CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O papel carcinogÃnico de Helicobacter pylori està relacionado à sua capacidade de promover a inflamaÃÃo e, como conseqÃÃncia, a metilaÃÃo do DNA, caracterÃstica epigenÃtica frequentemente associada à carcinogÃnese gÃstrica. Por sua vez, o processo inflamatÃrio pode ser modulado pela presenÃa de alguns dos polimorfismos presentes em genes de interleucinas, bem como pelo genÃtipo bacteriano. Assim, os objetivos desse estudo foram: a) associar o perfil genotÃpico de virulÃncia de H. pylori (quanto aos genes cagA, cagE, vacA e virB11) e o perfil genotÃpico dos polimorfismos de interleucinas prÃ-inflamatÃrias, IL1β -511 C/T, IL1RN, IL6 -174 G/C e TNF -308 G/A com a metilaÃÃo de promotores gÃnicos de CDKN2A, MLH1 e COX-2; b) verificar a associaÃÃo dos polimorfismos da IL6 -174 G/C e TNF -308 G/A com genÃtipo bacteriano no desenvolvimento do cÃncer gÃstrico, considerando os aspectos clinico-patolÃgicos. Para isso, foi extraÃdo DNA a partir de 125 amostras tumorais, coletadas de pacientes submetidos à gastrectomia em hospitais de Fortaleza â Cearà â Brasil. A genotipagem dos polimorfismos foi feita por PCR-RFLP e a anÃlise de metilaÃÃo, por MS-PCR. Os genes de virulÃncia de H. pylori foram analisados por PCR. Em algumas anÃlises, os genÃtipos bacterianos foram agrupados de acordo com os alelos de vacA e a integridade de cag-PAI. Neste estudo, foi verificado que nos tumores da cÃrdia a metilaÃÃo na regiÃo promotora de COX-2 estava associada ao alelo IL1RN*2 (p= 0,015), e o genÃtipo IL-1B -511 T + IL1RN*2 se mostrou importante para a metilaÃÃo desse gene (p=0,013), principalmente na presenÃa de cepas de H. pylori cagA+ (p=0,026) e vacA s1 (p=0,025). A combinaÃÃo genotÃpica IL6 CC+TNFGG parece estar envolvida na nÃo-metilaÃÃo dos promotores dos genes CDKN2A (p=0,046) e MLH1 (p=0,031), mesmo na presenÃa da infecÃÃo por cepa H. pylori cagA+. Considerando os aspectos clinico-patÃlogicos, uma correlaÃÃo positiva foi encontrada entre o gÃnero masculino e pacientes da faixa etÃria >65 anos (r=0,198; p=0,037), na qual esse gÃnero foi predominante (77,5%; p= 0.022). AlÃm disso, tambÃm foi encontrada correlaÃÃo positiva entre o gÃnero feminino e a faixa etÃria de 55-64 (r=+0,217; p=0,021). Quanto ao subtipo histolÃgico, foi visto que tumores difusos estavam correlacionados a pacientes mais jovens (15-44 anos, r=+0,207; p=0,033), enquanto o subtipo intestinal, a pacientes de mais idade (> 65 anos, r=+0,296; p=0,017). Tumores do subtipo difuso foram correlacionados com o gÃnero feminino e aqueles do subtipo intestinal, com o gÃnero masculino (r=+0,226; p=0,019). Quanto aos polimorfismos de interleucinas, o alelo C do polimorfismo IL6 -174G/C foi correlacionado negativamente com pacientes de menor faixa etÃria (r=â0,193; p=0,041), sendo o que pacientes com genÃtipo CC de IL6 foi associado com a infecÃÃo por cepas virulentas (grupo 1c) (r=+0,225; p=0,017); enquanto que pacientes portadores do genÃtipo heterozigoto IL6 -174 GC, com cepas virulentas (grupo 1c) (r=â0,215; p=0,023) e de menor virulÃncia (grupo 2c) (r=+0,204; p=0,031). Os achados desse estudo contribuem com o estabelecimento de um perfil genotÃpico envolvido na metilaÃÃo de alguns genes, no qual pacientes com genÃtipo mais inflamatÃrio e infectados por cepas de H. pylori mais virulentas estÃo associadas a uma maior taxa de metilaÃÃo de alguns genes envolvidos na carcinogÃnese gÃstrica, podendo tambÃm variar de acordo com a localizaÃÃo e o subtipo do tumor. Esse estudo, portanto, oferece uma contribuiÃÃo relevante no que diz respeito à associaÃÃo da cepa de H. pylori com polimorfismos de interleucinas, no qual cepas de maior virulÃncia parecem estar relacionadas com a infecÃÃo de pacientes com genÃtipos menos inflamatÃrios, sendo o contrÃrio tambÃm verdadeiro. / The carcinogenic role of Helicobacter pylori is related to its ability to promote inflammation and, consequently, DNA methylation, epigenetic trait often associated with gastric carcinogenesis. In turn, the inflammation can be modulated by the presence of polymorphisms in some interleukin genes, as well as the bacterial genotype. The objectives of this study were: a) link the genotypic profile of H. pylori virulence (cagA, cagE, vacA and virB11 genes) and genotypic profile of pro-inflammatory interleukins polymorphisms, IL1β -511 C/T, IL1RN, IL6 -174 G/C and TNF-308 G/A with gene promoter methylation of CDKN2A, MLH1, and COX-2 b) verify the association of polymorphisms of IL6 -174 G/C and TNF -308 G/A with bacterial genotype in the gastric cancer development, considering the clinical and pathological aspects. For this, DNA was extracted from 125 tumor samples, collected from patients who underwent gastrectomy at hospitals in Fortaleza â Cearà â Brazil. Polymorphisms genotyping were identified by PCR-RFLP and methylation analysis by MS-PCR. Virulence genes of H. pylori were analyzed by PCR. In some analyzes, the bacterial genotypes were grouped according to the alleles of vacA and integrity of cag-PAI. In this study, we observed that in cardia tumors the methylation of COX-2 promoter region was associated with IL1RN*2 allele (p=0.015), and genotype IL-1B -511T+IL1RN*2 was important to methylation of this gene (p=0.013), especially in the presence of H. pylori cagA+strains (p=0.020) and vacA s1 (p=0.032). The genotype combination IL6 CC+TNFGG seems to be involved in non-methylation of promoters of genes CDKN2A (p=0.046) and MLH1 (p=0.031), even in the presence of infection by strain H. pylori cagA+. Considering the clinical and pathological aspects, a positive correlation was found between males and patients aged >65 years (r=0.198, p=0.037), in which this gender was predominant (77.5%, p=0.022) . In addition, positive correlation was found between female and patients aged 55-64 years (r=+0.217, p=0.021). Regarding the histologic subtype, we found that diffuse tumors were correlated with younger patients (15-44 years, r=+0.207, p=0.033), while the intestinal subtype, with the older patients (>65 years, r=+ 0.296, p=0.017). Tumors of the diffuse subtype were correlated with female gender and those of the intestinal subtype, with males (r=+0.226, p=0.019). Regarding polymorphisms of interleukins, the C allele of IL6 polymorphism -174G/C was negatively correlated with the younger group (r=-0.193, p=0.041), and the patients with CC genotype of IL6 was associated with infection by virulent strains (group 1c) (r=+0.225, p=0.017), whereas patients with the genotype IL6 -174 GC, with virulent strains (group 1c) (r=-0.215, p=0.023) and less virulent (group 2c) (r=+0.204, p=0.031). Our findings contribute to the establishment of a genotypic profile involved in methylation of some genes in which patients with genotype more inflammatory and infected with strains of H. pylori more virulent are associated with a higher rate of methylation of some genes involved in gastric carcinogenesis and may also vary according to location and tumor subtype. This study thus provides an important contribution with regard to the association of the strain of H. pylori polymorphisms interleukins, in which most virulent strains appear to be related to infection of patients with inflammatory genotypes less, and the converse is also true.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T19:32:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_ArianeRibasPohl.pdf: 1837392 bytes, checksum: 6cc11fc0f4afa1359aa483abe37c0633 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T19:32:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_ArianeRibasPohl.pdf: 1837392 bytes, checksum: 6cc11fc0f4afa1359aa483abe37c0633 (MD5) Previous issue date: 2017-03-30 / Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) are used in the treatment of pain, fever and inflammatory processes. However, these drugs have some adverse effects on the gastrointestinal tract. Indomethacin (INDO) may cause adverse reactions to the patient, such as gastric erosions and ulcers. Oxidative stress occurs when the cellular antioxidant defense mechanism is no longer able to inactivate reactive oxygen species (ROS) or excess production. Oxidative stress leads to severe damage to DNA, which has been associated with several pathologies, including gastric ulcers. Antioxidants are able to fight these reactive species, thus protecting biomolecules and reducing disease risk. Flavonoids are the plant metabolites that provide protection against ROS. Naringin (NA) and naringenin (NG) are flavonoids responsible for the bitter taste of citrus fruits. They have low solubility in water, they undergo first pass metabolism and low bioavailability when administered orally. Therefore, the importance of nanoencapsulate these flavonoids, to increase stability, changing the pharmacokinetics and biodistribution of these.Nanocapsule suspensions were prepared by the interfacial deposition technique of the preformed polymer. Eight male Wistar rats, divided in control group, omeprazole, NA + NG (L), white nanocapsule (NB), NG + NA (NN) nanocapsule were used. For the induction of ulcer, 48 mg INDO / kg body mass were administered by orogastric gavage. For the pre-treatment groups, omeprazole (5mg / kg body weight) and L (0.5mg of each active, NA and NG), NB (0.5mg of each active, NA and NG) were administered via Oral / day for 28 days. On the 28th day, INDO was administered by v.o. One hour after treatments. All rats were fasted 24 hours prior to induction of gastric injury by INDO. Four hours after INDO administration, rats were euthanized and their stomachs dissected and separated for histological and biochemical analyzes to calculate the gastric and preventive ulcer index, pH determination and oxidative stress parameters, to verify if there was protection By the action of nanocapsules. Pretreatment with NN nanocapsules proved to be more effective than omeprazole in preventing INDO-induced ulcer. More studies are needed so that these assets can be used in therapy. / Os anti-inflamatórios não esteroides (AINEs) são utilizados no tratamento da dor, febre e processos inflamatórios. Porém, estes fármacos como, por exemplo, a indometacina (INDO), podem apresentar alguns efeitos adversos no trato gastrointestinal como erosões gástricas e úlceras. As úlceras gástricas vêm sendo associadas ao desequilíbrio redox na mucosa gástrica, ou seja, quando a ação de espécies reativas se sobrepõe à ação dos mecanismos de defesa antioxidante. Este desequilíbrio redox é denominado estresse oxidativo. Com o objetivo de restaurar o equilíbrio redox, e reduzir o risco do aparecimento de úlceras na mucosa gástrica, temse proposto o uso de substâncias antioxidantes como a naringina (NA) e a naringenina (NG) presentes em frutas cítricas. Porém, tanto NA quanto NG possuem baixa solubilidade em água, sofrem metabolismo de primeira passagem e têm baixa biodisponibilidade quando administradas por via oral. Para contornar estes problemas, nanoencapsular estes flavonoides, pode aumentar a estabilidade, e biodistribuição dos mesmos. Nesse contexto, foram preparadas as suspensões de nanocápsulas com NA e NG, através da técnica de deposição interfacial do polímero pré-formado. Para o desenvolvimento do presente estudo, foram utilizados 80 ratos Wistar machos divididos randomicamente em grupos com e sem úlcera. Os grupos sem úlcera foram controle (C), omeprazol (O), NA + NG livres (L), nanocápsula branca (NB), nanocápsula com NA + NG (NN). Os grupos com úlcera foram controle (U), omeprazole (UO), NA + NG livre (UL), nanocápsula trançada (UNB) e nanocápsula com NA + NG (UNN). Para a indução de úlcera, 48 mg de INDO/kg de massa corporal foram administrados por sonda gástrica orogástrica. Todos os grupos foram tratados oralmente durante 28 dias com os pré-tratamentos. As dosagens foram 5 mg/kg de massa corporal de omeprazol e 0,5 mg/massa corporal de cada uma, NA e NG nos grupos L e NN. No 28º dia, para os grupos com úlcera, a INDO foi administrada por v.o., 1 h após a administração dos tratamentos. Todos os ratos estavam em jejum de 24 horas antes da indução de lesão gástrica por INDO. Quatro horas após a administração de INDO, os ratos foram eutanaziados e os seus estômagos dissecados e separados para as análises histológicas, bioquímicas, para cálculo do índice de úlcera gástrica e preventivo, a determinação do pH e parâmetros do estresse oxidativo O pré-tratamento com as nanocápsulas NN se mostrou mais eficaz que o omeprazol em relação à prevenção da úlcera induzida por INDO, indicando que houve certa prevenção pelas nanopartículas. Para melhor elucidar os mecanismos de ação e segurança no uso de NN, mais estudos serão necessários.

Orientador: Edgard Ferro Collares / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T00:13:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vinagre_AdrianaMendes_D.pdf: 6789809 bytes, checksum: 05de43a9be5ce48b46cb5b0b6ab54ec7 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O esvaziamento gástrico (EG) é um processo de transferência do conteúdo gástrico para o intestino delgado, resultante da ação de mecanismos inibidores e estimuladores que controlam a atividade motora do estômago, piloro e duodeno. A dipirona, um derivado da fenilpirazolona, por via intravenosa (iv) e intra-cérebro-ventricular (icv), em ratos, retarda o esvaziamento gástrico (EG) de uma refeição líquida (salina). Quando administrada por via iv, o fenômeno foi abolido pela vagotomia sub-diafragmática e lesão eletrolítica do núcleo para-ventricular do hipotálamo. Em observação adicional, foi demonstrado que este efeito foi bloqueado pela injeção icv de baclofen, um agonista de receptores GABAB. O derivado fenilpirazolônico antipirina injetado iv também retarda o EG de líquido e este efeito foi reduzido significativamente pela vagotomia sub-diafragmática e abolido pela injeção icv de baclofen. Adicionalmente, demonstramos que a administração iv de 4-aminoantipirina (um metabólito da dipirona) diminui o EG de líquido em ratos e, da mesma forma que com a antipirina, foi reduzido significativamente pela vagotomia sub-diafragmática e abolido pela injeção icv de baclofen. Em situações em que há alteração no EG, a participação do estômago no processo pode ser inferida através da determinação in vivo do volume e da complacência gástrica, como indicadores do tônus gástrico. O tônus desta região é resultado, em grande parte, da atividade do nervo vago. Demonstramos que, para as condições de estudo as três drogas aumentam a complacência gástrica. O conjunto destes estudos sugere a participação do sistema nervoso central (SNC) e do nervo vago no fenômeno de retardo do EG induzido por estas drogas. Como somente a dipirona induziu o mesmo efeito quando administrada icv e o retardo do EG induzido pelas três drogas iv foi abolido pela vagotomia sub-diafragmática, em continuidade especulamos que o estímulo inibitório do EG, quando da administração por via iv, chegue ao SNC através de vias aferentes. A capsaicina é uma neurotoxina que administrada a ratos recém nascidos resulta em degeneração irreversível da maioria dos neurônios aferentes periféricos com axônios não mielinizados (fibras C) e de uma minoria de fibras escassamente mielinizadas (fibras A?). Constatamos que a administração desta neurotoxina, no período neonatal, a ratos, aboliu o efeito destas três drogas administradas iv, mas não da dipirona icv, sugerindo a participação das vias aferentes no fenômeno e de que o mecanismo (ou mecanismos) envolvido no efeito da administração dipirona no SNC difere daquele quando a droga é administrada iv. Embora os estudos relacionados ao efeito dos derivados fenilpirazolônicos sobre o EG, indicarem a participação do nervo vago no fenômeno, sabe-se que os efeitos do sistema nervoso simpático e parassimpático sobre os sistemas podem ser sinérgicos, exclusivos e até mesmo concomitantes. O sistema nervoso simpático, que tem efeito inibitório sobre o EG, libera norepinefrina nas terminações pós-ganglionares. Foram identificados subtipos de "alfa"- e ß-adrenoceptores em diferentes níveis do trato gastrointestinal que podem ter participação importante no controle da motricidade gástrica. Há evidências que neurônios aferentes e eferentes do nervo vago possuam beta-adrenoceptores, sendo que o subtipo ß2-adrenoceptor parece ser o predominante. Avaliando a participação do sistema adrenérgico no retardo do EG, os resultados do estudo sugerem: 1) que a simpatectomia química ou o pré-tratamento com propranolol (antagonista não seletivo ß-adrenérgico) aboliram o efeito da dipirona e antipirina e reduziram o da 4-aminoantipirina sobre o EG; 2) como pouco provável que retardo do EG induzido por estas drogas ocorra por ativação de "alfa"1-, "alfa"2-, ß1- , ß2- e ß3-adrenoceptores periféricos. Estes últimos resultados aventam a possibilidade que no efeito destas drogas haja envolvimento da ativação de receptores ß1- e/ou ß2-adrenérgicos no SNC e, que o mesmo, não ocorra em grande parte do efeito da 4-aminoantipirina / Abstract: Gastric emptying (GE) is the process of transfer of the gastric contents to small intestine, as result of inhibitory and stimulatory mechanisms that control the stomach, pylorus and duodenum motor activity. Dipyrone, a phenylpyrazole derivative, administrated intravenously (iv) and intracerebroventricularly (icv), in rats, slows the gastric emptying (GE) of a liquid meal (saline). When administrated iv, this phenomenon was abolished by sub-diaphragm vagotomy and electrolytic lesion of the hypothalamus paraventricular nucleus. In an additional study, it was demonstrated that this effect was blocked by icv injection of baclofen, a GABAB receptor agonist. The phenylpyrazole derivative antipyrine when injected by iv slows the GE of liquid also, and this effect was significantly decreased by sub-diaphragm vagotomy and abolished by bacloflen icv injection. Moreover, we demonstrated that the 4-aminoantipyrine (a dipyrone metabolite) administration iv decrease the GE of liquids in rats and as antipyrine, it was significantly reduced by subdiaphragm vagotomy and abolished by bacloflen icv injection. When happen alterations on GE, the stomach activity in this process can be inferred by in vivo determination of gastric volume and complacency, as indicators of gastric tone. The tone of this region is a result, mostly, of vagus nerve activity. We showed that in our studies conditions, the three drugs increased gastric complacence. Putting these results together we suggested the action of central nervous system (CNS) and vagus nerve in the GE retardation induced by these drugs. Taking into account that only dipyrone induced the same effect when administrated icv and that GE retardation induced by the three drugs was abolished by sub-diaphragm vagotomy, we speculated whether the GE inhibitory stimulus, when the drugs were administrated iv, reach the CNS through afferent pathway. The capsaicin is a neurotoxin which when administrated to new born rats, results in irreversible degeneration of the most part of peripheral afferent neurons with unmyelinated axons (fiber C) and a minority of thinly myelinated fibers (fiber A"sigma"). Our studies showed that the administration of this neurotoxin, during neonatal period, nullify the effect of these three drugs when administrated by iv, but didn't when dipyrone was gave by icv, what suggests the role of afferent pathways in this phenomenon and that the mechanism (or mechanisms) involved in the effect of dipyrone administration on CNS id different when the drug is administrated by iv. Although the studies related to phenylpyrazole derivative effects on the GE indicated the action of vagus nerve on this phenomenon, we know that the effects of sympathetic and parasympathetic system on the systems can be synergics, exclusives and to concomitant. The sympathetic nervous system, which has inhibitory effect on the GE, releases norepinephrine in the postganglionic endings. It was identified subtypes of "alfa"- and ß- adrenoreceptors in different sites in gastrointestinal tract that may have important roles in the control of gastric motor. It's evidences that afferent and efferent neurons of vagus nerve have beta-adrenoreceptors and the subtype ß2-adrenoreceptor seems to be the predominant. Evaluating the participation of adrenergic system on the GE retardation, the results of our study suggest: 1) the chemistry sympathectomy or the early treatment with propanolol (ß-adrenergic non selective antagonist) abolished the effect of dipyrone and antipyrine and reduced the effect of 4-aminoantipyrine on the GE; 2) it's almost unlikely that the slow GE induce by these drugs occur by activation of "alfa"1-, "alfa"2-, ß1- , ß2- e ß3- peripherics adrenoreceptors. The last results suggest the possibility that in this drugs effects have involvement of receptor ß1- and/or ß2-adrenergics activation on the CNS and that this don't occur at mostly of 4-aminoantipyrine effect / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientador: Carlos Eduardo Pinheiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-23T08:14:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pedrolli_LinahPessattiAraujo_M.pdf: 1678898 bytes, checksum: b3a2fa5bb8efeb9572b3a6c5afcd998d (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Inúmeros trabalhos têm sido relatados na literatura objetivando demonstrar a interação entre drogas e secreção gástrica. Com o objetivo de apresentar alguma contribuição nesta área de pesquisa é que nos propusemos a investigar a influência in vivo de algumas drogas de interesse terapêutico sobre o pH, volume e acidez da secreção gástrica em ratos. Foram utilizados, neste experimento, 100 ratos machos adultos pesando em média 300 gramas, os quais foram divididos aleatoriamente em dez grupos experimentais. Os animais foram deixados em jejum por 48 horas, anestesiados por inalação de éter e submetidos à cirurgia para ligação do piloro. Após 4 horas foi coletada a secreção gástrica para análise. As drogas foram administradas por sonda gástrica, num volume de 0,5ml, após a ligadura do piloro. ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Numerous studies have been reported in the literature with the objective of showing the interaction between drugs and gastric acid secretion. In order to present some contribution in this research area, we proposed to investigate the in vivo influence of some drugs of therapeutic interest on the pH, volume and acidity of gastric secretion in rats. In this study, 100 adult male rats weighing approximately 300 grams were used and were randomly divided in ten experimental groups. The animais were fasted for 48 hours, anesthetized with ether and submitted to the surgery of pylorus ligature. After 4 hours, the gastric juice was collected for analysis. The drugs were administered by gastric intubation, in a volume of 0.5 ml, after the pylorus ligature, ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Fisiologia e Biofisica do Sistema Estomatognatico / Mestre em Odontologia

Orientadores: Adriana Maria Alves De Tommaso, Elizete Aparecida Lomazi da-Costa-Pinto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T01:18:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Meneses_DanielaGois_M.pdf: 2107961 bytes, checksum: 3c6d1348a7cb14c00d73b7268fcd84f4 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A história natural da hipertensão portal (HP) é pouco conhecida em crianças e dados relacionados à evolução em longo prazo são escassos. O objetivo desse estudo foi descrever a evolução endoscópica da HP em 98 pacientes (0 a18 anos) admitidos no Hospital de Clínicas da UNICAMP, no período de março de 1986 a dezembro de 2006 e seguidos, em média, por 6,4 anos. Estudo descritivo e longitudinal. Dados coletados por meio de revisão de prontuários. Analisadas informações referentes a gênero; idade; etiologia; avaliações clínicas, laboratoriais e endoscópicas; tratamentos clínico, endoscópico e cirúrgico da hipertensão portal; complicações do tratamento endoscópico; episódios de hemorragia digestiva alta; evolução das varizes esofagogástricas e da gastropatia da hipertensão portal; causas de óbito. Realizada análise estatística descritiva, comparação de proporções Qui-Quadrado ( c2) com Correção de Yates ou o método Exato de Fisher, comparação entre grupos Teste T (de Student) com Correção de Welch. O nível de significância estabelecido foi p0,05. A maioria dos pacientes era do gênero feminino (58,2%). A causa mais comum de HP foi obstrução da veia porta extra-hepática (OVPEH) (44,9%), seguida pelas doenças que evoluem para cirrose (40,8% dos pacientes). A idade mediana à admissão foi de 4,3 anos. Os sinais endoscópicos de risco de sangramento à admissão, o antecedente de HDA e sua ocorrência durante o seguimento foram mais frequentes nos pacientes não cirróticos (p= 0,0001, p= 0,0001 e p= 0,0015, respectivamente). Cerca de 40% (3998) dos pacientes, em sua maioria cirróticos, não apresentaram HDA durante o seguimento. A profilaxia endoscópica primária associou-se a período livre de sangramento digestivo significativamente mais longo (p= 0,036) no grupo de cirróticos. A erradicação das varizes de esôfago, em cirróticos e não cirróticos, associou-se a diminuição do risco de sangramento dessas varizes (p= 0,0001) e não ocasionou aumento quantitativo de varizes gástricas (p=0,12) e(ou) gastropatia da hipertensão portal (p= 0,87). No entanto, ocorreu aumento do número de episódios de sangramento de origem gástrica. Após tratamento para erradicação ou redução do risco de sangramento, 3342 (78,5%) pacientes foram seguidos por um período superior a 1 ano. Os sinais de risco de sangramento reapareceram em 72,7% dos pacientes, em média 16,2 meses após interrupção do tratamento endoscópico. O óbito foi mais frequente entre os cirróticos (p= 0,001). Em conclusão, os sinais endoscópicos de risco de sangramento e a frequencia de HDA predominaram entre os não cirróticos. A profilaxia endoscópica primária foi mais efetiva entre os cirróticos. O tratamento endoscópico é eficaz para diminuição dos sinais de risco de sangramento de varizes de esôfago, porém há um alto índice de recidiva desses sinais e aumento dos episódios de HDA por variz gástrica e gastropatia da HP após erradicação das varizes de esôfago. A mortalidade foi superior entre os cirróticos / Abstract: The natural evolution of portal hypertension (PH) is little known in children and data related to long term evolution are scarce. The aim of this study was to evaluate the endoscopic evolution of PH in 98 patients. This is a descriptive and transversal study, in which were included both male and female patients with PH, aged from 0 to 18 years, enrolled at the Clinical Hospital of the FCM/UNICAMP. The mean follow-up was 6.4 years. Data from March 1986 to December 2006 were collected through review of medical records, and information analyzed were related to gender; age; etiology; clinical, laboratory and endoscopic evaluation; clinical, endoscopic and surgical treatments of PH; complications of endoscopic treatment; upper gastrointestinal bleeding episodes; evolution of esophagogastric varices and PH gastropathy; causes of death. Descriptive statistical analysis and comparison of proportions were accomplished, through Chi-Square (c2) with Yates correction or the Fisher's exact method; comparison among groups: Student's t Test with Welch's Correction. The significance level was p<0,05. Most patients were female (58.2%). The main cause of PH was obstruction of extra-hepatic portal vein (OEHPV) (44.9%), followed by diseases that progress to cirrhosis (40.8%). The median age at admission was 4.3 years. Endoscopic signs of bleeding risk at admission, the history of upper gastrointestinal bleeding (UGB) and its occurrence during follow-up were more frequent among noncirrhotic patients. Among patients who were included in this study, 39.8% (39/98) has not showed UGB during follow-up, most of them cirrhotic. Primary endoscopic prophylaxis in cirrhotic group was associated to a longer period without showing digestive bleeding. Total eradication of esophageal varices in both cirrhotic and noncirrhotic patients was associated to a reduction of bleeding risk in those varices. It was not detected a quantitative increase of gastric varices (p=0.12) and/or PH gastropathy (p=0.87). However, it was observed an increase in the number of bleeding episodes from gastric varices. After treatment for eradication or reduction of bleeding risk, 33/42 patients were followed for a period over 1 year. Signs of bleeding risk reappear in 72.7% of patients, on average 16.2 months after interruption of endoscopic treatment. Death was more frequent among cirrhotics (p=0.001). In conclusion, endoscopic signs of bleeding risk and frequency of UGB episodes was predominant among non-cirrhotic. Primary endoscopic prophylaxis was more effective among cirrhotic. Although endoscopic treatment is effective in reducing the risk of bleeding from esophageal varices, there is a high index of recurrence of that signs and an increase in episodes of UGB from gastric varices and gastropathy from PH after eradication of espophageal varices. The mortality was higher among cirrhotic / Mestrado / Pediatria / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente

Orientador: Alba Regina Monteiro Souza Brito / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias / Made available in DSpace on 2018-08-13T20:43:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_FelipeMeirade_M.pdf: 4207314 bytes, checksum: 70c7146121839f75d360ebf1de64eb88 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A pesquisa farmacológica têm se voltado ao conhecimento da medicina popular, a fim de estabelecer as bases científicas dos seus efeitos farmacológicos. Atualmente taninos têm papel de destaque em função de sua capacidade antioxidante e em função dos avanços obtidos na análise e identificação desses compostos além de suas possibilidades terapêuticas. Entre as diversas fontes naturais desses compostos destacou-se, neste trabalho, uma planta bastante conhecida nos ambientes costeiros, a Rhizophora mangle L. (manguevermelho), pertencente à família RHIZOPHORACEAE. O gênero Rhizophora compreende cinco espécies das regiões equatorial, tropical e subtropical de ambos os hemisférios. É uma das mais importantes fontes de taninos (15 a 36% da massa da casca seca) para uso industrial. R. mangle é conhecida na medicina popular caribenha por suas propriedades antinflamatória, antifúngica, bactericida, anti-úlcera, antihipertensiva e antioxidante. Este trabalho avaliou as atividades antiulcerogênica e antioxidante de R. mangle, assim como traçou o perfil químico das substâncias presentes em suas cascas. Para tanto foram realizados ensaios químicos e farmacológicos com o extrato bruto (acetona:água 7:3) e frações orgânicas (aquosa - fr aq, acetato de etila - fr-EtOAc e butanólica - fr-BuOH) dele obtidas. A análise da atividade antiulcerogênica do extrato e frações, mostrou que fr-BuOH foi mais eficaz na dose de 0,5mg.Kg-1. Essa fração também apresentou atividade antioxidante significativa. Nos ensaios químicos realizados, tanto para o extrato bruto quanto para as frações, verificou-se a existência de alta concentração de compostos polifenólicos. Os testes farmacológicos com a fr-BuOH buscaram determinar os mecanismos pelos quais são exercidas as atividades antiulcerogênica e antioxidante das substâncias nela presentes. Concluiu-se que fr-BuOH possui catequinas heterosídeos, galotaninos, elagitaninos e taninos complexos em sua composição, de acordo com métodos de análise empregados. Estas substâncias mostraram-se capazes de sequestrar radicais livres, atuar sobre compostos (GSH) e enzimas antioxidantes (GR, GPx e SOD) e próoxidantes (MPO e LPO) definindo sua atividade antioxidante. A atividade antiulcerogênica além de ser mediada pela própria ação antioxidante é dependente de GSH e NO, envolve a participação de PGE2, COX-2, EGF, PCNA, HSP-70, além do aumento da produção de muco aderido e propriedades anti-secretoras / Abstract: The pharmacological research has been focusing on the folk medicine knowledge in order to establish the scientific basis of their pharmacological effects. Nowadays, tannins play a prominent role because of its high antioxidant capacity and, due to the progress made in the analysis and identification of these compounds and their therapeutic possibilities. Among the many natural sources of these compounds, highlighted in this work a well known plant in coastal environments, the Rhizophora mangle L., belonging to the family RHIZOPHORACEAE. The genus includes five species of Rhizophora in equatorial, tropical and subtropical regions in both hemispheres. It is one of the most important sources of tannin (15 to 36% of the dry bark weight) in industrial use. Rhizophora mangle is well known in the Caribbean folk medicine for its anti-inflammatory, antifungal, antibacterial, anti-ulcer, anti-hypertensive and antioxidant properties. This study aimed to evaluate the antioxidant and anti-ulcer activities of R. mangle, and to elucidate the chemical compounds present in its barks. For both evaluations chemical and pharmacological assays with the crude extract (acetone: water 7:3) and their organic fractions (aqueous - fr-aq, ethyl acetate - fr-EtOAc and butanolic - fr-BuOH) were performed. The analysis of anti-ulcer activity of the extract and fractions showed that fr-BuOH was more effective at a dose of 0,5 mg.Kg-1. This fraction also showed significant antioxidant activity. It was found the presence of high concentrations of polyphenolic compounds in the chemical assay performed for both the crude extract and its fractions. The pharmacological experiments were carried out to determine the mechanisms by which the compounds present in fr-BuOH exert their antiulcer and antioxidant activities. It was concluded that the fr-BuOH has antioxidant activity linked to the concentration of polyphenolic compounds, which were able to scavenge free radicals, maintain the levels of GSH, reduce the MPO activity and LPO levels and maintain or increase the antioxidant enzymatic activities of GR, GPx and SOD. Moreover, the antiulcer activity of fr-BuOH is mediated by several mechanisms including: antioxidant action; involvement of GSH and NO; anti-secretory properties; increase of mucus and PGE2 synthesis, and expression of COX-2, EGF, HSP-70 and PCNA on gastric mucosa. Chemical study revealed that the major compounds are heteroside catechins, gallotannins and "tannin complexes" / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Alba R. M. Souza Brito / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T06:30:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Batista_RangelWillians_M.pdf: 2463513 bytes, checksum: 90bd2dae3ec5cefb9c37861d828c29dd (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Em processos de ulcerogênese por isquemia-reperfusão há grande liberação de radicais livres causando peroxidaçâo lípidica e desestruíuração proteica pela oxidação de grupos -SH, o que altera funções da membrana e de enzimas e leva à disfunção celular e necrose tecidual. Ensaios fitoquímícos revelaram que infusos de Turnera diffusa e T. ulmifolia tem como compostos majoritários flavonas C- glicosiladas derivadas de luteonina e apigenina. A atividade antiulcerogênica destes infusos está comprovada, porém faltam estudos sobre o potencial antioxidante. Relacionando o potencial antioxidante de flavonóides e a atividade antíúlcera do extrato, mostramos in vitro que 50 pg/ml salina do extrato de T. ulmifolia e T diffusa protegem em 58 e 47% a oxidação de GSH proteico na mitocôndria oxidada por 10 uM Fe+2 e 200 uM ascorbato, respectivamente. E proteção de 12 e 50% em mitocôndria oxidada por 1,5 mM Pi e 10pM CaCb, demonstrando poder de manter grupos -SH intactos durante diferentes sistemas de danos à mitocôndria. O potencial de estabilizar a membrana foi corroborado com a diminuição na peroxidaçâo lípidica de 62 e 67% para 7. ulmifolia e T diffusa, respectivamente. Quando testados em úlcera por isquemia-reperfusão como modelo in vivo houve uma diminuição no índice de úlceras de 59 e 69%; com diminuição da peroxidaçâo lípidica de 50 e 51% e manutenção na [-SH] total de até 100% na mucosa gástrica para T. ulmifolia e T diffusa, quando comparadas à salina. / Abstract: Turnera ulmifolia L. and Turnera diffusa Wild are known in folk medicine for treatment of several gastric diseases. Other studies have previously reported anti-ulcer activity and this relationship with your majority composition to be flavonoids. Natural flavonoids are known for scavenging properties on oxygen radicals in vivo and in vitro. The oxyradicals generated during the proposed episodes of ischemia-reperfusion provoke severe changes in mitochondria-generated ROS, induce peroxidation of the membrane lipids and oxidation -SH compounds. Therefore, agents that inhibit the oxidation thiol groups, as well as lipid peroxidation, may be of high pharmacological potential. This work showed activity antioxidant when used mitochondria systems in vitro, both species tea plants exhibited effect to inhibit lipid peroxidation and oxidation thiois proteins compounds induced by FeC^/ascorbic acid, succuiate/rotenone or CaCyinorganic phosphate (Pi). Our experiments in vivo demonstrated effect anti-ulcer and antioxidant to both species in models ischaemia-reperfUsion-ulcer-induced after administration orally tea T. diffusa e T. ulmifolia inhibit lesion ulcer index when compared with control group. And in gastric mucosa exhibited effect to inhibit lipid peroxidation or oxidation -SH total compounds. In model ethanol/HCl-ulcer-induced Turnera ulmifolia show effect anti-ulcer partial dependent to compounds SH and Turnera diffusa demonstrated to be independent effect anti-ulcer to SH compounds. / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / O (-)-a-bisabolol, um Ãlcool sesquiterpenico comumente obtido de Matricaria chamomilla e de espÃcies do gÃnero Vanillosmopsis, foi testado em modelos animais padronizado de nocicepÃÃo, inflamaÃÃo e Ãlcera gÃstrica em camundongos. Nestes ensaios, o (-)-a-bisabolol foi utilizado nas doses de 25 e 50 mg/Kg nos modelos de nocicepÃÃo e 100 e 200 mg/Kg nos modelos de inflamaÃÃo e Ãlceras gÃstricas, administrados por via oral. O (-)-a-bisabolol demonstrou possuir atividade antinociceptiva nos modelos de nocicepÃÃo visceral induzida por Ãcido acÃtico intraperitoneal e na segunda fase do teste de nocicepÃÃo induzida pela injeÃÃo intraplantar de formalina. O (-)-a-bisabolol nÃo demonstrou atividade no modelo de nocicepÃÃo tÃrmica da placa quente. Esses achados sugerem que a aÃÃo antinociceptiva do (-)- a-bisabolol nÃo està ligada a mecanismos centrais e deve estar relacionada com o processo inflamatÃrio. Nos modelos de edema de pata induzidos por carragenina e dextrano os animais tratados com (-)-a-bisabolol exibiram edemas menores em comparaÃÃo com os animais tratados apenas com veÃculo. (-)-a-bisabolol foi capaz de diminuir os edemas de pata induzidos por 5-HT, mas nÃo os edemas induzidos por histamina, assim, pode-se relacionar a atividade anti-inflamatÃria do (-)-a-bisabolol a sua interferÃncia na aÃÃo/liberaÃÃo ou na sÃntese/metabolismo da 5-HT. O (-)-a-bisabolol mostrou ter atividade gastroprotetoras frente Ãs lesÃes gÃstricas induzidas por etanol absoluto ou indometacina. O mecanismo dessa aÃÃo foi testado farmacologicamente, realizando prÃ-tratamentos com L-NAME, Glibenclamida e Indometacina. Estes experimentos demonstraram que a aÃÃo gastroprotetora do (-)-a- bisabolol parece nÃo envolver o Ãxido nÃtrico, os canais de potÃssio ATP-dependentes ou a sÃntese de prostaglandinas. Por outro lado, a quantificaÃÃo de GSH nos tecidos gÃstricos dos animais nÃo lesionados e lesionados por etanol ou indometacina mostraram que o tratamento com (-)-a-bisabolol atenua o decrÃscimo de GSH associado as lesÃes pelos agentes lesivos, mas nÃo aumenta a sua quantidade nos estÃmagos dos animais nÃo tratados com etanol ou indometacina. Dessa forma o (-)-a-bisabolol aumenta a disponibilidade de GSH no tecido gÃstrico, possuindo aÃÃo antioxidante in vivo, o que nos permite associar esse achado a sua aÃÃo gastroprotetora. / (-)-a-bisabolol, a sesquiterpenic Ãlcool, is commonly obtained from Matricaria chamomilla and from species of Vanillosmopsis, it was tested in animal standardized models of nociception, inflamation and gastric ulcer in mice. In this assays, (-)-a-bisabolol was used in the doses of 25 and 50 mg/Kg in the models of nociception and 100 and 200 mg/Kg in the models of inflamatiom and gastric ulcers, administered by via oral. (-)-a-bisabolol demonstrated to have an antinociceptive activity in the models of visceral nociception induced by intraperitoneal acetic acid and in the second phase of the test nociception was induced by intraplantar administration of formaline. (-)-a-bisabolol did not demonstrate activity in the thermal nociception model of hot plate. These findings suggests that the antinociceptive action of (-)-a-bisabolol is not linked to central mechanisms and may be related with pre inflamatory process. In the models of paw oedema induced by carragenine and dextran the animals treated with (-)-a-bisabolol showed smaller oedemas as compared to animals treated only with the vehicle. (-)-a-bisabolol was capable to reduce the paw oedemas induced by 5- HT, but not the oedema induced by histamine, so it could relate the antiinflamatory activity of (-)-a-bisabolol to the interference in the action/liberation or in the systesis/metabolism of 5- HT. (-)-a-bisabolol demostrated having gastroprotective activity in the absolute ethanol and indomethacin-induced gastric lesions. The mechanism of this action was pharmacologicaly tested, doing pre-treatments with L-NAME, Glibenclamide and Indomethacin. These experiments demonstrated that tha gastroprotective action of (-)-a-bisabolol seems not to be involved the nitric oxide, potassium channels ATP-dependents or the sysntesis of prostaglandines. By the way, the quantification of GSH in the gastric tissues of not lesioned animals e lesionated by ethanol or indomethacin showed that the treatment with (-)-a- bisabolol atenuate the decrease of GSH associated with the lesive agents, but it did not increase its levels in the animals that not recieve ethanol or indomethacin. This way (-)-a- bisabolol increase the disponibility of GSH in the gastric tissue, having in vivo antioxidant activity, that allows us to associate this finding to its gastroprotective action.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Tendo em vista que o comportamento motor do trato gastrointestinal parece ter intima relaÃÃo com a atividade do sistema cardiovascular, decidimos verificar se a redistribuiÃÃo do volume sanguÃneo atravÃs de fistula aorto-caval com agulhas de calibres (21, 23 ou 26G) afeta a motilidade do trato gastrintestinal em ratos acordados. Ratos machos albinos (230 a 280g) foram divididos em grupos falso-operado (FO) ou com fÃstula designados (F), alÃm disso, tiveram grupos fÃstula+sangria (FS), fÃstula+vagotomia (FV) bem como fÃstula+esplancnotomia (FE), todos estudados com 24 horas apÃs a confecÃÃo da fistula com agulha (21G). Os parÃmetros hemodinÃmicos de pressÃo arterial mÃdia (PAM), freqÃÃncia cardÃaca (FC), e pressÃo venosa central (PVC) foram monitorados continuamente e o dÃbito cardÃaco (DC) determinado por termo-diluiÃÃo. ApÃs os procedimentos cirÃrgicos os ratos FO e os (F) tiveram os parÃmetros hemodinÃmicos e o esvaziamento gÃstrico (EG) estudados nos tempos pÃs-prandial (10, 20 ou 30min.). A PA dos ratos (F) tiveram valores inferiores (p < 0,05) quando comparados aos FO (116,3  3,5 vs 101,3  3,3mmHg). Por outro lado, nos ratos (F) houve aumento (p < 0,05) nos valores da PVC (1,9  0,4 vs 5,8  0,6cmH2O) da FC (365,0  7,0 vs 417,0  7,0bpm) e do DC (119,9  9,6 vs 172  5,3ml/min) quando comparados aos ratos FO. Em relaÃÃo ao FO ocorreu uma retenÃÃo gÃstrica nos ratos (F) nos tempos pÃs-prandial 10, 20 e 30min (45,6 Â3,6 vs 57,5  2,1%; 36,4  2,7 vs 50,5  3,3 % e 33,3  2,7 vs 44,7  3,0 %, respectivamente). Os ratos do grupo (FS), apresentaram valores de (EG) inferiores aos animais (F) (36,5  3,2 vs 50,5  3,3%, p<0,05), mas similares aos FO (36,4  2,7%). Em relaÃÃo à vagotomia (FV), a mesma reverteu o retarde no (EG) induzido pela FÃstula (F) (40,4  2,3 vs 50,5  3,3%), em contrapartida, os ratos submetidos a esplancnotomia (FE) nÃo apresentaram diferenÃas com os (F) (50,5  3,3 e 50,1  1,4%). AlÃm do mais, nÃo foi encontrada participaÃÃo da secreÃÃo Ãcida no retarde do (EG) apÃs fÃstula. Portanto, a sobrecarga cardÃaca advinda de fÃstula arteriovenosa com agulhas de calibre (21, 23 ou 26G) alÃm de promover alteraÃÃes nos parÃmetros hemodinÃmicos, induz retarde no (EG) e interfere no trÃnsito intestinal de lÃquidos em ratos acordados. Tal retarde no (EG) inclusive foi abolido apÃs sangria ou vagotomia subdiafragmÃtica prÃvias, mas nÃo havendo alteraÃÃo apÃs esplancnotomia. / In view that the behaviour of gastrointestinal tract seems to have intimate relationship with the activity of the cardiovascular system, we decided to verify whether the redistribution of blood volume through fistula aorto-caval with sizes of needles (21, 23 or 26G) affect the motility of the gastrointestinal tract in rats awaked. Male albino rats (230 to 280g) were divided into groups false-operated (FO) or designated with fistula (F), moreover, had groups fistula + bleeding (FS), fistula + vagotomy (FV) and fistula + esplancnotomy (FE), all with studied 24 hours after preparation of the fistula with needle (21G). Hemodynamic parameters of mean arterial pressure (MAP), heart rate (HR), central venous pressure (CVP) were monitored continuously and cardiac output (CO) determined by term-dilution. After the surgical procedures the rats FO and (F) had the hemodynamic parameters and gastric emptying (GE) studied in the time post-prandial (10, 20 or 30min.). The MAP of rats (F) had lower values (p <0.05) when compared to FO (116.3  3.5 vs. 101.3  3.3 mmHg). Moreover, in rats (F) increased (p <0.05) the values of CVP when compared to rats FO (1.9  0.4 vs 5.8  0.6 cmH2O), HR (365.0  7.0 vs 417.0  7.0 bpm) and the CO (119.9  9.6 vs 172  5.3 ml / min). In relation the rats the FO was a gastric retention increased in (F) in the time post-prandial 10, 20 and 30min (45.6  3.6 vs 57.5  2.1%; 36.4  2.7 vs 50.5  3.3% and 33.3  2.7 vs 44.7  3.0%, respectively). The rats of the group (FS), showed values of (GE) lower than the animals (F) (36.5  3.2 vs 50.5  3.3%, p <0.05) but similar to FO ( 36.4  2.7%). The vagotomy (FV), it reversed the delay in the (GE) induced by fistula (F) (40.4  2.3 vs 50.5  3.3%), in contrast, the rats undergoing esplancnotomy (FE) showed no differences in comparation with the (F) (50.5  3.3 and 50.1  1.4%). Moreover, was not found involvement of acid secretion in the delays of the (GE) after fistula. Therefore, the overload heart arisen from arteriovenous fistula with needles, size (21, 23 or 26G) to promote changes in hemodynamic parameters, leads decreases the (GE) and interfere in the intestinal transit of liquids in rats awaked. This delay in the (GE) was also abolished after bleeding or prior the subdiaphragmatic vagotomy, but no change after esplancnotomy.

Submitted by Lúcia Brandão (lucia.elaine@live.com) on 2015-12-09T19:19:03Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleyce dos Santos Barbosa.pdf: 2917376 bytes, checksum: 06d23d301fe537d8d8c6b4a14c4689cf (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T20:34:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleyce dos Santos Barbosa.pdf: 2917376 bytes, checksum: 06d23d301fe537d8d8c6b4a14c4689cf (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T20:42:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleyce dos Santos Barbosa.pdf: 2917376 bytes, checksum: 06d23d301fe537d8d8c6b4a14c4689cf (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-19T20:42:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Gleyce dos Santos Barbosa.pdf: 2917376 bytes, checksum: 06d23d301fe537d8d8c6b4a14c4689cf (MD5) Previous issue date: 2012-01-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In the northern Brazil, especially in the states of Amazonas and Pará, there is a high incidence of gastric cancer which available treatments are ineffective in most cases. The biflorin, a prenylated ortanaftoquinona obtained from the roots of Capraria biflora L., showed, in previous studies, an inhibition of the tumor growth in vivo and in vitro in several cell lines, without inducing mutagenicity. The ACP02, main cell line used in this work, was established from a primary diffuse gastric adenocarcinoma, removed from the stomach cardia region of a 66-year-old pacient born in Pará. Among the main karyotypes and genetic changes of this lineage are the trisomy of chromosome 8, with amplification of the MYC oncogene, and the deletion of the chromosome 17’s short arm, where the tumor suppressor gene TP53 is located. These characteristics observed in the established line correspond to those observed in the original tumor, what indicates that this line is a good alternative to the study of the human gastric cancer pathophysiology and the drug screening. Considering biflorin’s promising potencial and the necessity to regionalize the study of new anticancer drugs to answer genotype particularities of each group of patients, we evaluated the activity of biflorin on ACP02 through the morphological cell analysis, the cell viability assays, the clonogenic assay, scratch assay, the cell differentiation test by NBT, the evaluation of the MYC status and telomere length by FISH, in 0, 1.0, 2.5 and 5.0 M concentrations, after 24 and 72 hours of treatment. The morphological changes indicate cell death by necrosis, and suggest the occurrence of the differentiation process, due to change in the format of the attached cell. The biflorin showed a cytotoxic activity (IC50 1.92 M) and cytostatic, anticlonogenic and antimotility activities, statistically significant (p<0,05) since 1 M. There was a significant reduction in MYC amplification rate in cells treated with 2.5 e 5 M of the drug (p<0,05), which can explain the occurrence of cellular differentiation process, in view of the physiological role of this gene. This differentiation was confirmed by the results obtained during the NBT test, in which the cells showed the ability to metabolize salt from a treatment of 1.0 M. The telomere length was reduced in cells treated with 5.0 M of biflorina (p<0,05). These results showed that biflorin acts on important targets of anticancer therapy, when used on the gastric line ACP02, at concentrations around 2.5 M, which makes it a promising substance for the treatment of this tumor type. / No norte do Brasil, sobretudo nos Estados do Amazonas e Pará, há alta incidência de câncer gástrico, cujos tratamentos disponíveis são ineficazes, na maioria dos casos. A biflorina, uma ortonaftoquinona prenilada obtida das raízes de Capraria biflora L., demonstrou, em trabalhos prévios, inibir o crescimento tumoral in vivo e in vitro de várias linhagens celulares, sem induzir mutagenicidade. A ACP02, principal linhagem celular utilizada nesse trabalho, foi estabelecida a partir de um adenocarcinoma gástrico difuso primário, retirado da região cárdia estomacal de um paciente de 66 anos oriundo do Pará. Entre as principais alterações cariotípicas e genéticas dessa linhagem estão a trissomia do cromossomo 8, com amplificação do oncogene MYC, e a deleção do braço curto do cromossomo 17, onde estaria localizado o gene supressor de tumor TP53. Essas características observadas na linhagem estabelecida correspondem àquelas observadas no tumor que a deu origem, evidenciando que tal linhagem é uma boa alternativa para o estudo da fisiopatologia do câncer gástrico humano e triagem de drogas. Tendo em vista o potencial promissor da biflorina e a necessidade de regionalizar o estudo de novas drogas anticâncer para atender as particularidades genotípicas de cada grupo de pacientes, avaliamos a atividade da biflorina sobre ACP02 através da análise morfológica das células, dos ensaios de viabilidade celular, do ensaio clonogênico, do teste de motilidade, do teste de diferenciação celular pelo NBT e da avaliação do status de MYC e comprimento dos telômeros por FISH, nas concentrações de 0, 1,0, 2,5 e 5 M, após 24 e 72h de tratamento. As alterações morfológicas indicaram morte celular por necrose, além de sugerirem a ocorrência de processo de diferenciação, devido à alteração no formato da célula aderida. A biflorina apresentou atividade citotóxica (CI50 1,92 M) e atividades citostática, anticlonogênica e inibidora da motilidade in vitro, estatisticamente significativas (p<0,05) desde a concentração de 1 M. Houve redução significativa da taxa de amplificação de MYC, nas células tratadas com 2,5 e 5,0 M da droga (p<0,05), o que pode justificar a ocorrência de processo de diferenciação celular, tendo em vista o papel fisiológico desse gene. Essa diferenciação foi confirmada pelos resultados obtidos durante o teste do NBT, no qual as células apresentaram capacidade de metabolizar o sal a partir do tratamento de 1,0 M. O comprimento do telômero foi reduzido nas células tratadas com 5,0 M de biflorina (p<0,05). Esses resultados demonstram que a biflorina atua sobre importantes alvos da terapia anticâncer, quando utilizada sobre a linhagem gástrica ACP02 em concentrações em torno de 2,5 M, o que a torna uma substância promissora para o tratamento desse tipo de tumor.