg), feed conversion (kg), mortality (%), energy bio-economic conversion index (Mcal/kg), moisture faeces (%), carcass weight (kg), body cavity fat (g) and breast color (L*a *b*) in cuts of chicken chronic heat stress conditions. Thus, the electrolyte balance (EB = K+Na-Cl) was set to 300 mEq / kg and electrolyte ratio (ER = [(K+Cl)/Na]) 3: 1 by non-linear PPFR program. They were housed 640 male chicks a day old, distributed in a factorial arrangement 2x2 (with and without ETC and with and without EB) in a completely randomizeddesign in 32 boxes (8 replicates per treatment). The thermal conditioning was applied on the fifth day old birds for 24 hours at 36 °C and only half of the batch (320 birds). After this period, all the birds were transferred to boxes (20 birds/box), with the bed waste acerola. Chronic heat stress (6 hours at 32 °C) was applied to all the birds of 35 after 39 days of age, being electronically monitored temperature and humidity of the warehouse, in relation to the microclimate of the area / height of the birds. The results indicated that: a) there was no interaction between the two techniques, EB and ETC; b) diets with EB resulted in more expensive ration besides increasing the moisture of faeces, but there was lower mortality; c) ETC resulted in a pale staining in breast samples. Thus, it can be concluded that both the EB and ETC are not effective for minimizing the negative effects of chronic heat stress in broilers / Mestre

Orientador: Hirasilva Borba / Coorientador: Pedro Alves de Souza / Banca: Marco Antônio Trindade / Banca: Silvana Martinez Baraldi Artoni / Banca: Lizandra Amoroso / Banca: Cecília Maria Costa do Amaral / Resumo: Este estudo propôs avaliar diferenças entre carne de peito de matrizes e de frangos de corte com relação à qualidade, composição química e perfil de ácidos graxos e quais os possíveis efeitos da maturação na qualidade dos filés. Propôs também avaliar diferenças entre carne de peito de frangos de diferentes linhagens e de que maneira a maturação pode contribuir para que um produto de melhor qualidade seja oferecido ao consumidor. O Capítulo 1 aborda considerações gerais e revisão de literatura sobre o tema proposto. No Capítulo 2, foi avaliada a influência da idade da ave e o efeito da maturação sobre as propriedades físicas, atributos relacionados à maciez, composição química e o perfil lipídico da carne de peito de aves de corte abatidas com seis e 70 semanas de idade. Concluiu-se que o uso da carne de aves em idade de descarte como matéria-prima pode ser benéfico à indústria, pois apresenta mais gordura e menos colesterol, maior capacidade de reter água intracelular e menor perda durante o cozimento; que a menor concentração de ácidos graxos poli-insaturados faz com que a carne de aves em idade de descarte seja menos susceptível à oxidação lipídica; que maturar filés de peito durante três dias é suficiente para promover o amaciamento e reduzir a quantidade de gordura e de colesterol; e que a maturação pode, portanto, ser utilizada como técnica para agregar valor e diferenciar os produtos cárneos a base de frango. No Capítulo 3, foi avaliado o efeito da maturação sobre as características físicas e químicas da carne de peito de frangos das linhagens Cobb 500 e Label Rouge, abatidos aos 42 e 85 dias de idade, respectivamente. Concluiu-se que embora seja menos macia, a carne de frangos Label Rouge apresenta maior capacidade de reter a água intracelular, menor produção de exsudato e, possivelmente menor perda nutricional durante o... / Abstract: The aim of this research was to evaluate the differences between breast meat from spent hens and broilers, related to quality, chemical composition and fatty acids profile, and what are the possible effects of aging process on the quality of the fillets. The aim was also evaluating the differences between breast meat from broilers of different strains and how the aging process may contribute to the improvement of products offered to the consumers. Chapter 1 deals with general considerations and a review about the subject. In chapter 2 was evaluated the influence of the bird's age and the effect of aging on physical properties, attributes related to the softness, chemical composition and lipid profile of breast meat from broilers slaughtered at 6 and 70-w-old. It concludes that use of spent hen breast meat as a raw material may be beneficial to the industry because it has more fat and less cholesterol, higher intracellular water holding capacity and lower cooking loss; that the lower concentration of polyunsaturated fatty acids makes the meat from spent hens is less susceptible to the lipid oxidation; that the aging of breast fillets for three days is enough to cause softening and reducing the amount of fat and cholesterol; and that the aging process can therefore be used as a technique to add value and differentiate chicken meat products. In Chapter 3 was evaluated the effect of aging on the physical and chemical characteristics of breast meat from Cobb 500 and Label Rouge broilers, slaughtered at 42 and 85-d-old, respectively. In conclusion, although it is less tender, the meat from Label Rouge broilers has higher capacity to hold the intracellular water, produce less exudate and, possibly, shows lower nutritional loss during storage. It has higher concentration of cholesterol but, in contrast, has a higher concentration of PUFA, which are beneficial to human health. The aging process ... / Doutor

Orientador: Fernando Antônio de Ávila / Banca: Caroline Peters Pigatto De Nardi / Banca: Patrícia Amoroso de Andrade / Banca: Hélio José Montassier / Banca: José Moacir Marin / Resumo: As condições de criação de galinhas de fundo de quintal (GFQ) apresentam alto risco sanitário, já que medidas de biossegurança nem sempre são implementadas nessas criações. Dentre as doenças infecciosas de grande destaque na avicultura está a colibacilose, cujo agente envolvido é Escherichia coli patogênica aviária (APEC). Essa enfermidade está ligada à maneira e ao ambiente em que as aves são criadas, sendo que alguns isolados de APEC podem causar infecções nas próprias aves e em humanos. O mecanismo de virulência das amostras de APEC tem sido continuamente estudado e acredita-se ser multifatorial. O objetivo do trabalho foi detectar e caracterizar isolados potencialmente APEC em criações de GFQ. Para isto foram coletadas amostras cloacais e orofaríngeas de 250 GFQ, provenientes de sete pequenas propriedades da região de Ribeirão Preto - SP. Das 500 amostras, foram obtidos 69 isolados de E. coli positivos para pelo menos 5 genes característicos de APEC. Estes foram submetidas à PCR para a detecção de mais 11 genes de virulência, apresentando alta prevalência dos mesmos. A inoculação in vivo em pintainhos de um dia revelou que 49 destes isolados são de alta e/ou intermediária patogenicidade. Os isolados também foram submetidos ao teste de suscetibilidade a 17 antimicrobianos, e apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano e a maioria (79,7%) apresentou perfil de multirresistência. Além disso, foi realizada análise filogenética e foi observado que 53,6% dos isolado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The conditions of backyard chickens creation (BC) present a high sanitary risk, since biosafety measures are not always implemented in these systems. Among the most important infectious disease in poultry is colibacillosis, and avian pathogenic Escherichia coli (APEC) is the causative agent. This disease is related to the way and environment in which these birds are created, and some APEC isolates can cause infection in birds and humans. The virulence mechanism of APEC samples has been continuously studied and probably is multifactorial. The objective of this work was to detect and characterize potentially APEC isolates in BC creations. For that, it were collected cloacal and oropharyngeal samples of 250 BC, from seven small properties from Ribeirão Preto - SP. Of the 500 samples, 69 positive E. coli isolates were obtained for at least 5 characteristic genes of APEC. These isolates were submitted to PCR for detection of 11 more virulence genes, resulting in a high prevalence of them. The test of inoculation in one day-old chicks revealed that 49 of these isolates had high and/or intermediate pathogenicity. All isolates were also submitted to the susceptibility testing on 17 antimicrobials, and showed resistance to at least one antimicrobial agent, but the most of them (79.7%) had a multiresistance profile. In addition, phylogenetic analysis was performed and 53.6% of the isolates belonged to B2 group, which has already been described as the group harboring isolates that cause extraintestinal infections. In pulsified gel electrophoresis analysis (PFGE), it was detected a high heterogeneity of pulse types among the APEC isolates and only one sample was non-typable for XbaI enzyme. Furthermore, 15 serogroups were identified among the isolates, and O8 was the most frequent (23.2%). The results obtained in this study demonstrated that BC are (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Helio José Montassier / Banca: Cintia Hiromi Okino / Banca: Manoel Victor Franco Lemos / Resumo: Em plantéis avícolas, é frequente a ocorrência de doenças infecciosas respiratórias e dentre estas, destaca-se a Bronquite Infecciosa (BI), uma doença aguda e altamente contagiosa de aves. A BI é causada pelo vírus da bronquite infecciosa (VBI), cujo processo infeccioso geralmente provoca perdas econômicas significativas para as criações avícolas. A extensa variação genética, especialmente nas regiões hipervariáveis (HVRs) do gene S1, é uma das principais características da evolução do VBI, e resulta no surgimento de diversas variantes, que requerem um diagnóstico molecular que inclua a detecção dessas novas estirpes, como o genótipo brasileiro (BR-VBI), pois a detecção e identificação do agente etiológico são essenciais para o controle dessa enfermidade. Para tanto, é necessário que os métodos de diagnóstico empregados sejam sensíveis, específicos e de baixo custo. Foi então desenvolvida e avaliada neste estudo uma técnica de Nested-RT-PCR (BR-Nested-RT-PCR) utilizando um conjunto de oligonucleotídeos iniciadores desenvolvido dentro da região HVR3 do gene S1 de estirpes variantes brasileiras do VBI para a detecção e identificação de linhagens do genótipo brasileiro do VBI presentes em amostras biológicas de aves e comparada com a Nested-RT-PCR universal, utilizando oligonucleotídeos iniciadores universais para a mesma região do gene S1. Os resultados demonstraram que a técnica BR-Nested-RT-PCR apresentou uma elevada sensibilidade na detecção de estirpes do genótipo BR-I do V... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Infectious bronchitis (IB) is an acute and highly contagious disease of birds. IB is caused by infectious bronchitis virus (IBV), which usually results in significant economic losses for poultry farms. The extensive genetic variation, especially in the hypervariable regions (HVRs) of the S1 gene, is one of the main characteristics of the evolution of IBV, and results in the appearance of several variants that require a molecular diagnosis which includes the detection of these new strains, such as Brazilian I genotype (BR-I), since the detection and identification of the causative agent are essential for the control of the disease. Therefore, the diagnostic methods used must be sensitive, specific and inexpensive. A Nested-RT-PCR (BR-Nested-RT-PCR) technique was developed and evaluated in this study using a set of primers designed for the HVR3 region of the S1 gene for the detection and identification of Brazilian genotype strains of IBV present in biological samples from birds and compared with universal Nested-RT-PCR using universal primers for the same region of the S1 gene. The results demonstrated that the BR-Nested-RT-PCR technique had a high sensitivity to detect IBV strains from BR-I genotype and did not generate amplified products from heterologous virus samples tested (Newcastle disease virus, avian metapneumovirus, Reovirus and Gumboro disease virus), neither from IBV strains of other genotypes. In addition, the comparison between BR-Nested-RT-PCR techniques with th... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Atualmente, o Brasil é o segundo maior produtor e exportador mundial de frango. Doenças respiratórias compreendem o principal problema sanitário e levam à condenação de um grande número de carcaças, além de perdas na produtividade. Dentre estes problemas, o vírus da laringotraqueíte infecciosa (VLTI) tem adquirido grande importância nos últimos anos, devido a surtos da doença clínica, como em Bastos (SP) em 2002. Mais recentemente, VLTI vem sendo isolado de galinhas e perus das regiões Sudeste-Sul do Brasil. Dando continuidade aos trabalhos desenvolvidos no laboratório, um isolado de peru foi inoculado experimentalmente em galinhas e perus susceptíveis reproduzindo a doença de forma branda em ambas as espécies. Também foram testados diferentes cultivos celulares de linhagem CER, CEC-32, HD11, Vero e um primário de embrião de galinha para a efetiva replicação do ILTV, com o propósito de aumentar o título viral e a qualidade do DNA viral extraído. O cultivo primário de fibroblasto de embrião de galinha foi o cultivo mais eficiente na replicação do ILTV dentre todos os estudados. Isolados de perus e galinhas foram seqüenciados a partir das regiões genômicas da timidina kinase e glicoproteína C, e alinhados com uma cepa vacinal e amostras de referência, obtidas no GenBank, demonstrando alta similaridade entre as amostras, sugerindo uma origem comum recente. Com o propósito de desenvolvimento de um recombinante com deleção da glicoproteína E, com o objetivo de atenuar a virulência do ILTV, foi concluído um cassete de clonagem contendo as regiões flanqueadoras da glicoproteína E e um gene marcador EGFP. / Actually, Brazil is the second major poultry producer and exporting country. Respiratory diseases comprising the most important sanitary problems that leads to condemnation of many poultry carcass and productivity losses. Between these problems, the laryngotracheitis virus (ILTV) is displaying great importance following by outbreaks of the disease, such as that occured in Bastos (SP), 2002, Brazil. Epidemiological studies showed the presence of antibodies from avian flocks and the existence of carrier birds without clear clinical signs. More recently, the ILTV has been isolated from chicken and turkeys of the southest-south of Brazil. Continuing the works at laboratory, a turkey isolate was inoculated experimentally in susceptible chicken and turkeys and the reproducible of a mild disease was displayed in both species. Also, different line cell cultures CER, CEC-32, HD11, Vero and a primary fibroblast cell culture were tested for the effective propagation of ILTV with the propose to get greatest titers and the quality of viral DNA extracted. The primary fibroblast cell culture was the most efficient to replicate ILTV. Turkey and chicken isolates was sequenced from de regions of thymidine kinase and glycoprotein C and were alignment with a vaccine strain and reference strains (GenBank) displaying high homology between them, suggesting a common origin. A cloning cassette containing the regions flanking glycoprotein E and a marker gene EGFP was constructed with the purpose to develop a recombinant with deletion of the glycoprotein E.

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA12MA096.pdf: 554346 bytes, checksum: 590c296923a5eb206d91a626b6f5f829 (MD5) Previous issue date: 2012-10-25 / This study aimed to evaluate the performance and egg quality of laying hens subjected to forced molting methods through qualitative and quantitative feed restriction to induce a second cycle of egg production. A total of 225 Hy-line Brown hens at 88 weeks of age, distributed in a DIC with nine repetitions, subjected to five methods of food restriction, three quantitative (100, 75 and 50% of food restriction) and two qualitative (75% rice husk + 25% basal diet and 50% of rice husk + 50% basal diet). When the birds reached the percentage weight loss of 25% or 21 days of submission methods, six birds were slaughtered from each treatment to assess the weight and indices of ovarian, oviduct, liver and abdominal fat. In the second production cycle, which lasted five periods of 21 days, was evaluated feed intake, egg production, feed conversion, mass, weight and density of eggs. The method of restriction 100% took four days to stop production of eggs, eight days 75% 75 +25% took five days, and the programs of feed restriction and 50% 50 +50% did not interrupt the production of eggs in 21 days. The methods of food restriction 75% and 75 +25% were the most nearly to weight reduction of 25% recommended, as the reduction of 20.91 and 23.34%, respectively. Already in the methods of food restriction 50 +50% and 50% weight reduction was not as pronounced (12.85 and 8.49%, respectively). In the fat content, the method of qualitative dietary restriction was 75% +25 similar to the method of food restriction 100% (P <0.05). Indices ovary, oviduct and liver, the results repeated between treatments, and in the quantitative methods 100%, 75 +25% and 75% qualitative, were similar (P <0.05). In the second cycle the difference (P <0.05) in feed consumption, egg production and egg mass between the only restriction method and qualitative method 100% 50 +50%, and 100% higher in the method. Egg weight (g), the density of eggs, bird weight and viability were not affected (P> 0.05) by alternative methods of molt. Feed conversion (g / g) differ (P> 0.05) between the method and the method 100% +50% 50 restriction, being greater in the latter. The method for quantitative dietary restriction with a 75% reduction of the recommended daily amount of feed for poultry and the method of qualitative restriction with 75% rice hulls and 25% of feed supplied will, when used for a period of 21 days to induce to molt, cause the birds reduce by more than 20% of body weight to weight ratio observed after the first cycle. Both methods can replace the method of quantitative feed restriction of 100% (conventional fasting) without loss of performance of laying hens in a second laying cycle / Este trabalho teve o objetivo de avaliar o desempenho zootécnico e qualidade de ovos de poedeiras comerciais submetidas a métodos de muda forçada através da restrição alimentar qualitativa e quantitativa para indução a um segundo ciclo de produção de ovos. Foram utilizadas 225 galinhas Hy-line Brown com 88 semanas de vida, distribuídas em um DIC com nove repetições, submetidas a cinco métodos de restrição alimentar, sendo três quantitativos (100, 75 e 50% de restrição alimentar) e dois qualitativos (75% de casca de arroz + 25% dieta basal e 50% de casca de arroz + de 50% dieta basal). Quando as aves atingiram o percentual de redução de peso de 25% ou 21 dias de submissão aos métodos, foram abatidas seis aves de cada tratamento para avaliar o peso vivo e índices de ovário, oviduto, fígado e gordura abdominal. No segundo ciclo de produção, que teve uma duração de cinco períodos de 21 dias, foi avaliado consumo de ração, produção de ovos, conversão alimentar, massa, peso e densidade dos ovos. O método de restrição 100% levou quatro dias para interromper a produção de ovos, o 75% oito dias, 75+25% levou cinco dias, e os programas de restrição alimentar 50% e 50+50% não interromperam a produção de ovos nos 21 dias. Os métodos de restrição alimentar 75% e 75+25% foram os que mais se aproximaram à redução de peso de 25% recomendada, sendo a redução de 20,91 e 23,34%, respectivamente. Já nos métodos de restrição alimentar 50% e 50+50%, a redução de peso não foi tão acentuada (12,85 e 8,49%, respectivamente). No índice de gordura, o método de restrição alimentar qualitativo 75+25% foi semelhante ao método de restrição alimentar 100% (P<0,05). Nos índices de ovário, oviduto e fígado, os resultados se repetiram entre os tratamentos, sendo que nos métodos quantitativos 100%, 75% e qualitativo 75+25%, foram semelhantes (P<0,05). No segundo ciclo ocorreu diferença (P<0,05) no consumo de ração, na produção de ovos e na massa de ovos apenas entre o método de restrição 100% e o método qualitativo 50+50%, sendo maior no método 100%. O peso dos ovos (g), a densidade dos ovos, o peso das aves e a viabilidade não foram influenciados (P>0,05) pelos métodos alternativos de muda forçada. A conversão alimentar (g/g) diferiu (P>0,05) apenas entre o método 100% e o método de restrição 50+50%, sendo neste último maior. O método de restrição alimentar quantitativo com redução de 75% da quantidade diária de ração recomendada às aves e o método de restrição qualitativo com 75% de casca de arroz e 25% de ração fornecido a vontade, quando utilizados por um período de 21 dias para induzir à muda forçada, fazem com que as aves reduzam em mais de 20% do peso vivo em relação ao peso observado ao final do primeiro ciclo. Ambos o métodos podem substituir o método de restrição alimentar quantitativo de 100% (jejum convencional) sem perda de desempenho das poedeiras em um segundo ciclo de postura